CN102309655A - 具有防治癌症作用的中药组合物及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种具有防治癌症作用的组合物,主要由下列质量百分比的原料药制备而成:黄药子20%~85%,当归15%~80%。本发明的中药组合物具有防治癌症作用,可克服化疗药用药易诱发肝损伤的局限,适用于肝癌、胃癌、乳腺癌、肺癌、膀胱癌、卵巢癌、前列腺癌、食管癌、胰腺癌、大肠癌、结肠癌、皮肤癌、甲状腺癌、宫颈癌、白血病等多型癌症的治疗,可用于制备抗癌药物,实现黄药子、当归组合物作为制备治疗癌症药物的应用,开拓了黄药子、当归的应用范围和药物价值,为中医药学的发展作出创造性贡献。
Description
技术领域
本发明涉及一种具有防治癌症作用的中药组合物。另外,本发明还涉及该中药组合物的医药用途。
背景技术
癌症是严重威胁人类健康和生命的主要疾病之一。在癌症治疗中,尽管传统的放、化疗已经取得了很大的进展,但由于其在杀伤癌细胞的同时,也对人体产生不同程度的毒副作用,其中主要是骨髓抑制和免疫功能低下,可造成白细胞减少症等,有时甚至不得不中断治疗,从而也限制了药物的疗效。为了克服传统的放、化疗所带来的一系列弊病,近年来药学工作者不断的探索,应用植物药进行防治癌症成为了当前研究的热点领域
黄药子为薯蓣科薯蓣属植物黄独Dioscorea bulbifera L.的干燥块茎,在亚洲的热带和亚热带地区分布广泛,也存在于非洲的部分地区,而传统将其作为药用的主要在中国。早在公元500-600年,黄药子粉、汤剂或酊剂,就已被用于诸如现代医学中的甲状腺肿(瘤)、胃癌、直肠癌、喉痛、咽炎、子宫出血等病症的治疗,而其中尤以甲状腺肿(瘤)和多型癌症的治疗最为常用;现代临床上常将黄药子用于食管癌、胃癌、肝癌、直肠癌、乳腺癌、肺癌、宫颈癌、鼻咽癌、上颌窦癌、膀胱癌等多型癌症的治疗。
配伍是中医用药的特色之一,通过配伍可以起到增效的作用。《中国中医秘方大全》共收载19首治疗甲状腺瘤的复方,其中有8首含有黄药子,有5首既含有当归又含有黄药子,可见黄药子与当归配伍应用较多。因此,通过配伍寻求安全有效的防治癌症的药物是本发明的主要着眼点。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种具有防治癌症作用的中药组合物。该中药组合物是一种广谱抗癌剂。
本发明所要解决的另一技术问题是提出该中药组合物在制备防治癌症疾病的药物中的应用。
为了解决上述技术问题,本发明提出的具有防治癌症作用的中药组合物,主要由下列质量百分比的原料药制备而成:黄药子20%~85%,当归15%~80%。
本发明具有防治癌症作用的中药组合物的制备过程并无特别之处。将黄药子块茎和当归根分别打粉,用水、20%~95%乙醇、丙酮、乙酸乙酯、汽油或石油醚回流提取,加入常见药用辅料制成任何一种药学上所说的剂型,优选浸膏、流浸膏、酒剂、酊剂、口服液、丸剂、散剂、滴丸、片剂或胶囊剂。
本发明中药组合物具有防治癌症作用很可能与如下物质之间的协同作用密切相关:黄药子中的二萜内酯类物质,尤其是黄独素A、黄独素B、黄独素C、黄独素D、黄独素E、黄独素F、黄独素G、黄独素H、黄独素I、黄独素J、黄独素K、黄独素L、黄独素M,以及它们的衍生物,以及当归有机酸类物质,尤其是桂皮酸类中的阿魏酸,以及当归多糖类物质。
随后的药效实验将证明,本发明中药组合物可替代化疗药防治肝癌、胃癌、乳腺癌、肺癌、膀胱癌、卵巢癌、前列腺癌、食管癌、胰腺癌、大肠癌、结肠癌、皮肤癌、甲状腺癌、宫颈癌、白血病等多型癌症疾病。
