CN102225875A - 西藏灵菇快速增殖的培养基及培养方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种西藏灵菇快速增殖的培养基及培养方法，培养基组成为番茄汁5~20mL、胡萝卜汁5~20mL、豆粉2～10g和牛乳60~90mL。本发明培养方法为：用无菌水洗涤藏灵菇菌体3次，吸去菌体表面残水，然后将菌体1～5g接种于上述培养基中，在18～35℃下培养，每隔24h更换新鲜培养基，进行培养增殖。该培养基的原料来源广泛、成本低廉、便于储藏和运输。利用本发明的培养基和培养方法增殖西藏灵菇菌体具有生长速度快、周期短、增殖率高、工艺简单、成本低等优点，适于西藏灵菇的工业化扩大生产。用本发明方法培养所得的西藏灵菇菌体可更大程度地满足市场对西藏灵菇的需求，缓解市场需求压力。

Description

西藏灵菇快速增殖的培养基及培养方法

技术领域

本发明属生物工程技术领域，具体涉及西藏灵菇快速增殖的培养基及培养方法。

背景技术

藏灵菇又名“西藏雪莲”，是源自西藏雪原的特有珍稀菌种。从形态上看，藏灵菇是一种乳白色、胶质状的块状物，外型酷似米粒，在牛乳培养基中培养后体积会增大，而且在室温下也可以培养，不易染菌。藏灵菇作为一种天然的乳品发酵剂，具有良好的发酵特性，用它制作的酸奶与传统自然发酵的酸奶或用其它纯种乳酸菌发酵剂制成的酸奶有很大的不同，最显著的特征是除常规乳酸发酵外，还伴有轻微的由酵母菌引起的酒精发酵。所以藏灵菇酸奶是一种集酸味﹑醇味于一体的新型发酵乳制品，具有很好的市场前景。

由于西藏灵菇上栖息的微生物的某些特性及益生菌的种类不同于普通酸牛奶，因此与一般的酸奶相比，西藏灵菇酸奶具有特殊的营养功能和保健作用。灵菇酸奶分解出来的乳酸、碳酸气有独特味道能提高食欲，还能促进唾液分泌和肠道蠕动，平衡肠道细菌，对体内促进作用比酸奶高；乳酸、醋酸及抗菌物质可以抑制小肠腐败菌的繁殖，防止肠道感染；微量的乙醇可以促进新陈代谢，使循环系统及神经系统的活动正常化，对于胃肠病、代谢异常病有较好的治疗与预防作用；此外，据有关研究报道，西藏灵菇酸奶还具有明显的降胆固醇和治疗高血脂的作用，即可以改善动脉硬化，对平衡血压（高压降低、低压升高）良好的作用，有效防止高血压、冠心病等心血管疾病；其活性物质成分以及微生物所产生的抑制致病菌的抗菌性物质能抑制癌症的发生及抑制癌细胞增殖；此外，西藏灵菇酸奶还具有增强机体非特异性免疫功能，从而增强机体的抵抗力，抗肿瘤作用显著；另外，有研究报道西藏灵菇奶有明显的消炎作用，并能消除疲劳，调整面部菌群失调，达到对异常性痤疮的治疗作用。

正是藏灵菇的特殊功效，引起了国内外科研人员的重视，纷纷对藏灵菇展开了研究。但是由于藏灵菇中微生物菌相组成复杂，如用传统发酵剂扩大培养的方法培养，极易发生菌相失衡，使发酵乳制品的风味和品质发生变化，限制了其工业化生产。

发明内容

本发明的目的是提供一种能够促进西藏灵菇快速增殖的培养基。

本发明的另一个目的是提供一种西藏灵菇快速增殖的培养方法。

本发明培养基的组成为：番茄汁5~20 mL、胡萝卜汁 5~20 mL、豆粉 2～10g和牛乳60~90 mL。

培养基配方中所用蕃茄汁的制法为：称取150 g西红柿，于组织捣碎机中粉碎，用80目滤布过滤，取滤液。

培养基配方中所用胡萝卜汁的制法为：称取胡萝卜150 g，加150 mL的无菌水于组织捣碎机中粉碎，用80目滤布过滤。

培养基配方中所用豆粉的制法为：将一定量的干黄豆，置于组织捣碎机中粉碎后得到豆粉。

本发明西藏灵菇快速增殖的培养方法，其特征在于包含下列步骤：

A、培养基制作

在250 mL三角瓶中加入番茄汁5~20  mL，胡萝卜汁5~20 mL，豆粉 2～10g，牛乳60~90 mL，放入高压蒸汽灭菌锅在115℃下灭菌15 min。

