CN102150770B

CN102150770B - 一种可增强免疫力的复合蜂产品制剂

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Publication number: CN102150770B
Application number: CN2011100662643A
Authority: CN
Inventors: 尹渭元; 尹志红
Original assignee: HANGZHOU BIYUTIAN HEALTH PRODUCTS CO Ltd
Current assignee: HANGZHOU BIYUTIAN HEALTH PRODUCTS CO Ltd
Priority date: 2011-03-18
Filing date: 2011-03-18
Publication date: 2012-12-26
Anticipated expiration: 2031-03-18
Also published as: CN102150770A

Abstract

一种可增强免疫力的复合蜂产品制剂，属于保健食品技术领域。它包括以下重量份数的蜂花粉10-60份，蜂胶2-20份，蜂王浆2-20份，蜂王胎2-15份，蜂蛹2-15份，西洋参2-10份，经过处理、干燥、粉碎、配制混合而成。本发明通过将处理后的蜂花粉、蜂胶、蜂王浆、蜂王胎、蜂蛹和西洋参，经过处理、干燥、粉碎、配制混合制成各种医学上的剂型，有以下有益效果：制作方法简单，可以提高机体免疫力、降血脂、通便、护肝、抗疲劳、改善睡觉、抗衰老等功效。

Description

一种可增强免疫力的复合蜂产品制剂

技术领域

本发明属于保健食品技术领域，具体涉及一种可增强免疫力的复合蜂产品制剂。

背景技术

蜂胶是蜜蜂从植物的树芽、树皮等部位采集的树脂，再混以蜜蜂舌腺、蜡腺等腺体的分泌物，经蜜蜂加转化而成的一种胶状物质。蜜蜂将这些物质涂布在整个蜂巢的表面，一方面起防腐、抗氧化作用，另一方面来粘合蜂巢，堵塞缝隙等，使众多病菌无法在蜂巢内滋生。蜂胶能起到全面调理，平衡机体免疫功能的作用。蜂产品中的蜂蜜、蜂胶、蜂王浆、花粉等均具有治病、保健、美容等功效，但由于受其欠佳的物理性能及口感的影响，如蜂蜜由于具有结晶性容易被消费者误认为加了白糖，而且信用时流动性差，不易从瓶中倒出；蜂王浆不仅味酸、涩、辛，适口性差，而且要结冰存放，食用时要破冰，食取不便；花粉食用时有草腥味，口感较差。

发明内容

针对现有技术中存在的上述问题，本发明的目的在于提供一种能增强免疫力的复合蜂产品制剂。

所述的一种可增强免疫力的复合蜂产品制剂，包括原料蜂花粉、蜂胶、蜂王浆、蜂王胎、蜂蛹和西洋参，经过处理、干燥、粉碎、配制混合而成，其特征在于所述的各组份的重量份数为：

蜂花粉 10-60份，蜂胶 2-20份，蜂王浆 2-20份，蜂王胎 2-15份，蜂蛹 2-15份，西洋参 2-10份。

所述的一种可增强免疫力的复合蜂产品制剂，其特征在于

所述的各组份的重量份数为：

蜂花粉 20-50份，蜂胶8-15份，蜂王浆 10-15份，蜂王胎 5-10份，蜂蛹 6-12份，西洋参5-8份。

所述的一种可增强免疫力的复合蜂产品制剂，其特征在于

所述的各组份的重量份数为：

蜂花粉 45份，蜂胶10份，蜂王浆 10份，蜂王胎 8份，蜂蛹 10份，西洋参6份。

所述的一种可增强免疫力的复合蜂产品制剂，其特征在于所述的蜂花粉经灭菌，粉碎后备用。

所述的一种可增强免疫力的复合蜂产品制剂，其特征在于所述的蜂胶由毛胶原料经酒精提取后备用。

所述的一种可增强免疫力的复合蜂产品制剂，其特征在于所述的西洋参经烘干灭菌粉碎后备用。

所述的一种可增强免疫力的复合蜂产品制剂，其特征在于所述的蜂王浆处理过程为，将它置于真空冷冻干燥机内冻干，分两个步骤完成：预冻和升华解析，所述的预冻为1h内降温至-30～-25℃，并保温2h；所述的升华解析为以每2h升高10℃的速度，缓慢升温至40℃，保温4-7h，整个过程需24小时，经冷冻后，再磨成80-120目的细粉，含水量为3%-5%以下。

