CN102228513B

CN102228513B - 一种治疗糖尿病或糖尿病并发症的药物组合物及其制备方法

Info

Publication number: CN102228513B
Application number: CN 201110178678
Authority: CN
Inventors: 欧阳臻; 彭国平; 赵明; 杨兵
Original assignee: Jiangsu University
Current assignee: Jiangsu University
Priority date: 2011-06-29
Filing date: 2011-06-29
Publication date: 2013-04-17
Anticipated expiration: 2031-06-29
Also published as: CN102228513A

Abstract

本发明公开了一种治疗糖尿病或糖尿病并发症的药物组合物及其制备方法，该药物组合物含有桑叶总生物碱部位和总黄酮部位，所述的总生物碱部位和总黄酮部位质量比为1∶2～1∶5，优选为1∶3，该制备方法是采用阳离子交换树脂-阴离子交换树脂-混合大孔树脂三次吸附的联用技术，富集桑叶总黄酮部位及总生物碱部位，该制备方法不仅简化了工艺流程，有效去除相关杂质，有效成分含量高，而且还宜于工业化生产。

Description

一种治疗糖尿病或糖尿病并发症的药物组合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种治疗糖尿病或糖尿病并发症的药物组合物及其制备方法，具体涉及一种包含从桑叶里提取出来的总生物碱部位和总黄酮部位的组合物及其制备方法。

背景技术

自古以来中医就以桑叶作为治疗消渴症的中药应用于临床，近代也常用桑叶配伍于中药复方应用于临床，均有获效，现代药理研究证明桑叶可抑制血糖升高，具有预防和治疗糖尿病的作用。用桑叶开发治疗糖尿病的天然安全的治疗糖尿病的新药或降血糖的功能食品已有很多研究。桑叶中的生物碱经研究发现为一种糖苷酶抑制剂，通过抑制机体对糖的吸收，降低餐饮后血糖高峰值，使血糖浓度降低；杨雨等认为桑叶中，桑叶黄酮提取物对四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠无明显降血糖和增加肝糖原的作用。(杨雨等.桑叶不同组分降血糖作用研究.食品科学，28(8)：2007，454-456)。关于桑叶降血糖已经有一些相关专利：如申请号：01129976.2“一种桑叶多糖产品及其用途”公开了一种用桑叶提取的桑叶多糖产品和用途，多糖分子量在1500-50000道尔顿之间；申请号：200410018677.4“具有α-糖苷酶抑制活性的药物组合物及其用途”，公开了的药物组合按重量百分比生物碱为5-90％、黄酮类为10-95％；申请号：01113191.8“具有α-糖苷酶抑制剂活性的中药提取物、其制备方法及用途”，公开了总生物碱的制备方法；申请号：03142068.0“桑叶有效成分提取物及制备方法”，公开的提取物中含野尻霉素1.0-3.0％，r-氨基丁酸0.8-1.5％；申请号：02125869.4“一种α-糖苷酶抑制剂和它的用途”，公开了一种高效、廉价且易于获得的α-糖苷酶抑制剂。以上专利没有涉及采用阳离子交换树脂-阴离子交换树脂-大孔树脂联用的方法制备桑叶总生物碱部位和总黄酮部位的研究，也没有使用混合大孔树脂进行制备，更没涉及桑叶总生物碱部位和总黄酮部位的不同比例治疗糖尿病和糖尿病并发症用途的报道。

发明内容

发明目的：本发明的目的在于提供一种从桑叶里提取出来的含有总生物碱部位和总黄酮部位的组合物及其制备方法。

技术方案：一种治疗糖尿病或糖尿病并发症的药物组合物，该药物组合物含有桑叶总生物碱部位和总黄酮部位，所述的总生物碱部位和总黄酮部位质量比为1∶2～1∶5。

上述的治疗糖尿病或糖尿病并发症的药物组合物，所述的总生物碱部位和总黄酮部位质量比为1∶3。

上述总生物碱部位和总黄酮部位的方法，包括如下步骤：a.取桑叶，以水为溶剂提取，提取液经浓缩、乙醇沉淀、滤过，得醇沉液；b.醇沉液流经阳离子交换树脂，收集流出液备用，吸附后的阳离子交换树脂依次用40-60％乙醇水溶液、水和0.4-0.6mol/L的氨水进行洗脱，收集氨水洗脱液；c.氨水洗脱液流经阴离子交换树脂，收集流出液，经浓缩、干燥，即得总生物碱部位，其中总生物碱的含量为50～65％；d.将上述步骤b中所得流出液回收乙醇后，流经大孔树脂，依次用水、pH 9～10的碳酸钠水溶液进行洗脱，收集碳酸钠水洗脱液；e.将碳酸钠水洗脱液调节pH至3～4，流经所述大孔树脂，依次用水、60％乙醇水溶液进行洗脱，收集60％乙醇水溶液的洗脱液，浓缩，干燥，即得总黄酮部位，其中总黄酮的含量为60～80％。

