CN102247399B - 一种治疗猪链球菌病的药物组合物及注射液 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种治疗猪链球菌病的药物组合物，主要是由以下重量份的药物组分组成：盐酸林可霉素5-10份，硫酸庆大霉素1-5份，安乃近15-25份，肌苷2-8份，抗氧剂0-0.5份。本发明治疗猪链球菌病的药物组合物，在盐酸林可霉素和硫酸庆大霉素作为主要的抗生素的基础上加入安乃近和肌苷，能显著降低药物组合物的最小抑菌浓度（MIC），同时安乃近具有解热、镇痛、抗炎的作用，能快速、有效的解决猪链球菌及其它病原微生物混合、继发感染引起的高热高烧，使体温快速恢复正常，还有缓解炎症的作用。肌苷能提高各种酶的活性，刺激机体产生抗体，增强机体免疫力；本发明的药物组合物适用于猪链球菌病及其混合、继发感染的情况。

Description

一种治疗猪链球菌病的药物组合物及注射液

技术领域

本发明涉及一种治疗猪链球菌病的药物组合物，同时涉及一种采用该药物组合物的注射液及制备方法，属于兽药技术领域。

背景技术

我国现已将猪链球菌病列为猪主要传染病之一，本病一年四季均可发生，但在夏秋炎热、潮湿的季节多发，多呈散发和地方流行，偶有爆发，而且各种日龄猪均可感染。随着我国规模化养猪业的发展，猪链球菌病已成为一种常见病和多发病，流行范围不断扩大，发病率不断提高，尤其是在饲养管理方面，猪舍封闭、饲养密度大、通风不良、阉割和注射消毒不严等都是造成该病爆发的主要原因。

猪链球菌是猪群中一种常见的条件致病菌，在世界范围内分布十分广泛，共35个血清型，导致疫苗防控效果差，常常造成免疫失败，临床上普遍采用药物治疗和预防。CN101543506A公开了一种预防或治疗猪链球菌病的复方抗生素组合物，该组合物中含有在治疗上有效量的盐酸林可霉素和硫酸庆大霉素，并阐述了盐酸林可霉素和硫酸庆大霉素对猪链球菌分离株具有协同作用和相加作用，联用后的MIC均有不同程度的降低，将二者合用可提高疗效、减少耐药发生和降低毒副反应。

但是经研究发现，由猪链球菌因其的猪链球菌病还常常与猪附红细胞体病、巴氏杆菌病、猪副嗜血杆菌病、传染性胸膜肺炎等混合、继发感染，也是一些病毒性疾病如猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪圆环病毒Ⅱ型感染等的继发病，给我国养殖业造成了极大的经济损失。因此，急需寻找一种高效的药物，用于预防和治疗猪链球菌病及其混合、继发感染，减少养猪业经济损失。

发明内容

本发明的目的是提供一种用于预防和治疗猪链球菌病的药物组合物，提高抗菌效果。

为了实现以上目的，本发明所采用的技术方案是：一种治疗猪链球菌病的药物组合物，主要是由以下重量份的药物组分组成：盐酸林可霉素5-10份，硫酸庆大霉素1-5份，安乃近15-25份，肌苷2-8份，抗氧剂0-0.5份。

所述抗氧剂的用量为0.1-0.5份。

所述抗氧剂为亚硫酸氢钠。

本发明治疗猪链球菌病的药物组合物中，盐酸林可霉素和硫酸庆大霉素作为主要的抗生素，共同使用具有协同增效作用，降低最小抑菌浓度（MIC）。在盐酸林可霉素和硫酸庆大霉素基础上加入的安乃近，能配合盐酸林可霉素和硫酸庆大霉素显著降低MIC，同时安乃近具有解热、镇痛、抗炎的作用，能快速、有效的解决猪链球菌及其它病原微生物混合、继发感染引起的高热高烧，使体温快速恢复正常，还有缓解炎症的作用。在上述三种药物作用的基础上加入肌苷，肌苷对细胞膜有良好的通透性，能直接进入细胞，转变为核苷酸，再进一步变成ATP参与代谢，有促进肝细胞恢复，保护肝脏的作用，并能提高各种酶的活性，刺激机体产生抗体，增强机体免疫力。本发明的药物组合物适用于猪链球菌病及其混合、继发感染的情况。

本发明治疗猪链球菌病的药物组合物可以制成注射液剂型，即每100L注射液中含有盐酸林可霉素5-10 kg、硫酸庆大霉素1-5 kg，安乃近15-25kg，肌苷2-8kg，抗氧剂0-0.5kg。抗氧剂的用量优选为0.1-0.5份，抗氧剂优选为亚硫酸氢钠。治疗猪链球菌病的注射液可以采用常规方法制得：

