发明内容
本发明在研究了大量具有选择性的Raf小分子抑制剂的基础上,根据Raf的晶体结构模型,利用计算机辅助药物设计手段搭建了Raf抑制剂的构效关系模型和药物虚拟筛选模型,在此基础上设计并合成了一系列全新结构的N,N′-双取代脲类化合物,初步药理实验结果表明:本发明的化合物具有良好的Raf激酶抑制活性。
本发明的化合物通式I如下:
其中R1表示氢、C1-C6烷基、三氟甲基、C1-C6烷基氧基或卤素;
R2或R3表示氢、卤素或C1-C6烷基;
Ar表示取代芳环基或取代芳杂环基,其中取代基选自:氢、甲基、乙基、三氟甲基、卤素、羟基、甲氧基或乙氧基;芳杂环基选自:吡咯、吡唑、咪唑、吲哚、喹啉、嘌呤、苯并五元杂环、五元杂环并六元杂环;
R1优选表示氢或三氟甲基;
R2优选表示氢或氯;
R3优选表示氢或甲基;
Ar优选表示苯并[d]咪唑-2-基、吲哚-2-基、吡咯-2-基、2-羟基苯基、咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基、咪唑-2-基。
根据本发明,药学上可接受的盐包括通式I化合物与下列酸形成的酸加成盐:盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、萘磺酸、柠檬酸、酒石酸、乳酸、丙酮酸、乙酸、马来酸或琥珀酸、富马酸、水杨酸、苯基乙酸、杏仁酸。此外还包括无机碱的酸式盐,如:含有碱性金属阳离子、碱土金属阳离子、铵阳离子盐。
通式I的化合物优选以下结构化合物:
N-(4-氯-3-三氟甲基苯基)-N’-[4-[2-(1H-苯并[d]咪唑-2-基甲酰氨基)乙基]苯基]脲(I-A-a)
N-(3-三氟甲基苯基)-N’-[4-[2-(1H-苯并[d]咪唑-2-基甲酰氨基)乙基]苯基]脲(I-A-b)
N-(4-氯-3-三氟甲基苯基)-N’-[3-甲基-4-[2-(1H-苯并[d]咪唑-2-基甲酰氨基)乙基]苯基]脲(I-A-c)
N-(3-三氟甲基苯基)-N’-[3-甲基-4-[2-(1H-苯并[d]咪唑-2-基甲酰氨基)乙基]苯基]脲(I-A-d)
N-(4-氯-3-三氟甲基苯基)-N’-[4-(2-(1H-吲哚-2-基甲酰氨基)乙基)苯基]脲(I-B-a)
N-(3-三氟甲基苯基)-N’-[4-[2-(1H-吲哚-2-基甲酰氨基)乙基]苯基]脲(I-B-b)
N-(4-氯-3-三氟甲基苯基)-N’-[3-甲基-4-[2-(1H-吲哚-2-基甲酰氨基)乙基]苯基]脲(I-B-c)
N-(3-三氟甲基苯基)-N’-[3-甲基-4-[2-(1H-吲哚-2-基甲酰氨基)乙基]苯基]脲(I-B-d)
N-(4-氯-3-三氟甲基苯基)-N’-[4-[2-(1H-吡咯-2-基甲酰氨基)乙基]苯基]脲(I-C-a)
N-(3-三氟甲基苯基)-N’-[4-[2-(1H-吡咯-2-基甲酰氨基)乙基]苯基]脲(I-C-b)
N-(4-氯-3-三氟甲基苯基)-N’-[3-甲基-4-[2-(1H-吡咯-2-基甲酰氨基)乙基]苯基]脲(I-C-c)
N-(3-三氟甲基苯基)-N’-[3-甲基-4-[2-(1H-吡咯-2-基甲酰氨基)乙基]苯基]脲(I-C-d)
N-(4-氯-3-三氟甲基苯基)-N’-[4-[2-(2-羟基苯甲酰氨基)乙基]苯基]脲(I-D-a)
N-(3-三氟甲基苯基)-N’-[4-[2-(2-羟基苯甲酰氨基)乙基]苯基]脲(I-D-b)
N-(4-氯-3-三氟甲基苯基)-N’-[3-甲基-4-[2-(2-羟基苯甲酰氨基)乙基]苯基]脲(I-D-c)
N-(3-三氟甲基苯基)-N’-(3-甲基-4-(2-(2-羟基苯甲酰胺基)乙基)苯基)脲(I-D-d)
N-(4-氯-3-三氟甲基苯基)-N’-[4-[2-(1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基甲酰氨基)乙基]苯基]脲(I-E-a)
N-(4-氯-3-三氟甲基苯基)-N’-[4-[2-(1H-咪唑-2-基甲酰氨基)乙基]苯基]脲(I-F-a)
本发明的部分化合物制备方法如下:
方法一
方法二
方法三
方法四
方法五
方法六
本发明化合物都可以用上述或类似上述的制备方法制备得到,根据取代基的不同和取代基位置的不同选用相应的原料即可。
药理测试结果表明,通式I的化合物及其药学上可接受的盐对体外Raf激酶均有不同程度的抑制作用,因此,通式I化合物及其药学上可接受的盐可以用于治疗与Raf激酶抑制剂有关的临床病症。所述与Raf激酶抑制剂有关的疾病可以是黑色素瘤、肝癌、肾癌、急性白血病、非小细胞肺癌、前列腺癌、甲状腺癌、皮肤癌、结肠直肠癌、胰腺癌、卵巢癌、乳腺癌、骨髓增生异常综合症、食管癌、胃肠道癌或间皮瘤。
1)下面是体外Raf激酶药理学试验的材料和方法:
[材料]
仪器 伯乐westernblot电泳仪(美国BIO-RAD公司)
黑壁黑底384孔板(美国corning公司)
平板摇床(江苏省光明实验仪器厂)
试剂 Raf-1(truncated)(美国Sigma)
MEK1 unactive(美国Sigma)
Assay Dilution Buffer1(美国Sigma)
agnesium/ATP Cocktail(美国Sigma)
Anti-phospho-MEK1(Ser218/222)/MEK2(美国Sigma)
Goat anti-rabbit HRP conjugated lgG(美国Sigma)
DMSO(美国Sigma)
[方法]
