CN102215953A - 基于苯氧基烷基和烷氧基-或苯氧基-苯基烷基配体的新色谱介质 - Google Patents

基于苯氧基烷基和烷氧基-或苯氧基-苯基烷基配体的新色谱介质 Download PDF

Info

Publication number
CN102215953A
CN102215953A CN2009801461572A CN200980146157A CN102215953A CN 102215953 A CN102215953 A CN 102215953A CN 2009801461572 A CN2009801461572 A CN 2009801461572A CN 200980146157 A CN200980146157 A CN 200980146157A CN 102215953 A CN102215953 A CN 102215953A
Authority
CN
China
Prior art keywords
medium
silica
carrier
group
reverse phase
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN2009801461572A
Other languages
English (en)
Inventor
南度·德奥卡
B·西亚加拉詹
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Anwantuo Spcial Materials Co Ltd
Avantor Performance Materials LLC
Original Assignee
Anwantuo Spcial Materials Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Anwantuo Spcial Materials Co Ltd filed Critical Anwantuo Spcial Materials Co Ltd
Publication of CN102215953A publication Critical patent/CN102215953A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3231—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the coating or impregnating layer
    • B01J20/3242—Layers with a functional group, e.g. an affinity material, a ligand, a reactant or a complexing group
    • B01J20/3244—Non-macromolecular compounds
    • B01J20/3246—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure
    • B01J20/3248—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure the functional group or the linking, spacer or anchoring group as a whole comprising at least one type of heteroatom selected from a nitrogen, oxygen or sulfur, these atoms not being part of the carrier as such
    • B01J20/3253—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure the functional group or the linking, spacer or anchoring group as a whole comprising at least one type of heteroatom selected from a nitrogen, oxygen or sulfur, these atoms not being part of the carrier as such comprising a cyclic structure not containing any of the heteroatoms nitrogen, oxygen or sulfur, e.g. aromatic structures
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
    • B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
    • B01D15/26—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism
    • B01D15/32—Bonded phase chromatography
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/281—Sorbents specially adapted for preparative, analytical or investigative chromatography
    • B01J20/286—Phases chemically bonded to a substrate, e.g. to silica or to polymers
    • B01J20/287—Non-polar phases; Reversed phases
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3214—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the method for obtaining this coating or impregnating
    • B01J20/3225—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the method for obtaining this coating or impregnating involving a post-treatment of the coated or impregnated product
    • B01J20/3227—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the method for obtaining this coating or impregnating involving a post-treatment of the coated or impregnated product by end-capping, i.e. with or after the introduction of functional or ligand groups
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3231—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the coating or impregnating layer
    • B01J20/3242—Layers with a functional group, e.g. an affinity material, a ligand, a reactant or a complexing group
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3231—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the coating or impregnating layer
    • B01J20/3242—Layers with a functional group, e.g. an affinity material, a ligand, a reactant or a complexing group
    • B01J20/3244—Non-macromolecular compounds
    • B01J20/3246—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/89—Inverse chromatography
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J2220/00—Aspects relating to sorbent materials
    • B01J2220/50—Aspects relating to the use of sorbent or filter aid materials
    • B01J2220/54—Sorbents specially adapted for analytical or investigative chromatography
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
  • Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)

Abstract

本发明提供了一种反相色谱介质，其选自式[X-C6H4-(O)m-(CH2)n]q-Z表示的介质和所述式的疏水性封端的介质，其中n为1至4的数，m为0或1，当m为1时，X选自基团H、苯基和具有1至6个碳原子的烷基，当m为0时，X选自苯氧基和具有1至6个碳原子的烷氧基，Z为硅胶或亲水性聚合物色谱载体的骨架，q为等于连接至所述硅胶或亲水性聚合物色谱载体的骨架的配体的数量的数，条件是，当所述式的反相色谱介质未被疏水性基团封端时，m＝1时X不为H。这些新的色谱物质是如下制备的：使(a)色谱介质载体，其选自(1)在硅胶骨架的表面上具有羟基的硅胶载体或(2)在聚合物骨架的表面上具有羟基、胺或亚胺基团的亲水性聚合物载体，与(b)式[X-C6H4-(O)m-(CH2)n]p-Si(Y)4-p的反应物进行反应，其中p为1至3的数，Y为氯、溴、碘和在烷氧基部分具有1至4个碳原子的烷氧基，m、n和X如上所定义，以及任选地，使所得介质与疏水性封端反应物反应。所得色谱介质具有连接至硅胶或亲水性聚合物载体的骨架的这些配体，这种色谱介质提供了在含水的流动相中分析物分离的能力。