1）称取盐酸林可霉素5-10 kg、硫酸庆大霉素1-5 kg，安乃近15-25kg，肌苷2-8kg，抗氧剂0-0.5kg；

2）取适量的注射用水分别溶解称取的盐酸林可霉素、硫酸庆大霉素、安乃近、肌苷和抗氧剂；

3）将步骤2）中溶解的各溶液混合在一起，再加入注射用水至100L，搅拌均匀，调整pH为4.0-5.0，过滤即得。

本发明的治疗猪链球菌病的药物组合物还可以采用常规的其它剂型，如散剂，称取过筛后的各组份原料充分混合后得到的组合物。

具体实施方式

实施例1

本实施例的治疗猪链球菌病的药物组合物主要是由以下重量份的药物组分组成：盐酸林可霉素5份，硫酸庆大霉素1份，安乃近15份，肌苷2份，抗氧剂0.1份。

本实施例的药物组合物采用注射液剂型，即每100 L注射液中含有盐酸林可霉素5 kg、硫酸庆大霉素1kg，安乃近15kg，肌苷2kg，亚硫酸氢钠0.1kg。其是由以下方法制备而成：

1）称取盐酸林可霉素5 kg、硫酸庆大霉素1 kg，安乃近15kg，肌苷2kg，抗氧剂0.1kg；

2）取适量的注射用水分别溶解称取的盐酸林可霉素、硫酸庆大霉素、安乃近、肌苷和抗氧剂；

3）将步骤2）中溶解的各溶液混合在一起，再加入注射用水至100L，搅拌均匀，调整pH为4.0，过滤即得。过滤后还可以灌封、100℃灭菌30分钟，得到注射液产品。

实施例2

本实施例的治疗猪链球菌病的药物组合物主要是由以下重量份的药物组分组成：盐酸林可霉素7份，硫酸庆大霉素3份，安乃近20份，肌苷5份，抗氧剂0.3份。

本实施例的药物组合物采用注射液剂型，即每100 L注射液中含有盐酸林可霉素7kg、硫酸庆大霉素3kg，安乃近20kg，肌苷5kg，亚硫酸氢钠0.3kg。其是由以下方法制备而成：

1）称取盐酸林可霉素7 kg、硫酸庆大霉素3 kg，安乃近20kg，肌苷5kg，抗氧剂0.3kg；

2）取适量的注射用水分别溶解称取的盐酸林可霉素、硫酸庆大霉素、安乃近、肌苷和抗氧剂；

3）将步骤2）中溶解的各溶液混合在一起，再加入注射用水至100L，搅拌均匀，调整pH为4.5，过滤即得。过滤后还可以灌封、100℃灭菌30分钟，得到注射液产品。

实施例3

本实施例的治疗猪链球菌病的药物组合物主要是由以下重量份的药物组分组成：盐酸林可霉素10份，硫酸庆大霉素5份，安乃近25份，肌苷8份，抗氧剂0.5份。

本实施例的药物组合物采用注射液剂型，即每100 L注射液中含有盐酸林可霉素10kg、硫酸庆大霉素5kg，安乃近25kg，肌苷8kg，亚硫酸氢钠0.5kg。其是由以下方法制备而成：

1）称取盐酸林可霉素10kg、硫酸庆大霉素5 kg，安乃近25kg，肌苷8kg，抗氧剂0.5kg；

2）取适量的注射用水分别溶解称取的盐酸林可霉素、硫酸庆大霉素、安乃近、肌苷和抗氧剂；

3）将步骤2）中溶解的各溶液混合在一起，再加入注射用水至100L，搅拌均匀，调整pH为5.0，过滤即得。过滤后还可以灌封、100℃灭菌30分钟，得到注射液产品。

实验例1： 体外抑菌试验

1、药物与菌株

1.1试验药物

盐酸林可霉素标准品、硫酸庆大霉素标准品：本实验室自配盐酸林可霉素、硫酸庆大霉素无菌水溶液，浓度分别为1280ug/ml，备用；

本发明实施例1-3所制得的注射液；

对照药物为实验室自制盐酸林可霉素和硫酸庆大霉素复方注射液，盐酸林可霉素和硫酸庆大霉素重量比为3：8，使用无菌水配置成两霉素的总浓度为1024 ug/ml的混合液，备用。