1.取50ulEP管,加入20ul Magnesium/ATP Cocktail。
2.加入1ul Raf-1(truncated)。
3.加入4ul待筛药物(1.0*10-4mol/l)。
4.加入0.84ul MEK1 unactive,再加入14.16ul Assay Dilution Buffer1。
5.微型离心机离心后,摇床上30摄氏度30min。
6.再加入40ulsample buffer,沸水煮5min。
7.每孔10ul,SDS-PAGE电泳,转膜,三蒸水洗膜两遍。
8.含5%脱脂奶粉的TBST封闭,室温摇床上轻轻摇动30min。
9.孵一抗Anti-phospho-MEK1(Ser218/222)/MEK2,4摄氏度过夜。
10.三蒸水洗膜两遍。
11.孵Goat anti-rabbit HRP conjugated lgG二抗。
12.三蒸水洗膜两遍。
13.用.TBS-0.05%Tween-20洗膜3-5min。
14.三蒸水漂洗膜4-5次。
15.westernblot化学发光检测(1.0*10-5mol/ml)。
2)、下表是体外Raf激酶药理学试验的结果:
(表中化合物代号对应于前面的化合物代号)
药理测试结果表明,本发明化合物具有Raf激酶双重抑制活性,可用于预防或治疗与Raf激酶抑制剂有关的临床疾病,这些疾病可以是:黑色素瘤、肝癌、肾癌、急性白血病、非小细胞肺癌、前列腺癌、甲状腺癌、皮肤癌、结肠直肠癌、胰腺癌、卵巢癌、乳腺癌、骨髓增生异常综合症、食管癌、胃肠道癌或间皮瘤等。
具体实施方式
熔点用b形熔点管测定,介质为甲基硅油,温度计未校正;IR谱用Nicolet Impact 410型红外光谱仪测定,KBr压片;1HNMR用JEOL FX90Q型傅立叶变换核磁共振仪、BRUKERACF-300型核磁共振仪和BRUKER AM-500型核磁共振仪完成(TMS内标);MS用Nicolet2000型傅立叶变换质谱仪和MAT-212型质谱仪测定。
实施例1
1H-苯并[d]咪唑-2-甲酰氯(I-1)
在150mL单颈瓶中加入1H-苯并[d]咪唑-2-甲酸8.1g(50mmol)、氯化亚砜40mL,加热回流4hrs。减压蒸除氯化亚砜,得到黄色固体(I-1)7.7g,收率86.0%,产品无需进一步纯化,直接投下一步反应。
实施例2
N-[2-(4-硝基苯基)乙基]-1H-苯并[d]咪唑-2-甲酰胺(I-2)
在250mL三颈瓶中加入4-硝基苯乙胺9.6g(58mmol)、无水氯仿50mL和无水三乙胺5mL,室温下缓慢滴加I-17.0g(38.7mmol)的氯仿悬浮液(25mL),加毕加热回流4hr,TLC检测原料消失(甲醇∶氯仿=1∶30)。蒸除氯仿,加水约50mL,搅拌,静置,抽滤,得到黄色固体(I-2)9.94g,收率83.1%,产品无需进一步纯化,直接投下一步反应。1H-NMR[300MHz,DMSO-d6]:δ13.16(1H,s,benzimidazole-NH);9.04(1H,t,CO-NH);8.13(2H,dd,ArH);7.69(1H,m,ArH);7.56(1H,m,ArH);7.53(2H,dd,ArH);7.28(2H,m,ArH);83.61(2H,q,CH2);δ3.05(2H,t,CH2)。
实施例3
N-[2-(4-氨基苯基)乙基]-1H-苯并[d]咪唑-2-甲酰胺(I-4)
在250mL三颈瓶中加入I-29g(29mmol)、铁粉6.5g(116mmol)、NH4Cl 3.1g(58mmol)和75%乙醇(100mL),加热回流5hrs,TLC检测原料消失(甲醇∶氯仿=1∶30)。趁热抽滤,滤饼用少量的乙醇洗涤。减压蒸除大部分溶剂,乙酸乙酯萃取3次(20mL×3),合并提取液并分别用水和饱和氯化钠各洗一次(20mL×1),减压蒸除溶剂得到黄色油状物,粗品经柱层析(展开剂:甲醇∶氯仿=1∶30)得I-45.74g,收率70.6%。1H-NMR[300MHz,DMSO-d6]:δ13.16(1H,s,benzimidazole);8.82(1H,t,CO-NH);7.69(1H,m,ArH);7.53(1H,m,ArH);7.28(2H,m,ArH);6.88(2H,dd,ArH);6.74(2H,dd,ArH);4.82(2H,s,NH2);3.43(2H,q,CH2);2.69(2H,t,CH2)。
实施例4
N-(4-氯-3-三氟甲基苯基)N’-[4-[2-(1H-苯并[d]咪唑-2-基甲酰氨基)乙基]苯基]脲(I-A-a)
在100mL三颈瓶中加入I-4280mg(1mmol)、4-氯-3-三氟甲基苯异氰酸酯287mg(1.3mmol)和无水二氯甲烷(25mL),室温搅拌3hrs,TLC检测原料消失(甲醇∶氯仿=1∶20)。减压蒸除溶剂得到黄色油状物。粗品经柱层析(展开剂:甲醇∶氯仿=1∶20)得I-A-a 314mg,收率62.6%,mp:312-313℃,MS[M+H]+502.2。1H-NMR[300MHz,DMSO-d6]:δ11.55(1H,s,benzimidazole-NH);9.14(1H,s,NH-CO-NH);8.78(1H,s,NH-CO-NH);8.57(1H,t,CO-NH);8.14(1H,s,ArH);7.66(1H,m,ArH);7.63(1H,m,ArH);7.48(1H,m,ArH);7.42(2H,dd,ArH);7.22(2H,dd,ArH);7.19(1H,m,ArH);7.12(1H,m,ArH);7.07(1H,m,ArH);3.54(2H,q,CH2);2.87(2H,t,CH2)。
