CN102202525A - 具有被包被脂质球的营养组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种用于婴儿和/或初学走路者的营养组合物，包含具有以极性脂质包被的脂质球的脂质组分。所述组合物可用于防止以后肥胖并且/或者改善以后的身体组成。所述液体包含以所述组合物干重计10-50重量％的植物液体，以及(i)以总重计0.5-20重量％的磷脂，或(ii)以总脂质计0.6-25重量％的极性脂质，其中极性脂质是磷脂、糖鞘脂和胆固醇之和，并且所述组合物包含具有包含所述植物脂质的核心和包含所述磷脂或极性脂质的包被层的脂质球。
Description
技术领域
本发明涉及用于预防以后肥胖的婴儿配方乳和成长乳领域。
背景技术
母乳喂养是喂养婴儿的首选方法。然而，有一些情况会使得母乳喂养不可能或者不太可取。在这些情形下，婴儿配方物是很好的选择。现代婴儿配方物的组成被以这样的方式调整，即它满足快速生长发育的婴儿的许多特别的营养需求。
似乎仍可以对婴儿配方乳的构成进行改进。与配方物喂养婴儿相比，母乳喂养婴儿以后变肥胖的几率降低，但对婴儿配方物中的成分对以后肥胖的效应知之甚少。肥胖是一个主要的健康问题。它是一种医学病症，其中，过多体脂肪积累到它会对健康产生不利效应的程度，导致预期寿命降低，并且与许多疾病相关，特别是心脏病、2型糖尿病、睡眠中呼吸困难、一些类型的癌症和骨关节炎。肥胖是世界范围内重要的可预防死亡诱因，并且在成年和儿童中越来越普遍，权威机构将其看作是21世纪最严重的公共健康问题之一。
本发明涉及这类将来身体健康的组合物。
WO 2007/073194涉及用于防止肥胖的包含磷脂、鞘脂和胆固醇的婴儿配方物。WO 2007/073193涉及用于预防以后肥胖的婴儿配方物，其具有特定亚油酸与α-亚麻酸比，低亚油酸含量并包含磷脂、鞘脂、胆固醇和/或胆碱+尿苷。EP1800675涉及用于改善用于治疗多种病症的膜组成的具有多不饱和脂肪酸、蛋白质以及锰和/或钼的组合物。
Michalski等人，2005，J Dairy Sci 88：1927-1940公开了人乳和婴儿配方物中的脂质球的大小分布。WO 2005/051091涉及一种脂质结合物，所述脂质结合物在基本上呈水性的具有婴儿配方物的其他成分的介质中分散或乳化时，形成基本同质的分散液或乳液，所述分散液或乳液具有含脂质球的微结构，该微结构基本上模拟天然人乳脂肪的相应球形微结构。然而，未公开对以后肥胖的效应。
发明内容
本发明人意外地发现，如果生命早期给予的饮食含有以包含极性脂质的层包被的脂质球，那么会影响到以后的身体组成。婴儿饮食中被包被的脂质球可致使以后的脂肪量降低，减少以后的相对脂肪量并且/或者减少以后的肥胖。如果将所述极性脂质与所述脂质球分开加入所述饮食中，那么就不会或者不会那么明显地观察到这些结果。具体而言，脂肪细胞肥大被减少。由脂肪细胞肥大引起的肥胖被认为指示以后肥胖的开始，并且与脂肪细胞增生导致的肥胖相比与健康问题例如胰岛素抵抗更加相关。
所述配方物之间的重要差异是以极性脂质包被脂质球，而所述配方物中的脂肪酸谱是类似的。除了含有极性脂质包被的小脂质球的饮食具有降低的脂肪量之外，所述配方物还能够使得产生类似的良好生命早期的生长和发育，并且对生命早期的体重、瘦体重(lean body mass)和脂肪量无显著效应。因此，所述饮食无直接效应，例如防止肥胖的效应。这一点是有利的，因为婴儿和幼儿的脂肪量在能量贮存、隔热、脂溶性维生素的贮存和激素发生例如瘦蛋白和胰岛素敏感性的发生中起到重要作用，因此不希望显著降低婴儿和幼儿的脂肪量。
当由极性脂质外层包被的脂质球的大小增大时，观察到对以后的脂肪量以及脂肪量与总体重的相对量有进一步改善的效应。
标准婴儿配方乳具有作为脂质组分的植物脂肪。所述脂质被匀化以生成稳定的乳剂，并且所述脂质球较小，体积加权众数直径(volume-weighted mode diameter)的区间是约0.3-0.6μm。一般而言，不专门加入极性脂质，但为了稳定性的原因其可以少量存在于即饮型配方物中。已经发现，标准的(例如从粉末化制备的)婴儿配方物的脂质球包覆有乳蛋白质，而非极性脂质。这些蛋白质被认为具体是酪蛋白。
本发明涉及包含具有极性脂质包被的脂质球的植物脂肪的婴儿配方物或初学走路者的成长乳。这可以以如下方式实现：在存在极性脂质下匀化包含植物脂肪的脂质组分，然后是干燥步骤。
本发明人现已意外发现，以极性脂质包被生命早期给予的脂质球是影响以后身体组成(特别是脂肪量)的决定因素之一。当所述脂质球大小增大时，对脂肪量的这一效应甚至更加明显。有利的是，所观察到的饮食对身体组成的急性效应少于以后观察到的效应，因此可以得出的结论是所述饮食以这样的方式编程或印记身体，即在类似条件下进一步生长后，该方式致使以后出现改善的身体组成。
本发明因此可以用于这样的食物组合物，即该食物组合物意欲用于婴儿和/或初学走路者，以预防以后的肥胖，增加以后的瘦体重并且/或者降低以后的脂肪量。
具体实施方式
因此本发明涉及一种用于防止肥胖、降低肥胖风险并且/或者治疗肥胖的方法，所述方法包括对人受试者给予一种营养组合物，所述组合物包含
以所述组合物干重计10至50重量％的植物脂质，以及
i)以总脂质计0.5至20重量％的磷脂，或
ii)以总脂质计0.6至25重量％的极性脂质，其中极性脂质为磷脂、糖鞘脂和胆固醇之和，
所述组合物包含具有包含所述植物脂质的核心和包含所述磷脂或极性脂质的包被层的脂质球。
本发明还涉及一种用于改善身体组成的方法，所述身体组成的改善选自瘦体重增加、脂肪量降低以及脂肪量与总体重的相对量降低，所述方法包括对人受试者给予一种营养组合物，所述组合物包含
以所述组合物干重计10至50重量％的植物脂质，以及
i)以总脂质计0.5至20重量％的磷脂，或
ii)以总脂质计0.6至25重量％的极性脂质，其中极性脂质为磷脂、糖鞘脂和胆固醇之和，
所述组合物包含具有包含所述植物脂质的核心和包含所述磷脂或极性脂质的包被层的脂质球。
在一方面中，本发明涉及一种用于防止肥胖并且/或者降低肥胖风险的非治疗性方法，所述方法包括对人受试者给予一种营养组合物，所述组合物包含
以所述组合物干重计10至50重量％的植物脂质，以及
i)以总脂质计0.5至20重量％的磷脂，或
ii)以总脂质计0.6至25重量％的极性脂质，其中极性脂质为磷脂、糖鞘脂和胆固醇之和，
所述组合物包含具有包含所述植物脂质的核心和包含所述磷脂或极性脂质的包被层的脂质球。
在一方面中，本发明还涉及一种用于改善身体组成的非治疗性方法，所述身体组成的改善选自瘦体重增加、脂肪量降低以及脂肪量与总体重的相对量降低，所述方法包括对人受试者给予一种营养组合物，所述组合物包含
以所述组合物干重计10至50重量％的植物脂质，以及
i)以总脂质计0.5至20重量％的磷脂，或
ii)以总脂质计0.6至25重量％的极性脂质，其中极性脂质为磷脂、糖鞘脂和胆固醇之和，
所述组合物包含具有包含所述植物脂质的核心和包含所述磷脂或极性脂质的包被层的脂质球。
本发明还可以描述为脂质用于制备用于防止肥胖、降低肥胖风险并且/或者治疗肥胖的营养组合物的用途，所述营养组合物包含
以所述组合物干重计10至50重量％的植物脂质，以及
i)以总脂质计0.5至20重量％的磷脂，或
ii)以总脂质计0.6至25重量％的极性脂质，其中极性脂质为磷脂、糖鞘脂和胆固醇之和，
并且所述组合物包含具有包含所述植物脂质的核心和包含所述磷脂或极性脂质的包被层的脂质球。
本发明还涉及脂质用于制备用于改善身体组成的营养组合物的用途，所述身体组成的改善选自瘦体重增加、脂肪量降低以及脂肪量与总体重的相对量降低，所述营养组合物包含
以所述组合物干重计10至50重量％的植物脂质，以及
i)以总脂质计0.5至20重量％的磷脂，或
ii)以总脂质计0.6至25重量％的极性脂质，其中极性脂质为磷脂、糖鞘脂和胆固醇之和，
