CN102279172A - 一种检测手足口病病原的纳米探针芯片及其应用方法 - Google Patents
一种检测手足口病病原的纳米探针芯片及其应用方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102279172A CN102279172A CN2011100671591A CN201110067159A CN102279172A CN 102279172 A CN102279172 A CN 102279172A CN 2011100671591 A CN2011100671591 A CN 2011100671591A CN 201110067159 A CN201110067159 A CN 201110067159A CN 102279172 A CN102279172 A CN 102279172A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- probe
- nano
- disease
- cause
- chip
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 239000000523 sample Substances 0.000 title claims abstract description 94
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 10
- 208000020061 Hand, Foot and Mouth Disease Diseases 0.000 title claims description 19
- 208000025713 Hand-foot-and-mouth disease Diseases 0.000 title claims description 16
- 244000052769 pathogen Species 0.000 title abstract description 6
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 title abstract description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 44
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 44
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 30
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 29
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 29
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims abstract description 27
- 238000012412 chemical coupling Methods 0.000 claims abstract description 4
- 241001529459 Enterovirus A71 Species 0.000 claims description 33
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 claims description 20
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 11
- 238000011895 specific detection Methods 0.000 claims description 8
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 5
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 5
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 5
- 239000002096 quantum dot Substances 0.000 claims description 5
- 125000003368 amide group Chemical group 0.000 claims description 4
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 4
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 4
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 4
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 4
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 4
- UDGUGZTYGWUUSG-UHFFFAOYSA-N 4-[4-[[2,5-dimethoxy-4-[(4-nitrophenyl)diazenyl]phenyl]diazenyl]-n-methylanilino]butanoic acid Chemical compound COC=1C=C(N=NC=2C=CC(=CC=2)N(C)CCCC(O)=O)C(OC)=CC=1N=NC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 UDGUGZTYGWUUSG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 claims description 3
