CN102220437A - 部分接种鉴定烟草病毒病抗性的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了部分接种鉴定烟草病毒病抗性的方法,包括:(1)择地:选择相对平整、均匀,排灌方便,与周围环境有隔离措施,周围50m内不种植其它茄科作物的地块;(2)种植:每个品种重复种植10株,单行区排列;随机区组,设4个重复;四周设双行保护;(3)接种:在移栽后10~15天,选择气温20℃~30℃、无雨的下午对各小区每个品种进行部分接种;(4)鉴定:根据调查记载、病情指数计算,按相应烟草病害调查、烟草品种抗病性鉴定的行业标准划分烟草品种的抗性等级。本方法有效控制田间发病率在30%~80%,各品种对病毒病抗病、感病特征表现明显,显著提高病毒病田间鉴定准确性;有效解决了传统田间鉴定自然发病或全部接种时,发病率过高过低的问题。
Description
技术领域
本发明涉及烟草的育种、栽培,具体来说,涉及鉴定烟草病毒病抗性的方法。
背景技术
烟草上发生的主要病毒病包括烟草普通花叶病毒(TMV)病、黄瓜花叶病毒(CMV)病、马铃薯Y病毒(PVY)病等。烟草品种病毒病抗性田间鉴定,是不一种不可替代的抗病性鉴定方法,田间鉴定是烟草品种在自然环境下多种因素综合作用的抗病性表现,是最直接、最真实的抗病性反映。但烟草品种病毒病抗性田间鉴定存在发病率难于控制的问题,烟草品种病毒病抗性田间鉴定通常采用自然发病法、或人工接种病毒法。自然发病法经常出现发病率很低的情况;而人工接种法则会出现全部烟草发病的情况。这两种情况会导致抗病品种与感品种都不发病或都发病,这样就难以准确区分不同品种间的抗病性差异。
中国专利数据库中涉及烟草抗性鉴定的技术方案有200610048657.0号《一种烟草普通花叶病抗性的苗期鉴定方法》、200610048658.5号《一种烟草黑胫病抗性的苗期鉴定方法》、200910094173.3号《一种烟草黑胫病抗性的病圃鉴定方法》、200910094174.8号《一种烟草青枯病抗性的苗期鉴定方法》、200910041164.8号《一种烟草普通花叶病抗性的离体快速鉴定方法》和201010280169.9号《一种烟草黑胫病抗性的苗期恒温水培鉴定方法》等,但迄今为止,未见针对可有效控制田间发病率、多种烟草病毒病抗性田间鉴定的方法专利。
发明内容
本发明的目的在于提供部分接种鉴定烟草病毒病抗性的方法,以控制烟草的田间发病率,解决鉴定烟草品种对病毒病抗性的难题。
本发明提供的部分接种鉴定烟草病毒病抗性的方法,是在田间进行的,具体做法是:(1)择地:选择相对较平整、均匀的地块,该地块满足以下条件:排灌方便,与周围环境有隔离措施,周围50m内不种植烟草以外的其它茄科作物;(2)种植烟草:每个品种每重复种植10株,单行区排列;随机区组,设4个重复;四周设双行保护行;(3)接种:在移栽后的10~15天,选择气温20℃~30℃、无雨的下午对各个小区的每个品种进行部分人工接种,每个品种均按鉴定株数的30%接种(即对田间每行的第2、5、8、株进行人工接种),注意避免叶面潮湿;(4)鉴定:根据调查记载、病情指数计算,按相应烟草病害调查、烟草品种抗病性鉴定的行业标准划分烟草品种的抗性等级。
发明人指出:接种时间如遇烟草生长缓慢或无适宜天气等问题,可适当推后。
上述第3步中,具体的接种方法是:将已鉴定、纯化的烟草病叶(TMV、CMV、PVY)进行仔细研磨,用双层沙布滤除残渣,最终浓度以病叶质量与水的体积之比计为1∶20;在病毒液中直接加入质量分数为2%经灭菌的600目金刚砂混匀,作为接种时创造微伤口的介质;采用人工摩擦接种法,每株待接种烟株接种3cm以上两片新生叶;接种时,用手托起叶背,用已灭菌砂布蘸已制备的病毒汁液,在叶正面由内侧向外轻轻摩擦接种。
本方法的“部分接种”即是需鉴定抗病性的烟草在田间对部分烟株进行接种。例如一个品种田间种植10株,只对30%的烟草进行接种,即人工接种病毒3株烟,其余7株不接种,由其自然发病。接种的3株烟的作用,一是观察接种烟株是否对接种病毒有抗病性;二是使其成为田间自然传染源,观察其它未接种烟株的抗病性。对需接种烟草的确定,是以这3株烟能成为另外7株烟均等传染源为原则。即接种烟草较为均匀的分布在未接种烟草的中间(以距离计算)。以10株一行为列,通常接种第2、5、8株烟。各品种间接种方法、接种烟株保持一致,各品种间有可比性即可。
