CN102307895A - 用于治疗或预防麻醉药停药症状的方法和组合物 - Google Patents

Abstract

本发明提供了预防或治疗与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药的方法和药物组合物，特别是通过调节5-HT3受体。在小鼠中使用计算遗传方法，鉴定出了在小鼠和人之间保守的基因作为吗啡生理依赖性的调节剂的候选。发现调节5-HT3受体的化合物的施用在小鼠和人中控制吗啡停药。

Description

用于治疗或预防麻醉药停药症状的方法和组合物

本申请要求2008年12月4日提交的美国专利申请系列号61/120,003的权益，其通过全文提述并入本文。

对联邦资助研究的声明

本发明是通过美国政府由NIH/NIDA在合同号DA021332和由NIH/NIGMS在合同号GM071400下的支持完成的。

发明背景

对违禁和处方的阿片样麻醉药物(海洛因、吗啡、可待因、羟考酮(oxycodone)和相关药剂)成瘾是严重的公共健康问题。在美国，每个月4.9％年龄在12岁或以上的个人(＞1千1百万人)使用处方镇痛药以供非医药用途。对于青年人(young adult，年龄18至25岁)这一问题特别严重，且其具有最高的处方镇痛药滥用率(来自the 2006 National Survey on Drug Use and Health：National Findings.Substance Abuse and Mental Health Services Administration，Department of Health and Human Services，2006的结果)。对阿片样物质成瘾对个人健康和社会造成不利后果(Birnbaum，H.G.等，Clin J Pain，2006.22(8)：p.667-676；Gruber，S.A.et al.Neuropsychol Rev，2007.17(3)：p.299-315；Manchikanti，L.，Pain Physician，2006.9(4)：p.287-321)。多至90％在慢性疼痛控制设定(chronic pain management setting)中的患者接受阿片样镇痛药，且在这些患者中药物滥用的流行率为9-41％(Manchikanti，L.，见上)。在阿片样物质停药过程中发生焦虑、增加的疼痛敏感性、注意力不集中、心动过速和流感样症状，这是反映对这些药物生理依赖性(physical dependency)的综合征(Handelsman，L.等，Am J Drug Alcohol Abuse，1987.13(3)：p.293-308)。该依赖性的严重程度和所导致的停药症状是阿片样麻醉药成瘾潜力的主要原因。目前用于治疗阿片样物质停药的策略不够理想；其依赖于施用管制药(美沙酮(methadone)和丁丙诺啡(buprenorphine))，或具有显著血液动力学副作用的药物(可乐定(clonidine))。

对阿片样药物的误用和成瘾可在临床中(或牵涉医药来源)暴露于处方药物之后起始。因此，减少误用和成瘾风险的临床介入可对该公共健康问题具有实质性作用。之前并未着眼于医师将药物与成瘾剂一同处方以减少后续误用、依赖或成瘾风险的预防模型。这是由于多数成瘾剂(可卡因、海洛因、大麻(marijuana)是从非医药来源获得的违禁药。然而，阿片样麻醉药通常从合法医药途径获得。因此，这增加了与减轻该导致并维持处方阿片药物误用和滥用的医源性(iatrogenic)影响的药物一同施用会具有实质性益处的可能性。

因为其可导致新的用于预防或治疗成瘾的方法，鉴定新颖的影响对阿片样物质依赖性的遗传因子也具有重大的公共健康显著性。对阿片样物质成瘾的易感性在人中是可遗传的(Kendler，K.S.等.Am J Psychiatry，2003.160(4)：p.687-695)。成瘾的一个方面是生理依赖性，其可在啮齿类中建模。吗啡依赖的小鼠在施用纳洛酮(naloxone)(一种强力的阿片样物质受体拮抗剂)之后展示的跳跃行为，是一种常用的生理依赖性量度。纳洛酮骤致的跳跃是近交小鼠品系之中高度可遗传的性状(Kest，B.等，Mamm Genome，2004.15(8)：p.610-617)，且品系间差异很大程度上独立于药物施用方法或治疗期间的差异(Kest，B.等Pharmacol Biochem Behav 2002.73(4)：p.821-828；Liang，D.Y.，et al.Pain，2006.121(3)：p.232-240)。此外纳洛酮骤致的停药已用于量化人志愿者的阿片样物质依赖性(Bickel，W.K.等，NIDA Res Monogr，1986.67：p.349-54)。尽管这些事实，未鉴定出与生理依赖性关联的具体基因。

计算遗传作图(Wang，J.等，Trends Genet.2005.21(9)：p.526-532；Liao，G.等，Science，2004.306(5696)：p.690-695)可用于在小鼠中鉴定几种作为吗啡诱导的疼痛敏感性改变(痛觉过敏)的多变性和对止痛药物响应基础的遗传因子。(Liang，D.Y.等，Pharmacogenet Genomics 2006.16(11)：p.825-835；Liang，D.Y.等Anesthesiology，2006.104(5)：p.1054-1062；Smith，S.B.等，PharmacogenetGenomics，2008.18(3)：p.231-241)。基于单元型的计算遗传作图可用于在小鼠中鉴定影响对阿片样物质依赖性的易感性的基因，而靶向经计算鉴定的鼠类基因的人同源物的药剂可在人中减轻停药的体征(sign)和症状。

发明内容

下述简单总结并非旨在包括本发明的所有特征和方面，其也并不暗示本发明必须包括该总结中讨论的所有特征和方面。

本发明在某些方面包括用于预防或治疗受试者中与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的方法，包括向所述受试者施用调节5-HT3受体的药剂。在某些方面，提供了用于预防或治疗受试者中与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的方法，由向所述受试者施用调节5-HT3受体的药剂组成。在某些方面，提供了用于预防或治疗受试者中与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的方法，基本上由向所述受试者施用调节5-HT3受体的药剂组成。所述受试者可为人受试者，且在某些实施方案中，所述麻醉药可为，或包含吗啡。在本发明的某些方面，所述药剂是5-HT3受体拮抗剂，其在某些情况下可为昂丹司琼(ondansetron)或帕洛诺司琼(palonosetron)。

在本发明的某些方面，在将阿片样物质拮抗剂向所述受试者施用之前将所述药剂向所述受试者施用。在本发明的某些方面，还可在将所述麻醉药向所述受试者施用之前或之后将所述药剂向所述受试者施用。此外，在本发明的某些方面，可将所述药剂与所述麻醉药共同施于所述受试者。在本发明的某些方面，所述药剂为高至16mg的昂丹司琼或高至1.5mg的帕洛诺司琼。

在本发明的某些方面，提供了用于预防或治疗受试者中与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的方法，包括向受试者施用药物组合物，所述组合物包含麻醉药和减少与使用所述麻醉药相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂。在本发明的某些方面，提供了用于预防或治疗受试者中与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的方法，包括向受试者施用药物组合物，所述组合物由麻醉药和减少与使用所述麻醉药相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂组成。在本发明的某些方面，提供了用于预防或治疗受试者中与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的方法，包括向受试者施用药物组合物，所述组合物基本上由麻醉药和减少与使用所述麻醉药相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂组成。在本发明的某些方面，所述受试者是人。在本发明的某些方面，所述麻醉药是或包含吗啡。在本发明的某些方面，所述药剂调节5-HT3受体。在本发明的某些方面，所述药剂是5-HT3受体拮抗剂。在本发明的某些方面，所述药剂是昂丹司琼或帕洛诺司琼。在本发明的某些方面，所述麻醉药为高至16mg的吗啡且所述药剂为高至16mg的昂丹司琼或高至1.5mg的帕洛诺司琼。在本发明的某些方面，提供了用于治疗受试者中对麻醉药成瘾的方法，包括向所述受试者施用调节5-HT3受体的药剂。在此同样，在本发明的某些方面，所述受试者是人。在本发明的某些方面，所述麻醉药是吗啡。在本发明的某些方面，所述药剂是5-HT3受体拮抗剂。在本发明的某些方面，所述药剂是昂丹司琼或帕洛诺司琼。

在本发明的某些方面，提供了药物组合物，其包含麻醉药和减少与使用所述麻醉药相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂。在本发明的某些方面，提供了药物组合物，其由麻醉药和减少与使用所述麻醉药相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂组成。在本发明的某些方面，提供了药物组合物，其基本上由麻醉药和减少与使用所述麻醉药相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂组成。在本发明的方法中，所述药剂调节5-HT3受体。在本发明的某些方面，所述药剂是5-HT3拮抗剂。在本发明的某些方面，所述药剂是昂丹司琼或帕洛诺司琼。

在本发明的某些方面，提供了治疗或预防受试者中与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的方法，包括向所述受试者施用调节5-HT3受体的药剂和第二药剂。在本发明的某些方面，提供了治疗或预防受试者中与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的方法，由向所述受试者施用调节5-HT3受体的药剂和第二药剂组成。在本发明的某些方面，提供了治疗或预防受试者中与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的方法，基本上由向所述受试者施用调节5-HT3受体的药剂和第二药剂组成。此外，在本发明的某些方面，所述受试者是人。在本发明的某些方面，所述麻醉药是吗啡。在本发明的某些方面，所述药剂是5-HT3受体拮抗剂。在本发明的某些方面，所述药剂是昂丹司琼或帕洛诺司琼。在本发明的某些方面，所述第二药剂是止吐剂。在本发明的某些方面，所述止吐剂是抗组胺剂。在本发明的某些方面，所述抗组胺剂是羟嗪。在本发明的某些方面，所述调节5-HT3受体的药剂和第二药剂是在向受试者施用麻醉药之前施用的。在本发明的某些方面，所述调节5-HT3受体的药剂和第二药剂是在向受试者施用麻醉药之后施用的。在本发明的某些方面，所述调节5-HT3受体的药剂和第二药剂是与麻醉药共同施于受试者的。

在本发明的某些方面，提供了药物组合物，其包含麻醉药和至少两种减少与所述麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂。在本发明的某些方面，两种药剂包括5-HT3受体调节剂和第二药剂。在本发明的某些方面，所述5-HT3受体调节剂是5-HT3拮抗剂。在本发明的某些方面，所述第二药剂是抗组胺剂。在本发明的某些方面，所述5-HT3受体调节剂是昂丹司琼或帕洛诺司琼，而所述第二药剂是羟嗪。在本发明的某些方面，所述麻醉药是吗啡。在本发明的某些方面，所述麻醉药是吗啡，所述5-HT3受体调节剂是昂丹司琼或帕洛诺司琼，而另一种药剂是羟嗪。在本发明的某些方面，所述麻醉药为高至20mg的吗啡，所述5-HT3受体调节剂是高至1.5mg的帕洛诺司琼，而另一种药剂是高至200mg的羟嗪。

在本发明的某些方面，提供了药物组合物，其由麻醉药和两种减少与所述麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂组成。在本发明的某些方面，提供了药物组合物，其基本上由麻醉药和两种减少与所述麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂组成。在本发明的某些方面，一种药剂是调节5-HT3受体的药剂。在本发明的某些方面，一种药剂是止吐剂。在本发明的某些方面，两种药剂均为止吐剂。在本发明的某些方面，一种药剂是抗组胺剂。在本发明的某些方面，所述麻醉药是吗啡。在本发明的某些方面，一种药剂是5-HT3受体拮抗剂，而另一种药剂是抗组胺剂。在本发明的某些方面，一种药剂是昂丹司琼或帕洛诺司琼，而另一种药剂是羟嗪。在本发明的某些方面，所述麻醉药是吗啡，一种药剂是昂丹司琼或帕洛诺司琼，而另一种药剂是羟嗪。在本发明的某些方面，所述麻醉药为高至20mg的吗啡，一种药剂是高至1.5mg的帕洛诺司琼，而另一种药剂为高至200mg的羟嗪。

通过提述并入本文

本说明书中提及的所有公开文献、专利和专利申请均通过提述并入本文，正如具体地并单独地表明每个单独的公开文献、专利或专利申请通过提述并入本文一般。

附图简述

本发明的新颖特征具体列举于所附的权利要求中。对于本发明的特征和优点的更佳理解可通过参照下述列举的利用本发明原理的说明性实施方案的详细描述，以及下述附图而获得：

图1说明对吗啡的生理依赖性的品系间差异，以及对品系间差异的计算遗传分析。

图2是Htr3a基因及其相关单元型区段的概略图。

图3说明施用选择性5-HT3受体拮抗剂(昂丹司琼)减少纳洛酮骤致的停药行为。

图4说明昂丹司琼治疗减少吗啡依赖性相关的痛觉过敏。

图5说明昂丹司琼阻断吗啡施用相关的条件性位置偏好(conditioned placepreference)。

图6说明吗啡治疗对Htr3a mRNA表达具有差示性(differential)和脑区特异性(brain region specific)作用。

图7说明吗啡对几种基因CNS表达的调节。

图8说明吗啡对脑干5-HT3蛋白水平的调节。

图9说明在人受试者中昂丹司琼预处理对急性纳洛酮骤致的停药应答的作用。

图10说明在人受试者中昂丹司琼预处理对急性纳洛酮骤致的主观阿片剂停药量表(Subjective Opiate Withdrawal Scale，SOWS)应答的作用。

图11说明将5-HT3拮抗剂与抗组胺剂组合的作用是治疗停药症状。

发明详述

本发明提供了用于减少、预防或治疗与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的方法和组合物。在另一个方面，本发明提供了用于预防或治疗对麻醉药成瘾的方法和组合物。一般而言，用于减少、预防、治疗与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的方法和组合物涉及调节5-HT3受体。5-HT3受体在人中涉及控制麻醉药停药。在一个实施方案中，用于治疗与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的方法靶向5-HT3受体。

本发明的方法包括鉴定可调节与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的基因。本文中还描述了治疗与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的方法。

I.基于单元型的计算遗传作图

基于单元型的计算遗传作图使得能够通过在选定的近交品系中可观察到的生理或病理差异的样式与遗传变异的样式相关联来鉴定成因性遗传因子。然后鉴定了遗传变异的样式与所分析的近交品系中性状分布具有最强关联的基因组区。取决于所分析的性状的类型，可在起始实验之后一日至一周之内获得表型数据。一旦获得了表型数据，可将数据进行计算分析并由单个科学家在一日内对预测进行评估。

对于计算作图，通过在基因组区之内鉴定单核苷酸多态性(SNP)并确定对于所分析的18个近交品系的小鼠的每个SNP位置的等位基因来表征遗传变异的样式。计算了在一个区内SNP等位基因之间连锁不平衡的程度，并产生了具有高连锁不平衡的基因组区之内的单元型区段的图。近交品系基因组的SNP和单元型图展示于http://mouseSNP.roche.com。计算作图程序使用基于方差分析的统计学建模在每个单元型区段之内评价性状值和品系分组之间的关联程度。为了评价这种关联，计算p值以确定数据是否与具有相同基因型单元型的近交品系的平均性状值是相同的这一零假设一致。

基于单元型的计算遗传作图用于鉴定在小鼠中影响对阿片样物质依赖性的易感性的基因。所述基因之一为HTR3A，其编码5-HT3受体的组分。

II.与麻醉药使用相关的生理依赖性和停药

本发明的方法和组合物涉及与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状或成瘾。麻醉药可经过血流传至脑，在此处其结合于阿片剂敏感神经元表面上的mu阿片样物质受体。麻醉药与受体的结合可导致感觉愉悦。通常施用麻醉药以减轻疼痛；然而，当不存在疼痛而激活奖赏过程(rewardingprocess)时，可导致为了愉悦反复使用该麻醉药。麻醉药可通过多种途径施于麻醉药使用者，包括例如经口、经皮(例如皮肤贴片(skin patch))、静脉内或作为栓剂；此外，所述药物可通过吸烟或嗅吸施用。麻醉药可在医药环境中例如诊所或医院等中施用。

成瘾可由变得强制性和自毁性的升级麻醉药使用导致。麻醉药成瘾可表征为尽管承认药物的害处仍然持续使用药物，对于使用药物过分专注(excessive preoccupation)，以及社会孤立。反复暴露于渐增剂量的麻醉药可改变脑部使得其在药物存在时正常运作，但在其不存在时异常运作。该改变可导致耐受(需要摄取渐增剂量的麻醉药以取得相同的阿片样效果)和依赖，或对停药症状的易感性。麻醉药停药的症状可发生在停止或减少麻醉药重度或长期(持续几周或更长)使用之后，或发生在一段阿片样物质使用之后施用阿片样物质拮抗剂之后。

阿片样物质依赖和阿片样物质停药症状可归因于蓝斑(LC)的改变。LC中的神经元产生一种化学品去甲肾上腺素(NA)，并使其分布于脑的部分，在此处其激发一般的警觉等功能。当阿片样物质分子连接于LC中脑细胞上的mu受体时，该神经元对NA的释放受抑制，其可导致困倦，呼吸减慢和低血压。然而，反复暴露于阿片样物质可导致LC神经元增加其活性水平。当阿片样物质存在时，其抑制作用由该变高的活性所抵消，而正常量的NA使患者感觉基本正常。当阿片样物质不存在，无法抑制LC脑细胞的变高的活性时，神经元释放过量的NA，其可引发焦虑、肌肉痉挛和腹泻。其他脑区也可导致停药症状的产生，包括中脑边缘奖赏系统。

麻醉药停药的症状可包括腹泻、烦躁不安、发热、失眠(慢性)、流泪(产生眼泪)或鼻漏(流鼻涕)、肌肉疼痛、恶心或呕吐、瞳孔扩张(瞳孔散大)、立毛(鸡皮疙瘩)、流汗、心动过速、流感样症状、震颤、腹部痉挛、烦躁不安、战栗、肌肉颤搐、热/冷潮红、呼吸速率增加(快速呼吸)、流涎、食欲不振和打呵欠。精神症状可包括抑郁、焦虑、惊恐、易怒、注意力不集中、意识混乱以及对麻醉药的渴望。

