CN102228494A

CN102228494A - 一种扶正固本、增强人体免疫力、抗疲劳、抗肿瘤、延缓衰老的中药组合物

Info

Publication number: CN102228494A
Application number: CN 201110175461
Authority: CN
Inventors: 王林元; 张建军
Original assignee: BEIJING CAIRUI MEDICAL TECHNOLOGY Co Ltd
Current assignee: BEIJING CAIRUI MEDICAL TECHNOLOGY Co Ltd
Priority date: 2011-05-10
Filing date: 2011-05-10
Publication date: 2011-11-02
Anticipated expiration: 2031-05-10
Also published as: CN102228494B

Abstract

本发明公开了一种扶正固本、增强人体免疫力、抗疲劳、抗肿瘤、延缓衰老的中药组合物，该组合物原料药组成为蝙蝠蛾拟青霉菌丝体、灵芝、西洋参等，该中药组合物具有显著的增强免疫力、抗疲劳、抑制肿瘤、抗氧化的作用。

Description

一种扶正固本、增强人体免疫力、抗疲劳、抗肿瘤、延缓衰老的中药组合物

技术领域：

本发明涉及一种中药组合物，特别涉及一种具有扶正固本、增强人体免疫力、抗疲劳、抗肿瘤、延缓衰老功能的中药组合物，本申请是201110119811.x的分案申请。

技术背景：

中医学认为：“正气存内，邪不可干。”人体的正气包括气、血、阴、阳等，对人体有温煦、滋养的作用，同时能抵御外邪。中医学通过调补机体正气，可发挥对机体的免疫功能调节的作用。盖肺为气之主，主皮毛，主卫外，为免疫的屏障。皮毛包括皮肤，粘膜、肌肉、汗腺、毛发等组织，皮毛是抵御外邪入侵的防线，其作用的强弱，取决于肺气的充足与否，腠理开合是否正常，所以肺卫是抗御外邪的第一道屏障。若肺气虚，开合失职，肺卫不固，外邪乘虚而入，便可由皮毛伤肺，则肺气宣降失职。脾主运化，为后天之本，气血生化之源。李东垣说：“内伤脾胃，百病由生。”故脾胃损伤，则运化腐熟水谷精微之职失常，气血生化不足，内不足以维持脏腑正常生理机能，外不足以抗御病邪的侵袭，形成内伤虚劳，又易感受外邪，因而产生种种疾病。肾为先天之本，生命之根，与免疫的关系最为密切。肾藏精气，化生元气，维持人体的生长发育，是人体生命活动的原动力。肾中精气充沛，正气内存，脏腑功能就正常。若先天禀赋不足，或后天失于调养或失治误治，损伤精气，正气不足，机体抵抗力减弱，抗病能力下降，免疫功能低下，则易产生各种病变。因此补益肺脾肾等脏腑之气，可增强机体的免疫功能。

疲劳是机体过用(超限)而引起的功能降低并出现机体不适的状态，主要表现为疲劳困倦，可出现头晕、健忘、睡眠质量下降等伴随症状。疲劳的产生与能源物质消耗、代谢产物堆积、内环境稳定性失调、自由基影响等因素关系密切。疲劳属于中医学“虚”、“虚劳”、“虚损”等范畴。疲劳与五脏都有联系，主要责之于脾、肾、肺。脾气不足，失于健运，则气血生化无源，四肢肌肉得不到濡养，表现为四肢倦怠乏力，肌肉松软，甚或痿废不用。肾为先天之本，藏精，主骨生髓。恣情纵欲，过度疲劳，肾气不固，肾精亏损，髓海不足，则精神萎靡，眩晕耳鸣，记忆力减退，思维迟钝，腰膝酸软，肢体痿弱不用，疲乏无力。肺主气司呼吸，朝汇百脉而助心行血。劳役过度，耗气伤肺，肺气虚弱，不能助心行血，则出现血行瘀滞，表现为心悸、胸闷等症状。因此，补益肺脾肾之气，能振奋脏腑机能，有效缓解疲劳。

肿瘤是全球死亡率最高的疾病之一。发病原因复杂，目前尚无有效的根治方法。《肿瘤鉴证备要》中指出：“祖国医学认为肿瘤的形成是正气不足，脏腑功能失调而致气滞血瘀、痰凝毒聚，热毒蕴结，形成肿块”。现代医学认为肿瘤之本为基因调控的失常，与机体免疫功能紊乱关系密切。本着中医“治病求本”的原则，运用中医的整体观念，扶正固本，重视患者生理功能的调节，只有正气内存，才能提高机体的抗御能力。培补病人气、血、阴阳的不足，平衡阴阳，提高机体免疫力以固本，可有助于肿瘤的预防和促进肿瘤病人的康复。