所述的一种可增强免疫力的复合蜂产品制剂，其特征在于所述的蜂蛹处理过程为，将它置于真空冷冻干燥机内冻干，分两个步骤完成：预冻和升华解析，所述的预冻为1h内降温至-30～-25℃，并保温2h；所述的升华解析为以每2h升高10℃的速度，缓慢升温至40℃，保温4-7h，整个过程需24小时，经冷冻后，再磨成80-120目的细粉，含水量为3%-5%以下。

所述的一种可增强免疫力的复合蜂产品制剂，其特征在于所述的蜂王胎处理过程为，将它置于真空冷冻干燥机内冻干，分两个步骤完成：预冻和升华解析，所述的预冻为1h内降温至-30～-25℃，并保温2h；所述的升华解析为以每2h升高10℃的速度，缓慢升温至40℃，保温4-7h，整个过程需24小时，经冷冻后，再磨成80-120目的细粉，含水量为3%-5%以下。

所述的一种可增强免疫力的复合蜂产品制剂，其特征在于将以上处理的原料粉按配方比例混合均匀，然后制成医学上的各种剂型，包装、检验、入库。

本发明通过将处理后的蜂花粉、蜂胶、蜂王浆、蜂王胎、蜂蛹和西洋参，经过处理、干燥、粉碎、配制混合制成各种医学上的剂型，有以下有益效果

本发明的产品制作方法简单，可以提高机体免疫力、降血脂、通便、护肝、抗疲劳、改善睡觉、抗衰老等功效。

具体实施方式

以下结合实施例对本发明作进一步的描述：

实施例1 所用的原料重量份数如下：

蜂花粉 10份，蜂胶20份，蜂王浆20份，蜂王胎15份，蜂蛹 10份，西洋参 8份，每种原料都经过一定的处理，干燥，碎粉后按上述配方比例混合均匀，按所需剂型制成。

其中所述的蜂花粉经灭菌，粉碎后备用；所述的蜂胶由毛胶原料经酒精提取后备用；西洋参经烘干灭菌粉碎后备用；蜂王浆、蜂蛹、蜂王胎的处理过程为，将它置于真空冷冻干燥机内冻干，分两个步骤完成：预冻和升华解析，所述的预冻为1h内降温至-30～-25℃，并保温2h；所述的升华解析为以每2h升高10℃的速度，缓慢升温至40℃，保温4-7h，整个过程需24小时，经冷冻后，再磨成80-120目的细粉，含水量含在5%以下。