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 claims description 3
- XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N Silicon Chemical compound [Si] XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 238000010382 chemical cross-linking Methods 0.000 claims description 3
- 239000002082 metal nanoparticle Substances 0.000 claims description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 3
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000010703 silicon Substances 0.000 claims description 3
- 108091092724 Noncoding DNA Proteins 0.000 claims description 2
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 claims description 2
- 239000003068 molecular probe Substances 0.000 claims description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 claims description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 abstract description 12
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 abstract description 7
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract description 6
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 abstract description 3
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 abstract description 2
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 abstract 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 abstract 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 abstract 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 abstract 1
- 238000010791 quenching Methods 0.000 abstract 1
- 230000000171 quenching effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 abstract 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide Chemical class CCN=C=NCCCN(C)C LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000709661 Enterovirus Species 0.000 description 4
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 4
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 4
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 3
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 description 3
- 238000000018 DNA microarray Methods 0.000 description 2
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 2
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 210000000214 mouth Anatomy 0.000 description 2
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 2
- 238000002165 resonance energy transfer Methods 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 101710145634 Antigen 1 Proteins 0.000 description 1
- 208000006740 Aseptic Meningitis Diseases 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 241000988559 Enterovirus A Species 0.000 description 1
- 206010027201 Meningitis aseptic Diseases 0.000 description 1