本发明的方法和药物组合物可用于治疗与受试者使用麻醉药相关的生理依赖性和/或停药症状。所述受试者可为任何曾使用或现时正在使用麻醉药的哺乳动物。所述受试者可为大鼠、小鼠或人。所述受试者可对麻醉药成瘾或不成瘾。本发明的方法和药物组合物可用于治疗麻醉药成瘾。

A.麻醉药

本发明用于减少、预防或治疗与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状，或预防或治疗与麻醉药使用相关的成瘾的方法和药物组合物。麻醉药可包括，例如：醋托啡(acetorphine)、乙酰-α-甲基芬太尼(acetyl-alpha-methylfentanyl)、醋美沙朵(acetylmethadol)、阿芬太尼(alfentanil)、烯丙罗定(allylprodine)、阿醋美沙朵(alphacetylmethadol)、阿法美罗定(alphameprodine)、阿法芳沙朵(alphmethadol)、α-甲基芬太尼(alpha-methylfentayl)、α-甲基硫代芬太尼(alpha-methylthiofentanyl)、阿法罗定(alphaprodine)、阿尼利定(anileridine)、苄替啶(benzethidine)、苄吗啡(benzylmorphine)、倍醋美沙朵(betacetylmethadol)、β-羟基芬太尼(beta-hydroxyfentanyl)、β-羟基-3-甲基芬太尼(beta-hydroxy-3-methylfentanyl)、倍他美罗定(betameprodine)、倍他美沙朵(betamthadol)、倍他罗定(betaprodine)、贝齐米特(bezitramide)、大麻和大麻树胶及提取物以及大麻酊剂(cannabis andcannabis resin and extracts and tinctures of cannabis)、氯尼他秦(clonitazene)、古柯叶(coca leaf)、可卡因(cocaine)、可多克辛(codoxime)、罂粟秆浓缩物(concentrate of poppy straw)、地素吗啡(desomorphine)、右吗拉胺(dextromoramide)、地恩丙胺(diampromide)、二乙噻丁(diethylthiambutene)、地芬诺辛(difenoxin)、二氢埃托啡(dihydroetorphine)、双氢吗啡(dihydromorphine)、地美沙朵(dimenoxadol)、地美庚醇(dimepheptanol)、二甲噻丁(dimethylthiambutene)、吗苯丁酯(dioxaphetyl  butyrate)、地芬诺酯(diphenoxylate)、地匹哌酮(dipipanone)、羟蒂巴酚(drotebanol)、芽子碱(ecgonine)、乙甲噻丁(ethylmethylthiambutene)、依托尼秦(etonitazene)、埃托啡(etorphine)、依托利定(etoxeridine)、芬太尼(fentanyl)、呋替啶(furethidine)、海洛因(heroin)、氢可酮(hydrocodone)、氢吗啡醇(hydromorphinol)、氢吗啡酮(hydromorphone)、羟哌替啶(hydroxypethidine)、异美沙酮(isomethadone)、凯托米酮(ketobemidone)、左美沙芬(levomethorphan)、左吗拉胺(levomoramide)、左芬啡烷(levophenacylmorphan)、左啡诺(levorphanol)、美他佐辛(metazocine)、美沙酮(methadone)、美沙酮中间物(methadone intermediate)、甲地索啡(methyldesorphine)、甲二氢吗啡(methyldihydromorphine)、3-甲基芬太尼(3-methylfentanyl)、3-甲基硫代芬太尼(3-methylthiofentanyl)、美托酮(metopon)、吗拉迈得中间物(moramide intermediate)、吗哌利定(morpheridine)、吗啡(morphine)、吗啡甲溴化物和吗啡-N-氧化物(morphine methobromide andmorphine-N-oxide)、MPPP、麦罗啡(myrophine)、尼可吗啡(nicomorphine)、诺美沙朵(noracymethadol)、去甲左啡诺(norlevorphanol)、去甲美沙酮(normethadone)、去甲吗啡(normophine)、诺匹哌酮(norpipanone)、阿片(opium)、羟考酮(oxycodone)、羟吗啡酮(oxymorphone)、对氟代芬太尼(para-fluorofentanyl)、PEPAO、哌替啶(pethidine)、哌替啶中间物A(pethidineintermediate A)、哌替啶中间物B(pethidine intermediate B)、哌替啶中间物C(pethidine intermediate C)、苯吗庚酮(phenadoxone)、非那丙胺(phenampromide)、非那佐辛(phenazocine)、非诺啡烷(phenomorphan)、苯哌利定(phenoperidine)、匹米诺定(piminodine)、哌腈米特(piritramide)、普罗庚嗪(proheptazine)、丙哌利定(properidine)、消旋甲啡烷(racemethorphan)、消旋吗拉胺(racemoramide)、消旋啡烷(racemorphan)、瑞芬太尼(remifentanil)、舒芬太尼(sufentanil)、醋氢可酮(thebacon)、二甲基吗啡(thebaine)、硫代芬太尼(thiofentanyl)、替利定(tilidine)和trimeperidiene。

在本发明的一个实施方案中，将一种或多种减少、预防或治疗与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂可与一种或多种麻醉药共同向受试者施用以预防或治疗与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状。在另一个实施方案中，将一种或多种减少、预防或治疗与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂在将一种或多种麻醉药向受试者施用之前向受试者施用。在另一个实施方案中，将一种或多种减少、预防或治疗与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂在将一种或多种麻醉药向受试者施用之后向受试者施用。一种或多种减少与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂可与向受试者施用的一种或多种麻醉药在同一药物组合物中。

B.阿片样物质受体

麻醉药可结合阿片样物质受体，其为与归类为阿片样物质的配体相互作用的G蛋白偶联受体(GPCR)。有三种主要类型的阿片样物质受体：delta(δ)、kappa(κ)和mu(μ)。由两种类型的delta受体(δ₁，δ₂)，且delta受体见于脑中的脑桥核、杏仁核、嗅球和深皮层。delta受体在痛觉缺失、生理依赖性和抗抑郁作用中起作用。kappa受体具有三种亚型(κ₁，κ₂和κ₃)，并见于脑中包括屏状核、下丘脑和导水管周围灰质中，并见于脊髓包括胶状质(substantiagelatinosa)中。kappa受体在ADH释放的抑制、瞳孔缩小、镇静作用和脊髓麻醉(spinal analgesia)中起作用。mu受体具有三种亚型(μ₁、μ₂和μ₃)，并位于脑包括皮质、丘脑和导水管周围灰质中，并见于脊髓包括胶状质中。μ₁受体涉及脊髓上麻醉(supraspinal analgesia)和生理依赖性，而μ₂受体涉及呼吸抑制、瞳孔缩小、欣快、减少的GI运动和生理依赖性。第四种阿片样物质受体家族成员是阿片样物质受体样受体(ORL1，NOP)。受试者使用的麻醉药可结合任何阿片样物质受体。

本发明的方法和药物组合物可涉及调节一种或多种阿片样物质受体的活性。

C.阿片样物质受体拮抗剂

本发明的方法和药物组合物可包含一种或多种阿片样物质受体拮抗剂。可适用于本发明方法和药物组合物的阿片样物质受体的选择性拮抗剂包括，例如CTAP(mu受体)、naltrindole、TIPP-ψ、ICI 174864(delta受体)、nor-binaltorphimine(kappa受体)。其他适用于本发明方法和药物组合物的阿片样物质受体拮抗剂包括，例如纳洛酮(naloxone)、纳曲酮(naltrexone)、alvimopan、甲基纳曲酮(methylnaltrexone，MNTX)、纳布啡(nalbuphine)、烯丙吗啡(nalorphine)、纳美芬(nalmefene)、二丙诺啡(diprenorphine)、反式-3，4-二甲基-4-(3-羟基苯基)哌啶(trans-3，4-dimethyl-4-(3-hydroxyphenyl)piperidine)、5′-acetamidinoethylnaltrindole(ANTI)、4-氨基喹啉(4-Aminoquinoline)、N-(4-氨基-2-甲基喹啉-6-基)-2-(4-乙基苯氧基甲基)苯甲酰胺单盐酸盐(N-(4-amino-2-methylquinolin-6-yl)-2-(4-ethylphenoxymethyl)benzamidemonohydrochloride)、7-苄叉纳曲酮(7-Benzylidenenaltrexone)、Binaltorphimine；布托啡诺(Butorphanol)(17-环丁基甲基-3，14-二羟基吗啡烷)酒石酸盐；CTAP，D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Arg-Thr-Pen-Thr-NH2；CTOP，D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Orn-Thr-Pen-Thr-NH2(SEQ ID NO：32)；环佐辛(Cyclazocine)；Cyprodime；1，3-二甲基-4-哌啶酮(1，3-Dimethyl-4-piperidinone)；乙基氧代环唑星(Ethylketocyclazocine)；.beta.-Funaltrexamine；GNTI，5′-Guanidinonaltrindole；ICI 174864，N，N-二烯丙基-Tyr-Aib-Aib-Phe-Leu(SEQID NO：40)；吲哚并吗啡喃(Indolomorphinan)；5’-异硫氰酸盐/酯(5′-Isothiocyanate)；J-113397，1-[(3R，4R)-1-环辛基甲基-3-羟基甲基-4-哌啶基]-3-乙基-1，3-二-氢-2H-苯并咪唑-2-酮(1-[(3R，4R)-1-Cyclooctylmethyl-3-hydroxymethyl-4-piperidyl]-3-ethyl-1，3-di-hydro-2H-benzimidazol-2-one)；JDTic，(3R)-7-羟基-N-[(1S)-1-[[(3R，4R)-4-(3-羟基苯基)-3，4-二甲基-1-哌啶基]甲基]-2-甲基丙基]-1，2，3，4-四氢-3-异喹啉-羧酰胺((3R)-7-Hydroxy-N-[(1S)-1-[[(3R，4R)-4-(3-hydroxyphenyl)-3，4-dimethyl-1-piperidinyl]methyl]-2-methylpropyl]-1，2，3，4-tetrahydro-3-isoquinoline-carboxamide)；3-夸达佐辛(3-Quadazocine)；洛哌丁胺(Loperamide)；甲氧基纳曲酮(Methoxynaltrexone)；Mr 2266；Naloxone methiodide；纳洛刹腙(Naloxazone)；.beta.-Naltrexamine；Naltriben；苯基哌啶(Phenylpiperidine)；SB-612111，(-)-顺式-1-甲基-7-[[4-(2，6-二氯苯基)哌啶-1-基]甲基]-6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-5-醇((-)-cis-1-methyl-7-[[4-(2，6-dichlorophenyl)piperidin-1-yl]methyl]-6，7，8，9--tetrahydro-5H-benzocyclohepten-5-ol)；SoRI 9409，59-(4-氯苯基)-17-(环丙基甲基)-6，7-二脱氢-3，14-二羟基-4-，5a-环氧吡啶并[29，39：6，7]吗啡烷(59-(4-chlorophenyl)-17-(cyclopropylmethyl)-6，7-didehydro-3，14-dihydroxy-4-，5a-epoxypyrido-[29，39：6，7]morphinan)，SNC 80；TIPP-y，Tyr-Tic-Phe-Phe；以及Triethyleneglycolnaltrexamine。

III.调节呕吐的受体和药物

本发明的方法和药物组合物可靶向调节呕吐(emesis，vomitting)的受体和/或途径。呕吐中心见于脑桥的侧髓网状结构(lateral medullary reticularformation)并含有调节呕吐的受体和神经递质，所述脑桥是位于脑干的结构。化学感受器触发区(CTZ)(最后区)的激发可导致呕吐。在第四脑室的CTZ具有在呕吐中起作用的受体，包括5-HT3受体、神经激肽1(NK1)受体、多巴胺D2受体、阿片样物质受体和乙酰胆碱受体。前庭系统亦在呕吐中起作用。前庭系统与脑通过脑神经VIII(前庭蜗神经)彼此联系，其具有毒蕈碱性受体和H1组胺受体。呕吐中心还含有神经递质胆碱、组胺、多巴胺、5-羟色胺和阿片样物质。

A.5-HT3受体

本发明的方法和药物组合物可靶向5-HT3受体。5-HT3(5-羟基色胺-3)受体是配体门控性离子通道。受体含有5个亚基，其围绕中央的离子传导孔定位。这些亚基为由基因HTR3A、HTR3B、HTR3C、HTR3D和/或HTR3E编码的蛋白。功能性通道可包含5个相同的5-HT3A亚基(同五聚体)或5-HT3A与其他四种亚基之一的混合物(5-HT3B、5-HT3C、5-HT3D或5-HT3E；异五聚体)。5-HT3通道的孔对钠、钾和钙离子是可渗透的。5-HT3受体可结合5-羟色胺(5-羟基色胺，或5-HT)。

5-HT3受体在整个中枢和周围神经系统中表达，并介导多种生理功能。HTR3A、HTR3B和HTR3C基因表达于CNS和周围神经系统(periphery)；HTR3D和HTR3E表达于GI道。5-HT3受体的激活可调节包括例如药物诱导的呕吐和伤害感受、肠胃运动、蠕动、内脏感觉和分泌的活性。在大鼠新皮质中间神经元和杏仁核中，以及在雪貂视皮质中，突触后5-HT3受体可介导快速兴奋性突触传递。5-HT3受体还存在于前突触神经末端，在此处认为其介导或调节神经递质释放。5-HT3受体可见于迷走神经的传入支末端。迷走神经向脑的延髓和化学感受器触发区(CTZ)中的脑呕吐中心发送信号。

1.5-HT3受体拮抗剂

本发明的方法和药物组合物可包括一种或多种5-HT3受体拮抗剂。可用于本文中所述的方法和药物组合物中的5-HT3拮抗剂包括，例如西兰司琼(cilansetron)、氯氮平(clozapine)、多拉司琼(dolasetron)、格拉司琼(granisetron

)、昂丹司琼(ondansetron

)、阿洛司琼(alosetron

阿扎司琼(azasetron)、美金刚(memantine)、米安色林(mianserin)、米氮平(mirtazapine)、贝美司琼(bemesetron(MDL-72222)西兰司琼、来立司琼(lerisetron(F-0930-RS))、卢罗司琼(lurosetron)、帕洛诺司琼(palonosetron奥氮平(olanzapine)、喹硫平(quetiapine)、雷莫司琼(ramosetron

伦扎必利(renzapride)、托烷司琼(tropisetron

)、扎考必利(zacopride)、扎托司琼(zatosetron(LY-277，359)。Galanolactone也是一种5-HT3受体拮抗剂。西沙必利(cisapride)、伦扎必利(renzapride)和甲氧氯普胺(metoclopramide)对5-HT3受体具有一些拮抗作用。5-HT3受体拮抗剂可阻止5-羟色胺结合于5-HT3受体。5-HT3受体拮抗剂可为在其结构式中包含咪唑、噁唑、噻唑、吡唑、3-吡咯啉或吡咯烷的任何其他5-HT3受体拮抗剂。

5-HT3受体拮抗剂可用于治疗肠易激综合征、恶心、呕吐、神经精神疾病、食欲过剩、纤维肌痛和风湿性疾病。

在一个实施方案中，提供了药物组合物，其包含5-HT3受体拮抗剂，由5-HT3受体拮抗剂组成或基本上由5-HT3受体拮抗剂组成。在另一个实施方案中，提供了药物组合物，其包含5-HT3受体拮抗剂和一种或多种其他可预防或治疗与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂。在另一个实施方案中，提供了药物组合物，其由或基本上由5-HT3受体拮抗剂和一种、两种、三种、四种或五种其他可预防或治疗与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂组成。

在一个实施方案中，本发明的药物组合物包含一种或多种5-HT3受体拮抗剂和一种或多种麻醉药。提供了药物组合物，其包含麻醉药、5-HT3受体拮抗剂和一种或多种其他可预防或治疗与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂，或由或基本上由麻醉药、5-HT3受体拮抗剂和一种或多种其他可预防或治疗与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂组成。

在另一个实施方案中，提供了用于预防或治疗受试者中与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的方法，包括向受试者施用5-HT3拮抗剂，或由或基本上由向受试者施用5-HT3拮抗剂组成。在另一个实施方案中，提供了用于预防或治疗受试者中与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的方法，包括向受试者施用麻醉药和5-HT3拮抗剂，或由或基本上由向受试者施用麻醉药和5-HT3拮抗剂组成。在另一个实施方案中，提供了用于预防或治疗受试者中与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的方法，包括向受试者施用5-HT3拮抗剂和一种或多种其他可减少或治疗与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂，或由或基本上由向受试者施用5-HT3拮抗剂和一种或多种其他可减少或治疗与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂组成。在另一个实施方案中，提供了用于预防或治疗受试者中与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的方法，包括向受试者施用麻醉药、5-HT3拮抗剂和一种或多种其他可减少或治疗与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂，或由或基本上由向受试者施用麻醉药、5-HT3拮抗剂和一种或多种其他可减少或治疗与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂组成。在另一个实施方案中，本发明的方法可包括将一种或多种5-HT3受体拮抗剂与一种或多种麻醉药共同向受试者施用。在另一个实施方案中，本发明的方法可包括向受试者施用药物组合物，所述药物组合物包含一种或多种5-HT3受体拮抗剂和一种或多种麻醉药。

2.其他类型的5-HT3受体抑制剂

本发明的方法和药物组合物可包括其他靶向5-HT3受体的分子。这些分子可包括，例如核酸，包括siRNA、shRNA、miRNA，核酶，和蛋白，包括抗体和酶。在一个实施方案中，提供了预防或治疗受试者中与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的方法，包括将包含靶向5-HT3受体或5-HT3受体组分的siRNA、shRNA、miRNA、核酶和/或蛋白的分子向所述受试者施用。所述分子可处于包含一种或多种其他预防或治疗与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂的药物组合物中。