衰老是人体生命进程中的自然规律。现代医学认为，人体的衰老与机体抗氧化能力的下降有密切关系。生物过氧化不仅是衰老的基本原因，也会诱发许多疾病，是人类健康的大敌，所以抗氧化是一项重要的保健功能。自由基与抗氧化、衰老有密切关系。受控的自由基对人体是有益的，但当人体中的自由基超过一定的量，并失去控制时，这种自由基就会通过氧化作用给我们的生命带来伤害。现已经证明与自由基有关的疾病有上百种，包括动脉粥样硬化、糖尿病、肿瘤等。人体自身具有一定程度的抗氧化能力，这种能力来自于一种叫做SOD的酶。这种酶可以分解自由基，因此被视为人体的清道夫。大量实验数据表明，SOD的活性程度与寿命和免疫系统的关系密切。中医学认为：脏腑虚损，精气神渐减是衰老的重要原因，但五脏之中尤以脾肾最为关键。《素问·上古天真论》曰：“丈夫……五八，肾气衰，发堕齿槁……七八肾脏衰，形体皆极。”明确指出了机体生、长、壮、老、已的自然规律与肾中精气的盛衰密切相关。《医学正传》中：“肾气盛则寿延，肾气衰则寿夭”，也说明了这一点，肾为先天之本，元气之根。元气即元阳，又称真阳之气，秘藏于肾精之中。肾中精气的重要生理功能是促进机体的生长，发育和生殖。老年人肾精不足，则肾阴肾阳亦虚，无以化生肾气，肾气虚衰则五脏六腑生化功能减退，出现一系列衰老的表现。另外，肾主骨生髓其华在发，老年人肾精不足，精不能生髓，髓不能充养骨骼，则步态不稳，骨质疏松。肾中精气虚衰，则髓亦不足，脑转耳鸣，由上可见肾虚是衰老的重要原因。脾为后天之本，气血生化之源。人体生长发育，其维持生命的一切物质均有赖于脾胃之运化。张介宾指出“土气为万物之源，胃气为养生之主，胃强则强，胃弱则衰……是以养生家当以脾胃为先”。《素问·上古天真论》曰“五七，阳明脉衰，面始焦，发始堕”，以上可看出脾虚是机体衰老的重要环节。老年脾胃虚弱，其运化功能减退，水谷化生精、气、血、津障碍，则脏腑、经络、四肢百骸得不到充分的营养，而失去正常的生理活动，导致衰老。综上所述，衰老主要是由脾肾虚衰，阴阳失调所导致。因此，调理脾肾和调整阴阳是抗衰老之关键所在，补肾健脾、调理阴阳，是可以延缓人体衰老的速度而延长寿命的。

本产品青洋胶囊由蝙蝠蛾拟青霉菌丝体(虫草菌丝体，冬虫夏草的替代品)、灵芝、破壁灵芝孢子粉、西洋参组成，配方中西洋参补元气、补肺气、补脾气、补心气、补肾气；同时，兼能养阴生津，补益而不燥热。灵芝及灵芝孢子粉补心气、养心血、安心神、补肺气、理痰嗽、健脾胃、治虚劳、防衰老。虫草菌丝体补肺气，养肺阴，益肾气，补肝肾。诸品同用，可补五脏，益元气，补肺气，补脾气，补心气，补肝肾；生津液，养心血，宁心神。通过补益脏腑之气，平补气阴，抵御外邪，可扶正固本、增强人体免疫力、抗疲劳、抗肿瘤、延缓衰老。

总之，本发明从补肺健脾益肾，益气养阴生津的角度提供了一种新的能扶正固本、增强人体免疫力、抗疲劳、抗肿瘤、延缓衰老的中药组合物产品。

发明内容：

本发明一个目的在于提供一种具有扶正固本、增强人体免疫力、抗疲劳、抗肿瘤、延缓衰老功能的中药组合物；本发明的另一个目的在于提供一种具有扶正固本、增强人体免疫力、抗疲劳、抗肿瘤、延缓衰老功能的中药组合物的制备方法。

本发明提供的一种具有扶正固本、增强人体免疫力、抗疲劳、抗肿瘤、延缓衰老功能的中药组合物，其原料药组成为(重量比)：

蝙蝠蛾拟青霉菌丝体1-10重量份灵芝2-12重量份

破壁灵芝孢子粉1-8重量份西洋参1-10重量份。

本发明药物组合物的原料药组成优选为：

蝙蝠蛾拟青霉菌丝体1.2-5重量份灵芝6-11重量份

破壁灵芝孢子粉1.1-4重量份西洋参4.1-8重量份

本发明药物组合物的原料药组成优选为：

蝙蝠蛾拟青霉菌丝体5.2-9.5重量份灵芝2.1-5重量份

破壁灵芝孢子粉4.1-8重量份西洋参1.1-4重量份。

本发明药物组合物的原料药组成优选为：

蝙蝠蛾拟青霉菌丝体5.2-9.5重量份灵芝2.1-5重量份

破壁灵芝孢子粉4.1-8重量份西洋参4.1-8重量份。

本发明药物组合物的原料药组成更优选为：

蝙蝠蛾拟青霉菌丝体1.2重量份灵芝3.6重量份

破壁灵芝孢子粉1.2重量份西洋参2.4重量份。

本发明药物组合物的原料药组成更优选为：

蝙蝠蛾拟青霉菌丝体3重量份灵芝8重量份

破壁灵芝孢子粉3重量份西洋参6重量份。

本发明药物组合物的原料药组成更优选为：

蝙蝠蛾拟青霉菌丝体7重量份灵芝3重量份

破壁灵芝孢子粉6重量份西洋参3重量份。

本发明药物组合物的原料药组成更优选为：

蝙蝠蛾拟青霉菌丝体7.5重量份灵芝3重量份

破壁灵芝孢子粉6重量份西洋参6重量份。

本发明提供的一种具有扶正固本、增强人体免疫力、抗疲劳、抗肿瘤、延缓衰老功能的中药组合物的制备方法，该方法优选如下步骤：

步骤1、取西洋参，加20-90％乙醇回流提取，得到西洋参提取物细粉；

步骤2、取灵芝，加水煎煮提取，得到灵芝提取物细粉；

步骤3、破壁灵芝孢子粉，蝙蝠蛾拟青霉菌丝体，灭菌；

步骤4、取西洋参提取物细粉、灵芝提取物细粉、破壁灵芝孢子粉、蝙蝠蛾拟青霉菌丝体混匀，按照常规工艺，制成临床或药学上或消费者可接受的制剂；

所述制剂为片剂、胶囊剂、散剂、丸剂、颗粒剂、膏剂、缓释制剂、速释制剂、口服液体制剂。

步骤1、取西洋参，粉碎成粗粉，加70％乙醇回流提取2次，加醇量分别为10、10倍，每次2小时，减压回收乙醇(压力0.05MPa，温度60℃)，减压浓缩(压力0.08MPa，温度60℃)成稠膏(60℃时相对密度为1.20～1.25)，减压干燥(压力0.08Mpa，温度70℃)，得提取物干膏，粉碎，过80目筛，得到西洋参提取物细粉；