1.2试验菌株

猪链球菌（质控菌ATCC29213），购自中国兽药监察所。

2、试验方法

采用试管两倍稀释法测定本发明实施例注射液、对照药物对猪链球菌最小抑菌浓度MIC。试验中每种药物均设10个梯度，第11支试管作阳性对照，第12支试管作阴性对照。

本发明实施例注射液浓度梯度处理：首先将各实施例注射液用无菌注射用水稀释到浓度为10ug/ml，在第一管中加入2ml浓度为10ug/ml的抗菌药物稀释液，按照倍比稀释法使1-10管药物依次成1：2、1：4、1：8………1：1024浓度梯度。

盐酸林可霉素、硫酸庆大霉素、对照药物注射液的浓度梯度处理：首先分别将药物浓度稀释为8 ug/ml，在第一管中加入2ml浓度为8ug/ml的抗菌药物稀释液，按照倍比稀释法使1-10管药物依次成1：2、1：4、1：8………1：1024浓度梯度。

3、试验结果

试验结果见表1所示。

表1  各实施例及对照药物对猪链球菌的MIC值

试验药物	盐酸林可霉素	硫酸庆大霉素	实施例1	实施例2	实施例3	对照药物
							MIC(ug/ml)	0.5	1.0	0.156	0.078	0.156	0.25

从表1所示数据可看出本发明实施例注射液对猪链球菌的最小抑菌浓度最大为0.156 ug/ml。与对照药物相比，本发明实施例注射液的最小抑菌浓度明显下降，说明安乃近促进了盐酸林可霉素和硫酸庆大霉素的抗菌效果。

实验例2：动物试验例

（一）用本发明治疗猪链球菌病的疗效观察。

临床诊断标准：在流行初期，突然发病，往往前一天晚上未见任何症状，次日凌晨己死亡；体温升到41℃以上，有的在数小时至1天内死亡。急性病猪表现为精神沉郁、食欲废绝，体温41℃左右、呈稽留热、心跳加快，眼结膜潮红、结膜发绀、流泪，口、鼻流出淡红色泡沫样液体，便秘、卧地不起，呼吸浅表而快。部分病猪出现转圈、空嚼、磨牙、颈部强直、角弓反张或昏睡等神经症状。部分病猪则出现多发性关节炎、跛行、爬行或不能站立，四肢呈划水状。

疾病后期：四肢下端、耳尖、腹下可见有紫红色或出血性红斑，颈部、背部局部皮肤出现充血、发绀。死前出现呼吸困难，急促，间有咳嗽，尿赤褐色，体温降低至常温或低于常温以下，天然孔出现暗红色或淡黄的液体，最后衰竭死亡，病死率高达87%以上。

病理解剖诊断标准：死后剖检可见死亡的病猪均呈典型的败血症变化，出血明显、各器官充血、皮下、黏膜、浆膜出血，血凝不良、呈酱油色。

实验室诊断标准：（1）无菌方式采取病死猪的肝、脾、肾、淋巴结、心、血涂片和触片，干燥、火焰固定后，经革兰氏染色，镜检可见革兰氏阳性球菌，排列成短链状。（2）无菌采取心、肝、肾、脾的病料划线于鲜血琼脂平板上，37℃培养24 h，在鲜血琼脂平板上形成微小、圆形、边缘整齐、略带灰白色、露滴样、有明显的β型溶血环的菌落。挑取单个菌落将其接种于含有血清的肉汤中，37℃培养18 h，可见肉汤上部澄清，管底有少量沉淀物。

试验动物：河南省周口市某养猪场，患病猪40头，综合诊断为猪链球菌病。

试验方法：将诊断为链球菌病的患猪随机分为实验组和对照组，试验组14头、对照组14头、空白组12头。实验组猪采用的治疗方法是取本发明实施例2的注射液，直接肌注，每kg体重肌注0.1ml，每天1次，连用2-3天；对照组猪治疗方法为：采用本公司实验室自制盐酸林可霉素和硫酸庆大霉素复方注射液，二者按3：8的重量比例制成，每kg体重肌注0.1ml，每天1次，连用3-5天。

空白组猪不采取任何治疗措施。

疗效诊断标准：（1）痊愈：临床症状完全消失；（2）显效：临床症状减轻，但未完全消失；（3）无效：临床症状无明显变化，病情未见减轻，甚至出现恶化。

试验结果：

试验结果显示，试验组病猪注射本发明注射液1天后，体温恢复正常、食欲增加、精神明显好转，连续用要3天后，大部分猪被治愈，未见继发感染；对照组用药3天后基本控制病情，病猪好转，个别病情严重的猪已经死亡，连续用药5天后，大部分猪被治愈；空白组不采取任何治疗措施，病情加重，多数病猪死亡。具体见表2所示。