- 208000009525 Myocarditis Diseases 0.000 description 1
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 1
- 241000709664 Picornaviridae Species 0.000 description 1
- 206010037423 Pulmonary oedema Diseases 0.000 description 1
- BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N Silver Chemical compound [Ag] BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000002352 blister Diseases 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 230000004907 flux Effects 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 208000030194 mouth disease Diseases 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 208000005333 pulmonary edema Diseases 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 1
- 230000000630 rising effect Effects 0.000 description 1
- 229910052709 silver Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004332 silver Substances 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
- Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明一种检测疾病抗原的纳米探针芯片，还涉及该纳米探针芯片的应用，属于医学检测领域。本发明将能够特异性检测病原特征信息的生物分子或特征序列与纳米荧光探针化学偶联制成纳米探针芯片，再将能够特异性淬灭荧光探针的信号探针与待测样品中的抗原分子进行杂交，将纳米探针芯片与信号探针-抗原分子复合物按照不同比例混合反应，通过荧光图谱检测仪检测纳米荧光探针强度，达到快速准确检测病原的目的。本发明不仅克服了PCR技术在多重检测方面的局限性，同时也克服了固相芯片敏感性不高、检测结果可重复性差的缺陷，与液相芯片技术相比，则具有更高检测灵敏度和更短反应时间。该纳米探针芯片检测种类多、操作简单、灵敏度高、特异性强且检测准确，在各类病原、微生物及肿瘤标志物检测方面具有广阔的应用前景。
Description
技术领域
本发明涉及一种病原检测纳米探针芯片，特别是涉及特异检测手足口病病原的纳米探针芯片技术及其应用。
背景技术
手足口病(hand-foot mouth disease，HFMD)是由肠道病毒引起的传染病，多发生于婴幼儿，可引起手、足、口腔等部位的疱疹，个别患者可引起心肌炎、肺水肿、无菌性脑膜炎等并发症。引发手足口病的肠道病毒有20多种(型)，柯萨奇病毒A组的16、4、5、9、10型，B组的2、5型，以及肠道病毒71型均为手足口病较常见的病原体，其中以柯萨奇病毒A16型(CoxA16)和肠道病毒71型(enterovirus71，EV71)最为常见，而且发病死亡的患儿中主要是因为感染了EV71病毒。EV71是小RNA病毒科，肠道病毒属成员。病毒基因组为7408个核苷酸(SHZH98)的单股正链RNA。近年来，EV71引起的手足口病重症和死亡病例增长迅速。截至5月4日，全国已累计报告手足口病病例427278例，同比上升超40％，其中死亡260例，同比上升142.99％。国内目前95％以上的手足口患儿都是由EV71病毒引起的，表现为危重型症状，重症患儿的病死率更是高达5％。HFMD至今仍无有效的疫苗和特异性治疗手段，所以，对EV进行快速检测无论是对于指导治疗还是控制HFMD疫情都具有重要价值。
目前，EV的检测方法包括病毒分离培养、病毒核酸检测和血清学检查三个方面。病毒分离方法费时、费力，检测种类少，无法满足疾病流行期间同时处理大量样本的需要。病毒核酸检测是采用逆转录聚合酶链反应(PCR，RT-PCR)技术，为当前肠道病毒快速检测的主要手段，该方法灵敏度高，但具有样品污染，假阳性率高等缺点，同时，普通PCR和荧光定量PCR由于各组引物间不兼容性、扩增背景高以及重复性差等因素不利于多重检测。血清学检查同样由于检测通量局限性而不能满足检测需求。传统固相芯片价格昂贵，敏感性不高，检测结果可重复性差。液相芯片技术能够实现高通量检测，但由于需要PCR扩增存在操作复杂、易污染等缺点。基因芯片技术具有高特异性、高灵敏度、高通量的特点，为临床和环境检测提供了良好的应用前景。目前通用的基因芯片技术有多种，但分别都存在着灵敏度不高，或者检测技术复杂，或者条件和设备要求高的问题限制了该技术在临床检测中的应用。当前基于纳米金探针技术已被报道应用于肝炎病毒和人乳头瘤病毒检测中，该技术通过金标银染法达到相对定量检测靶DNA的目的，而其纳米探针荧光强度针对不同浓度待测抗原响应值区分差异较小，从而限制了其检测灵敏度。
发明内容
本发明针对以上现有技术存在的缺点，提出一种快速检测手足口病病原的纳米探针芯片及其制备方法，并通过对其的应用达到检测种类多、反应时间短、灵敏度高且特异性强的效果。
本发明的原理是：结合纳米探针芯片技术，将带有氨基或者经过氨基修饰的针对病原特征信息的特异性检测分子，化学偶联到纳米荧光探针，制成纳米探针芯片。再将通过能量共振转移特异淬灭纳米荧光探针的信号探针与待测病原分子交联反应，将信号探针-待测病原复合物与纳米探针芯片混合反应后，通过荧光图谱扫描，根据信号探针对纳米探针荧光强度的淬灭程度，以标准品多肽抗原为阳性对照，判定待测物中病原的浓度。从而达到快速准确检测病原的目的。其中病原特征信息指病原抗原或者病原核苷酸序列。本发明采用了特有的基于能量共振转移技术的信号放大机制，从而克服了现有纳米探针检测技术的灵敏度局限性。
