CN102133305A - 用于提高免疫力防治三高的保健物或药物组合物及其应用 - Google Patents
用于提高免疫力防治三高的保健物或药物组合物及其应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及一种用于提高免疫力防治“三高”的保健物或药物组合物，由下述重量份数的原料组成：30～50重量份的蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉，20～30重量份的黄芪提取物，10～30重量份的灵芝子实体提取物和5～20重量份的葡萄籽提取物。所谓“三高”指高血糖、高血脂和高血压。本发明的用于提高免疫力防治“三高”的保健物或药物组合物设计巧妙独特，组分间相互携同，生物利用率高，能提高免疫力防治“三高”，且可制成复方制剂，无毒副作用，适于大规模推广应用。
Description
技术领域
本发明涉及保健物或药物组合物技术领域，特别涉及提高免疫力的保健物或药物组合物技术领域，具体是指一种用于提高免疫力防治“三高”的保健物或药物组合物及其应用。
背景技术
许多原因可以导致人体免疫力低下，如慢性疾病、老年人、长期服用抗生素、肿瘤患者、接受化疗和放射治疗的患者，免疫力低下会是个体更容易受到微生物的感染、加重原有的疾病、使化疗和放射治疗无法安计划完成。因此，增强免疫力对免疫力低下人群有着非常重要的医学意义，在临床应用和医学研究方面也得到了广泛的重视。
中国已经步入老年社会，随着年龄的增长免疫力下降，为了提供广大老年人的生活质量，需要向老年人提供疗效肯定的增强免疫力保健产品。另一方面，工业化发展也产生了很多环境污染，导致肿瘤和一些慢性疾病的增加，他们也需要增强免疫力保健产品。因此增强免疫力保健产品有着巨大的市场前景。
因此，需要提供一种用于提高免疫力防治“三高”的保健物或药物组合物，其能用于提高免疫力防治“三高”，从而为保障人类健康作出一定贡献。
发明内容
本发明的目的是克服了上述现有技术中的缺点，提供一种用于提高免疫力防治“三高”的保健物或药物组合物及其应用，该用于提高免疫力防治“三高”的保健物或药物组合物设计巧妙独特，组分间相互携同，生物利用率高，能提高免疫力防治“三高”，且可制成复方制剂，无毒副作用，适于大规模推广应用。
为了实现上述目的，在本发明的第一方面，提供了一种用于提高免疫力防治“三高”的保健物或药物组合物，其特点是，由下述重量份数的原料组成：30～50重量份的蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉，20～30重量份的黄芪提取物，10～30重量份的灵芝子实体提取物和5～20重量份的葡萄籽提取物。所谓“三高”指高血糖、高血脂和高血压。
较佳地，所述蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉为35～40重量份，所述黄芪提取物为20～25重量份，所述灵芝子实体提取物为15～25重量份和所述葡萄籽提取物为5～10重量份。
较佳地，所述蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉为40重量份，所述黄芪提取物为25重量份，所述灵芝子实体提取物为25重量份和所述葡萄籽提取物为10重量份。
上述配方依据如下：
蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉：功效作用：虫草及人工培养的蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉可以明显增加小鼠的免疫器官的重量，能促进T淋巴细胞、B淋巴细胞、NK细胞和巨噬细胞活性，还能促进抗体的形成。
黄芪提取物：功效作用：黄芪的主要功效成分有多糖、黄芪甲苷和黄酮等物质，作为免疫调节剂能激活淋巴细胞、巨嗜细胞和自然杀伤细胞等免疫细胞；还能激活补体，促进细胞因子生成等在多途径对免疫系统发挥调节作用，对正常机体的抗体生成功能也有明显的促进作用。
灵芝子实体提取物：功效作用：研究表明，灵芝及其提取物能增加胸腺和脾脏的重量促进非特异性免疫，还能促进特异性抗体产生，提高细胞免疫和体液免疫。