本发明中药组合物是药食兼用的纯天然的植物提取物,具有高效防治癌症的同时,避免了化疗药诱发肝损伤的副作用。
具体实施方式
下面结合具体实施例进一步阐述本发明。这些实施例应理解为仅用于说明本发明而不用于限制本发明的保护范围。在阅读了本发明记载的内容之后,本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改,这些等效变化和修饰同样落入本发明权利要求所限定的范围。
实施例1(黄药子醇提物、当归醇提物、黄药子当归醇提物组合物对小鼠肉瘤S180实体瘤的影响)
本发明首先考察ET与当归乙醇提取物(AE)组合物对小鼠肉瘤S180实体瘤的影响。
1.1实验材料
1.1.1受试动物
1.1.2受试药物及其制备
黄药子醇提物(ET):采用黄药子块茎饮片粗粉,用10倍量80%乙醇提取三次,每次3h,滤液合并后减压浓缩至无醇味,以黄药子生药计浓度2g/mL,即得黄药子醇提物ET。
当归醇提物(AE):采用当归饮片粗粉,按2005版中国药典方法用70%乙醇渗漏法提取,以当归生药计浓度1g/mL,即得当归醇提物。
黄药子当归醇提物组合物:将前述黄药子醇提物和当归醇提物按2/3~4/3的比例(重量比)组合,即得黄药子当归醇提物组合物ET+AE。
1.2实验方法
采用荷瘤小鼠体内实验,从肉瘤S180荷瘤小鼠腹内抽取对应肿瘤细胞,用台盼蓝染色,计数,用无菌生理盐水稀释至(1.0-1.3)×107cells/mL于离心管中,插冰上,皮下注射(sc)接种该浓度肿瘤细胞于ICR小鼠右腋下,注射量0.1mL/只。按体重随机分组,分别为Control(CMC-Na)、5-Fu、当归醇提物AE、黄药子醇提物ET、ET+AE组。将各提取物或单体化合物用0.5%CMC-Na溶解至所需浓度,于接种后24h开始按体重灌胃(ig)给药,CMC-Na组ig给予同等体积的0.5%CMC-Na,5-Fu(用dd水溶解至2.5mg/mL)组腹腔注射(ip),每隔一天注射一次;连续给药12d,末次给药后24h,摘眼球采血,供离心分离血清后测定血清ALT和AST活力用;取瘤组织,称重,拍照。按下公式计算肿瘤抑制率(Tumor inhibition ratio)。
Tumor inhibition ratio(%)=[(C-T)/C]×100,其中C指CMC-Na对照组平均瘤重,T指给药组平均瘤重。以瘤重有显著性差异,且肿瘤抑制率>30%为药物具有抗肿瘤活性的标准。
1.3实验结果
1.3.1ET、AE及其组合物ET+AE对小鼠肉瘤S180实体瘤的影响
与模型组比较,如表1所示,接种肉瘤S180的小鼠在连续给予ET(100mg/kg)12d后,瘤重显著减小(P<0.05),表明ET(100mg/kg)对S180实体瘤有效;与ET(100mg/kg)比较,配伍AE(150mg/kg)后,瘤重均显著减小(P<0.05),肿瘤抑制率明显提高,表明当归醇提物可增强黄药子醇提物的抗肿瘤活性。
表1ET、AE及其组合物ET+AE对小鼠肉瘤S180实体瘤的影响(n=10)
与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01;与ET比较,##P<0.01
1.3.2对血清生化指标的影响
由表2可知,阳性药5-Fu可使S180荷瘤小鼠血清肝损伤指标ALT和AST均极显著升高(P<0.01),表明5-Fu诱导了荷瘤小鼠的肝毒性,而本发明中药组合物在保持疗效的同时,对肝损伤指标无明显影响,说明本发明中药组合物具有避免化疗药5-Fu诱导肝损伤副作用的优势。