Description

基于苯氧基烷基和烷氧基-或苯氧基-苯基烷基配体的新色谱介质
发明领域
本发明涉及新的色谱介质及其用于分离和纯化小分子的用途。更具体地，本发明公开了一种新的疏水性色谱介质，其通过将含有C-O-C键的苯氧基烷基、烷氧基-苯基或苯氧基苯基类型的配体键合至固体载体而制备。该介质还可以具有疏水性封端。在本发明中提供的新的色谱介质特别有用于分离各种基于疏水性和π-π相互作用的分子。此外，该新的介质可以通过仅使用高含水量的流动相来分离高水溶性的化合物。
发明背景
反相HPLC介质广泛地应用于分离多种基本化合物如药物、农用化学品和肽及小分子蛋白质。多种直径、孔径、孔体积、表面积和硬度定义明确的、结构上合适的球形硅胶颗粒和聚合物颗粒适合于分析型和制备型的HPLC。此外，广泛地使用经极性配体和非极性配体修饰的、在化学上不同的硅胶基固定相介质和聚合物载体介质。公知的是除了所使用的配体的化学性质如氰基、氨基、二醇、和C4，C8或C18和苯基配体之外，剩余SiOH基团的分布在分离过程中也具有重要的作用。
一般而言，大多数色谱介质都基于聚合物颗粒或硅胶颗粒，其具有不规则的至球形颗粒的形状、不同的粒径和孔径。最常见的色谱介质是通过将一系列链长为1-30个碳原子的烷基键合至聚合物或硅胶颗粒而制备的。十八烷基(C18)最常见的，接着是C8和C4结合的硅胶。下一步研究是使用封端，其中较小的试剂(TMS，三甲基甲硅烷基氯化物)用来对未反应的Si-OH基团进行封端。键合的程度随硅胶的类型变化，其反映在碳载量(carbon loading)中，如从表面覆盖的百分比可见的，表面覆盖的百分比大致为固定相比例的指导，并因此大致为柱的整体保持性的指导。
在反相色谱中使用含水有机流动相，分离是基于分析物在流动相和固定相之间的分配，并受到分析物的极性和疏水性的控制。洗脱液的强度受到有机改性剂(通常是甲醇、乙腈或THF)比例的控制。由于各改性剂与分析物和介质的配体的相互作用会是不同的，任何分析物化合物的选择性或相对保留取决于各分子的极性和流动相的洗脱强度。常见的是在流动相中使用多种以及变化量的溶剂以从柱中洗脱感兴趣的化合物。然而，对于使用色谱单元操作进行制备的方法应用，出于安全性和经济的原因，将会高度优选能够使用尽可能少量的有机溶剂来洗脱小分子。然而，不可能使用现有的色谱介质，因为大多数分离的发生是基于在流动相中的分配，而不是基于分析物与配体之间的强力的相互作用。
我们已经发现通过在介质中存在一些配体，我们能够实现更好的分离，因为其提供了多种相互作用位点，包括疏水性范德华相互作用、π-π相互作用和氢键。尽管出于经济或效率目的，洗脱液的有机组分的通常优选为甲醇或乙腈，但是出于多种原因，理想的洗脱溶剂将会是水。许多不同的反相介质已知在市场上可以从许多制造商包括Mallinckrodt Baker，Inc.获得，但是除非有特定的相互作用，否则相似类型的柱之间的选择性差异通常少于改变洗脱溶剂所引起的差异。
本发明的一个目的是显示本文记载的新反相介质不仅表现出独特的分离而且仅使用水作为流动相洗脱感兴趣的化合物。此外，该介质可以用于使用高含水量的流动相分离水溶性分析物。
发明概述
本发明提供了一种反相色谱介质，其选自下式表示的介质：
[X-C6H4-(O)m-(CH2)n]q-Z
和所述式的疏水性封端的介质，
其中n为1至4、优选2至4的数，并更优选3或4，再更优选3，m为0或1，优选1，当m为1时，X选自基团H、苯基和具有1至6个碳原子、优选1至4个碳原子和更优选2至4个碳原子的烷基，其中X优选为H，当m为0时，X选自苯氧基和具有1至6个碳原子、优选1至4个碳原子、更优选1至2个碳原子且再更优选1个碳原子的烷氧基，其中X优选为甲氧基，Z为硅胶色谱载体或亲水性聚合物色谱载体(chromatographic support)的骨架，q为等于连接至所述硅胶或亲水性聚合物色谱载体的骨架的配体的数量的数，条件是，当所述式的反相色谱介质未被疏水性基团封端时，m＝1时X不为H。本发明提供的所述式的这种封端介质在硅胶色谱载体的骨架上具有硅烷醇部分的疏水性封端，或者在亲水性聚合物色谱载体的骨架上具有羟基、胺或亚胺部分的封端。该式的新色谱介质是如下制备的：
使(a)色谱介质载体，其选自(1)在硅胶骨架的表面上具有羟基的硅胶载体或(2)在聚合物骨架的表面上具有羟基、胺或亚胺基团的亲水性聚合物载体，
与(b)下式的反应物进行反应
[X-C6H4-(O)m-(CH2)n]p-Si(Y)4-p
其中p为1至3的数，优选为1，Y为氯、溴、碘或在烷氧基中具有1至4个碳原子的烷氧基，优选为氯，m、n和X如上所定义，其中下式的配体
[X-C6H4-(O)m-(CH2)n]-
经由硅胶骨架上的羟基或经由亲水性聚合物骨架上的羟基、胺或亚胺基团连接至硅胶或亲水性聚合物载体的骨架，从而提供下式的反相色谱介质：
[X-C6H4-(O)m-(CH2)n]q-Z