葡萄籽提取物：功效作用：葡萄籽提取物的主要功效成分是原花青素，它可以改善免疫缺陷小鼠的B细胞和T细胞功能，增强动物的非特异性免疫等，其主要机制是是通过清除体内的自由基、免除或减少自由基对免疫系统的损害来实现的。
本发明的用于提高免疫力防治“三高”的保健物或药物组合物的配伍关系：经查文献，虫草、灵芝、黄芪、原花青素都被大量研究文献证实具有明确的增强免疫力功能的成分。在配伍方面以虫草和灵芝的配伍最多，文献“灵芝虫草菌丝体对大鼠NK细胞活性影响的流式细胞术研究”“虫草菌丝体灵芝胶囊对小鼠的免疫作用”“虫草灵芝孢子粉的食用安全性和免疫功能研究”“百菌健食用菌胶囊对化学性肝损伤和增强免疫功能的作用”的研究均是以虫草和灵芝为配伍的，结果表明他们都具有增强免疫力的作用。文献“奇灵康片免疫调节作用实验研究”是以黄芪、灵芝和抗氧化剂(铜锌超氧化物歧化酶)为配方的研究，文献“伍茶多酚复合剂免疫增强作用的研究”也是以黄芪、灵芝和抗氧化剂茶多酚为配方的研究，他们都证明以黄芪、灵芝和抗氧化剂具有增强免疫力的功能。文献“复方虫草精华对小鼠免疫功能的影响”和“复方虫草精华改善血液循环功能和增强免疫功能的实验研究”的试验配方是冬虫夏草和黄芪，结果表明该配方能增强免疫功能。
在增强免疫力机理方面，灵芝与黄芪以多糖的作用为主，虫草以腺苷和多糖为主，原花青素可能是通过清除体内的自由基、免除或减少自由基对免疫系统的损害来实现的。
在本发明的第二方面，提供了上述的用于提高免疫力防治“三高”的保健物或药物组合物在制备提高免疫力防治“三高”的保健品或药品中的应用。例如，通过将该用于提高免疫 力防治“三高”的保健物或药物组合物和可食性辅料或药学上可接受的载体等混合在一起制成提高免疫力防治“三高”的保健品或药品。
例如，一种提高免疫力防治“三高”的保健品或药品可以通过以下方法制备：1、所有原料过60目筛；2、按配方比例称取各原料；3、混合：混合机转速为60转/分，混合时间为45分钟；4、在自动胶囊填充机上，0#胶囊、0.4克/粒进行胶囊填充；5、胶囊抛光；6、装瓶；7、成品检验。
本发明的有益效果具体如下：本发明的用于提高免疫力防治“三高”的保健物或药物组合物，其特点是，由下述重量份数的原料组成：30～50重量份的蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉，20～30重量份的黄芪提取物，10～30重量份的灵芝子实体提取物和5～20重量份的葡萄籽提取物，设计巧妙独特，组分间相互携同，生物利用率高，能用于提高免疫力防治“三高”，且可制成复方制剂，无毒副作用，适于大规模推广应用。
具体实施方式
为了能够更清楚地理解本发明的技术内容，下面通过具体实施例对本发明进行详细描述。
实施例1配方筛选
经查文献，虫草、灵芝、黄芪、葡萄籽提取物原花青素都被大量研究文献证实具有明确的增强免疫力功能的成分，以虫草和灵芝的配伍最多，其次为灵芝与黄芪配伍和虫草与黄芪配伍。在增强免疫力机理方面，灵芝与黄芪以多糖的作用为主，虫草以腺苷和多糖为主，葡萄籽提取物原花青素是通过清除体内的自由基、免除或减少自由基对免疫系统的损害来实现的。从文献研究看来，虫草、灵芝、黄芪为增强免疫力的一个基本配方配伍，本配方筛选的目的在于研究在该配伍的基础之上，加上葡萄籽提取物(内含原花青素)抗氧化成分后是否具有更好的增强免疫力功能。
1.1、实验动物：昆明种纯系健康小白鼠，体重18～22克，由中科院上海实验动物中心提供(合格证号：中科动管字第027号)，颗粒饲料亦由中科院上海实验动物中心提供。小鼠随机分成4组，每组10只，自由取食标准饲料。