实施例5
N-(3-三氟甲基苯基)-N’-[4-[2-(1H-苯并[d]咪唑-2-基甲酰氨基)乙基]苯基]脲(I-A-b)
I-4280mg(1mmol)、3-三氟甲基苯异氰酸酯243mg(1.3mmol),制备方法同(I-A-a)。制得化合物I-A-b 274mg,收率58.7%,mp:310-311℃,MS[M+H]+468.2。1H-NMR[300MHz,DMSO-d6]:δ13.18(1H,s,benzimidazole-NH);9.01(1H,s,NH-CO-NH);8.94(1H,t,CO-NH);8.71(1H,s,NH-CO-NH);8.0(1H,s,ArH);7.72(1H,m,ArH);7.57(1H,m,ArH);7.54(1H,m,ArH);7.52(2H,m,ArH);7.37(2H,dd,ArH);7.30(1H,m,ArH);7.28(1H,m,ArH);7.25(1H,m,ArH);7.19(2H,dd,ArH);3.53(2H,q,CH2);2.84(2H,t,CH2)。
实施例6
N-[2-(2-甲基-4-硝基苯基)乙基]-1H-苯并[d]咪唑-2-甲酰胺(I-3)
I-11.8g(10mmol)、2-甲基-4-硝基苯乙胺2.7g(15mmol)、无水氯仿30mL和无水三乙胺2mL,制备方法同(I-2)。得化合物I-32.78g,收率85.7%。
实施例7
N-[2-(2-甲基-4-氨基苯基)乙基]-1H-苯并[d]咪唑-2-甲酰胺(I-5)
I-31.62g(5mmol)、铁粉1.12g(20mmol)、NH4Cl 0.535g(10mmol)和75%乙醇(30mL),制备方法同(I-4)。得化合物I-5 1.1g,收率75.1%。1H-NMR[300MHz,DMSO-d6]:δ13.21(1H,s,benzimidazole-NH);8.98(1H,t,CO-NH);7.69(1H,m,ArH);7.51(1H,m,ArH);7.27(2H,m,ArH);6.79(1H,m,ArH);6.36(1H,m,ArH);6.32(1H,m,ArH);4.78(2H,s,NH2);3.36(2H,m,CH2);2.68(2H,t,CH2);2.18(3H,s,CH3)。
实施例8
N-(4-氯-3-三氟甲基苯基)-N’-[3-甲基-4-[2-(1H-苯并[f]咪唑-2-基甲酰氨基)乙基]苯基]脲(I-A-c)
I-5 294mg(1mmol)、4-氯3-三氟甲基苯异氰酸酯288mg(1.3mmol),制备方法同(I-A-a)。得化合物I-A-c 312.6mg,收率60.7%,mp:233-235℃。MS[M+H]+516.2。1H-NMR[300MHz,DMSO-d6]:δ13.2(1H,s,benzimidazole-NH);9.18(1H,s,NH-CO-NH);9.02(1H,t,CO-NH);8.73(1H,s,NH-CO-NH);8.1(1H,s,ArH);7.7(1H,m,ArH);7.61(1H,m,ArH);7.6(1H,m,ArH);7.51(1H,m,ArH);7.33(1H,m,ArH);7.28(1H,m,ArH);7.26(1H,m,ArH);7.19(1H,m,ArH);7.1(1H,m,ArH);3.47(2H,q,CH2);2.82(2H,t,CH2);2.31(3H,s,CH3)。
实施例9
N-(3-三氟甲基苯基)-N’-[3-甲基-4-[2-(1H-苯并[d]咪唑-2-基甲酰氨基)乙基]苯基]脲(I-A-d)
I-5294mg(1mmol)、3-三氟甲基苯异氰酸酯243mg(1.3mmol),制备方法同(I-A-a)。得化合物I-A-d 264mg,收率54.9%,mp:227-229℃。MS[M-H]- 480.3。1H-NMR[300MHz,DMSO-d6]: δ13.21(1H,s,benzimidazole-NH);9.04(1H,t,CO-NH);8.98(1H,s,NH-CO-NH);8.62(1H,s,NH-CO-NH);8.01(1H,s,ArH);7.7(1H,m,ArH);7.53(1H,m,ArH);7.52(1H,m,ArH);7.49(1H,m,ArH);7.33(1H,m,ArH);7.31(1H,m,ArH);7.28(1H,m,ArH);7.26(1H,m,ArH);7.18(1H,m,ArH);7.1(1H,m,ArH);3.48(2H,q,CH2);2.85(2H,t,CH2);2.32(3H,s,CH3)。
实施例10
1H-吲哚-2-甲酰氯(I-6)
1H-吲哚-2-甲酸3.22g(20mmol),制备方法同(I-1),得化合物I-63.2g,收率89.0%。
实施例11
N-[2-(4-硝基苯基)乙基]-1H-吲哚-2-甲酰胺(I-7)
I-61.8g(10mmol)、4-硝基苯乙胺2.49g(15mmol)、无水氯仿30mL和无水三乙胺2mL,制备方法同(I-2)。得化合物I-72.7g,收率87.3%。MS[M+H]+ 310.2。1H-NMR[300MHz,DMSO-d6]:δ11.51(1H,s,indole-NH);8.56(1H,t,CO-NH);8.16(2H,dd,ArH);7.61(1H,m,ArH);7.55(2H,dd,ArH);7.42(1H,m,ArH);7.17(1H,m,ArH);7.06(1H,m,ArH);7.03(1H,m,ArH);3.59(2H,q,CH2);2.89(2H,t,CH2)。
