CN102274254B - 一种空心莲子草有效部位群提取物的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种空心莲子草有效部位群提取物的制备方法，其步骤为：1、取空心莲子草药材用乙醇回流提取；2、将醇提液减压回收，并将药液稀释后过滤；3、滤液通过D101大孔吸附树脂柱吸附并用蒸馏水和不同浓度的乙醇洗脱；4、将洗脱液减压回收，浓缩至相对密度1.01-1.10，干燥即得。本发明得到空心莲子草有效部位群提取物产品中总黄酮含量可达3-5wt%，转移率为50-70%；总皂苷含量可达15-18wt%，转移率为40-60%。本发明所得有效部位群提取物的制备工艺国内外未见相关资料报道。其提取纯化工艺简单，有效物质含量较高，降低了生产成本，节约了能源，减少了生产中的安全隐患，符合中药产业现代化的要求。

Description

一种空心莲子草有效部位群提取物的制备方法

技术领域

本发明属于中药有效部位群的提取纯化技术领域，更具体涉及一种空心莲子草有效部位群提取物的制备方法，该方法能有效提取出空心莲子草中的总黄酮和总皂苷。

背景技术

空心莲子草[Alternanthera philoxeroides(Mart.)Griseb]为苋科(Amaranthaceae)莲子草属(Alternanthera)多年生宿根草本植物，曾收载于《中国药典》1977年版一部，具有清热解毒、凉血利尿的功效。近20年的文献报道，空心莲子草具有抗病毒、调节免疫、抗肝损伤等作用，临床上用于治疗荨麻疹、流行性感冒、乙型脑炎、流行性出血热等病毒性疾患。莲子草属植物含有多种化学成分，迄今已从中分离鉴定的化学成分包括：三萜类、黄酮类、生物碱、内酰胺、有机酸类、植物甾醇类、氨基酸和无机盐等。本实验室近20多年对空心莲子草的抗病毒研究表明，乙酸乙酯部位和正丁醇部位为主要活性部位。因此，开发空心莲子草有效部位群提取物具有重要意义。

目前关于空心莲子草的药效物质的提取纯化方法仅收载于1977年版《中国药典》，其方法为水提醇沉，并用醋酸铅沉淀，再用硫化氢脱铅。此方法工艺落后，质量不可控，并且非常容易引起铅中毒，因此日后的药典中并未将此制备工艺收录其中。目前关于空心莲子草的药效物质的提取纯化方法尚未见报道，而国内外有效抗病毒药物较少，抗病毒药物仍是国内外学者研究的热点。空心莲子草的自然资源十分丰富，具有广谱抗病毒作用，而且积累了一定临床用药经验，因此其开发应用前景广阔。

发明内容

针对现有技术中存在的不足，本发明的目的在于提供了一种空心莲子草有效部位群提取物的制备方法。

为了实现上述目的，本发明采用的技术措施如下：

一种空心莲子草有效部位群提取物的制备方法，其步骤如下：

a.称取空心莲子草[Alternanthera philoxeroides(Mart.)Griseb]药材(水生空心莲子草干燥后粉碎成段，长度约1cm)，每次按照其重量的6-10倍加入50-70v/v％乙醇先浸泡0.5-2小时，再加热回流提取1-3小时后过滤得乙醇提取液，提取1-3次后合并乙醇提取液；

b.将合并的乙醇提取液减压回收乙醇，然后将剩余药液用蒸馏水稀释至以生药量计浓度为0.1-0.2g/ml，静置过滤后，得到滤液；

c.滤液以每小时0.5-3倍柱床体积的流速通过径高比为1∶4-1∶12的D101大孔吸附树脂柱(树脂重量：药材重量＝1∶0.4-1∶0.6)，然后先用2-5倍树脂质量的水以每小时0.5-3倍柱床体积的流速进行洗脱并弃去水洗液，再用2-4倍柱床体积的10-30v/v％的乙醇以每小时0.5-3倍柱床体积的流速进行洗脱并弃去醇洗液，最后再用2-6倍柱床体积的40-90v/v％的乙醇以每小时0.5-3倍柱床体积的流速洗脱树脂上的有效物质并收集此部分乙醇洗脱液；