并且所述组合物包含具有包含所述植物脂质的核心和包含所述磷脂或极性脂质的包被层的脂质球。
本发明还可以描述为一种在防止肥胖、降低肥胖风险并且/或者治疗肥胖中使用的营养组合物，所述营养组合物包含
以所述组合物干重计10至50重量％的植物脂质，以及
i)以总脂质计0.5至20重量％的磷脂，或
ii)以总脂质计0.6至25重量％的极性脂质，其中极性脂质为磷脂、糖鞘脂和胆固醇之和，
所述组合物包含具有包含所述植物脂质的核心和包含所述磷脂或极性脂质的包被层的脂质球。
本发明还涉及一种在改善身体组成中使用的营养组合物，所述身体组成的改善选自瘦体重增加、脂肪量降低以及脂肪量与总体重的相对量降低，所述营养组合物包含
以所述组合物干重计10至50重量％的植物脂质，以及
i)以总脂质计0.5至20重量％的磷脂，或
ii)以总脂质计0.6至25重量％的极性脂质，其中极性脂质为磷脂、糖鞘脂和胆固醇之和，
所述组合物包含具有包含所述植物脂质的核心和包含所述磷脂或极性脂质的包被层的脂质球。
本发明还涉及一种营养组合物，所述营养组合物包含
a)以所述组合物干重计10至50重量％的植物脂质，以及
b)以总脂质计0.5至20重量％的磷脂，其中所述磷脂来自于乳脂质，
并且所述组合物包含具有包含所述植物脂质的核心和包含所述磷脂的包被层的脂质球，
其中
i)所述脂质球的体积加权众数直径大于1.0μm，优选1.0至10μm，并且/或者
ii)以总脂质计至少45体积％、更优选至少55体积％的量的所述脂质球的直径为2至12μm。
本发明还涉及一种营养组合物，所述营养组合物包含
a)以所述组合物干重计10至50重量％的植物脂质，以及
b)以总脂质计0.6至25重量％的极性脂质，其中极性脂质以总脂质计为磷脂、糖鞘脂和胆固醇之和，
并且所述组合物包含具有包含所述植物脂质的核心和包含所述磷脂或极性脂质的包被层的脂质球，
其中
i)所述脂质球的体积加权众数直径大于1.0μm，优选1.0至10μm，并且/或者
ii)以总脂质计至少45体积％、更优选至少55体积％的量的所述脂质球的直径为2至12μm。
在一方面中，本发明涉及一种营养组合物，所述营养组合物包含
a)以所述组合物干重计10至50重量％的植物脂质，以及
b1)以总脂质计0.5至20重量％的磷脂，其中所述磷脂来自于乳脂质，或
b2)以总脂质计0.6至25重量％的极性脂质，其中极性脂质以总脂质计为磷脂、糖鞘脂和胆固醇之和，
其中所述脂质具有亚油酸与α-亚麻酸的重量比为4至7的脂肪酸谱
并且所述组合物包含具有包含所述植物脂质的核心和包含所述磷脂或极性脂质的包被层的脂质球，
其中
i)所述脂质球的体积加权众数直径小于1.0μm，优选0.3至0.6μm，并且
ii)以总脂质计少于45体积％的量的所述脂质球的直径为2至12μm，优选的大小分布为其中多于55体积％的脂质球具有小于2μm的直径。
肥胖
优选将本发明的组合物给予年龄小于36个月、优选小于18个月、更优选小于12个月、甚至更优选小于6个月的人受试者。所述人受试者优选不肥胖并且/或者不超重。
本发明中肥胖涉及身体脂肪量过剩。脂肪量还被称为脂肪组织(adipose tissue或fat tissue)。成人如果超过25重量％(男性)或超过30重量％(女性)的体重为脂肪量则为肥胖。肥胖有时被称为肥胖症。
确定身体脂肪量％的合适方式有水下称重、皮肤褶测量、生物电阻抗分析、计算机体层摄影术(CT/CAT扫描)、磁共振成像(MRI/NMR)、超声波检查和双能X线吸收术(DEXA)。优选的方法是DEXA测量。在本发明的上下文中，身体脂肪量通过DEXA确定。
脂质组分
本发明的组合物包含脂质。所述脂质优选提供30至60％的所述组合物的总卡路里。本发明的组合物更优选包含提供35至55％的总卡路里的脂质，本发明的组合物甚至更优选包含提供40至50％的总卡路里的脂质。当为液体形式时，例如作为即食型液体，所述组合物每100ml优选包含2.1至6.5g脂质，更优选每100ml包含3.0至4.0g脂质。以干重计，本发明的组合物优选包含10至50重量％、更优选12.5至40重量％的脂质，甚至更优选19至30重量％的脂质。
脂质包括极性脂质(例如磷脂、糖脂、鞘磷脂和胆固醇)、甘油单酯、甘油二酯、甘油三酯和游离脂肪酸。所述组合物优选包含以总脂质计至少75重量％、更优选至少85重量％的甘油三酯。
本发明的脂质包含植物脂质。存在植物脂质可有利于地使脂肪酸谱最优，(多)不饱和脂肪酸更高并且/或者更类似于人乳脂肪。使用来自仅牛乳或其他驯养哺乳动物的脂质不能提供最优的脂肪酸谱。这种次优的脂肪酸谱例如有大量的饱和脂肪酸已知会导致肥胖增加。优选地，本发明的组合物包含至少1种、优选至少2种选自如下的脂质源：亚麻籽油(亚麻仁油)、油菜籽油(例如菜籽油、低芥酸油菜籽油和油菜油)、鼠尾草油、紫苏籽油、马齿苋油、越橘油、沙棘油、大麻油、葵花籽油、高油酸葵花籽油、红花油、高油酸红花油、橄榄油、黑醋栗种子油、蓝蓟油、椰子油、棕榈油和棕榈仁油。优选地，本发明的组合物包含至少1种、优选至少2种选自如下的脂质源：亚麻籽油、油菜油、椰子油、葵花籽油和高油酸葵花籽油。市售植物脂质一般以连续油相的形式提供。当以液体形式时，例如作为即食型液体，所述组合物优选每100ml包含2.1至6.5g植物脂质，更优选每100ml包含3.0至4.0g植物脂质。以干重计，本发明的组合物优选包含10至50重量％、更优选12.5至40重量％的植物脂质，甚至更优选19至30重量％的植物脂质。所述组合物优选包含以总脂质计50至100重量％的植物脂质，更优选70至100重量％，甚至更优选75至97重量％。因此请注意，本发明的组合物还可包含非植物脂质。合适的和优选的非植物脂质在下文进一步详细说明
极性脂质
本发明包含极性脂质。极性脂质在性质上是两亲的，并包括甘油磷脂、糖鞘脂、鞘磷脂和/或胆固醇。所述组合物更优选包含磷脂(甘油磷脂和鞘磷脂之和)。本发明中的极性脂质涉及甘油磷脂、糖鞘脂、鞘磷脂和胆固醇之和。根据本发明，极性脂质作为所述脂质球的包被层存在。“包被层”是指，所述脂质球包含极性脂质的外表面层，然而这些极性脂质基本上不存在于所述脂质球的核心中。在生命早期给予的饮食中存在作为所述脂质球的包被层或外层的极性脂质被发现可有利地进一步降低以后的脂肪量，降低以后的相对脂肪量即肥胖，并且/或者增加以后的瘦体重。
本发明的组合物优选包含甘油磷脂。甘油磷脂是由以下物质形成的一类脂质：在主链甘油部分的碳-1和碳-2上的羟基酯化的脂肪酸，经酯键连接于甘油的碳-3的带负电磷酸基团，以及任选的连接于所述磷酸基团的胆碱基团(对于磷脂酰胆碱，PC)、丝氨酸基团(对于磷脂酰丝氨酸，PS)、乙醇胺基团(对于磷脂酰乙醇胺，PE)、肌醇基团(对于磷脂酰肌醇，PI)或甘油基团(对于磷脂酰甘油，PG)。溶血磷脂是具有一个脂肪酰链的一类磷脂。本发明的组合物优选包含PC、PS、PI和/或PE，更优选至少PC。
本发明的组合物优选包含糖鞘脂。本发明中的术语糖鞘脂特别是指具有氨醇鞘氨醇的糖脂。所述鞘氨醇的主链与带电首基——如乙醇胺、丝氨酸或胆碱主链以O相连。所述主链还与脂肪酰基基团以酰胺键连接。糖鞘脂是具有以β-糖苷键连接在1-羟基位置的一个或多个糖残基的神经酰胺。本发明的组合物优选包含神经节苷脂，更优选选自GM3和GD3的至少一种神经节苷脂。
本发明的组合物优选包含鞘磷脂。鞘磷脂具有酯化于神经酰胺的1-羟基基团上的磷脂酰胆碱或磷脂酰乙醇胺分子。它们被分类为磷脂和鞘脂，但是不分类为甘油磷脂或糖鞘脂。
鞘脂在本发明中被定义为鞘磷脂和糖鞘脂之和。磷脂在本发明中被定义为鞘磷脂和甘油磷脂之和。所述磷脂优选来自乳脂质。磷脂∶糖鞘脂的重量比优选为2∶1至10∶1，更优选2∶1至5∶1。