上述的方法，步骤a中以水为溶剂提取的条件为：水煎煮提取3次，加水量与药材重量的比例分别为14∶1、10∶1、10∶1；步骤a中提取液经浓缩至65℃时相对密度为1.10～1.20；乙醇沉淀的参数为：醇沉液中含醇量的体积百分比为50～80％。

上述的方法，步骤b中醇沉液流经阳离子交换树脂的条件为：阳离子交换树脂的用量与醇沉液中所含药材重量的比例为1∶3，上样流速为2～3ml/min；洗脱液依次用50％乙醇、水和0.5mol/L的氨水；步骤c中氨水洗脱液流经阴离子交换树脂的条件为：阴离子交换树脂的用量与氨水洗脱液中药材重量的比例为1∶3，上样流速为2～3ml/min；步骤d中流经大孔树脂的条件为：大孔树脂用量与流出液中药材重量的比例为1∶0.8，上样流速为15～20ml/min；步骤e中流经大孔树脂的条件为：大孔树脂用量与碳酸钠水洗脱液中药材重量的比例为1∶1.6，上样流速为15～20ml/min。

上述的方法，步骤b中所用阳离子交换树脂型号为001×7，步骤c中阴离子交换树脂型号为201×4；步骤d或步骤e中所用大孔树脂为HPD400和HPD826的混合树脂，体积比为1∶1。

本发明中凡涉及干燥时均可采用烘箱干燥、真空干燥或喷雾干燥。本发明制备方法中凡涉及浓缩工艺时，可采用减压浓缩、常压浓缩。本发明中凡涉及过滤，可采用常压过滤、减压过滤或离心。本发明中凡涉及提取，可采用超声提取，加热回流提取或浸提。

有益效果：(1)本发明的方法能够成功地从桑叶中提取分离总生物碱部位和总黄酮部位，所述的总生物碱部位和总黄酮部位质量比为1∶2～1∶5，优选为1∶3，并能使总生物碱部位中总生物碱的含量达到55-75％，总黄酮部位中总黄酮的含量达到60-80％。(2)本发明中制备工艺采用阳离子交换树脂-阴离子交换树脂-混合大孔树脂三次吸附的联用技术富集有效部位桑叶总黄酮及桑叶总生物碱，不仅简化了工艺流程，有效去除相关杂质，而且还宜于工业化生产。药液浓缩经醇沉后，利用阳离子交换树脂的化学吸附生物碱并经阴离子交换树脂去酸性杂质，制成的总生物碱的含量达到55-75％，黄酮因不被阳离子交换树脂吸附随药液流出，药液再经大孔径树脂时黄酮被吸附；桑叶中黄酮的极性差异较大，单一大孔树脂不能将极性各异的黄酮有效吸附，反复试验用HPD400和HPD826的1∶1混合树脂最适宜于桑叶黄酮的吸附，混合树脂吸附黄酮后首先采用弱碱溶液使黄酮电荷改变，与树脂间产生排斥而洗脱，萜类、木脂素及色素等杂质仍被大孔径树脂吸附而去除，弱碱洗脱液经酸化后再次经大孔径树脂吸附，乙醇水洗脱可得到高纯度的桑叶总黄酮部位，这种方法制备的总黄酮纯度比直接采用大孔树脂吸附制备的总黄酮纯度高一倍以上，使总黄酮部位中总黄酮的含量达到60-80％；最终达到总黄酮与总生物碱的组合物含量超过55％，达到有效部位中药新药的含量要求。(3)本发明组合物为固态棕褐色粉末，可研制成具有降血糖作用的药品或功能性食品，工艺过程简单，设备要求低，成本低，原料简单价格低廉，药效显著，服用方便，且可以充分利用自然资源。(4)本发明所用的树脂可再生使用，乙醇也可回收再利用，故有利于降低工业生产的成本。(5)本发明所得到的桑叶有效组分组合物可以用于治疗II型糖尿病的高血糖症及糖尿病并发症，还可用于预防与治疗高糖引发的糖尿病肾病。