发明人指出:病毒接种即是采用人工手段使病毒进入烟草活细胞内,并在烟草细胞内开始繁殖,致使烟草发病的过程。其关键在于使病毒进入“活细胞”。这需要在烟草表皮细胞上制造出一点“微伤口”这些伤口应该是肉眼看不到的,是在活细胞上的伤口,这样的微伤口才能让病毒进入细胞,而细胞也不会死亡,这样才能接种成功。如无伤口则病毒无法侵入、而伤口过大则会使细胞死亡,病毒无法繁殖,这两种情况都会导致接种失败。600目金刚砂是一种极细的无化学作用的颗粒,病毒汁液混入金刚砂后,通过手的摩擦,金刚砂可划破烟草表皮细胞,造成微伤口,使病毒进入活细胞。传统方法是采用400~500目金刚砂,先用金刚砂摩擦叶片划出伤口,再用病毒汁液涂摸接种。600目金刚砂混入病毒汁液一次接种比传统方法减少步骤,并因颗粒细度的提高而使接种效果明显提高。
本发明采用部分接种的方法鉴定烟草病毒病抗病性,可有效控制田间发病率在30%~80%之间,各品种对病毒病抗病、感病特征表现明显,显著提高病毒病田间鉴定准确性。有效解决了传统田间鉴定自然发病或全部接种时,田间发病率过高过低的问题。使用1∶20的烟草病毒汁液,混入600目金刚砂接种,可提高病毒接种成功率及接种效率。
具体实施方式
实施例
2009年贵州省烤烟品种区域试验马铃薯Y病毒(PVY)抗性鉴定,需鉴定烟草品系14份,对照品种2份,计16个品种(系)。
田间试验地在海拔1000m的贵州省烟科所福泉实验基地进行。田间试验设4重复,随机排列,每小区每品种10株。试验地5月20日移栽,除不采摘烟叶外其余管理按田间生产规范进行。
田间鉴定于移栽后18天,对各个小区的每个品种(系)的第2、5、8三株烟草进行病毒汁液人工摩擦接种,作为传染源。每株接种两片叶,接种浓度以病叶质量与水的体积之比计为1∶20。将已鉴定、纯化的PVY病叶进行仔细研磨,用双层沙布滤除残渣,最终浓度以病叶质量与水的体积之比计为1∶20。在病毒液中直接加入2%灭菌600目金刚砂混匀。采用人工摩擦接种的方法,每株待接种烟株接种3cm以上两片新生叶。接种时,用手托起叶背,用已灭菌砂布蘸已制备的病毒汁液,在叶正面由内侧向外轻轻摩擦接种。
田间记载分在打顶后10天一次记载,调查所有烟株,病级分级按相关标准执行。计算病情指数后进行抗病性初判。
病害严重度分级(以株为单位分级调查):
0级:全株无病。
1级:心叶脉明或轻微花叶,病株无明显矮化。
3级:1/3叶片花叶但叶不变形,或病株矮化为正常株高的3/4以上。
5级:1/3~1/2叶片花叶,或少数叶片变形,或主脉变黑,或病株矮化为正常株高的2/3~3/4。
7级:1/2~2/3叶片花叶,或变形或主侧脉坏死,或病株矮化为正常株高的1/2~2/3。
9级:全株叶片花叶,严重变形或坏死,或病株矮化为正常株高的1/2以上。
病情指数(D)计算公式:
D=∑(各级病株数×该病级数)×100/(调查总株数×最高级数)
抗性评价分级标准:
免疫 病指为0
抗病 病指为0.1~20
中抗 病指为20.1~40
中感 病指为40.1~60
感病 病指为60.1~80
高感 病指为80.1~100
感病对照的病情指数不低于60时方可认为试验及评价有效。
结果:PVY抗病对照TN90病指为0,对照K326病指为60,实验发病程度属正常范围。在鉴定材料中其余均表现为感病至中感。
各材料鉴定结果见下表:
Claims (2)
1.部分接种鉴定烟草病毒病抗性的方法,是在田间进行的,其特征包括:(1)择地:选择相对较平整、均匀的地块,该地块满足以下条件:排灌方便,与周围环境有隔离措施,周围50m内不种植烟草以外的其它茄科作物;(2)种植烟草:每个品种每重复种植10株,单行区排列;随机区组,设4个重复;四周设双行保护行;(3)接种:在移栽后的10~15天,选择气温20℃~30℃、无雨的下午对各个小区的每个品种进行部分人工接种,每个品种均按鉴定株数的30%接种,即对田间每行的第2、5、8、株进行人工接种,注意避免叶面潮湿;(4)鉴定:根据调查记载、病情指数计算,按相应烟草病害调查、烟草品种抗病性鉴定的行业标准划分烟草品种的抗性等级。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于所述第3步中,具体的接种方法是:将已鉴定、纯化的烟草病叶(TMV、CMV、PVY)进行仔细研磨,用双层沙布滤除残渣,最终浓度以病叶质量与水的体积之比计为1∶20;在病毒液中直接加入质量分数为2%经灭菌的600目金刚砂混匀,作为接种时创造微伤口的介质;采用人工摩擦接种法,每株待接种烟株接种3cm以上两片新生叶;接种时,用手托起叶背,用已灭菌砂布蘸已制备的病毒汁液,在叶正面由内侧向外轻轻摩擦接种。