步骤2、取灵芝，破碎成粗块，加水煎煮提取2次，加水量分别为7、7倍，每次2小时，滤过，得灵芝水煮液，减压浓缩(压力0.08MPa，温度60℃)成稠膏(60℃时相对密度为1.20～1.25)，减压干燥(压力0.08Mpa，温度70℃)，得提取物干膏，粉碎，过80目筛，得到灵芝提取物细粉；

步骤3、破壁灵芝孢子粉、蝙蝠蛾拟青霉菌丝体，喷洒75％乙醇湿润，干燥，粉碎；

步骤4、取西洋参提取物细粉、灵芝提取物细粉、破壁灵芝孢子粉、蝙蝠蛾拟青霉菌丝体混匀，80％乙醇湿润制软材，20目筛制颗粒，70℃干燥，整粒(30目筛)；制成胶囊剂。

蝙蝠蛾拟青霉菌丝、体破壁灵芝孢子粉可以选择市售产品，如蝙蝠蛾拟青霉菌丝体可购买于浙江万丰企业集团制药有限公司，破壁灵芝孢子粉可购买于保定施达科生物工程技术有限公司。

下面实施例、实验例均用于进一步说明但不作为本发明范围的限制(下述实验例中所用“采瑞牌青洋胶囊”为实施例1制备的产品)。

实验例1“采瑞牌青洋胶囊”增强免疫力功能试验报告

1材料和方法

1.1样品：“采瑞牌青洋胶囊”，内容物为棕色颗粒和粉末，0.5g/粒。

1.2实验动物：18～22g昆明种健康清洁级雌性小鼠，随机分为4组(三个剂量组和一个阴性对照组)，每组12只。分别进行抗体生成细胞数的测定、半数溶血值(HC_5ο)的测定、碳廓清实验和小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验。

1.3剂量：“采瑞牌青洋胶囊”的推荐剂量为成人(按60kg体重计)每日3.0g，相当于0.05g/日/kg体重。实验设人体推荐量的5倍、10倍、30倍，即每日0.25g/kgBW、0.50g/kgBW和1.50g/kgBW为低、中、高剂量组。受试物用水(已消毒)配制，每日一次经口给予，连续灌胃30天后测各项免疫指标。小鼠灌胃体积为0.1mL/10g鼠重。同时设一溶剂对照组(0g/kgBW)，用水(已消毒)代替受试物，每日灌胃体积与各受试物组相同。

1.4实验方法：

1.4.1抗体生成细胞数的测定(Jerne改良玻片法)

取羊血，生理盐水洗涤3次，每只鼠经腹腔注射2％(v/v，用生理盐水配制)压积SRBC0.2mL。将SRBC免疫5天后的小鼠颈椎脱臼处死，取出脾脏，轻轻磨碎脾脏，制成细胞悬液。离心(1000r/min)10min，用Hank’s液洗2遍，最后将细胞悬浮在8mLHank’s液中。将琼脂糖加热溶解后，与等量、双倍浓度的Hank’s液混合，分装小试管，每管0.5mL，再向管内加10％(v/v，用SA液配制)压积SRBC 50μL、脾细胞悬液20μL，迅速混匀后，倾倒于已刷琼脂糖薄层的玻片上，做平行片，待琼脂凝固后，将玻片水平扣放在片架上，放入二氧化碳培养箱中37℃温育1h，然后用SA缓冲液稀释的补体(1∶8)加入到玻片架凹槽内，继续温育1.5h后，计数溶血空斑数。用空斑数/全脾细胞来表示。受试样品组的空斑数显著高于对照组的空斑数。可判定该项实验结果阳性。

1.4.2半数溶血值(HC₅₀)的测定

取羊血，生理盐水洗涤3次，每只鼠经腹腔注射2％(v/v，用生理盐水配制)压积SRBC0.2mL进行免疫。5天后，摘除眼球取血于离心管内，放置约1h，将凝固血与管壁剥离，使血清充分析出，2000r/min离心10min，收集血清。用SA缓冲液将血清稀释为300倍，取1mL置试管内，依次加入10％(v/v，用SA缓冲液配制)压积SRBC 0.5mL，补体1mL(用SA缓冲液按1∶8稀释)。另设不加血清的对照管(以SA缓冲液代替)。置37℃恒温水浴中保温15min后，冰浴止反应。2000r/min离心10min，取上清1mL，加都氏试剂至3mL。同时取10％(v/v，用SA缓冲液配制)的压积SRBC 0.25mL，加都氏试剂至4mL于另一试管中，充分混匀，放置10min后，于540nm处以对照管作空白，分别测定各管光密度值。溶血素的量以半数溶血值(HC₅₀)表示，按下式计算：