本发明的组合物优选包含磷脂。本发明的组合物优选包含以总脂质计0.5至20重量％的磷脂，以总脂质计更优选0.5至10重量％、更优选1至10重量％、甚至更优选2至10重量％、甚至更优选3至8重量％的磷脂。本发明的组合物优选包含以总脂质计0.1至10重量％的糖鞘脂，更优选0.5至5重量％，甚至更优选2至4重量％。本发明的组合物优选包含以总脂质计0.5至10重量％(糖鞘脂和磷脂)，以总脂质计更优选1.0至10重量％(糖鞘脂和磷脂)。
本发明的组合物优选包含胆固醇。本发明的组合物优选包含以总脂质计至少0.005重量％的胆固醇，更优选至少0.02重量％，更优选至少0.05重量％，甚至更优选至少0.1重量％。胆固醇的量以总脂质计优选不超过10重量％，更优选不超过总脂质的5重量％，甚至更优选不超过总脂质的1重量％。
本发明的组合物优选包含以总脂质计0.6至25重量％的极性脂质，其中所述极性脂质为磷脂、糖鞘脂和胆固醇之和，以总脂质计更优选0.6至12重量％、更优选1至10重量％、甚至更优选2至10重量％、甚至更优选3.0至10重量％的极性脂质，其中所述极性脂质为磷脂、糖鞘脂和胆固醇之和。
提供磷脂、糖鞘脂和/或胆固醇的优选源是卵脂质、乳脂、酪乳脂和酪乳清脂(例如β乳清脂)。磷脂特别是PC的优选源是大豆卵磷脂和/或葵花卵磷脂。本发明的组合物优选包含来自乳的磷脂。本发明的组合物优选包含来自乳的磷脂和糖鞘脂。胆固醇也优选获自乳。所述极性脂质优选来自乳。来自乳的极性脂质包括从乳脂质、乳油脂质、酪乳清脂(例如β乳清脂)、乳清脂质、乳酪脂质和/或酪乳脂质分离的极性脂质。所述酪乳脂质一般在制造酪乳过程中得到。酪乳清脂质或β乳清脂一般在从酪制造无水乳脂过程中得到。磷脂、糖鞘脂和/或胆固醇优选从乳油得到。所述组合物优选包含来自母牛、母马、绵羊、山羊、水牛、马和骆驼的乳的磷脂、糖鞘脂和/或胆固醇。最优选使用从牛乳分离的脂质提取物。使用来自乳脂的极性脂质有利地包含来自乳脂小球膜的极性脂质，所述极性脂质与人乳中的情况更相似。与其他来源的极性脂质相比，来自脂肪乳的极性脂质可有利地将脂肪量降低至更大的程度。所述极性脂质位于所述脂质球表面上，即作为包被层或外层。确定所述极性脂质是否位于所述脂质球表面之上的合适方式有实施例1中给出的激光扫描显微术。因此，并行使用来自家畜乳的极性脂质和来自植物脂质的甘油三酯能够制造以更类似于人乳的具有包被层的被包被脂质球，同时提供最优的脂肪酸谱。合适的市售乳极性脂质来源有Corman的BAEF、SM2、SM3和SM4粉末；Glanbia的Salibra；以及Arla的LacProdan MFGM-10或PL20。乳极性脂质来源优选包含以总脂质计至少4重量％的磷脂，以总脂质计更优选7至75重量％、最优选20至70重量％的磷脂。磷脂与蛋白质的重量比优选高于0.10，更优选高于0.20，甚至更优选高于0.3。优选至少25重量％、更优选至少40重量％、最优选至少75重量％的所述极性脂质来自乳极性脂质。
脂肪酸组成
在本文中，LA是指亚油酸和/或酰基链(18:2 n6)；ALA是指α-亚麻酸和/或酰基链(18:3 n3)；LC-PUFA是指脂肪酰基链中包含至少20个碳原子且具有2个或更多个不饱和键的长链多不饱和脂肪酸和/或酰基链；DHA是指二十二碳六烯酸和/或酰基链(22:6，n3)；EPA是指二十碳五烯酸和/或酰基链(20:5 n3)；ARA是指花生四烯酸和/或酰基链(20:4 n6)；DPA是指二十二碳五烯酸和/或酰基链(22:5 n3)。中链脂肪酸(MCFA)是指链长为6、8或10个碳原子的脂肪酸和/或酰基链。
存在的LA的量优选足够促进健康生长和发育，但尽可能低以防止以后出现肥胖。因此，所述组合物优选包含以总脂肪酸计低于15重量％的LA，优选5至14.5重量％，更优选6至10重量％。所述组合物优选包含以脂肪酸计多于5重量％的LA。存在的ALA的量优选足够促进婴儿的健康生长和发育。因此，本发明的组合物优选包含以总脂肪酸计至少1.0重量％的ALA。所述组合物优选包含以总脂肪酸计至少1.5重量％、更优选至少2.0重量％的ALA。所述组合物优选包含以总脂肪酸计低于10重量％、更优选低于5.0重量％的ALA。应将LA/ALA重量比良好地平衡以防止肥胖，同时保证正常的生长和发育。因此，本发明的组合物优选包含2至15、更优选2至7、更优选4至7、更优选3至6、甚至更优选4至5.5、甚至更优选4至5的LA/ALA重量比。
由于在将MCFA给予婴儿时其可促进以后脂肪量降低，因此本发明的组合物优选包含以总脂肪酸计至少3重量％、更优选至少10重量％、甚至更优选15重量％的MCFA。由于MCFA可非向心性脂肪量优先地降低身体脂肪沉积并且由于MFCA不降低脂肪细胞数目，因此本发明的组合物可有利地包含以总脂肪酸计少于50重量％、更优选少于40重量％、甚至更优选少于25重量％的MCFA。
本发明的组合物优选包含n-3LC-PUFA，这是由于n-3LC-PUFA可减少以后的肥胖，更优选向心性肥胖。本发明的组合物更优选包含EPA、DPA和/或DHA，甚至更优选DHA。由于低浓度的DHA、DPA和/或EPA已经是有效的并且正常生长和发育是重要的，本发明的组合物中的n-3LC-PUFA含量优选不超过15重量％、优选不超过10重量％、甚至更优选不超过5重量％的总脂肪酸含量。本发明的组合物优选包含占总脂肪酸含量至少0.2重量％、优选至少0.5重量％、更优选至少0.75重量％的n-3LC-PUFA。
由于n-6类脂肪酸(特别是花生四烯酸(AA)和作为其前体的LA)可抵消n-3类脂肪酸(特别是DHA和EPA以及作为它们的前体的ALA)的作用，因此本发明的组合物包含相对少量的AA。n-6LC-PUFA含量优选以总脂肪酸计不超过5重量％，更优选不超过2.0重量％，更优选不超过0.75重量％，甚至更优选不超过0.5重量％。由于AA对于婴儿最佳功能膜——特别是神经组织的膜——是重要的，因此n-6LC-PUFA的量优选以总脂肪酸计为至少0.02重量％，更优选至少0.05重量％，更优选至少0.1重量％，更优选至少0.2重量％。在低LA的组合物中存在AA是有利的，这是由于它可补救LA不足。在待给予年龄小于6个月的婴儿的营养物中存在AA(优选少量)是有利的，这是由于婴儿配方物对于这些婴儿通常是营养的唯一来源。
除了所述植物脂质之外，优选还存在选自鱼油(优选鲔鱼鱼油)和单细胞油(例如藻油、微生物油和真菌油)的脂质。这些油来源适合作为LC-PUFA来源。优选使用作为n-3LC-PUFA来源的单细胞油——包括藻油和微生物油，原因是这些油来源具有低EPA/DHA比，这会致使抗肥胖效应增加。更优选将鱼油(甚至更优选鲔鱼鱼油)用作n-3LC-PUFA的来源，原因是它们具有较高的EPA浓度，这是有利的，因为EPA是具有另外的抗肥胖效应的类花生酸类物质(eicosanoid)的前体。因此，在一个实施方案中，本发明的组合物还包含选自鱼油、海产油、藻油、真菌和微生物油的至少一种脂质。
得到极性脂质包被的脂质球的方法
本发明的组合物包含脂质球。通过调整制造本发明组合物的加工步骤可以操纵脂质球的大小。得到以极性脂质包被的脂质球的合适且优选的一种方法是与一般存在于婴儿配方物中的量相比增加极性脂质的量，并且在匀化过程中存在这些极性脂质，其中水相和油相的混合物被匀化。婴儿配方物中磷脂/极性脂质的量以总脂肪计一般是约0.15重量％/0.2重量％。将磷脂的量增加至以总脂肪计至少0.5重量％，更优选至少1.0重量％，或者将极性脂质的量增加至以总脂肪计至少0.6重量％，更优选至少1.0重量％。在标准婴儿配方乳中，将脂质级分(通常包括植物脂肪、少量极性脂质和脂溶性维生素)通过匀化混入水性级分(通常包括水、脱脂乳、乳清、例如乳糖的可消化性碳水化合物、水溶性维生素和矿物质以及可选的非消化性碳水化合物)。若不进行匀化，则脂质部分就会迅速变成奶油状，即从水性部分分离出来并在上部聚积。匀化是将脂肪相打碎成较小尺寸的过程，这样使得它就不再迅速从水相中分离出来而是保持为稳定的乳液。这通过在高压下将乳挤压通过小孔来完成。
所述过程包括以下步骤：