d.将步骤c收集的乙醇洗脱液进行减压浓缩回收乙醇，浓缩至相对密度为1.01-1.10，浓缩液经喷雾干燥，即得到空心莲子草有效部位群的提取物。

上述提取方法的优选条件为：

步骤a中，每次按照药材重量的6-10倍加入60v/v％乙醇浸泡1小时，然后回流提取，提取次数为3次，第一次为2小时，第二次为1小时，第三次为1小时；

步骤b中，将合并的乙醇提取液减压回收，然后将剩余药液稀释至以生药量计浓度为0.15g/ml；

步骤c中，首先将滤液以每小时2倍柱床体积的流速通过径高比为1∶8的D101大孔树脂进行吸附，然后用4.5倍树脂质量的水以每小时2倍柱床体积的流速洗脱并弃去水洗液，再用2倍柱床体积的20v/v％的乙醇以每小时2倍柱床体积的流速洗脱并弃去醇洗液，最后用4倍柱床体积的70v/v％的乙醇以每小时2倍柱床体积的流速洗脱树脂上的有效物质并收集此部分乙醇洗脱液；

步骤d中，喷雾干燥条件为：进风口温度为175℃，出风口温度为85℃，雾化盘转速为20000转/分钟。

利用本发明方法制备得到的提取物中总黄酮的含量可达3-5wt％，转移率为50-70％；总皂苷的含量可达15-18wt％，转移率为40-60％。

与现有技术相比，本发明方法具有以下优点：

1.本发明采用乙醇作为空心莲子草的提取溶媒，提取液用D101大孔吸附树脂纯化得到总黄酮和总皂苷提取物，工艺流程简单，有效物质含量较高，生产成本低，节约了能源，控制了环境污染，减少了生产中的安全隐患，符合中药产业现代化的要求。

2.本发明采用D101大孔吸附树脂技术提取纯化有效部位群，具有工艺简单，成本低的优点，树脂可反复使用，适合工业生产的特点。与77年版《中国药典》的铅盐沉淀法相比，用药更安全，质量更可控。而且本发明方法中的相关技术参数进行了细致周密的考察，优选出最佳条件，并进行了中试验证，证明可过渡到产业化，提高了有效物质的纯度。

具体实施方式

下面结合具体的实施例对本发明方法做进一步的详细说明。

实施例1

一种空心莲子草有效部位群提取物的制备方法，步骤如下：

a、称取空心莲子草药材，按照其重量的6-10倍加入浓度为60v/v％的乙醇先浸泡1h，然后回流提取，共提取三次，合并三次提取液，得乙醇提取液；

第一次提取时60v/v％的乙醇加入量为药材重量的10倍，第二次为药材重量的8倍，第三次为药材重量的6倍；

第一次回流提取的时间为2小时，第二和第三次回流提取的时间均为1小时。

b、将乙醇提取液减压回收乙醇，剩余的药液稀释至以生药量计浓度为0.15g/ml，静置后过滤，得到滤液；

c、滤液首先以每小时2倍柱床体积的流速通过径高比为1∶8的D101大孔吸附树脂柱进行吸附(树脂重量∶药材重量＝1∶0.5)，先用4.5倍树脂质量的水以每小时2倍柱床体积的流速进行洗脱并弃去水洗液，再用2倍柱床体积的20v/v％的乙醇以每小时2倍柱体积的流速洗脱并弃去醇洗液，最后再用4倍柱床体积的70v/v％的乙醇以每小时2倍柱床体积的流速洗脱树脂上的有效物质并收集此部分乙醇洗脱液；

