CN102106291B - 一种适用于中国南方地区的无特定病原凡纳滨对虾苗种的培育方法 - Google Patents

一种适用于中国南方地区的无特定病原凡纳滨对虾苗种的培育方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种适用于中国南方地区的无特定病原凡纳滨对虾苗种的培育方法，包括：(1)土池培养轮虫的纯化，杀灭病毒、细菌和营养强化；(2)以轮虫为主要饵料的无特定病原凡纳滨对虾苗种培育工艺。本发明的培育方法解决了目前培育中出现的成活率低，易被病毒污染等问题，使培育的虾苗不受白斑病毒的感染，虾苗个体大小均匀、健壮、逆水游泳力强，腹节肌肉饱满、透明、外观清亮，且能达到95％以上的存活率。

Description

一种适用于中国南方地区的无特定病原凡纳滨对虾苗种的培育方法
技术领域
本发明属凡纳滨对虾苗种的培育养殖领域，特别是涉及一种适用于中国南方地区的无特定病原凡纳滨对虾苗种的培育方法。
背景技术
凡纳滨对虾(俗名南美白对虾)是国外引进的人工选育品种，目前已成为我国主要对虾养殖品种。如何保持凡纳滨对虾“无特定病原”(简称SPF)和生长迅速的良种优势，已成为业界关注的热点。
我国现行凡纳滨对虾苗种生产一般多在具有增氧、加温条件的室内20m3水泥池中进行，育苗方式主要采用全程投喂虾片、螺旋藻粉等人工配制饲料，糠虾阶段少量搭配用高温水烫昏迷的卤虫无节幼体，仔虾阶段适量投喂活体卤虫无节幼体，有条件的苗场在育苗早期适当添加骨条藻、角毛藻等单细胞藻类，以弥补人工饲料中维生素、消化酶等活性物质的不足。此种育苗方式的优点是育苗用饵料全部为商品饲料，来源不受气候条件影响，使用方便；缺点是用此种方式培育的虾苗苗体细长、体质相对较弱，对温度、盐度等环境因子突变的应激能力弱；此外，由于上述人工饲料投喂前需用150～300目筛网在水中搓洗，颗粒非常小，用肉眼很难判断所投饲料是否完全被虾苗摄食，如无节幼体质量差或放养密度低，会由于苗池水体中残饵过多而导致水质恶化、引发病菌和聚缩虫等附着性原生动物大量繁殖，使虾苗质量下降甚至育苗生产失败。
优质、健康的虾苗是养虾成功的基础。我国南方沿海各级凡纳滨对虾良种场承担着引种、保种、向周边苗场提供无节幼体和向养殖业者提供优质虾苗的任务，因此，留种用亲虾的质量将直接影响产业的可持续发展和良种场的市场竞争力。据初步调查、了解，目前国内凡纳滨对虾良种场作为保种亲虾培育的虾苗大多采用上述育苗方式生产，由此引发的虾苗质量的不确定性，容易成为亲虾培育过程中的隐患。
轮虫是水产界公认的鱼、虾、蟹幼苗阶段的优质生物饵料，二十世纪80年代曾被广泛应用于中国对虾的苗种培育，具有较好的饵料效果。但要将轮虫应用于无特定病原凡纳滨对虾优质苗种培育，需要解决由于轮虫培养方式和虾苗育苗温度不同而产生的各类问题。
在对现有文献的分析中，尚未发现在虾苗生产全过程使用轮虫培育无特定病原凡纳滨虾苗的方法的报道。
发明内容
本发明提供了一种适用于中国南方地区的无特定病原凡纳滨对虾苗种的培育方法，该培育方法解决了目前培育中出现的成活率低，易被病毒污染等问题，使培育的亲虾不受白斑病毒的感染，且能达到95％以上的存活率。
本发明的一种适用于中国南方地区的无特定病原凡纳滨对虾苗种的培育方法，包括：
1.土池培养轮虫的纯化，杀灭病毒、细菌和营养强化
(1)轮虫纯化
轮虫的纯化处理在水泥池或玻璃钢水槽中进行，池内按1个/m2设置充气石，容器规格根据轮虫数量而定，水位30cm以上为宜，轮虫进场后按200个/ml培养密度放入池内，为防止轮虫采收时池内沉淀物进入采收网袋，放养轮虫应尽可能远离排水口；