实施例2 所用的原料重量份数如下：

蜂花粉 20份，蜂胶20份，蜂王浆15份，蜂王胎10份，蜂蛹15份，西洋参9份，原料处理及配制如实施例1。

实施例3 所用的原料重量份数如下：

蜂花粉 50份，蜂胶2份，蜂王浆8份，蜂王胎5份，蜂蛹6份，西洋参10份，原料处理及配制如实施例1。

实施例4 所用的原料重量份数如下：

蜂花粉 60份，蜂胶2份，蜂王浆2份，蜂王胎2份，蜂蛹2份，西洋参2份，原料处理及配制如实施例1。

实施例5 所用的原料重量份数如下：

蜂花粉 45份，蜂胶8份，蜂王浆10份，蜂王胎10份，蜂蛹12份，西洋参10份，原料处理及配制如实施例1。

实施例6 所用的原料重量份数如下：

蜂花粉 35份，蜂胶15份，蜂王浆12份，蜂王胎10份，蜂蛹15份，西洋参5份，原料处理及配制如实施例1。

实施例7 所用的原料重量份数如下：

蜂花粉 45份，蜂胶10份，蜂王浆 10份，蜂王胎 8份，蜂蛹 10份，西洋参6份，原料处理及配制如实施例1。

1 本发明产品的增强免疫力功能动物实验

1.1 对象：选用上海西普尔-必凯实验动物有限公司繁殖的18.3-24.2g健康雌性小鼠40只，随机平均分为4组，作为Ⅰ组，进行二硝基氟苯诱导小鼠DTH试验；18.6-23.5g健康雌性小鼠40只，随机平均分为4组，作为Ⅱ组，进行小鼠抗体生成细胞及半数溶血值（HC₅₀）试验；19.4-23.9g健康雌性小鼠40只，随机平均分为4组，作为Ⅲ组，进行小鼠碳廓清试验；18.6-23.9g健康雌性小鼠40只，随机平均分为4组，作为Ⅳ组，进行小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验；18.1-24.6g健康雌性小鼠40只，随机平均分为4组，作为Ⅴ组，进行小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验。

1.2剂量：按60KG体重计，每人每天推荐摄入量为3.24，相当于54mg/d/kg.bw。分别按人体推荐摄入量的5倍、10倍、30倍设计三个剂量组即270mg/d/kg.bw、540mg/d/kg.bw 、1620mg/d/kg.bw，另设0mg/d/kg.bw组以无菌水代替受试物，经口每日一次给小鼠相应剂量的受试物，连续灌胃30d后测各项增强免疫力功能指标，小鼠灌胃量为10ml/kg.bw。

1.3试验方法：按«保健食品检验与评价技术规范-2003版»之增强免疫力功能检验方法进行。

1.3.1二硝基氟苯（DNFB）诱导小鼠DTH（耳肿胀法）：

各剂量组连续灌胃30天，每鼠用剪刀将腹部毛剪去，范围约3cm×3cm，用1%DNFB溶液10微升均匀涂抹于小鼠右耳进行攻击，同时用不含DNFB的溶液10微升均匀涂抹于小鼠左耳作对照，攻击后24小时颈椎脱臼处死小鼠，剪下左右耳壳，用打孔器取下直径8mm耳片，称重。同时取小鼠脾脏、胸腺并称重，计算脏/体比值。

1.3.2血清溶血素测定：

各剂量组连续灌胃30天，制备2%（v/v）的绵羊红细胞（SRBC）悬液，每只鼠腹腔注射0.2ml进行免疫，4天后摘除眼球取血于离心管内，放置1h，2000r/min离心10min，分离并收集血清。血清200倍稀释后，按检验方法测定样品管及SRBC半数溶血时的光密度值。溶血素的量以半数溶血值（HC₅₀）表示。

1.3.3抗体生成细胞检测（Jerne改良玻片法）

各组动物连续灌胃30d，每只鼠腹腔注射2%（v/v）的SRBC悬液0.2ml进行免疫，4d后小鼠颈椎脱臼处死，取出脾脏，放在盛有适量无菌Hank^,s液的小平皿中，研磨脾脏，制成细胞悬液，经200目筛网过滤，离心（1000r/min）10min，用Hank^,s液洗2遍，最后将细胞悬浮于5mlRPMI 1640培养液中，放45度水浴保温，与等量pH7.2-7.4、2倍浓度的Hank^,s液混合，分装小试管，每管0.5ml，再向管内加50微升10%(v/v，用SA液配制)SRBC，20微升脾细胞悬液（5×10⁶个/ml），迅速混匀，倾倒于已刷琼脂糖薄层的玻片上，待琼脂凝固后，将玻片水平扣放在片架上，放入CO₂培养箱中孵育1.5h，然后将制备好的补体1:10稀释后加入到玻片架凹槽内，继续孵育1.5h，计数溶血空斑数。

1.3.4小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验（半体内法）

各组动物连续灌胃30d，制备20%v/v的鸡红细胞悬液，每只鼠腹腔注射1ml，间隔30min，颈椎脱臼处死小鼠，将其仰位固定于鼠板上，正中剪开腹壁皮肤，经腹腔注入生理盐水2ml,转动鼠板1min，然后吸出腹腔洗液1ml，平均分滴于2片载玻片上，放入垫有湿沙布的搪瓷盒内，移置37℃温箱孵育30min，然后，于生理盐水中漂洗，晾干，以1:1丙酮甲醇溶液固定，4%（v/v）Giemsa-磷酯缓冲液染色3min，再用蒸馏水漂洗晾干，光镜下观察。

