CN102066358B - 作为cgrp受体拮抗剂的哌啶衍生物 - Google Patents
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Abstract
本发明大体上涉及新颖的式I的化合物，包括其盐，所述化合物为CGRP受体拮抗剂。本发明也涉及药物组合物及使用所述化合物治疗CGRP相关病症的方法，所述病症包括偏头痛及其它头痛、神经性血管舒张、神经性炎症、热损伤、循环性休克、与更年期相关的潮红、呼吸道炎症疾病诸如哮喘及慢性阻塞性肺疾病(COPD)。
Description
对相关申请的交叉参考
本申请要求2008年4月11日提交的美国临时申请61/044198的优先权。
技术领域
本发明大体上涉及新颖的式I的化合物，包括其药用盐，所述化合物为CGRP受体拮抗剂。本发明也涉及药物组合物及使用所述化合物治疗CGRP相关病症的方法，所述病症包括偏头痛、神经性血管舒张、神经性炎症、热损伤、循环性休克、与更年期相关的潮红、呼吸道炎症疾病诸如哮喘及慢性阻塞性肺疾病(COPD)。
背景技术
降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide，CGRP)为最先于1982年被鉴定的天然存在的包含37个氨基酸的肽(Amara，S.G.等人，Science1982，298，240-244)。所述肽的两种形式(αCGRP及βCGRP)被表达，这两种形式的差异分别在大鼠中为一个氨基酸，及在人类中为三个氨基酸。所述肽广泛分布于外周神经系统(PNS)及中枢神经系统(CNS)中，主要位于感觉传入神经元及中枢神经元中，且展现出多种生物作用，包括血管舒张。
当CGRP从细胞中释放时，CGRP与特异性细胞表面G蛋白偶联受体结合且主要通过活化细胞内腺苷酸环化酶来发挥其生物作用(Poyner，D.R.等人，Br J Pharmacol 1992，105，441-7和Van Valen，F.等人，Neurosci Lett 1990，119，195-8)。基于针对肽片段CGRP(8-37)的拮抗剂性质及CGRP线性类似物活化CGRP2受体的能力，提出有两种类型的CGRP受体即CGRP1受体及CGRP2受体(Juaneda，C.等人，TiPS 2000，21，432-438)。然而，缺乏针对CGRP2受体的分子证据(Brain，S.D.等人，TiPS 2002，23，51-53)。CGRP1受体具有三种组成：(i)七跨膜降钙素受体样受体(CRLR)；(ii)单跨膜受体活性调节蛋白I型(RAMP1)；及(iii)细胞内受体组成蛋白(RCP)(Evans B.N.等人，JBiol Chem.2000，275，31438-43)。RAMP1为将CRLR转运至质膜及使配体与CGRP受体结合所必须(McLatchie，L.M.等人，Nature 1998，393，333-339)。RCP为信号转导所必须(Evans B.N.等人，J Biol Chem.2000，275，31438-43)。已知在使小分子拮抗剂与CGRP受体结合中有物种特异性差异，其中典型地，就针对人类受体的拮抗作用而言，观察到的亲和性高于其它物种(Brain，S.D.等人，TiPS 2002，23，51-53)。RAMP1的氨基酸序列决定了物种选择性，具体地，氨基酸残基色氨酸74负责所述人类受体的显型(Mallee等人，J BiolChem 2002，277，14294-8)。
在受体水平针对CGRP的抑制剂被视为可用于其中出现过度CGRP受体活化的病生理病症。一些所述病症包括神经性血管舒张、神经性炎症、偏头痛、丛集性头痛及其它头痛、热损伤、循环性休克、更年期潮红及哮喘。CGRP受体的活化与偏头痛的发病相关(Edvinsson L.CNS Drugs 2001；15(10)：745-53；Williamson，D.J.Microsc.Res.Tech.2001，53，167-178；和Grant，A.D.Brit.J.Pharmacol.2002，135，356-362)。CGRP的血清水平在偏头痛期间是升高的(Goadsby P.J.