CN102240259B - 一种蝉花提取物洗发水及其制备 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种蝉花提取物洗发水及其制备，本发明的蝉花提取物洗发水，含有重量百分比为0.1%-5%的蝉花提取物。本发明的蝉花提取物洗发水将蝉花提取物加入后，大大提高了其中的活性成分如SOD、氨基酸、透明质酸、N⁶-(2-羟乙基)腺苷等的利用率，很好的提高了养护效果，有效降低紫外线对头发头皮的损伤，减少了蝉花的用量，降低了生产成本，节省了宝贵的虫草原料，有着重要的现实和商业意义。

Description

一种蝉花提取物洗发水及其制备

技术领域

本发明属于日用化妆品领域，具体涉及一种蝉花提取物洗发水及其制备。

背景技术

蝉花(Paecilomyces cicadae)是由麦角菌科(claviceplaceae)真菌及寄生于蝉类若虫的干燥复合体，属虫生性药用真菌，药用已有1000多年历史，是我国传统的名贵药材之一，具有多方面的药用价值。主要活性成分：虫草多糖、虫草酸、腺苷、超氧化物歧化酶(SOD)、甾醇、生物碱、维生素等。蝉花具有很强的抗氧化、抗辐射、调节人体免疫的功能，提高食欲，促进睡眠，增强自身抗病的能力。近年来随着人工栽培蝉花技术的发展，有许多蝉花产品陆续面市，如各种蝉花粉、蝉花片剂、蝉花胶囊、及各种蝉花食品等。但是这些产品中所用蝉花粉，均采用传统方法粉碎，无法达到细胞破壁的超微细程度，其中的虫草酸、虫草素、虫草多糖、SOD等活性成分释放量不高，严重的影响了蝉花粉的使用效率。为了保证产品效果，不得不增加剂量，不但导致了成本的增加，而且对宝贵的虫草资源造成了巨大损失和浪费。

发明内容

本发明的目的既是针对现有技术中洗发水的缺陷，提供一种含有蝉花活性成分的洗发水。

本发明的目的是这样实现的：一种蝉花提取物洗发水及其生产方法，采用蝉花提取物配制洗发水，由于蝉花经过人工提取后，其中的活性成分几乎全部溶出，且以可溶性形式存在于提取液中。将提取液加到洗发水中去以后，其中的活性成分如SOD等几乎百分之百能被皮肤吸收，很好的提高了养护效果，减少了蝉花的用量，降低了生产成本，节省了宝贵的虫草原料，有着重要的现实和商业意义。

本发明的蝉花提取物洗发水，含有重量百分比为0.1％-5％的蝉花提取物。

本发明的洗发水中还可包括表面活性剂、调理剂、增稠剂、pH调节剂、防腐剂等其他洗发水用助剂和水。

具体的，可包括下列重量百分比的原料：

表面活性剂                            10％～30％；

调理剂                                0.5％～4％；

增稠剂                                1％～4％；

蝉花提取液                            0.1％～5％；

pH调节剂                              0.01％～0.1％；

防腐剂                                0.02％～0.2％；

水                                    余量

所述蝉花提取物洗发水为弱酸性，如pH值为5.5-7.0。

所述洗发水中还可含有0.1％～0.2％的香精。

所述洗发水中还可含有去屑止痒剂、珠光剂等常规洗发水助剂。

所述表面活性剂选自椰子油酰胺丙基甜菜碱(CAB)、十二烷基甜菜碱(BS-12)、咪唑啉甜菜碱、烷基糖苷(APG)、磺基琥珀酸脂肪醇聚氧乙烯醚二钠盐(MES)、烷醇酰胺、月桂酰胺丙基氧化胺(LAO-30)、脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸铵和十二烷基硫酸铵；所述增稠剂选自氯化钠、氯化铵、氧化胺、聚乙二醇双硬脂酸酯(6501)、聚乙二醇单硬脂酸酯(6501片)、丙二醇、丙三醇；所述调理剂选自聚季铵盐-7(P7)、聚季铵盐-10、阳离子瓜尔胶、十六烷基三甲基氯化铵(1631)、乳化硅油、植物油脂和二甲基硅油；所述去屑止痒剂选自ZPT、OCT、甘宝素；所述pH调节剂选自三乙醇胺和柠檬酸；所述防腐剂选DMDMH、尼泊金甲酯、尼泊金丙酯和卡松，所述珠光剂选自乙二醇双硬脂酸酯、乙二醇单硬脂酸酯。