其中n为1至4、优选2至4的数，并更优选3或4，再更优选3，m为0或1，优选1，当m为1时，X选自基团H、苯基和具有1至6个碳原子、优选1至4个碳原子和更优选2至4个碳原子的烷基，其中X优选为H，当m为0时，X选自苯氧基和具有1至6个碳原子、优选1至4个碳原子、更优选1至2个碳原子且再更优选1个碳原子的烷氧基，其中X优选为甲氧基，Z为硅胶色谱载体或亲水性聚合物色谱载体的骨架，q为等于连接至所述硅胶色谱载体或亲水性聚合物色谱载体的骨架的配体的数量的数，条件是，当所述式的反相色谱介质未被疏水性基团封端时，m＝1时X不为H。反应物以硅胶或亲水性聚合物载体与反应物为约20∶1至约2∶1、优选约13∶1至约5∶1和更优选7∶1的重量比与硅胶载体或亲水性聚合物载体反应。如果期望上述式的反相色谱介质具有疏水性封端，那么这种介质可以与任何合适的疏水性封端反应物反应，使封端反应物与硅胶骨架上任何剩余的硅烷醇基团或者与亲水性聚合物色谱载体的骨架上的任何剩余的羟基、胺或亚胺基团发生反应。
已经发现，所得具有连接至硅胶或亲水性聚合物载体的骨架的这些配体的色谱介质提供了在含水的流动相中分离分析物的能力。此外，当所述色谱介质已经被疏水性封端时，所得封端的介质与亲水性封端的介质相比具有增加的在水性介质中的稳定性，以及增加的与配体或封端基团的疏水性相互作用从而增加保留性质。此外，并且出人意料的是，该疏水性封端的介质允许在高含水量的流动相中进行分离。
附图的简要说明
本发明通过附图所示的本发明实施方案进行解释，但是并不局限于此，在各附图中：
图1为分离对乙酰氨基酚(acetaminophen)的应用例1的分离色谱图；
图2为分离咖啡因的应用例2的分离色谱图；
图3为分离碘克沙醇(iodixanol)的应用例3的分离色谱图；
图4为分离碘克沙醇的应用例4的分离色谱图；
图5为分离含有尿嘧啶、苯酚、m-DETA和联苯的混合物的应用例5的分离色谱图；和
图6为分离碘克沙醇的对比应用例的分离色谱图。
发明详述
本发明提供了一种反相色谱介质，其选自下式表示的介质：
[X-C6H4-(O)m-(CH2)n]q-Z
和所述式的疏水性封端的介质，
其中n为1至4、优选2至4的数，并更优选3或4，再更优选3，m为0或1，优选1，当m为1时，X选自基团H、苯基和具有1至6个碳原子、优选1至4个碳原子和更优选2至4个碳原子的烷基，其中X优选为H，当m为0时，X选自苯氧基和具有1至6个碳原子、优选1至4个碳原子、更优选1至2个碳原子且再更优选1个碳原子的烷氧基，其中X优选为甲氧基，Z为硅胶色谱载体或亲水性聚合物色谱载体的骨架，q为等于连接至所述硅胶或亲水性聚合物色谱载体的骨架的配体的数量的数，条件是，当所述式的反相色谱介质未被疏水性基团封端时，m＝1时X不为H。本发明提供的所述式的这种封端介质在硅胶色谱载体的骨架上具有硅烷醇部分的疏水性封端，或者在亲水性聚合物色谱载体的骨架上具有羟基、胺或亚胺部分的封端。该式的新色谱介质是如下制备的：
使(a)色谱介质载体，其选自(1)在硅胶骨架的表面上具有羟基的硅胶载体或(2)在聚合物骨架的表面上具有羟基、胺或亚胺基团的亲水性聚合物载体，
与(b)下式的反应物进行反应
[X-C6H4-(O)m-(CH2)n]p-Si(Y)4-p
其中p为1至3的数，优选为1，Y为氯、溴、碘或在烷氧基部分具有1至4个碳原子的烷氧基，优选为氯，m、n和X如上所定义，其中下式的配体
[X-C6H4-(O)m-(CH2)n]-
经由硅胶骨架上的羟基或经由亲水性聚合物骨架上的羟基、胺或亚胺基团连接至硅胶或亲水性聚合物载体的骨架，从而提供下式的反相色谱介质：
[X-C6H4-(O)m-(CH2)n]q-Z
其中n为1至4、优选2至4的数，并更优选3或4，再更优选3，m为0或1，优选1，当m为1时，X选自基团H、苯基和具有1至6个碳原子、优选1至4个碳原子和更优选2至4个碳原子的烷基，其中X优选为H，当m为0时，X选自苯氧基和具有1至6个碳原子、优选1至4个碳原子、更优选1至2个碳原子且再更优选1个碳原子的烷氧基，其中X优选为甲氧基，Z为硅胶或亲水性聚合物色谱载体的骨架，q为等于连接至所述硅胶或亲水性聚合物色谱载体的骨架的配体的数量的数，条件是，当所述式的反相色谱介质未被疏水性基团封端时，m＝1时X不为H。反应物以硅胶或亲水性聚合物载体与反应物为约20∶1至约2∶1、优选约13∶1至约5∶1和更优选7∶1的重量比与硅胶载体或亲水性聚合物载体反应。如果期望上述式的反相色谱介质具有疏水性封端，那么这种介质可以与任何合适的疏水性封端反应物反应，使封端反应物与硅胶骨架上任何剩余的硅烷醇基团或者与亲水性聚合物色谱载体的骨架上的任何剩余的羟基、胺或亚胺基团发生反应。
反应物以硅胶或亲水性聚合物载体与反应物为约20∶1至约2∶1、优选约13∶1至约5∶1和更优选约7∶1的重量比与硅胶载体或亲水性聚合物反应。
如果期望上述式的反相色谱介质具有疏水性封端，那么这种介质可以与任何合适的疏水性封端反应物反应，使封端反应物与硅胶骨架上任何剩余的硅烷醇基团或者与亲水性聚合物色谱载体的骨架上的任何剩余的羟基、胺或亚胺基团发生反应。本发明可以采用以下任何合适的疏水性封端反应物，所述疏水性封端反应物能够与硅胶骨架上的未反应硅烷醇基团发生反应，或者与亲水性聚合物色谱载体的骨架上剩余的未反应羟基、胺或亚胺基团发生反应。合适的封端反应物包括，但不限于：六甲基二硅氮烷(hexamethyldisilaZane)、1-(三甲基甲硅烷基)咪唑，以及三烷基卤代硅烷如三甲基氯硅烷和三乙基氯硅烷。六甲基二硅氮烷和1-(三甲基甲硅烷基)咪唑优选作为封端反应物，甚至更优选六甲基二硅氮烷。通常，未封端的物质与合适的封端试剂使用硅胶对试剂的比为5∶1至10∶1的比值在合适的溶剂如甲苯中在室温或高达90℃的温度反应多达24小时。所得产物用合适的溶剂如甲苯洗涤，并在85℃干燥。