处理步骤为：微充气条件下放置4小时；在池底排水口用300目采收网袋采收悬浮于上层的轮虫，100目筛网过滤，用300目筛网收集通过100目筛网网孔的轮虫，用洁净海水淋洗轮虫，根据轮虫纯度情况决定是否进行二次沉淀；
(2)桡足类、病毒、细菌、真菌的杀灭处理
轮虫进入纯化消毒池后，按所示浓度加入以下药物：
纯度90％的晶体敌百虫1g/m3：杀灭混杂在轮虫中的桡足类；
聚维酮碘10ml/m3：杀灭对虾白斑病毒和革兰氏阳性菌(金黄色葡萄球菌等)；
氟苯尼考2g/m3：杀灭革兰氏阴性菌(弧菌)；
氟乐灵0.05ml/m3：杀灭真菌；
上述药物使用时须分别溶解投入，其中，氟乐灵、聚维酮碘、敌百虫分别用淡水溶解、混匀后全池泼洒，氟苯尼考需用300目筛网在淡水中搓洗过滤后全池泼洒；药物处理时间与沉淀时间相同，均为24小时；
(3)营养强化
南方土池培养轮虫以投喂发酵鱼浆为主，北方则主要采用施肥繁殖藻类的方式；
在轮虫的营养组成上表现为前者欠缺海水动物苗种发育所必须的ω3系列高度不饱和脂肪酸，必须在投喂前进行营养强化，可供选择的轮虫营养强化材料有海水小球藻、鱼苗用液体营养强化剂、淡水小球藻粉等；其中海水小球藻营养强化效果最佳，用量为轮虫培养水体的15％(小球藻浓度2×107个/ml)可在轮虫入池时一并加入；也可使用替代材料；
方法是在轮虫进入消毒纯化池当天傍晚按池内有效水体投喂0.5g/m3用300目筛网搓洗的淡水小球藻粉和5ml/m3鱼苗用营养强化剂，营养强化时间为6小时以上；
2.以轮虫为主要饵料的无特定病原凡纳滨对虾苗种培育工艺
(1)培养设施
以亲虾留种为目的的苗种生产选择15m2常规育苗池，以育种研究为目的苗种培育选择在苗池内放置100L水体培育容器，采用苗池加盖薄膜和苗池内注水水浴的方法保持育苗容器内温度恒定在30-32℃；
(2)海水和育苗器具的消毒处理
海水预处理：苗种培育前一周用棉花、过滤袋双层过滤沙滤海水，用50ml/m3次氯酸钠消毒海水，曝气2小时后暗沉淀备用；
苗池或育苗器的消毒：育苗池、育苗容器及育苗器具须用200mg/L漂白粉溶液洗刷、浸泡消毒24小时待用；苗种培育前48小时将预处理海水经250目筛网过滤后抽取至苗池或育苗容器，用20ml/m3甲醛二次消毒；正式育苗前用50mg/L高锰酸钾溶液消毒；
(3)虾苗培育
a.无节幼体放养密度
本发明以种质研究为目的，育苗所用无节幼体为进口无特定病原凡纳滨对虾亲虾在0.5m3玻璃钢水槽中单尾产卵孵化所得，不同亲虾获得的幼体数量不尽相同，有效水体100L塑料桶内无节幼体的放养量0.8～3×104；
b.培育环境
水温：溞状幼体阶段29～31℃；糠虾幼体阶段30.5～32℃；仔虾阶段32～31℃；
溶解氧：5mg/L以上；充气量随虾苗生长发育而逐渐增大；
盐度：30～32，仔虾第五天后逐渐添加淡水，降低培育盐度，盐度日降幅控制在5‰以内，淡化下限根据养殖池盐度而定，最低下限为16‰；
光照：全黑暗；
水体环境：虾苗生长至仔虾前，苗池采取每天添加1～2％水量的方式，不换水，仔虾阶段后开始换水，换水量增至5％；
c.饵料投喂
溞状一期幼体以质量比5∶2∶1∶1∶1的比例投喂由虾片、螺旋藻粉、车元、黑粒、人工轮虫(BP)组成的人工饲料，6次/天，每次0.6g/m3，并视虾苗摄食情况调整；溞状二期幼体至糠虾二期幼体阶段调整为以轮虫为主要饵料，人工饲料仅每天早上投喂一次，投喂量1.2～2.5g/m3，轮虫密度维持在10～15个/ml，每天上下午各补充调整一次；糠虾二期幼体后补充投喂卤虫无节幼体，密度2～3个/ml，每天2次，投喂量根据虾苗摄食情况而定；