进一步优化的，本发明的蝉花提取物洗发水，包括下列重量百分比的原料：

脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸铵    5％～20％；

十二烷基硫酸铵            5％～14％；

椰油酰胺丙基甜菜碱        3％～10％，优选3-7％；

聚季铵盐-7                0.5％～4％；

丙二醇                    1％～4％；

蝉花提取液                0.1％～5％；

柠檬酸                    0.01％～0.1％；

卡松                      0.02％～0.2％；

香精                      0.1％～0.2％；

水                        60％～70％。

所述蝉花提取液为以人工培养的蝉拟青霉的发酵产物中的菌质为原料在49-60℃下用水提法获得。

所述蝉拟青霉的菌质为人工培养获得的蝉拟青霉的发酵产物中除去孢梗束后的菌丝体与剩余物质。发酵后从培养基上用剪刀剪下新鲜的孢梗束后的剩余物质即使菌质。

较佳的，所述水提方法包括下列步骤：

将原料与水以重量体积比1∶7～30(W/V为Kg/L)混合，于49-51℃下提取2～4小时，分离水提液，重复多次(较佳为2次)，合并水提取液，减压浓缩即可。较佳的，减压浓缩至总体积为浓缩前的1/4-1/2即得蝉花提取液。

进一步的，本发明还对人工培养获得蝉拟青霉发酵产物的方法进行了优化，包括如下步骤：

1)菌种制备：包括斜面种培养和一级种培养；

其中，斜面种制备包括如下步骤：将分离纯化的蝉拟青霉菌株(Paecilomyces cicadae)移植到PSA培养基斜面试管中，在22℃～25℃下培养5～7天，挑选长势较好的作为斜面种；也可采用现有的蝉拟青霉菌斜面种。

一级种制备包括如下步骤：将斜面种接入马铃薯蔗糖培养液中，在22℃～25℃，振荡频率为130～150r/min的条件下培养3～7天，至锥形瓶内出现大量菌丝球后作为一级种备用；

2)接种：将步骤1)中制得的一级种接入到置有固体培养基的培养器皿中；

3)发酵：接种后的培养器皿移至培养室，在20℃～25℃，空气相对湿度为60％～80％的条件下培养30天～50天；

4)蝉花孢梗束及菌质的采收：一般当蝉花孢梗束高度达9cm左右、表面有少量分生孢子出现时即可采收。

较佳的，步骤1)中，所述PSA培养基中含有如下组分：每1000ml培养基中含有马铃薯200g、蔗糖20g、琼脂20g。其制备方法为：将去皮马铃薯切丁置于容器内加水1000ml，煮沸20min～30min，过滤，加入蔗糖与琼脂，补足水至1000ml，加热溶解，然后分装至试管内，装量为试管长的1/5～1/4，塞上棉塞，置于灭菌锅内0.15MPa压力下灭菌30min，趁热将试管摆放在斜面板上冷却。

较佳的，步骤1)中，所述马铃薯蔗糖培养液中含有如下组分：每1000ml培养液中含有马铃薯200g、蔗糖20g。其制备方法为：将去皮马铃薯切丁置于容器内加水1000ml，煮沸15min～30min，过滤，加入蔗糖，补足水至1000ml，加热溶解，然后分装至锥形瓶内，装量为锥形瓶容量的20％～30％，塞上棉塞，再用牛皮纸包裹，置于灭菌锅内0.15MPa压力下灭菌30min，取出冷却至20℃以下。