1 混合各成分
将所述组合物的各成分混合，优选例如调合(blend)。基本上是将含有植物脂质的脂质相和水相添加在一起。所述成分还包括极性脂质，更优选磷脂。所述水相的成分可包括水、脱脂乳(粉末)、乳清(粉末)、低脂乳、乳糖、水溶性维生素和矿物质。所述水相优选包含非消化性低聚糖。优选将所述水相设定为pH 6.0至8.0，更优选pH 6.5至7.5。所述极性脂质——特别是磷脂——优选来自乳。有利地，在匀化之前使极性脂质存在于水性混合物中致使极性脂质包被层有效地包被所述脂质球(主要由甘油三酯组成)。
所述脂质相优选包括以脂质相总重量计50至100重量％的植物脂质。除了在所述水相中之外，所述极性脂质，更优选磷脂，还可以存在于脂质相中，或者存在于两相中。或者，可以将所述极性脂质分别加入至水相和脂质相中。磷脂与总脂质的重量比优选为0.5至20重量％，更优选0.5至10重量％，甚至更优选3至8重量％。极性脂质与总脂质的重量比优选为0.6至25重量％，更优选0.6至12重量％。
优选将所述水相和脂质相加热，然后添加在一起，优选的加热温度为40℃至80℃，更优选55℃至70℃，甚至更优选55℃至60℃。将所得混合物也保持在此温度并且调合。调合的合适方法是使用Ultra-Turrax T50在5000-10000rpm下调合约30-60秒。然后可向此调合物中加入去矿物质水(demi-water)以获取所需干物质％。所需干物质％为例如15％。或者，将所述脂质相注入所述水相，之后立即进行匀化。
可在所述过程的不同点加入矿物质、维生素和稳定树胶，这取决于它们对热的敏感性。混合可例如通过高剪切搅拌器进行。在本发明的方法中，脱脂乳(酪蛋白)优选不存在于该步骤中，并且在将所述脂肪级分匀化至所述水性级分(包含例如乳清、乳清蛋白、乳糖的化合物)后将其加入至所述组合物。
2.巴氏消毒法
然后，优选对所述混合物进行巴氏消毒。巴氏消毒法涉及在微生物不能存活的受控条件下的快速加热步骤。将温度保持在60至80℃(更优选65至75℃)至少15秒，通常就能充分地减少微生物的营养细胞。一些巴氏消毒方法为已知的且商业可用的。或者，此步骤也可在如步骤1中的混合前进行和/或被步骤1中加热至60℃的这一步骤代替。
3.匀化
随后，将任选巴氏消毒的包含植物脂质、极性脂质和水相的混合物匀化。匀化是一种通过减小所述配方物中脂质球的大小来增加乳液的均匀性和稳定性的过程。此处理步骤可通过多种混合设备进行，所述设备对产品施加高剪切力。此类型的混合将脂质球打碎成更小的球。优选将所获的混合物分两步匀化，例如，分别在250对50巴(250to 50bar)，因此总压力为300巴，目的是获得小的稳定脂质球。
在脂质球大小优选更大的情况下，在低得多的压力下进行所述匀化步骤。例如，在60℃下在5至100巴，优选分别是30至100巴和5至50巴，总压力为35至150巴。或者，优选将所获的混合物分别在5至50巴和在低温下以及在5至50巴和低温下分两步匀化，所述低温为15至40℃，优选约20℃，总压力为5至100巴。这明显低于标准压力，标准压力一般分别是250对50巴，因此总压力为300巴。这取决于使用的具体匀化器、所施加的压力。一种合适的方法是在Niro Suavi NS 2006H匀化器中和60℃的温度下在第一步时使用100巴的压力，在第二步时使用50巴的压力。一种合适的方法是在Niro Suavi NS 2006H匀化器中和20℃的温度下在第一步时使用5巴的压力，在第二步时使用20巴的压力。
然后，任选地可加入其他非脂质成分。
4.灭菌
随后，优选将从步骤3中获取的乳液灭菌。优选在超高温度(UHT)和/或在合适的容器中进行在线(in-line)灭菌以获取无菌液体形式的配方物。UHT处理的一种合适方法是在120-130℃下处理至少20秒。或者，该灭菌步骤4在匀化步骤3之前进行。
然后，优选将通过以上过程得到的组合物喷雾干燥。
或者，将在步骤3中获取的乳液通过蒸发浓缩，然后在超高温度下灭菌，然后进行喷雾干燥以获得喷雾干燥的粉末，将所述粉末装入合适容器中。
所述脂质球的包被层上的差异还可来自于ζ电势。ζ电势测量表面周围紧密结合层和远处电中性区之间的动电势的毫伏(mV)差异，是分散系中颗粒之间排斥或吸引幅度的量度。其值还与胶态分散系的稳定性有关。高绝对ζ电势将赋予稳定性，即所述溶液或分散系将抗聚集。
脂质球大小
根据本发明，脂质以乳化于所述水相中的脂质球的形式存在于所述组合物中。脂质球包含一个核心和一个包被层。所述核心包含植物脂肪，并且优选包含至少90重量％甘油三酯，更优选基本由甘油三酯组成。所述包被层包含磷脂和/或极性脂质。包被层中不必一定要包含所有存在于所述组合物中的磷脂和/或极性脂质，但优选包含大部分。所述脂质球的包被层中优选包含超过50重量％、更优选超过70重量％、甚至更优选超过85重量％、最优选超过95重量％的存在于所述组合物中的磷脂和/或极性脂质。所述脂质球的核心中不必一定要包含所有存在于所述组合物中的植物脂质，但优选包含大部分，所述脂质球的核心中优选包含超过50重量％、更优选超过70重量％、甚至更优选超过85重量％、甚至更优选超过95重量％、最优选超过98重量％的存在于所述组合物中的植物脂质。在一个实施方案中，优选地，本发明的脂质球
1.其体积加权众数直径大于1.0μm，优选大于3.0μm，更优选4.0μm或以上，优选1.0至10μm，更优选2.0至8.0μm，甚至更优选3.0至8.0μm，最优选4.0μm至8.0μm，并且/或者
2.具有这样的大小分布，即至少45体积％、优选至少55体积％、甚至更优选至少65体积％、甚至更优选至少75体积％具有2至12μm的直径。更优选至少45体积％、优选至少55体积％、甚至更优选至少65体积％、甚至更优选至少75体积％具有2至10μm的直径。甚至更优选至少45体积％、优选至少55体积％、甚至更优选至少65体积％、甚至更优选至少75体积％具有4至10μm的直径。
在另一个优选的实施方案中，优选地，本发明的脂质球
1.其体积加权众数直径小于1.0μm，优选为0.2-0.7μm，更优选为0.3-0.6μm，并且
2.具有这样的大小分布，即少于45体积％具有2至12μm的直径；优选具有这样的大小分布，其中超过55体积％的所述脂质球具有小于2μm的直径；更优选具有这样的大小分布，即少于35体积％具有2至12μm的直径；甚至更优选具有这样的大小分布，其中超过65体积％的所述脂质球具有小于2μm的直径。
脂质球的百分数以总脂质的体积计。所述众数直径与以总脂质体积计存在最多的直径有关，或者与直径在X轴且体积(％)在Y轴的曲线图表示的峰值有关。
用颗粒大小分析仪例如Mastersizer(Malvern Instruments，Malvern UK)，可合适地测量脂质球的体积及其大小分布，例如通过Michalski et al，2001，Lait 81：787-796中描述的方法。
可消化性碳水化合物组分
所述组合物优选包含可消化性碳水化合物。所述可消化性碳水化合物优选提供30至80％的所述组合物的总卡路里。所述可消化性碳水化合物优选提供40至60％的总卡路里。当为液体形式时，例如作为即食型液体，所述组合物优选每100ml包含3.0至30g可消化性碳水化合物，更优选每100ml 6.0至20g，甚至更优选7.0至10.0g。以干重计，本发明的组合物优选包含20至80重量％、更优选40至65重量％的可消化性碳水化合物。
优选的可消化性碳水化合物的来源有乳糖、葡萄糖、蔗糖、果糖、半乳糖、麦芽糖、淀粉和麦芽糊精。乳糖是人乳中存在的主要可消化性碳水化合物。本发明的组合物优选包含乳糖。本发明的组合物优选包含可消化性碳水化合物，其中至少35重量％、更优选至少50重量％、更优选至少75重量％、甚至更优选至少90重量％、最优选至少95重量％的所述可消化性碳水化合物是乳糖。以干重计，本发明的组合物优选包含至少25重量％、优选至少40重量％的乳糖。