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Cited By (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN104152533A (zh) * | 2014-08-07 | 2014-11-19 | 贵州省烟草科学研究院 | 一种烟草小苗期快速鉴定黑胫病抗性的方法 |
CN105123175A (zh) * | 2015-07-22 | 2015-12-09 | 四川省农业科学院作物研究所 | 一种玉米灰斑病的接种方法 |
CN106435017A (zh) * | 2016-08-30 | 2017-02-22 | 中国烟草总公司广东省公司 | 烟草抗黄瓜花叶病毒病的抗病性强弱的鉴定方法 |
CN106508335A (zh) * | 2016-09-23 | 2017-03-22 | 湖北省农业科学院经济作物研究所 | 一种高山萝卜苗期抗黑腐病鉴定方法 |
CN106576874A (zh) * | 2017-01-06 | 2017-04-26 | 江西省农业科学院植物保护研究所 | 一种芝麻品种抗青枯病田间高通量鉴定方法 |
CN106636465A (zh) * | 2016-12-30 | 2017-05-10 | 中国烟草总公司广东省公司 | 一种pvy病毒快速鉴定方法及其应用 |
CN113767805A (zh) * | 2021-08-27 | 2021-12-10 | 中国农业科学院果树研究所 | 一种利用田间小区鉴定苹果火疫病抗性的方法 |
CN115530037A (zh) * | 2022-10-26 | 2022-12-30 | 云南省烟草农业科学研究院 | 改进的全生育期人工病圃烟草品种青枯病抗性鉴定方法 |
Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2007002008A2 (en) * | 2005-06-21 | 2007-01-04 | Medimmune Vaccines, Inc. | Methods and compositions for expressing negative-sense viral rna in canine cells |
CN1918959A (zh) * | 2006-09-05 | 2007-02-28 | 云南省烟草科学研究所 | 一种烟草普通花叶病抗性的苗期鉴定方法 |
CN1922965A (zh) * | 2006-09-05 | 2007-03-07 | 云南省烟草科学研究所 | 一种烟草黑胫病抗性的苗期鉴定方法 |
CN101491199A (zh) * | 2009-03-09 | 2009-07-29 | 云南省烟草科学研究所 | 一种烟草黑胫病抗性的病圃鉴定方法 |
CN101671720A (zh) * | 2009-09-22 | 2010-03-17 | 云南省烟草农业科学研究院 | 一种病圃中烟草黑胫病菌的生理小种鉴定方法 |
CN101884281A (zh) * | 2010-06-23 | 2010-11-17 | 江苏省农业科学院 | 一种注射接种鉴定番茄对番茄黄化曲叶病毒抗性的方法 |
CN101946607A (zh) * | 2010-08-12 | 2011-01-19 | 江苏省农业科学院 | 一种利用牙签接种法鉴定番茄对番茄黄化曲叶病毒抗性的方法 |
-
