CN102088866A - 可溶性卡诺拉蛋白质分离物的生产 - Google Patents

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Abstract

提供卡诺拉蛋白质分离物,其既包含白蛋白又包含球蛋白蛋白质级分,其在酸性含水环境中是可溶且透明的。该卡诺拉蛋白质分离物完全可溶于低pH的水中,植酸含量低,并且可用于供人类食用的产品、宠物食物和水产养殖。

Description

可溶性卡诺拉蛋白质分离物的生产
本申请根据35 USC 119 (e)要求2008年7月11日提交的US临时专利申请No.61/129,673的优先权。
发明领域
本发明涉及新型卡诺拉(canola)蛋白质分离物的生产。
背景技术
蛋白质含量为至少100重量%(Nx6.25)的卡诺拉油籽蛋白质分离物可以从油籽粗粉,通过下面的均转让给这里的受让人的文献中所述的方法来形成:2002年5月3日提交的共同未决的US专利申请No.10/137391(US专利申请公开No.2003-0125526A1和WO02/089597)和2004年6月9日提交的US专利申请No.10/476230(US专利申请公开No.2004-0254353A1),并且其公开内容在此引入作为参考。所述工序包括多步方法,包括:使用盐的含水溶液提取卡诺拉油籽粗粉,从残留的油籽粗粉中分离所得到的蛋白质含水溶液,通过使用选择性膜技术来保持离子强度基本恒定的同时将该含水溶液的蛋白质浓度提高到至少大约200g/L,将所得到的浓缩蛋白质溶液稀释到冷水中,以引起蛋白质胶束的形成,使该蛋白质胶束沉降来形成无定形的,发粘的,凝胶状的类似面筋(gluten)的蛋白质胶束物质(PMM),和从蛋白质含量为至少大约100重量%(Nx6.25)的上清液中回收该蛋白质胶束物质。如文中使用的,蛋白质含量是基于干重来测量的。回收的PMM可以被干燥。
在所述方法的一种实施方案中,对来自PMM沉降步骤的上清液进行加工,来从该上清液中回收卡诺拉蛋白质分离物。该工序可以如下来进行:最初使用超滤膜浓缩该上清液,并且干燥该浓缩物。所得到的卡诺拉蛋白质分离物的蛋白质含量为至少大约90重量%,优选至少大约100重量%(Nx6.25)。
US专利申请No.10/137391中所述的方法基本是分批方法,在2002年11月19日提交的共同待决US专利申请No.10/298678(US专利申请公开No.2004-0039174A1和WO03/043439)以及2005年3月15日提交的US专利申请No. 10/496071(US专利申请公开No. 2007-0015910) 中(二者均转让给这里的受让人,并且其公开内容在此引入作为参考),描述了一种用于制备卡诺拉蛋白质分离物的连续方法。根据其内容,将卡诺拉油籽粗粉与盐的含水溶液连续混合,将该混合物通过管道传送,同时从卡诺拉油籽粗粉中提取蛋白质,来形成蛋白质含水溶液,将该蛋白质含水溶液通过选择性膜操作连续传送,来将该蛋白质含水溶液的蛋白质含量提高到至少大约50g/L,同时保持离子强度基本恒定,将所得到的浓缩蛋白质溶液与冷水连续混合,来引起蛋白质胶束的形成,并且使得该蛋白质胶束连续沉降,同时使上清液连续溢流,直到在沉降容器中已经积累了期望量的PMM为止。PMM从沉降容器中回收,并且可以干燥。该PMM的蛋白质含量是至少大约90重量%(Nx6.25),优选至少大约100重量%。溢流的上清液可以加工,来从其中回收卡诺拉蛋白质分离物,如上所述。
已知的是卡诺拉籽包含大约10 重量%-大约30重量%的蛋白质,并且已经确认了几种不同的蛋白质成分。这些蛋白质包括12S球蛋白(也称作十字花科蛋白),7S蛋白质和2S贮藏蛋白(已知为napin)。如同下面的文献中所述,上述的工序包括将浓缩的蛋白质含水溶液进行稀释,来形成PMM,并且加工上清液来回收另外的蛋白质,导致不同蛋白质谱的分离物的回收:2003年4月15日提交的共同待决US专利申请No.10/413371(US专利申请公开No.2004-0034200和WO03/088760)和2005年4月29日提交的US专利申请No.10/510766(US专利申请公开No.2005-0249828),转让给这里的受让人,并且其公开内容在此引入作为参考。
在这方面,PMM来源的卡诺拉蛋白质分离物具有下面的蛋白质成分含量:大约60 重量%-大约98重量%的7S蛋白质,大约1 重量%-大约15重量%的12S蛋白质和0-大约25重量%的2S蛋白质。该上清液来源的卡诺拉蛋白质分离物具有下面的蛋白质成分含量:大约60 重量%-大约95重量%的2S蛋白质,大约5 重量%-大约40重量%的7S蛋白质和0-大约5重量%的12S蛋白质。因此,该PMM来源的卡诺拉蛋白质分离物主要是7S蛋白质,该上清液来源的卡诺拉蛋白质分离物主要是2S蛋白质。如前述的US专利申请No.10/413371和10/510766中所述,该2S蛋白质的分子量是大约14000道尔顿,7S蛋白质的分子量是大约145000道尔顿,12S蛋白质的分子量是大约290000道尔顿。
如2005年1月21日提交的共同未决的美国专利申请No.11/038086(WO 2005/067729)和2008年6月20日提交的12/213500(美国专利申请公开2008/0299282)(转让给此处的受让人并且其公开内容引入本文作为参考)所述,该上清液来源的卡诺拉蛋白质分离物可以被处理以提供具有与该上清液来源的卡诺拉蛋白质分离物所不具有的性能的形式,该性能包括在宽泛的pH值的溶解性和在含水介质中的透明性。这些性能保证该被处理的上清液来源的卡诺拉蛋白质分离物被利用以提供强化卡诺拉蛋白质的饮料,特别是在酸性pH值。
卡诺拉(canola)也称作油菜籽(rapeseed)或者油籽油菜(oil seed rape)。
发明内容