非消化性低聚糖
本发明的组合物优选包含聚合度(DP)为2至250、更优选3至60的非消化性低聚糖。所述非消化性低聚糖可有利地阻止胰岛素抵抗开始，这也将使得以后的肥胖和/或脂肪量减少。再者，存在非消化性低聚糖可有利地致使肠内微生物丛中硬壁菌门(Firmicutes)少而拟杆菌门(Bacteroidetes)多，这可使肥胖减少。因此，非消化性低聚糖被认为可增强本发明所述组合物的较大脂质球的抗肥胖效应。
所述非消化性低聚糖优选地选自低聚果糖(fructo-oligosaccharides)(例如菊粉)、低聚半乳糖(galacto-oligosaccharides)(例如反式低聚半乳糖或β-低聚半乳糖)、低聚葡萄糖(gluco-oligosaccharides)(例如龙胆寡糖(gentio-oligosaccharides)、黑曲霉寡糖(nigero-oligosaccharides)和环糊精寡糖(cyclodextrin-oligosaccharides))、低聚阿拉伯糖(arabino-oligosaccharides)、低聚甘露糖(mannan-oligosaccharides)、低聚木糖(xylo-oligosaccharides)、低聚岩藻糖(fuco-oligosaccharides)、低聚阿拉伯半乳糖(arabinogalacto-oligosaccharides)、低聚葡糖甘露糖(glucomanno-oligosaccharides)、低聚半乳甘露糖(galactomanno-oligosaccharides)、含唾液酸(sialic acid)的寡糖和糖醛酸寡糖。所述组合物优选包含与非消化性低聚糖结合的阿拉伯树胶。
本发明的组合物优选包含低聚果糖、低聚半乳糖和/或半乳糖醛酸寡糖，更优选低聚半乳糖，最优选反式低聚半乳糖。在一个优选的实施方案中，所述组合物包含反式低聚半乳糖和低聚果糖的混合物。本发明的组合物优选包含DP为2-10的低聚半乳糖和/或DP为2-60的低聚果糖。所述低聚半乳糖优选选自反式低聚半乳糖、乳糖-N-四糖(LNT)、乳糖-N-新四糖(neo-LNT)、岩藻糖基乳糖(fucosyl-lactose)、岩藻糖基化LNT(fucosylated LNT)和岩藻糖基化新LNT(fucosylated neo-LNT)。在一个特别优选的实施方案中，本发明的方法包括给予反式低聚半乳糖([半乳糖]n-葡萄糖；其中n是1至60之间的整数，即2、3、4、5、6、……59、60；优选n选自2、3、4、5、6、7、8、9或10)。反式低聚半乳糖(TOS)例如以商标VivinalTM(Borculo Domo Ingredients，Netherlands)销售。所述反式低聚半乳糖的糖优选是β-连接的。
低聚果糖是包含β连接的果糖单元链的非消化性低聚糖，DP或平均DP为2至250，更优选10至100。低聚果糖包括菊粉、果聚糖和/或混合型多聚果糖(polyfructan)。特别优选的低聚果糖是菊粉。适合用于所述组合物中的低聚果糖还已市购，例如Raftiline
HP(Orafti)。
糖醛酸寡糖优选获自果胶降解。糖醛酸寡糖优选地是半乳糖醛酸寡糖。因此，本发明的组合物优选包含DP为2至100的果胶降解产物。所述果胶降解产物优选从苹果果胶、甜菜果胶和/或柑橘果胶制备。所述组合物优选包含反式低聚半乳糖、低聚果糖和果胶降解产物。反式低聚半乳糖∶低聚果糖∶果胶降解产物的重量比优选是(20至2)∶1∶(1至3)，更优选(12至7)∶1∶(1至2)。
优选地，所述组合物每100ml包含80mg至2g、更优选每100ml包含150mg至1.50g、甚至更优选300mg至1g的非消化性低聚糖。以干重计，所述组合物优选包含0.25重量％至20重量％、更优选0.5重量％至10重量％、甚至更优选1.5重量％至7.5重量％。较低量的非消化性低聚糖在防止肥胖方面效应较小，而太高量将导致胃气胀和腹部不适的副作用。
蛋白质组分
本发明的组合物优选包含蛋白质。所述蛋白质组分优选提供5至15％的总卡路里。本发明的组合物优选包含提供6至12％的总卡路里的蛋白质组分。所述组合物中存在的蛋白质更优选以卡路里计低于9％，所述组合物更优选以总卡路里计包含7.2至8.0％的蛋白质，以总卡路里计甚至更优选7.3至7.7％。低蛋白质浓度可有利地确保较低的胰岛素反应，从而防止婴儿脂肪细胞的增殖。以总卡路里计，人乳包含比牛乳更低量的蛋白质。营养组合物中的蛋白质浓度由蛋白质、肽和游离氨基酸之和确定。以干重计，所述组合物优选包含少于12重量％、更优选9.6至12重量％、甚至更优选10至11重量％的蛋白质。以即饮型液体产品计，所述组合物每100ml优选包含少于1.5g蛋白质，更优选1.2至1.5g，甚至更优选1.25至1.35g。
蛋白质源应该以这样的方式选择，即满足对必需氨基酸含量的最小需求并确保良好的生长。因此，优选基于牛乳蛋白质的蛋白质源例如乳清、酪蛋白及其混合物，以及基于大豆、马铃薯或豌豆的蛋白质。在使用乳清蛋白的情况下，蛋白质源优选基于酸乳清或甜乳清、乳清蛋白分离物或它们的混合物，并且可以包括α-乳白蛋白和β-乳球蛋白。蛋白质源更优选基于酸乳清或从中已经除去酪蛋白糖巨肽(caseino glyco macro，CGMP)的甜乳清。从甜乳清蛋白除去CGMP可有利地减少甜乳清蛋白的苏氨酸含量。减少苏氨酸含量还可有利地通过使用酸乳清实现。可以任选向所述蛋白质源中补加游离氨基酸，例如甲硫氨酸、组氨酸、酪氨酸、精氨酸和/或色氨酸，目的是改善氨基酸谱。优选使用富含α-乳白蛋白的乳清蛋白，目的是优化氨基酸谱。使用具有与人乳更接近的优化氨基酸谱的蛋白质源能够使得在以卡路里计低于9％、优选以卡路里计7.2至8.0％的降低蛋白质浓度下提供所有必需氨基酸，并且仍确保良好的生长。如果其中CGMP已经被除去的甜乳清被用作蛋白质源，则优选补加以总蛋白质计量为0.1至3重量％的游离精氨酸和/或量为0.1至1.5重量％的游离组氨酸。
所述组合物优选以干重计包含至少3重量％的酪蛋白。所述酪蛋白优选是完整的和/或非水解的。
营养组合物
本发明的组合物优选特别适合于对年龄低于36个月的人、特别是年龄低于24个月的婴儿、甚至更优选年龄低于18个月、最优选年龄低于12个月的婴儿提供日常营养需求。因此，所述营养组合物用于或者被用于喂食人受试者。本发明的组合物包含脂质，优选包含蛋白质并优选包含可消化性碳水化合物组分，其中所述脂质组分优选提供30至60％的总卡路里，所述蛋白质组分优选提供5至20％、更优选5至15重量％的总卡路里，所述可消化性碳水化合物组分优选提供25至75％的总卡路里。本发明的组合物优选包含提供35至50％的总卡路里的脂质组分，提供6至12％的总卡路里的蛋白质组分以及提供40至60％的总卡路里的可消化性碳水化合物组分。总卡路里的量由蛋白质、脂质和可消化性碳水化合物来源的卡路里之和确定。
本发明的组合物不是人乳。本发明的组合物包含植物脂质。本发明的组合物优选包含其他级分，例如根据国际婴儿配方物指导的维生素、矿物质。
在一个实施方案中，所述组合物是一种适合在以水性溶液、优选以水复溶后用于制备液体组合物的粉末。所述组合物优选是待用水复溶的粉末。已经意外地发现，所述脂质球的大小及其极性脂质包被层在干燥步骤和随后复溶后保持原状。
为了满足婴儿的卡路里需求，所述组合物优选包括50至200kcal/100ml的液体，更优选60至90kcal/100ml的液体，甚至更优选60至75kcal/100ml的液体。该卡路里密度确保水和卡路里消耗之间的最佳比例。本发明的组合物的克分子渗透压浓度优选是150至420mOsmol/l，更优选260至320mOsmol/l。该低克分子渗透压浓度旨在减少胃肠应激。该应激可诱导脂肪细胞形成。