样品半数溶血值＝样品光密度值/SRBC半数溶血时的光密度值×稀释倍数

受试样品组的HC₅₀显著高于对照组的HC₅₀，可判定该项实验结果阳性。

1.4.3小鼠碳廓清实验

按体重从小鼠尾静脉注射稀释4倍的印度墨汁(100mL/kg)。待墨汁注入，立即计时，注入墨汁后2、10min，分别从内眦静脉丛取血20μL。并将其加到2mL0.1％Na₂CO₃溶液中。用755分光光度计在600nm波长处测光密度值(OD)，以Na₂CO₃溶液作空白对照。将小鼠处死，取肝脏和脾脏称重。以碳廓清指数(a)表示小鼠碳廓清的能力，按下式计算a：

k＝(lgOD₁-lgOD₂)/(t₂-t₁)a＝体重÷(肝重+脾重)xk^1/3

受试样品组碳廓清指数显著高于对照组的碳廓清指数，可判定该项实验结果阳性。

1.4.4小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验(半体内法)

小鼠腹腔注射20％(v/v，用生理盐水配置)鸡红细胞。悬液1mL，间隔30min，颈椎脱臼处死，将其仰位固定于鼠板上，经腹腔注入生理盐水2mL，转动鼠板1min，取腹腔洗液1mL，分别滴于2片载玻片上，放入垫有湿纱布的搪瓷盒内，移置37℃孵箱温育30min。孵毕，于生理盐水中漂洗，以除去未贴片细胞。晾干，以1∶1丙酮甲醇溶液固定，4％(v/v)Giemsa-磷酸缓冲液染色，再用蒸馏水漂洗晾干。油镜下计数，每片计数100个巨噬细胞，按下式计算吞噬率和吞噬指数：

吞噬百分率(％)＝吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数/计数的巨噬细胞数×100

吞噬指数＝被吞噬的鸡红细胞总数/计数的巨噬细胞数

得出的吞噬百分率再按下式进行数据转换，

式中P为吞噬百分率，用小数表示。所得数据为计量资料，受试样品组的吞噬百分率和吞噬指数均显著高于对照组的吞噬百分率和吞噬指数，可判定该项实验结果阳性。

1.5数据处理

用SPSS软件进行数据处理。采用方差分析，但需求按方差分析的程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算F值，F值＜F_0.05，结论：各组均数间差异无显著性；F值≥F_0.05，P≤0.05，用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计；对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后的数据进行统计；若变量转换后仍未达到正太或方差齐的目的，改用秩和检验进行统计。

2结果

2.1“采瑞牌青洋胶囊”对体液免疫的影响

表1“采瑞牌青洋胶囊”对小鼠抗体生成细胞数的影响

*：与0g/kgBW组比较有显著性差异

由表1可见，经口给予小鼠不同剂量的“采瑞牌青洋胶囊”30天后，0.50g/kgBW组与0g/kgBW组比较，抗体生成细胞数有显著性差异(P＜0.05)；1.50g/kgBW组与0g/kgBW组比较，抗体生成细胞数有显著性差异(P＜0.01)。即“采瑞牌青洋胶囊”在0.50g/kgBW组和1.50g/kgBW组均能提高小鼠抗体生成细胞数。

表2“采瑞牌青洋胶囊”对小鼠半数溶血值(HC₅₀)的影响

*：与0g/kgBW组比较有显著性差异

由表2可见，经口给予小鼠不同剂量的“采瑞牌青洋胶囊”30天后，1.50g/kgBW组与0g/kgBW组比较，半数溶血值有显著性差异(P＜0.05)；即“采瑞牌青洋胶囊”在1.50g/kgBW组能提高小鼠半数溶血值。

2.2“采瑞牌青洋胶囊”对小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能的影响

表3“采瑞牌青洋胶囊”对小鼠碳廓清能力的影响

*：与0g/kgBW组比较有显著性差异

由表3可见可见，经口给予小鼠不同剂量的“采瑞牌青洋胶囊”30天后，1.50g/kgBW组与0g/kgBW组比较，小鼠碳廓清能力有显著性差异(P＜0.01)；即“采瑞牌青洋胶囊”在1.50g/kgBW组能提高小鼠的碳廓清能力。

表4“采瑞牌青洋胶囊”对小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞吞噬率的影响

*：与0g/kgBW组比较有显著性差异

由表4可见，经口给予小鼠不同剂量的“采瑞牌青洋胶囊”30天后，1.50g/kgBW组与0g/kgBW组比较，吞噬率有显著性差异(P＜0.01)；即“采瑞牌青洋胶囊”在1.50g/kgBW组能提高小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞吞噬率。

表5“采瑞牌青洋胶囊”对小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞吞噬指数的影响

*：与0g/kgBW组比较有显著性差异

由表5可见，经口给予小鼠不同剂量的“采瑞牌青洋胶囊”30天后，1.50g/kgBW组与0g/kgBW组比较，吞噬指数有显著性差异(P＜0.05)；即“采瑞牌青洋胶囊”在1.50g/kgBW组能提高小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞吞噬指数。

3结论

经口给予小鼠不同剂量的“采瑞牌青洋胶囊”30天后，0.05g/kgBW组能提高小鼠抗体生成细胞数(P＜0.05)；在1.50g/kgBW组能提高小鼠抗体生成细胞数(P＜0.01)、提高小鼠半数溶血值(P＜0.05)、提高小鼠的碳廓清能力(P＜0.01)、提高小数巨噬细胞吞噬鸡红细胞吞噬率(P＜0.01)、提高小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞吞噬指数(P＜0.05)。