B.其他调节呕吐的受体

另一种涉及呕吐调节的受体是NK1受体。NK1受体是速激肽受体，前七位7次跨膜GPCR家族受体的成员。NK1受体的激活可诱导磷脂酶C的激活，其产生肌醇三磷酸。NK1受体可结合于P物质，其为可作为神经递质和神经调质起作用的11氨基酸的多肽。脑干中的呕吐中心含有高浓度的P物质和NK1受体。在一个实施方案中，提供了治疗或预防生理依赖性和/或停药症状的方法，其包括靶向NK1受体，或由或基本上由靶向NK1受体组成。

另一种涉及呕吐调节的受体为多巴胺D2受体。多巴胺D2受体是多巴胺受体的五种亚型之一。D1和D5受体为多巴胺受体D1样家族成员，而D2、D3和D4受体为D2-样家族成员。多巴胺受体是GPCR。在另一个实施方案中，提供了治疗或预防生理依赖性和/或停药症状的方法，其包括靶向多巴胺受体，或由或基本上由靶向多巴胺受体组成。

C.其他止吐药

本发明的方法和药物组合物可包括靶向除了5-HT3受体之外其他控制呕吐的受体或途径的药剂。在一个实施方案中，提供了预防或治疗受试者中与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的方法，包括用药剂靶向调节呕吐的途径，或由或基本上由用药剂靶向调节呕吐的途径组成。所述药剂可包括止吐药。这些药物可包括，例如：

H1抗组胺，例如茶苯海明(dimenhydrinate)

几种clizine(例如赛克力嗪(cyclizine)，美克洛嗪(meclizine))、苯海拉明(diphenhydramine)

异丙嗪(promethazine)

和羟嗪(hydroxyzine)

所述药物可包括NK1受体拮抗剂，例如Aprepitant

Casopitant(Rezonic，

)、Fosaprepitant(

注射剂，

)和Maropitant

所述药物可包括多巴胺拮抗剂，例如氯丙嗪(chlorpromazine)、氟哌利多(droperidol)

丙氯拉嗪(prochlorperazine)、甲氧氯普胺(metoclopramide)、fluphenzine、多潘立酮(domperidone)、氟哌啶醇(haloperidol)、异丙嗪(promethazine)和阿立必利(alizapride)。

所述药物可包括毒蕈碱性受体拮抗剂(抗胆碱能类)，例如东莨菪碱(hyoscine，scopolamine)。

所述药物可包括地西泮类(benzodiazepines)，例如咪达唑仑(midazolam)、地西泮(diazepam)

和劳拉西泮(lorazepam)

所述药物可包括皮质类固醇，例如地塞米松(dexamethasone)和甲泼尼龙(methylprednisolone)。

所述药物可包括大麻素类(cannabinoids)，例如大麻(cannabis)、屈大麻酚(dronabinol)

大麻隆(nabilone)

和sativex。

所述药物可包括，例如苯喹胺(benzquinamide)、地芬尼多(diphenidol)

曲美苄胺(trimethobenzamide)

维拉帕米(verapamil)

姜、emetrol、丙泊酚(propofol)、胡椒薄荷、蝇蕈醇(muscimol)和ajwain。

可为止吐的并可用于本发明方法的非药物疗法包括针刺和催眠。

其他可用于本发明的方法和组合物中以预防或治疗与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂包括，例如可乐定(clonidine)、丁丙诺啡(buprenorphine)或美沙酮(methadone)、纳曲酮(naltrexone)、纳洛酮(naloxone)或suboxone(丁丙诺啡和纳洛酮的组合)。

IV.治疗方法

在一个实施方案中，提供了用于治疗或预防麻醉药生理依赖性和/或停药症状的方法，包括在将麻醉药向受试者施用之前向受试者施用一种或多种5-HT3受体调节剂，或由或基本上由在将麻醉药向受试者施用之前向受试者施用一种或多种5-HT3受体调节剂组成。在另一个实施方案中，提供了用于治疗或预防麻醉药生理依赖性和/或停药症状的方法，包括在将麻醉药向受试者施用之后向受试者施用一种或多种5-HT3受体调节剂，或由或基本上由在将麻醉药向受试者施用之后向受试者施用一种或多种5-HT3受体调节剂组成。在另一个实施方案中，提供了用于治疗或预防麻醉药生理依赖性和/或停药症状的方法，包括向受试者与麻醉药共同施用一种或多种5-HT3受体调节剂，或由或基本上由向受试者与麻醉药共同施用一种或多种5-HT3受体调节剂同时向受试者施用组成。在另一个实施方案中，所述一种或多种3-HT3受体调节剂是5-HT3受体拮抗剂，包括昂丹司琼或帕洛诺司琼。在另一个实施方案中，所述一种或多种5-HT-3受体调节剂和所述麻醉药作为共同配制剂(co-formulation)向受试者施用。在另一个实施方案中，提供了预防或治疗受试者中与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的方法，包括向受试者施用调节5-HT3受体的药剂和一种或多种其他可预防或治疗与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂。所述调节5-HT3受体的药剂和所述一种或多种其他药剂可1)在向受试者施用麻醉药之前向受试者施用；2)在向受试者施用麻醉药之后向受试者施用，或3)与麻醉药共同向受试者施用。调节5-HT3受体的药剂可在向受试者施用麻醉药之前施用，而所述一种或多种其他药剂可在向受试者施用麻醉药之后施用。调节5-HT3受体的药剂可在已经向受试者施用麻醉药之后施用，而所述一种或多种其他药剂可在向受试者施用麻醉药之前施用。

在一个实施方案中，将一种或多种5-HT3受体调节剂和一种或多种其他止吐药在向受试者施用麻醉药之前向受试者施用以治疗或预防麻醉药生理依赖性和/或停药症状。在另一个实施方案中，将一种或多种5-HT3受体调节剂和一种或多种其他止吐药在向受试者施用麻醉药之后向受试者施用以治疗或预防麻醉药生理依赖性和/或停药症状。在另一个实施方案中，将一种或多种5-HT3受体调节剂和一种或多种其他止吐药与麻醉药共同向受试者施用以治疗或预防麻醉药生理依赖性和/或停药症状。在另一个实施方案中，所述一种或多种5-HT3受体调节剂是5-HT3受体拮抗剂，包括昂丹司琼或帕洛诺司琼。在另一个实施方案中，所述一种或多种止吐药包括抗组胺药、NK1受体拮抗剂、毒蕈碱性受体拮抗剂、地西泮、皮质类固醇和/或大麻素。在另一个实施方案中，所述麻醉药是吗啡。在另一个实施方案中，所述一种或多种5-HT3受体调节剂和一种或多种其他止吐药作为共同配制剂向受试者施用。在另一个实施方案中，所述一种或多种5-HT-3受体调节剂，一种或多种其他止吐药和一种或多种麻醉药作为共同配制剂向受试者施用。

在一个实施方案中，将一种或多种5-HT3受体调节剂和一种或多种抗组胺药向受试者施用以治疗或预防麻醉药生理依赖性和/或停药症状。在另一个实施方案中，所述一种或多种5-HT3受体调节剂是5-HT3拮抗剂。在另一个实施方案中，所述一种或多种5-HT3拮抗剂选自下组：西兰司琼(cilansetron)、氯氮平(clozapine)、多拉司琼(dolasetron

)、格拉司琼(granisetron

)、昂丹司琼(ondansetron

)、阿洛司琼(alosetron

阿扎司琼(azasetron)、美金刚(memantine)、米安色林(mianserin)、米氮平(mirtazapine)、贝美司琼(bemesetron)(MDL-72222)西兰司琼(cilansetron)、来立司琼(lerisetron(F-0930-RS))、卢罗司琼(lurosetron)、帕洛诺司琼(palonosetron

)、奥氮平(olanzapine)、喹硫平(quetiapine)、雷莫司琼(ramosetron

)、伦扎必利(renzapride)、托烷司琼(tropisetron)、扎考必利(zacopride)、扎托司琼(zatosetron(LY-277，359))、Galanolactone西沙必利(Galanolactone Cisapride)、伦扎必利(renzapride)和甲氧氯普胺(metoclopramide)。在另一个实施方案中，所述一种或多种5-HT3拮抗剂是昂丹司琼或帕洛诺司琼。在另一个实施方案中，所述一种或多种抗组胺药选自下组：茶苯海明(dimenhydrinate)

几种clizine(例如赛克力嗪(cyclizine)、苯海拉明(diphenhydramine)

异丙嗪(promethazine)

和羟嗪(hydroxyzine)

在另一个实施方案中，所述一种或多种抗组胺药包括羟嗪。在一个实施方案中，所述一种或多种5-HT3拮抗剂包括昂丹司琼而所述抗组胺药包括羟嗪。在另一个实施方案中，所述一种或多种5-HT3拮抗剂包括帕洛诺司琼而所述抗组胺药包括羟嗪。在一个实施方案中，一种或多种5-HT3拮抗剂和一种或多种抗组胺药在向受试者施用麻醉药之前向受试者施用以治疗或预防麻醉药生理依赖性和/或停药症状。在另一个实施方案中，一种或多种5-HT3拮抗剂和一种或多种抗组胺药在向受试者施用麻醉药之后向受试者施用以治疗或预防麻醉药生理依赖性和/或停药症状。在另一个实施方案中，将一种或多种5-HT3拮抗剂和一种或多种抗组胺药与一种或多种麻醉药向受试者共同施用以治疗或预防麻醉药生理依赖性和/或停药症状。

在另一个实施方案中，将一种或多种5-HT3拮抗剂和一种或多种NK1受体拮抗剂向受试者施用以治疗或预防麻醉药生理依赖性和/或停药症状。在另一个实施方案中，将一种或多种5-HT3拮抗剂和一种或多种多巴胺拮抗剂向受试者施用以治疗或预防麻醉药生理依赖性和/或停药症状。在另一个实施方案中，将一种或多种5-HT3拮抗剂和一种或多种毒蕈碱性受体拮抗剂向受试者施用以治疗或预防麻醉药生理依赖性和/或停药症状。在另一个实施方案中，将一种或多种5-HT3拮抗剂和一种或多种地西泮向受试者施用以治疗或预防麻醉药停药症状。在另一个实施方案中，将一种或多种5-HT3拮抗剂和一种或多种皮质类固醇向受试者施用以治疗或预防麻醉药生理依赖性和/或停药症状。在另一个实施方案中，将一种或多种5-HT3拮抗剂和一种或多种大麻素向受试者施用以治疗或预防麻醉药生理依赖性和/或停药症状。在另一个实施方案中，这些组合的每一个可在向受试者施用麻醉药之前或在已经向受试者施用麻醉药之后施用。在另一个实施方案中，这些组合的每一个可与麻醉药共同施用于受试者。

在一个方面，提供了治疗受试者中对麻醉药成瘾的方法，包括向受试者施用一种或多种调节5-HT3受体的药剂，或由或基本上由向受试者施用一种或多种调节5-HT3受体的药剂组成。在另一个实施方案中，提供了治疗受试者中对麻醉药成瘾的方法，包括向受试者施用一种或多种调节5-HT3受体的药剂和第二药剂，或由或基本上由向受试者施用一种或多种调节5-HT3受体的药剂和第二药剂组成。在另一个实施方案中，所述调节5-HT3受体的药剂为5-HT3拮抗剂。在另一个实施方案中，所述第二药剂为抗组胺药、NK1受体拮抗剂、毒蕈碱性受体拮抗剂、地西泮、皮质类固醇和/或大麻素。在一个实施方案中，所述5-HT3拮抗剂是昂丹司琼和帕洛诺司琼。在一个实施方案中，所述抗组胺药是羟嗪。

在另一个方面，提供了药物组合物，其包含麻醉药和一种或多种减少与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂，或由或基本上由麻醉药和一种或多种减少与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂组成。所述一种或多种减少与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂可为调节5-HT3受体的药剂、抗组胺药、NK1受体拮抗剂、毒蕈碱性受体拮抗剂、地西泮、皮质类固醇和/或大麻素。在一个实施方案中，所述调节5-HT3受体的药剂是5-HT3受体拮抗剂。

IV.配制剂、施用途径和有效剂量

本发明包括包含本发明的药剂的方法和组合物。此外，本发明涉及这些组合物的配制剂和组合物的有效剂量。药物组合物可用于减少、预防或治疗与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状。所述药物组合物可用于减少、预防或治疗与麻醉药使用相关的成瘾。

药剂或其药学上可接受的盐可单独提供或与一种或多种其他药剂或一种或多种其他形式的组合一同提供。举例而言，配制剂可包含一种或多种特定比例的药剂，或由或基本上由一种或多种特定比例的药剂组成，取决于每种药剂的相对效力和有意的适应症。举例而言，在靶向两个不同靶标，且效力相似的组合物中，可使用1∶1比例的药剂。两个形式可一同配制于同一剂量单位中，例如在一种乳膏剂、栓剂、片剂、胶囊剂、气雾剂喷剂或供溶解于饮料的散剂包(packet of powder)中；或每个形式可配制于不同的单位中，例如，两种乳膏剂、两种栓剂、两种片剂、两种胶囊剂、一种片剂和一种用于溶解该片剂的液体、两种气雾剂喷剂或一包散剂和用于溶解该散剂的液体等。

“药学上可接受的盐”可为保留用于本发明的药剂的生物学有效性和性质，且并不在生物学方面或其他方面不合需要的盐。举例而言，药学上可接受的盐并不干扰本发明药剂在调节5-HT3受体方面的有益作用。

典型的盐为无机离子如例如钠、钾、钙、锰离子等的盐。此类盐包括无机酸或有机酸如盐酸、氢溴酸、磷酸、硝酸、硫酸、甲磺酸、对甲苯磺酸、乙酸、延胡索酸、琥珀酸、乳酸、扁桃酸、苹果酸、柠檬酸、酒石酸或马来酸的盐。此外，如果所述药剂含有羧基基团或其他酸性基团，其可用无机或有机碱转化为药学上可接受的加成盐。合适的碱的实例包括氢氧化钠、氢氧化钾、氨、环己胺、二环己胺、乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺等。

药学上可接受的酯或酰胺指保留用于本发明中的药剂的生物学有效性和性质，并不在生物学方面或其他方面不合需要的那些。举例而言，所述酯或酰胺并不干扰本发明药剂在调节5-HT3受体方面的有益作用。典型的酯包括乙酯、甲酯、异丁酯、乙二醇酯等。典型的酰胺包括未取代的酰胺、烷基酰胺、二烷基酰胺等。

在一些实施方案中，药剂可与一种或多种例如如上所述的其他化合物、形式和/或药剂组合施用。所述药剂可为麻醉药。包含5-HT3受体调节剂与一种或多种其他活性剂组合的药物组合物可配制为包含某种摩尔比例。举例而言，可使用约99∶1至约1∶99的5-HT3受体调节剂对其他活性剂的摩尔比例。在所述实施方案的一些子集中，5-HT3受体调节剂∶其他活性剂的摩尔比例的范围选自约80∶20至约20∶80；约75∶25至约25∶75、约70∶30至约30∶70、约66∶33至约33∶66、约60∶40至约40∶60；约50∶50；和约90∶10至约10∶90。5-HT3受体调节剂∶其他活性剂的摩尔比例可为约1∶9，且在一些实施方案中可为约1∶1。在一个实施方案中，5-HT3受体调节剂对麻醉药的摩尔比例为约1∶100、1∶50、1∶25、1∶10、1∶9、1∶8、1∶7、1∶6、1∶5、1∶4、1∶3、2∶5、1∶2、1∶1、2∶1、5∶2、3∶1、4∶1、5小6∶1、7∶1、8∶1、9∶1、10∶1、25∶1、50∶1或100∶1。该两种药剂(例如5-HT3受体调节剂和麻醉药)、形式和/或化合物可一同配制于同一剂量单位中，例如在一种乳膏剂、栓剂、片剂、胶囊剂或供溶解于饮料的散剂包中，或每种药剂、形式和/或化合物可配制于不同的单位中，例如两种乳膏剂、栓剂、片剂、两种胶囊剂、一种片剂和一种用于溶解该片剂的液体、一种气雾剂喷剂一包散剂和用于溶解该散剂的液体等。在一个实施方案中，所述5-HT3受体调节剂是5-HT3受体拮抗剂。在另一个实施方案中，所述麻醉药是吗啡。在另一个实施方案中，所述5-HT3受体调节剂是5-HT3拮抗剂且所述麻醉药是吗啡。在另一个实施方案中，所述5-HT3拮抗剂是昂丹司琼或帕洛诺司琼，而所述麻醉药是吗啡。

在一个实施方案中，提供了组合物，其包含5-HT3受体调节剂和另一种活性剂，或由或基本上由5-HT3受体调节剂和另一种活性剂组成。在一个实施方案中，另一种活性剂是另一种止吐药。在另一个实施方案中，5-HT3受体调节剂和另一种活性剂的摩尔比例为约1∶100、1∶50、1∶25、1∶10、1∶5、1∶4、1∶3、2∶5、1∶2、1∶1、2∶1、5∶2、3∶1、4∶1、5∶1、10∶1、25∶1、50∶1或100∶1。在另一个实施方案中，所述5-HT3受体调节剂是5-HT3受体拮抗剂。在另一个实施方案中，所述5-HT3受体调节剂是5-HT3受体拮抗剂而另一种止吐药是抗组胺药。在另一个实施方案中，所述5-HT3受体调节剂和另外的止吐药一同配制于同一剂量单位中，例如在一种乳膏剂、栓剂、片剂、胶囊剂或供溶解于饮料的散剂包中，或每种药剂、形式和/或化合物可配制于不同的单位中，例如两种乳膏剂、栓剂、片剂、两种胶囊剂、一种片剂和一种用于溶解该片剂的液体、一种气雾剂喷剂一包散剂和用于溶解该散剂的液体等。

所述药剂和/或药剂的组合还有其他药剂可一同施用。可与本发明的药剂和/或药剂的组合共同施用的药剂的选择可至少部分取决于待治疗的病状。特定用于本发明的配制剂的药剂包括，例如任何对麻醉药使用者或麻醉药成瘾者生理依赖性或停药症状具有治疗作用的药剂。