B、接种

将西藏灵菇菌体用无菌水洗涤藏灵菇菌体3次，吸去菌体表面残水，然后将菌体1～5g接种于上述培养基中，在18℃～35℃温度下培养，每隔24h更换新鲜培养基，进行连续培养增殖。

增殖率计算公式如下：

增殖率(％) = [ (培养后的质量-培养前的质量) /培养前的质量] ×100％

本发明优选方案是所述步骤A培养基配好后灭菌前调pH值为6.0～6.5。

本发明所述步骤B西藏灵菇菌体的培养时间优选为5天。

本发明培养基的原料来源广泛、成本低廉、便于储藏和运输。利用该培养基及本发明的培养方法对发酵生产西藏灵菇菌体具有生长速度快、周期短、增殖率高、工艺简单、成本低等优点，适于西藏灵菇的工业化扩大生产。用本发明方法培养所得的西藏灵菇菌体可更大地满足市场对西藏灵菇的需求，缓解了市场需求对自然资源的压力。基于上述优点，本发明可产生较好的社会及经济效益，市场前景广阔。

具体实施方式

下面的实施例可以进一步说明本发明，但不以任何方式限制本发明。

实施例1

培养基配方为：番茄汁5 mL、胡萝卜汁 5mL、豆粉 2g、牛乳90 mL。

一、培养基配制

培养基的制法为：在250 mL三角瓶中加入番茄汁5 mL、胡萝卜汁 5mL、豆粉 2g、牛乳90 mL，调整起始pH值为6.2，放入高压蒸汽灭菌锅在115℃下灭菌15 min。

所用蕃茄汁的制法为：称取150 g西红柿，于组织捣碎机中粉碎，用80目滤布过滤，取滤液。

所用胡萝卜汁的制法为：称取胡萝卜150 g，加150 mL的无菌水于组织捣碎机中粉碎，用80目滤布过滤。

所用豆粉的制法为：将一定量的干黄豆，置于组织捣碎机中粉碎后得到豆粉。

二、菌体的增殖

用无菌水洗涤藏灵菇菌体3次，吸去菌体表面残水，然后将菌体1g接种于上述培养基，在18℃下培养，每隔24h更换新鲜培养基，连续培养5天后称重，其增殖率可达160%。

对照例1

对照组培养基配方为：牛乳100mL。

一、培养基配制

对照组培养基的制法为：在250 mL三角瓶中加入牛乳100mL，放入高压蒸汽灭菌锅在115℃下灭菌15 min。

二、菌体的增殖

将菌体1g接种于上述对照组培养基中，在18℃下培养，每隔24h更换新鲜培养基，连续培养5天后称重，其增殖率可达90%，不如本实施例效果好。

实施例2

培养基配方为：番茄汁10 mL、胡萝卜汁 10 mL、豆粉 5g、牛乳80 mL。

一、培养基配制

培养基的制法为：在250 mL三角瓶中加入番茄汁10 mL、胡萝卜汁 10 mL、豆粉 5g、牛乳80 mL，调整起始pH值为6.5，放入高压蒸汽灭菌锅在115℃下灭菌15 min。

所用蕃茄汁的制法为：称取150 g西红柿，于组织捣碎机中粉碎，用80目滤布过滤，取滤液。

所用胡萝卜汁的制法为：称取胡萝卜150 g，加150 mL的无菌水于组织捣碎机中粉碎，用80目滤布过滤。

所用豆粉的制法为：将一定量的黄豆，置于组织捣碎机中粉碎后得到豆粉。

二、菌体的增殖

用无菌水洗涤藏灵菇菌体3次，吸去菌体表面残水，然后将菌体2g接种于上述培养基中，在25℃下培养，每隔24h更换新鲜培养基，连续培养5天后称重，其增殖率可达196%。

对照例2

对照组培养基配方为：牛乳100mL。

一、培养基配制

对照组培养基的制法为：在250 mL三角瓶中加入牛乳100mL，放入高压蒸汽灭菌锅在115℃下灭菌15 min。

二、菌体的增殖

用无菌水洗涤藏灵菇菌体3次，吸去菌体表面残水，将菌体2g接种于上述对照组培养基中，在25℃下培养，每隔24h更换新鲜培养基，连续培养5天后称重，其增殖率可达86%，不如本实施例效果好。