我们现在已经发现生产既包含白蛋白又包含球蛋白蛋白质级分的卡诺拉蛋白质分离物的方法,该卡诺拉蛋白质分离物在酸性含水环境中是可溶的和透明的,同时保留以上所述程序的温和加工条件但是不沉淀蛋白质胶束物质(micellular mass)。所得的卡诺拉蛋白质分离物不仅仅完全可溶于在低 pH的水中,而且植酸含量低,并且可用于供人类食用的产品、宠物食品和水产养殖。
根据本发明的一个方面,提供了生产卡诺拉蛋白质分离物的方法,该卡诺拉蛋白质分离物具有的卡诺拉蛋白质含量为至少约90重量%(N x 6.25)d.b.,优选地至少约100重量%,其包括:
(a)在至少约5℃的温度提取卡诺拉籽粗粉以引起来自该粗粉的卡诺拉蛋白质的增溶且形成具有的蛋白质含量为约5至约40 g/L和pH为约5至约6.8的蛋白质含水溶液,
(b)从该用过的油籽粗粉分离出该蛋白质含水溶液,
(c)通过使用选择性膜技术在保持离子强度基本上恒定的同时增加该蛋白质含水溶液的蛋白质浓度至约50-约250 g/L,以提供第一浓缩的蛋白质溶液;
(d)任选地渗滤该第一浓缩的蛋白质溶液,
(e)添加钙盐溶液到该第一浓缩的蛋白质溶液至电导率为约15至约25 mS以引起沉淀物在该第一浓缩的蛋白质溶液中形成,
(f)从该第一浓缩的蛋白质溶液除去该沉淀物,
(g)用约2至约20份,优选地约10至约15份,更优选约10份体积的温度为约2℃至约90℃,优选地约10℃至约50℃,更优选约20℃至约30℃的水稀释该澄清的第一浓缩的蛋白质溶液,
(h)酸化所得的溶液至pH为约2.5至约4.0以产生酸化的透明蛋白质溶液,
(i)使用选择性膜技术在保持通过保持离子强度基本上恒定的同时增加该酸化的透明蛋白质溶液的浓度至约50-约250 g/L以提供第二浓缩的蛋白质溶液,
(j)任选地渗滤该第二浓缩的蛋白质溶液,和
(k)任选地干燥该第二浓缩的蛋白质溶液以提供具有至少约90重量% (N x 6.25) d.b.,优选地至少约100重量% d.b.的蛋白质含量的卡诺拉蛋白质分离物。
可以根据本发明采用该程序的许多变化以产生既包括白蛋白又包括球蛋白级分的在酸性含水环境中可溶且透明的卡诺拉蛋白质分离物。
在一个此类变化中,在从该油籽粗粉中分离出之后并且在浓缩该溶液之前,可以添加氯化钙到该蛋白质含水溶液。添加氯化钙之后,除去在该步骤中形成的沉淀物。
所得的卡诺拉蛋白质含水溶液可以通过如下步骤进一步加工:浓缩,稀释,pH调整,进一步浓缩和干燥,如上所述。
因此,在本发明的另一方面中,提供了生产具有至少约90重量% (N x 6.25) d.b.的卡诺拉蛋白质含量的卡诺拉蛋白质分离物的方法,其包括:
(a)在至少约5℃的温度提取卡诺拉油籽粗粉以引起来自该粗粉的卡诺拉蛋白质的增溶且形成具有的蛋白质含量为约5至约40 g/L和pH为约5至约6.8的卡诺拉蛋白质含水溶液,
(b)从该油籽粗粉分离出该卡诺拉蛋白质含水溶液,
(c)添加钙盐溶液到该蛋白质含水溶液至电导率为约15至约25 mS,优选地约17至约20 mS,以引起沉淀物在该卡诺拉蛋白质溶液中形成,
(d)从该卡诺拉蛋白质含水溶液除去该沉淀物,
(e)通过使用选择性膜技术在保持离子强度基本上恒定的同时增加该蛋白质含水溶液的蛋白质浓度至约50-约250 g/L,以提供浓缩的蛋白质溶液;
(f)任选地渗滤该浓缩的蛋白质溶液,
(g)用约2至约20,优选地约10至约15份体积的温度为约2℃至约90℃的水稀释该浓缩的蛋白质溶液,
(h)酸化所得的溶液至pH为约2.5至约4.0,优选地约 3至约3.5,以产生酸化的透明蛋白质溶液,
(i)通过使用选择性膜技术在保持离子强度基本上恒定的同时增加该酸化的透明蛋白质溶液的浓度至约50-约250 g/L以提供第二浓缩的蛋白质溶液,
(j)任选地渗滤该第二浓缩蛋白质溶液,和
(k)任选地干燥该第二浓缩的蛋白质溶液以形成具有至少约90重量%(N x 6.25) d.b.的蛋白质含量的卡诺拉蛋白质分离物。
或者,所得的卡诺拉蛋白质含水溶液可以被稀释以降低电导率,如通过2份体积的水稀释,然后用HCl调节pH。所得的溶液可被浓缩和渗滤以进一步降低电导率,产生透明的低pH溶液以备干燥。
根据本发明的额外的方面,提供了生产具有至少约90重量% (N x 6.25) d.b.的卡诺拉蛋白质含量的卡诺拉蛋白质分离物的方法,其包括:
(a)在至少约5℃的温度提取卡诺拉油籽粗粉以引起来自该粗粉的卡诺拉蛋白质的增溶且形成具有的蛋白质含量为约5至约40 g/L和pH为约5至约6.8的卡诺拉蛋白质含水溶液,
(b)从该油籽粗粉分离出该卡诺拉蛋白质含水溶液,
(c)添加钙盐溶液到该蛋白质含水溶液至电导率为约15至约25 mS,优选地约17至约20 mS,以引起沉淀物在该卡诺拉蛋白质含水溶液中形成,
(d)从该卡诺拉蛋白质含水溶液除去该沉淀物,
(e)用约0.5至约10份体积的温度为约2℃至约90℃的水稀释该卡诺拉蛋白质含水溶液,
(f)酸化所得的含水溶液至pH为约2.5至约4.0,优选地至约3至约3.5,以产生酸化的透明蛋白质溶液,
(g)通过使用选择性膜技术在保持离子强度基本上恒定的同时增加该酸化的透明蛋白质溶液的浓度至约50-约250 g/L以提供浓缩的蛋白质溶液,
(h)任选地渗滤该浓缩的蛋白质溶液,和
(i)任选地干燥该浓缩的蛋白质溶液以提供具有至少约90重量%(N x 6.25) d.b.的蛋白质含量的卡诺拉蛋白质分离物。
在另一种此变化中,氯化钙可以加入部分浓缩的卡诺拉蛋白质溶液且所得的沉淀物从该部分浓缩的卡诺拉蛋白质溶液除去。该澄清的溶液然后可以放回膜系统上用于最终浓缩,然后稀释,pH调整,进一步浓缩和干燥步骤,如上述。
根据本发明的进一步的方面,提供了生产具有的卡诺拉蛋白质含量为至少约90重量% (N x 6.25) d.b.的卡诺拉蛋白质分离物的方法,其包括:
(a)在至少约5℃的温度提取卡诺拉油籽粗粉以引起在该粗粉中的卡诺拉蛋白质的增溶和形成具有的蛋白质含量为约5至约40 g/L和pH为约5至约6.8的蛋白质含水溶液,
(b)从该用过的油籽粗粉分离出该蛋白质含水溶液,