1.2实验分组：实验设阳性对照组(P)、阴性对照组(N)、研究配方1组(F1)和研究配方2组(F2)。阳性对照组用胸腺肽(剂量为34.8mg/kg BW)灌胃，灌胃体积为0.5ml/次，每天1次；阴性对照组用0.5ml生理盐水灌胃；研究配方1组的配方为蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉(西安三江生物工程有限公司、食品级、60目粉)80mg/kg BW+灵芝子实体提取物(西安三江生物工程有限公司、食品级、60目粉)50mg/kg BW+黄芪提取物(西安三江生物工程有限公司、 食品级、60目粉)50mg/kg BW；研究配方2组的配方为蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉80mg/kg BW+灵芝提取物50mg/kg BW+黄芪提取物50mg/kg BW+葡萄籽提取物(西安三江生物工程有限公司、食品级、60目粉)8mg/kg BW。研究配方3组的配方为：蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉60mg/kgBW+灵芝提取物60mg/kg BW+黄芪提取物20mg/kg BW+葡萄籽提取物(西安三江生物工程有限公司、食品级、60目粉)10mg/kg BW；研究配方4组的配方为：蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉100mg/kg BW+灵芝提取物40mg/kg BW+黄芪提取物60mg/kg BW+葡萄籽提取物(西安三江生物工程有限公司、食品级、60目粉)40mg/kg BW；灵芝提取物的标准为多糖20％，黄芪提取物的标准为多糖30％，按上述剂量连续灌胃给药30天。
1.3试验方法及观察指标：胸腺/体重比，脾脏/体重比，MTT法测ConA诱导的脾淋巴细胞转化试验，足跖增厚法迟发型过敏反应，溶血空斑试验，乳酸脱氢酶(ABC)测定法巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验，小鼠碳廓清实验。
1.4统计处理数据用SPSS10.0软件包进行统计分析。
1.5结果
1.5.1研究配方对小鼠免疫器官的影响
试验结果显示，研究配方1、2、3、4均能使小鼠的免疫器官脾脏的重量增加，但以研究配方2、3、4的效果更好，且差异有显著性意义(表1)。
表1配方对小鼠免疫器官重量指数的影响( 
n＝10)
与阴性对照相比，*P＜0.05，**P＜0.01；与阳性对照和研究配方1组，#P＜0.05。
1.5.2研究配方对小鼠脾淋巴细胞转化的影响
用MTT法测定结果表明，正常小鼠脾细胞在ConA激活的条件下，研究配方的淋巴细胞转化，与阴性对照组相比有明显的提高，差异有显著性，但4个研究配方之间的差异无显著性(表2)。
表2配方对小鼠脾淋巴细胞转化的影响( 
n＝10)
与阴性对照相比，*P＜0.01；与阳性对照和研究配方1组，#P＜0.05。
1.5.3研究配方对小鼠迟发型过敏反应的影响
试验结果表明研究配方组的小鼠足跖肿胀度均高于阴性对照组，以研究配方2、3、4组的显著，且差异有显著性意义(表3)。
表3配方对小鼠迟发型过敏反应的影响( 
n＝10)
| 组别 | 足跖肿胀度(mm) |
| 阴性对照组 | 0.31±0.13 |
| 阳性对照组 | 0.42±0.15 |
| 研究配方1组 | 0.42±0.14* |
| 研究配方2组 | 0.58±0.16**，# |
| 研究配方3组 | 0.53±0.17**，# |
| 研究配方4组 | 0.57±0.19**，# |
与阴性对照相比，*P＜0.05，**P＜0.01；与阳性对照和研究配方1组，#P＜0.05。
1.5.4研究配方对小鼠碳廓清指数的影响
试验结果表明研究配方组的小鼠碳廓清指数均高于阴性对照组，以研究配方2、3、4组的显著，且差异有显著性意义(表4)。
表4配方对小鼠碳廓清指数的影响( 
n＝10)
| 组别 | 碳廓清指数 |
| 阴性对照组 | 0.0260±0.0047 |
| 阳性对照组 | 0.0356±0.0068 |
| 研究配方1组 | 0.0369±0.0082* |
| 研究配方2组 | 0.0412±0.0073**，# |
| 研究配方3组 | 0.0419±0.0085**，# |
| 研究配方4组 | 0.0411±0.0081**，# |
与阴性对照相比，*P＜0.05，**P＜0.01；与阳性对照和研究配方1组，#P＜0.05。
1.5.5研究配方对小鼠溶血空斑数的影响