等人，Ann.Neurol.1990，28，183-7)且用抗偏头痛药物进行的治疗使CGRP的水平恢复至与减轻头痛相符的正常水平(Gallai V.等人，Cephalalgia 1995，15：384-90)。偏头痛患者与对照患者相比呈现出升高的基线CGRP水平(Ashina M.等人，Pain 2000，86(1-2)：133-8)。静脉内输注的CGRP在偏头痛患者中产生持续的头痛(Lassen L.H.等人，Cephalalgia.2002，22(1)：54-61)。对狗及大鼠进行的临床前研究报导，用肽拮抗剂CGRP(8-37)阻断全身的CGRP不会改变静止时的全身血液动力学，也不会改变静止时的区域血流(Shen，Y-T.等人，J Pharmacol.Exp.Ther.2001，298，551-8)。因此，CGRP受体拮抗剂可作为用于偏头痛的新颖疗法，所述疗法可避免与非选择性5-HT1B/1D激动剂即“曲坦类(triptan)”(例如舒马曲坦(sumatriptan))相关的心血管倾向即活性血管收缩。
CGRP拮抗剂已在人类临床试验中显示出效能。参见Davis CD，Xu C.Curr Top Med Chem.20088(16)：1468-79；Benemei S，Nicoletti P，Capone JG，Geppetti P.Curr Opin Pharmacol.20099(1)：9-14.Epub 2009 Jan 20；Ho TW，Ferrari MD，Dodick DW，Galet V，Kost J，Fan X，Leibensperger H，Froman S，Assaid C，Lines C，Koppen H，Winner PK.Lancet.2008372：2115.Epub 2008Nov 25；Ho TW，Mannix LK，Fan X，Assaid C，Furtek C，Jones CJ，Lines CR，Rapoport AM；和Neurology 200870：1304.Epub 2007Oct 3。
本发明提供了技术优点，例如所述化合物是新颖的且抑制CGRP。此外，所述化合物提供了针对药物用途的优点，例如所述化合物的一种或多种以下性质：作用机制、结合机制、抑制效能、靶标选择性、溶解性、安全性或生物利用度。
CGRP受体拮抗剂已披露在PCT公开文本WO 2004/092166、WO2004/092168和WO 2007/120590中。
附图说明
图1.[125I]-CGRP饱和/Scatchard分析。[125I]-CGRP饱和使用SK-N-MC膜在不存在CGRP拮抗剂实施例20(实心方块)和存在CGRP拮抗剂实施例20(所有其它标识)的情况下来进行。
图2.功能性拮抗/Schild分析。CGRP剂量响应(经刺激的cAMP产生)在SK-N-MC细胞中在不存在CGRP拮抗剂实施例20(空心方块)和存在浓度增加(从左至右为0.3至24nM)的CGRP拮抗剂实施例20(所有其它标识)的情况下来进行。
图3.在大鼠中对代表颅内动脉舒张的面部血流进行的直接确定。静脉内给药的hαCGRP在大鼠脑膜中动脉直径和大鼠面部血流(分别为左侧条纹柱和右侧条纹柱)方面诱导出可比较的增加百分数(基线的100-120％)。就这两项测量而言，用肽拮抗剂CGRP(8-37)进行的预处置对随后静脉内给药的hαCGRP产生50％抑制(实心柱)。在每只动物(n＝5只大鼠)中同时测量颅内动脉直径和面部血流。数据为平均值±sem，其中与相应的单独hαCGRP相比，*为p＜0.05，且**为p＜0.01。
图4.在非人类灵长动物激光多普勒面部血流方面对hαCGRP的剂量响应。静脉内给药的hαCGRP在非人类灵长动物(例如普通狨猴)激光多普勒面部血流方面诱导出剂量依赖性增加。动物(n＝6)以30分钟间隔接受增加剂量的hαCGRP。数据为峰相对于基线的变化百分数±sem，其中每只动物作为其自身的对照。
发明内容
本发明涵盖一系列CGRP拮抗剂化合物(包括其药用盐)、组合物、制备这些化合物的方法及在治疗性处置中使用这些化合物的方法。