1.3.5 NK细胞活性测定（乳酸脱氢酶测定法）

各组动物连续灌胃30d，颈椎脱臼处死小鼠，无菌取脾，置于盛有适量无菌hank^,s液的小平皿中，研磨脾脏，制成细胞悬液，用Hank^,s液洗2遍，经200目筛网过滤，离心（1000r/min）10min，弃去上清将细胞浆弹起，加入0.5ml灭菌水20秒，裂解红细胞后再加入0.5ml 2倍Hank^,s液及8mlHank^,s液，离心10min（1000r/min），用1ml含10%小牛血清RPMI1640完全培养液重悬，用1%冰乙酸稀释后计数，台酚蓝染色计数活细胞数（应在95%以上），用RPMI1640完全培养液调整细胞浓度为2×10⁷。

1.3.6 ConA诱导小鼠脾淋巴细胞转化试验（MTT法）

各组动物连续灌胃30d，颈椎脱臼处死小鼠，无菌取脾，置于盛有适量无菌hank^,s液的小平皿中，研磨脾脏，制成细胞悬液，经200目筛网过滤，用Hank^,s液洗3遍，每次离心（1000r/min）10min，然后将细胞悬浮于1ml RPMI1640完全培养液k ,台酚蓝染色计数活细胞数（应在95%以上），整细胞浓度为3×10⁶个/ml。将细胞悬液分两孔加入24孔培养板中，每孔1ml，一孔加75μlConA液，另一孔作为对照，置5%CO₂、37℃孵箱中培养72h。培养结束前4h，每孔轻轻吸去上清液0.7ml，加入0.7ml不含小牛血清的RPMI1640培养液，同时加入MTT（5ml/ml）50μl/孔，继续培养4h。培养结束后，每孔加入1ml酸性异丙酮，吹打混匀，使紫色结晶完全溶解，将溶解液移入96孔板中，酶标仪测定光密度值。

1.4 饲养条件：小鼠在温度为18-22℃、相对湿度为40-70%的屏障系统中饲养。实验动物使用许可证号：SYXK(苏)2002-0014。小鼠辐射无菌饲料由江苏省协同医药生物工程有限公司提供。

2 实验结果

2.1服用本发明的蜂产品复合制剂对小鼠体重的影响

从上表中可以看出，经口给予小鼠不同剂量的本发明的复合蜂产品制剂胶囊30d，各剂量组体重差异均无显著性，对小鼠的体重增长无影响。

2.2对DNFB诱导小鼠DTH的影响

从上表中可以看出，经口给予小鼠不同剂量的本发明的复合蜂产品制剂胶囊30d，540mg/kg.bw组小鼠DNFB诱导小鼠DTH显著高于0mg/kg.bw组。

2.3复合蜂产品制剂对小鼠血清溶血素形成的影响

从上表中可以看出，经口给予小鼠不同剂量的本发明的复合蜂产品制剂胶囊30d，所测定值进行正态、方差齐性检验，满足正态要求，用单因素方差分析方法和多个实验组与一个对照组间均数的两两比较方法进行统计处理。服用组的DTH显著高于无服用组。

2.4复合蜂产品制剂对ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化的影响

从上表中可以看出，经口给予小鼠不同剂量的本发明的复合蜂产品制剂胶囊30d，所测定值进行正态、方差齐性检验，满足正态要求，用单因素方差分析方法和多个实验组与一个对照组间均数的两两比较方法进行统计处理。服用组小鼠加ConA 孔与不加ConA 孔吸光度血清溶血素含量显著高于无服用组。

2.5对抗体生成细胞（溶血空斑数）的影响

从上表中可以看出，经口给予小鼠不同剂量的本发明的复合蜂产品制剂胶囊30d，所测定值进行正态、方差齐性检验，满足正态要求，用单因素方差分析方法和多个实验组与一个对照组间均数的两两比较方法进行统计处理。1620mg/kg.bw组小鼠溶血空斑数显著高于0mg/kg.bw组。