在一个实施方案中，提供了组合物，其包含5-HT3受体调节剂，第二药剂和麻醉药。在另一个实施方案中，所述第二药剂是止吐药。

在一个实施方案中，药物组合物并不包含刺激剂。在另一个实施方案中，药物组合物并不包含阿片样物质拮抗剂。在另一个实施方案中，药物组合物并不包含NSAID止痛剂。在另一个实施方案中，药物组合物并不包含NMDA受体拮抗剂。在另一个实施方案中，药物组合物并不包含Cox-2抑制剂。在另一个实施方案中，药物组合物并不包含beta阻断剂、5-羟色胺受体激动剂、血管收缩药、抗血小板剂、以及抗惊厥药、曲坦(triptan)、麦角(ergot)或降钙素基因相关肽受体拮抗剂、抗抑郁剂、和抗胆碱能药、麻醉药或α₂肾上腺素受体激动剂药剂。在另一个实施方案中，药物组合物并不是双层片剂的形式。在另一个实施方案中，药物组合物是双层片剂的形式。

药物组合物如用于本文，可为任何准备用于向受试者施用的组合物。所述药剂(或其药学上可接受的盐、酯或酰胺)可以其中活性剂是与一种或多种药学上可接受的载体的混合物(mixture或admixture)的形式施用。可使用如下途径将药物组合物向受试者施用，所述途径包括，例如经口、含服、局部、直肠、经皮、经粘膜、皮下、静脉内、肌肉内和经鼻。依照本发明使用的药物组合物可使用一种或多种生理学上可接受的载体包括赋形剂、稀释剂和/或辅助剂(auxiliary)进行配制，所述载体促进将活性剂加工为可施用的制剂。药物组合物的合适的配制剂可至少部分取决于施用途径。

在一些实施方案中，一种或多种药剂可与一种或多种麻醉药共同施用以减少与所述一种或多种麻醉药相关的生理依赖性和/或停药症状。

A.施用途径

1.经口施用

对于经口施用药剂，可通过将活性剂与本领域公知的药学上可接受的载体组合来配制药物组合物。配制剂可包含的药学上可接受的载体包括固体稀释剂或填充剂、无菌水性介质和多种无毒的有机溶剂。所述载体可使得本发明的药剂配制为片剂包括可咀嚼的片剂、丸剂、糖衣剂(dragee)、胶囊剂、锭剂(lozenge)、硬糖果(hard candy)、液体、凝胶剂、糖浆剂、膏剂、散剂、悬液、酏剂、薄饼(wafer)等，以供向受试者经口施用。一般而言，会按总组合物或口服剂量形式重量计从约0.5％、约5％、约10％、约20％、约30％至约50％、约60％、约70％、约80％或约90％范围的浓度水平，以足以提供所需剂量单位的量包含本发明的药剂

本发明的药剂可为用于经口使用的水性悬液。所述水性悬液可包括药学上可接受的赋形剂，如悬浮剂(例如甲基纤维素)、润湿剂(例如卵磷脂、溶血卵磷脂和/或长链脂肪醇)，以及着色剂、防腐剂、矫味剂等。

在一些实施方案中，由于例如较大亲脂模块(moiety)的存在，可使用非水性溶剂或油以使药剂成为溶液。或者，可使用乳剂、悬液或其他制剂例如脂质体制剂。任何本领域技术人员已知的方法可用于制备脂质体制剂(参见，例如Bangham等，J.Mol.Biol.23：238-252(1965)和Szoka等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 75：4194-4198(1978))。配体还可附于所述脂质体以引导这些组合物至特定的作用位点。本发明的药剂还可整合入食品例如黄油、干乳酪、冰激淋或色拉调味料以促进溶解、施用和/或在某些受试者群体中的顺应性。

用于经口施用的药物组合物可作为固体赋形剂生成，即将所得的混合物磨碎并在添加合适的辅助剂之后，加工颗粒混合物以获得片剂或糖衣剂的芯。合适的赋形剂可包括，例如填充剂如糖包括乳糖、甘露醇、蔗糖或山梨醇；矫味成分，纤维素制剂如例如玉米淀粉、小麦淀粉、稻米淀粉、马铃薯淀粉、明胶、西黄蓍胶、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和/或聚乙烯基吡咯烷酮(PVP)。可添加崩解剂，如交联的聚乙烯基吡咯烷酮、琼脂或藻酸或其盐如藻酸钠。所述药剂还可配制为持续释放的制剂。

可向糖衣剂的芯提供合适的包衣；举例而言，可使用浓缩的糖溶液，其可含有阿拉伯胶、滑石粉、聚乙烯基吡咯烷酮、聚羧乙烯凝胶、聚乙二醇和/或二氧化钛、漆溶液(lacquer solution)和合适的有机溶剂或溶剂混合物。可将染料或色素添加于所述片剂或糖衣剂包衣，例如以允许鉴别(identification)或表征活性剂的不同组合。

可经口使用的药物制剂包括用明胶制成的推合(push fit)的胶囊剂，以及用明胶和增塑剂如甘油或山梨醇制成的软的密封的胶囊剂。所述推合的胶囊剂可含有与填充剂如乳糖、粘合剂如淀粉和/或润滑剂如滑石粉或硬脂酸镁以及任选地稳定剂混合的活性剂。在软胶囊剂中，活性剂可溶解或悬浮于合适的液体如脂肪油、液体石蜡或液体聚乙二醇中。此外，可添加稳定剂。所有用于经口施用的配制剂可为适于施用的剂量。

2.注射和局部施用

对于注射，本发明的药剂可配制为水性溶液，包括但不限于生理学上相容的缓冲液如Hank’s溶液、林格液或生理盐水缓冲液。此类组合物还可包括一种或多种赋形剂，例如防腐剂、增溶剂、填充剂、润滑剂、稳定剂、白蛋白等。配制方法在本领域是已知的，例如，如公开于Remington’s PharmaceuticalSciences，最新版本，Mack Publishing Co.，Easton P。

所述药剂还可配制为储备制剂(depot preparation)，其为可在一段时间内通过控制释放过程作用的药物剂量形式。储备制剂可通过植入或经皮递送(例如皮下或肌肉内)、肌肉内注射或使用透皮贴片来施用。因此，例如所述药剂可与合适的聚合或疏水材料(例如作为可接受的油中的乳剂)或离子交换树脂配制，或作为略溶性衍生物，例如作为略溶性盐配制。

在一些实施方案中，包含一种或多种本发明的药剂的药物组合物当局部施用或注射于特定感染位点或附近时，产生局部或区域性作用。例如粘性液体、凝胶剂、胶冻剂、乳膏剂、洗剂、软膏剂、栓剂、泡沫剂或气雾剂喷剂的直接局部应用可用于局部施用以产生例如局部和/或区域性的作用。用于此种配制剂的药学上合适的媒介(vehicle)包括，例如低级脂肪醇、聚乙二醇(例如甘油或聚乙二醇)、脂肪酸酯、油、脂肪、硅氧烷等。此类制剂亦可包含防腐剂(例如对羟基苯甲酸酯)和/或抗氧化剂(例如抗坏血酸和生育酚)。亦参见Dermatological Formulations：Percutaneous absorption，Barry(Ed.)，MarcelDekker Incl，1983。

本发明的药物组合物可包含化妆品上或皮肤学上可接受的载体。此类载体与皮肤、指甲、粘膜、组织和/或毛发相容，并可包括符合这些要求的任何常规使用的化妆品或皮肤学载体。此类载体可方便地由本领域一般技术人员选取。在配制皮肤软膏剂时，可将本发明的药剂或药剂的组合配制于油状的烃基底、无水吸收基底、油包水吸收基底、水包油除水基底和/或水溶性基底中。

本发明的组合物可为任何适于局部施用的形式，包括水性、水-醇性(aqueous-alcoholic)或油性溶液，洗剂或血清分散剂，水性、无水或油性凝胶，通过将脂肪相分散于水相而获得的乳剂(O/W或水包油)，或相反(W/O或油包水)，微乳剂或者微囊剂、微粒剂或离子和/或非离子类型的脂质小囊分散剂。这些组合物可根据常规方法制备。除了本发明的药剂之外，本发明的组合物的多种组分的量为本领域中常规使用的量。这些组合物具体构成用于面部、用于手、用于身体和/或用于粘膜或用于清洁皮肤的保护、治疗或护理乳膏剂、乳、洗剂、凝胶剂或泡沫剂。所述组合物亦可由构成肥皂或清洁块(cleansing bar)的固体制剂组成。

本发明的组合物还可含有化妆品和皮肤病领域常用的佐剂，如亲水性或亲脂性胶凝剂、亲水性或亲脂性活性剂、防腐剂、抗氧化剂、溶剂、芳香基、填充剂、遮光剂、气味吸收剂和染料。这些不同佐剂的量为常规用于所考虑的领域中的那些，例如，为从约0.01％至约20％的组合物的总重量。取决于其特性，这些佐剂可引入脂肪相、引入水相和/或引入脂质小囊。

在一些实施方案中，可使用包含本发明药剂或药剂组合的眼用溶液、悬液、软膏剂或插入物。

在一些实施方案中，可使用包含本发明药剂或药剂组合的耳用溶液、悬液、软膏剂或插入物。

在一些实施方案中，将本发明的药剂以可溶而非悬液形式递送，其允许至作用位点更加迅速和定量的吸收。一般而言，配制剂如胶冻剂、乳膏剂、洗剂、栓剂和软膏剂可使得一个区域更广阔地暴露于本发明的药剂，而溶液中的配制剂例如喷剂，提供更加迅速，短期的暴露。

在一些与局部(topical/local)应用相关的实施方案中，所述药物组合物可包含一种或多种渗透促进剂。举例而言，所述配制剂可包含合适的固体或凝胶相载体或赋形剂，其增加渗透或协助将本发明的药剂或药剂组合递送穿过渗透屏障例如皮肤。许多这些渗透促进性化合物在局部配制剂领域是已知的，并包括例如水、醇类(例如萜类如甲醇、乙醇、2-丙醇)、亚砜类(例如二甲亚砜、癸甲基亚砜、四癸甲基亚砜)、吡咯烷酮类(例如2-吡咯烷酮、N-甲基-2-吡咯烷酮、N-(2-羟乙基)吡咯烷酮)、月桂氮卓酮、丙酮、二甲基乙酰胺、二甲基甲酰胺、四氢糠醇、L-α-氨基酸、阴离子型、阳离子型、兼性型或非离子型表面活性剂(例如肉豆蔻酸异丙酯和月桂基硫酸钠)、脂肪酸、脂肪醇(例如油酸)、胺类、酰胺类、氯贝酸酰胺(clofibric acid amide)、六亚甲基月桂酰胺(hexamethylene lauramide)、蛋白水解酶、α-没药醇、d-柠檬烯，尿素和N，N-二乙基-m-甲苯酰胺等。其他实例包括湿润剂(例如尿素)、乙二醇(例如丙二醇和聚乙二醇)、甘油单月桂酸酯、烷类、链烷醇类(alkanols)、ORGELASE、碳酸钙、磷酸钙、多种糖类、淀粉、纤维素衍生物、明胶和/或其他聚合物。在一些实施方案中，所述药物组合物会包括一种或多种此类渗透促进剂。

在一些实施方案中，用于局部应用的药物组合物可包括一种或多种抗微生物防腐剂如季铵化合物、有机汞、对羟基苯甲酸酯、芳香醇、三氯叔丁醇(chlorobutanol)等。

可使用包含本发明药剂或药剂组合的经口或直肠递送的溶液、悬液、软膏剂、灌肠剂和/或栓剂。

3.吸入

可使用包含本发明药剂或药剂组合的气雾剂溶液、悬液或干粉。所述气雾剂可经过呼吸系统或鼻道施用。举例而言，本领域技术人员会知道本发明的组合物可悬于或溶解于适当的载体例如药学上可接受的推进剂中，并使用鼻喷剂或吸入剂直接施于肺部。举例而言，可将包含5-HT3受体调节剂的气雾剂配制剂溶解于、悬于或乳化于推进剂或溶剂和推进剂的混合物中，例如以供作为鼻喷剂或吸入剂施用。气雾剂配制剂可含有压力下可接受的推进剂，如化妆品或皮肤学或药学上可接受的推进剂，如本领域中常规使用的。

用于经鼻施用的气雾剂配制剂通常为以滴剂或喷剂的形式设计用于施于鼻道的水溶液。经鼻的溶液可与鼻腔分泌物在一般为等张的并略微缓冲以维持约5.5至约6.5的pH的方面类似，尽管也可使用在该范围之外的pH值。抗微生物剂或防腐剂也可包含于配制剂中。

用于吸入的气雾剂配制剂和吸入剂可设计为使得本发明的药剂和药剂组合当通过经鼻或经口呼吸道途径施用时被带入受试者的呼吸树。吸入溶液可通过例如雾化器施用。包含精细粉末化药物或液体药物的吸入物或吹入物(insufflation)可作为推进剂中药剂或药剂组合的溶液或悬液的药物气雾剂递送至呼吸系统，例如，为了协助支出(disbursement)。推进剂可为液化气体，包括卤代烃(halocarbon)，例如氟代烃(fluorocarbon)如氟代的氯代烃，氢氯氟烃(hydrochlorofluorocarbon)和含氢氯化烃(hydrochlorocarbon)，以及烃类和烃醚(hydrocarbon ether)。

可用于本发明的卤代烃推进剂包括所有的氢由氟取代的氟代烃推进剂，其中所有的氢由氯和至少一个氟取代的氯氟烃推进剂，含有氢的氟代烃推进剂和含有氢的氯氟烃推进剂。卤代烃推进剂描述于Johnson，美国专利号5,376,359，1994年12月27日授予；Byron等，美国专利号5,190,029，1993年3月2日授予；以及Purewal等，美国专利号5,776,434，1998年7月7日授予。可用于本发明的烃推进剂包括，例如丙烷、异丁烷、正丁烷、戊烷、异戊烷和新戊烷。烃类的混合物亦可用作推进剂。醚推进剂包括，例如二甲基醚以及乙醚。本发明的气雾剂配制剂亦可包含多于一种推进剂。举例而言，所述气雾剂配制剂可包含多于一种来自同一类别的推进剂，如两种或更多种氟代烃；或来自不同类别的多于一种，多于两种，多于三种推进剂，如氟代烃和烃。本发明的药物组合物还可配以压缩气体，例如惰性气体如二氧化碳、氧化亚氮或氮气。

气雾剂配制剂还可包含其他组分，例如乙醇、异丙醇、丙二醇，以及表面活性剂或其他组分如油和去污剂。这些组分可负责稳定化所述配制剂和/或润滑瓣膜组分。

可将气雾剂配制剂在压力下包装，并可将其配制为使用溶液、悬液、乳液、散剂和半固体制剂的气雾剂。举例而言，溶液气雾剂配制剂可包含本发明药剂的溶液如(基本上)纯的推进剂中的5-HT3受体调节剂和/或抗组胺药和/或麻醉药，或作为推进剂和溶剂的混合物。所述溶剂可用于溶解所述药剂和/或延缓推进剂的蒸发。可用于本发明的溶剂包括，例如水、乙醇和乙二醇。可使用任何合适溶剂的组合，任选地与防腐剂、抗氧化剂和/或其他气雾剂组分组合。

气雾剂配制剂还可为分散剂或悬液。悬液气雾剂配制剂可包含本发明药剂或药剂组合以及分散剂的悬液，所述药剂例如5-HT3调节剂。可用于本发明的分散剂包括，例如三油酸山梨坦、油醇、油酸、卵磷脂和玉米油。悬液气雾剂配制剂还可包含润滑剂、防腐剂、抗氧化剂和/或其他气雾剂组分。

气雾剂配制剂可类似地配制为乳剂。乳剂气雾剂配制物可包括，例如醇如乙醇，表面活性剂，水和推进剂，以及本发明的药物或药物组合，所述药物例如5-HT3受体调节剂。使用的表面活性剂可为非离子型、阴离子型或阳离子型。乳剂气雾剂配制剂的一个实例包含，例如乙醇，表面活性剂，水和推进剂。乳剂气雾剂配制剂的另一个实例包含，例如植物油，甘油单硬脂酸酯和丙烷。

B.有效剂量

适用于本发明的药物组合物包括其中活性成分以有效量，即以有效于在受试者中取得治疗益处的量存在的组合物。有效于特定应用的实际量取决于受治疗的病状，受试者的情况，配制剂和施用途径，以及其他本领域技术人员已知的因素。鉴于本文中的公开，确定例如5-HT3受体调节剂、麻醉药或抗组胺药的有效量完全属于本领域技术人员的能力范围之内，且可使用常规的优化技术来确定。

用于人的有效量可根据动物模型确定。举例而言，可配制用于人的剂量以取得在动物中发现为有效的循环、肝、局部和/或胃肠道浓度。本领域技术人员可确定供人使用的有效量，特别是鉴于本文中所述的动物模型实验数据。基于动物数据，和其他类型的类似数据，本领域技术人员可确定本发明组合物对人适当的有效量。

当提及本发明的药剂或药剂组合时，有效量一般会意指由任何几种医学或药学领域的调控或咨询组织(例如FDA，AMA)或由生产商或供应商推荐或批准的剂量范围、施用模式、配制剂等等。

在一个实施方案中，提供了用于治疗或预防与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的药物组合物，其包含5-HT3受体调节剂。

在另一个实施方案中，所述5-HT3受体调节剂是昂丹司琼。在另一个实施方案中，在药物组合物剂量中昂丹司琼的量为约1mg、约2mg、约3mg、约4mg、约5mg、约6mg、约7mg、约8mg、约9mg、约10mg、约11mg、约12mg、约13mg、约14mg、约15mg、约16mg、约17mg、约18mg、约19mg或约20mg。在一个实施方案中，在药物组合物的剂量中昂丹司琼的量为约1-20mg，约5-10mg，约8-16mg或约4-8mg。