(c)通过使用选择性膜技术在保持离子强度基本上恒定的同时增加该蛋白质含水溶液的蛋白质浓度至约50g/L或更少以提供部分浓缩的蛋白质溶液,
(d)添加钙盐溶液到该部分浓缩的蛋白质溶液至电导率为约15至约25 mS,优选地约17至约20 mS,以引起沉淀物在该部分浓缩的蛋白质溶液中形成,
(e)从该部分浓缩的蛋白质溶液除去该沉淀物,
(f)通过使用选择性膜技术在保持离子强度基本上恒定的同时进一步增加该部分浓缩的蛋白质溶液的蛋白质浓度至约50-约250 g/L以提供浓缩的蛋白质溶液,
(g)任选地渗滤该浓缩的蛋白质溶液,
(h)用约2至约20份体积的温度为约2℃至约90℃的水稀释该浓缩的蛋白质溶液,
(i)酸化所得的溶液至pH为约2.5至约4.0,优选地约3至约3.5,以产生酸化的透明蛋白质溶液,
(j)通过使用选择性膜技术在保持离子强度基本上恒定的同时增加该酸化的透明蛋白质溶液的浓度至约50-约250 g/L以提供第二浓缩的蛋白质溶液,
(k)任选地渗滤该第二浓缩的蛋白质溶液,和
(l)任选地干燥该第二浓缩的蛋白质溶液以提供具有至少约90重量%(N x 6.25) d.b.的蛋白质含量的卡诺拉蛋白质分离物。
或者,该澄清的部分浓缩的卡诺拉蛋白质溶液可以被充分稀释以降低电导率,调节pH然后浓缩和渗滤,之后干燥。
因此,在本发明的进一步的方面中,提供了产生具有至少约90重量%(N x 6.25) d.b.的蛋白质含量的卡诺拉蛋白质分离物的方法,其包括:
(a)在至少约5℃的温度提取卡诺拉油籽粗粉以引起来自该粗粉的卡诺拉蛋白质的增溶和形成具有的蛋白质含量为约5至约40 g/L和pH为约5至约6.8的蛋白质含水溶液,
(b)从该用过的油籽粗粉分离出该蛋白质含水溶液,
(c)通过使用选择性膜技术在保持离子强度基本上恒定的同时增加该蛋白质含水溶液的蛋白质浓度至约50g/L或更少以提供部分浓缩的蛋白质溶液,
(d)添加钙盐溶液到该浓缩的蛋白质溶液至电导率为约15至约25 mS,优选地约17至约20 mS,以引起沉淀物在该部分浓缩的蛋白质溶液中形成,
(e)从该部分浓缩的蛋白质溶液除去该沉淀物,
(f)用约0.5至约20份体积的温度为约2℃至约90℃的水稀释该浓缩的蛋白质溶液,
(g)酸化所得的溶液至pH为约2.5至约4.0,优选地约3至约3.5,以产生酸化的透明蛋白质溶液,
(h)通过使用选择性膜技术在保持离子强度基本上恒定的同时增加该酸化的卡诺拉蛋白质溶液的蛋白质浓度至约50-约250 g/L以提供浓缩的蛋白质溶液,
(i)任选地渗滤该浓缩的蛋白质溶液,和
(j)任选地干燥该浓缩的蛋白质溶液以提供具有至少约90重量%(N x 6.25) d.b.的蛋白质含量的卡诺拉蛋白质分离物。
在额外的此类变体中,氯化钙含水溶液可被用作卡诺拉蛋白质提取盐以从该油籽粗粉提取卡诺拉蛋白质,其产生随该用过的粗粉除去的植酸盐。如此产生的该卡诺拉蛋白质溶液可以用充足体积的水充分地稀释以降低电导率,然后调节pH,之后浓缩且干燥。
根据本发明的另一方面,提供了产生具有至少约90重量% (N x 6.25) d.b.的卡诺拉蛋白质含量的卡诺拉蛋白质分离物的方法,其包括:
(a)用优选地浓度小于约1.0 M,更优选约0.1至约0.15 M的钙盐的含水溶液在至少约5℃的温度提取卡诺拉籽粗粉,以引起来自该粗粉的卡诺拉蛋白质的增溶和形成蛋白质含量为约5至约40 g/L和pH为约5至约6.8的卡诺拉蛋白质含水溶液,
(b)从该油籽粗粉分离出该蛋白质含水溶液,
(c)用约0.5至约10份体积的温度为约2℃至约90℃的水稀释该蛋白质含水溶液,
(d)酸化所得的稀释的卡诺拉蛋白质溶液至pH为约2.5至约4,优选地约3至约3.5,以产生酸化的透明蛋白质溶液,
(e)通过使用选择性膜技术在保持离子强度基本上恒定的同时增加该酸化的透明蛋白质溶液的浓度至约50-约250 g/L以提供浓缩的蛋白质溶液,
(f)任选地渗滤该浓缩的蛋白质溶液,
(g)任选地干燥该浓缩的溶液以提供具有至少约90重量%(N x 6.25) d.b.的蛋白质含量的卡诺拉蛋白质分离物。
根据本文的方法产生的卡诺拉蛋白质分离物可以用于蛋白质分离物的常规应用,如,加工食品和饮料的蛋白质强化,油的乳化,在烘焙物品中的形体成型剂和截留气体的产品中的发泡剂。另外,该卡诺拉蛋白质分离物可以成形为蛋白质纤维,可用于肉类似物,可用作蛋清代用品或在蛋清用作粘合剂的食品中的增量剂。该卡诺拉蛋白质分离物可以用作营养增补剂。卡诺拉蛋白质分离物的其它用途是在宠物食品,动物饲料中并且在工业和化妆品应用中以及在个人护理产品中。
本发明的一般说明
提供卡诺拉蛋白质分离物的该方法的初始步骤包括增溶来自卡诺拉油籽粗粉的蛋白质材料。从卡诺拉籽粗粉回收的该蛋白质材料可以是天然存在于卡诺拉籽中的蛋白质,或者该蛋白质材料可以是通过基因操纵改性的,但是具有天然蛋白质特有的疏水性和极性的蛋白质。该卡诺拉粗粉可以是通过从卡诺拉油籽中除去卡诺拉油而形成的任意卡诺拉粗粉,具有不同含量的非变性蛋白质,例如是由热己烷萃取或者冷油挤出方法形成的。从卡诺拉油籽中除去卡诺拉油通常是作为与这里所述的蛋白质分离物回收工序分开的操作来进行的。
蛋白质增溶最有效是通过使用食品级盐溶液来进行的,因为盐的存在提高了可溶性蛋白质从油籽粗粉中的除去率。在该卡诺拉蛋白质分离物打算用于非食品用途的情况中,可以使用非食品级化学品。所述的盐通常是氯化钠,但是也可以使用其他的盐例如氯化钾。该盐溶液的浓度是至少大约0.05M,优选至少大约0.10M,以使得能够对显著量的蛋白质进行增溶。随着该盐溶液的浓度的升高,油籽粗粉中的蛋白质的增溶度初始时升高,直到达到一个最大值为止。浓度随后的任何升高都不增加总的增溶的蛋白质。引起最大的蛋白质增溶度的食品级盐溶液的浓度是根据所涉及的盐而变化的。通常优选的是使用小于大约0.8M的浓度值,和更优选大约0.1M-大约0.15M的值。