实施例12
N-[2-(4-氨基苯基)乙基]-1H-吲哚-2-甲酰胺(I-9)
I-71.54g(5mmol)、铁粉1.12g(20mmol)、NH4Cl 0.535g(10mmol)和75%乙醇(20mL),制备方法同(I-4)。得化合物I-9 1g,收率72.3%。1H-NMR[300MHz,DMSO-d6]:δ11.50(1H,s,indole-NH);8.47(1H,t,CO-NH);7.58(1H,m,ArH);7.4(1H,m,ArH);7.16(1H,m,ArH);7.07(2H,m,ArH);6.9(2H,dd,ArH);6.48(2H,dd,ArH);4.83(2H,s,NH2);3.39(2H,q,CH2);2.67(2H,t,CH2)。
实施例13
N-(4-氯-3-三氟甲基苯基)-N’-[4-(2-(1H-吲哚-2-基甲酰氨基)乙基)苯基]脲(I-B-a)
I-9279mg(1mmol)、4-氯3-三氟甲基苯异氰酸酯288mg(1.3mmol),制备方法同(I-A-a)。得化合物I-B-a 226mg,收率45.3%,mp:237-239℃。MS[M+H]+ 501.1。1H-NMR[300MHz,DMSO-d6]:δ11.50(1H,s,indole-NH);9.09(1H,s,NH-CO-NH);8.73(1H,s,NH-CO-NH);8.51(1H,t,CO-NH);8.09(1H,s,ArH);7.64(1H,m,ArH);7.60(1H,m,ArH);7.58(1H,m,ArH);7.43(1H,m,ArH);7.39(2H,dd,ArH);7.16(2H,dd,ArH);7.14(1H,m,ArH);7.07(1H,s,ArH);7.02(1H,m,ArH);3.49(2H,q,CH2);2.81(2H,t,CH2)。
实施例14
N-(3-三氟甲基苯基)-N’-[4-[2-(1H-吲哚-2-基甲酰氨基)乙基]苯基]脲(I-B-b)
I-9279mg(1mmol)、3-三氟甲基苯异氰酸酯243mg(1.3mmol),制备方法同(I-A-a)。得化合物I-B-b 259mg,收率55.7%,mp:241-243℃。MS[M+H]+467.2。1H-NMR[300MHz,DMSO-d6]:δ11.51(1H,s,indole-NH);8.98(1H,s,NH-CO-NH);8.68(1H,s,NH-CO-NH);8.52(1H,t,CO-NH);8.0(1H,s,ArH);7.58(1H,m,ArH);7.54(1H,m,ArH);7.52(1H,m,ArH);7.43(1H,m,ArH);7.40(2H,dd,ArH);7.30(1H,m,ArH);7.19(2H,dd,ArH);7.14(1H,m,ArH);7.04(2H,m,ArH);3.49(2H,q,CH2);2.81(2H,t,CH2)。
实施例15
N-[2-(2-甲基-4-硝基苯基)乙基]-1H-吲哚-2-甲酰胺(I-8)
I-6 1.8g(10mmol)、2-甲基-4-硝基苯乙胺2.7g(15mmol)、无水氯仿30mL和无水三乙胺2mL,制备方法同(I-2)。得化合物I-82.82g,收率87.2%。1H-NMR[300MHz,DMSO-d6]:δ11.54(1H,s,indole-NH);8.62(1H,t,CO-NH);8.07(1H,m,ArH);7.98(1H,m,ArH);7.65(1H,m,ArH);7.48(1H,m,ArH);7.39(1H,m,ArH);7.16(1H,m,ArH);7.05(2H,m,ArH);3.5(2H,q,CH2);2.99(2H,t,CH2);2.49(3H,s,CH3)。
实施例16
N-[2-(2-甲基-4-氨基苯基)乙基]-1H-吲哚-2-甲酰胺(I-10)
I-8 1.62g(5mmol)、铁粉1.12g(20mmol)、NH4Cl 0.535g(10mmol)和75%乙醇(20mL),制备方法同(I-4)。得化合物I-10 1.01g,收率69.0%。1H-NMR[300MHz,DMSO-d6]:δ11.51(1H,s,indole-NH);8.52(1H,t,CO-NH);7.58(1H,m,ArH);7.43(1H,m,ArH);7.16(1H,m,ArH);7.04(2H,m,ArH);6.8(1H,m,ArH);6.37(1H,m,ArH);6.32(1H,m,ArH);4.74(2H,s,NH2);3.33(2H,q,CH2);2.67(2H,t,CH2);2.19(3H,s,CH3)。
实施例17
N-(4-氯-3-三氟甲基苯基)-N’-[3-甲基-4-[2-(1H-吲哚-2-基甲酰氨基)乙基]苯基]脲(I-B-c)