在另一个实施方案中，剂量形式包含每剂高至1mg、2mg、3mg、4mg、5mg、6mg、7mg、8mg、9mg、10mg、11mg、12mg、13mg、14mg、15mg、16mg、17mg、18mg、19mg或20mg的昂丹司琼，或由或基本上由每剂高至1mg、2mg、3mg、4mg、5mg、6mg、7mg、8mg、9mg、10mg、11mg、12mg、13mg、14mg、15mg、16mg、17mg、18mg、19mg或20mg的昂丹司琼组成。

在另一个实施方案中，方法包含向受试者施用高至1mg、2mg、3mg、4mg、5mg、6mg、7mg、8mg、9mg、10mg、11mg、12mg、13mg、14mg、15mg、16mg、17mg、18mg、19mg或20mg的昂丹司琼，或由或基本上由向受试者施用高至1mg、2mg、3mg、4mg、5mg、6mg、7mg、8mg、9mg、10mg、11mg、12mg、13mg、14mg、15mg、16mg、17mg、18mg、19mg或20mg的昂丹司琼组成。

在另一个实施方案中，所述5-HT3受体调节剂是帕洛诺司琼。在另一个实施方案中，药物组合物剂量中帕洛诺司琼的量为约0.01mg、约0.02mg、约0.03mg、约0.04mg、约0.05mg、约0.06mg、约0.07mg、约0.075mg、约0.8mg、约0.9mg、约0.1mg、约0.2mg、约0.3mg、约0.4mg、约0.5mg、约0.6mg.、约0.7mg、约0.8mg、约0.9mg、约1.0mg、约1.1mg、约1.2mg、约1.3mg、约1.4mg、约1.5mg、约1.6mg、约1.7mg、约1.8mg、约1.9mg或约2.0mg。在另一个实施方案中，药物组合物中帕洛诺司琼的量为约0.01至约0.1mg、0.1至1.0mg、约0.5至1.0mg、约0.5-2.0mg或约1.0至2.0mg。

在另一个实施方案中，剂量形式包含每剂高至0.01mg、0.02mg、0.03mg、0.04mg、0.05mg、0.06mg、0.07mg、0.075mg、0.08mg、0.09mg、0.1mg、0.2mg、0.3mg、0.4mg、0.5mg、0.6mg.、0.7mg、0.8mg、0.9mg、1.0mg、1.1mg、1.2mg、1.3mg、1.4mg、1.5mg、1.6mg、1.7mg、1.8mg、1.9mg或2.0mg的帕洛诺司琼，或由或基本上由每剂高至0.01mg、0.02mg、0.03mg、0.04mg、0.05mg、0.06mg、0.07mg、0.075mg、0.08mg、0.09mg、0.1mg、0.2mg、0.3mg、0.4mg、0.5mg、0.6mg.、0.7mg、0.8mg、0.9mg、1.0mg、1.1mg、1.2mg、1.3mg、1.4mg、1.5mg、1.6mg、1.7mg、1.8mg、1.9mg或2.0mg的帕洛诺司琼组成。

在另一个实施方案中，方法包括向受试者施用高至0.01mg、0.02mg、0.03mg、0.04mg、0.05mg、0.06mg、0.07mg、0.075mg、0.08mg、0.09mg、0.1mg、0.2mg、0.3mg、0.4mg、0.5mg、0.6mg、0.7mg、0.8mg、0.9mg、1.0mg、1.1mg、1.2mg、1.3mg、1.4mg、1.5mg、1.6mg、1.7mg、1.8mg、1.9mg或2.0mg的帕洛诺司琼，或由或基本上由向受试者施用高至0.01mg、0.02mg、0.03mg、0.04mg、0.05mg、0.06mg、0.07mg、0.075mg、0.08mg、0.09mg、0.1mg、0.2mg、0.3mg、0.4mg、0.5mg、0.6mg、0.7mg、0.8mg、0.9mg、1.0mg、1.1mg、1.2mg、1.3mg、1.4mg、1.5mg、1.6mg、1.7mg、1.8mg、1.9mg或2.0mg的帕洛诺司琼组成。

在另一个实施方案中，所述药物组合物进一步包含麻醉药。在一个实施方案中，所述麻醉药是吗啡。在另一个实施方案中，药物组合物的剂量中吗啡的量为约0.1mg、约0.2mg、约0.5mg、约0.75mg、约1mg、约2mg、约3mg、约4mg、约5mg、约6mg、约7mg、约8mg、约9mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约35mg、约40mg、约45mg、约50mg、约55mg或约60mg。在另一个实施方案中，剂量中吗啡的量为约10-20mg/70kg受试者。在另一个实施方案中，剂量中吗啡的量为约5-15mg/70kg受试者。在另一个实施方案中，剂量中吗啡的量为约1-10mg、约5-15mg、约10-20mg、约20-50mg或约2-25mg。

在一个实施方案中，剂量形式包含每剂高至0.1mg、0.2mg、0.5mg、0.75mg、1mg、2mg、3mg、4mg、5mg、6mg、7mg、8mg、9mg、10mg、15mg、20mg、25mg、30mg、35mg、40mg、45mg、50mg、55mg或60mg的吗啡，或由或基本上由每剂高至0.1mg、0.2mg、0.5mg、0.75mg、1mg、2mg、3mg、4mg、5mg、6mg、7mg、8mg、9mg、10mg、15mg、20mg、25mg、30mg、35mg、40mg、45mg、50mg、55mg或60mg的吗啡组成。在另一个实施方案中，在剂量形式中吗啡的量为约10-20mg/70kg受试者。在另一个实施方案中，在剂量形式中吗啡的量为约5-15mg/70kg受试者。在另一个实施方案中，在剂量形式中吗啡的量为约1-10mg、约5-15mg、约10-20mg、约20-50mg或约2-25mg。

在一个实施方案中，方法包括向受试者施用高至0.1mg、0.2mg、0.5mg、0.75mg、1mg、2mg、3mg、4mg、5mg、6mg、7mg、8mg、9mg、10mg、15mg、20mg、25mg、30mg、35mg、40mg、45mg、50mg、55mg或60mg的吗啡，或由或基本上由向受试者施用高至0.1mg、0.2mg、0.5mg、0.75mg、1mg、2mg、3mg、4mg、5mg、6mg、7mg、8mg、9mg、10mg、15mg、20mg、25mg、30mg、35mg、40mg、45mg、50mg、55mg或60mg的吗啡组成。在另一个实施方案中，向受试者施用的吗啡的量为约10-20mg/70kg受试者。在另一个实施方案中，向受试者施用的吗啡的量为约5-15mg/70kg受试者。在另一个实施方案中，向受试者施用的吗啡的量为约1-10mg、约5-15mg、约10-20mg、约20-50mg或约2-25mg。

在另一个实施方案中，所述药物组合物进一步包含抗组胺药。在一个实施方案中，所述抗组胺药是羟嗪(Vistaril)。在另一个实施方案中，药物组合物的剂量中羟嗪的量为约5mg、约7.5mg、约10mg、约12.5mg、约15mg、约17.5mg、约20mg、约22.5mg、约25mg、约27.5mg、约30mg、约32.5mg、约35mg、约37.5mg、约40mg、约42.5mg、约45mg、约47.5mg、约50mg、约52.5mg、约55mg、约57.5mg、约60mg、约65mg、约70mg、约75mg、约80mg、约85mg、约90mg、约95mg、约100mg、约110mg、约120mg、约130mg、约140mg或约150mg。在另一个实施方案中，药物组合物的剂量中羟嗪的量为约10-50mg、约50-100mg或约10-25mg。

在另一个实施方案中，方法包括施用高至5mg、7.5mg、10mg、12.5mg、15mg、17.5mg、20mg、22.5mg、25mg、27.5mg、30mg、32.5mg、35mg、37.5mg、40mg、42.5mg、45mg、47.5mg、50mg、52.5mg、55mg、57.5mg、60mg、65mg、70mg、75mg、80mg、85mg、90mg、95mg、100mg、110mg、120mg、130mg、140mg或150mg的羟嗪，或由或基本上由施用高至5mg、7.5mg、10mg、12.5mg、15mg、17.5mg、20mg、22.5mg、25mg、27.5mg、30mg、32.5mg、35mg、37.5mg、40mg、42.5mg、45mg、47.5mg、50mg、52.5mg、55mg、57.5mg、60mg、65mg、70mg、75mg、80mg、85mg、90mg、95mg、100mg、110mg、120mg、130mg、140mg或150mg的羟嗪组成。在另一个实施方案中，剂量形式包含每剂高至5mg、7.5mg、10mg、12.5mg、15mg、17.5mg、20mg、22.5mg、25mg、27.5mg、30mg、32.5mg、35mg、37.5mg、40mg、42.5mg、45mg、47.5mg、50mg、52.5mg、55mg、57.5mg、60mg、65mg、70mg、75mg、80mg、85mg、90mg、95mg、100mg、110mg、120mg、130mg、140mg或150mg羟嗪，或由或基本上由每剂高至5mg、7.5mg、10mg、12.5mg、15mg、17.5mg、20mg、22.5mg、25mg、27.5mg、30mg、32.5mg、35mg、37.5mg、40mg、42.5mg、45mg、47.5mg、50mg、52.5mg、55mg、57.5mg、60mg、65mg、70mg、75mg、80mg、85mg、90mg、95mg、100mg、110mg、120mg、130mg、140mg或150mg羟嗪组成。

在一个实施方案中，向受试者施用约100mg羟嗪和约0.75mg帕洛诺司琼。在另一个实施方案中，向受试者施用高至200mg羟嗪和高至1.5mg帕洛诺司琼。

在另一个实施方案中，剂量形式具有每剂高至200mg羟嗪和高至1.5mg帕洛诺司琼。在另一个实施方案中，剂量形式具有每剂少于150mg羟嗪和少于1.5mg的帕洛诺司琼。

在另一个实施方案中，剂量形式包含每剂高至1mg、2mg、3mg、4mg、5mg、6mg、7mg、8mg、9mg、10mg、11mg、12mg、13mg，14mg、15mg、16mg、17mg、18mg、19mg或20mg的昂丹司琼和高至0.1mg、0.2mg、0.5mg、0.75mg、1mg、2mg、3mg、4mg、5mg、6mg、7mg、8mg、9mg、10mg、15mg、20mg、25mg、30mg、35mg、40mg、45mg、50mg、55mg或60mg的吗啡，或由或基本上由每剂高至1mg、2mg、3mg、4mg、5mg、6mg、7mg、8mg、9mg、10mg、11mg、12mg、13mg，14mg、15mg、16mg、17mg、18mg、19mg或20mg的昂丹司琼和高至0.1mg、0.2mg、0.5mg、0.75mg、1mg、2mg、3mg、4mg、5mg、6mg、7mg、8mg、9mg、10mg、15mg、20mg、25mg、30mg、35mg、40mg、45mg、50mg、55mg或60mg的吗啡组成。

在另一个实施方案中，剂量形式包含每剂高至0.1mg、0.2mg、0.5mg、0.75mg、1mg、2mg、3mg、4mg、5mg、6mg、7mg、8mg、9mg、10mg、15mg、20mg、25mg、30mg、35mg、40mg、45mg、50mg、55mg或60mg的吗啡和每剂高至0.01mg、0.02mg、0.03mg、0.04mg、0.05mg、0.06mg、0.07mg、0.075mg、0.08mg、0.09mg、0.1mg、0.2mg、0.3mg、0.4mg、0.5mg、0.6mg.、0.7mg、0.8mg、0.9mg、1.0mg、1.1mg、1.2mg、1.3mg、1.4mg、1.5mg、1.6mg、1.7mg、1.8mg、1.9mg或2.0mg的帕洛诺司琼，或由或基本上由包含每剂高至0.1mg、0.2mg、0.5mg、0.75mg、1mg、2mg、3mg、4mg、5mg、6mg、7mg、8mg、9mg、10mg、15mg、20mg、25mg、30mg、35mg、40mg、45mg、50mg、55mg或60mg的吗啡和每剂高至0.01mg、0.02mg、0.03mg、0.04mg、0.05mg、0.06mg、0.07mg、0.075mg、0.08mg、0.09mg、0.1mg、0.2mg、0.3mg、0.4mg、0.5mg、0.6mg.、0.7mg、0.8mg、0.9mg、1.0mg、1.1mg、1.2mg、1.3mg、1.4mg、1.5mg、1.6mg、1.7mg、1.8mg、1.9mg或2.0mg的帕洛诺司琼组成。

在另一个实施方案中，剂量形式包含每剂高至0.1mg、0.2mg、0.5mg、0.75mg、1mg、2mg、3mg、4mg、5mg、6mg、7mg、8mg、9mg、10mg、15mg、20mg、25mg、30mg、35mg、40mg、45mg、50mg、55mg或60mg的吗啡，每剂高至0.01mg、0.02mg、0.03mg、0.04mg、0.05mg、0.06mg、0.07mg、0.075mg、0.08mg、0.09mg、0.1mg、0.2mg、0.3mg、0.4mg、0.5mg、0.6mg.、0.7mg、0.8mg、0.9mg、1.0mg、1.1mg、1.2mg、1.3mg、1.4mg、1.5mg、1.6mg、1.7mg、1.8mg、1.9mg或2.0mg的帕洛诺司琼和每剂高至5mg、7.5mg、10mg、12.5mg、15mg、17.5mg、20mg、22.5mg、25mg、27.5mg、30mg、32.5mg、35mg、37.5mg、40mg、42.5mg、45mg、47.5mg、50mg、52.5mg、55mg、57.5mg、60mg、65mg、70mg、75mg、80mg、85mg、90mg、95mg、100mg、110mg、120mg、130mg、140mg或150mg的羟嗪，或由或基本上由每剂高至0.1mg、0.2mg、0.5mg、0.75mg、1mg、2mg、3mg、4mg、5mg、6mg、7mg、8mg、9mg、10mg、15mg、20mg、25mg、30mg、35mg、40mg、45mg、50mg、55mg或60mg的吗啡，每剂高至0.01mg、0.02mg、0.03mg、0.04mg、0.05mg、0.06mg、0.07mg、0.075mg、0.08mg、0.09mg、0.1mg、0.2mg、0.3mg、0.4mg、0.5mg、0.6mg.、0.7mg、0.8mg、0.9mg、1.0mg、1.1mg、1.2mg、1.3mg、1.4mg、1.5mg、1.6mg、1.7mg、1.8mg、1.9mg或2.0mg的帕洛诺司琼和每剂高至5mg、7.5mg、10mg、12.5mg、15mg、17.5mg、20mg、22.5mg、25mg、27.5mg、30mg、32.5mg、35mg、37.5mg、40mg、42.5mg、45mg、47.5mg、50mg、52.5mg、55mg、57.5mg、60mg、65mg、70mg、75mg、80mg、85mg、90mg、95mg、100mg、110mg、120mg、130mg、140mg或150mg的羟嗪组成。

在另一个实施方案中，提供了预防或治疗生理依赖性和/或停药症状的方法，其包括向受试者施用高至0.01mg、0.02mg、0.03mg、0.04mg、0.05mg、0.06mg、0.07mg、0.075mg、0.08mg、0.09mg、0.1mg、0.2mg、0.3mg、0.4mg、0.5mg、0.6mg.、0.7mg、0.8mg、0.9mg、1.0mg、1.1mg、1.2mg、1.3mg、1.4mg、1.5mg、1.6mg、1.7mg、1.8mg、1.9mg或2.0mg的帕洛诺司琼和高至5mg、7.5mg、10mg、12.5mg、15mg、17.5mg、20mg、22.5mg、25mg、27.5mg、30mg、32.5mg、35mg、37.5mg、40mg、42.5mg、45mg、47.5mg、50mg、52.5mg、55mg、57.5mg、60mg、65mg、70mg、75mg、80mg、85mg、90mg、95mg、100mg、110mg、120mg、130mg、140mg或150mg的羟嗪，或由或基本上由向受试者施用高至0.01mg、0.02mg、0.03mg、0.04mg、0.05mg、0.06mg、0.07mg、0.075mg、0.08mg、0.09mg、0.1mg、0.2mg、0.3mg、0.4mg、0.5mg、0.6mg.、0.7mg、0.8mg、0.9mg、1.0mg、1.1mg、1.2mg、1.3mg、1.4mg、1.5mg、1.6mg、1.7mg、1.8mg、1.9mg或2.0mg的帕洛诺司琼和高至5mg、7.5mg、10mg、12.5mg、15mg、17.5mg、20mg、22.5mg、25mg、27.5mg、30mg、32.5mg、35mg、37.5mg、40mg、42.5mg、45mg、47.5mg、50mg、52.5mg、55mg、57.5mg、60mg、65mg、70mg、75mg、80mg、85mg、90mg、95mg、100mg、110mg、120mg、130mg、140mg或150mg的羟嗪组成。

此外，对于5-HT3受体调节剂适当的剂量可基于体外实验结果来确定。举例而言，调节5-HT3受体的药剂的体外效力提供了可用于开发取得类似的生物学作用的有效体内剂量的信息。

C.施用设定和日程

在一些实施方案中，本发明药剂的施用可为间歇性的，例如每两日一次、每三日一次、每五日一次、每周一次、每月一至两次等。在一些实施方案中，其量、其形式和/或不同形式的量可在施用不同时间有所变化。

在一些实施方案中，可将一种或多种减少与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状在麻醉药之前向受试者施用。所述一种或多种药剂可在麻醉药施用之前至少1、5、15、30、45或60分钟施用。所述药剂可在施用麻醉药之前至少2、3、4、5、6、12或24小时施用。在一个实施方案中，所述一种或多种药剂包括5-HT3受体调节剂。在另一个实施方案中，所述5-HT3受体调节剂是5-HT3受体拮抗剂。在一个实施方案中，所述5-HT3拮抗剂是昂丹司琼和帕洛诺司琼。在另一个实施方案中，所述一种或多种药剂包含5-HT3受体调节剂和第二止吐药。在另一个实施方案中，所述第二止吐药为抗组胺药。在另一个实施方案中，所述抗组胺药是羟嗪。