在分批方法中,蛋白质的盐增溶是在大约5℃-大约75℃的温度进行的,优选伴随着搅拌,来减少增溶时间,增溶时间通常是大约10-大约60分钟。优选的是进行增溶,来从油籽粗粉中充分提取尽可能多的蛋白质,目的是提供总的高产品收率。
选择大约5℃的温度下限,因为增溶在低于该温度时不切实际得慢,而所选择的优选的温度上限是大约75℃,这归因于蛋白质的变性温度。
在连续方法中,从卡诺拉油籽粗粉中提取蛋白质是以与从卡诺拉油籽粗粉中进行蛋白质的连续提取相一致的任何方式来进行的。在一种实施方案中,将卡诺拉油籽粗粉与食品级盐溶液连续混合,将该混合物通过具有一定长度的管子或者管道并且以一定的流速进行传送,历时按照本文所述的参数进行期望的提取的停留时间。在这样的连续工序中,盐增溶步骤是在至多大约10分钟的时间内快速进行的,优选进行增溶来从卡诺拉油籽粗粉中充分提取尽可能多的蛋白质。连续工序中的增溶是在大约10℃-大约75℃,优选大约15℃-大约35℃的温度进行的。
该食品级盐的含水溶液通常具有的pH是大约5-大约6.8,优选大约5.3-大约6.2,通过使用任何方便的酸(通常是盐酸)或者碱(通常是氢氧化钠),该盐溶液的pH可以根据需要调整到提取步骤中所用的大约5-大约6.8范围内的任何期望值。
在增溶步骤过程中,该食品级盐溶液中的油籽粗粉的浓度可以广泛地变化。典型的浓度值是大约5%-大约15%w/v。
使用盐的含水溶液的蛋白质提取步骤具有增溶脂肪的另外的作用,该脂肪可能存在于卡诺拉粗粉中,这则导致存在于含水相中的脂肪。
由该提取步骤所产生的蛋白质溶液通常的蛋白质浓度是大约5-大约40g/L,优选大约10-大约30g/L。
该盐的含水溶液可以包含抗氧化剂。抗氧化剂可以是任何常规的抗氧化剂,例如亚硫酸钠或者抗坏血酸。抗氧化剂的用量可以是溶液的大约0.01 重量%到大约1重量%,优选的是大约0.05重量%。抗氧化剂用于抑制蛋白质溶液中的酚类的氧化。
由提取步骤所形成的含水相然后可以通过任何方便的方式来与残留的卡诺拉粗粉分离,例如使用沉降式离心机,随后使用盘式离心分离和/或过滤来除去残留的粗粉。分离的残留粗粉可以被干燥用于处置。
最终的卡诺拉蛋白质分离物的颜色可以如下在浅色和不太深的黄色方面进行改善:将粉末化的活性炭或者其他颜料吸附剂与该分离的蛋白质含水溶液混合,随后除去该吸附剂,方便的是通过过滤来除去,以提供蛋白质溶液。还可以使用渗滤来除去颜料。
这样的颜料除去步骤可以在任何方便的条件下,通常在分离的蛋白质含水溶液的环境温度下,使用任何合适的颜料吸附剂来进行。对于粉末化的活性炭来说,用量是大约0.025%-大约5%w/v,优选大约0.05%-大约2%w/v。
在卡诺拉籽粗粉包含显著量的脂肪的情况中(如US专利No.5844086和6005076中所述,其转让给这里的受让人,并且其公开内容在此引入作为参考),则可以对分离的蛋白质含水溶液和下面所讨论的浓缩的蛋白质含水溶液进行其中所述的脱脂步骤。当进行颜色改善步骤时,该步骤可以在第一脱脂步骤之后进行。
作为用盐的含水溶液来提取卡诺拉油籽粗粉的一个备选方案,这样的提取可以单独使用水来进行,虽然单独使用水往往从卡诺拉油籽粗粉中提取比盐的含水溶液更少的蛋白质。在使用这样的备选方案的情况中,则在与残留的油籽粗粉分离之后,处于上述浓度的盐可以加入到该蛋白质溶液中,目的是在下述的浓缩步骤过程中将该蛋白质保持溶解。当进行第一脂肪除去步骤时,盐通常是在这样的操作完成之后加入的。
另外一种可选择的工序是用处于高于大约6.8,通常至多大约9.9的相对高的pH值的食品级盐溶液来提取该卡诺拉油籽粗粉。该食品级盐溶液的pH可以通过使用任何方便的食品级碱(例如氢氧化钠水溶液)调整pH到期望的碱值。或者,该油籽粗粉可以用低于大约 pH5,通常低至大约 pH3的相对低的pH的盐溶液来提取。在使用这样的变化方案的情况中,然后将油籽粗粉提取步骤所形成的含水相与残留的卡诺拉粗粉通过任何方便的方式进行分离,例如通过使用沉降式离心机,然后使用盘式离心分离和/或过滤来除去残留的粗粉。分离的残留粗粉可以干燥以备处置。
由高或者低pH提取步骤所形成的该蛋白质含水溶液然后在下面所述的进一步加工之前,如上所述将pH调整到大约5-大约6.8,优选大约5.3-大约6.2。这样的pH调整可以使用任何方便的酸(例如盐酸)或者碱(例如氢氧化钠)来适当进行。
在保持其离子强度基本上恒定同时浓缩该卡诺拉蛋白质含水溶液来提高其蛋白质浓度。通常进行这样的浓缩来提供浓缩的蛋白质溶液,该溶液的蛋白质浓度为至少大约50g/L至大约250g/L,优选大约200g/L。
该浓缩步骤可以通过与分批或者连续操作相一致的任何方便的方式来进行,例如通过使用任何方便的选择性膜技术,例如超滤或者渗滤,使用膜,例如空心纤维膜或者螺旋缠绕的膜,针对不同的膜材料和构造具有合适的截留分子量,例如大约3000-大约100000道尔顿,优选大约5000-大约10000道尔顿膜,并且对于连续操作来说,确定尺寸来使得当蛋白质含水溶液通过膜时,实现期望的浓缩度。
该浓缩的蛋白质溶液然后可以使用与提取溶液具有相同摩尔浓度和pH的盐的含水溶液,来进行渗滤步骤。这样的渗滤可以使用大约2-大约20份体积的渗滤溶液,优选大约5-大约10份体积的渗滤溶液来进行。在该渗滤操作中,通过随渗透物穿过所述膜,而从卡诺拉蛋白质含水溶液中除去另外量的污染物。可以进行该渗滤操作,直到在渗透物中没有明显的另外量的污染物和可见的颜色存在为止。这样的渗滤可以使用与浓缩步骤相同的膜来进行。但是,如果期望的话,该渗滤步骤可以使用具有不同的截留分子量的单独膜来进行,例如截留分子量针对不同的膜材料和构造为大约3000-大约100000道尔顿,优选大约5000-大约10000道尔顿的膜。
在至少部分的渗滤步骤过程中,抗氧化剂可以存在于渗滤介质中。该抗氧化剂可以是任何方便的抗氧化剂,例如亚硫酸钠或者抗坏血酸。在渗滤介质中所用的抗氧化剂的量取决于所用的材料,并且可以为大约0.01 重量%到大约1重量%,优选是大约0.05重量%。抗氧化剂用于抑制浓缩的卡诺拉蛋白质分离物溶液中所存在的酚类的氧化。