I-10 293mg(1mmol)、4-氯3-三氟甲基苯异氰酸酯288mg(1.3mmol),制备方法同(I-A-a)。得化合物I-B-c 293mg,收率57.0%,mp:230-232℃。MS[M+H]+ 515.2。1H-NMR[300MHz,DMSO-d6]:δ11.53(1H,s,indole-NH);9.09(1H,s,NH-CO-NH);8.66(1H,s,NH-CO-NH);8.58(1H,t,CO-NH);8.10(1H,s,ArH);7.63(1H,m,ArH);7.60(1H,m,ArH);7.59(1H,m,ArH);7.40(1H,m,ArH);7.27(1H,m,ArH);7.21(1H,m,ArH);7.19(1H,m,ArH);7.10(1H,m,ArH);7.08(1H,m,ArH);7.02(1H,m,ArH);3.43(2H,q,CH2);2.80(2H,t,CH2);2.32(3H,s,CH3)。
实施例18
N-(3-三氟甲基苯基)-N’-[3-甲基-4-[2-(1H-吲哚-2-基甲酰氨基)乙基]苯基]脲(I-B-d)
I-10 293mg(1mmol)、3-三氟甲基苯异氰酸酯288mg(1.3mmol),制备方法同(I-A-a)。得 化合物I-B-d 260.6mg,收率54.3%,mp:232-234℃。MS[M+H]+481.2。1H-NMR[300MHz,DMSO-d6]:δ11.53(1H,s,indole-NH);8.98(1H,s,NH-CO-NH);8.62(1H,s,NH-CO-NH);8.59(1H,m,CO-NH);8.01(1H,s,ArH);7.59(1H,m,ArH);7.53(1H,m,ArH);7.52(1H,m,ArH);7.40(1H,m,ArH);7.28(2H,s,ArH);7.19(1H,m,ArH);7.17(1H,m,ArH);7.10(1H,m,ArH);7.08(1H,m,ArH);7.02(1H,m,ArH);3.42(2H,q,CH2);2.80(2H,t,CH2);2.32(3H,s,CH3)。
实施例19
2,2,2-三氯-1-(1H-吡咯-2-基)乙酮(I-11)
在250mL单颈瓶中加入三氯乙酰氯19.35mL(164mmol)和无水乙醚(50mL),室温下缓慢滴加吡咯10.32mL(149mmol)的乙醚溶液(80mL),滴毕反应4hrs,TLC检测原料消失(乙酸乙酯∶石油醚=1∶2)。用饱和K2CO3调节pH到8-9,静置,分液,有机层分别用水和饱和氯化钠各洗一次(20mL×1),减压蒸除溶剂,石油醚重结晶得浅灰色固体I-1126.4g,收率83.1%。 1H-NMR[300MHz,DMSO-d6]:δ12.4(1H,s,pyrrole-NH);7.3(2H,m,ArH);6.3(1H,m,ArH)。
实施例20
N-[2-(4-硝基苯基)乙基]-1H-吡咯-2-甲酰胺(I-12)
在100mL三颈瓶中加入I-112.12g(10mmol)、4-硝基苯乙胺2g(12mmol)和乙腈30mL,室温下缓慢滴加无水三乙胺(2.5mL),加毕60℃反应3hrs,TLC检测原料消失(甲醇∶氯仿=1∶30)。冰水冷却反应液,静置,抽滤,滤饼用少量水洗涤,得到黄色固体I-12 1.75g,收率67.4%。1H-NMR[300MHz,DMSO-d6]:δ11.35(1H,s,pyrrole-NH);8.13(2H,dd,ArH);8.06(1H,t,CO-NH);7.53(2H,dd,ArH);6.81(1H,s,ArH);6.70(1H,s,ArH);6.04(1H,m,ArH);3.49(2H,q,CH2);2.80(2H,t,CH2)。
实施例21
N-[2-(4-氨基苯基)乙基]-1H-吡咯-2-甲酰胺(I-14)
I-12 1.5g(5.7mmol)、铁粉1.29g(23mmol)、NH4Cl 0.61g(11.4mmol)和75%乙醇(30mL),制备方法同(I-4)。得化合物I-140.79g,收率60.6%。1H-NMR[300MHz,DMSO-d6]:δ11.33(1H,s,pyrrole-NH);7.95(1H,t,CO-NH);6.86(2H,dd,ArH);6.80(2H,m,ArH);6.47(2H,dd,ArH);6.05(1H,s,ArH);4.81(2H,s,NH2);3.3(2H,q,CH2);2.61(2H,t,CH2)。
实施例22
N-(4-氯-3-三氟甲基苯基)-N’-[4-[2-(1H-吡咯-2-基甲酰氨基)乙基]苯基]脲(I-C-a)
I-14 150mg(0.65mmol),4-氯-3-三氟甲基苯异氰酸酯188.7mg(0.85mmol),制备方法同(I-A-a)。得白色固体I-C-a 145mg,收率48.74%,mp:238-240℃。MS[M+H]+ 451.1。 1H-NMR[300MHz,DMSO-d6]:δ11.36(1H,s,pyrrole-NH);9.09(1H,s,NH-CO-NH);8.73(1H,s, NH-CO-NH);8.09(1H,s,ArH);8.02(1H,t,CO-NH);7.62(1H,m,ArH);7.61(1H,m,ArH);7.37(2H,dd,ArH);7.15(2H,dd,ArH);6.82(1H,s,ArH);6.72(1H,s,ArH);6.05(1H,m,ArH);3.40(2H,q,CH2);2.75(2H,t,CH2)。
实施例23
N-(3-三氟甲基苯基)-N’-[4-[2-(1H-吡咯-2-基甲酰氨基)乙基]苯基]脲(I-C-b)