表2 临床用药治疗效果观察结果

组别	头数	死亡头数	死亡率	治愈头数	治愈率	有效头数	有效率
								试验组	14	0	0	13	92.85%	14	100%
对照组	14	2	14.28%	11	78.57%	12	85.71%
								空白组	12	8	66.66%	——	——	——	——

 从表2可以看出试验组的治愈率为92.85%和有效率100%，均高于对照组和空白组，说明本发明同以往的药物相比较具有疗效高、见效快的优势，更能满足当前养猪场的需要。

（二）用本发明治疗猪链球菌、猪附红细胞体病混合感染的疗效观察。

临床诊断标准：病猪精神高度集中沉郁、皮肤发红或发紫，尤其是腹下、耳朵、耳后、眼圈、眼结膜潮红或发绀、流泪；呼吸困难；口鼻流出淡红色泡沫样液体。严重猪驱赶不起、四肢呈游泳状、就地排泄、腹泻带血、尿液发黄、体温高达41℃-42℃。

剖检诊断标准：血液凝固不良且手感稀薄；咽喉部有绿豆大小的出血性溃疡灶，气管充血并有大量泡沫，肺部大面积淤块状血；皮下有大量出血点并黄染，全身淋巴结肿大出血，切面多汁并有化脓现象。胸腔有大量混浊液体，腹腔内有大量黄色液体，肝脏肿大呈棕黄色，肝有脂肪变性，胆汁浓稠，肝有出血性梗死区，脾被膜有结节，结构模糊，肺、心都有不同程度的炎症变化。肾脏肿大，颜色淡黄。

实验室诊断标准：猪链球菌的诊断同试验（一）中方法；血液片镜检发现红细胞成锯齿状、星状等不规则形态。

试验动物：河南省洛阳市某养猪场，患病猪75头，综合诊断为猪链球菌病与猪附红细胞体混合感染。

试验方法：将诊断为链球菌病的患猪随机分为实验一、二、三组，对照组和空白对照组，共5组，每组平均15头。实验组猪采用的治疗方法是取本发明实施例1、2、3注射液，直接肌注，每kg体重肌注0.1ml，每天1次，连用2-3天；对照组猪治疗方法为：采用本公司实验室自制盐酸林可霉素和硫酸庆大霉素复方注射液，每kg体重肌注0.1ml，每天1次，连用3-5天。空白组猪不采取任何治疗措施。

疗效诊断标准：同试验（一）。

试验结果：

从表3可以看出，试验组治疗效果明显高于对照组，死亡率显著降低，治愈率、有效率显著升高。说明本发明对于猪链球菌、猪附红细胞体混合感染的治疗效果明显优于盐酸林可霉素和硫酸庆大霉素复方注射液。

表3  临床用药治疗效果观察结果

组别	头数	死亡头数	死亡率	治愈头数	治愈率	有效头数	有效率
								试验一组	15	1	6.7%	12	80%	14	93.3%
试验二组	15	0	0	14	93.3%	15	100%
								试验三组	15	0	0	13	86.7%	15	100%
对照组	15	6	40%	7	46.7%	9	60%
								空白组	15	13	86.7%	——	——	——	——

Claims (6)

1.一种治疗猪链球菌病的药物组合物，其特征在于：主要是由以下重量份的药物组分组成：盐酸林可霉素5-10份，硫酸庆大霉素1-5份，安乃近15-25份，肌苷2-8份，抗氧剂0-0.5份。

2.根据权利要求1所述的治疗猪链球菌病的药物组合物，其特征在于：所述抗氧剂的用量为0.1-0.5份。

3.根据权利要求1或2所述的治疗猪链球菌病的药物组合物，其特征在于：所述抗氧剂为亚硫酸氢钠。

4.一种采用如权利要求1所述药物组合物的治疗猪链球菌病的注射液，其特征在于：每100L注射液中含有盐酸林可霉素5-10kg、硫酸庆大霉素1-5kg，安乃近15-25kg，肌苷2-8kg，抗氧剂0-0.5kg。

5.根据权利要求4所述的治疗猪链球菌病的注射液，其特征在于：所述抗氧剂的用量为0.1-0.5kg。

6.根据权利要求4或5所述的治疗猪链球菌病的注射液，其特征在于：所述抗氧剂为亚硫酸氢钠。