该浓缩步骤和渗滤步骤可以在任何方便的温度下,通常是大约20℃-大约60℃,优选大约20-大约30℃进行,并且进行一定的时间来实现期望的浓缩度。所用的温度和其他条件一定程度上取决于用于实现所述浓缩的膜装置和所述溶液的期望的蛋白质浓度。
作为公知的,超滤和类似的选择性膜技术允许低分子量物质通过膜,同时阻止较高分子量的物质通过。该低分子量物质不仅包括食品级盐的离子性物质,而且还包括从源材料中提取的低分子量材料,例如碳水化合物、颜料和抗营养因子,以及任何低分子量形式的蛋白质。通常对膜的截留分子量进行选择,来保证显著比例的蛋白质在溶液中的保持,同时针对不同的膜材料和构造允许污染物通过。
如果需要,该浓缩的和任选的渗滤的蛋白质溶液可以进行另外的脱脂操作,如US专利No.5844086和6005076所述。
该浓缩的和任选的渗滤的蛋白质溶液可以进行脱色操作,作为上述的脱色操作的一个备选方案。粉末化的活性炭以及粒状活性炭(GAC)可以用于此。另外一种能够用作颜色吸收剂的材料是聚乙烯吡咯烷酮。
该颜色吸收剂处理步骤可以在任何方便的条件下进行,通常在卡诺拉蛋白质溶液的环境温度进行。对于粉末化的活性炭来说,用量可以是大约0.025%-大约5%w/v,优选大约0.05%-大约2%w/v。在使用聚乙烯吡咯烷酮作为颜色吸收剂的情况中,用量可以是大约0.5%-大约5%w/v,优选大约2%-大约3%w/v。该颜色吸收剂可以通过任何方便的手段(例如通过过滤)来从该卡诺拉蛋白质溶液中除去。
由任选的脱色步骤所形成的该浓缩的和任选渗滤的卡诺拉蛋白质溶液可以进行巴氏杀菌,来减少微生物负载。这样的巴氏杀菌可以在任何期望的巴氏杀菌条件下进行。通常,将该浓缩的和任选渗滤的卡诺拉蛋白质溶液加热到大约55℃-大约70℃,优选大约60℃-大约65℃的温度历时大约10-大约15分钟,优选大约10分钟。该巴氏杀菌过的浓缩卡诺拉蛋白质溶液然后可以冷却来用于下述的进一步的加工,优选冷却到大约25℃-大约40℃的温度。
在浓缩步骤和任选的渗滤,颜料去除和巴氏灭菌步骤之后,添加食品等级钙盐,通常是氯化钙,到所得的溶液以避免在后续稀释步骤期间的胶束沉淀。这一添加引起主要包含植酸钙的沉淀物的形成。添加充分的氯化钙以提供具有通常约15至约25 mS,优选地约17至约20 mS的电导率的溶液。氯化钙可以作为浓缩含水溶液或以干燥形式添加。
氯化钙的添加可以在约20℃至约35℃的环境温度实施,但是可以使用约5℃至约70℃范围内的温度。添加氯化钙之后,该沉淀的植酸盐从蛋白质溶液除去,如通过离心作用。
来自植酸盐沉淀的该浓缩的蛋白质溶液然后通过将滞留物与具有实现所需稀释度的所需体积的水混合来进行稀释。作为添加氯化钙的结果,该稀释不产生蛋白质胶束的沉淀。该浓缩的蛋白质溶液通常稀释约2至约20倍,优选地约10至约15倍。
与该浓缩的蛋白质溶液混合的水的温度为约2℃至约90℃,优选地约10℃至约50℃,更优选约20℃至约30℃。
稀释的滞留物然后通过添加任何合适的酸,如盐酸,调节pH至约2.5至约4.0,优选地约3至约3.5,以产生透明的卡诺拉蛋白质含水溶液。
透明的卡诺拉蛋白质含水溶液被浓缩以增加其蛋白质浓度,同时保持离子强度基本上恒定。该浓缩通常被实施以提供具有的蛋白质浓度为约50至约250 g/L,优选地约100至约150 g/L的浓缩的蛋白质溶液。
该浓缩步骤可以通过与分批或者连续操作相一致的任何方便的方式来进行,例如通过使用任何方便的选择性膜技术,例如超滤或者渗滤,使用膜,例如空心纤维膜或者螺旋缠绕的膜,针对不同的膜材料和构造具有合适的截留分子量,例如大约3000-大约100000道尔顿,优选大约5000-大约10000道尔顿,并且对于连续操作来说,确定尺寸来使得当蛋白质含水溶液通过膜时,实现期望的浓缩度。
该浓缩的蛋白质溶液然后可以使用水来进行渗滤步骤。该水可以为其天然pH,或者等于被渗滤的该蛋白质溶液的pH,或者在其间的任何pH。这样的渗滤可以使用大约2-大约20份体积的渗滤溶液,优选大约5-大约10份体积的渗滤溶液来进行。在该渗滤操作中,通过随渗透物穿过所述膜,而从该透明的卡诺拉蛋白质含水溶液中除去另外量的污染物。可以进行该渗滤操作,直到在渗透物中没有明显的另外量的污染物和可见的颜色存在为止。这样的渗滤可以使用与浓缩步骤相同的膜来进行。但是,如果期望的话,该渗滤步骤可以使用具有不同的截留分子量的单独膜来进行,例如截留分子量针对不同的膜材料和构造为大约3000-大约100000道尔顿,优选大约5000-大约10000道尔顿的膜。
在至少部分的渗滤步骤过程中,抗氧化剂可以存在于渗滤介质中。该抗氧化剂可以是任何方便的抗氧化剂,例如亚硫酸钠或者抗坏血酸。在渗滤介质中所用的抗氧化剂的量取决于所用的材料,并且可以为大约0.01 重量%到大约1重量%变化,优选是大约0.05重量%。抗氧化剂用于抑制浓缩的卡诺拉蛋白质分离物溶液中所存在的酚类的氧化。
该浓缩步骤和渗滤步骤可以在任何方便的温度下,通常是大约20℃-大约60℃,优选大约20℃-大约30℃进行,并且进行一定的时间来实现期望的浓缩度。所用的温度和其他条件一定程度上取决于用于实现所述浓缩的膜装置和所述溶液的期望的蛋白质浓度。
浓缩和任选渗滤的透明的卡诺拉蛋白质含水溶液可以通过任何适宜技术干燥,如喷雾干燥或冷冻干燥。在干燥之前,可以对该卡诺拉蛋白质溶液实施上述巴氏灭菌步骤。该干燥卡诺拉蛋白质分离物具有高蛋白含量,超过约90重量%蛋白质,优选地至少约100重量%蛋白质(作为凯氏N x 6.25计算),基于干重。该卡诺拉蛋白质分离物的植酸含量低,通常小于约1.5 %重量。
如上所述,本文中所述的程序存在若干变化来产生该卡诺拉蛋白质分离物并涉及本文概述的步骤的若干改变。
本文产生的该卡诺拉蛋白质分离物既包含白蛋白又包含球蛋白级分且可溶于酸性的含水环境,使得该分离物理想地用于掺入碳酸化和未碳酸化的饮料,以向其中提供蛋白质强化。该饮料具有宽范围的酸性pH值,从约2.5至约5。本文提供的该卡诺拉蛋白质分离物可以任何适宜数量加入该饮料中以给该饮料提供蛋白质强化,例如,至少约5克该卡诺拉蛋白质分离物/12流体盎司量。添加的卡诺拉蛋白质分离物溶于该饮料并且不削弱饮料的透明性。