在一些实施方案中，可将一种或多种减少与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状在麻醉药之后向受试者施用。所述一种或多种药剂可在向受试者施用麻醉药之后至少1、5、15、30、45或60分钟施用。所述一种或多种药剂可在向受试者施用麻醉药之后至少2、3、4、5、6、12或24小时施用。所述药剂可在已经向受试者施用至少1、2、3、4或5剂量的麻醉药之后向所述受试者施用。在一个实施方案中，所述一种或多种药剂包括5-HT3受体调节剂。在另一个实施方案中，所述5-HT3受体调节剂是5-HT3受体拮抗剂。在一个实施方案中，所述5-HT3拮抗剂是昂丹司琼和帕洛诺司琼。在另一个实施方案中，所述一种或多种药剂包含5-HT3受体调节剂和第二止吐药。在另一个实施方案中，所述第二止吐药为抗组胺药。在另一个实施方案中，所述抗组胺药是羟嗪。

在一些实施方案中，可将一种或多种减少与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂与麻醉药同时向受试者施用(共同施用)。所述麻醉药和所述一种或多种药剂可在同一配制剂中。所述麻醉药和所述一种或多种药剂可在不同配制剂中。所述麻醉药和所述一种或多种药剂可通过相同途径向受试者施用。所述麻醉药和所述一种或多种药剂可通过不同途径向受试者施用。在一个实施方案中，所述一种或多种药剂包括5-HT3受体调节剂。在另一个实施方案中，所述5-HT3受体调节剂是5-HT3受体拮抗剂。在一个实施方案中，所述5-HT3拮抗剂是昂丹司琼和帕洛诺司琼。在另一个实施方案中，所述一种或多种药剂包含5-HT3受体调节剂和第二止吐药。在另一个实施方案中，所述第二止吐药为抗组胺药。在另一个实施方案中，所述抗组胺药是羟嗪。

在一些实施方案中，可将一种或多种减少与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂在向受试者施用阿片样物质拮抗剂之前向受试者施用。所述一种或多种药剂可在向受试者施用阿片样物质拮抗剂之前至少1、5、15、30、45或60分钟施用。所述一种或多种药剂可在施用麻醉药之前至少2、3、4、5、6、12或24小时施用。在一个实施方案中，所述一种或多种药剂包括5-HT3受体调节剂。在另一个实施方案中，所述5-HT3受体调节剂是5-HT3受体拮抗剂。在一个实施方案中，所述5-HT3拮抗剂是昂丹司琼或帕洛诺司琼。在另一个实施方案中，所述一种或多种药剂包含5-HT3受体调节剂和第二止吐药。在另一个实施方案中，所述第二止吐药为抗组胺药。在另一个实施方案中，所述抗组胺药是羟嗪。

在一个实施方案中，本发明的药剂包括例如止吐药、5-HT3受体拮抗剂或抗组胺药的有效血浆浓度可在向受试者施用之后约1分钟(min.)、约2min.、约3min.、约4min.、约5min.、约6min.、约7min.、约8min.、约9min.、约10min.、约11min.、约12min.、约13min.、约14min.、约15min.、约16min.、约17min.、约18min.、约19min.或约20分钟达到。

所述药剂可为调节5-HT3受体的药剂。所述药剂可为5-HT3受体拮抗剂。可将所述药剂和/或麻醉药在医疗环境下例如诊所、医院等向受试者施用。所述药剂和/或麻醉药可由保健提供者如医师、护士等向受试者施用。

实施例

实施例1

HTR3A内的遗传变异影响吗啡依赖性

通过在4日期间的施用使十八个近交品系对吗啡，一种原型的阿片样物质麻醉药产生生理依赖性。然后，测量了通过将阿片样物质受体拮抗剂(纳洛酮)施于具有依赖性的小鼠骤致的跳跃行为。在停药诱导的跳跃行为方面有很大的品系间差异；在纳洛酮施用之后，在15分钟期间SM/J小鼠平均仅一次跳跃，而BUB/BnJ小鼠在相同条件下跳跃超过100次(图1)。其他研究者(Kest，B.等，Pharmacol Biochem Behav，2002.73(4)：p.821-828)通过类似方法衡量了这些品系中的八种，而对这8个常见品系的数据的对比性的Pearson相关分析表明两个研究产生类似的结果(系数为0.87，p＝0.05)。

使用基于单元型的计算遗传作图来分析来自我们的研究的数据(Wang，J.等，Trends Genet，2005.21(9)：p.526-32；Liao，G.等，Science，2004.306(5696)：p.690-695)。将纳洛酮诱导的停药行为的分布与所分析的18个品系之间遗传变异的样式进行了比较。有趣的是，两个最高相关性的单元型区段(p-值＜5x10-6)在染色体9上相当接近，并对应于Htr3a基因的5’和3’区(图1和图2)。有七个单元型区段覆盖该基因，虽然依赖性相关区段占据了多数SNP。剩下的小的非相关区段位于第二和第四外显子之间。在相关区段中的SNP均未改变该蛋白的预期氨基酸序列。该基因编码5-HT3a受体，其在调节恶心、焦虑和疼痛中具有充分确立的作用(Costall，B.and R.J.Naylor，Curr Drug Targets CNSNeurol Disord，2004.3(1)：p.27-37)。尽管更为推测性的，还假定该受体亦可影响阿片样物质耐受性和依赖性(Roychoudhury，M.and S.K.Kulkarni，MethodsFindExp Clin Pharmacol，1996.18(10)：p.677-83)。

图1显示了对吗啡的生理依赖性的品系间差异的计算遗传分析。图1A显示将十八个品系(每个品系8只小鼠)用吗啡处理四日以建立生理依赖性。在第五日，将纳洛酮注射之后的15分钟期间之内发生的跳跃数作为阿片样物质依赖性程度的指标进行测量。数据代表对于每个所示品系的平均跳跃数+/-SEM(图1B)。通过计算遗传作图分析吗啡生理依赖性数据(对于每个品系的平均跳跃数)。显示了十个具有最强相关性的单元型区段。对于每个区段，列出了其染色体位置、区段之内的SNP数和其基因符号。对于每个基因，单元型通过着色的区段代表，且区段与表型数据以相同的等级次序表示。分享相同单元型的品系具有相同的着色区段。计算出的p-值测量分组于一个区段之内的品系由于偶然(random chance)而与表型数据具有相同的相关程度的可能性。该遗传效应表明了潜在地可归于单元型的品系间变异的部分。

图2显示了Htr3a基因和相关单元型区段的概略图。图2A图示展示了Htr3a基因的内含子/外显子结构及两个相关的单元型区段的相对位置。其基因相关性样式与纳洛酮骤致的跳跃应答的严重性最相关的两个单元型区段位于Htr3a基因的5’和3’区。这些单元型区段的每一个具有3个不同的单元型，且这两个区段之内的86个SNP均未改变5-HT3a受体的预期的氨基酸序列。(http://mouseSNP.roche.com)。图2B显示在Htr3a基因中有7个单元型区段。两个主要区段为与依赖性相关的3’和5’区段，每个分别具有76个和10个SNP；覆盖Htr3a基因的大部分。其他五个小区段(未在图中显示)在所述5’和3’区段之间(外显子2和4之间)，并一共含有15个SNP。所述5’和3’区段，其显示与对吗啡的生理依赖性最高的相关性，在用于我们的研究的18个品系的小鼠中具有相同的遗传变异样式。

该实施例的实验细节可见于实施例9。

实施例2

5-HT3受体拮抗剂(昂丹司琼)减少纳洛酮骤致的停药行为

为了确定5-HT3受体功能是否影响阿片样物质停药，评价了选择性5-HT3受体拮抗剂(昂丹司琼)对与停药相关的跳跃的作用。在测量纳洛酮诱导的跳跃之前的昂丹司琼施用显著地在吗啡依赖性C57BL/6J小鼠中以剂量依赖性方式减少了该应答(图3A)。此外，将昂丹司琼与每一剂吗啡在供确立依赖性的4日实验方案中的同时施用减弱了纳洛酮骤致的停药应答(图3B)。后一个作用不太可能是由于在依赖性测量时点的残余昂丹司琼的存在，因为当骤然施用时，1mg/kg的剂量无法有效的抑制停药，而在最后一剂昂丹司琼和纳洛酮骤致的停药步骤之间大约已经经过了5个药物半衰期的时间。接下来研究了在CNS之内表达的5-HT3受体能否改变停药的严重性。在这些实验中，在将纳洛酮施于吗啡依赖性C57BL6小鼠之前，用昂丹司琼(或盐水)进行脑室内(i.c.v.)注射。昂丹司琼的脑室内施用以剂量依赖性方式深刻地阻断了纳洛酮骤致的跳跃行为(图3C)。

图3说明选择性5-HT3受体拮抗剂(昂丹司琼)的施用减少纳洛酮骤致的停药行为。对于图3A，用吗啡在四日期间处理小鼠(C57BL/6J)，然后将其在第五日用盐水或所示剂量的昂丹司琼处理，之后评价纳洛酮骤致的跳跃行为。昂丹司琼处理诱导了跳跃行为统计学上显著的且为剂量依赖性的减少。对于图3B，在所述四日建立依赖性的实验方案中每次每两日一次的吗啡注射时用盐水或昂丹司琼(1mg/kg)处理小鼠(C57BL/6J)。在最后一个剂量之后十八小时，评价纳洛酮骤致的跳跃行为。对于图3C，在评价纳洛酮骤致的跳跃行为之前将小鼠(C57BL/6J)用盐水或所示剂量的昂丹司琼进行脑室内(i.c.v.)处理。昂丹司琼处理诱导跳跃行为统计学上显著的且为剂量依赖性的减少。对于所有实验每组使用6-8只小鼠。数据表示为平均值+/-SEM。*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001。

对于该实施例，实验细节可见于实施例9。

实施例3

昂丹司琼处理减少吗啡依赖性相关的痛觉过敏

在慢性暴露于阿片样物质之后见于人和小鼠的自发性痛觉过敏，称作阿片样物质诱导的痛觉过敏(Angst，M.S.和J.D.Clark，Anesthesiology，2006.104(3)：p.570-587)，是生理依赖性的另一种量度(Chu，L.F等，JPain，2006.7(1)：p.43-48；Kayan，S.等，J Pharmacol Exp Ther，1971.177(3)：p.509-513；VonVoigtlander，P.F.和R.A.Lewis，J Pharmacol Methods，1983.10(4)：p.277-282)。在本实验中，慢性吗啡处理导致C57BL/6J小鼠中的痛觉过敏。对于机械刺激的致敏导致了强烈程度的致敏(Liang，D.Y.等，Anesthesiology，2006.104(5)：1054-1062)。昂丹司琼施用在未经吗啡处理的对照小鼠中对疼痛敏感性无作用，但是逆转了在吗啡戒瘾中发生的痛觉过敏(图4)。综上所述，通过两种不同量度这些实验说明5-HT3受体拮抗剂显著减少了对吗啡生理依赖性的严重性。

图4说明昂丹司琼处理减少了吗啡依赖性相关的痛觉过敏。在四日期间在对吗啡产生依赖性的小鼠中衡量了选择性5-HT3拮抗剂昂丹司琼的作用。作为对吗啡的生理依赖性的量度，在最后一剂吗啡的施用之后18小时测量了机械伤害性疼痛致敏，此时为最大伤害性疼痛致敏的时点。在阈值评价之前30分钟将小鼠用盐水(对照)或所示剂量的昂丹司琼处理。昂丹司琼剂量依赖性地逆转了由吗啡停药造成的机械伤害性疼痛致敏(mechanical nociceptivesensitization)，但并未改变对照动物中基线伤害性疼痛的阈值，甚至在施用了高于有效逆转痛觉过敏的昂丹司琼剂量时亦如此。在这些实验中使用每组六只小鼠，而数据表示为平均值+/-SEM。**p＜0.01。

该实施例的实验细节可见于实施例9。

实施例4

昂丹司琼阻断与吗啡施用相关的条件性位置偏好

由于针对5-HT3阻断和减少生理依赖性体征的阳性发现，将测试延伸至通过使用条件性位置偏好(CPP)来探测阿片样物质施用的加强性质(reinforcing property)的方案(paradigm)。施以5mg/kg吗啡并在注射之后25分钟置于条件化室(conditioning chamber)的小鼠组具有的条件化之前和之后花费在与药物相关的室中的时间的百分比的平均差异为百分之21.29(95％ CI：16.82至25.75；p＜0.001)。除了5mg/kg吗啡之外还接受1mg/kg昂丹司琼的小鼠组显示平均差异为百分之0.40(95％CI：-9.666至10.47；p＝0.93)(图5)。因此昂丹司琼完全阻断了与吗啡施用相关的位置偏好。

图5说明昂丹司琼阻断了与吗啡施用相关的条件性位置偏好。在该图中，显示了在条件性位置偏好评价中条件化之前和之后在指定的与药物相关的室中花费的时间百分比平均值。使用了三组小鼠：媒介(n＝15)；5mg/kg吗啡(n＝14)；1mg/kg昂丹司琼和5mg/kg吗啡(n＝10)。***p＜0.001。

该实施例的实验细节可见于实施例9。

实施例5

吗啡处理对HTR3A mRNA表达具有差示性和脑区特异性作用

慢性吗啡暴露减少关键脑干核区(brainstem nuclei)内的Htr3a mRNA表达。脑室内注射实验说明昂丹司琼通过在CNS中起作用调节纳洛酮诱导的跳跃。此外，在任一Ht3a相关单元型区段中的所有SNP均未改变其预期的氨基酸序列。许多SNP位于3’和5’调节区内，表明其可改变mRNA转录或稳定性。因此，CNS Htr3a mRNA表达的差异可导致在纳洛酮骤致的停药的严重性方面的品系间差异。为了研究该可能性，衡量了进行或不进行慢性吗啡处理时在几个脑区中Htr3a mRNA的表达。测量是对具有不同Htr3a单元型、具有高(C57BL/6J)或低(129/SvlmJ)吗啡依赖性的品系进行的。慢性吗啡处理诱导Htr3a表达的品系和脑区特异性变化(图6)；C57BL/6J品系在皮质和脑干组织中展示了Htr3a mRNA更剧烈的减少，而129/SvlmJ品系展示了在小脑中更大的减少。在两个品系中均观察到脊髓Htr3a表达大约相同的变化。

亦研究了慢性吗啡暴露是否会在之前发现与对阿片样物质的生理依赖性相关的特定脑干核区之内改变Htr3a mRNA水平。杏仁核(Costall，B.等，Pharmacol Biochem Behav，1990.36(1)：p.97-104；Gulati，A.和H.N.Bhargava，Eur J Pharmacol，1989.167(2)：p.185-192)、中缝背核(dorsal raphe)(Costall，B.等，Pharmacol Biochem Behav，1990.36(1)：p.97-104；Tao，R.，Z.Ma，和S.B.Auerbach，J Pharmacol Exp Ther，1998.286(1)：p.481-488)和导水管周围灰质(Ingram，S.L.等，J Neurosci，1998.18(24)：p.10269-10276)为已知调节阿片样物质依赖性和停药的体征的脑干核区。将来自这三个脑干区的组织从发生依赖性的C57BL/6J小鼠通过激光捕获显微解剖收获。在慢性吗啡处理之后所有三个这些脑干核区中的Htr3a mRNA表达显著减少(2至5倍)(图6)。因此，与计算预测一致，在慢性吗啡暴露对CNS Htr3a mRNA表达的作用中存在品系特异性差异，而慢性吗啡暴露在3个与阿片样物质依赖性相关的脑干核区中减少了Htr3a mRNA。

图6说明吗啡处理对Htr3a mRNA表达具有差示性和脑区特异性作用。对于图6A，将具有高(C57BL/6J)或低(129Svlm/J)倾向发生吗啡依赖性的小鼠暴露于盐水或吗啡四日。在第五日处死小鼠，解剖所示的脑区，并使用实时qPCR测量Htr3a mRNA表达水平。数据表示为来自对至少每组6只小鼠进行的重复测量的平均值+/-SEM。图6B说明吗啡在选定的脑干核区中诱导Ht3amRNA表达的变化。如上所述用盐水或吗啡处理小鼠(C57BL/6J)。然后将小鼠处死，通过激光捕获显微解剖分离所示的脑干核区，并分析脑干核区中Ht3amRNA的表达。将吗啡处理的小鼠中Htr3a mRNA水平相对于盐水处理的动物中的水平标准化。数据显示为对于来自每组n＝6只小鼠的组织的标准化平均值+/-SEM。**p＜0.01。

该实施例的实验细节可见于实施例9。

实施例6

吗啡对几种基因CNS表达的调节

几种其他基因的表达水平作为特异性对照在C57BL/6J和129SvlmJ小鼠中进行了测量。在这两种品系之间在慢性吗啡处理之后Kcnj6、C3ar1、C5ar1或Htr3b mRNA的脑表达水平并无品系间差异。图7。重要的是，Htr3b基因位于染色体9上Htr3a的邻接位置，并编码形成异多聚性5-HT3受体的蛋白，其与Htr3a同多聚体在生物物理性质上有所不同(Brady，C.A.等，Neuropharmacology，2001.41(2)：p.282-284)。

图7说明吗啡对几种基因CNS表达的调节。对于发生高(C57Bl/6J)和低(129/SvlmJ)依赖性的品系进行盐水对比吗啡处理四日之后收获脑组织。在该基因调查中，仅编码5-HT3 5-羟色胺受体的Htr3a基因表达受阿片样物质调节(p＜0.05)。重要的是，编码5-HT3受体替代形式的邻接的Htr3b基因的表达不受吗啡处理改变。在这些实验中使用每组五只小鼠，且显示的数据表示为平均值+/-SEM。*p＜0.05(品系间差异)。