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Patent Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2007002008A2 (en) * | 2005-06-21 | 2007-01-04 | Medimmune Vaccines, Inc. | Methods and compositions for expressing negative-sense viral rna in canine cells |
CN1918959A (zh) * | 2006-09-05 | 2007-02-28 | 云南省烟草科学研究所 | 一种烟草普通花叶病抗性的苗期鉴定方法 |
CN1922965A (zh) * | 2006-09-05 | 2007-03-07 | 云南省烟草科学研究所 | 一种烟草黑胫病抗性的苗期鉴定方法 |
CN101491199A (zh) * | 2009-03-09 | 2009-07-29 | 云南省烟草科学研究所 | 一种烟草黑胫病抗性的病圃鉴定方法 |
CN101671720A (zh) * | 2009-09-22 | 2010-03-17 | 云南省烟草农业科学研究院 | 一种病圃中烟草黑胫病菌的生理小种鉴定方法 |
CN101884281A (zh) * | 2010-06-23 | 2010-11-17 | 江苏省农业科学院 | 一种注射接种鉴定番茄对番茄黄化曲叶病毒抗性的方法 |
CN101946607A (zh) * | 2010-08-12 | 2011-01-19 | 江苏省农业科学院 | 一种利用牙签接种法鉴定番茄对番茄黄化曲叶病毒抗性的方法 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
徐香瑞等: "甜(辣)椒多抗性鉴定方法的研究", 《吉林农业大学学报》 * |
Cited By (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN104152533A (zh) * | 2014-08-07 | 2014-11-19 | 贵州省烟草科学研究院 | 一种烟草小苗期快速鉴定黑胫病抗性的方法 |
CN104152533B (zh) * | 2014-08-07 | 2016-06-29 | 贵州省烟草科学研究院 | 一种烟草小苗期快速鉴定黑胫病抗性的方法 |
CN105123175A (zh) * | 2015-07-22 | 2015-12-09 | 四川省农业科学院作物研究所 | 一种玉米灰斑病的接种方法 |
CN105123175B (zh) * | 2015-07-22 | 2018-01-09 | 四川省农业科学院作物研究所 | 一种玉米灰斑病的接种方法 |
CN106435017A (zh) * | 2016-08-30 | 2017-02-22 | 中国烟草总公司广东省公司 | 烟草抗黄瓜花叶病毒病的抗病性强弱的鉴定方法 |
CN106508335A (zh) * | 2016-09-23 | 2017-03-22 | 湖北省农业科学院经济作物研究所 | 一种高山萝卜苗期抗黑腐病鉴定方法 |
CN106636465A (zh) * | 2016-12-30 | 2017-05-10 | 中国烟草总公司广东省公司 | 一种pvy病毒快速鉴定方法及其应用 |
CN106576874A (zh) * | 2017-01-06 | 2017-04-26 | 江西省农业科学院植物保护研究所 | 一种芝麻品种抗青枯病田间高通量鉴定方法 |
CN106576874B (zh) * | 2017-01-06 | 2018-04-17 | 江西省农业科学院植物保护研究所 | 一种芝麻品种抗青枯病田间高通量鉴定方法 |
CN113767805A (zh) * | 2021-08-27 | 2021-12-10 | 中国农业科学院果树研究所 | 一种利用田间小区鉴定苹果火疫病抗性的方法 |
CN115530037A (zh) * | 2022-10-26 | 2022-12-30 | 云南省烟草农业科学研究院 | 改进的全生育期人工病圃烟草品种青枯病抗性鉴定方法 |
Also Published As
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