所述组合物优选是液体形式，粘度低于35mPa.s，更优选低于6mPa.s，粘度通过在20℃和在100s-1剪切速率下使用Brookfield粘度计测定。所述组合物可合适地为粉末形式，其可以用水复溶成液体；或者为浓缩液形式，其可用水稀释。如果所述组合物为液体形式，那么每日给予的优选体积是每天约80至2500ml，更优选约450至1000ml。
婴儿
脂肪细胞在生命开始36个月增殖，并且在青春期更有限地增殖。脂肪细胞的量是以后脂肪量、脂肪组织和/或肥胖水平的重要决定因素。因此，优选将本发明的组合物给予生命开始3年中的人受试者。在本发明的用途的一个实施方案中，所述营养组合物用于或者被用于喂食年龄为0至36个月之间的人受试者。已经发现，脂肪细胞在生命开始12个月里增殖明显，有最佳的围产期脂肪细胞增殖。因此，特别优选将本发明的组合物给予这个生命时期的人受试者。因此，本发明的组合物可有利地给予至0-24个月的人，更优选0-18个月的人，最优选0-12个月的人。本发明特别旨在防止以后肥胖，并且优选不是肥胖治疗物。因此，优选将本发明的组合物给予至未出现肥胖或超重的婴儿和/或初学走路者。在本发明的用途的一个实施方案中，所述营养组合物用于喂食非肥胖人受试者。优选将所述组合物用于具有与胎龄相符重量的婴儿。
虽然脂肪细胞增殖在生命开始36个月和青春期最明显，但是脂肪细胞也在36个月和青春期之间的间隔期以较少程度形成。因此，优选在上至5岁、更优选上至10岁、更优选上至13岁的年龄给予本发明的组合物。
优选将所述组合物用于早产婴儿或者对于胎龄显小的婴儿。这些婴儿在出生后出现追赶式生长，追赶式生长是形成以后肥胖和/或过多脂肪量的额外风险。优选将所述组合物用于对于胎龄显大的婴儿。这些婴儿以后肥胖和/或过多脂肪量的风险增加。优选将所述组合物用于肥胖和/或患有糖尿病的母亲生产的婴儿。这些婴儿以后肥胖和/或过多脂肪量的风险增加。
施用
本发明的组合物优选经口服给予婴儿。本发明还旨在防止在年龄大于36个月时出现肥胖并且/或者在年龄大于36个月时减少脂肪量。在一个实施方案中，本发明的方法用于防止人受试者在以下时间的肥胖，降低人受试者在以下时间的肥胖风险并且/或者用于改善人受试者在以下时间的身体组成，所述时间为在所述人受试者年龄大于36个月时，优选在所述人受试者年龄大于5岁，特别是大于13岁，更特别是大于18岁时。在一个实施方案中，本发明的方法或本发明的营养组合物用于喂食年龄为0至36个月的人受试者，并用于防止在以下时间的肥胖，降低在以下时间的肥胖风险并且/或者用于改善在以下时间的身体组成，即在所述人受试者年龄大于36个月时；优选用于防止在以下时间的肥胖，降低在以下时间的肥胖风险并且/或者用于改善在以下时间的身体组成，所述时间为在所述人受试者年龄大于5岁，特别是大于13岁，更特别是大于18岁时。在一个实施方案中，防止肥胖、减少肥胖风险以及/或者改善身体组成在出现在以后。以后所指的年龄大于食用所述饮食时的年龄，优选至少大一年。在一个实施方案中，本发明的方法或本发明的营养组合物用于防止内脏肥胖并且/或者用于减小内脏脂肪与皮下脂肪的比例。
本发明人意外地发现，当对婴儿和儿童期的小鼠喂食包含以极性脂质包被的脂质球的食物组合物时，与在婴儿和儿童期喂食具有相似脂肪酸组成、但无极性脂质——特别是包被层形式的极性脂质——的食物组合物的小鼠相比，观察到了对以后身体组成的不同且显著的效应。在第42天——这是对应于人类背景儿童期的时间点，除了具有以极性脂质包被的小脂质球的饮食中的脂肪量之外，两组之间的生长(体重)无显著差异，但从第42天开始，对两组喂食高脂肪的西式饮食。令人意外地，在第98天——这是对应于人成年早期的时间点，与接受对照组合物的小鼠相比，先食用本发明的食物组合物、然后换成西式饮食的小鼠具有显著更低的脂肪量、更低的相对脂肪量以及增加的瘦体重。这主要可归因于出现在第42天和第98天之间的效应。在所述脂质球大小增加时，该效应甚至更加明显。脂质球大小增大的饮食还有利地不影响第42天时的脂肪量。此外观察到脂肪细胞肥大减少。由脂肪细胞肥大引起的肥胖被认为指示了以后肥胖的开始，并且与由脂肪细胞增生导致的肥胖相比与健康问题例如胰岛素抵抗更加相关。这进一步指示了所述饮食对肥胖的治疗或预防没有急性效应(该效应在婴儿中是不希望的)，而是有编程效应来阻止以后肥胖的发生。
在本说明书及其权利要求中，动词“包括”及其变化形式使用其非限制性含义，意为包括该词之后接着的条目，但是并不排除没有具体提及的条目。另外，不定冠词“a”或“an”指的要素并不排除存在超过一种要素的可能性，除非文中清楚地要求有且仅有一种该要素。因此“a”或“an”通常指“至少一种”。
实施例
实施例1：制备具有极性脂质包被的脂质球的IMF的方法
实施例1A：制备一种婴儿配方物，每kg粉末包含4800kcal、248g脂质、540g可消化性碳水化合物、55g非消化性低聚糖和103g蛋白质。使用BAEF粉末(Corman，Goé，Belgium)、植物油调合物、除矿物质的乳清粉、乳糖、非消化性寡糖(重量比例为9/1的低聚半乳糖和长链低聚果糖)制备所述组合物。还使用本领域已知的维生素、矿物质、微量元素。
BAEF的量为使得所述组合物中存在以总脂质计7.24重量％的磷脂(来自BAEF)。基于所述油调合物中的少量磷脂，磷脂的总量以总脂质计为7.39重量％。BAEF还提供少量胆固醇(以所述婴儿配方物总脂质计约0.08重量％)和糖鞘脂(以所述婴儿配方物总脂质计约1.65％的糖鞘脂)。
在室温下，通过搅拌将BAEF粉末与低聚半乳糖、乳糖、维生素预混合物和矿物质预混合物在水中混合。用氢氧化钾将pH调节至6.8-7.0。所述混合物的干重物质为约27％。将所述混合物加热至60℃。将所述植物油调合物也加热至60℃并加入所述水相，以Ultra-Turrax T50在5000-10000rpm下调合约30-60秒。随后，加入去矿物质水以得到约15％的干物质含量。
随后，在Niro Suavi NS 2006H匀化器中将所述油-水混合物在第一步骤中以100巴的压力并在第二步骤中以50巴的压力匀化。温度为60℃。随后，将除矿物质的乳清粉加入，达到18％的终干物质含量。将所述产物在125℃下UHT处理30秒。通过喷雾干燥将所述产物干燥成粉末。将麦芽糊精与长链菊粉干混入所述粉末。
用Mastersizer 20000(Malvern Instruments，Malvern UK)测量所述脂质球的大小。体积众数直径为7.3μm。小得多的第二峰出现在0.52μm。大小为2至12微米的脂质球的体积％以总脂质体积计为71％。在喷雾干燥之前以及在以水复溶所述喷雾干燥的粉末后，以共聚焦激光扫描显微镜检查本发明的较大脂质球是否被磷脂包被。在两种情形下，所述脂质球都被磷脂层包被。使用Annexin V Alexa Fluor 488(In Vitrogen molecular probes)作为荧光探针标记所述磷脂，使用Nile Red(Sigma-Aldrich)作为荧光探针标记甘油三酯。在标记所述乳样品后，加入Vectrahield封固剂(Vector laboratories inc.，Burliname USA)，用于减少颗粒运动和光漂白。使用激发波长为488/543/633nm以及设定为通带505-530和通带560-615的发射滤光片的Zeiss激光扫描显微镜进行观察。同样，所述脂质球的大小在干燥之前和用水复溶所述喷雾干燥的粉末后是相同的。
作为对照，以所述共聚焦激光扫描显微镜观察，标准婴儿配方物(Nutrilon 1)的脂质球未显示出被磷脂标记。以荧光蛋白质染色Fast Green FCF确定，所述小球被蛋白质包被。测得该标准婴儿配方乳中的脂质球的体积众数直径为0.5μm。小得多的第二峰出现在8.1μm。大小为2至12微米的脂质球的体积％以总脂质体积计为34％。
同时，对人乳进行了分析，人乳显示5.3μm的脂质球的体积众数直径。大小为2至12微米的脂质球的体积％以总脂质体积计为98％。所述脂质球被磷脂层包被。