具体实施方式

以下通过实施例形式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明，但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例，凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

实施例1：取桑科植物桑树叶子3Kg，粉碎，分别加入14、10、10倍量的水煎煮提取三次，每次1小时，合并三次提取液，过滤，去渣取液，浓缩至65℃时相对密度110，加入乙醇使含醇量的体积百分比达50％，沉淀，静置，滤过，得醇沉液；醇沉液经1kg阳离子交换树脂001×7吸附，上样流速为2ml/min，流出液备用，阳离子交换树脂依次用1L 40％乙醇水溶液、2L水和2.5L 0.4mol/L的氨水进行洗脱，收集氨水洗脱液，氨水洗脱液再经1kg阴离子交换树脂201×4吸附，上样流速为2ml/min，收集流出液，浓缩，干燥，得桑叶生物碱部位5.4g，总生物碱的含量为56.4％；取阳离子交换树脂吸附后的流出液，回收乙醇，经3.75kg大孔树脂(所用大孔树脂为HPD400和HPD826的混合树脂，体积比为1∶1)吸附，上样流速为15ml/min，大孔树脂依次用7.5L水、3L pH为9.5的碳酸钠水溶液进行洗脱，收集碳酸钠水洗脱液，调节pH至3，再经1.875kg大孔树脂吸附，上样流速为15ml/min，大孔树脂依次用3.75L水、4.69L 60％乙醇水溶液进行洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩，干燥，得桑叶总黄酮部位10.9g，其中总黄酮含量为71.4％。

实施例2：取桑科植物桑树叶子3Kg，粉碎，分别加入14、10、10倍量的水煎煮提取三次，每次2小时，合并三次提取液，过滤，去渣取液，浓缩至65℃时相对密度1.20，加入乙醇使含醇量的体积百分比达80％，沉淀，静置，滤过，得醇沉液；醇沉液经1kg阳离子交换树脂001×7吸附，上样流速为3ml/min，流出液备用，阳离子交换树脂依次用1L 50％乙醇水溶液、2L水和2.5L 0.5mol/L的氨水进行洗脱，收集氨水洗脱液，氨水洗脱液再经1kg阴离子交换树脂201×4吸附，上样流速为3ml/min，收集流出液，浓缩，干燥，得桑叶生物碱部位6.0g，总生物碱的含量为50.9％；取阳离子交换树脂吸附后的流出液，回收乙醇，经3.75kg大孔树脂(所用大孔树脂为HPD400和HPD826的混合树脂，体积比为1∶1)吸附，上样流速为20ml/min，大孔树脂依次用7.5L水、3L pH为10的碳酸钠水溶液进行洗脱，收集碳酸钠水洗脱液，调节pH至4，再经1.875kg大孔树脂吸附，上样流速为20ml/min，大孔树脂依次用3.75L水、4.69L 60％乙醇水溶液进行洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩，干燥，得桑叶总黄酮部位18.0g，其中总黄酮含量为79.5％。

实施例3：取桑科植物桑树叶子3Kg，粉碎，分别加入14、10、10倍量的水煎煮提取三次，每次1.5小时，合并三次提取液，过滤，去渣取液，浓缩至65℃时相对密度115，加入乙醇使含醇量的体积百分比达70％，沉淀，静置，滤过，得醇沉液；醇沉液经1kg阳离子交换树脂001×7吸附，上样流速为2ml/min，流出液备用，阳离子交换树脂依次用1L 60％乙醇水溶液、2L水和2.5L 0.6mol/L的氨水进行洗脱，收集氨水洗脱液，氨水洗脱液再经1kg阴离子交换树脂201×4吸附，上样流速为3ml/min，收集流出液，浓缩，干燥，得桑叶生物碱部位5.1g，总生物碱的含量为65.7％；取阳离子交换树脂吸附后的流出液，回收乙醇，经3.75kg大孔树脂(所用大孔树脂为HPD400和HPD826的混合树脂，体积比为1∶1)吸附，上样流速为15ml/min，大孔树脂依次用7.5L水、3L pH为10的碳酸钠水溶液进行洗脱，收集碳酸钠水洗脱液，调节pH至3.5，再经1.875kg大孔树脂吸附，上样流速为20ml/min，大孔树脂依次用3.75L水、4.69L 60％乙醇水溶液进行洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩，干燥，得桑叶总黄酮部位25.5g，其中总黄酮含量为62.3％。