通过本实验说明“采瑞牌青洋胶囊”具有增强免疫力功能，从而具有扶正固本作用。

实验例2“采瑞牌青洋胶囊”抗疲劳功能试验报告

1材料和方法

1.1样品：“采瑞牌青洋胶囊”，内容物为棕色颗粒和粉末，日摄入量为3.0g/60kg·BW。用蒸馏水配制各剂量浓度。

1.2实验动物：ICR种小鼠，体重18～22g。

1.3剂量选择：“采瑞牌青洋胶囊”，按人体日摄入量3.0g/60kg·BW，本试验设计了对照组和低、中、高三个剂量组，分别为每日0.25g/kg·BW、0.50g/kg·BW、1.00g/kg·BW。即相当于人体推荐量的5倍、10倍、20倍。受试物用蒸馏水配制。每日一次，经口给予，连续灌胃30天后测定各项指标。小鼠灌胃体积为0.1mL/10g鼠重。同时设一空白对照组(0g/kg·BW)，用水(已消毒)代替受试物，每日灌胃体积与各受试物组相同。

1.4试验方法：

经预游泳后选姿势正确小鼠120只称重分组。负重游泳、血清尿素氮、肝糖原三项实验均设三个剂量组和一个溶剂对照组，每组10只小鼠。按上述剂量每天经口给予受试物一次，溶剂对照组给予等容量蒸馏水，连续30天。

1.4.1负重游泳试验

第30天给予受试物后30分钟，做小鼠负重(5％体重铝箔)游泳试验，水温25±1℃，记录各组小鼠游泳时间，计算各组平均游泳时间，与对照组比较，进行方差分析。

1.4.2血清尿素氮测定

第30天给予受试物后30分钟，小鼠不负重游泳90分钟，水温30℃。捞出擦干，60分钟后拔眼球采血，使用全自动生化分析仪进行血清尿素氮测定，结果与对照组比较，进行方差分析。

1.4.3肝糖原测定

第30天给予受试物后30分钟，小鼠不游泳，处死。解剖取肝脏，准确称取100mg肝/鼠，按试剂盒要求进行肝糖原含量测定，结果与对照组比较，进行方差分析。

2结果

2.1小鼠负重游泳试验

表6“采瑞牌青洋胶囊”对小鼠体重影响

表6中各剂量组小鼠各期体重及增重与溶剂对照组比较，差异均无显著性(P＞0.05)。

表7“采瑞牌青洋胶囊”对小鼠游泳时间的影响

*：与0g/kgBW组比较有显著性差异

由表7可见，各剂量组小鼠平均游泳时间均较溶剂对照组游泳时间延长，经方差分析，高、中剂量组与溶剂对照组间有极显著性差异(P＜0.01)。

2.2小鼠血清尿素氮测定

表8“采瑞牌青洋胶囊”对小鼠体重影响

表8中各剂量组小鼠各期体重及增重与溶剂对照组比较，差异均无显著性(P＞0.05)。

表9“采瑞牌青洋胶囊”对小鼠血清尿素氮含量的影响

*：与0g/kgBW组比较有显著性差异

由表9可见，各剂量组小鼠血清尿素氮含量均较溶剂对照组降低，且中剂量组小鼠血清尿素氮含量与溶剂对照组间差异有显著性(P＜0.05)。

2.3小鼠肝糖原测定

表10“采瑞牌青洋胶囊”对小鼠体重影响

表10中各剂量组小鼠各期体重及增重与溶剂对照组比较，差异均无显著性(P＞0.05)。

表11“采瑞牌青洋胶囊”对小鼠肝糖原含量的影响

*：与0g/kgBW组比较有显著性差异

由表11可见，各剂量组小鼠肝糖原含量均较溶剂对照组有所增高，且中剂量组小鼠肝糖原含量与溶剂对照组间差异有显著性(P＜0.05)。

3.结论

本次试验观察到“采瑞牌青洋胶囊”在0.50g/kg·BW剂量能明显延长小鼠负重游泳时间、升高小鼠肝糖原含量和降低小鼠血清尿素氮含量，1.00g/kg·BW剂量能明显延长小鼠负重游泳时间。

通过本实验说明“采瑞牌青洋胶囊”具有抗疲劳功能。

实验例3“采瑞牌青洋胶囊”抑制肿瘤作用试验报告

1材料和方法

1.1样品：样品为“采瑞牌青洋胶囊”，内容物为棕色颗粒和粉末。人体推荐服用量为每日3g，相当于0.05g/kg体重。

1.2实验动物：18-22g雄性昆明种小鼠。实验动物随机分为正常对照组、高、中、低剂量4组，每组12只。

1.3剂量选择：高、中、低剂量分别为1.50、0.50和0.25g/kg·BW，分别相当于人口服剂量的30、10、5倍，对照组同时以蒸馏水灌胃，灌胃量均为0.4ml/20g。

1.4试验方法：

1.4.1 S-180细胞株试验

将“采瑞牌青洋胶囊”用蒸馏水溶解稀释，灌胃给予，对照组同时以蒸馏水灌胃，灌胃量均为0.4ml/20g，灌胃第13天，在无菌条件下，于右侧腋窝皮下接种S-180肿瘤细胞(5×10⁶细胞/0.2ml/只)，接种后继续给受试物，11天后，颈椎脱臼处死小鼠，取出瘤体称重。数据采用单因素方差分析统计，若出现阳性结果，按上述试验方式以12只雄性小鼠重复实验一次。