(4)有益微生物
苗种培育期间，通过在育苗水体内添加由乳酸菌、枯草杆菌、酵母菌等复合菌株组成的EM菌(海南创新药业有限公司生产)的方式改善育苗水质，EM菌的添加量为10ml/m3，每天一次；
(5)病害防治
在虾苗由溞状三期幼体变态为糠虾幼体时，放养密度0.8×104/m3的培育桶观察到部分幼体附肢上粘有脏物，采取将培育水温由30.5℃提升至31℃和投放高锰酸钾(0.3g/m3)的措施，虾苗即顺利蜕壳，变态为糠虾。
与人工饲料育苗方式相比，本发明在进行以无特定病原凡纳滨对虾种质研究为目的的虾苗培育的同时，进行了两种培育方式不同虾苗培育密度的效果试验，结果表明：
1.小水体培育条件下，虾苗放养密度低于1×104/m3，以轮虫为主要饵料的育苗方式的虾苗培育成功率为100％，人工饲料育苗方式的育苗成功率为30％；
2.虾苗培育密度3×104/m3条件下，投喂轮虫组由于人工饲料投喂量减少80％，加上轮虫的滤食作用，育苗水体内有机物含量明显减少，育苗水质得到明显改善；
3.采用本发明方法培育虾苗，四个试验组全部成功，虾苗由无节幼体～仔虾第5天的培育成活率为65～75％，平均成活率71％；三个对照组中仅放养密度3×104/m3组育苗成功，成活率60％，其余2组全部在溞状幼体变态为糠虾时夭折。实验组虾苗个体大小均匀、健壮、逆水游泳力强，腹节肌肉饱满、透明、外观清亮；
4.虾苗抽样病毒检测，未检测到白斑病病毒；此批虾苗经过9个月的室内养殖，亲虾体长、体重全部达到进口亲虾标准，养殖成活率95％。期间多次检测均未发现病毒感染。
有益效果
本发明的培育方法解决了目前培育中出现的成活率低，易被病毒污染等问题，使培育的亲虾不受白斑病毒的感染，且能达到95％以上的存活率。
具体实施方式
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明讲授的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
实施例1
1.土池培养轮虫的纯化，杀灭病毒、细菌和营养强化
(1)轮虫纯化
轮虫的纯化处理在水泥池或玻璃钢水槽中进行，池内按1个/m2设置充气石，容器规格根据轮虫数量而定，水位30cm以上为宜，轮虫进场后按200个/ml培养密度放入池内，为防止轮虫采收时池内沉淀物进入采收网袋，放养轮虫应尽可能远离排水口；
处理步骤为：微充气条件下放置4小时；在池底排水口用300目采收网袋采收悬浮于上层的轮虫，100目筛网过滤，用300目筛网收集通过100目筛网网孔的轮虫，用洁净海水淋洗轮虫，根据轮虫纯度情况决定是否进行二次沉淀；
(2)桡足类、病毒、细菌、真菌的杀灭处理
轮虫进入纯化消毒池后，按所示浓度加入以下药物：
纯度90％的晶体敌百虫1g/m3：杀灭混杂在轮虫中的桡足类；
聚维酮碘10ml/m3：杀灭对虾白斑病毒和革兰氏阳性菌(金黄色葡萄球菌等)；
氟苯尼考2g/m3：杀灭革兰氏阴性菌(弧菌)；
氟乐灵0.05ml/m3：杀灭真菌；
上述药物使用时须分别溶解投入，其中，氟乐灵、聚维酮碘、敌百虫分别用淡水溶解、混匀后全池泼洒，氟苯尼考需用300目筛网在淡水中搓洗过滤后全池泼洒；药物处理时间与沉淀时间相同，均为24小时；
(3)营养强化
南方土池培养轮虫以投喂发酵鱼浆为主，北方则主要采用施肥繁殖藻类的方式；