实施例
实施例1:
该实施例描述了根据本发明一个实施方案产生新型卡诺拉蛋白质分离物。
将“a”kg的卡诺拉粗粉加入到环境温度的“b”L的“c” M NaCl溶液中,并且搅拌30分钟来提供蛋白质含水溶液。除去该残留的卡诺拉粗粉,并且将所得到的蛋白质溶液通过离心法进行部分澄清,来产生“d”L的部分澄清的蛋白质溶液,该溶液的蛋白质含量是“e”重量%。该部分澄清的蛋白质溶液然后被过滤以进一步澄清产生蛋白质含量为“g”%重量的“f”L体积的溶液。
如下来将“h”L的等份部分的该蛋白质提取溶液的体积降低到“i”L:在截留分子量为“j”道尔顿的聚醚砜(PES)膜上浓缩,然后在相同的膜上用“k”L的“l”M NaCl溶液进行渗滤。然后将该渗滤的滞留物在60℃巴氏杀菌10分钟。所得到的巴氏杀菌过的浓缩的蛋白质溶液的蛋白质含量为“m”重量%。
该浓缩的溶液然后通过添加来自浓缩溶液的食品级氯化钙调节到“n”MS的电导率。滞留物然后离心而除去添加氯化钙时形成的沉淀物。“o”kg的沉淀物然后再悬浮在“p”升的19 MS氯化钙溶液中且离心以回收尽可能多的溶液蛋白质。来自该洗涤步骤的上清液然后同该处理后的滞留物合并。在实施例之一中,该洗涤程序重复第二次。“q”升的澄清滞留物然后稀释入“r”份体积的RO水。(注解:当进行该稀释时没有胶束形成)。该溶液然后用HCL调节到 pH为“s”。针对两次运行的参数“a”至“t”阐述在下表I中:
表I
BW-SA082-C31-08a BW-SA082-D14-08A
a 20 20
b 200 200
c 0.15 0.15
d NA 168
e 1.36 1.18
f 160 171
g 1.09 0.89
h 160 171
i 6.25 5
j 100000 100000
k 18.75 25
l 0.15 0.15
m 23.95 25.93
n 19.8 18.34
o 1.86 1.84
p 1.2 1.8
q 6.28 7.7
r 10 10
s 3 3
pH调节后的透明溶液然后通过使用截留分子量为“u”道尔顿的聚醚砜(PES)膜进行超滤将体积降低到“t”L,然后该浓缩物在同样的膜上用“v”L的水渗滤。渗滤的浓缩物包含“w”%蛋白质重量。
过滤后的蛋白质溶液的总蛋白质回收率是“x”重量%。该浓缩物被喷雾干燥以形成给定命名“y”C700的最终产品且具有蛋白质含量“z”% (N x 6.25) d.b.。针对两次运行的参数“t”至“z”阐述在下表II中:
表II
y BW-SA082-C31-08a BW-SA082-D14-08A
t 13.46 17
u 10000 10000
v 174 95
w 7.72 5.25
x 62 67
z 101 101
实施例2:
本实施例描述根据本发明的另一个方面生产新型卡诺拉蛋白质分离物。
20 kg的卡诺拉粗粉被添加到在环境温度的200升的0.15 M NaCl溶液且搅动30分钟以提供蛋白质含水溶液。除去残余的卡诺拉粗粉且所得的蛋白质溶液被通过离心来部分澄清以产生153升的部分澄清的蛋白质溶液,具有的蛋白质含量为1.30 %重量。该部分澄清的蛋白质溶液然后过滤以进一步澄清产生172升体积的溶液,具有蛋白质含量1.29 %重量。
该滤液然后通过添加来自浓缩溶液的食品级氯化钙调节到18.57 mS的电导率。该滤液然后离心而除去添加氯化钙时形成的沉淀物,提供160升的处理后的滤液。
160升的处理后的滤液在具有100000道尔顿的截留分子量聚醚砜(PES)膜上浓缩而降低体积到6.88升。该样品没有被渗滤。滞留物然后在60℃巴氏杀菌1分钟。所得的巴氏杀菌后的浓缩蛋白质溶液具有的蛋白质含量为19.44 %重量。该巴氏灭菌步骤令人惊讶地产生显著的蛋白质沉淀。
6.74升的巴氏杀菌后的滞留物然后稀释入10份体积的冷(3℃)的反渗透净化水且用HCl调节pH到3。该溶液然后通过离心和过滤澄清,而除去相信是在巴氏灭菌步骤中形成的固体。
pH调节后的透明溶液然后通过使用具有10000道尔顿的截留分子量的聚醚砜(PES)膜来超滤而从76.5升浓缩到20.5 kg。没有进行渗滤。该浓缩的蛋白质溶液包含4.08 %蛋白质重量。
过滤后的蛋白质溶液的总蛋白质回收率是37.8重量%。浓缩物进行碳处理和喷雾干燥以形成最终产品,给定命名BW-SA082-D21-08A C700FC,其具有的蛋白质含量为98.63 % (N x 6.25) d.b。
实施例3
本实施例描述在干燥时将提供根据本发明的另一个方面的新型卡诺拉蛋白质分离物的样品的产生。
60 kg的卡诺拉粗粉被添加到在环境温度的600升的0.15 M NaCl溶液且搅动30分钟以提供蛋白质含水溶液。除去残余的卡诺拉粗粉且所得的蛋白质溶液被通过离心来部分澄清以产生511升的部分澄清的蛋白质溶液,其具有的蛋白质含量为1.78 %重量。该部分澄清的蛋白质溶液然后过滤以进一步澄清产生534升体积的溶液,其具有蛋白质含量1.51 %重量。
充分的氯化钙被添加到等份试样的500 ml的过滤后的蛋白质溶液以将电导率升高到20.6mS。添加CaCl2使得形成白色沉淀物,其通过离心除去以提供透明溶液。
处理和澄清后的蛋白质溶液然后用3份体积的反渗透净化水稀释并将该溶液用HCl调节pH到3.05。没有形成混浊且该溶液保持高澄清性。稀释和酸化的溶液的蛋白质含量是0.53 %重量。
1450毫升的稀释和酸化溶液然后在装备有具有10000道尔顿的截留分子量的Hydrosart膜的Vivaflow 200超滤单元上减少体积到200毫升。该部分浓缩的蛋白质溶液然后在相同的膜上用200毫升的pH 3反渗透净化水渗滤以减少电导率。
渗滤的溶液然后进一步浓缩以提供大约30毫升的蛋白质含量12.39 %重量的透明滞留物。
实施例4
本实施例描述根据本发明的另一个方面生产新型卡诺拉蛋白质分离物。