1.4.2 H-22细胞株试验

将“采瑞牌青洋胶囊”用蒸馏水溶解稀释，灌胃给予，对照组同时以蒸馏水灌胃，灌胃量均为0.4ml/20g，灌胃第13天，在无菌条件下，于右侧腋窝皮下接种H-22肿瘤细胞(5×10⁶细胞/0.2ml/只)，接种后继续给受试物，11天后，颈椎脱臼处死小鼠，取出瘤体称重。数据采用单因素方差分析统计，若出现阳性结果，按上述试验方式以12只雄性小鼠重复实验一次。

2结果

2.1“采瑞牌青洋胶囊”对小鼠接种S-180瘤细胞后肿瘤生长的影响

结果见表12、表13，两次重复实验均表明，各剂量组小鼠的瘤重均低于对照组，高剂量组与对照组相比，有显著性差异(P＜0.05)，高剂量组抑瘤率大于30％。给受试物后各剂量组小鼠体重与对照组比无显著性差异，见表14、15。

表12“采瑞牌青洋胶囊”对荷S-180瘤小鼠瘤重的影响(一)(mean±SD)

*：与0g/kgBW组比较有显著性差异

表13“采瑞牌青洋胶囊”对荷S-180瘤小鼠瘤重的影响(二)(mean±SD)

*：与0g/kgBW组比较有显著性差异

表14“采瑞牌青洋胶囊”对荷S-180瘤小鼠体重的影响(一)(mean±SD)

表15“采瑞牌青洋胶囊”对荷S-180瘤小鼠体重的影响(二)(mean±SD)

2.2“采瑞牌青洋胶囊”对小鼠接种H-22瘤细胞后肿瘤生长的影响

结果见表16、表17，两次重复实验均表明，各剂量组小鼠的瘤重均低于对照组，高剂量组与对照组比较，有显著性差异(p＜0.01)，且抑瘤率大于30％。给受试物后各剂量组小鼠体重与对照组无显著性差异。见表18、19。

表16“采瑞牌青洋胶囊”对荷H-22瘤小鼠瘤重的影响(一)(mean±SD)

*：与0g/kgBW组比较有显著性差异

表17“采瑞牌青洋胶囊”对荷H-22瘤小鼠瘤重的影响(二)(mean±SD)

*：与0g/kgBW组比较有显著性差异

表18“采瑞牌青洋胶囊”对荷H-22瘤小鼠体重的影响(一)(mean±SD)

表19“采瑞牌青洋胶囊”对荷H-22瘤小鼠体重的影响(二)(mean±SD)

3结论：

“采瑞牌青洋胶囊”对小鼠移植性肿瘤的生长，S-180细胞株两次抑瘤试验结果均表明：高剂量组小鼠瘤重显著低于对照组(P＜0.05)，抑瘤率大于30％；H-22细胞株两次抑瘤试验均表明：高剂量组小鼠瘤重均显著低于对照组(P＜0.01)，抑瘤率大于30％。

本实验说明“采瑞牌青洋胶囊”对肿瘤具有抑制作用。

实验例4“采瑞牌青洋胶囊”抗氧化(延缓衰老)作用试验报告

1材料和方法

1.1样品：“采瑞牌青洋胶囊”，内容物为棕色颗粒和粉末，日摄入量为3.0g/60kg·BW。

1.2实验动物：昆明种健康清洁级10月龄雌性小鼠40只。随机分为4组。

1.3剂量选择：“采瑞牌青洋胶囊”，按人体日摄入量3.0g/60kg·BW，本试验设计了对照组和低、中、高三个剂量组，分别为每日0.25g/kg·BW、0.50g/kg·BW、1.50g/kg·BW。即相当于人体推荐量的5倍、10倍、30倍。受试物用水(已消毒)配制。每日一次，经口给予，连续灌胃48天后测定各项指标。小鼠灌胃体积为0.1mL/10g鼠重。同时设一空白对照组(0g/kg·BW)，用水(已消毒)代替受试物，每日灌胃体积与各受试物组相同。

1.4试验方法

1.4.1心肌脂褐质含量测定

取心肌，称重。加入2∶1(v/v)氯仿甲醇混合液4mL，用匀浆器在45℃水浴中2500r/min匀化1min，制成以氯仿甲醇混合液为介质的5％匀浆。随后加入4mL蒸馏水，以2000r/min(匀浆器)充分混合1min，除去黄素干扰物，3000r/min离心10min后样品分为3层，上层为水相，中层为组织，下层为氯仿甲醇相。小心吸去水层，沿管壁穿过中层，将下层氯仿甲醇液取出，不可将水混入提取液中，若水混入提取液中，应再离心去除水。向氯仿甲醇提取液中加入甲醇0.2mL，轻轻振荡混匀，使之清澈透明，置紫外灯下照射30s，倒入石英杯中，测定荧光强度。

以硫酸奎宁(0.1μg/mL 0.1mol/L硫酸)为标准对照，在入射狭缝5nm、出射狭缝5nm、激发波长360nm、发射波长450nm条件下测定样品荧光强度。氯仿甲醇混合液为空白对照。按下式计算心肌脂褐质含量：

心肌脂褐质含量(μg/g组织)＝(样品荧光强度-空白荧光强度)÷硫酸奎宁荧光强度×C_硫酸奎宁×(匀浆体积÷心肌重量)

所得数据为计量资料，若受试物组心肌脂褐质含量明显低于空白对照组，且差异有显著性(P＜0.05)，可判定该受试物有降低心肌脂褐质含量的作用。

1.4.2抗氧化酶活力测定

全血中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力测定

由小鼠眼内眦静脉丛取血10μL，加蒸馏水至1mL，配成1∶99的溶血液。

表20酶促反应

表21显色反应

小鼠全血GSH-Px活力(U/mL全血)＝[log(非酶管OD-空白管OD)-log(样品管OD-空白管OD)]÷(3min×0.004mL)