试验结果表明研究配方组的小鼠溶血空斑数均高于阴性对照组，以研究配方2组最显著，但4个研究配方组之间的差异无显著性意义(表5)。
表5配方对小鼠溶血空斑数的影响( 
n＝10)
| 组别 | 空斑数/106脾细胞 |
| 阴性对照组 | 41.3±13.8 |
| 阳性对照组 | 87.5±25.4 |
| 研究配方1组 | 107.6±47.7* |
| 研究配方2组 | 111.3±36.2* |
| 研究配方3组 | 111.9±41.7* |
| 研究配方4组 | 111.6±48.9* |
与阴性对照相比，*P＜0.01，与阳性对照相比，*P＜0.05。
1.5.6研究配方对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响
试验结果表明研究配方组对小鼠巨噬细胞吞噬功能没有影响。
表6配方对小鼠溶血空斑数的影响( 
n＝10)
| 组别 | 吞噬率(％) | 吞噬指数 |
| 阴性对照组 | 30.2±3.5 | 0.383±0.15 |
| 阳性对照组 | 32.5±4.1 | 0.865±0.13 |
| 研究配方1组 | 30.1±3.7 | 0.401±0.12 |
| 研究配方2组 | 29.4±3.9 | 0.412±0.14 |
| 研究配方3组 | 30.1±4.7 | 0.402±0.13 |
| 研究配方4组 | 31.2±3.1 | 0.405±0.11 |
从以上的研究数据可以看出，4个研究配方组对小鼠的体液免疫和细胞免疫等功能均具有不同程度的增强作用，但以研究配方2、3、4组的作用更为显著，且差异有统计学意义。因此决定采用研究配方2、3、4为本发明的配方。
实施例2剂量筛选
根据配方筛选的结果，选定研究配方2、3、4作为产品配方，但需要对配方的剂量做进一步筛选。以研究配方2为例。
2.1实验分组实验设高、中、低三个剂量组，低剂量组的配方为蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉80mg/kg BW+灵芝提取物50mg/kg BW+黄芪提取物50mg/kg BW+葡萄籽提取物8mg/kg BW。中剂量组为低剂量组的2倍，高剂量组为低剂量组的3倍。
2.2试验方法、观察指标和检测方法同配方筛选部分。
2.3结果
表7不同剂量配方对小鼠免疫功能的影响( 
n＝10)
经统计学分析，各剂量组与阴性对照组相比，各观察指标均优于阴性对照组，有显著性差异。中剂量组与低剂量组相比，有显著性差异。高剂量组与中剂量组比无显著性差异，与低剂量组比有显著性差异。
2.4结论：因高剂量组和中剂量组相比，各指标的差异无显著性，并且考虑到原料成本和服用的方便性，因此最终采用了中剂量组配方。
实施例3功能实验检验
经口每天给予200、400和1200mg/kg(分别相当于成人每日每千克体重推荐摄入量的5倍、10倍和30倍)本胶囊制剂(采用实施例1的研究配方2组)30天，各项实验结果如下：
样品对实验前后动物体重的影响：
实验后各受试物剂量组小鼠增重与溶剂对照组无显著性差异(P＞0.05)。
2.样品对脏器/体重比值的影响：
与溶剂对照组相比，各组小鼠胸腺/体比值、脾/体比值无统计学差异(P＞0.05)。
3.细胞免疫功能实验：
3.1ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验(MTT法)：中剂量组与溶剂对照组光密度差值经方差分析及两两比较有统计学极显著性差异(P＜0.01)。提示本胶囊制剂具有增强小鼠淋 巴细胞增殖能力的作用。
3.2二硝基氟苯(DNFB)诱导的小鼠迟发性变态反应(DTH)：各剂量组小鼠的耳廓肿胀度均高于溶剂对照组值，结果经方差分析及两两比较统计学处理，中、高剂量组有统计学极显著性差异(P＜0.01)。提示本胶囊制剂具有增强DNFB引起的小鼠迟发性变态反应作用。
两个实验的结果均为阳性，本胶囊制剂(采用实施例1的研究配方2组)可增强小鼠细胞免疫功能。
4.体液免疫功能实验：