在轮虫的营养组成上表现为前者欠缺海水动物苗种发育所必须的n-3系列高度不饱和脂肪酸，必须在投喂前进行营养强化，可供选择的轮虫营养强化材料有海水小球藻、鱼苗用液体营养强化剂、淡水小球藻粉等；其中海水小球藻营养强化效果最佳，用量为轮虫培养水体的15％(小球藻浓度2×107个/ml)可在轮虫入池时一并加入；也可使用替代材料；
方法是在轮虫进入消毒纯化池当天傍晚按池内有效水体投喂0.5g/m3用300目筛网搓洗的淡水小球藻粉和5ml/m3鱼苗用营养强化剂，营养强化时间为6小时以上；
2.以轮虫为主要饵料的无特定病原凡纳滨对虾苗种培育工艺
(1)培育装置的准备
将深1.5m的室内水泥池彻底消毒，并放入0.8m深的消毒海水用于保温；将容积100升水体的白色塑料桶作为培育容器，经次氯酸钠消毒后放入室内水泥池；在水泥池上加盖薄膜用于保温；往白色塑料桶中注入约80升消毒海水，每个桶配一个消毒过的气头；
(2)凡纳滨对虾幼苗的繁育
将产卵、孵化获得的无节幼体放入塑料桶中，每桶约放入0.8～3×104尾的无节幼体；
溞状一期幼体以质量比5∶2∶1∶1∶1的比例投喂由虾片、螺旋藻粉、车元、黑粒、人工轮虫(BP)组成的人工饲料，6次/天，每次0.6g/m3，并视虾苗摄食情况调整；溞状二期幼体至糠虾二期幼体阶段调整为以轮虫为主要饵料，人工饲料仅每天早上投喂一次，投喂量1.2～2.5g/m3，轮虫密度维持在10～15个/ml，每天上下午各补充调整一次；糠虾二期幼体后补充投喂卤虫无节幼体，密度2～3个/ml。
监控水温保持在30～32℃；在虾苗由溞状三期幼体变态为糠虾幼体时，放养密度0.8×104/m3的培育桶观察到部分幼体附肢上粘有脏物，采取将培育水温由30.5℃提升至31℃和投放高锰酸钾(0.3g/m3)的措施，虾苗即顺利蜕壳，变态为糠虾。
实施例2
凡纳滨对虾虾苗的适应性
1.实际测定虾苗由无节幼体至仔虾的培育周期，与生产性育苗基本相同(9天左右)。
2.测定采用此种方法培育的虾苗对盐度的适应性，成活率高出常规方法培育的虾苗。
3.测定采用此种方法培育的虾苗对温度的适应性，成活率高出常规方法培育的虾苗。
实施例3
凡纳滨对虾虾苗的养成与检测
1.此方法培育的虾苗经过9个月的室内养殖，成活率95％以上。
2.经形态观察，亲虾体色晶莹透亮、体表光洁、活力强；雌、雄亲虾体长分别达到16cm和15cm、体重达到60g和50g；性腺发育良好。
3.病毒抽样检测，未检测到白斑病毒。
经空运测试，运输成活率98％。

Claims (2)

1.一种适用于中国南方地区的无特定病原凡纳滨对虾苗种的培育方法，包括：
(一)土池培养轮虫的纯化，杀灭病毒、细菌和营养强化
(1)轮虫纯化
轮虫的纯化处理在水泥池或玻璃钢水槽中进行，池内按1个/m2设置充气石，容器规格根据轮虫数量而定，水位30cm以上，轮虫进场后按200个/ml培养密度放入池内；
处理步骤为：微充气条件下放置4小时；在池底排水口用300目采收网袋采收悬浮于上层的轮虫，100目筛网过滤，用300目筛网收集通过100目筛网网孔的轮虫，用洁净海水淋洗轮虫；
(2)桡足类、病毒、细菌、真菌的杀灭处理
轮虫进入纯化消毒池后，按所示浓度加入以下药物：纯度90wt％的晶体敌百虫1g/m3，聚维酮碘10ml/m3，氟苯尼考2g/m3，氟乐灵0.05ml/m3；
上述药物使用时分别溶解投入，其中氟乐灵、聚维酮碘、敌百虫分别用淡水溶解，混匀后全池泼洒；氟苯尼考需用300目筛网在淡水中搓洗过滤后全池泼洒；药物处理时间与沉淀时间相同，均为24小时；
(3)营养强化