还测量了ζ电势和体积加权平均直径。结果显示于表1中。
表1：不同乳的脂质球特征
实施例1B：
与实施例1A类似制备婴儿配方物。使用植物油、油溶性维生素和抗氧化剂制备所述油调合物。在混合前将水相和油调合物都加热至65℃。将所述油调合物加入水相并且用Ultra-Turrax T50以5000-1000rpm调合约30-60秒。所述混合物的干重为约26％。将所得产物在125℃下UHT处理30秒，然后冷却至20℃。
对于饮食4，将该混合物分别在5和20巴的压力下在Niro Suavi NS 2006H匀化器中分两步匀化。对于饮食1、2和3，在Niro Suavi NS 2006H匀化器中匀化压力分别是200和50巴。将所得产物通过喷雾干燥干燥成粉末。将长链菊粉干混入所得粉末中。对于饮食1，不存在加入的极性脂质。对于饮食1，植物甘油磷脂的量以总脂肪计为0.2重量％。饮食1不含鞘脂和胆固醇。对于饮食2、3和4，使用酪乳粉末。饮食3以总脂肪计包含1.83重量％的甘油磷脂，其中约90％来自酪乳粉末而约10％已经存在于来自植物油的标准IMF中；并且还包含来自乳的鞘脂，其中大部分(以总脂肪计约0.47重量％)为鞘磷脂；余量是糖鞘脂，其中大部分(超过60％)是以总脂肪计浓度为约0.13重量％的GD3。饮食3包含以总脂肪计约0.05重量％的来自乳的胆固醇。饮食4包含以饮食3的总脂肪计一半量的来自乳的极性脂质。
在饮食2中，在匀化、灭菌和喷雾干燥步骤后，将包含这些极性脂质的酪乳粉末干调合，目的是防止脂质球被包被。在饮食3和4中，所述酪乳极性脂质在匀化步骤过程中存在于水相中，目的是包被所述脂质球。
表2：不同乳的脂质球特征
用Mastersizer 20000(Malvern Instruments，Malvern UK)测量脂质球的大小，显示于表2中。通过上文描述的共聚焦激光扫描显微镜方法确认饮食3和4中脂质球被极性脂质包被，并且在饮食1和2中不存在包被。
在室温下保存5个月后，饮食1、2和3中的脂质球的大小没有变化，体积众数直径分别为0.5、0.4和0.5。饮食4的体积众数直径也相当稳定，为6.6μm。
实施例2：脂质球大小对成年身体组成的编程效应
母C57/BL6的幼仔从第15天开始断奶。继续实验断奶饮食直至第42天。从第42天至第126天，对所有幼畜喂食基于AIN-93G饮食的具有调整过的脂质级分(包含10重量％脂质，其中以总脂质计50重量％的猪油和1％的胆固醇)的相同饮食，AIN-93G饮食代表西式饮食。
用于断奶的实验饮食为：
1)基于婴儿配方乳(IMF)的对照饮食。该饮食每kg包含282g标准IMF(Nutrilon 1)，具有实施例1A中提及的脂质球大小。所述饮食的余量为AIN-93G蛋白质、碳水化合物和纤维。所述饮食中存在的所有脂质均来自IMF。
2)本发明的基于IMF的饮食。该饮食与饮食1的不同之处在于，它包含282g实施例1A的本发明的IMF，即包含以极性脂质包被的脂质球。所述饮食中存在的所有脂质均来自IMF。
在第42天，所有的小鼠转而食用包含10重量％脂质的“西式饮食”，直至第126天。所述饮食的组成在表3中给出。两种实验和自助饮食的脂肪酸组成显示于表4。两种实验饮食的脂肪酸谱十分相似。
表3：每kg实验饮食的组成
n.d.＝未测定
每周两次对小鼠称重。在整个实验过程中每周一次测定食物摄取。为了确定身体组成(即脂肪量(FM)和无脂肪体重(FFM))，通过使用PIXImus成像仪(GE Lunar，Madison，WI，USA)的密度测定法，分别在出生后第42、70、98天的6、10和14周龄以及出生后第126天在全身麻醉下进行DEXA扫描(Dual Energy X-ray Absorbiometry)。在年龄第126天时将雄性小鼠处死，切下器官并称重(即脂肪组织、肝、肌肉胫骨肌)。分析血液的瘦蛋白、抵抗素和(禁食)胰岛素。
表4：实验饮食的脂肪酸组成
结果：
在实验期间未观察到两组之间对生长(体重)和摄食有影响。而且，脂肪量(以DEXA确定)的发展在第42天时(饮食介入期结束)无显著差异。
随后在第42天和第126天之间对所有组以西式饮食处理导致在实验结束时(第126天)身体组成的明显不同，见表5。与接受对照饮食的幼畜相比，在婴儿和儿童时期接受具有较大脂质球的饮食的幼畜中以后形成的脂肪量和相对脂肪量减少。两组之间的总体重相当。实验组的瘦体重增加。
表5：体重、瘦体重、脂肪量和相对脂肪量。
*与对照组相比P＜0.05
对照组中的肝平均重量是157g(s.e.0.07)，实验饮食中的为1.44g(s.e.0.15)。这一点可指示实验组中的脂肪肝减少。对照组中的肌肉胫骨肌是95.3g(平均值，s.e.2.1)，实验组中的是96.7g(s.e.3.2)。这一点与对瘦体重的效应相符。对脂肪组织的效应显示于表6中。在实验组中，动物显示出较高量的棕脂肪组织(BAT)，但较低量的白脂肪组织(WAT)，例如腹膜后脂肪(rp)、腹股沟脂肪(i)和附睾脂肪(e)。对于婴儿，存在棕脂肪组织可有利地用于隔热的目的。白脂肪组织不但存在于婴儿而且存在于成年中，被用于能量贮存。较低的内脏脂肪量(即eWAT和rpWAT)也是有利的，原因是它将降低胰岛素无敏感性或胰岛素抵抗的风险。
表6：第126天时小鼠中的脂肪组织量
实验组中的禁食胰岛素水平(1200单位)比对照组中的(1470单位)低。这一点可指示脂肪细胞减少信号。与对照组(9500)相比，实验组中的瘦蛋白水平(6000单位)降低。与对照组(1550)相比，实验组中的抵抗素水平(1350单位)也降低。这可分别指示食欲正常和肥胖即脂肪量增加倾向降低。
这些结果证明，通过生命早期的具有以极性脂质包被的脂质球的饮食，可明显减少以后的脂肪量、相对脂肪量和/或肥胖。结论是，包含具有改变脂质构架的脂质球的食物可以这样的方式编程并/或印记生命早期的身体，该方式即以后形成更健康的身体组成，脂肪量、相对脂肪量减少以及/或者瘦体重增加。
实施例3：脂质球大小对成年身体组成的编程效应
除了在第98天而不是第128天结束实验之外，使用与实施例2中相同的实验动物模型和设计。
用于断奶的实验饮食为：
1)基于婴儿配方乳(IMF)的对照饮食。该饮食每kg包含282g标准IMF，实施例1B的IMF 1，即小脂质球，不加极性脂质。所述饮食的余量为AIN-93G蛋白质、碳水化合物和纤维。所述饮食中存在的所有脂质均来自IMF。
2)本发明的基于IMF的饮食。该饮食与饮食1的不同之处在于，它包含282g实施例1B的IMF 2，即包含脂质球，具有加入的极性脂质，所述极性脂质不位于所述脂质球的外表面层。所述饮食中存在的所有脂质均来自IMF。
3)本发明的加入磷脂的基于IMF的饮食。该饮食与饮食2的不同之处在于，它包含282g实施例1B的IMF 3，即包含以来自乳的极性脂质包被的脂质球。所述饮食中存在的所有脂质均来自IMF。
4)本发明的基于IMF的饮食。该饮食与饮食3的不同之处在于，它包含282g实施例1B的IMF 4，即包含比对照大并且以来自乳的极性脂质包被的脂质球。所述饮食中存在的所有脂质均来自IMF。
所述饮食的组成与实施例2的表3中的类似。所述两个实验饮食和自助饮食的脂肪酸组成与实施例2的表4中的类似，分别为：以总脂肪酸计，饮食1中的亚油酸(LA)算得为14％，饮食2、3和4中的为13.2％；以总脂肪酸计，饮食1中的α亚麻酸(ALA)为2.6％，饮食2、3和4中的为2.5％；饮食1中的LA/ALA为5.4，饮食2、3和4中的LA/ALA为5.3。DHA的量在所有4种饮食中都是0.2重量％，ARA的量在饮食1中是0.35重量％，而在饮食2、3和4中是0.36重量％。
结果：