该实施例的实验细节可见于实施例9。

实施例7

吗啡对脑干5-HT3蛋白水平的调节

慢性吗啡暴露减少5-HT3蛋白表达。进行了Western印迹分析以确定5-HT3蛋白的变化是否继发于观察到的Htr3a mRNA的变化。该分析显示来自C57BL/6J小鼠脑干的蛋白制备物的5-HT3含量在吗啡处理之后具有统计学上显著的减少，而此类变化未在从129/SvlmJ小鼠制备的制备物中观察到(图8)。

图8显示吗啡对脑干5-HT3蛋白水平的调节。对于发生高(C57Bl/6J)和低(129/SvlmJ)依赖性的品系进行了盐水对比吗啡处理四日之后收获脑组织。仅在来自C57Bl/6J品系的组织中表现了吗啡诱导的5-HT3变化。在这些实验中使用每组五只小鼠，且所显示的数据表示为平均值+/-SEM。将平均对照小鼠表达设为1。***p＜0.001(对照与吗啡处理组之间的差异)。

该实施例的实验细节可见于实施例9。

实施例8

昂丹司琼预处理对人受试者中急性、纳洛酮骤致的停药应答的作用

用昂丹司琼的预处理减少了人中阿片样物质停药的体征。基于鼠类结果，在人受试者中使用供诱导阿片样物质停药的实验方案测试了5-HT3受体拮抗剂昂丹司琼的效力(Compton，P.等，Pharmacol Biochem Behav，2004.77(2)：p.263-268)。对八名健康的男性志愿者进行用安慰剂或昂丹司琼(8mg)的预处理，然后在静脉内施用吗啡并随后进行纳洛酮骤致的停药。使用充分确立的阿片样物质停药的客观性(客观性阿片样物质停药量表或OOWS，主要结果)和主观性(主观性阿片样物质停药量表或SOWS)量度评价预处理药物的作用(Handelsman，L.等，Am J Drug Alcohol Abuse，1987.13(3)：p.293-308)。昂丹司琼预处理引起了高度(substantial)(76.4％±22.6)和统计学上显著(p＝0.0313)的平均OOWS评分的减少(图9)。8名受试者中的七名发生了阿片样物质停药的客观体征，而昂丹司琼预处理在所有七名受影响的个体中减少了这些体征。OOWS评分是十三个生理学上可观察的体征的复合量度。志愿者表现出了13个测量的体征中的12个，而昂丹司琼预处理减少所有12个这些单个体征，表明广谱作用(图9)。与之相对，主观症状(SOWS)仅有非常小的平均值减少，并未达到统计学显著性(4.1％±62.5，p＞0.05，图10)。

图9显示昂丹司琼预处理在人受试者中对急性、纳洛酮骤致的停药应答的作用。在8个受试者中静脉内(IV)施用吗啡(10mg/70kg)之前30分钟静脉内(IV)施用8mg昂丹司琼或安慰剂(正常盐水)。然后在吗啡施用之后120分钟诱导纳洛酮(10mg/70kg)骤致的停药。在图9A中，显示了盐水或昂丹司琼预处理之后对于每个受试者在纳洛酮骤致的阿片样物质停药之后的复合OOWS评分。基于用昂丹司琼和安慰剂预处理之后OOWS评分中的差异的符号秩检验计算出p-值＝0.0313。在图9B中，显示了对昂丹司琼预处理的OOWS亚分类应答。OOWS量表由十三个生理学上可观察的体征组成，其在观察期间评为存在(1)或不存在(0)。显示了昂丹司琼或安慰剂预处理之后遭受每种所示的纳洛酮骤致的停药体征的志愿者的百分比。

图10显示了昂丹司琼预处理对人受试者中急性、纳洛酮骤致的主观阿片停药量表(SOWS)应答的作用。在8个受试者中静脉内施用吗啡(10mg/70kg)之前30分钟静脉内施用8mg昂丹司琼或安慰剂(生理盐水)。然后在吗啡施用之后120分钟诱导纳洛酮(10mg/70kg)骤致的阿片样物质停药。在图10A中，显示了对于每个接受盐水或昂丹司琼预处理的受试者在纳洛酮骤致的阿片样物质停药之后的复合SOWS评分。基于用昂丹司琼和安慰剂预处理之后SOWS评分中的差异的符号秩检验计算出p-值＝0.5625。在图10B中，显示了在人中对昂丹司琼预处理的SOWS亚分类应答。SOWS评分由以0至4的尺度(0＝完全没有，1＝略微，2＝中等，3＝较多，4＝极多)评级的十六个主观症状组成，基于受试者在测试时点的体验。显示了昂丹司琼或安慰剂预处理之后遭受每种所示的纳洛酮骤致的停药症状的志愿者的评分平均值。

该实施例的实验细节可见于实施例9。

实施例9

实施例1-8的实验细节

动物

所有动物实验是使用经Institutional Animal Care and Use Committee批准的实验方案进行的。与Guide for the Care and Use of Laboratory Animals一同编纂的实验方案可通过National Academy of Sciences获得。

来自近交小鼠品系的雄性小鼠(129/SvlmJ、A/HeJ、A/J、AKR/J、B10.D2-H2/oSNJ、BALB/cByJ、BALB/cJ、BUB/BnJ、C3H/HeJ、C57BL/6J、DBA/2J、FVB/NJ、LP/J、LG/J、MRL/MpJ、NZB/BinJ、NZW/LaCJ、SM/J)是从Jackson Labs(Bar Harbor，ME)在7-8周龄获得的，并在动物护理设施中栖息10日以供用于实验之前的顺应。将小鼠维持在无病原体的条件下，并向其任意提供食物和水，并给予12:12h光:暗周期。

行为测定

吗啡处理：在基线伤害性疼痛测试之后，将吗啡(Sigma Chemical，St.Louis，MO)在50-100μl体积的0.9％ NaCl中在第1日每日两次10mg/kg，在第2-3日20mg/kg，而在第4日每日两次40mg/kg皮下施于小鼠，其类似于之前用于生成阿片样物质诱导的痛觉过敏(OIH)、耐受和依赖性的实验方案(Liang，D.Y.等Pain，2006.121(3)：p.232-240；Liang，D.Y.等，Pharmacogenet Genomics，2006.16(11)：p.825-835.Liang，D.Y.等，Anesthesiology，2006.104(5)：p.1054-1062)。

骤致的停药：对于依赖性的确定，在最后一剂吗啡之后18小时评价小鼠，此时自发性依赖性相关痛觉过敏为最大(Lin，R.J.等，Oncogene，2001.20(49)：p.7204-7215)。将50μl NaCl中的10mg/kg纳洛酮(Sigma Chemical)如前所述进行皮下(s.c.)注射(Kest，B.等，Pharmacol Biochem Behav，2002.73(4)：p.821-828；Liang，D.Y.等，Pain，2006.121(3)：p.232-240)。在纳洛酮施用之后，将小鼠置于透明塑料筒(直径10cm，高40cm)中，并对之后的15分钟内跳跃次数进行计数。纳洛酮骤致的跳跃行为是在近交小鼠品系中观察到的反映对阿片样物质的生理依赖性的强烈应答(Kest，B.等，Neuroscience 2002.115(2)：463-469)。

在一些实验中，施用了选择性5-HT3拮抗剂昂丹司琼(Sigma)。对于系统性施用，将100μl体积的0.9％ NaCl中的昂丹司琼皮下注射于一些组的小鼠。该药物或者以1mg/kg的剂量在慢性施用方案过程中与每一剂吗啡一同给予，或者在依赖性或伤害性疼痛测试之前30分钟以多种剂量给予一次。对于脑室内注射施用，将小鼠用吸入的异氟烷短暂麻醉。使用之前描述的方法(Pedigo，N.W.等J Pharmacol Exp Ther，1975.193(3)：p.845-852)使用30规格1/2英寸针头(30 gauge 1/2 inch needle)穿刺颅骨并进入脑室。一旦插入，将5μl注射液(injectate)使用微注射器缓慢施用，并在注射之后20分钟之内使用该动物。

阿片样物质依赖性相关痛觉过敏：机械异常性疼痛是使用尼龙von Frey细丝依照Chaplan等(Chaplan，S.R.等，J Neurosci Methods，1994.53(1)：p.55-63)所描述的“上下(up-down)”算法如前所述(Liang，D.Y.等，Anesthesiology，2006.104(5)：p.1054-1062；Li，X等，Brain Res Mol Brain Res，2001.86(1-2)：p.56-62)进行测定的。在这些实验中，将小鼠置于透明圆柱形塑料筒中的线网平台之上。在顺应15分钟之后，将刚度顺次渐增的纤维施于一只后爪的跖面，向上按压以导致纤维的略微弯曲，并保持该位置5秒钟。从该纤维收回后爪算作应答。当未获得应答时，将系列中下一个最具刚度的纤维施于同一只爪。如果获得应答，则施以具有较小刚度的纤维。如此方式继续测试直至在第一根导致收回应答的纤维之后施用了4根纤维，从而允许对机械收回阈值进行估计(Poree，L.R.等，Anesth Analg，1998.87(4)：p.941-948)。该数据拟合算法允许使用参数统计以供分析。该测定法对于检测低至0.02g的机械阈值足够敏感(Liang，D.Y.等，Anesthesiology，2006.104(5)：p.1054-1062)。

条件性位置偏好(CPP)：为了评价对吗啡依赖性的易患性，以及昂丹司琼对此种依赖性的后续作用，采用了反平衡(counter balanced)条件性位置偏好(CPP)方案(Bardo，M.T.等Neurosci Biobehav Rev 1995.19(1)：39-51；Reid，L.D.等Pharmacol Biochem Behav 1989.33(4)：765-775)。CPP实验是使用PlacePreference System(MED Associates Inc.，St.Albans，VT)进行的，其由三个室组成：供主动关联(active association)的两个外侧的室和一个中间的中立室。一个关联室是由白色不透明塑料壁与金属棒制成的底部构成的，而另一个室是由黑色不透明塑料壁与金属网底部组成的。较小的中间中立室是由灰色不透明的塑料壁和底部组成的。较小的中间中立室是由灰色不透明的塑料壁和底部组成的。实验是在具有均一光照(～20勒克斯)的暗淡照明的房间中进行的。位置偏好装置配置有运动光感器(motion photo-sensor)，并通过执行MED PC软件(MED Associates Inc，VT)的计算机记录数据。在所有实验中使用C57B1/6J小鼠(8至12周龄)，将其在光期间的后半部分(13:00-18:00小时)期间取出。在第0日，使小鼠顺应测试室，并记录其在每个室中花费的时间(条件化前报道)。排除任何在任一关联室中花费多于75％时间的小鼠。在翌日，将每只小鼠随机分至对照或药物组，并以反平衡方式分配至白色或黑色关联室(每组n＝10-15)。在第1、3和5日，药物组接受腹膜内(i.p.)注射药物：媒介(0.9％盐水)，5mg/kg吗啡或1mg/kg昂丹司琼加上5mg/kg吗啡(分别注射)。在注射之后二十五分钟，将每只小鼠置于其分配的关联室25分钟，阻止其进入另一个室。在第2、4和6日，小鼠接受盐水注射，并在25分钟之后置于相反的室。在第7日，将小鼠置于位置偏好装置的中间的中立室，允许其自由进入另外两个室，并评价其在每个室所花费的时间长度(条件化后报道)。相对于在两个关联室中花费的总时间计算在每个关联室花费的时间的百分比。

基于单元型的计算遗传作图

对表型数据基于单元型的计算遗传分析是如前所述进行的(Wang，J.等，Trends Genet，2005.21(9)：p.526-532；Liang，D.Y.等，Anesthesiology，2006.104(5)：p.1054-1062；Guo，Y.等，Nat Biotechnol，2006.24(5)：p.531-536；Liang，D.Y.等，Behav Brain Res，2007.181(1)：p.118-126)。近来已经将该技术用于鉴定与多种不同的鼠类表型性状包括阿片样物质麻醉药药物应答相关的基因(Liang，D.Y.等，.Pain，2006.121(3)：p.232-240；Liang，D.Y.等，PharmacogenetGenomics，2006.16(11)：p.825-835；Liang，D.Y.等，Anesthesiology，2006.104(5)：p.1054-1062；Smith，S.B.等，Pharmacogenet Genomics，2008.18(3)：p.231-241)。简言之，分析来自多个近交品系的等位基因数据，并构建小鼠基因组的单元型区段图。仅有限数量的单元型——通常为2、3或4——存在于单元型区段之内。该分析鉴定了其中聚集于区段之内的单元型品系与所分析的近交品系中的表型数据分布相关联的单元型区段。为了做到这一点，使用ANOVA如前所述计算了评价每个区段之内的遗传变异可导致所述近交品系中所观察到的表型分布的可能性的p-值(Wang，J.等，Trends Genet，2005.21(9)：p.526-532；Liao，G.等，Science，2004.306(5696)：p.690-695)。表型数据是使用对于每个品系的平均值来衡量的，所述平均值是通过每个品系评价8只小鼠获得的。然后基于计算的p-值对单元型区段进行评级。当进行该计算分析时，单元型图具有从表征自19个近交品系，覆盖2609个基因的215155个单核苷酸多态性(SNP)生成的5694个单元型区段。根据该分析，依照经验供进一步分析而选取的候选单元型区段具有最佳p-值。

基因表达分析

通过CO₂窒息在特定时点处死小鼠。将整个脑部整块地从颅骨解剖出来，并通过挤压来收获脊髓。使用低倍双目镜放大，在冰冷的表面解剖组织。将脑组织分为皮质、小脑和脑干。然后将经解剖的组织在液氮中迅速冻结，并储藏于-80℃直至使用。总RNA是使用RNeasy Mini Kit(Qiagen，Valencia，CA)依照生产商的指示进行分离的，其纯度和浓度如前所述对于脑和脊髓样品通过分光光度法确定(Li，X.等，J Neurosci Res，2004.78(4)：p.533-541)。从总RNA使用随机六聚体引发和First Strand cDNA Synthesis Kit(Invitrogen，Carlsbad，CA)合成cDNA。简言之，将1μg总RNA与4μl 10x RT缓冲液，8μl 25mM MgCl2，4μl 0.1M DTT，1μl RNasin，2μl SSII(50u/μl)，5μl六聚体混合，用不含RNase的水加至40μl。然后在42℃进行温育60分钟，接着在70℃进行热失活。最终将1μl RNase H添加至每个反应，并在37℃温育20分钟以降解RNA。对于实时定量PCR，反应是在4μl的体积中使用Sybr GreenI主试剂盒(PE applied Biosystems，Foster City，CA)进行的。简言之，将2μl的2x sybr绿和引物的混合物与2μl稀释的cDNA模板加载于每个孔中。在此之后，将8μl矿物油加载至每个孔中以阻止溶液丧失。使用ABI prism 7900HT系统，使用下述参数进行PCR：52℃，5分钟→95℃，10分钟，然后[95℃，30s→60℃，60s]进行40个循环。将样品以三次重复进行分析。实施解链曲线以记录单产物形成，而琼脂糖电泳确证适当的产物大小。使用18s RNA作为内部对照。18s引物购自Ambion(Austin，TX)。在吗啡处理样品对比对照样品中Htr3a的表达是使用ΔΔC_t方法(Liang，D.等，Neuroscience，2003.121(4)：p.999-1005)分析的。

使用了之前描述的对CNS组织进行Laser Capture Microdissection(LCM)的方法(Li，X.等，J Neurosci Res，2004.78(4)：p.533-541)。在CO₂窒息之后对小鼠用10cc冰冷的0.9％ NaCl进行心内灌注，然后进行脑部收获。迅速解剖出脑干，将其包埋于OCT介质，并储藏于-80℃直至切片。稍后，使用低温恒温器切出15μM的切片，将其置于载玻片上，并藉由乙醇和二甲苯迅速脱水。每个载玻片含有约6个切片。然后将所述载玻片直接送至PixCell LCM装置(Arcturus，Mountain View，CA)，其具有15μm激光点直径(laser spot diameter)，40mW的功率和500微秒的脉冲期间以将组织转移至CapSure基质(Arcturus)。直至80-90％的表面含有转移的组织时使用各个封盖(cap)。从杏仁核、中缝背核和导水管周围灰质核收获组织，使用标准的大脑解剖图以指导该过程。使用RiboAmp(Arcturus)RNA扩增试剂盒依照生产商的指示提取RNA，然后进行mRNA扩增。激光捕获的RNA的扩增明确而非歪曲了样品间的差异(Feldman，A.L.等，Biotechniques，2002.33(4)：p.906-12，914)。使用RiboAmpRNA扩增试剂盒(Arcturus)依照生产商的指示进行单一一轮扩增来实施该过程，而通过吸光度分光光度法定量物质的量，然后对其使用如上所述的随机六聚体引物进行逆转录。然后将扩增的mRNA用于基于如上所述实时PCR的定量。

如前所述进行了针对5-HT3受体蛋白的Western印迹(Liang，D.Y.和J.D.Clark，Neurosci Lett，2004.365(1)：p.73-77)。简言之，将来自特定CNS区的组织在含有蛋白酶的缓冲液中匀浆，并在丙烯酰胺凝胶上运行分离。在转移之后，使用兔多克隆抗5-HT3抗体(abcam，Cambridge，MA)以1∶500稀释探测膜。然后对膜进行剥除抗体(strip)，并就肌动蛋白丰度重新进行探测，从而允许进行标准化。