60 g的卡诺拉粗粉被添加到在环境温度的600毫升的0.10 M CaCl2溶液且搅动30分钟以提供蛋白质含水溶液。除去残余卡诺拉粗粉且所得的蛋白质溶液通过离心和过滤澄清以产生330毫升的澄清的蛋白质溶液,其具有的蛋白质含量为1.17 %重量。该澄清的蛋白质溶液用两份体积的反渗透净化水稀释以提供990毫升的具有0.41 %重量的蛋白质含量的稀释溶液。该溶液的pH值通过添加稀盐酸降低到3.03。在稀释和pH调整步骤之后的蛋白质溶液是透明的。
等份试样的920毫升的稀释和酸化的蛋白质溶液通过在装备有具有截留分子量10000道尔顿的Hydrosart膜的Vivaflow 200超滤单元上浓缩而将体积降低到35毫升。该浓缩的蛋白质溶液具有6.84 %重量的蛋白质含量。
等份试样的32毫升的浓缩的蛋白质溶液用5份体积的反渗透净化水(160毫升)在用于初始浓缩步骤的相同的膜上滤渗。该渗滤和浓缩的蛋白质溶液具有7.06 %重量的蛋白质含量。
初始过滤的蛋白质溶液的总蛋白质回收率是60.4%。该渗滤、浓缩的蛋白质溶液被冷冻干燥以形成最终产品,给定命名C701,其具有的蛋白质含量为93.42 % (N x 6.25) w.b。
公开内容的概述
概述本公开内容,本发明提供用于形成既包括白蛋白又包括球蛋白级分的、在酸性含水环境中可溶且透明的卡诺拉蛋白质分离物的新颖工艺程序。在本发明范围内进行变化是可能的。

Claims (32)

1.生产具有至少约90重量% (N x 6.25) d.b.的卡诺拉蛋白质含量的卡诺拉蛋白质分离物的方法,其包括:
(a)在至少约5℃的温度提取卡诺拉油籽粗粉以引起来自该粗粉的卡诺拉蛋白质的增溶并形成具有的蛋白质含量为约5至约40 g/L和pH为约5至约6.8的蛋白质含水溶液,
(b)从该用过的油籽粗粉分离出该蛋白质含水溶液,
(c)通过使用选择性膜技术在保持离子强度基本上恒定的同时增加该蛋白质含水溶液的蛋白质浓度至约50-约250 g/L,以提供第一浓缩的蛋白质溶液;
(d)任选地渗滤该第一浓缩的蛋白质溶液,
(e)添加钙盐溶液到该第一浓缩的且任选地渗滤的蛋白质溶液至电导率为约15至约25 mS,以引起沉淀物在该第一浓缩的蛋白质溶液中形成,
(f)从该第一浓缩的蛋白质溶液除去该沉淀物,
(g)用约2至约20份体积的温度为约2℃至约90℃的水稀释该澄清的第一浓缩的蛋白质溶液,
(h)酸化所得的溶液至pH为约2.5至约4.0以产生酸化的透明蛋白质溶液,
(i)通过使用选择性膜技术在保持离子强度基本上恒定的同时增加该酸化的透明蛋白质溶液的浓度至约50-约200 g/L,以提供第二浓缩的蛋白质溶液,
(j)任选地渗滤该第二浓缩的蛋白质溶液,和
(k)任选地干燥该第二浓缩的蛋白质溶液以提供具有至少约90重量%(N x 6.25) d.b.的蛋白质含量的卡诺拉蛋白质分离物。
2.如权利要求1所述的方法,其中该钙盐是氯化钙。
3.如权利要求2所述的方法,其中充分的氯化钙溶液被添加到该浓缩的并任选地渗滤的蛋白质溶液以提供具有约17至约20 mS的电导率的溶液。
4.如权利要求1所述的方法,其中用约10至约15份水的溶液稀释该第一浓缩的蛋白质溶液。
5.如权利要求1所述的方法,其中所得的溶液被酸化至pH为约3至约3.5。
6.生产具有至少约90重量% (N x 6.25) d.b.的卡诺拉蛋白质含量的卡诺拉蛋白质分离物的方法,其包括:
(a)在至少约5℃的温度提取卡诺拉油籽粗粉以引起来自该粗粉的卡诺拉蛋白质的增溶且形成具有的蛋白质含量为约5至约40 g/L和pH为约5至约6.8的卡诺拉蛋白质含水溶液,
(b)从该油籽粗粉分离出该卡诺拉蛋白质含水溶液,
(c)添加钙盐溶液到该蛋白质含水溶液至电导率为约15至约25 mS,以引起沉淀物在该浓缩的蛋白质溶液中形成,
(d)从该卡诺拉蛋白质含水溶液除去该沉淀物,
(e)通过使用选择性膜技术在保持离子强度基本上恒定的同时增加该蛋白质含水溶液的蛋白质浓度至约50-约250 g/L,以提供第一浓缩的蛋白质溶液,
(f)任选地渗滤该第一浓缩的蛋白质溶液,
(g)用约2至约20份体积的温度为约2℃至约90℃的水稀释该第一浓缩的蛋白质溶液,
(h)酸化所得的溶液至pH为约2.5至约4.0以产生酸化的透明蛋白质溶液,
(i)通过使用选择性膜技术在保持离子强度基本上恒定的同时增加该酸化的透明蛋白质溶液的浓度至约50-约250 g/L以提供第二浓缩的蛋白质溶液,
(j)任选地渗滤该第二浓缩蛋白质溶液,和
(k)任选地干燥该第二浓缩的蛋白质溶液以提供具有至少约90重量%(N x 6.25) d.b.的蛋白质含量的卡诺拉蛋白质分离物。
7.如权利要求6所述的方法,其中该钙盐是氯化钙。
8.如权利要求7所述的方法,其中充分的氯化钙溶液被添加到该蛋白质含水溶液至电导率为约17至约20 mS。
9.如权利要求6所述的方法,其中该第一浓缩的蛋白质溶液用约10至约15份体积的水稀释。
10.如权利要求6所述的方法,其中所得的溶液被酸化至pH为约3至约3.5。
11.生产具有至少约90重量% (N x 6.25) d.b.的卡诺拉蛋白质含量的卡诺拉蛋白质分离物的方法,其包括:
(a)在至少约5℃的温度提取卡诺拉油籽粗粉以引起来自该粗粉的卡诺拉蛋白质的增溶并形成具有的蛋白质含量为约5至约40 g/L和pH为约5至约6.8的蛋白质含水溶液,
(b)从该用过的油籽粗粉分离出该蛋白质含水溶液,
(c)通过使用选择性膜技术在保持离子强度基本上恒定的同时增加该蛋白质含水溶液的蛋白质浓度至约50g/L或更少以提供部分浓缩的蛋白质溶液,
(d)添加钙盐溶液到该部分浓缩的蛋白质溶液至电导率为约15至约25 mS,以引起沉淀物在该部分浓缩的蛋白质溶液中形成,
(e) 从该部分浓缩的蛋白质溶液除去该沉淀物,
(f)通过使用选择性膜技术在保持离子强度基本上恒定的同时进一步增加该部分浓缩的蛋白质溶液的蛋白质浓度至约50-约250 g/L以提供第一浓缩的蛋白质溶液,