与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01
实施例2(组合物全粉混悬液、水提液、70%乙醇提取液、乙酸乙酯提取液、丙酮提取液、120#汽油提取物、人工胃液提取物体内抗肿瘤作用研究)
在确定了黄药子当归乙醇提取物组合物具有较强的抗S180实体瘤作用之后,本发明进一步考察了本发明中药组合物的混悬液及其多种提取液的体内抗肿瘤作用。
2.1实验材料
2.1.1受试动物(同实施例1之1.1.1)
2.1.2受试药物及其制备
组合物全粉混悬液:黄药子36g,当归36g,粉碎,过150目筛,混悬于180mL蒸馏水。
组合物水提液:黄药子36g,当归36g,加10倍量水,回流提取3次,每次3h,过滤合并滤液,回收水使成浓度0.4g/mL。
组合物70%乙醇提取液:黄药子36g,当归36g,加10倍量70%乙醇,回流提取3次,每次3h,过滤合并滤液,回收乙醇使成浓度0.4g/mL。
组合物乙酸乙酯提取液:黄药子36g,当归36g,加10倍量乙酸乙酯,回流提取3次,每次3h,过滤合并滤液,回收乙酸乙酯使成浓度0.4g/mL。
组合物丙酮提取液:黄药子36g,当归36g,加10倍量乙酸乙酯,回流提取3次,每次3h,过滤合并滤液,回收丙酮使成浓度0.4g/mL。
组合物120#汽油提取液:黄药子36g,当归36g,加10倍量70%乙醇,回流提取3次,每次3h,过滤合并滤液,回收120#汽油使成浓度0.4g/mL。
组合物人工胃肠液提取物:黄药子36g,当归36g,加10倍量人工胃液,在摇床(模拟胃肠蠕动)摇动4h,将滤液和药渣放入10倍量的人工肠液,在摇床上摇动4h,收集肠液,回收使之浓度0.4g/mL。
2.2实验方法(同实施例1之1.2)
2.3实验结果
如表3所示,与模型组比较,各给药组瘤重均显著降低,表明黄药子当归组合物全粉混悬液及各提取物均有抗肿瘤作用,其中以70%乙醇提取液和乙酸乙酯提取液的作用最强;且该组合物70%乙醇及乙酸乙酯提取液抗肿瘤作用均明显强于阳性药5-Fu的,而组合物丙酮提取液、全粉混悬液、水提液、丙酮及汽油提取液抗肿瘤作用与5-Fu相当。
表3组合物混悬液及多种提取液对肉瘤S180实体瘤的影响(n=10)
与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01
实施例3(中药组合物及其活性成分体外抗癌活性研究)
通过整体动物实验发现本发明中药组合物具有抗肿瘤作用,发明人从黄药子的70%乙醇提取物中分离得到二萜内酯类成分黄独素B(Kawasaki T,Komori T,Setoguchi S.Furanoidnorditerpenes from Dioscoreacae plants.1.Diosbulins A,B,and C from Dioscorea bulbiferaform a spontanea.Chem Pharm Bull,1968;16:2430-2435.)(纯度在98%以上);从当归中分离纯化得到当归多糖(商澎,杨铁虹,贾敏,梅其炳,赵文明,曹之宪,赵德化.当归多糖的分离、纯化及分析鉴定.第四军医大学学报,2001,22(14):1311-1314.)(含量在95%以上)、有机酸类成分阿魏酸(Sun Y,Li S,Song H,Tian S.Extraction of ferulic acid from Angelicasinensis with supercritical CO2.Nat Prod Res,2006;20(9):835-841.)(纯度在99%以上)以及挥发油类成分Z-藁本内酯(纯度在99%以上)。发明人进一步通过体外实验考察了该发明中药组合物及其活性成分的抗癌活性。下面将以当归中对黄药子活性成分黄独素B增效作用较强的当归多糖及其有机酸类物质阿魏酸为例进行介绍。其中,黄独素B(DiosbulbinB)和阿魏酸(Ferulic acid)的化学结构如下。