实施例4：取桑科植物桑树叶子3Kg，粉碎，分别加入14、10、10倍量的水煎煮提取三次，每次1小时，合并三次提取液，过滤，去渣取液，浓缩至65℃时相对密度110，加入乙醇使含醇量的体积百分比达50％，沉淀，静置，滤过，得醇沉液；醇沉液经1kg阳离子交换树脂001×7吸附，上样流速为2ml/min，流出液备用，阳离子交换树脂依次用1L 50％乙醇水溶液、2L水和2.5L 0.5mol/L的氨水进行洗脱，收集氨水洗脱液，氨水洗脱液再经1kg阴离子交换树脂201×4吸附，上样流速为2ml/min，收集流出液，浓缩，干燥，得桑叶生物碱部位5.5g，总生物碱的含量为57.8％；取阳离子交换树脂吸附后的流出液，回收乙醇，经3.75kg大孔树脂(所用大孔树脂为HPD400和HPD826的混合树脂，体积比为1∶1)吸附，上样流速为15ml/min，大孔树脂依次用7.5L水、3L pH为9.5的碳酸钠水溶液进行洗脱，收集碳酸钠水洗脱液，调节pH至3，再经1.875kg大孔树脂吸附，上样流速为15ml/min，大孔树脂依次用3.75L水、4.69L 60％乙醇水溶液进行洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩，干燥，得桑叶总黄酮部位20.2g，其中总黄酮含量为70.8％。

实施例5：取桑科植物桑树叶子3Kg，粉碎，分别加入14、10、10倍量的水煎煮提取三次，每次2小时，合并三次提取液，过滤，去渣取液，浓缩至65℃时相对密度1.20，加入乙醇使含醇量的体积百分比达80％，沉淀，静置，滤过，得醇沉液；醇沉液经1kg阳离子交换树脂001×7吸附，上样流速为3ml/min，流出液备用，阳离子交换树脂依次用1L 50％乙醇水溶液、2L水和2.5L 0.5mol/L的氨水进行洗脱，收集氨水洗脱液，氨水洗脱液再经1kg阴离子交换树脂201×4吸附，上样流速为3ml/min，收集流出液，浓缩，干燥，得桑叶生物碱部位6.1g，总生物碱的含量为53.4％；取阳离子交换树脂吸附后的流出液，回收乙醇，经3.75kg大孔树脂(所用大孔树脂为HPD400和HPD826的混合树脂，体积比为1∶1)吸附，上样流速为20ml/min，大孔树脂依次用7.5L水、3L pH为10的碳酸钠水溶液进行洗脱，收集碳酸钠水洗脱液，调节pH至4，再经1.875kg大孔树脂吸附，上样流速为20ml/min，大孔树脂依次用3.75L水、4.69L 60％乙醇水溶液进行洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩，干燥，得桑叶总黄酮部位12.5g，其中总黄酮含量为76.5％。

实施例6：取桑科植物桑树叶子3Kg，粉碎，分别加入14、10、10倍量的水煎煮提取三次，每次1.5小时，合并三次提取液，过滤，去渣取液，浓缩至65℃时相对密度115，加入乙醇使含醇量的体积百分比达70％，沉淀，静置，滤过，得醇沉液；醇沉液经1kg阳离子交换树脂001×7吸附，上样流速为2ml/min，流出液备用，阳离子交换树脂依次用1L 50％乙醇水溶液、2L水和2.5L 0.5mol/L的氨水进行洗脱，收集氨水洗脱液，氨水洗脱液再经1kg阴离子交换树脂201×4吸附，上样流速为3ml/min，收集流出液，浓缩，干燥，得桑叶生物碱部位5.2g，总生物碱的含量为64.8％；取阳离子交换树脂吸附后的流出液，回收乙醇，经3.75kg大孔树脂(所用大孔树脂为HPD400和HPD826的混合树脂，体积比为1∶1)吸附，上样流速为15ml/min，大孔树脂依次用7.5L水、3L pH为10的碳酸钠水溶液进行洗脱，收集碳酸钠水洗脱液，调节pH至3.5，再经1.875kg大孔树脂吸附，上样流速为20ml/min，大孔树脂依次用3.75L水、4.69L 60％乙醇水溶液进行洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩，干燥，得桑叶总黄酮部位22.4g，其中总黄酮含量为61.3％。