I-14 150mg(0.65mmol),3-三氟甲基苯异氰酸酯159mg(0.85mmol),制备方法同(I-A-a)。得白色固体I-C-b 142mg,收率52.7%,mp:228-230℃。MS[M+H]+ 417.2。 1H-NMR[300MHz,DMSO-d6]:δ11.35(1H,s,pyrrole-NH);8.98(1H,s,NH-CO-NH);8.68(1H,s,NH-CO-NH);8.03(1H,m,ArH);8.0(1H,m,CO-NH);7.54(1H,m,ArH);7.50(1H,m,ArH);7.37(2H,dd,ArH);7.30(1H,m,ArH);7.16(2H,dd,ArH);6.83(1H,m,ArH);6.72(1H,m,ArH);6.06(1H,m,ArH);3.40(2H,q,CH2);2.75(2H,t,CH2)。
实施例24
N-[2-(2-甲基-4-硝基苯基)乙基]-1H-吡咯-2-甲酰胺(I-13)
I-11 2.12g(10mmol)、2-甲基-4-硝基苯乙胺2.16g(12mmol)和乙腈30mL,制备方法同(I-12)。得到黄色固体(I-13)1.76g,收率64.4%。1H-NMR[300MHz,DMSO-d6]:δ11.39(1H,s,pyrrole-NH);8.13(1H,t,CO-NH);8.05(1H,m,ArH);7.97(1H,m,ArH);7.42(1H,m,ArH);6.83(1H,m,ArH);6.72(1H,m,ArH);6.06(1H,m,ArH);3.43(2H,q,CH2);2.92(2H,t,CH2);2.44(3H,s,CH3)。
实施例25
N-[2-(2-甲基-4-氨基苯基)乙基]-1H-吡咯-2-甲酰胺(I-15)
I-13 1.56g(5.7mmol)、铁粉1.29g(23mmol)、NH4Cl 0.61g(11.4mmol)和75%乙醇(50mL),制备方法同(I-4),得化合物I-15 0.86g,收率62.3%。1H-NMR[300MHz,DMSO-d6]:δ11.36(1H,s,pyrrole-NH);8.03(1H,t,CO-NH);6.82(1H,m,ArH);6.77(1H,m,ArH);6.71(1H,m,ArH);6.36(1H,m,ArH);6.31(1H,m,ArH);6.06(1H,m,ArH);4.74(2H,s,NH2);3.27(2H,q,CH2);2.61(2H,t,CH2);2.17(3H,s,CH3)。
实施例26
N-(4-氯-3-三氟甲基苯基)-N’-[3-甲基-4-[2-(1H-吡咯-2-基甲酰氨基)乙基]苯基]脲(I-C-c)
I-15 243mg(1mmol),4-氯-3-三氟甲基苯异氰酸酯288mg(1.3mmol),制备方法同(I-A-a)。得白色固体I-C-c 243mg,收率52.3%,mp:213-215℃。MS[M+H]+465.1。 1H-NMR[300MHz,DMSO-d6]:δ11.38(1H,s,pyrrole-NH);9.08(1H,s,NH-CO-NH);8.65(1H,s,NH-CO-NH);8.10(1H,m,CO-NH);8.08(1H,m,ArH);7.61(1H,m,ArH);7.60(1H,m,ArH); 7.26(2H,s,ArH);7.20(1H,m,ArH);7.08(1H,m,ArH);6.83(1H,m,ArH);6.72(1H,m,ArH);6.06(1H,m,ArH);3.40(2H,m,CH2);2.74(2H,t,CH2);2.30(3H,s,CH3)。
实施例27
N-(3-三氟甲基苯基)-N’-[3-甲基-4-[2-(1H-吡咯-2-基甲酰氨基)乙基]苯基]脲(I-C-d)
I-15 243mg(1mmol),3-三氟甲基苯异氰酸酯243.3mg(1.3mmol),制备方法同(I-A-a)。得白色固体I-C-d 241mg,收率56.1%,mp:172-174℃,MS[M+H]+ 431.2。1H-NMR[300MHz,DMSO-d6]:δ11.36(1H,s,pyrrole-NH);8.95(1H,s,NH-CO-NH);8.59(1H,s,NH-CO-NH);8.07(1H,t,CO-NH);8.0(1H,s,ArH);7.50(2H,m,ArH);7.26(2H,m,ArH);7.17(1H,m,ArH);7.05(1H,m,ArH);6.81(1H,m,ArH);6.70(1H,m,ArH);6.05(1H,m,ArH);3.31(2H,q,CH2);2.72(2H,t,CH2);2.28(3H,s,CH3)。
实施例28
N-[2-(4-硝基苯基)乙基]-2-羟基苯甲酰胺(I-16)
在150mL三颈瓶中加入水杨酸1.38g(10mmol)、EDCI 2.88g(15mmol)、HOBt 2.02g(15mmol)、Et3N(3mL)和DMF(50mL),室温搅拌24hrs,TLC检测原料消失(乙酸乙酯∶石油醚=1∶1)。加入4-硝基苯乙胺2.49g(15mmol)的DMF溶液(20mL),滴毕反应24hrs,TLC检测原料消失(乙酸乙酯∶石油醚=1∶1)。减压蒸除大部分溶剂后,加水(20mL),乙酸乙酯萃取3次(20mL×3),合并提取液并分别用水和饱和氯化钠各洗一次(20mL×1),减压蒸除溶剂得到浅黄色油状物,粗品经柱层析(展开剂:乙酸乙酯∶石油醚=2∶1)得浅黄色固体I-161.68g,收率58.6%。1H-NMR[300MHz,DMSO-d6]:δ12.35(1H,s,OH);7.38(1H,t,CO-NH);7.25(1H,m,ArH);7.17(1H,m,ArH);7.03(2H,dd,ArH);6.95(1H,m,ArH);6.78(1H,m,ArH);6.6(2H,dd,ArH);3.61(2H,q,CH2);2.81(2H,t,CH2)。