本发明的一个实施方案包括一种将分析物从含有分析物的溶液中分离的方法，所述方法包括：
(a)提供填充有下式的反相色谱介质的色谱柱：
[X-C6H4-(O)m-(CH2)n]q-Z
其中n为1至4、优选2至4的数，并更优选3或4，再更优选3，m为0或1，优选1，当m为1时，X选自基团H、苯基和具有1至6个碳原子、优选1至4个碳原子和更优选2至4个碳原子的烷基，其中X优选为H，当m为0时，X选自苯氧基和具有1至6个碳原子、优选1至4个碳原子、更优选1至2个碳原子且再更优选1个碳原子的烷氧基，其中X优选为甲氧基，Z为硅胶或亲水性聚合物色谱载体的骨架，q为等于连接至所述硅胶色谱载体或亲水性聚合物色谱载体的骨架的配体的数量的数，条件是，当所述式的反相色谱介质未被疏水性基团封端时，m＝1时X不为H，或者所述反相色谱介质具有疏水性封端；
(b)将该分析物的溶液注射进入该填充柱；和
(c)洗脱该分析物。
本发明具有这些连接至硅胶或亲水性聚合物载体的骨架的配体的色谱介质，特别是那些具有苯氧基烷基配体、尤其是苯氧基丙基配体和烷氧基苯基烷基配体、特别为甲氧基苯基丙基配体的色谱介质，提供了在高含水量的流动相中分离分析物的能力。例如本发明的具有苯氧基丙基配体的介质能够从其他相关杂质中分离碘克沙醇，即5-[乙酰基-[3-[乙酰基-[3，5-二(2，3-二羟基丙基氨基甲酰基)-2，4，6-三碘-苯基]氨基]-2-羟基-丙基]氨基]-N，N′-二(2，3-二羟基丙基)-2，4，6-三碘-苯-1，3-二甲酰胺，而不使用任何有机介质，因此碘克沙醇可以使用水作为唯一的洗脱液而分离。类似地，介质，尤其是本发明的具有苯氧基丙基配体的介质，能够使用水作为流动相洗脱对乙酰氨基酚。将对乙酰氨基酚装载到填充有本发明介质的柱上，并且用水洗脱，如应用例1中所示的尖锐峰。
根据本发明的一个实施方案，一种反相介质通过使3-苯氧基丙基三氯硅烷(C9H11Cl3OSi，CAS No.60333-76-8)与球状硅胶(40-60微米，
Figure BDA0000062244760000071
)在甲苯/甲醇混合物中在室温反应约16-20小时而制备。
在本发明的另一实施方案中，50g硅胶在250ml甲苯(含5ml甲醇)中浆化，并向其中加入7.5g苯氧基丙基三氯硅烷，室温反应约6小时。该浆料用甲醇洗涤，并在85℃干燥。表面覆盖(基于％C)为179μg/m2。将所得介质填充入分析柱(4.6X250mm)和半制备型柱(10X250mm)中，并测试在不同条件下多种小分子的分离。
用于本发明介质的硅胶或亲水性聚合物载体可以为任何合适的羟基化的硅胶或合适的亲水性聚合物。用于介质的硅胶(silica gel)载体可以为不规则的或球形的，粒径通常在约2μm至约250μm的范围内，并且孔径为约至约
Figure BDA0000062244760000073
类似地，用于本发明颗粒(beads)介质的亲水性聚合物可以为不规则的或球形的，粒径通常在2μm至250μm的范围内，并且孔径为约
Figure BDA0000062244760000074
至约
Figure BDA0000062244760000075
亲水性聚合物优选为选自聚甲基丙烯酸酯(polymethacrylate)、羟基化的苯乙烯-二乙烯基苯、羟基化的二乙烯基苯、纤维素或琼脂糖的聚合物颗粒，在表面上具有羟基、胺或亚胺基。例如，羟基化的聚甲基丙烯酸酯可以衍生自甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)和二甲基丙烯酸乙二醇酯(EGDM)之间的聚合并接着发生酸式水解或碱式水解。
在本发明的另一实施方案中，本发明介质用于从高含水量的流动相中分离分子量约2000或更少、甚至约1500或更少以及1000或更少的小分子。
在本发明中合成的物质与已知的用苯基丁基配体制备的硅胶介质(对比合成例)比较其碘克沙醇洗脱行为(对比应用例)。
合成例1
将50g硅胶(平均粒径50μm，孔径
Figure BDA0000062244760000076
)置于1L圆底烧瓶(配有漏斗、搅拌器和正氮压入口(positive nitrogen pressure inlet))中，向其中加入250ml甲苯和5ml甲醇，室温搅拌。在小于1分钟内将7.5g的3-苯氧基丙基三氯硅烷加入该烧瓶中，室温搅拌约16小时。过滤浆料，并用250ml甲醇洗涤，在85℃干燥过夜。元素分析：C，6.32％；H，0.90％。表面覆盖：179μg/m2。
合成例2
将200g硅胶(平均粒径20μm，孔径
Figure BDA0000062244760000081
)置于2L圆底烧瓶(配有漏斗、搅拌器和正氮压入口)中，向其中加入1000ml甲苯和20ml甲醇，室温搅拌。在小于1分钟内将30.0g的3-苯氧基丙基三氯硅烷加入该烧瓶中，室温搅拌16小时。过滤浆料，并用1000ml甲醇洗涤，在85℃干燥过夜。元素分析：C，6.57％；H，1.00％。表面覆盖：203μg/m2。
合成例3
将120g硅胶(平均粒径10μm，孔径
Figure BDA0000062244760000082
)置于1L圆底烧瓶(配有漏斗、搅拌器和正氮压入口)中，向其中加入500ml甲苯和15ml甲醇，室温搅拌。在小于1分钟内将18g的3-苯氧基丙基三氯硅烷加入该烧瓶中，室温搅拌约16小时。过滤浆料，并用500ml甲醇洗涤，在85℃干燥过夜。元素分析：C，5.92％；H，0.78％。表面覆盖：198μg/m2。