3.1实验材料
3.1.1细胞株来源
人肝癌Hep3B、胃癌SGC-7901、胰腺癌BXPC-3、乳腺癌MCF-7、肺癌A549、膀胱癌T24人卵巢癌HO8910、结肠癌LS174、大肠癌CCL229、前列腺癌PC-3、食管癌Eca-109、皮肤癌A431、甲状腺癌SW-579、白血病K562、宫颈癌Hela细胞株均购自中国科学院上海细胞生物学研究所。
3.1.2主要试剂
IV型胶原酶(Sigma公司),DEME培养基(GIBCO公司),胎牛血清(杭州四季青生物公司),二甲基亚砜(DMSO)(GIBCO公司),MTT(Sigma公司),蛋白酶抑制剂(Amresco),5-Fu(上海邦成),其它试剂为国产分析纯等。
3.1.3主要仪器设备
层流超净台;二氧化碳培养箱,购自Thermo公司;倒置相差显微镜,购自Olympus公司;酶标仪,购自Biotek公司。
3.2实验方法
细胞增殖实验(MTT):用0.25%胰酶消化细胞,1000rpm离心,用含5%活性炭灭活血清,无酚红的DMEM高糖培养液37℃,95%CO2培养48h(以排除内源激素的干扰),即细胞进入对数生长期,用0.25%胰酶消化细胞,以2×103个/孔接种细胞于96孔培养板上,每孔体积180μL,24h细胞贴壁,每列设5个复孔,分别设溶剂对照、5-Fu阳性对照、实验药物组,加药后继续观察培养48h。
呈色与比色:在加药培养48h后,取出培养板,每孔加入MTT溶液(5mg/mL)20μL,37℃,5%CO2继续培养4h终止培养。小心吸弃孔内培养上清液,每孔加入150μL DMSO振荡10min,使结晶物充分溶解,选择490nm在自动酶标仪(BIO-TEK)上测定各孔吸收值(OD,与活细胞数量成正比),计算细胞生长抑制率。细胞生长抑制率=(对照孔OD值-实验孔OD值)/对照孔OD值×100%。
3.3实验结果
由表4-8可知,本发明中药组合物70%乙醇提取液及其二萜内酯类活性成分黄独素B均可显著抑制人肝癌细胞Hep3B、胃癌细胞SGC-7901、膀胱癌细胞T24、卵巢癌细胞HO8910、胰腺癌细胞BXPC-3、乳腺癌细胞MCF-7、肺癌细胞A549、结肠癌细胞LS174、大肠癌细胞CCL229、前列腺癌细胞PC-3、食管癌细胞Eca-109、皮肤癌细胞A431、甲状腺癌细胞SW-579、白血病细胞K562、宫颈癌细胞Hela的生长,提示该中药组合物及其二萜内酯类成分黄独素B可用于治疗肝癌、胃癌、乳腺癌、肺癌、膀胱癌、卵巢癌、前列腺癌、食管癌、胰腺癌、大肠癌、结肠癌、皮肤癌、甲状腺癌、宫颈癌、白血病等多型癌症的治疗。同时,本发明也考察了活性成分组合物的抗癌效果,结果发现当归所含的有机酸类中诸如阿魏酸和当归多糖,分别在与黄独素B配伍时均可显著增强黄独素B对以上多种癌细胞的抗癌作用,且配伍后的抗癌活性强于化疗药5-Fu的,提示当归所含的有机酸类和多糖类均可与黄药子中所含的二萜内酯类成分配伍高效应用于治疗以上癌症疾病,且可作为替代化疗药5-Fu应用的选择。