在实验期间未观察到两组之间对生长(体重)和摄食有影响。而且，体重和脂肪量(以DEXA确定)的发展在第42天时(饮食介入期结束)无显著差异，但在饮食3中，脂肪量在第42天时稍微减少。如果将所述脂质球扩大，该减少不再存在(饮食4)。随后在第42天和第98天之间对所有组以西式饮食处理导致在实验结束时(第98天)身体组成的明显不同，见表7。与接受对照饮食的小鼠相比，在婴儿和儿童时期接受含有被包被小球的饮食的小鼠中，以后形成的脂肪量和相对脂肪量减少。
表7：脂肪量和相对脂肪量。
*P＜0.05。
从以上结果可以得出结论，以极性脂质包被脂质球可致使脂肪量和相对脂肪量减少(比较饮食3与饮食1和2)。该改善效应被认为不仅是由于所述极性脂质本身，而且也可能归因于对所述脂质球的包被，原因是与用饮食3相比，用饮食2时该效应不明显地多。在被包被的大脂质球中，对脂肪量和脂肪量％的效应比被包被的小脂质球甚至更加明显(比较饮食4与饮食3)。
在以饮食1和饮食4喂食的小鼠的脂肪组织(附睾白脂肪组织(eWAT)和腹股沟白脂肪组织(iWAT))中，在第98天测定了细胞大小。将脂肪细胞分离并通过对显微镜照片的图像分析确定平均直径。体积计算为V＝(π/6)(3σ2+X2)X，其中X和σ2是直径的平均值和方差。对于eWAT(代表内脏脂肪)中的脂肪细胞平均体积，以饮食1喂食的小鼠的为5.1106μm3(s.e.0.56 106)，喂食饮食4的小鼠的为4.3106μm3(s.e.0.52 106)。iWAT(代表皮下脂肪)中的脂肪细胞平均体积较小。它在以饮食1喂食的小鼠中为2.0106μm3(s.e.0.16 106)，在喂食饮食4的小鼠中为1.7 106μm3(s.e.0.1.4 106)。在喂食饮食4的小鼠中，细胞数目稍微增加。对于脂肪量的脂质含量％和脂质密度未观察到差异。
这些结果表明，通过生命早期的含有以极性脂质包被的脂质球的饮食，可以明显减少以后的脂肪量、相对脂肪量和/或肥胖。当所述脂质球大小更大时，该效应进一步增强。结论是，包含具有改变脂质构架(即具有位于所述脂质球外表面的极性脂质)的脂质球的食物可以这样的方式编程并/或印记生命早期的身体，该方式即以后形成更健康的身体组成，脂肪量和/或相对脂肪量减少。当与常规婴儿配方物中存在的脂质球大小相比，所述脂质球具有增大的大小时，该效应被增强。
实施例4 具有极性脂质包被的脂质球的婴儿营养物。
婴儿配方物每kg粉末包含4810kcal、255g脂质、533g可消化性碳水化合物、58g非消化性低聚糖(重量比为9/1的低聚半乳糖和长链低聚果糖)、96g蛋白质以及本领域中已知的维生素、矿物质、微量元素。
所述脂质组成使得0.57重量％的所述脂质由磷脂组成。所述组合物包含以总脂质计约0.17重量％的糖鞘脂。所述组合物包含以总脂质计约0.006重量％的胆固醇。作为磷脂、糖鞘脂和胆固醇的来源，使用SM-2粉末(Corman，Goé，Belgium)。约97-98％的所述脂质为植物脂质，余量为乳脂、鱼油和微生物油。LC-PUFA的量以总脂肪酸计为约0.64重量％。LA/ALA比为5.2。
在类似于实施例1B的实验饮食3的过程中制备IMF。体积众数直径小于1μm。大小为2至12微米的脂质球的体积％以总脂质体积计小于45％。所述脂质球被极性脂质层包覆。
Claims (17)
1.脂质用于制备用于防止肥胖、降低肥胖风险并且/或者治疗肥胖的营养组合物的用途，所述营养组合物包含
以所述组合物干重计10至50重量％的植物脂质，以及
i)以总脂质计0.5至20重量％的磷脂，或
ii)以总脂质计0.6至25重量％的极性脂质，其中极性脂质为磷脂、糖鞘脂和胆固醇之和，
并且所述组合物包含具有包含所述植物脂质的核心和包含所述磷脂或极性脂质的包被层的脂质球。
2.脂质用于制备用于改善身体组成的营养组合物的用途，所述身体组成的改善选自瘦体重增加、脂肪量降低以及脂肪量与总体重的相对量降低，所述营养组合物包含
以所述组合物干重计10至50重量％的植物脂质，以及
i)以总脂质计0.5至20重量％的磷脂，或
ii)以总脂质计0.6至25重量％的极性脂质，其中极性脂质为磷脂、糖鞘脂和胆固醇之和，
并且所述组合物包含具有包含所述植物脂质的核心和包含所述磷脂或极性脂质的包被层的脂质球。
3.前述权利要求任一项的用途，其中所述组合物用于喂食年龄为0至36个月的人受试者。
4.前述权利要求任一项的用途，用于在人受试者达到大于36个月的年龄时，优选在人受试者为大于5岁的年龄时，防止所述人受试者出现肥胖、降低所述人受试者的肥胖风险并且/或者用于改善所述人受试者的身体组成。
5.前述权利要求任一项的用途，其中所述组合物用于喂食年龄为0至36个月的人受试者，并且用于在所述人受试者达到大于36个月的年龄时，优选在所述人受试者达到大于5岁的年龄时，防止所述人受试者出现肥胖、降低所述人受试者的肥胖风险并且/或者用于改善所述人受试者的身体组成。
6.前述权利要求任一项的用途，用于喂食非肥胖人受试者。
7.前述权利要求任一项的用途，用于防止内脏肥胖。
8.前述权利要求任一项的用途，其中
i)所述组合物的脂质球具有的体积加权众数直径小于1.0μm，优选为0.3-0.6μm，并且
ii)以总脂质计少于45体积％的量的所述组合物的脂质球的直径为2至12μm；优选这样的大小分布，其中超过55体积％的所述脂质球具有小于2μm的直径。
9.权利要求1-7任一项的用途，其中
i)所述组合物的脂质球具有的体积加权众数直径大于1.0μm，优选为1.0-10μm，并且/或者
ii)以总脂质计至少45体积％、更优选至少55体积％的量的所述组合物的脂质球的直径为2至12μm。
10.营养组合物，包含
a)以所述组合物干重计10至50重量％的植物脂质，以及
b)以总脂质计0.5至20重量％的磷脂，其中磷脂来自于乳脂质，
并且所述组合物包含具有包含所述植物脂质的核心和包含所述磷脂的包被层的脂质球，
其中
i)所述脂质球具有的体积加权众数直径大于1.0μm，优选1.0至10μm，以及/或者
ii)以总脂质计至少45体积％、更优选至少55体积％的量的所述脂质球的直径为2至12μm。
11.营养组合物，包含
a)以所述组合物干重计10至50重量％的植物脂质，以及
b)以总脂质计0.6至25重量％的极性脂质，其中极性脂质以总脂质计为磷脂、糖鞘脂和胆固醇之和，
并且所述组合物包含具有包含所述植物脂质的核心和包含所述极性脂质的包被层的脂质球，
其中
i)所述脂质球具有的体积加权众数直径大于1.0μm，优选1.0至10μm，并且/或者
ii)以总脂质计至少45体积％、更优选至少55体积％的量的所述脂质球的直径为2至12μm。
12.权利要求10的组合物，包含以总脂质计0.6至25重量％的极性脂质，其中所述极性脂质为磷脂、糖鞘脂和胆固醇之和。
13.权利要求10-12任一项的组合物，其中所述脂质具有亚油酸与α-亚麻酸的重量比为4至7的脂肪酸谱。
14.营养组合物，包含
a)以所述组合物干重计10至50重量％的植物脂质，以及
b1)以总脂质计0.5至20重量％的磷脂，其中磷脂来自于乳脂质，或
b2)以总脂质计0.6至25重量％的极性脂质，其中极性脂质以总脂质计为磷脂、糖鞘脂和胆固醇之和，
其中所述脂质具有亚油酸与α-亚麻酸的重量比为4至7的脂肪酸谱
并且所述组合物包含具有包含所述植物脂质的核心和包含所述磷脂或极性脂质的包被层的脂质球，
其中
i)所述脂质球具有的体积加权众数直径小于1.0μm，优选0.3至0.6μm，以及
ii)以总脂质计少于45体积％的量的所述脂质球的直径为2至12μm，优选的大小分布为其中多于55体积％的脂质球具有小于2μm的直径。
15.权利要求10-14任一项的组合物，还包含非消化性低聚糖。
16.权利要求10-15任一项的组合物，用于权利要求1-9任一项的用途。
17.权利要求10-16任一项的组合物或者权利要求1-9任一项的用途，其中所述组合物是适合于在以水性溶液、优选以水复溶后制备液体组合物的粉末。
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