合成例4
将150g硅胶(平均粒径50μm，孔径
Figure BDA0000062244760000083
)置于2L圆底烧瓶(配有漏斗、搅拌器和正氮压入口)中，向其中加入750ml甲苯和15ml甲醇，室温搅拌。在小于1分钟内将22.5g的甲氧基苯基丙基三氯硅烷(CAS No.163155-57-5)加入该烧瓶中，室温搅拌约16小时。过滤浆料，并用750ml甲醇洗涤，在85℃干燥过夜。元素分析：C，6.49％；H，0.95％。表面覆盖：175μg/m2。
合成例5
将1.0Kg硅胶(平均粒径50μm，孔径
Figure BDA0000062244760000084
)置于1L圆底烧瓶(配有漏斗、搅拌器和正氮压入口)中，向其中加入5L甲苯和100ml甲醇，室温搅拌。在小于1分钟内将150g的3-苯氧基丙基三氯硅烷加入该烧瓶中，室温搅拌约16小时。过滤浆料，并用250ml甲醇洗涤，在85℃干燥过夜。元素分析：C，6.38％；H，1.13％。表面覆盖：169μg/m2。
对比合成例
将50g硅胶(平均粒径50μm，孔径
Figure BDA0000062244760000091
)置于1L圆底烧瓶(配有漏斗、搅拌器和正氮压入口)中，向其中加入250ml甲苯和5ml甲醇，室温搅拌。在小于1分钟内将7.5g的4-苯基丁基三氯硅烷加入该烧瓶中，室温搅拌约16小时。过滤浆料，并用250ml甲醇洗涤，在85℃干燥过夜。元素分析：C，7.51％；H，1.13％。表面覆盖：213μg/m2。
合成例6
将100g与3-苯氧基丙基(C＝6.06％)键合的硅胶(平均粒径50μm，孔径
Figure BDA0000062244760000092
)置于2L圆底烧瓶(配有漏斗、搅拌器和正氮压入口)中，向其中加入500ml甲苯，室温搅拌。在小于1分钟内将12.5g的六甲基二硅氮烷(CAS No.999-97-3)加入该烧瓶中，室温搅拌约16-20小时。过滤浆料，并用500ml甲苯洗涤2次，用500ml甲醇洗涤3次，在85℃干燥过夜。元素分析：C，7.0％；H，1.3％。表面覆盖：196μg/m2。
合成例7
100g与3-苯氧基丙基(C＝6.06％)键合的硅胶(平均粒径50μm，孔径 )置于2L圆底烧瓶(配有漏斗、搅拌器和正氮压入口)中，向其中加入500ml甲苯，室温搅拌。在小于1分钟内将12.5g的1-(三甲基硅烷基)咪唑)(CAS No.18156-74-6)加入该烧瓶中，室温搅拌约16-20小时。过滤浆料，并用500ml甲苯洗涤2次，用500ml甲醇洗涤3次，在85℃干燥过夜。元素分析：C，7.11％；H，0.89％。表面覆盖：199μg/m2。
应用例1
将如合成例1所制的含有连接至硅胶的苯氧基丙基配体的色谱介质，填充入分析柱(4.6X250mm)中。将5μl的含1mg/ml对乙酰氨基酚的水溶液注射入柱中，并使用0.85ml/分钟的流速洗脱，然后使用水作为流动相在245nm监控洗脱多达约45分钟的时间段。所得色谱图示于图1中。
应用例2
将如合成例2所制的含有连接至硅胶的苯氧基丙基配体的色谱介质，填充入分析柱(4.6X250mm)中。将5μl的水溶液(含1mg/ml咖啡因)注射入柱中，并使用0.85ml/分钟的流速洗脱，然后使用水作为流动相在245nm监控洗脱多达约45分钟，和30分钟的梯度从100％水至50％甲醇和50％水的洗脱。所得色谱图为图2，示出了在73分钟洗脱咖啡因。
应用例3
将如合成例3所制的含有连接至硅胶的苯氧基丙基配体的色谱介质，填充入半制备型柱(10mmX250mm)中，将25μl的含2.5mg/ml碘克沙醇的水溶液注射入柱中，并使用4.02ml/分钟的流速。仅使用水作为流动相，碘克沙醇在33.7分钟洗脱。所得色谱图为图3。
应用例4
将如合成例4所制的含有连接至硅胶的甲氧基苯基丙基配体的色谱介质，填充入半制备型柱(10mmX250mm)中，将25μl的含2.5mg/ml碘克沙醇的水溶液注射入柱中，并使用4.02ml/分钟的流速。仅使用水作为流动相，碘克沙醇在33.1分钟洗脱。所得色谱图为图4。
应用例5
将如合成例5所制的含有连接至硅胶的苯氧基丙基配体的色谱介质，填充入半制备型柱(10mmX250mm)中，将50μl的溶液(含尿嘧啶、苯酚、m-DETA和联苯的混合物)注射入柱中，并使用50/50乙腈∶水作为流动相，以2ml/分钟的流速。所得色谱图示于图5中。
对比应用例
将如对比合成例所制的含有连接至硅胶的苯基丁基配体的色谱介质，填充入分析柱(4.6X250mm)中。将5μl的含2.5mg/ml碘克沙醇的水溶液注射入柱中，流速为0.85ml/分钟。使用具有苯基丁基配体的介质和水作为流动相并不在水中洗脱碘克沙醇，甚至多至45分钟也不能。而且苯基丁基配体介质要求30％甲醇洗脱碘克沙醇。碘克沙醇在63分钟用在流动相中的约30％甲醇洗脱。所得色谱图示于图6中。这与本发明的介质(应用例3，图3)的对比表明碘克沙醇可以从高含水量的溶液中洗脱并分离出来。
尽管已经在此参考具体的实施方案对本发明进行了描述，但是应当理解的是，可以不偏离本文所公开的本发明概念的精神和范围对本发明进行改变、调节和变化。因此，这些落在所附权利要求书精神和范围内的改变、调节和变化也包括在本发明的范围内。