表4组合物及其活性成分对人癌BXPC-3、MCF-7、A549细胞生长抑制率(%)的影响
与溶剂对照组比较,*P<0.01;与5-Fu比较,#P<0.05
表5组合物及其活性成分对人癌SGC-7901、Hep3B、T24细胞生长抑制率(%)的影响
与溶剂对照组比较,*P<0.01;与5-Fu比较,#P<0.05
表6组合物及其活性成分对人癌HO8910、LS174、PC-3细胞生长抑制率(%)的影响
与溶剂对照组比较,*P<0.01;与5-Fu比较,#P<0.05
表7组合物及其活性成分对人癌CCL229、Eca-109、A431细胞生长抑制率(%)的影响
与溶剂对照组比较,*P<0.01;与5-Fu比较,#P<0.05
表8组合物及其活性成分对人癌SW-579、K562、Hela细胞生长抑制率(%)的影响
与溶剂对照组比较,*P<0.01;与5-Fu比较,#P<0.05
实施例4(流浸膏剂的制备)
取黄药子、当归各250g,打粉,用70%乙醇作溶剂,浸渍48h,缓缓渗漉,收集初漉液425mL,另器保存;继续渗漉,到渗漉液接近无色为止,收集续漉液,在55℃浓缩至稠膏状,加入初漉液425mL混匀,用70%乙醇稀释至500mL,静置3d,滤过,即得。
实施例5(片剂的制备)
取黄药子、当归各250g,打粉,过100目筛。喷入适量70%乙醇,加入17.5%微晶纤维素,其中内加7.5%微晶纤维素和20%淀粉,制成颗粒,干燥,外加10%微晶纤维素和1%的硬脂酸镁,混匀压片。
实施例6(滴丸剂的制备)
取黄药子、当归各250g,打粉,用70%乙醇回流提取3次,每次2h,回收乙醇得浸膏,以PGE4000为基质,与药物的比例为1∶1.5,二甲基硅油为冷凝剂,滴制。
实施例7(胶囊剂的制备)
取黄药子、当归各250g,打粉,用乙酸乙酯回流提取3次,每次2h,回收乙酸乙酯得浸膏,干燥,粉碎,过100目筛,加入5%硬脂酸镁,混匀装入硬胶囊。
Claims (7)
1.一种具有防治癌症作用的中药组合物,其特征是,其主要由下列质量百分比的原料药制备而成:黄药子20%~85%,当归15%~80%。
2.根据权利要求1所述的具有防治癌症作用的中药组合物,其特征是,该中药组合物为全粉混悬液,或水提取物、20%~95%乙醇提取物、丙酮提取物、乙酸乙酯提取物、汽油或石油醚提取物。
3.根据权利要求2所述的具有防治癌症作用的中药组合物,其特征是,该中药组合物的组成为黄药子二萜内酯类黄独素A-M及其衍生物、当归有机酸类物质和当归多糖类物质。
4.根据权利要求3所述的具有防治癌症作用的中药组合物,其特征是,该中药组合物的组成及其质量百分比为:黄独素B 50%~90%、阿魏酸10%~50%。
5.根据权利要求4所述的具有防治癌症作用的中药组合物,其特征是,它还可以进一步配伍质量百分比为10%~50%的当归多糖。
6.根据权利要求1-5中任何一项所述的具有防治癌症作用的中药组合物,其特征是,该中药组合物为浸膏、流浸膏、酒剂、酊剂、口服液、丸剂、散剂、滴丸、片剂或胶囊剂。
7.权利要求1-6中任何一项所述的中药组合物在制备防治肝癌、胃癌、乳腺癌、肺癌、膀胱癌、卵巢癌、前列腺癌、食管癌、胰腺癌、大肠癌、结肠癌、皮肤癌、甲状腺癌、宫颈癌或白血病的药物中的应用。
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CN102309655B (zh) | 2014-03-05 |
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