d、将步骤c收集的乙醇洗脱液进行减压浓缩回收乙醇，药液浓缩至相对密度为1.05，浓缩液经喷雾干燥，得到空心莲子草有效部位群提取物；

喷雾干燥条件为：进风口温度为175℃，出风口温度为85℃，雾化盘转速为20000转/分钟。

得到的提取物中总黄酮的含量达5wt％，转移率为65％；总皂苷的含量达17wt％，转移率为57％。

实施例2中试放大试验

一种空心莲子草有效部位群提取物的制备方法，步骤如下：

a、称取12Kg空心莲子草药材，每次加6-10倍药材重量的60v/v％乙醇先浸泡1小时后，再加热回流提取，一共提取三次，合并三次提取液，得乙醇提取液；

第一次提取时60v/v％乙醇加入量为药材重量的10倍，第二次为药材重量的8倍，第三次为药材重量的6倍；

第一次回流提取的时间为2小时，第二和第三次回流提取的时间均为1小时；

b、将乙醇提取液减压回收乙醇，剩余药液稀释至体积为80L(以生药量计浓度为0.15g/ml)，抽滤得上样药液；

c、将24Kg药用级D101型大孔吸附树脂用适量乙醇浸泡，湿法装柱，处理后备用。以2Bv/h的加样流速进行吸附，树脂床径高比为1∶8，吸附完毕后，用4.5倍树脂质量的蒸馏水以2Bv/h的流速洗脱并弃去水洗液，再用2倍柱床体积20v/v％的乙醇以每小时2倍柱床体积流速进行洗脱并弃去醇洗液，最后再用4倍树脂柱体积的70v/v％乙醇以2Bv/h的流速进行洗脱，收集此部分乙醇洗脱液；

d、将步骤c收集的乙醇洗脱液减压浓缩回收乙醇，浓缩至相对密度为1.05，然后将浓缩液喷雾干燥(进风口温度为175℃，出风口温度为85℃，雾化盘转速为20000转/分钟)，得到空心莲子草有效部位群提取物。

采用紫外-可见分光光度法测量提取物中有关物质的含量，计算转移率(转移率＝提取物中的含量/原药材中的含量×100％)和收膏率(收膏率＝提取物总重量/原药材总重量×100％)。

采用上述方法，取12Kg空心莲子草药材，共3批，进行空心莲子草有效部位群提取纯化中试放大试验，结果见下表。

中试试验结果

结果表明：提取物中总黄酮和总皂苷含量之和可达22wt％，总黄酮和总皂苷转移率均在55％以上。表明本试验研究的工艺参数可行，工艺条件经中试进一步调整后，可过渡到产业化生产。

Claims (1)

1.一种空心莲子草有效部位群提取物的制备方法，步骤如下：

a、称取空心莲子草药材，按照其重量的6-10倍加入浓度为60v/v %的乙醇先浸泡1h，然后回流提取，共提取三次，合并三次提取液，得乙醇提取液；

第一次提取时60v/v %的乙醇加入量为药材重量的10倍，第二次为药材重量的8倍，第三次为药材重量的6倍；

第一次回流提取的时间为2小时，第二和第三次回流提取的时间均为1小时；

b、将乙醇提取液减压回收乙醇，剩余的药液稀释至以生药量计浓度为0.15g/ml，静置后过滤，得到滤液；

c、滤液首先以每小时2倍柱床体积的流速通过径高比为1：8的D101大孔吸附树脂柱进行吸附，先用4.5倍树脂质量的水以每小时2倍柱床体积的流速进行洗脱并弃去水洗液，再用2倍柱床体积的20v/v%的乙醇以每小时2倍柱体积的流速洗脱并弃去醇洗液，最后再用4倍柱床体积的70v/v％的乙醇以每小时2倍柱床体积的流速洗脱树脂上的有效物质并收集此部分乙醇洗脱液，树脂重量:药材重量=1：0.5；

d、将步骤c收集的乙醇洗脱液进行减压浓缩回收乙醇，药液浓缩至相对密度为1.05，浓缩液经喷雾干燥，得到空心莲子草有效部位群提取物；

喷雾干燥条件为：进风口温度为175℃，出风口温度为85℃，雾化盘转速为20000转/分钟。