实施例7.本发明降血糖作用实验研究

(一)样品的制备：按上述实施例2制备总生物碱部位、总黄酮部位以及总生物碱部位和总黄酮部位的组合物(质量比为1∶3)，总生物碱部位和总黄酮部位的组合物为本发明。

桑叶经树脂洗脱后的提取物的制备：方法采用申请号为201010216512.3(一种桑叶黄酮、生物碱复合物的提取分离方法)的专利，①取桑科植物桑树叶子3Kg，粉碎，过100目筛子，溶于15倍体积的30℃，pH＝3的水中，动态搅拌，转速60r/min，时间上20min左右，提取2次，②将提取液合并，真空浓缩至原体积的1/2，再添加4倍体积的乙酸乙酯进行萃取，萃取2次，合并萃取液，浓缩至干，再用2倍体积去离子水溶解，用于上柱，③柱层析分离，分离介质为大孔树脂D101，先用2倍柱体积去离子水洗脱，再用80％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，④将②中萃余液合并，用碳酸氢钠溶液调pH至中性，进一步真空浓缩后用于上柱，⑤进行阳离子交换树脂分离，分离介质为罗姆哈斯FPC-21系列阳离子交换树脂，先用3倍柱体积去离子水洗脱，再用0.35mol/L氨水，收集氨水洗脱液，⑥对③、⑤收集的目标物质溶液按照比例混合，浓缩、干燥，可制得桑叶经树脂洗脱后的提取物。

(二)主要仪器和试剂：链脉佐菌素(STZ)，Sigma公司。微量快速血糖仪OneTouch-ll型，美国强生公司。血糖试纸，美国强生公司。尿糖试纸，广州市珠江生化试剂公司。MPZOOB电子天平，上海天普分析仪器有限公司。

(三)实验动物：SD大鼠180-220g，雄性，由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供，生产许可证：SCXK(沪)2007-0005。

(四)动物饲养：自由饮食饲养5d后进行实验，恒温23℃，湿度60％，人工照明12小时白天与12小时黑夜交替，给予常规的实验室饮食，不限制饮水。

(五)实验过程：

1.动物模型的制备：将实验用大鼠用天平称量体重，STZ按60mg/kg体重称取后，溶解于pH值4.5，浓度为0.1mol/L的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液，配制成2％的溶液，过滤器除菌，将禁食12h的大鼠腹腔注射，观察2h，开始饮食。3d后取尾静脉尖血用OneTouchll型血糖仪检测血糖，并同时测尿糖。以尿糖(+++)以上，血糖16.5mmol/L以上，出现多尿、多饮、多食症状的大鼠即为造模成功的糖尿病大鼠。实验期间大鼠正常饮食水。未成模的大鼠于7d后再次腹腔注射STZ。

2.分组及给药：取糖尿病大鼠，随机分为8组，每组10只，即糖尿病模型组、桑叶总生物碱部位组、桑叶总黄酮部位组、桑叶经树脂洗脱后的提取物、格列齐特对照组、桑叶总生物碱部位和总黄酮部位的组合物高中低剂量组。糖尿病模型组大鼠喂饲普通饲料，自由饮水，每天以蒸馏水灌胃(3mL/d)；桑叶总生物碱部位组、桑叶总黄酮部位组、桑叶经树脂洗脱后的提取物、格列齐特对照组、桑叶总生物碱部位和总黄酮部位的组合物高中低剂量组，每只大鼠分别给予桑叶总生物碱部位2g生药量/kg、桑叶总黄酮部位2g生药量/kg、桑叶经树脂洗脱后的提取物2g生药量/kg、格列齐特40mg/kg、桑叶总生物碱部位和总黄酮部位的组合物4g生药量/kg、2g生药量/kg、1g生药量/kg，分别灌胃。各组大鼠分别在20d后空腹静脉取血，测定血糖和胰岛素的浓度。

(六)实验结果：分析表1可发现本发明桑叶总生物碱部位和总黄酮部位的组合物高中低剂量组和格列齐特对照组一样可显著降低实验性糖尿病鼠体内血糖的浓度，并明显升高血浆胰岛素，与桑叶总生物碱部位组、桑叶总黄酮部位组、桑叶经树脂洗脱后的提取物组有显著差异。

表1 各组模型实验后各项生化指标的变化(x±s，n＝10)