南方土池培养轮虫以投喂发酵鱼浆为主，北方则主要采用施肥繁殖藻类的方式；
南方培养轮虫在投喂前进行营养强化，营养强化材料选自海水小球藻、鱼苗用液体营养强化剂、淡水小球藻粉中的一种或几种；营养强化在轮虫入池后当天下午进行，营养强化6小时以上即可投喂虾苗；
(二)以轮虫为主要饵料的无特定病原凡纳滨对虾苗种培育工艺
(1)培养设施
以育种研究为目的苗种培育选择在苗池内放置100L水体培育容器，采用苗池加盖薄膜和苗池内注水水浴的方法保持育苗容器内温度恒定在30-32℃；
(2)海水和育苗器具的消毒处理
海水预处理：苗种培育前一周用棉花、过滤袋双层过滤沙滤海水，用50ml/m3次氯酸钠消毒海水，曝气2小时后暗沉淀备用；
苗池或育苗器的消毒：育苗池、育苗容器及育苗器具用200mg/L漂白粉溶液洗刷、浸泡消毒24小时待用；苗种培育前48小时将预处理海水经250目筛网过滤后抽取至苗池或育苗容器，用20ml/m3甲醛二次消毒；正式育苗前用50mg/L高锰酸钾溶液消毒；
(3)虾苗培育
a.无节幼体放养密度
育苗所用无节幼体为进口无特定病原凡纳滨对虾亲虾在0.5m3玻璃钢水槽中单尾产卵孵化所得，有效水体100L塑料桶内无节幼体的放养量0.8～3×104；
b.培育环境
水温：溞状幼体阶段29～31℃；糠虾幼体阶段30.5～32℃；仔虾阶段32～31℃；
溶解氧：5mg/L以上；充气量随虾苗生长发育而逐渐增大；
盐度：30～32，仔虾第五天后逐渐添加淡水，降低培育盐度，盐度日降幅控制在5‰以内，淡化下限根据养殖池盐度而定，最低下限为16‰；
光照：全黑暗；
水体环境：虾苗生长至仔虾前，苗池采取每天添加1～2％水量的方式，不换水，仔虾阶段后开始换水，换水量增至5％；
c.饵料投喂
溞状一期幼体以质量比5∶2∶1∶1∶1的比例投喂由虾片、螺旋藻粉、车元、黑粒、人工轮虫组成的人工饲料，6次/天，每次0.6g/m3，并视虾苗摄食情况调整；
溞状二期幼体至糠虾二期幼体阶段调整为以轮虫为主要饵料，人工饲料每天早上投喂一次，投喂量1.2～2.5g/m3，轮虫密度维持在10～15个/ml，每天上下午各补充调整一次；
糠虾二期幼体后补充投喂卤虫无节幼体，密度2～3个/ml，每天2次，投喂量根据虾苗摄食情况而定；
(4)有益微生物
苗种培育期间，通过在育苗水体内添加EM菌的方式改善育苗水质，EM菌的添加量为10ml/m3，每天一次；
(5)病害防治
在虾苗由溞状三期幼体变态为糠虾幼体时，放养密度0.8×104/m3的培育桶观察到部分幼体附肢上粘有脏物，采取将培育水温由30.5℃提升至31℃和投放0.3g/m3高锰酸钾的措施，虾苗即顺利蜕壳，变态为糠虾。
2.根据权利要求1所述的一种适用于中国南方地区的无特定病原凡纳滨对虾苗种的培育方法，其特征在于：所述步骤(一)/(3)中营养强化的投喂方法为：在轮虫进入消毒纯化池当天傍晚按池内有效水体投喂0.5g/m3用300目筛网搓洗的淡水小球藻粉和5ml/m3鱼苗用营养强化剂，营养强化时间为6小时以上；或海水小球藻的用量为轮虫培养水体的15％，小球藻浓度2×107个/ml，在轮虫入池时一并加入，营养强化时间为6小时以上。
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CN101569291A (zh) * 2008-04-30 2009-11-04 中国科学院海洋研究所 一种凡纳滨对虾的育苗方法

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