本发明的发明目的通过以下技术方案实现：
一种检测手足口病病原的纳米探针芯片，主要由分别包被有病原特异性检测分子的纳米荧光探针构成，所述纳米荧光探针包括以下纳米探针中一种或者几种：
不同荧光发射波长的水溶性量子点，
硅壳纳米荧光探针、
壳聚糖纳米荧光探针；
磁性纳米荧光探针；
所述特异性检测分子为以下分子中的至少一种：
EV71抗体或EV71抗原适配子序列；
EV抗体或EV抗原适配子序列；
CAV16抗体或CAV16抗原适配子序列；
针对EV 5’端非编码区、EV71 VP1区、CAV16 VP1区核酸序列各区段基因中的DNA分子探针。
所述纳米荧光探针的荧光发射波长范围为300-1000nm。
所述EV71抗体的适配子序列为以下5’端经氨基修饰后适配子序列中的至少一种：
5’-NH2-AmMC6-ATACGGGAGCCAACACCA-TTCTATCGTTCCGGACGCTTATGCCTTGCCATCTAC-AGAGCAGGTGTGACGGAT-3’；
5’-NH2-AmMC6-ATCCGTCACTCCTGCTCT-GTAGATGGCAAGGCATAAGCGTCCGGAACGATAGAA-TGGTGTTGGCTCCCGTAT-3’；
5’-NH2-AmMC6-ATACGGGAGCCAACACCA-TGAATATCTCTTCTACCTCCTCTCCTCCCTTTACTT-AGAGCAGGTGTGACGGAT-3’。
一种检测手足口病病原的纳米探针芯片的应用方法，其特征在于包括以下步骤：第一步：通过筛选针对EV病原的抗体、多肽、适配子序列以及核酸引物序列，确定特异识别EV病原的特异检测分子；
第二步、对上述特异检测分子进行纳米荧光探针标记，得到纳米探针芯片；
第三步、将信号探针与待测病原分子进行化学偶联，得到信号探针-病原分子复合物；
第四步、将纳米探针芯片与信号探针-病原分子复合物混合反应；
第五步、将第四步中的反应产物通过荧光分光光度计或者荧光图谱扫描仪检测，根据纳米荧光探针荧光强度的变化诊断待测病原分子的浓度。
所述信号探针为金属纳米粒子、金纳米粒子、BHQ-2、Cy3、Cy5等分子中的一种或者几种，与待测病原分子进行化学交联，得到信号探针-病原分子复合物。
其中，本发明所称纳米荧光探针包括以下纳米探针中一种或者几种：不同荧光发射波长的水溶性量子点，硅壳纳米荧光探针、壳聚糖纳米荧光探针等荧光发射波长在300-1000nm范围的纳米级别荧光探针；
所称特异性检测分子由以下分子中至少一种：EV71抗体或者适配子序列；EV抗体或者适配子序列；CAV16抗体或者适配子序列。针对于特异性检测EV71病原纳米芯片中，其特异修饰纳米荧光探针的检测分子除抗体外，适配子序列可以由以下5’端经氨基修饰后适配子分子中至少一种：
5’-NH2-AmMC6-ATACGGGAGCCAACACCA-TTCTATCGTTCCGGACGCTTATGCCTTGCCATCTAC-AGAGCAGGTGTGACGGAT-3’；
5’-NH2-AmMC6-ATCCGTCACTCCTGCTCT-GTAGATGGCAAGGCATAAGCGTCCGGAACGATAGAA-TGGTGTTGGCTCCCGTAT-3’；
5’-NH2-AmMC6-ATACGGGAGCCAACACCA-TGAATATCTCTTCTACCTCCTCTCCTCCCTTTACTT-AGAGCAGGTGTGACGGAT-3’。、
所称能够特异性淬灭纳米荧光探针的信号探针包括金属纳米粒子、金纳米粒子、BHQ-2、Cy3、Cy5等分子中的一种或者几种，与待测病原分子进行化学交联，得到信号探针-病原分子复合物。
将标记有病原特异性检测分子的纳米荧光探针与信号探针-病原分子复合物混合反应，通过荧光分光光度计或者荧光图谱扫描仪检测纳米荧光探针荧光强度变化，以手足口病原多肽标准抗原作为阳性对照品，检测待测病原分子的浓度。
附图说明
图1为实施例1，2采用的纳米探针芯片透视电镜图片。
图2为实施例1纳米探针芯片检测EV71待测抗原荧光图谱图。
图3为实施例2纳米探针芯片检测EV71待测抗原荧光图谱图。
具体实施方式
以下结合附图对本发明做进一步的描述。
实施例1
EV71抗原快速检测纳米探针芯片制备：
通过ELISA筛选针对手足口病EV71 VP1抗原片段特异性强的单克隆抗体如Abnova公司生产的EV71-VP1单克隆抗体，将10μl EV71单克隆抗体与10μl 1uM纳米荧光探针即水溶性量子点(纳奥生物，发射波长620nm)交联反应，交联剂为1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳化二亚胺(EDC)(Sigma)。振荡混合，静止反应2小时后，通过100kDa分子量透析膜离心透析纯化，紫外分光光度计测定交联后纳米荧光探针浓度为2μM，避光保存于4摄氏度，待用。
将0.1-10μM水溶性纳米荧光探针淬灭剂(无锡纳奥生物医药有限公司生产)与经PCR验证阳性的待测EV71抗原溶液即临床咽拭子提取物混合，加入1-100mg/ml 1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳化二亚胺(EDC)(Sigma公司)交联反应1小时后，将探针淬灭剂-病原复合物直接加入纳米探针芯片液相体系中，振荡混合，静置10-30分钟后，通过荧光分光光度计测定纳米探针荧光强度，如图2所示，以EV71多肽抗原阳性对照品制作标准曲线，测定待测EV71抗原浓度为10ng/ml。
图2为纳米探针芯片检测EV71待测抗原荧光图谱图，图中系列1为加入待测抗原后纳米荧光探针荧光图谱，发射波长620nm，系列2为阳性品加入纳米探针芯片后荧光图谱，系列3为在纳米探针芯片体系中加入待测EV7抗原后复合物荧光图谱，根据荧光强度和以标准品确定的标准曲线，确定待测样品中含有EV71抗原10ng/ml。
实施例2
EV71抗原快速检测纳米探针芯片制备：