人受试者，研究设计和步骤

如前所述对八个健康的男性志愿者在两个不同的情况下使用随机化的双盲安慰剂对照的交叉研究设计进行有或无昂丹司琼预处理的急性骤致的麻醉药停药实验方案(Compton，P.等，Pharmacol Biochem Behav，2004.77(2)：p.263-268)。对于每个个体受试者的测试期间之间相隔至少七日。由于月经周期对阿片样物质应答的调节而在该研究中排除女性志愿者(Hoehe，M.，Psychoneuroendocrinology，1988.13(4)：p.339-344)。人体实验方案经Institutional Review Board(Stanford University)批准。在研究招募之前，所有志愿者提供了书面同意，且该研究登记于clinicaltrials.gov数据库(标识符NCT00661674)。

所有的研究期间是由不知内情的(blinded)研究助理(ND)进行，并由知悉内情的医师(LC)监督，所述医师在整个研究过程中施用研究药物，并监视心率、血压和动脉氧合作用。在确立静脉内联系(access)之后和在施用研究药物之前，完成了主观阿片样物质停药量表(SOWS)和客观阿片样物质停药量表(OOWS)，如最初由Handelsman等所述(Handelsman，L.等，.Am JDrug AlcoholAbuse，1987.13(3)：p.293-308)。由相同的不知内情的研究助理(ND)获得所有的OOWS测量。将8mg昂丹司琼(Bedford Laboratories，Bedford，OH)或安慰剂(0.9％盐水溶液，Hospira Inc.，Lake Forest，IL)以双盲的方式以静脉内推注(IV bolus)施用。三十分钟之后，将10mg/70kg吗啡(Baxter Healthcare Corp.，Deerfield，IL)在10分钟之内施用。患者留在实验室接受观察105分钟，并在该时间段内任意给予其音乐或录像娱乐，以及不含咖啡因的餐点或零食。在105分钟之后，重新评价患者的生命体征和OOWS及SOWS。在静脉内吗啡施用之后120分钟时，将10mg/70kg的纳洛酮(Hospira Inc.，Lake Forest，IL)以静脉内推注向受试者施用。在纳洛酮施用之后五分钟和十五分钟之后检查(administer)生命体征、SOWS和OOWS。

统计学分析

除非另行指出，所有数据表示为平均值+/-SEM。动物行为数据使用具有Tukey因果关系(post-hoc)检验的单向或双向ANOVA进行分析，或对于条件性位置偏好数据使用具有t检验的。对安慰剂和昂丹司琼处理组之间作为目标的结果测量使用配对t检验和Wilcoxon Signed Rank检验(当适当时)进行比较。正态分布是使用QQ作图和Kolmogorov-Smrinov检验确定的。用SAS 9.1统计学包(Cary，IL)进行分析，其中p＜0.05视为统计学上显著。

实施例10

5-HT3拮抗剂和抗组胺药的组合用于治疗麻醉药停药症状

在这些研究中，将帕洛诺司琼(5-HT3拮抗剂)单独或与临床上可获得的抗组胺药(羟嗪)组合施于人志愿者。如图11所示，用帕洛诺司琼(0.75mg IV)的单独处理在12个男性志愿者中相对于安慰剂对照减少了纳洛酮诱导的停药症状(P＜0.01)。然而，5-HT3拮抗剂和抗组胺药(100mg PO羟嗪(经口摄取))的组合(两者均以平均临床剂量施用)，导致停药的客观停药体征非常深刻的减少。值得注意的是，由组合疗法取得的减少显著优于由帕洛诺司琼单独施用所致(P＜0.05)。这些数据表明药物的协同组合在人志愿者中对于减轻麻醉药物停药症状具有增加的效力。

尽管已在本文中显示和描述了本发明的优选实施方案，对于本领域技术人员显而易见此类实施方案仅作为示例提供。本领域技术人员此时可想到多种变体、变化和替代，而不背离本发明。应理解的是对于本文中所述的本发明的实施方案的多种替代方案可用于实践本发明。其旨在使所附权利要求限定本发明的范围，且这些权利要求及其等同方案范围内的方法和结构由此得以涵盖。

权利要求书(按照条约第19条的修改)

1.一种预防或治疗受试者中与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的方法，包括向所述受试者施用调节5-HT3受体的药剂。

2.一种预防或治疗受试者中与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的方法，由向所述受试者施用调节5-HT3受体的药剂组成。

3.一种预防或治疗受试者中与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的方法，基本上由向所述受试者施用调节5-HT3受体的药剂组成。

4.权利要求1、2或3的方法，其中所述受试者是人。

5.权利要求1、2或3的方法，其中所述麻醉药是吗啡。

6.权利要求1、2或3的方法，其中所述药剂是5-HT3受体拮抗剂。

7.权利要求6的方法，其中所述药剂是昂丹司琼或帕洛诺司琼。

8.权利要求1、2或3的方法，其中将所述药剂在向所述受试者施用阿片样物质拮抗剂之前向所述受试者施用。

9.权利要求1、2或3的方法，其中将所述药剂在向所述受试者施用所述麻醉药之前向所述受试者施用。

10.权利要求1、2或3的方法，其中将所述药剂在向所述受试者施用所述麻醉药之后向所述受试者施用。

11.权利要求1、2或3的方法，其中将所述药剂与所述麻醉药共同施用于所述受试者。

12.权利要求1、2或3的方法，其中所述药剂为高至16mg的昂丹司琼或高至1.5mg的帕洛诺司琼。

13.一种预防或治疗受试者中与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的方法，包括向所述受试者施用药物组合物，所述药物组合物包含麻醉药和减少与所述麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂。

14.一种预防或治疗受试者中与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的方法，包括向所述受试者施用药物组合物，所述药物组合物由麻醉药和减少与所述麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂组成。

15.一种预防或治疗受试者中与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的方法，包括向所述受试者施用药物组合物，所述药物组合物基本上由麻醉药和减少与所述麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂组成。

16.权利要求13、14或15的方法，其中所述受试者是人。

17.权利要求13、14或15的方法，其中所述麻醉药是吗啡。

18.权利要求13、14或15的方法，其中所述药剂调节5-HT3受体。

19.权利要求18的方法，其中所述药剂是5-HT3受体拮抗剂。

20.权利要求19的方法，其中所述药剂是昂丹司琼或帕洛诺司琼。

21.权利要求13、14或15的方法，其中所述麻醉药是吗啡而所述药剂是昂丹司琼或帕洛诺司琼。

22.权利要求13、14或15的方法，其中所述麻醉药为高至16mg的吗啡并且所述药剂为高至16mg的昂丹司琼或高至1.5mg的帕洛诺司琼。

23.一种治疗受试者中对麻醉药成瘾的方法，包括向所述受试者施用调节5-HT3受体的药剂。

24.权利要求21的方法，其中所述受试者是人。

25.权利要求21的方法，其中所述麻醉药是吗啡。

26.权利要求21的方法，其中所述药剂是5-HT3受体拮抗剂。

27.权利要求26的方法，其中所述药剂是昂丹司琼或帕洛诺司琼。

28.一种药物组合物，其包含麻醉药和减少与所述麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂。

29.一种药物组合物，其由麻醉药和减少与所述麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂组成。

30.一种药物组合物，其基本上由麻醉药和减少与所述麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂组成。

31.权利要求28、29或30的组合物，其中所述麻醉药是吗啡。

32.权利要求28、29或30的组合物，其中所述药剂调节5-HT3受体。

33.权利要求28、29或30的组合物，其中所述药剂是5-HT3拮抗剂。

34.权利要求28、29或30的组合物，其中所述药剂是昂丹司琼或帕洛诺司琼。

35.一种治疗或预防受试者中与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的方法，包括向所述受试者施用调节5-HT3受体的药剂和第二药剂。

36.一种治疗或预防受试者中与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的方法，由向所述受试者施用调节5-HT3受体的药剂和第二药剂组成。

37.一种治疗或预防受试者中与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的方法，基本上由向所述受试者施用调节5-HT3受体的药剂和第二药剂组成。

38.权利要求35、36或37的方法，其中所述受试者是人。

39.权利要求35、36或37的方法，其中所述麻醉药是吗啡。

40.权利要求35、36或37的方法，其中所述调节5-HT3受体的药剂是5-HT3受体拮抗剂。

41.权利要求40的方法，其中所述5-HT3受体拮抗剂是昂丹司琼或帕洛诺司琼。

42.权利要求35、36或37的方法，其中所述第二药剂是止吐药。

43.权利要求42的方法，其中所述止吐药是抗组胺药、NK1受体拮抗剂、多巴胺拮抗剂、毒蕈碱性受体拮抗剂、地西泮、皮质甾或大麻素。

44.权利要求43的方法，其中所述抗组胺药是羟嗪。

45.权利要求35、36或37的方法，其中所述调节5-HT3受体的药剂和所述第二药剂在向受试者施用麻醉药之前施用。

46.权利要求35、36或37的方法，其中所述调节5-HT3受体的药剂和所述第二药剂在向受试者施用麻醉药之后施用。

47.权利要求35、36或37的方法，其中所述调节5-HT3受体的药剂和所述第二药剂与麻醉药共同施用。

48.一种药物组合物，其包含麻醉药和至少两种减少与所述麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂。

49.权利要求48的组合物，其中一种药剂包含5-HT3受体调节剂。

50.权利要求49的组合物，其中所述5-HT3受体调节剂是5-HT3拮抗剂。

51.权利要求48的组合物，其中一种药剂是抗组胺药。

52.权利要求49的组合物，其中所述5-HT3受体调节剂是昂丹司琼或帕洛诺司琼，而另一种药剂是羟嗪。

53.权利要求49的组合物，其中所述麻醉药是吗啡。

54.权利要求49的组合物，其中所述麻醉药是吗啡，所述5-HT3受体调节剂是昂丹司琼或帕洛诺司琼，而另一种药剂是羟嗪。

55.权利要求49的组合物，其中所述麻醉药是高至20mg的吗啡，所述5-HT3受体调节剂是高至1.5mg的帕洛诺司琼，而另一种药剂是高至200mg的羟嗪。

56.一种药物组合物，其由麻醉药和两种减少与所述麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂组成。

57.一种药物组合物，其基本上由麻醉药和两种减少与所述麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂组成。

58.权利要求56或57的组合物，其中一种药剂是调节5-HT3受体的药剂。

59.权利要求56或57的组合物，其中一种药剂是止吐药。

60.权利要求56或57的组合物，其中两种药剂均为止吐药。

61.权利要求56或57的组合物，其中一种药剂是抗组胺药。

62.权利要求56或57的组合物，其中所述麻醉药是吗啡。

63.权利要求56或57的组合物，其中一种药剂是5-HT3受体拮抗剂而另一种药剂是抗组胺药。

64.权利要求56或57的组合物，其中一种药剂是昂丹司琼或帕洛诺司琼，而另一种药剂是羟嗪。

65.权利要求56或57的组合物，其中所述麻醉药是吗啡，一种药剂是昂丹司琼或帕洛诺司琼，而另一种药剂是羟嗪。

66.权利要求56或57的组合物，其中所述麻醉药是高至20mg的吗啡，一种药剂是高至1.5mg的帕洛诺司琼，而另一种以及是高至200mg的羟嗪。

Claims (66)

1.一种预防或治疗受试者中与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的方法，包括向所述受试者施用调节5-HT3受体的药剂。

2.一种预防或治疗受试者中与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的方法，由向所述受试者施用调节5-HT3受体的药剂组成。

3.一种预防或治疗受试者中与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的方法，基本上由向所述受试者施用调节5-HT3受体的药剂组成。

4.权利要求1、2或3的方法，其中所述受试者是人。

5.权利要求1、2或3的方法，其中所述麻醉药是吗啡。

6.权利要求1、2或3的方法，其中所述药剂是5-HT3受体拮抗剂。

7.权利要求6的方法，其中所述药剂是昂丹司琼或帕洛诺司琼。

8.权利要求1、2或3的方法，其中将所述药剂在向所述受试者施用阿片样物质拮抗剂之前向所述受试者施用。

9.权利要求1、2或3的方法，其中将所述药剂在向所述受试者施用所述麻醉药之前向所述受试者施用。

10.权利要求1、2或3的方法，其中将所述药剂在向所述受试者施用所述麻醉药之后向所述受试者施用。

11.权利要求1、2或3的方法，其中将所述药剂与所述麻醉药共同施用于所述受试者。

12.权利要求1、2或3的方法，其中所述药剂为高至16mg的昂丹司琼或高至1.5mg的帕洛诺司琼。

13.一种预防或治疗受试者中与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的方法，包括向所述受试者施用药物组合物，所述药物组合物包含麻醉药和减少与所述麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂。

14.一种预防或治疗受试者中与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的方法，包括向所述受试者施用药物组合物，所述药物组合物由麻醉药和减少与所述麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂组成。

15.一种预防或治疗受试者中与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的方法，包括向所述受试者施用药物组合物，所述药物组合物基本上由麻醉药和减少与所述麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂组成。

16.权利要求13、14或15的方法，其中所述受试者是人。

17.权利要求13、14或15的方法，其中所述麻醉药是吗啡。

18.权利要求13、14或15的方法，其中所述药剂调节5-HT3受体。

19.权利要求18的方法，其中所述药剂是5-HT3受体拮抗剂。

20.权利要求19的方法，其中所述药剂是昂丹司琼或帕洛诺司琼。

21.权利要求13、14或15的方法，其中所述麻醉药是吗啡而所述药剂是昂丹司琼或帕洛诺司琼。

22.权利要求13、14或15的方法，其中所述麻醉药为高至16mg的吗啡并且所述药剂为高至16mg的昂丹司琼或高至1.5mg的帕洛诺司琼。

23.一种治疗受试者中对麻醉药成瘾的方法，包括向所述受试者施用调节5-HT3受体的药剂。

24.权利要求21的方法，其中所述受试者是人。

25.权利要求21的方法，其中所述麻醉药是吗啡。

26.权利要求21的方法，其中所述药剂是5-HT3受体拮抗剂。

27.权利要求26的方法，其中所述药剂是昂丹司琼或帕洛诺司琼。

28.一种药物组合物，其包含麻醉药和减少与所述麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂。

29.一种药物组合物，其由麻醉药和减少与所述麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂组成。

30.一种药物组合物，其基本上由麻醉药和减少与所述麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂组成。

31.权利要求28、29或30的组合物，其中所述麻醉药是吗啡。

32.权利要求28、29或30的组合物，其中所述药剂调节5-HT3受体。

33.权利要求28、29或30的组合物，其中所述药剂是5-HT3拮抗剂。

34.权利要求28、29或30的组合物，其中所述药剂是昂丹司琼或帕洛诺司琼。

35.一种治疗或预防受试者中与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的方法，包括向所述受试者施用调节5-HT3受体的药剂和第二药剂。

36.一种治疗或预防受试者中与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的方法，由向所述受试者施用调节5-HT3受体的药剂和第二药剂组成。

37.一种治疗或预防受试者中与麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的方法，基本上由向所述受试者施用调节5-HT3受体的药剂和第二药剂组成。

38.权利要求35、36或37的方法，其中所述受试者是人。

39.权利要求35、36或37的方法，其中所述麻醉药是吗啡。

40.权利要求35、36或37的方法，其中所述调节5-HT3受体的药剂是5-HT3受体拮抗剂。

41.权利要求40的方法，其中所述5-HT3受体拮抗剂是昂丹司琼或帕洛诺司琼。

42.权利要求35、36或37的方法，其中所述第二药剂是止吐药。

43.权利要求42的方法，其中所述止吐药是抗组胺药。

44.权利要求43的方法，其中所述抗组胺药是羟嗪。

45.权利要求35、36或37的方法，其中所述调节5-HT3受体的药剂和所述第二药剂在向受试者施用麻醉药之前施用。

46.权利要求35、36或37的方法，其中所述调节5-HT3受体的药剂和所述第二药剂在向受试者施用麻醉药之后施用。

47.权利要求35、36或37的方法，其中所述调节5-HT3受体的药剂和所述第二药剂与麻醉药共同施用。

48.一种药物组合物，其包含麻醉药和至少两种减少与所述麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂。

49.权利要求48的组合物，其中一种药剂包含5-HT3受体调节剂。

50.权利要求49的组合物，其中所述5-HT3受体调节剂是5-HT3拮抗剂。

51.权利要求48的组合物，其中一种药剂是抗组胺药。

52.权利要求49的组合物，其中所述5-HT3受体调节剂是昂丹司琼或帕洛诺司琼，而另一种药剂是羟嗪。

53.权利要求49的组合物，其中所述麻醉药是吗啡。

54.权利要求49的组合物，其中所述麻醉药是吗啡，所述5-HT3受体调节剂是昂丹司琼或帕洛诺司琼，而另一种药剂是羟嗪。

55.权利要求49的组合物，其中所述麻醉药是高至20mg的吗啡，所述5-HT3受体调节剂是高至1.5mg的帕洛诺司琼，而另一种药剂是高至200mg的羟嗪。

56.一种药物组合物，其由麻醉药和两种减少与所述麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂组成。

57.一种药物组合物，其基本上由麻醉药和两种减少与所述麻醉药使用相关的生理依赖性和/或停药症状的药剂组成。

58.权利要求56或57的组合物，其中一种药剂是调节5-HT3受体的药剂。

59.权利要求56或57的组合物，其中一种药剂是止吐药。

60.权利要求56或57的组合物，其中两种药剂均为止吐药。

61.权利要求56或57的组合物，其中一种药剂是抗组胺药。

62.权利要求56或57的组合物，其中所述麻醉药是吗啡。

63.权利要求56或57的组合物，其中一种药剂是5-HT3受体拮抗剂而另一种药剂是抗组胺药。

64.权利要求56或57的组合物，其中一种药剂是昂丹司琼或帕洛诺司琼，而另一种药剂是羟嗪。

65.权利要求56或57的组合物，其中所述麻醉药是吗啡，一种药剂是昂丹司琼或帕洛诺司琼，而另一种药剂是羟嗪。

66.权利要求56或57的组合物，其中所述麻醉药是高至20mg的吗啡，一种药剂是高至1.5mg的帕洛诺司琼，而另一种以及是高至200mg的羟嗪。

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