实施例3

培养基配方为：番茄汁20 mL、胡萝卜汁 20 mL、豆粉 10g、牛乳60mL。

一、培养基配制

培养基的制法为：在250 mL三角瓶中加入番茄汁20 mL、胡萝卜汁 20 mL、豆粉 10g、牛乳60mL，调整起始pH值为6.2，放入高压蒸汽灭菌锅在115℃下灭菌15min。

所用蕃茄汁的制法为：称取150 g西红柿，于组织捣碎机中粉碎，用80目滤布过滤，取滤液。

所用胡萝卜汁的制法为：称取胡萝卜150 g，加150 mL的无菌水于组织捣碎机中粉碎，用80目滤布过滤。

所用豆粉的制法为：将一定量的干黄豆，置于组织捣碎机中粉碎后得到豆粉。

二、菌体的增殖

用无菌水洗涤藏灵菇菌体3次，吸去菌体表面残水，然后将菌体5g接种于上述培养基中，在30℃下培养，每隔24h更换新鲜培养基，连续培养5天后称重，其增殖率可达165%。

对照例3

对照组培养基配方为：牛乳100mL。

一、培养基配制

对照组培养基的制法为：在250 mL三角瓶中加入牛乳100mL，放入高压蒸汽灭菌锅在115℃下灭菌15min。

二、菌体的增殖

用无菌水洗涤藏灵菇菌体3次，吸去菌体表面残水，将菌体5g接种于上述对照组培养基中，在30℃下培养，每隔24h更换新鲜培养基，连续培养5天后称重，其增殖率可达85%。不如本实施例效果好。

实施例4

培养基配方为：番茄汁15 mL、胡萝卜汁 15 mL、豆粉 10g、牛乳70mL。

一、培养基配制：

培养基的制法为：在250 mL三角瓶中加入番茄汁15 mL、胡萝卜汁 15 mL、豆粉 10g、牛乳70mL，调整起始pH值为6.5，放入高压蒸汽灭菌锅在115℃下灭菌15min。

所用蕃茄汁的制法为：称取150 g西红柿，于组织捣碎机中粉碎，用80目滤布过滤，取滤液。

所用胡萝卜汁的制法为：称取胡萝卜150 g，加150 mL的无菌水于组织捣碎机中粉碎，用80目滤布过滤。

所用豆粉的制法为：将一定量的干黄豆，置于组织捣碎机中粉碎后得到豆粉。

二、菌体的增殖：

用无菌水洗涤藏灵菇菌体3次，吸去菌体表面残水，然后将菌体1g接种于上述培养基中，在35℃下培养，每隔24h更换新鲜培养基，连续培养5天后称重，其增殖率可达170%。

对照例4

对照组培养基配方为：牛乳100mL。

一、培养基配制：

对照组培养基的制法为：在250 mL三角瓶中加入牛乳100mL，放入高压蒸汽灭菌锅在115℃下灭菌15min。

二、菌体的增殖：

将菌体1g接种于上述对照组培养基中，在35℃下培养，每隔24h更换新鲜培养基，连续培养5天后称重，其增殖率可达75%。不如本实施例效果好。

Claims (4)

1.一种西藏灵菇快速增殖的培养基，其特征在于其组成为：

番茄汁5~20 mL、胡萝卜汁 5~20 mL、豆粉 2～10g和牛乳60~90 mL。

2.一种西藏灵菇快速增殖的培养方法，其特征在于包含下列步骤：

A、培养基制作

在250 mL三角瓶中加入番茄汁5~20 mL，胡萝卜汁5~20 mL，豆粉 2～10g，牛乳60~90 mL，放入高压蒸汽灭菌锅在115℃下灭菌15min；

B、接种

将西藏灵菇菌体用无菌水洗涤3次，吸去菌体表面残水，然后将菌体1～5g接种于A步骤的培养基中，在18℃～35℃温度下培养，每隔24h更换新鲜培养基，进行连续培养，使西藏灵菇菌体快速增殖。

3. 根据权利要求2所述的培养方法，其特征在于：所述步骤A培养基配好后灭菌前调pH值为6.0～6.5。

4. 根据权利要求2或3所述的培养方法，其特征在于：所述步骤B西藏灵菇菌体的培养时间为5天。