2.6对NK细胞活性的影响

从上表中可以看出，540mg/kg.bw、1620mg/kg.bw组小鼠NK细胞活性显著高于0mg/kg.bw组。

2.7对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率及吞噬指数的影响

从上表中可以看出，经口给予小鼠不同剂量的本发明的复合蜂产品制剂胶囊30d，所测定值进行正态、方差齐性检验，满足正态要求，用单因素方差分析方法和多个实验组与一个对照组间均数的两两比较方法进行统计处理。1620mg/kg.bw组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞吞噬率及吞噬指数显著高于0mg/kg.bw组。

3 结论

对小鼠以270mg/d/kg.bw、540mg/d/kg.bw 、1620mg/d/kg.bw连接给样30d，结果显示，复合蜂产品制剂能增强小鼠DTH的能力，提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率及吞噬指数，促进小鼠脾细胞溶血空斑及血清溶血素的形成，能增强脾淋巴细胞的增殖能力，提高NK细胞的活性，因此本发明的复合蜂产品制剂具有增强免疫力的功能。

Claims

1.一种可增强免疫力的复合蜂产品制剂，其特征在于包括原料蜂花粉、蜂胶、蜂王浆、蜂王胎、蜂蛹和西洋参，经过处理、干燥、粉碎、配制混合而成，所述的各组份的重量份数为：蜂花粉 10-60份，蜂胶 2-20份，蜂王浆 2-20份，蜂王胎 2-15份，蜂蛹 2-15份，西洋参 2-10份，

所述的蜂王浆处理过程为，将它置于真空冷冻干燥机内冻干，分两个步骤完成：预冻和升华解析，所述的预冻为1h内降温至-30～-25℃，并保温2h；所述的升华解析为以每2h升高10℃的速度，缓慢升温至40℃，保温4-7h，整个过程需24小时，经冷冻后，再磨成80-120目的细粉，含水量为3%-5%以下。

2.根据权利要求1所述的一种可增强免疫力的复合蜂产品制剂，其特征在于

所述的各组份的重量份数为：

3.根据权利要求1所述的一种可增强免疫力的复合蜂产品制剂，其特征在于

所述的各组份的重量份数为：

4.根据权利要求1所述的一种可增强免疫力的复合蜂产品制剂，其特征在于所述的蜂花粉经灭菌，粉碎后备用。

5.根据权利要求1所述的一种可增强免疫力的复合蜂产品制剂，其特征在于所述的蜂胶由毛胶原料经酒精提取后备用。

6.根据权利要求1所述的一种可增强免疫力的复合蜂产品制剂，其特征在于所述的西洋参经烘干灭菌粉碎后备用。

7.根据权利要求1所述的一种可增强免疫力的复合蜂产品制剂，其特征在于所述的蜂蛹处理过程为，将它置于真空冷冻干燥机内冻干，分两个步骤完成：预冻和升华解析，所述的预冻为1h内降温至-30～-25℃，并保温2h；所述的升华解析为以每2h升高10℃的速度，缓慢升温至40℃，保温4-7h，整个过程需24小时，经冷冻后，再磨成80-120目的细粉，含水量为3%-5%以下。

8.根据权利要求1所述的一种可增强免疫力的复合蜂产品制剂，其特征在于所述的蜂王胎处理过程为，将它置于真空冷冻干燥机内冻干，分两个步骤完成：预冻和升华解析，所述的预冻为1h内降温至-30～-25℃，并保温2h；所述的升华解析为以每2h升高10℃的速度，缓慢升温至40℃，保温4-7h，整个过程需24小时，经冷冻后，再磨成80-120目的细粉，含水量为3%-5%以下。

9.根据权利要求1所述的一种可增强免疫力的复合蜂产品制剂，其特征在于将以上处理的原料粉按配方比例混合均匀，然后制成医学上的各种剂型，包装、检验、入库。