Claims (23)

1.反相色谱介质，其选自下式表示的介质：
[X-C6H4-(O)m-(CH2)n]q-Z
和所述式的疏水性封端的介质，
其中n为1至4的数，m为0或1，当m为1时，X选自基团H、具有1至6个碳原子的烷基和苯基，当m为0时，X选自具有1至6个碳原子的烷氧基和苯氧基，Z为硅胶色谱载体或亲水性聚合物色谱载体的骨架，q为等于连接至所述硅胶色谱载体或亲水性聚合物色谱载体的骨架的配体的数量的数，条件是，当所述式的反相色谱介质未被疏水性基团封端时，m＝1时X不为H。
2.根据权利要求1的反相色谱介质，其中Z为硅胶载体骨架。
3.根据权利要求1的反相色谱介质，其中Z为硅胶载体骨架，X为H，m＝1且n＝3。
4.根据权利要求3的反相色谱介质，其中所述介质具有疏水性封端，并且所述疏水性封端是通过六甲基二硅氮烷。
5.根据权利要求1的反相色谱介质，其中Z为硅胶载体骨架，X为甲氧基，m＝0且n＝3。
6.制备下式的反相色谱介质的方法：
[X-C6H4-(O)m-(CH2)n]q-Z
其中n为1至4的数，m为0或1，当m为1时，X选自基团H、具有1至6个碳原子的烷基和苯基，当m为0时，X选自具有1至6个碳原子的烷氧基和苯氧基，Z为硅胶色谱载体或亲水性聚合物色谱载体的骨架，q为等于连接至所述硅胶色谱载体或亲水性聚合物色谱载体的骨架的配体的数量的数，条件是，当所述式的反相色谱介质未被疏水性基团封端时，m＝1时X不为H，
所述方法包括使
(a)色谱介质载体，其选自(1)在硅胶骨架的表面上具有羟基的硅胶载体或(2)在聚合物骨架的表面上具有羟基、胺或亚胺基团的亲水性聚合物载体，
与
(b)下式的反应物进行反应
[X-C6H4-(O)m-(CH2)n]p-Si(Y)4-p
其中p为1至3的数，Y选自氯、溴、碘和在烷氧基部分具有1至4个碳原子的烷氧基，且m、n和X如上所定义，和
(c)任选地，使所得的下式的反相色谱介质：
[X-C6H4-(O)m-(CH2)n]q-Z
与疏水性封端反应物反应以提供所述介质的疏水性封端。
7.根据权利要求6的方法，其中p＝1，硅胶或亲水性聚合物载体与反应物反应的重量比范围为约20∶1至约2∶1。
8.根据权利要求7的方法，其中Z为硅胶载体。
9.根据权利要求8的方法，其中p＝1，X为H，m＝1，n＝3，Y为氯，且所得介质与疏水性封端试剂反应。
10.根据权利要求9的方法，其中所述封端试剂为六甲基二硅氮烷。
11.根据权利要求8的方法，其中p＝1，X为甲氧基，m＝0，n＝3，且Y为氯。
12.将分析物从含有分析物的溶液中分离的方法，所述方法包括：
(a)提供填充有反相色谱介质的色谱柱，所述反相色谱介质选自下式的介质：
[X-C6H4-(O)m-(CH2)n]q-Z
和所述式的疏水性封端的介质，
其中n为1至4的数，m为0或1，当m为1时，X选自基团H、具有1至6个碳原子的烷基和苯基，当m为0时，X选自具有1至6个碳原子的烷氧基和苯氧基，Z为硅胶色谱载体或亲水性聚合物色谱载体的骨架，q为等于连接至所述硅胶色谱载体或亲水性聚合物色谱载体的骨架的配体的数量的数，条件是，当所述式的反相色谱介质未被疏水性基团封端时，m＝1时X不为H；
(b)将该分析物的溶液注射进入该填充柱；和
(c)洗脱该分析物。
13.根据权利要求12的方法，其中Z为硅胶载体。
14.根据权利要求12的方法，其中Z为硅胶载体，X为H，m＝1且n＝3。
15.根据权利要求14的方法，其中所述介质具有疏水性封端，并且所述疏水性封端是通过六甲基二硅氮烷。
16.根据权利要求12的方法，其中Z为硅胶载体，X为甲氧基，m＝0和n＝3。
17.根据权利要求12的方法，其中所述分析物为对乙酰氨基酚，且所述对乙酰氨基酚的洗脱在水流动相中进行。
18.根据权利要求17的方法，其中在所述介质中，Z为硅胶载体，X为H，m＝1且n＝3。
19.根据权利要求12的方法，其中所述分析物为碘克沙醇，所述碘克沙醇的洗脱在水流动相中进行。
20.根据权利要求19的方法，其中在所述介质中，Z为硅胶载体，X为甲氧基，m＝0且n＝3。
21.根据权利要求12的方法，其中所述分析物为分子量为约200或更少的分析物，所述分析物的洗脱在水流动相中进行。
22.根据权利要求21的方法，其中在所述介质中，Z为硅胶载体，X为H，m＝1和n＝3，并且所述介质具有通过六甲基二硅氮烷的疏水性封端。
23.根据权利要求21的方法，其中在所述介质中，Z为硅胶载体，X为甲氧基，m＝0和n＝3。
CN2009801461572A 2008-11-19 2009-11-16 基于苯氧基烷基和烷氧基-或苯氧基-苯基烷基配体的新色谱介质 Pending CN102215953A (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US11599308P 2008-11-19 2008-11-19
US61/115,993 2008-11-19
PCT/US2009/064536 WO2010059550A1 (en) 2008-11-19 2009-11-16 New chromatographic media based on phenoxy alkyl and alkoxy-or phenoxy-phenyl alkyl ligands