注：同模型组相比*p＜0.05 **＜0.01；同桑叶经树脂洗脱后的提取物相比^△＜0.05 ^△△＜0.01

实施例8.本发明对糖尿病并发症肾病模型的作用实验研究

(一)样品的制备：方法同上述实施例7。

(二)主要仪器和试剂：链脉佐菌素(STZ)，Sigma公司。微量快速血糖仪OneTouch-ll型，美国强生公司。血糖试纸，美国强生公司。尿糖试纸，广州市珠江生化试剂公司。MPZOOB电子天平，上海天普分析仪器有限公司。SOD、NO、MDA试剂盒购自南京建成科技有限公司。尿微量白蛋白(mAlb)测定用散射比浊法，immage(美国Beckman公司)。

(三)实验动物：同上述实施例7。

(四)动物饲养：同上述实施例7。

(五)实验过程：

1.动物模型的制备：造模方法同上述实施例7。

2.分组及给药：方法同上述实施例7。

3.样本的制备：末次给药后收集24h尿液，取血后大鼠以水合氯醛麻醉，取肾脏，福尔马林固定。

4.主要观察指标：mAlb、SOD、NO、MDA采用南京建成科技有限公司生产的试剂盒进行检测。

(六)实验结果：表2结果表明，本发明桑叶总生物碱部位和总黄酮部位的组合物高中低剂量组能够降低大鼠血糖，降低尿微量白蛋白(mAlb)，与模型组、桑叶总生物碱部位组、桑叶总黄酮部位组、桑叶经树脂洗脱后的提取物组等比较有显著差异。表3结果表明，本发明桑叶总生物碱部位和总黄酮部位的组合物高中低剂量组能够升高模型大鼠SOD和NO含量，降低MDA水平，与模型组比较有显著性差异，与桑叶总生物碱部位组、桑叶总黄酮部位组、桑叶经树脂洗脱后的提取物组也有显著差异。说明本发明对糖尿病并发症肾病具有保护作用。

表2 各组模型实验后各项生化指标的变化(x±s，n＝10)

表3 各组模型实验后各项指标的变化(x±s，n＝10)

Claims

1.一种治疗糖尿病或糖尿病并发症的药物组合物的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：

a.取桑叶，以水为溶剂提取，提取液经浓缩、乙醇沉淀、滤过，得醇沉液；

b.醇沉液流经阳离子交换树脂，收集流出液备用，吸附后的阳离子交换树脂依次用40-60%乙醇水溶液、水和0.4-0.6mol/L的氨水进行洗脱，收集氨水洗脱液；

c.氨水洗脱液流经阴离子交换树脂，收集流出液，经浓缩、干燥，即得总生物碱部位，其中总生物碱的含量为50～65%；

d.将上述步骤b中所得流出液回收乙醇后，流经大孔树脂，依次用水、pH 9～10的碳酸钠水溶液进行洗脱，收集碳酸钠水洗脱液；

e.将碳酸钠水洗脱液调节pH至3～4，流经所述大孔树脂，依次用水、60%乙醇水溶液进行洗脱，收集60%乙醇水溶液的洗脱液，浓缩，干燥，即得总黄酮部位，其中总黄酮的含量为60～80%，所述的总生物碱部位和总黄酮部位质量比为1：3。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤a中以水为溶剂提取的条件为：水煎煮提取3次，加水量与药材重量的比例分别为14：1、10：1、10：1；步骤a中提取液经浓缩至65℃时相对密度为1.10～1.20；乙醇沉淀的参数为：醇沉液中含醇量的体积百分比为50～80%。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤b中醇沉液流经阳离子交换树脂的条件为：阳离子交换树脂的用量与醇沉液中所含药材重量的比例为1：3，上样流速为2～3ml/min；洗脱液依次用50%乙醇、水和0.5mol/L的氨水；步骤c中氨水洗脱液流经阴离子交换树脂的条件为：阴离子交换树脂的用量与氨水洗脱液中药材重量的比例为1：3，上样流速为2～3ml/min；步骤d中流经大孔树脂的条件为：大孔树脂用量与流出液中药材重量的比例为1：0.8，上样流速为15～20ml/min；步骤e中流经大孔树脂的条件为：大孔树脂用量与碳酸钠水洗脱液中药材重量的比例为1：1.6，上样流速为15～20ml/min。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征是：步骤b中所用阳离子交换树脂型号为001×7，步骤c中阴离子交换树脂型号为201×4；步骤d或步骤e中所用大孔树脂为HPD400和HPD826的混合树脂，体积比为1：1。