(g)任选地渗滤该第一浓缩的蛋白质溶液,
(h)用约2至约20份体积的温度为约2℃至约90℃的水稀释该第一浓缩的蛋白质溶液,
(i)酸化所得的溶液至pH为约2.5至约4.0以产生酸化的透明蛋白质溶液,
(j)通过使用选择性膜技术在保持离子强度基本上恒定的同时增加该酸化的透明蛋白质溶液的浓度至约50-约250 g/L以提供第二浓缩的蛋白质溶液,
(k)任选地渗滤该第二浓缩的蛋白质溶液,和
(l)任选地干燥该第二浓缩的蛋白质溶液以提供具有至少约90重量%(N x 6.25) d.b.的蛋白质含量的卡诺拉蛋白质分离物。
12.如权利要求11所述的方法,其中该钙盐是氯化钙。
13.如权利要求12所述的方法,其中充分的氯化钙溶液被添加到该蛋白质含水溶液至电导率为约17至约20 mS。
14.如权利要求11所述的方法,其中该第一浓缩的蛋白质溶液用约10至约15份体积的水稀释。
15.如权利要求11所述的方法,其中所得的溶液被酸化至pH为约3至约3.5。
16.生产具有至少约90重量% (N x 6.25) d.b.的卡诺拉蛋白质含量的卡诺拉蛋白质分离物的方法,其包括:
(a)在至少约5℃的温度用含水的钙盐提取卡诺拉籽粗粉以引起来自该粗粉的卡诺拉蛋白质的增溶并形成具有的蛋白质含量为约5至约40 g/L和pH为约5至约6.8的卡诺拉蛋白质含水溶液,
(b)从该油籽粗粉分离出该蛋白质含水溶液,
(c)用温度约2℃至约90℃的约0.5至约10份体积的水稀释该蛋白质含水溶液,
(d)酸化所得的稀释的卡诺拉蛋白质溶液至pH为约2.5至约4,以产生酸化的透明蛋白质溶液,
(e)通过使用选择性膜技术在保持离子强度基本上恒定的同时增加该酸化的透明蛋白质溶液的浓度至约50-约250 g/L以提供浓缩的蛋白质溶液,
(f)任选地渗滤该浓缩的蛋白质溶液,
(g)任选地干燥该浓缩的溶液以提供具有至少约90重量%(N x 6.25) d.b.的蛋白质含量的卡诺拉蛋白质分离物。
17.如权利要求16所述的方法,其中该钙盐是氯化钙。
18.权利要求17的方法,其中此处的该钙盐含水溶液具有小于1.0 M的浓度。
19.权利要求18的方法,其中钙盐含水溶液具有约0.10至约0.55 M的浓度。
20.如权利要求16所述的方法,其中所得的溶液被酸化至pH为约3至约3.5。
21.生产具有至少约90重量% (N x 6.25) d.b.的蛋白质含量的卡诺拉蛋白质分离物的方法,其包括:
(a)在至少约5℃的温度提取卡诺拉油籽粗粉以引起来自该粗粉的卡诺拉蛋白质的增溶并形成具有的蛋白质含量为约5至约40 g/L和pH为约5至约6.8的蛋白质含水溶液,
(b)从该用过的油籽粗粉分离出该蛋白质含水溶液,
(c)通过使用选择性膜技术在保持离子强度基本上恒定的同时增加该蛋白质含水溶液的蛋白质浓度至约50g/L或更少以提供部分浓缩的蛋白质溶液,
(d)添加钙盐溶液到该部分浓缩的蛋白质溶液至电导率为约15至约25 mS,以引起沉淀物在该部分浓缩的蛋白质溶液中形成,
(e)从该部分浓缩的蛋白质溶液除去该沉淀物,
(f)用约0.5至约20份体积的温度为约2至约90℃的水稀释该部分浓缩的蛋白质溶液,
(g)酸化所得的溶液至pH为约2.5至约4.0以产生酸化的透明蛋白质溶液,
(h)通过使用选择性膜技术在保持离子强度基本上恒定的同时增加该酸化的卡诺拉蛋白质溶液的蛋白质浓度至约50-约250 g/L以提供浓缩的蛋白质溶液,
(i)任选地渗滤该浓缩的蛋白质溶液,和
(j)任选地干燥该浓缩的蛋白质溶液以提供具有至少约90重量%(N x 6.25) d.b.的蛋白质含量的卡诺拉蛋白质分离物。
22.如权利要求21所述的方法,其中该钙盐是氯化钙。
23.如权利要求22所述的方法,其中充分的氯化钙溶液被添加到该蛋白质含水溶液至电导率为约17至约20 mS。
24.如权利要求21所述的方法,其中所得的溶液被酸化至pH为约3至约3.5。
25.生产具有至少约90重量% (N x 6.25) d.b.的卡诺拉蛋白质含量的卡诺拉蛋白质分离物的方法,其包括:
(a)在约5℃的温度提取卡诺拉油籽粗粉以引起来自该粗粉的卡诺拉蛋白质的增溶并形成具有的蛋白质含量为约5至约40 g/L和pH为约5至约6.8的卡诺拉蛋白质含水溶液,
(b)从该油籽粗粉分离出该卡诺拉蛋白质含水溶液,
(c)添加钙盐溶液到该蛋白质含水溶液至电导率为约15至约25 mS,以引起沉淀物在该浓缩的蛋白质溶液中形成,
(d)从该卡诺拉蛋白质含水溶液除去该沉淀物,
(e)用约0.5至约10份体积的温度为约2℃至约90℃的水稀释该卡诺拉蛋白质含水溶液,
(f)酸化所得的含水溶液至pH为约2.5至4.0以产生酸化的透明蛋白质溶液,
(g)通过使用选择性膜技术在保持离子强度基本上恒定的同时增加该酸化的透明蛋白质溶液的浓度至约50-约250 g/L以提供浓缩的蛋白质溶液,
(h)任选地渗滤该浓缩的蛋白质溶液,和
(i)任选地干燥该浓缩的蛋白质溶液以提供具有至少约90重量%(N x 6.25) d.b.的蛋白质含量的卡诺拉蛋白质分离物。
26.如权利要求25所述的方法,其中该钙盐是氯化钙。
27.如权利要求26所述的方法,其中充分的氯化钙溶液被添加到该蛋白质含水溶液至电导率为约17至约20 mS。
28.如权利要求25所述的方法,其中所得的溶液被酸化至pH为约3至约3.5。
29.卡诺拉蛋白质分离物,具有至少约90重量% (N x 6.25) d.b.的蛋白质含量,其包含该卡诺拉蛋白质的白蛋白以及球蛋白级分并且其可溶于酸性含水环境。
30.权利要求29的卡诺拉蛋白质分离物,其中该酸性含水环境是具有约2.5至约5的pH的饮料。
31.权利要求29的卡诺拉蛋白质分离物,具有小于约1.5%重量的植酸含量。
32.权利要求29的卡诺拉蛋白质分离物,具有至少约100重量% (N x 6.25) d.b.的蛋白质含量。
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