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN102215953A true CN102215953A (zh) 2011-10-12

Family

ID=41630929

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN2009801461572A Pending CN102215953A (zh) 2008-11-19 2009-11-16 基于苯氧基烷基和烷氧基-或苯氧基-苯基烷基配体的新色谱介质

Country Status (12)

Country Link
US (1) US20110220575A1 (zh)
EP (1) EP2365874A1 (zh)
JP (1) JP2012509479A (zh)
KR (1) KR20110089427A (zh)
CN (1) CN102215953A (zh)
AU (1) AU2009316828A1 (zh)
CA (1) CA2744145A1 (zh)
IL (1) IL212951A0 (zh)
MX (1) MX2011005163A (zh)
SG (1) SG171340A1 (zh)
TW (1) TW201035032A (zh)
WO (1) WO2010059550A1 (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107106932A (zh) * 2015-01-15 2017-08-29 戴安公司 具有改进的pH稳定性的色谱材料、其制备方法和其用途
CN114041052A (zh) * 2019-06-26 2022-02-11 沃特世科技公司 具有固定的亲和配体和酶的涂层及其在液相色谱测定中的用途

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2570185A1 (en) * 2011-09-15 2013-03-20 InstrAction GmbH Sorbent comprising an aromatic ring system on its surface for the purification of organic molecules
WO2019069158A1 (en) * 2017-10-02 2019-04-11 Ali Reza Ghiasvand MODIFIED COTTON FABRIC FOR SOLID PHASE EXTRACTION AND METHOD OF MANUFACTURE
CN113385157A (zh) * 2021-03-10 2021-09-14 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 二氧化硅接枝烷基封端离子液体