本发明一个方面为式I的化合物或其药用盐：
其中
R1为氢、氰基、卤素、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、烷基SO2、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、N-烷基哌嗪基或吗啉基；
R2为取代有选自下述的一个取代基的哌啶基：
或R2为
R3为氢、卤素、氰基、烷基、卤代烷基、烷氧基或卤代烷氧基；
R4为氢、卤素、氰基、烷基、卤代烷基、烷氧基或卤代烷氧基；
Ar1为取代有选自下述的0-3个取代基的苯基：氰基、卤素、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基和烷基SO2；
X为O、CH2或NH；且
Y为化学键、O、CH2或NH。
本发明另一个方面为式I的化合物或其药用盐，其中
R1为氢、氰基、氨基、烷基氨基或二烷基氨基；
R2为取代有选自下述的一个取代基的哌啶基：
或R2为
R3为氢或卤素；
R4为氢或卤素；
Ar1为取代有0-2个卤素取代基的苯基；
X为O、CH2或NH；
且Y为O。
本发明另一个方面为式I的化合物或其药用盐，其中R1为氢、氰基、氨基、二甲基氨基或叔丁基氨基；R2为取代有选自下述的一个取代基的哌啶基：
或R2为
Ar1为苯基或二氟苯基；X为O、CH2或NH；且Y为O。
本发明另一个方面为式I的化合物，其中R1为氢或氰基。
本发明另一个方面为式I的化合物，其中R2为N-哌啶基且在4位是取代的。
本发明另一个方面为式I的化合物，其中R2为N-哌啶基且在4位取代有选自下述的取代基：
本发明另一个方面为式I的化合物，其中Ar1为取代有2个卤素取代基的苯基。
本发明另一个方面为式I的化合物，其中Ar1为2，3-二氟苯基。
本发明另一个方面为式I的化合物，其中X为O。
本发明另一个方面为具有下述立体化学的式I的化合物：
本发明另一个方面为式II的化合物或其药用盐：
其中
R2为哌啶基且取代有选自下述的一个取代基：
或R2为
R3为氢或烷基；
R4为氢、卤素、氰基、烷基、卤代烷基、烷氧基或卤代烷氧基；
Ar1为取代有选自下述的0-3个取代基的苯基：氰基、卤素、烷基、卤代烷基、烷氧基和卤代烷氧基；
X为O、CH2或NR3；
Y为化学键、亚甲基、O或NR3。
变量(包括R1、R2、R3、R4、Ar1、X和Y)的任何实例的范围可独立于变量取代基的任何其它实例的范围而使用。因此，本发明包括不同方面的组合。
除非另有说明，这些术语具有以下意义。“烷基”意指由1至6个碳优选为1至3个碳构成的直链或支链烷基。“烯基”意指由2至6个碳构成且具有至少一个双键的直链或支链烷基。“环烷基”意指由3至7个碳构成的单环环系。“羟基烷基”、“烷氧基”及具有取代的烷基部分的其它术语就烷基部分而言包括由1至6个碳原子构成的直链和支链异构体。“卤代烷基”及“卤代烷氧基”包括从单卤素取代的烷基至全卤素取代的烷基的所有卤化异构体。“芳基”包括碳环芳族环系及杂环芳族环系。“氨基”包括伯氨基部分、仲氨基部分及叔氨基部分。“羰基”意指CO。“氧基”意指-O-。“氨基羰基”意指-N(R)C(＝O)-。“氧基羰基”意指-OC(＝O)-。“亚甲基羰基”意指-CH2C(＝O)-。“氨基(氰基)亚氨基甲基”意指-NHC(＝NCN)-。包含括号及多重括号的术语意在向本领域技术人员阐明键合关系。例如，术语诸如((R)烷基)意指进一步经取代基R取代的烷基取代基。
本发明包括所述化合物的所有药用盐形式。药用盐为其中抗衡离子不显著影响所述化合物的生理活性或毒性且功能如同药理等同物的盐。这些盐可按照普通有机技术使用市售试剂来制备。一些阴离子盐形式包括乙酸盐、醋硬脂酸盐、苯磺酸盐、溴化物、氯化物、枸橼酸盐、富马酸盐、葡糖醛酸盐、氢溴酸盐、盐酸盐、氢碘酸盐、碘化物、乳酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、硝酸盐、扑酸盐、磷酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、甲苯磺酸盐及昔萘酸盐。一些阳离子盐形式包括铵盐、铝盐、苄星盐、铋盐、钙盐、胆碱盐、二乙胺盐、二乙醇胺盐、锂盐、镁盐、葡甲胺盐、4-苯基环己胺盐、哌嗪盐、钾盐、钠盐、氨丁三醇盐及锌盐。