采用特异识别EV71抗原的适配子序列修饰纳米荧光探针，适配子序列为：5’-NH2-AmMC6-ATACGGGAGCCAACACCA-TTCTATCGTTCCGGACGCTTATGCCTTGCCATCTAC-AGAGCAGGTGTGACGGAT-3’。将10μl 100nM EV71适配子序列与10μl 1μM纳米荧光探针即水溶性量子点(纳奥生物，发射波长620nm)交联反应，交联剂为1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳化二亚胺(EDC)(Sigma公司)。振荡混合，静止反应2小时后，通过100kDa分子量透析膜离心透析纯化，紫外分光光度计测定交联后纳米荧光探针浓度为2μM，避光保存于4摄氏度，待用。将1μM水溶性纳米荧光探针淬灭剂(无锡纳奥生物医药有限公司生产)与经PCR验证阳性的不同浓度的待测EV71抗原溶液即临床咽拭子提取物混合，加入1-100mg/ml 1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳化二亚胺(EDC)(Sigma)交联反应1小时后，将探针淬灭剂-病原复合物直接加入纳米探针芯片液相体系中，振荡混合，静置10-30分钟后，通过荧光分光光度计测定纳米荧光探针荧光强度，如图3所示，以阳性对照品制作标准曲线，测定待测样本中EV71抗原浓度分别为1、3、5ng/ml。
图3为纳米探针芯片检测EV71待测抗原荧光图谱图，图中系列1为加入待测抗原后纳米荧光探针荧光图谱，发射波长620nm，系列2-4为在纳米探针芯片体系中加入待测EV7抗原后复合物荧光图谱，，根据荧光强度和以标准品确定的标准曲线，确定待测样品中含有EV71抗原分别为1，3，5ng/ml。
Claims (5)
1.一种检测手足口病病原的纳米探针芯片，主要由分别包被有病原特异性检测分子的纳米荧光探针构成，所述纳米荧光探针包括以下纳米探针中一种或者几种：
不同荧光发射波长的水溶性量子点；
硅壳纳米荧光探针；
壳聚糖纳米荧光探针；
磁性纳米荧光探针；
所述特异性检测分子为以下分子中的至少一种：
EV71抗体或EV71抗原适配子序列；
EV抗体或EV抗原适配子序列；
CAV16抗体或CAV16抗原适配子序列；
针对EV 5’端非编码区、EV71 VP1区、CAV16特征核酸序列各区段基因中的DNA分子探针。
2.根据权利要求1所述的纳米探针芯片，其特征在于所述纳米荧光探针的荧光发射波长范围为300-1000nm。
3.根据权利要求1所述的纳米探针芯片，其特征在于所述EV71抗原的适配子序列为以下5’端经氨基修饰后适配子序列中的至少一种：
5’-NH2-AmMC6-ATACGGGAGCCAACACCA-TTCTATCGTTCCGGACGCTTATGCCTTGCCATCTAC-AGAGCAGGTGTGACGGAT-3’；
5’-NH2-AmMC6-ATCCGTCACTCCTGCTCT-GTAGATGGCAAGGCATAAGCGTCCGGAACGATAGAA-TGGTGTTGGCTCCCGTAT-3’；
5’-NH2-AmMC6-ATACGGGAGCCAACACCA-TGAATATCTCTTCTACCTCCTCTCCTCCCTTTACTT-AGAGCAGGTGTGACGGAT-3’。
4.一种检测手足口病病原的纳米探针芯片的应用方法，其特征在于包括以下步骤：第一步：通过筛选针对EV病原的抗体、多肽、适配子序列以及核酸引物序列，确定特异识别EV病原的特异检测分子；
第二步、对上述特异检测分子进行纳米荧光探针标记，得到纳米探针芯片；
第三步、将信号探针与待测病原分子进行化学偶联，得到信号探针-病原分子复合物；
第四步、将纳米探针芯片与信号探针-病原分子复合物混合反应；
第五步、将第四步中的反应产物通过荧光分光光度计或者荧光图谱扫描仪检测，根据纳米荧光探针荧光强度的变化诊断待测病原分子的浓度。
5.根据权利要求4所述检测手足口病病原的纳米探针芯片的应用方法，其特征在于所述信号探针为金属纳米粒子、金纳米粒子、BHQ-2、Cy3、Cy5分子中的一种或者几种，与待测病原分子进行化学交联，得到信号探针-病原分子复合物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 201110067159 CN102279172B (zh) | 2011-03-20 | 2011-03-20 | 一种检测手足口病病原的纳米探针芯片及其应用方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 201110067159 CN102279172B (zh) | 2011-03-20 | 2011-03-20 | 一种检测手足口病病原的纳米探针芯片及其应用方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN102279172A true CN102279172A (zh) | 2011-12-14 |
| CN102279172B CN102279172B (zh) | 2013-11-06 |
Family
ID=45104740
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN 201110067159 Active CN102279172B (zh) | 2011-03-20 | 2011-03-20 | 一种检测手足口病病原的纳米探针芯片及其应用方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN102279172B (zh) |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104792999A (zh) * | 2015-03-24 | 2015-07-22 | 中国科学院上海微系统与信息技术研究所 | 一种基于双纳米金探针检测标志物的蛋白芯片 |
| CN105087772A (zh) * | 2015-06-26 | 2015-11-25 | 上海恒健生物技术有限公司 | 一种液相基因芯片检测方法、液相基因芯片及试剂盒 |