所得数据为计量资料，若受试物组GSH-Px活力明显高于空白对照组，且差异有显著性(P＜0.05)，可判定该受试物有提高GSH-Px活力的作用。

1.5数据处理

用SPSS软件进行数据处理。采用方差分析，但需按方差分析的程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算F值，F值＜F_0.05，结论：各组均数间差异无显著性；F值≥F_0.05，P≤0.05，用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计；对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换，带满足正态或方差齐要求后，用转换后的数据进行统计；若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的，改用秩和检验进行统计。

2试验结果

2.1“采瑞牌青洋胶囊”对老龄小鼠体重的影响

表22“采瑞牌青洋胶囊”对老龄小鼠体重的影响

由表22可见，老龄小鼠给予“采瑞牌青洋胶囊”前初始体重和给予“采瑞牌青洋胶囊”48天后体重在各剂量组与0g/kg·BW组间比较，差异均无显著性(P＞0.05)。即“采瑞牌青洋胶囊”对老龄小鼠的体重无不良影响。

2.2“采瑞牌青洋胶囊”对老龄小鼠心肌脂褐素的影响

表23“采瑞牌青洋胶囊”对老龄小鼠心肌脂褐素的影响

*：与0g/kg·BW组比较有显著性差异

由表23可见，经口给予老龄小鼠不同剂量的“采瑞牌青洋胶囊”48天后，其心肌脂褐素在1.50g/kg·BW组与0g/kg·BW组间比较，有显著差异(P＜0.01)。即“采瑞牌青洋胶囊”在1.50g/kg·BW能降低老龄小鼠的心肌脂褐素。

2.3“采瑞牌青洋胶囊”对老龄小鼠全血谷胱甘肽过氧化物酶活力的影响

表24“采瑞牌青洋胶囊”对老龄小鼠GSH-Px活力的影响

*：与0g/kg·BW组比较有显著性差异

由表24可见，经口给予老龄小鼠不同剂量的“采瑞牌青洋胶囊”48天后，其全血谷胱甘肽过氧化物酶活力在0.50g/kg·BW组、1.50g/kg·BW组与0g/kg·BW组间比较，有显著性差异(P＜0.05)。即“采瑞牌青洋胶囊”对在0.50g/kg·BW组和1.50g/kg·BW组均能提高老龄小鼠全血谷胱甘肽过氧化物酶活力。

3.结论

经口给予老龄小鼠不同剂量的“采瑞牌青洋胶囊”48天，与0g/kg·BW组间比较，该受试物在0.50g/kg·BW组能提高全血谷胱甘肽过氧化物酶活力(P＜0.05)；在1.50g/kg·BW组能降低心肌脂褐素含量(P＜0.01)、提高全血谷胱甘肽过氧化物酶活力(P＜0.05)。受试物对小鼠体重增长无不良影响。

通过本实验说明“采瑞牌青洋胶囊”具有抗氧化功能，从而起到延缓衰老的作用。

具体实施方式

实施例1

蝙蝠蛾拟青霉菌丝体1.2kg 灵芝3.6kg

破壁灵芝孢子粉1.2kg 西洋参2.4kg

制备方法：

1、取西洋参，粉碎成粗粉，加70％乙醇回流提取2次，加醇量分别为10、10倍，每次2小时，减压回收乙醇(压力0.05MPa，温度60℃)，减压浓缩(压力0.08MPa，温度60℃)成稠膏(60℃时相对密度为1.20～1.25)，减压干燥(压力0.08Mpa，温度70℃)，得提取物干膏，粉碎，过80目筛，得到西洋参提取物细粉；

2、取灵芝，破碎成粗块，加水煎煮提取2次，加水量分别为7、7倍，每次2小时，滤过，得灵芝水煮液，减压浓缩(压力0.08MPa，温度60℃)成稠膏(60℃时相对密度为1.20～1.25)，减压干燥(压力0.08Mpa，温度70℃)，得提取物干膏，粉碎，过80目筛，得到灵芝提取物细粉；

3、破壁灵芝孢子粉，蝙蝠蛾拟青霉菌丝体，用75％乙醇灭菌；

4、取西洋参提取物细粉、灵芝提取物细粉、破壁灵芝孢子粉、蝙蝠蛾拟青霉菌丝体混匀，80％乙醇湿润制软材，20目筛制颗粒，70℃干燥，整粒(30目筛)；按照胶囊常规工艺装成胶囊。

实施例2

蝙蝠蛾拟青霉菌丝体3kg 灵芝8kg

破壁灵芝孢子粉3kg 西洋参6kg

制备方法：

1、取西洋参粉碎，过80目筛，得到西洋参细粉；

2、取灵芝粉碎，过80目筛，得到灵芝细粉；

4、取西洋参细粉、灵芝细粉、破壁灵芝孢子粉、蝙蝠蛾拟青霉菌丝体混匀，经常规工艺制成片剂。

实施例3

蝙蝠蛾拟青霉菌丝体7kg 灵芝3kg

破壁灵芝孢子粉6kg 西洋参3kg

制备方法：

4、取西洋参提取物细粉、灵芝提取物细粉、破壁灵芝孢子粉、蝙蝠蛾拟青霉菌丝体混匀，经常规工艺制成颗粒剂。

实施例4

蝙蝠蛾拟青霉菌丝体7.5kg 灵芝3kg

破壁灵芝孢子粉6kg 西洋参6kg

制备方法：

4、取西洋参提取物细粉、灵芝提取物细粉、破壁灵芝孢子粉、蝙蝠蛾拟青霉菌丝体混匀，经常规工艺制成散剂。

实施例5

蝙蝠蛾拟青霉菌丝体1.2kg 灵芝3.6kg

破壁灵芝孢子粉1.2kg 西洋参2.4kg

制备方法：

1、取西洋参，粉碎过80目筛，得到西洋参细粉；

4、取西洋参细粉、灵芝提取物细粉、破壁灵芝孢子粉、蝙蝠蛾拟青霉菌丝体混匀，80％乙醇湿润制软材，20目筛制颗粒，70℃干燥，整粒(30目筛)；按照胶囊常规工艺制成胶囊。