较佳的，步骤2)中，所述接种的步骤为：当培养器皿中的固体培养基的温度冷却至20℃以下后，在无菌条件下接种，按照3～5％的接种量将一级种接入培养器皿中。

较佳的，步骤2)中，所述固体培养基的制备原料包括：

基质        42～46重量份；

甘蔗渣      2～10重量份；

贝壳粉      0.1～0.5重量份；

蚕蛹粉      2～5重量份；

硝酸钾      0.1～0.5重量份；

水          44～56重量份；

其中，所述基质选自如下组合中的一种：玉米粉、麸皮和蔗糖的混合物；小麦；大麦；粟和蔗糖的混合物；大米和蔗糖的混合物；高粱和蔗糖的混合物。

优选的，所述玉米粉、麸皮和蔗糖的混合物中，以所述玉米粉、麸皮和蔗糖的混合物的总重量计，玉米粉、麸皮和蔗糖的重量百分比分别为：玉米粉43％～55％、麸皮44％～55％、蔗糖1％～2％。

优选的，所述粟和蔗糖的混合物中，以所述粟和蔗糖的混合物的总重量计，粟和蔗糖的重量百分比分别为：粟98％～99％、蔗糖1％～2％。

优选的，所述大米和蔗糖的混合物中，以所述大米和蔗糖的混合物的总重量计，大米和蔗糖的重量百分比分别为：大米98％～99％、蔗糖1％～2％。

优选的，所述高粱和蔗糖的混合物中，以所述高粱和蔗糖的混合物的总重量计，高粱和蔗糖的重量百分比分别为：高粱98％～99％、蔗糖1％～2％。

优选的，所述固体培养基的制备方法为：先将除蔗糖外的基质煮熟，将蔗糖、硝酸钾在水中溶解，再与甘蔗渣、贝壳粉，蚕蛹粉按照比例混合均匀。

优选的，所述固体培养基中还含有蛋白胨(鱼粉)，且所述蛋白胨(鱼粉)的重量份为0.5重量份。

优选的，步骤2)中，所述固体培养基的碳氮比为80～98。

较佳的，步骤3)中，在固体发酵后期孢梗束生长阶段要求采光，培养过程中需保持空气流通。

较佳的，步骤4)中，所述采收的具体步骤为：去掉透气封口膜，用工具将培养物取出分离孢梗束，烘干分级，干燥后用薄膜袋真空包装，菌质置于-20℃贮存。

采用上述人工培养方法获得的人工栽培蝉拟青霉方法简便、生产成本低、栽培周期短，初步研究表明，所得培养物具有质量高、稳定性好，多糖含量为野生蝉花多糖含量的2倍以上。

本发明的洗发水由下列方法制得：

按配方称取原料，在75-85℃水浴锅中，先将表面活性剂与部分水混匀，降温至55-65℃，再加入调理剂后混匀，继续降温至38-42℃，再加入增稠剂、蝉花提取液、pH调节剂、防腐剂等成分后加入剩余的水，混匀后即可得到成品。

研究表明，本发明的洗发水具有控制头屑的功能。此外本发明的洗发水还可保湿、抗氧化、防静电、有效防止紫外线辐射对头发造成的损伤、修复受损毛囊、改善头皮微环境、使头发乌黑浓密、有效改善发质、定型、控油、可改善染发、烫发后产生的头发毛糙、干枯、分叉问题。

与现有技术相比，本发明具有如下优点：

在蝉花提取物化妆品中，由于蝉花经过人工提取后，其中的活性成分几乎全部溶出，且以可溶性形式存在于提取液中。将提取液加到化妆品以后，其中的活性成分如SOD等几乎百分之百能被皮肤吸收，很好的提高了养护效果，减少了蝉花的用量，降低了生产成本，节省了宝贵的虫草原料，有着重要的现实和商业意义。