| CN105087772B (zh) * | 2015-06-26 | 2018-06-01 | 上海恒健生物技术有限公司 | 一种液相基因芯片检测方法、液相基因芯片及试剂盒 |
| CN108707607A (zh) * | 2018-06-08 | 2018-10-26 | 邵玉芹 | 一种能特异性检测ev71病毒的适配体及试剂盒 |
| CN109735548A (zh) * | 2019-03-25 | 2019-05-10 | 镇江市第一人民医院 | Ev71单链dna适配体及利用双适配体检测肠道病毒71型的化学发光检测试剂盒 |
| CN114058721A (zh) * | 2021-11-18 | 2022-02-18 | 江苏大学 | 一种上转换荧光识别探针的制备方法及其产品和应用 |
-
2011
- 2011-03-20 CN CN 201110067159 patent/CN102279172B/zh active Active
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| 崔仑标等: "手足口病病原液相芯片检测方法的建立", 《江苏预防医学》 * |
| 廖英等: "手足口病病原学检测及临床特点相关性研究", 《吉林医学》 * |
| 李娟娟等: "功能化ZnS 纳米荧光探针荧光猝灭法测定丙硫氧嘧啶", 《浙江大学学报（理学版）》 * |
| 许智祥等: "新型银离子纳米荧光探针研究", 《分析科学学报》 * |
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104792999A (zh) * | 2015-03-24 | 2015-07-22 | 中国科学院上海微系统与信息技术研究所 | 一种基于双纳米金探针检测标志物的蛋白芯片 |
| CN105087772A (zh) * | 2015-06-26 | 2015-11-25 | 上海恒健生物技术有限公司 | 一种液相基因芯片检测方法、液相基因芯片及试剂盒 |
| CN105087772B (zh) * | 2015-06-26 | 2018-06-01 | 上海恒健生物技术有限公司 | 一种液相基因芯片检测方法、液相基因芯片及试剂盒 |
| CN108707607A (zh) * | 2018-06-08 | 2018-10-26 | 邵玉芹 | 一种能特异性检测ev71病毒的适配体及试剂盒 |
| CN109735548A (zh) * | 2019-03-25 | 2019-05-10 | 镇江市第一人民医院 | Ev71单链dna适配体及利用双适配体检测肠道病毒71型的化学发光检测试剂盒 |
| CN109735548B (zh) * | 2019-03-25 | 2022-04-26 | 镇江市第一人民医院 | Ev71单链dna适配体及利用双适配体检测肠道病毒71型的化学发光检测试剂盒 |
| CN114058721A (zh) * | 2021-11-18 | 2022-02-18 | 江苏大学 | 一种上转换荧光识别探针的制备方法及其产品和应用 |
| CN114058721B (zh) * | 2021-11-18 | 2024-04-16 | 江苏大学 | 一种上转换荧光识别探针的制备方法及其产品和应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN102279172B (zh) | 2013-11-06 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Abid et al. | Biosensors as a future diagnostic approach for COVID-19 | |
| Nguyen et al. | Sensitive detection of influenza a virus based on a CdSe/CdS/ZnS quantum dot-linked rapid fluorescent immunochromatographic test | |
| Sadeghi et al. | Lateral flow assays (LFA) as an alternative medical diagnosis method for detection of virus species: The intertwine of nanotechnology with sensing strategies | |
| Vaculovicova et al. | Nanotechnology-based analytical approaches for detection of viruses | |
| Roberts et al. | Japanese encephalitis virus: a review on emerging diagnostic techniques | |
| Hsiao et al. | Fluorescent nanodiamond-based spin-enhanced lateral flow immunoassay for detection of SARS-CoV-2 nucleocapsid protein and spike protein from different variants | |
| Gao et al. | Rolling circle amplification integrated with suspension bead array for ultrasensitive multiplex immunodetection of tumor markers | |
| CN102279172B (zh) | 一种检测手足口病病原的纳米探针芯片及其应用方法 | |
| Xu et al. | EuNPs-mAb fluorescent probe based immunochromatographic strip for rapid and sensitive detection of porcine epidemic diarrhea virus | |