4.1抗体生成细胞检测(Jerne改良玻片法)：各剂量组溶血空斑数均高于溶剂对照组值，结果经方差分析及两两比较统计学处理，各剂量组溶血空斑数与对照组比较均有统计学显著性差异(P＜0.05，P＜0.01)，提示本胶囊制剂具有增强小鼠产生抗体生成细胞的功能。
4.2血清溶血素测定：各剂量组与溶剂对照组小鼠血清半数溶血值(HC50)经ANOWVA得P值＞0.05，无统计学显著性差异。提示本胶囊制剂不具有增强小鼠产生血清溶血素的功能。
两个实验中有一个实验的三个剂量组结果为阳性，本胶囊制剂(采用实施例1的研究配方2组)有增强小鼠体液免疫的功能。
5.单核-巨噬细胞功能实验：
5.1小鼠碳廓清实验：各剂量组与溶剂对照组小鼠的吞噬指数a经ANOVA得P值＞0.05，无统计学显著性差异。提示本胶囊制剂无增强小鼠碳廓清能力的作用。
5.2小鼠腹腔巨噬百分率及吞噬指数经ANOVA得P值大于0.05，均无统计学显著性，单核-巨噬细胞吞噬百分率及吞噬指数经ANOVA得P值大于0.05，均无统计学显著性差异(P＞0.05)。提示本胶囊制剂无增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力的作用。
两项试验均为阴性，本胶囊制剂(采用实施例1的研究配方2组)无增强小鼠单核-巨噬细胞吞噬能力的作用。
6.NK细胞活性测定：
中、高剂量组小鼠的NK细胞活性高于溶剂对照组，并有统计学极显著性差异(P＜0.01)，试验结果阳性，提示中、高剂量本胶囊制剂(采用实施例1的研究配方2组)具有增强小鼠NK细胞活性的作用。
7分别采用实施例1的研究配方3和配方4进行上述功能验证，结果与采用配方2获得的试验结果相似。
因此，细胞免疫功能、体液免疫功能和NK细胞活性三个方面测定结果阳性，根据保健食品增强免疫力功能评价标准，本胶囊制剂(采用实施例1的研究配方2、3、4组)均具有 增强免疫力的功能。
本发明的用于提高免疫力防治“三高”的保健物或药物组合物，能够提高免疫力防治“三高”，其优点为：(1)所用原料均为传统的药食同源、有悠久食补历史的传统中药，安全无毒副作用，达到气血双补的提高免疫力，防治三高”的目的；(2)虫草、灵芝、黄芪为经典增强免疫力的配方，其主要机理为多糖和腺苷类物质对人体具有很好的增强免疫力作用，配与原花青素，他们是通过清除体内的自由基、免除或减少自由基对免疫系统的损害来实现增强免疫力的。这样，本配方从多个途径和多个机理增强机体免疫，配方合理。
综上，本发明的用于提高免疫力防治“三高”的保健物或药物组合物设计巧妙独特，组分间相互携同，生物利用率高，能提高免疫力防治“三高”，且可制成复方制剂，无毒副作用，适于大规模推广应用。
在此说明书中，本发明已参照其特定的实施例作了描述。但是，很显然仍可以作出各种修改和变换而不背离本发明的精神和范围。因此，说明书应被认为是说明性的而非限制性的。
Claims (4)
1.一种用于提高免疫力防治“三高”的保健物或药物组合物，其特征在于，由下述重量份数的原料组成：30～50重量份的蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉，20～30重量份的黄芪提取物，10～30重量份的灵芝子实体提取物和5～20重量份的葡萄籽提取物。
2.根据权利要求1所述的用于提高免疫力防治“三高”的保健物或药物组合物，其特征在于，所述蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉为35～40重量份，所述黄芪提取物为20～25重量份，所述灵芝子实体提取物为15～25重量份和所述葡萄籽提取物为5～10重量份。
3.根据权利要求1所述的用于提高免疫力防治“三高”的保健物或药物组合物，其特征在于，所述蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉为40重量份，所述黄芪提取物为25重量份，所述灵芝子实体提取物为25重量份和所述葡萄籽提取物为10重量份。
4.根据权利要求1所述的用于提高免疫力防治“三高”的保健物或药物组合物在制备提高免疫力防治“三高”的保健品或药品中的应用。
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