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3438296A1 (de) * 1984-04-18 1985-11-07 Hoechst Ag, 6230 Frankfurt Neue polypeptide mit blutgerinnungshemmender wirkung, verfahren zu deren herstellung bzw. gewinnung, deren verwendung und diese enthaltende mittel
DE3689525D1 (de) * 1985-07-17 1994-02-24 Hoechst Ag Neue Polypeptide mit blutgerinnungshemmender Wirkung, Verfahren zu deren Herstellung bzw. Gewinnung, deren Verwendung und diese enthaltende Mittel.
JP2504005B2 (ja) * 1986-11-17 1996-06-05 東ソー株式会社 充填剤およびその製法
US5204005A (en) * 1990-02-26 1993-04-20 Mallinckrodt, Inc. Reversed phase chromatographic process
US5380916A (en) * 1990-11-02 1995-01-10 University Of Florida Method for the isolation and purification of taxane derivatives
US5475120A (en) * 1990-11-02 1995-12-12 University Of Florida Method for the isolation and purification of taxol and its natural analogues
US5993653C1 (en) * 1997-08-11 2001-11-06 Phenomenex Composition and column used in hplc
US6002025A (en) * 1999-02-24 1999-12-14 Bcm Developement Inc. Method for the purification of taxanes
CN1867580B (zh) * 2003-09-03 2010-09-29 协和发酵麒麟株式会社 被甘油衍生物修饰的化合物
US7169307B2 (en) * 2004-09-02 2007-01-30 Jian Liu Process for the extraction of paclitaxel and 9-dihydro-13-acetylbaccatin III from Taxus
JP4942953B2 (ja) * 2005-06-30 2012-05-30 サントリーホールディングス株式会社 プロシアニジンの分析方法
US9308520B2 (en) * 2005-12-16 2016-04-12 Akzo Nobel N.V. Silica based material
US20070251870A1 (en) * 2006-05-01 2007-11-01 Agilent Technologies, Inc. Chromatographic stationary phase

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107106932A (zh) * 2015-01-15 2017-08-29 戴安公司 具有改进的pH稳定性的色谱材料、其制备方法和其用途
US11813588B2 (en) 2015-01-15 2023-11-14 Dionex Corporation Chromatographic material having improved pH stability, method for preparation thereof and uses thereof
CN114041052A (zh) * 2019-06-26 2022-02-11 沃特世科技公司 具有固定的亲和配体和酶的涂层及其在液相色谱测定中的用途

Also Published As

Publication number Publication date
US20110220575A1 (en) 2011-09-15
IL212951A0 (en) 2011-07-31
JP2012509479A (ja) 2012-04-19
MX2011005163A (es) 2011-06-17
KR20110089427A (ko) 2011-08-08
SG171340A1 (en) 2011-07-28
WO2010059550A1 (en) 2010-05-27
TW201035032A (en) 2010-10-01
EP2365874A1 (en) 2011-09-21
AU2009316828A1 (en) 2011-07-07
CA2744145A1 (en) 2010-05-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US5374755A (en) Liquid chromatography stationary phases with reduced silanol interactions
Buszewski et al. Survey and trends in the preparation of chemically bonded silica phases for liquid chromatographic analysis
CN1917953B (zh) 用于色谱分离的极性改性的键合相材料
O'Gara et al. Simple preparation of a C8 HPLC stationary phase with an internal polar functional group
Kirkland et al. Bidentate silane stationary phases for reversed-phase high-performance liquid chromatography
Calleri et al. Evaluation of a monolithic epoxy silica support for penicillin G acylase immobilization
O'Gara et al. Systematic study of chromatographic behavior vs alkyl chain length for HPLC bonded phases containing an embedded carbamate group
CN102215953A (zh) 基于苯氧基烷基和烷氧基-或苯氧基-苯基烷基配体的新色谱介质
Muderawan et al. Urea bonded cyclodextrin derivatives onto silica for chiral HPLC
CN101765458B (zh) 分离基质
CN101356003B (zh) 二氧化硅基材料
Colón et al. Allyl-functionalized hybrid silica monoliths
US7074491B2 (en) Polar silanes for binding to substrates and use of the bound substrates
CN102858419A (zh) 实施体积排阻色谱的设备和方法
Silva et al. Development of new urea-functionalized silica stationary phases: Characterization and chromatographic performance
EP1480730B1 (en) Polar silanes and their use on silica supports
Bocian et al. Synthesis and characterization of phosphodiester stationary bonded phases for liquid chromatography
US8133390B2 (en) Reversed endcapping and bonding of chromatographic stationary phases using hydrosilanes
Sun et al. Styrene‐N‐phenylacrylamide co‐polymer modified silica monolith particles with an optimized mixing ratio of monomers as a new stationary phase for the separation of peptides in high performance liquid chromatography
Sun et al. An optimized mixed‐mode stationary phase based on silica monolith particles for the separation of peptides and proteins in high‐performance liquid chromatography
Chen et al. Synthesis of chemically bonded cellulose trisphenylcarbamate chiral stationary phases for enantiomeric separation
US20070251869A1 (en) Chromatographic stationary phase
Yu et al. Preparation of pyrenebutyric acid bonded silica stationary phases for the application to the separation of fullerenes
US20050242038A1 (en) Novel stationary phases for use in high-performance liquid chromatography
Li et al. Hydrosilylated allyl‐silica hybrid monolithic columns

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C02 Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001)
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Open date: 20111012