| Mao et al. | Upconversion-mediated CRISPR-Cas12a biosensing for sensitive detection of ochratoxin A | |
| Sajjanar et al. | Peptide-activated gold nanoparticles for selective visual sensing of virus | |
| CN102608090B (zh) | 一种基于量子点均相免疫检测病毒的方法 | |
| CN102230032B (zh) | 一种病原体核酸的等温链多重检测卡 | |
| CN102967708B (zh) | 一种基于均相免疫同步荧光检测多个疾病标志物的方法 | |
| Zhu et al. | A colorimetric aptasensor for the simple and rapid detection of human papillomavirus type 16 L1 proteins | |
| He et al. | Rapid detection of SARS-CoV-2: The gradual boom of lateral flow immunoassay | |
| Zhang et al. | Second near-infrared fluorescent dye for lateral flow immunoassays rapid detection of influenza A/B virus | |
| Gu et al. | Ultrasensitive detection of SARS-CoV-2 S protein with aptamers biosensor based on surface-enhanced Raman scattering | |
| CN109828107A (zh) | 一种多原子元素标记探针及其制备方法与应用 | |
| CN107636461B (zh) | 利用多个金属纳米标签的多个靶标的同时分析方法 | |
| Zhu et al. | Competitive adsorption on gold nanoparticles for human papillomavirus 16 L1 protein detection by LDI-MS | |
| CN103728278B (zh) | 表面活性剂的作用、表面等离子共振检测低分子量物质的信号放大的方法 | |
| GhaderiShekhiAbadi et al. | Magnetic biosensors for identification of SARS-CoV-2, Influenza, HIV, and Ebola viruses: A review | |
| CN101550457B (zh) | 一种检测手足口病病原的液相芯片及其制备方法和应用 | |
| Yang et al. | Specific detection of foot-and-mouth disease serotype Asia 1 virus by carboxyl-magnetic beads conjugated with single-domain antibody |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| TR01 | Transfer of patent right | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20181204 Address after: 214000 No. 88, Meiliang West Road, Mashan, Binhu District, Wuxi City, Jiangsu Province Patentee after: WUXI FOXGENE Co.,Ltd. Address before: 310020 No. 268 Triumph Road, Jianggan District, Hangzhou City, Zhejiang Province Patentee before: Qi Li Feng |
|
| TR01 | Transfer of patent right | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20210330 Address after: Room 102, building 2, 947 Jinle Road, Baoshan District, Shanghai, 200941 Patentee after: Shanghai Nao Biotechnology Co.,Ltd. Address before: 214000 No. 88, Meiliang West Road, Mashan, Binhu District, Wuxi City, Jiangsu Province Patentee before: WUXI FOXGENE Co.,Ltd. |
|
| TR01 | Transfer of patent right | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20231122 Address after: 200000 Siping Road 1239, Shanghai, Yangpu District Patentee after: Qi Lifeng Address before: Room 102, building 2, 947 Jinle Road, Baoshan District, Shanghai, 200941 Patentee before: Shanghai Nao Biotechnology Co.,Ltd. |