实施例6

蝙蝠蛾拟青霉菌丝体3kg 灵芝8kg

破壁灵芝孢子粉3kg 西洋参6kg

制备方法：

4、取西洋参提取物细粉、灵芝提取物细粉、破壁灵芝孢子粉、蝙蝠蛾拟青霉菌丝体混匀，经常规工艺制成片剂。

实施例7

蝙蝠蛾拟青霉菌丝体7kg 灵芝3kg

破壁灵芝孢子粉6kg 西洋参7kg

制备方法：

实施例8

蝙蝠蛾拟青霉菌丝体3.5kg 灵芝3kg

破壁灵芝孢子粉6kg 西洋参6kg

制备方法：

Claims

1.一种具有扶正固本、增强人体免疫力、抗疲劳、抗肿瘤、延缓衰老作用的中药组合物，其特征在于该组合物由如下方法制成：

蝙蝠蛾拟青霉菌丝体1-10重量份灵芝2-12重量份

破壁灵芝孢子粉1-8重量份西洋参1-10重量份；

步骤1、取西洋参，粉碎成粗粉，加70％乙醇回流提取2次，加醇量分别为10、10倍，每次2小时，减压回收乙醇，减压浓缩成稠膏，减压干燥，得提取物干膏，粉碎，过80目筛，得到西洋参提取物细粉；

步骤2、取灵芝，破碎成粗块，加水煎煮提取2次，加水量分别为7、7倍，每次2小时，滤过，得灵芝水煮液，减压浓缩成稠膏，减压干燥，得提取物干膏，粉碎，过80目筛，得到灵芝提取物细粉；

步骤3、破壁灵芝孢子粉，蝙蝠蛾拟青霉菌丝体，75％乙醇灭菌；

步骤4、取西洋参提取物细粉、灵芝提取物细粉、破壁灵芝孢子粉、蝙蝠蛾拟青霉菌丝体混匀，80％乙醇湿润制软材，20目筛制颗粒，70℃干燥，整粒，制成制剂。

2.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于其中的原料药组成为：

蝙蝠蛾拟青霉菌丝体1.2-5重量份灵芝6-11重量份

破壁灵芝孢子粉1.1-4重量份西洋参4.1-8重量份。

3.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于其中的原料药组成为：

蝙蝠蛾拟青霉菌丝体5.2-9.5重量份灵芝2.1-5重量份

破壁灵芝孢子粉4.1-8重量份西洋参1.1-4重量份。

4.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于其中的原料药组成为：

蝙蝠蛾拟青霉菌丝体5.2-9.5重量份灵芝2.1-5重量份

破壁灵芝孢子粉4.1-8重量份西洋参4.1-8重量份。

5.如权利要求1-4任一所述的中药组合物，其特征在于该组合物按照常规工艺，制成临床或药学上可接受的片剂、胶囊剂、散剂、丸剂、颗粒剂、膏剂、缓释制剂、速释制剂、口服液体制剂。

6.一种具有扶正固本、增强人体免疫力、抗疲劳、抗肿瘤、延缓衰老作用的中药组合物的制备方法，其特征在于该方法为：

蝙蝠蛾拟青霉菌丝体1-10重量份灵芝2-12重量份

破壁灵芝孢子粉1-8重量份西洋参1-10重量份；

步骤2、取灵芝，加水煎煮提取，得到灵芝提取物细粉；

步骤3、破壁灵芝孢子粉，蝙蝠蛾拟青霉菌丝体，灭菌；

步骤4、取西洋参提取物细粉、灵芝提取物细粉、破壁灵芝孢子粉、蝙蝠蛾拟青霉菌丝体混匀，按照常规工艺，制成临床或药学上可接受的片剂、胶囊剂、散剂、丸剂、颗粒剂、膏剂、缓释制剂、速释制剂、口服液体制剂。

7.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于该方法包括如下步骤：

8.如权利要求6或7所述的制备方法，其特征在于该方法中的原料药组成为：

蝙蝠蛾拟青霉菌丝体1.2-5重量份灵芝6-11重量份

破壁灵芝孢子粉1.1-4重量份西洋参4.1-8重量份；

或蝙蝠蛾拟青霉菌丝体5.2-9.5重量份灵芝2.1-5重量份

破壁灵芝孢子粉4.1-8重量份西洋参1.1-4重量份；

或蝙蝠蛾拟青霉菌丝体5.2-9.5重量份灵芝2.1-5重量份

破壁灵芝孢子粉4.1-8重量份西洋参4.1-8重量份。

9.如权利要求1-5任一所述的中药组合物在制备抑制肿瘤药物、制备抗氧化药物中的应用。

10.如权利要求1-5任一所述的中药组合物在制备增强免疫力或抗疲劳药物中的应用。