实施例29
N-[2-(4-氨基苯基)乙基]-2-羟基苯甲酰胺(I-18)
N-[2-(4-硝基苯基)乙基]-2-羟基苯甲酰胺I-161.43g(5mmol),铁粉1.12g(20mmol)、NH4Cl0.54g(10mmol)和75%乙醇(20mL),制备方法同(I-4)。得到黄色固体I-180.94g,收率73.4%,MS[M+H]+255.2。
实施例30
N-(4-氯-3-三氟甲基苯基)-N’-[4-[2-(2-羟基苯甲酰氨基)乙基]苯基]脲(I-D-a)
I-18 256mg(1mmol),4-氯-3-三氟甲基苯异氰酸酯288mg(1.3mmol),制备方法同 (I-A-a)。得白色固体I-D-a 278.9mg,收率62.9%,mp:245-247℃,MS[M+Na]+500.1。 1H-NMR[300MHz,DMSO-d6]:δ12.55(1H,s,OH);9.11(1H,s,NH-CO-NH);8.86(1H,t,CO-NH);8.75(1H,s,NH-CO-NH);8.10(1H,m,ArH);7.80(1H,m,ArH);7.64(1H,m,ArH);7.61(1H,m,ArH);7.40(1H,m,ArH);7.39(2H,dd,ArH);7.18(2H,dd,ArH);6.90(1H,m,ArH);6.87(1H,m,ArH);3.50(2H,q,CH2);2.81(2H,t,CH2)。
实施例31
N-(3-三氟甲基苯基)-N’-[4-[2-(2-羟基苯甲酰氨基)乙基]苯基]脲(I-D-b)
I-18 256mg(1mmol),3-三氟甲基苯异氰酸酯243.3mg(1.3mmol),制备方法同(I-A-a)。得白色固体I-D-b 257.3mg,收率58.1%,mp:225-227℃,MS[M+H]+ 444.2。1H-NMR[300MHz,DMSO-d6]:δ12.54(1H,s,OH);8.99(1H,s,NH-CO-NH);8.87(1H,t,CO-NH);8.70(1H,s,NH-CO-NH);8.0(1H,s,ArH);7.82(1H,m,ArH);7.54(1H,m,ArH);7.49(1H,m,ArH);7.40(2H,dd,ArH);7.36(1H,m,ArH);7.30(1H,m,ArH);7.18(1H,m,ArH);7.15(1H,m,ArH);6.87(2H,dd,ArH);3.50(2H,q,CH2);2.81(2H,t,CH2)。
实施例32
N-[2-(2-甲基-4-硝基苯基)乙基]-2-羟基苯甲酰胺(I-17)
水杨酸1.38g(10mmol)、EDCI 2.88g(15mmol)、HOBt 2.02g(15mmol)、2-甲基-4-硝基苯乙胺2.7g(15mmol)、Et3N(3mL)和DMF(50mL),制备方法同(I-16),得浅黄色固体I-171.62g,收率53.9%。
实施例33
N-[2-(2-甲基-4-氨基苯基)乙基]-2-羟基苯甲酰胺(I-19)
I-17 1.5g(5mmol),铁粉1.12g(20mmol)、NH4Cl 0.54g(10mmol)和75%乙醇(30mL),制备方法同(I-4)。得黄色固体I-19 1.02g,收率75.4%。
实施例34
N-(4-氯-3-三氟甲基苯基)-N’-[3-甲基-4-[2-(2-羟基苯甲酰氨基)乙基]苯基]脲(I-D-c)
I-19 270mg(1mmol),4-氯-3-三氟甲基苯异氰酸酯288mg(1.3mmol),制备方法同(I-A-a)。得白色固体I-D-c 303.5mg,收率61.7%,mp:236-238℃,MS[M+Na]+514.1。 1H-NMR[300MHz,DMSO-d6]:δ12.6(1H,s,OH);9.09(1H,s,NH-CO-NH);8.92(1H,t,CO-NH);8.67(1H,s,NH-CO-NH);8.10(1H,s,ArH);7.83(1H,m,ArH);7.6(2H,s,ArH);7.39(1H,m,ArH);7.27(1H,m,ArH);7.2(1H,m,ArH);7.09(1H,m,ArH);6.90(1H,m,ArH);6.88(1H,m,ArH);3.45(2H,q,CH2);2.80(2H,t,CH2);2.3(3H,s,CH3)。
实施例35
N-(3-三氟甲基苯基)-N’-(3-甲基-4-(2-(2-羟基苯甲酰胺基)乙基)苯基)脲(I-D-d)
I-19 270mg(1mmol),3-三氟甲基苯异氰酸酯243.3mg(1.3mmol),制备方法同(I-A-a)。得白色固体I-D-d 257.3mg,收率59.2%,mp:204-206℃,MS[M+Na]+ 480.1。1H-NMR[300MHz,DMSO-d6]:δ12.61(1H,s,OH);8.98(1H,s,NH-CO-NH);8.93(1H,t,CO-NH);8.62(1H,s,NH-CO-NH);8.01(1H,s,ArH);7.80(1H,m,ArH);7.53(1H,m,ArH);7.52(1H,m,ArH);7.39(1H,m,ArH);7.3(1H,m,ArH);7.28(1H,m,ArH);7.20(1H,m,ArH);7.09(1H,m,ArH);6.9(1H,m,ArH);6.88(1H,m,ArH);3.44(2H,q,CH2);2.80(2H,t,CH2);2.3(3H,s,CH3)。