附图说明

图1最小抑菌浓度试验结果

图2不同浓度抑菌效果试验结果

具体实施方式

以下列举具体实例以进一步阐述本发明，应理解，实例并非用于限制本发明的保护范围。

实施例1蝉拟青霉发酵产物的获得

1、菌种的制备和培养：

(1)菌种制备：制备马铃薯蔗糖琼脂培养基或马铃薯蔗糖培养液备用；

①斜面种制备：从云南三江源头采集的野生蝉花通过组织分离纯化获得，转管后，在22℃下培养5天，挑选长势好的备用；

②一级种制备：将马铃薯蔗糖培养液装入锥形瓶中，置于灭菌锅内0.15MPa压力下灭菌30min，冷却后在无菌条件下把备用的斜面种接入锥形瓶中，在22℃，振荡频率为130r/min的条件下培养5天，至锥形瓶内出现大量菌丝球后备用；

本实施方式采用的PSA培养基配比为每1000ml培养基：马铃薯200g、蔗糖20g、琼脂20g，其制备方法为将去皮马铃薯切丁置于容器内加水1000ml，煮沸20min，过滤，加入蔗糖与琼脂，补足水至1000ml，加热溶解，然后分装至试管内，装量为试管长的1/4，塞上棉塞，置于灭菌锅内0.15MPa压力下灭菌30min，趁热将试管摆放在斜面板上冷却。

本实施方式采用的马铃薯蔗糖培养液配比为每1000ml培养液：马铃薯200g、蔗糖20g，其制备方法为将去皮马铃薯切丁置于容器内加水1000ml，煮沸30min，过滤，加入蔗糖，补足水至1000ml，加热溶解，然后分装至锥形瓶内，装量为锥形瓶容量的30％，塞上棉塞，再用牛皮纸包裹，置于灭菌锅内0.15MPa压力下灭菌30min，取出冷却至20℃以下。

(2)配料装盒：配制固体培养基，将配好的培养基装入培养盒中，装料量为15％，用透气封口膜封口；本实施方式所述的固体培养基配比为基质42重量份，甘蔗渣2重量份，贝壳粉0.1重量份，蚕蛹粉2重量份，硝酸钾0.1重量份，蛋白胨(鱼粉)为0.5重量份，水为56重量份，其中基质由玉米粉、麸皮和蔗糖组成，且以基质的总重量计，玉米粉的重量百分比为55％、麸皮的重量百分比为44％、蔗糖的重量百分比为1％。

其制备方法为：先将玉米粉、麸皮煮熟，将蔗糖、硝酸钾在水中溶解，再与甘蔗渣、蛋白胨、贝壳粉、蚕蛹粉按照比例混合均匀。

(3)灭菌：将培养盒放入灭菌锅中，于0.15MPa压力下灭菌30min；

(4)接种：在固体培养基冷却至20℃以下后，在无菌条件下接种，每300ml一级种接50-60只培养盒；

(5)发酵：接种后的培养盒移至培养室在20℃-25℃，相对湿度60％-80％下培养30d-50d，后期孢梗束生长阶段要求采光，每天需适时通气，保持培养室内空气新鲜；

(6)采收：当蝉花孢梗束高度达9cm左右、表面有少量分生孢子出现时即可采收；采收时，去掉封口膜，用工具将培养基取出新鲜的孢梗束，余下物质即为菌质。为长期保存，可将孢梗束与菌质烘干分级，用薄膜袋真空包装。

2、产量及性质检测：

本实施例中所得的培养产物由分生孢子梗、分生孢子、菌丝体与培养基的混合物三部分组成。经药理学实验证明，本实施例中经培养后的蝉拟青霉的培养产物具有调节免疫、解热镇痛、镇静催眠、滋补强壮、改善肾功能的作用，同时与天然蝉花相比，由于天然蝉花对生长环境要求较高，产量较少，而本发明的蝉拟青霉人工培养物价格相对低廉，生态要求相对比较低，因此可以大力开发蝉花其人工培养物，具有极强的实际应用价值。

实施例2蝉拟青霉发酵产物的获得

1、菌种的制备和培养：

(1)菌种制备：制备马铃薯蔗糖琼脂培养基或马铃薯蔗糖培养液备用；

①斜面种制备：从云南三江源头采集的野生蝉花通过组织分离纯化获得，转管后，在25℃下培养7天，挑选长势好的备用；

②一级种制备：将马铃薯蔗糖培养液装入锥形瓶中，置于灭菌锅内0.15MPa压力下灭菌30min，冷却后接入锥形瓶中，在25℃，振荡频率为150r/min的条件下培养3天，至锥形瓶内出现大量菌丝球后备用；