本发明一些化合物可按立体异构形式存在，其一种实例如下所示。本发明包括所述化合物的所有立体异构形式及互变异构形式。
合成方法
本发明化合物可通过本领域已知的方法(包括下面描述的那些方法且包括本领域技术范围内的变体)来制备。一些试剂和中间体是本领域已知的。其它试剂和中间体可通过本领域已知的方法使用易于得到的物质来制备。下述方法出于说明目的而非意在限制本发明范围。本领域技术人员应该理解的是，存在多种可用于合成这些化合物的方法且这些化合物的合成不限于下面实施例中提供的方法。未说明的化合物变体及制备这些变体的操作在本领域技术范围内。在合成方案中描述一般结构式及特征的变量不同于权利要求书或说明书其余部分中的变量且不应该与之混淆。这些变量仅用于说明如何制备本发明一些化合物。
在方案中使用的缩写通常符合本领域的惯用意义。在说明书和实施例中使用的化学缩写如下定义：“NaHMDS”表示二(三甲基甲硅烷基)氨基钠；“DMF”表示N，N-二甲基甲酰胺；“MeOH”表示甲醇；“NBS”表示N-溴琥珀酰亚胺；“Ar”表示芳基；“TFA”表示三氟乙酸；“LAH”表示氢化锂铝；“BOC”表示叔丁氧羰基、“DMSO”表示二甲基亚砜；“h”表示小时；“rt”表示室温或保留时间(视情况而定)；“min”表示分钟；“EtOAc”表示乙酸乙酯；“THF”表示四氢呋喃；“EDTA”表示乙二胺四乙酸；“Et2O”表示乙醚；“DMAP”表示4-二甲基氨基吡啶；“DCE”表示1，2-二氯乙烷；“ACN”表示乙腈；“DME”表示1，2-二甲氧基乙烷；“HOBt”表示1-羟基苯并三唑水合物；“DIEA”表示二异丙基乙基胺，“Nf”表示CF3(CF2)3SO2-；且“TMOF”表示原甲酸三甲酯。
下述方案说明了可用于制备式I的化合物的方法。方案I描述的合成方法开始于化合物III，其为文献已知的由商购原料按一步法制备的化合物。III与芳基金属试剂(诸如ArLi或ArMgX)的反应可形成IV，而IV可在环合易位反应(ring-closure metathesis，RCM)下形成V。叔醇V可进行脱羟基化以形成烯VI，而V在标准二羟基化条件下可得到二醇VII。二醇的单保护可得到VIII，而VIII可氧化以得到经保护的羟基酮IX。修饰醇、酮或α-碳的常规反应可得到其它式I的化合物。可选择地，IX可修饰以得到如X那样的多种稠合的杂环并环庚烷衍生物。脱保护可得到相应的醇XI，而醇XI可活化并与不同的胺反应以得到其中X＝O的式II的化合物。XI也可氧化成酮XIII，接着进行碳链延长(Wittig)、还原和水解以得到酸XIV，而酸XIV通过酰胺形成反应可得到其中X＝CH2的式II的化合物。可选择地，醇XI可转化为胺，接着进行脲形成反应以得到其中X＝NH的式II的化合物。方案2提供了制备式I的化合物的可选方法。该方法使用Grubbs环合反应，接着转化为酮，所述酮然后可引入芳基部分。进一步加工以得到醇，所述醇然后可通过本领域已知的方法来转化。
方案1
方案2描述了使用Grubbs环合反应来得到稠合有吡啶环结构的环庚烷环的一些方法。进一步加工以得到式I的化合物。
方案2
方案3描述了使用Grubbs环合反应来得到稠合有吡啶环结构的环庚烷环的可选方法。进一步加工以得到式I的化合物。
方案3
方案4描述了得到稠合有吡啶环结构的环庚烷环接着选择性还原二酮中间体的可选方法。进一步加工以得到式I的化合物。
方案4
方案5描述了得到具有与稠合的吡啶并环庚烷母核相连的碳连接基的式I的化合物的方法。
方案5
方案6描述了在稠合的吡啶并环庚烷母核上产生额外的取代基的一些方法。进一步加工以得到式I的化合物。
方案6
方案7描述了在稠合的吡啶并环庚烷母核上产生额外的芳基取代基的一些方法。进一步加工以得到式I的化合物。
方案7
方案8描述了在稠合的吡啶并环庚烷母核上产生额外的氮连取代基的一些方法。进一步加工以得到式I的化合物。
方案8
方案9描述了得到吡啶并环庚烷母核的N-氧化物类似物的一些方法。进一步加工以得到式I的化合物。