实施例36
3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-甲酰氯(I-20)
3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-甲酸3.26g(20mmol)、氯化亚砜20mL,制备方法类似于(I-1)。产品无需进一步纯化,直接投下一步反应。
实施例37
N-[2-(4-硝基苯基)乙基]-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-甲酰胺(I-21)
I-20 1.81g(10mmol)、4-硝基苯乙胺2.49g(15mmol)、无水氯仿30mL和无水三乙胺2mL,制备方法同(I-2)。得黄色固体I-21 2.03g,收率64.7%。1H-NMR[300MHz,DMSO-d6]:δ13.48(1H,s,imidazole-NH);9.12(1H,t,CO-NH);8.76(1H,s,ArH);8.09(1H,s,ArH);7.57(1H,m,ArH);7.36(2H,dd,ArH);7.16(2H,dd,ArH);3.53(2H,q,CH2);2.84(2H,t,CH2)。
实施例38
N-[2-(4-氨基苯基)乙基]-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-甲酰胺(I-23)
I-21 3.11g(10mmol)、铁粉2.24g(40mmol)、NH4Cl 1.07g(20mmol)和75%乙醇(30mL),制备方法同(I-4)。得化合物I-23 1.85g,收率65.7%。1H-NMR[300MHz,DMSO-d6]:δ13.17(1H,s,imidazole-NH);8.92(1H,t,CO-NH);7.69(1H,m,ArH);7.51(1H,m,ArH);7.25(2H,dd,ArH);6.79(1H,m,ArH);6.37(2H,dd,ArH);4.7(2H,s,NH2);3.14(2H,q,CH2);2.7(2H,t,CH2);2.18(3H,s,CH3)。
实施例39
N-(4-氯-3-三氟甲基苯基)-N’-[4-[2-(1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-基甲酰氨基)乙基]苯基]脲(I-E-a)
I-23 281mg(1mmol),4-氯-3-三氟甲基苯异氰酸酯288mg(1.3mmol),制备方法同(I-A-a)。得白色固体I-E-a 324.7mg,收率64.7%,mp:325-327℃,MS[M+H]+ 503.1。 1H-NMR[300MHz,DMSO-d6]:δ13.5(1H,s,imidazole-NH);9.16(2H,s);8.78(1H,s);8.47(1H,s);8.09(2H,s,ArH);7.61(1H,m,ArH);7.57(1H,m,ArH);7.36(2H,dd,ArH);7.34(1H,m,ArH); 7.19(2H,dd,ArH);3.54(2H,q,CH2);2.84(2H,t,CH2)。
实施例40
1H-咪唑-2-甲酰氯(I-25)
1H-咪唑-2-甲酸2.24g(20mmol),制备方法同(I-1),得化合物I-252.28g,收率87.3%。
实施例41
N-[2-(4-硝基苯基)乙基]-1H-咪唑-2-甲酰胺(I-26)
I-25 1.35g(10mmol)、4-硝基苯乙胺2.49g(15mmol)、无水氯仿30mL和无水三乙胺2mL,制备方法同(I-2)。得样品1.97g,收率75.6%。1H-NMR[300MHz,DMSO-d6]:δ11.37(1H,s,imidazole-NH);8.18(2H,dd,ArH);7.51(2H,dd,ArH);7.32(1H,t,CO-NH);6.96(2H,m,ArH);3.52(2H,q,CH2);2.96(2H,t,CH2)。
实施例42
N-[2-(4-氨基苯基)乙基]-1H-咪唑-2-甲酰胺(I-28)
I-26 1.34g(5mmol)、铁粉1.12g(20mmol)、NH4Cl 0.535g(10mmol)和75%乙醇(20mL),制备方法同(I-4)。得化合物I-280.71g,收率61.3%。
实施例43
N-(4-氯-3-三氟甲基苯基)-N’-[4-[2-(1H-咪唑-2-基甲酰氨基)乙基]苯基]脲(I-F-a)
I-28 230mg(1mmol)、4-氯3-三氟甲基苯异氰酸酯288mg(1.3mmol),制备方法同(I-A-a)。得化合物I-F-a 249.4mg,收率55.3%,mp:242-244℃,MS[M+H]+ 452.2。1H-NMR[300MHz,DMSO-d6]:δ11.37(1H,s,imidazole-NH);9.22(1H,s,NH-CO-NH);8.83(1H,s,NH-CO-NH);8.03(1H,t,CO-NH);7.57(2H,m,ArH);7.36(2H,dd,ArH);7.13(2H,dd,ArH);6.82(1H,s,ArH);6.72(1H,s,ArH);6.06(1H,s,ArH);3.39(2H,q,CH2);2.75(2H,t,CH2)。