马铃薯蔗糖琼脂培养基及马铃薯蔗糖培养液制备同实施例1。

(2)配料装盒：配制固体培养基，将配好的培养基装入培养盒中，装料量为15％-25％，用封口膜封口；本实施方式所述的固体培养基配比为基质46重量份，甘蔗渣5重量份，贝壳粉0.4重量份，蚕蛹粉2.5重量份，硝酸钾0.1重量份，水为44重量份；其中基质为小麦。其制备方法为：先将小麦煮熟，将蔗糖、硝酸钾在水中溶解，再与甘蔗渣、贝壳粉，蚕蛹粉按照比例混合均匀。

(3)灭菌、接种、固体发酵及采收步骤均同实施例1。

2、产量及性质检测：

本实施例中所得的培养产物由分生孢子梗、分生孢子、菌丝体与培养基的混合物三部分组成。经药理学实验证明，本实施例中经培养后的蝉拟青霉的培养产物具有调节免疫、解热镇痛、镇静催眠、滋补强壮、改善肾功能的作用，同时与天然蝉花相比，由于天然蝉花对生长环境要求较高，产量较少，而本发明的蝉拟青霉人工培养物价格相对低廉，生态要求相对比较低，因此可以大力开发蝉花其人工培养物，具有极强的实际应用价值。

实施例3蝉拟青霉发酵产物的获得

1、菌种的制备和培养：

(1)菌种制备：制备马铃薯蔗糖琼脂培养基或马铃薯蔗糖培养液备用；

①斜面种制备：从云南三江源头采集的野生蝉花通过组织分离纯化获得，转管后，在22℃下培养5天，挑选长势好的备用；

②一级种制备：将马铃薯蔗糖培养液装入锥形瓶中，置于灭菌锅内0.15MPa压力下灭菌30min，冷却后接入锥形瓶中，在23℃，振荡频率为130r/min的条件下培养5天，至锥形瓶内出现大量菌丝球后备用；

马铃薯蔗糖琼脂培养基及马铃薯蔗糖培养液制备同实施例1。

(2)配料装盒：配制固体培养基，将配好的培养基装入培养盒中，装料量为15％，用封口膜封口；本实施方式所述的固体培养基配比为基质46重量份，甘蔗渣10重量份，贝壳粉0.5重量份，蚕蛹粉5重量份，硝酸0.5重量份，水为44重量份；其中基质为粟和蔗糖组成，且以基质的总重量计，粟的重量百分比为98％、蔗糖的重量百分比为2％。其制备方法为：先将粟煮熟，将蔗糖、硝酸钾在水中溶解，再与甘蔗渣、贝壳粉、蚕蛹粉按照比例混合均匀。

(3)灭菌、接种、固体发酵及采收步骤均同实施例1。

2、产量及性质检测：

本实施例中所得的培养产物由分生孢子梗、分生孢子、菌丝体与培养基的混合物三部分组成。经药理学实验证明，本实施例中经培养后的蝉拟青霉的培养产物具有调节免疫、解热镇痛、镇静催眠、滋补强壮、改善肾功能的作用，同时与天然蝉花相比，由于天然蝉花对生长环境要求较高，产量较少，而本发明的蝉拟青霉人工培养物价格相对低廉，生态要求相对比较低，因此可以大力开发蝉花其人工培养物，具有极强的实际应用价值。

实施例1-3中制得的培养产物中多糖含量的测定：

1、试剂

A液：0.1％葡萄糖标准液

精确称量烘干后葡萄糖0.1g，用蒸馏水定容到100ml，浓度为0.1％。

B液：5％苯酚溶液。

精取称取5g重蒸酚，用蒸馏水定容到100ml。

2、样品的前处理

精确称取野生蝉花、实施例1-3中制得的人工培养蝉拟青霉孢梗束各0.5g，加入10ml蒸馏水，超声萃取10min，然后放入90℃水浴锅，热水浸提2h，4000r/min离心10min，获得上清液。重复上述步骤一次，合并上清液，用于多糖检测。

3、样品多糖测定

1)样液稀释12.5倍。

2)用加样抢精确吸取1ml稀释后样液，加入1ml蒸馏水，再加入5％苯酚溶液，摇匀。加入5ml98％浓硫酸。摇匀。冷却至室温后检测。

3)采用紫外可见分光光度计检测，波长490nm。

4、标准曲线绘制

精确吸取0.1％葡萄糖标准液(A液)0.0，0.1，0.2，0.3，0.4，0.5，0.6，0.7，0.8，0.9，1.0ml到试管中，试管编号为1，2，3，4，5，6，7，8，9，10，11，其中1号试管为空白对照液。分别加水至2.0ml，分别精确加入5％苯酚溶液1.0ml，摇匀迅速加入浓硫酸5.0ml，摇匀，冷却至室温，用紫外可见分光光度法在490nm的波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，葡萄糖的浓度为横坐标，绘制标准曲线，得线性回归方程：y＝0.1475＊x+0.0226，R2＝0.9915。质量浓度在0.1-0.6mg/ml范围内相关性较好.

5、计算公式

多糖含量＝a·C·V/W

a：稀释倍数，C：由回归方程计算得到的浸提液中糖浓度(mg·mL。)，V：体积(ml)；W：为样品的重量(mg)。

6、检测结果

表1样品测试结果

表1中的结果证明：本实施例中制得的蝉花培养产物中的多糖含量比野生蝉花高，且产物质量稳定，具有很高的实际应用价值。

实施例4蝉花提取液的制备

以实施例1-3的发酵产物中的菌质为原料，经下列步骤提取：

方法一：水提取的方法为：将原料与水以重量体积比1∶7Kg/L混合，于50±1℃下提取4小时，分离水提液，重复2次，合并水提取液，减压浓缩成体积为浓缩前的1/2即得蝉花提取液。

方法二：水提取的方法为：将原料与水以重量体积比1∶30Kg/L混合，于50±1℃下提取2小时，分离水提液，重复2次，合并水提取液，减压浓缩成体积为浓缩前的1/4即得蝉花提取液。

研究表明，上述两种方法获得的提取液中氨基酸与腺苷的含量均获得了大幅提高。

实施例5洗发水制备

洗发水重量百分比配方如下：

在80℃条件下，往一半的水中加入脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸铵、十二烷基硫酸铵混匀，降温至60℃，再加入椰油酰胺丙基甜菜碱、聚季铵盐-7后混匀，继续降温至40℃，再加入丙二醇、蝉花提取液、柠檬酸、卡松等成分后加水至100份，混匀后得到成品。

实施例6洗发水制备

洗发水配方如下：

洗发水制备方法同实施例4，得到成品。

实施例7洗发水制备

洗发水配方如下：

洗发水制备方法同实施例4，得到成品。

实施例8洗发水制备

洗发水配方如下：

洗发水制备方法同实施例4，得到成品。

实施例9洗发水制备

洗发水配方如下：

洗发水制备方法同实施例4，得到成品。

实施例10安全性及稳定性测试

皮肤测试：将产品按剂量分组，连续14d均匀涂抹于试验动物裸露皮肤处，在除去本品后的1小时、24小时、48小时观察，涂抹部位无红斑和水肿出现。

刺激性测试：将产品按剂量分组，滴入实验动物一只眼结膜囊内，另一只眼为对照。记录滴药后6、24、48、72眼的局部反应，在地4、7天观察恢复情况。再一次和多次的接触到本品，能引起角膜、虹膜和结膜的轻度炎性反应，但是这种改变是可以可逆的，说明本品安全可用。

稳定性测试：在42℃条件下存放1个月，3个月，6个月没有分层或有浮油现象；在-5℃条件下存放24小时后，在室温下存放24小时，再放入40℃恒温箱中存放24h，循环3次后稳定性良好；在-5℃下存放一周，稳定性良好。

虫草类产品常采用传统方法粉碎，其颗粒度大，虫草中的虫草素、虫草酸、虫草多糖、SOD等活性成分不易释放被吸收，影响了应用效果。本发明在蝉花提取物洗发水中，采用水提法将活性成分溶出制备成水溶液后进行添加，使活性成分均以水溶性的成分存在，有效的解决了活性成分的释放和吸收问题。

实施例11洗发水的去头屑效果检测实验

1、试验材料与方法

11试验菌株：采集分离菌株，采集于具有头皮屑的正常人群；

标准菌株：糠秕马拉色菌，购自武汉大学菌种保藏中心。

实验组：实施例5、6、7、8的洗发水

阳性对照组：市场购买的去屑洗发露

1.2Leeming&Notman培养基：蛋白胨1％，葡萄糖0.5％，酵母浸膏0.1％，牛胆盐0.4％，甘油0.1％，单硬脂酸甘油脂0.05％，吐温600.05％，全脂牛奶1％，橄榄油2％，放线菌酮0.1％，氯霉素0.01％，琼脂1.2％。

1.3其他：灭菌培养皿，滤纸片，恒温水浴箱，试管，吸管，三角烧瓶，32℃培养箱。

2、试验方法

2.1马拉色氏菌的采集、分离、培养和鉴定：采用刮屑法在具有头皮屑的正常人头部取材，接种于Leeming&Notman培养基平板中，32℃下，培养10天左右，将所得各种马拉色菌在同样培养基平板上划线分离出单菌落，保藏并留作下一步鉴定。根据文献K A Hammer，eta1.In Vitro Activities of Ketoconazole，Econazole，Miconazole and Melaleuca alternifolia(TeaTree)Oil against Malassezia Species[J]Antimicrobial Agents andChemotherapy，2000，44(2)：467-469.与Guido Gayko，et al，Antidandruf Efficacy of Sosium ShaleOil Sulfonate Versus Coal Tar[J]Cosmetic&Toiletries magazine，2005，120(3)：839.方法对分离得到的各种马拉色菌进行分类鉴定(标准菌株用于对分离的糠秕马拉色菌的对照)。

2.2实验组洗发水与阳性对照组洗发露最小抑菌浓度测定：根据卫生部《消毒技术规范》2002版的方法对去屑剂进行最小抑菌浓度检测。

2.3试样片的制备：取新华一号定性滤纸，用打孔器打成直径5mm圆形滤纸片，经压力蒸汽灭菌，取灭菌处理后烘干的试样片若干，用无菌镊子分别蘸取待检的阳性对照组洗发露与实验组的洗发水少许于试样片上，尽量将试样片涂抹均匀。

2.4平板的制备：将活化好的糠秕马拉色菌配制成107cfu/mL-108cfu/mL的菌悬液，取菌悬液0.5mL涂抹于12cm的Leeming&Notman培养基平板上。将上述含菌平板放置5min后，在无菌超净工作台里打开平板盖，用无菌风吹干平板(约15min)。

2.5抑菌剂样片贴放：每次试验贴放1个染菌平板，每个平板贴放4片试验样片，1片阴性对照样片(不含洗发液成分)，共5片。用无菌镊子取样片贴放于平板表面。各样片中心之间相距25mm以上，与平板的周缘相距15mm以上。贴放好后，用无菌镊子轻压样片，使其紧贴于平板表面。盖好平皿，置32℃温箱，培养16h观察结果。用游标卡尺测量抑菌环的直径(包括贴片)并记录。试验重复3次。

3、实验结果见附图

3.1最小抑菌浓度

试验结果表明，不同去屑产品最小抑菌浓度(MIC)相差较大。虽然最小抑菌浓度(MIC)值并不能完全代表实际作用效果，但是检测最小抑菌浓度可为配方设计中去头屑有效成分的用量的选择提供依据。

3.2不同浓度抑菌效果(％)

试验结果表明，随着去屑剂用量增加，抑菌环会加大。但当去屑剂达到一定用量后(阳性对照组与实验组均为0.4％)，增加去屑剂用量，抑菌环增加不明显。

上述试验表明，本发明的洗发水对于引发头皮屑的菌群具有较好的抑制作用，具有良好的去屑功效。此外，蝉花提取物还有效降低紫外线对头发、头皮的损伤，有效补充头发营养，提高了养护效果，有效防止头皮衰老，改善头皮微环境，有效的锁住头发水分，防止头发干枯。

以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明作任何形式上的限制，虽然本发明已以较佳实施例揭露如上，然而并非以限定本发明，任何熟悉本专业的技术人员，在不脱离本发明技术方案范围内，当可以利用上述揭示的技术内容做出些许更动或修饰为等同变化的等效实施例，但凡是未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与修饰，均仍属于本发明技术方案的范围内。

Claims (7)

1.一种具有控制头屑的功能的蝉花提取物洗发水，含有重量百分比为0.1%-5%的蝉花提取物，所述蝉花提取物为以人工培养的蝉拟青霉的发酵产物的菌质为原料，用水提法获得，所述水提法包括下列步骤：将原料与水以重量体积比1：7～30kg/L混合，于49-51℃下提取2～4小时，分离水提液，重复多次，合并水提取液，减压浓缩即得蝉花提取物；所述人工培养的蝉拟青霉发酵产物经包括下列步骤的方法制得：

1）菌种制备：包括斜面种培养和一级种培养；

2）接种：将步骤1）中制得的一级种接入到置有固体培养基的培养器皿中；

3）固体发酵：接种后的培养器皿移至培养室，在20℃～25℃，空气相对湿度为60％～80％的条件下培养30天～50天；

4）孢梗束和菌质的采收；

所述步骤1）中，斜面种培养采用PSA培养基，一级种培养采用马铃薯蔗糖培养液；

所述步骤2）中，固体培养基的制备原料包括：

其中，所述基质选自如下组合中的一种：玉米粉、麸皮和蔗糖的混合物；小麦；大麦；粟和蔗糖的混合物；大米和蔗糖的混合物；高粱和蔗糖的混合物；

所述蝉花提取物洗发水，包括下列重量百分比的原料：

2.如权利要求1所述蝉花提取物洗发水，其特征在于，所述洗发水中还含有香精、去屑止痒剂和珠光剂中的一种或多种。

3.如权利要求1所述蝉花提取物洗发水，其特征在于，所述表面活性剂选自椰油酰胺丙基甜菜碱、十二烷基甜菜碱、咪唑啉甜菜碱、烷基糖苷、磺基琥珀酸脂肪醇聚氧乙烯醚二钠盐、烷醇酰胺、月桂酰胺丙基氧化胺、脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸铵和十二烷基硫酸铵；所述增稠剂选自氯化钠、氯化铵、氧化胺、聚乙二醇双硬脂酸酯、聚乙二醇单硬脂酸酯、丙二醇和丙三醇；所述调理剂选自聚季铵盐-7、聚季铵盐-10、阳离子瓜尔胶、十六烷基三甲基氯化铵、乳化硅油、植物油脂和二甲基硅油；所述pH调节剂选自三乙醇胺和柠檬酸；所述防腐剂选自DMDMH、尼泊金甲酯、尼泊金丙酯和卡松。

4.如权利要求1所述蝉花提取物洗发水，其特征在于，所述蝉花提取物洗发水包括下列重量百分比的原料：

5.如权利要求1所述蝉花提取物洗发水，其特征在于，所述固体培养基中还含有蛋白胨0.5重量份。

6.如权利要求1所述蝉花提取物洗发水，其特征在于，所述步骤3）中，在固体发酵后期孢梗束生长阶段要求采光，培养过程中保持空气流通。

7.如权利要求1-6任一权利要求所述蝉花提取物洗发水的制备方法，包括下列步骤：按配方称取原料，在75-85℃水浴锅中，先将表面活性剂与部分水混匀，降温至55-65℃，再加入调理剂后混匀，继续降温至38-42℃，再加入增稠剂、蝉花提取物、pH调节剂、防腐剂等成分后加入剩余的水，混匀后即得到成品。

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