方案9
生物学方法
体外药理学
组织培养
在由含有Earl’s盐及L-谷氨酰胺(Invitrogen)的MEM构成且补充有10％胎牛血清(Invitrogen)的培养基中使SK-N-MC细胞以单层在37℃和5％CO2中生长。
膜制备
粗膜由表达CGRP受体的SK-N-MC细胞制备。细胞用磷酸盐缓冲盐水(155mM NaCl、3.3mM Na2HPO4、1.1mM KH2PO4、pH 7.4)淋洗两次并在4℃在由10mM Tris(pH 7.4)及5mM EDTA构成的低渗溶胞缓冲液中培养5-10分钟。将细胞自培养板转移至聚丙烯管(16×100mm)中并使用多转子(polytron)来匀化。匀化物以32,000×g离心30分钟。将沉淀团块重新悬浮于冷的含有0.1％哺乳动物蛋白酶抑制剂混合剂(Sigma)的低渗溶胞缓冲液中并测定蛋白质浓度。将SK-N-MC匀化物分成等分液且贮存于-80℃。
放射性配体结合测定
本发明化合物使用100％DMSO来增溶及进行连续稀释。将源于化合物连续稀释的等分液再在测定缓冲液(50mM Tris-Cl pH 7.5、5mM MgCl2、0.005％Triton X-100)中稀释25倍并转移(体积为50微升)至96孔测定板中。将[125I]-CGRP(GE Healthcare或Perkin-Elmer)稀释于测定缓冲液中至浓度为72pM且以50微升的体积加到各孔中。将SK-N-MC膜解冻，稀释于含有新鲜0.1％哺乳动物蛋白酶抑制剂混合剂(Sigma)的测定缓冲液中并再次匀化。以100微升的体积加入SK-N-MC匀化物(7微克/孔)。然后将测定板在室温培养2小时。加入过量的冷的洗涤缓冲液(50mM Tris-Cl pH 7.5、0.1％BSA)，由此停止测定，接着立即用预先浸渍于0.5％PEI中的玻璃纤维滤器(Whatman GF/B)过滤。非特异性结合用1μM β-CGRP(Bachem)定义。蛋白质结合放射性使用γ计数器或闪烁计数器来确定。所得到的数据使用四参数竞争结合方程(XLfit v2.0)来分析且将IC50定义为置换50％放射性配体结合所需要的本发明化合物浓度。[125I]-CGRP的最终测定浓度为18pM。针对[125I]-CGRP的平均Kd为25.4pM。本发明所有化合物在至少两次独立的实验中来评价。参见表1中的数据总结。
表1.人类CGRP结合
| 实施例 | 人类CGRP受体IC50(nM) |
| 1 | 2.86 |
| 2 | 0.23 |
| 3 | 1.25 |
| 4 | 0.44 |
| 5 | 4.04 |
| 6 | 0.89 |
| 7 | ＞100 |
| 8 | 1.60 |
| 9 | ＞1000 |
| 实施例 | 人类CGRP受体IC50(nM) |
| 10 | 8.89 |
| 11 | 4.14 |
| 12 | 7.41 |
| 13 | 1.55 |
| 14 | 0.25 |
| 15 | 0.98 |
| 16 | 6.96 |
| 17 | 0.80 |
| 18 | 0.78 |
| 19 | 0.76 |
| 20 | 0.12 |
| 21 | 0.12 |
饱和/Scatchard分析
人类CGRP肽和实施例20之间的相互作用本质使用饱和结合实验来详细研究。浓度增加的[125I]-CGRP与SK-N-MC细胞膜的结合在不存在实施例20(对照条件)和存在300pM和600pM实施例20的情况下来测量。饱和数据使用单一位点结合方程来分析以评估表观平衡解离常数(Kd)和结合位点最大数目(Bmax)(Prizm v4.0，Graphpad)。测量并比较了实施例20的加入对[125I]-CGRP结合的结合参数(Kd和Bmax)的影响。实施例20剂量依赖性地增加了[125I]-CGRP结合的Kd，而没有显著性地改变[125I]-CGRP结合的结合位点最大数目(Bmax)。这表明实施例20对[125I]-CGRP结合的抑制机制是竞争性的。实施例20在3次独立的实验中来评价(数据集例如参见“图1.[125I]-CGRP饱和/Scatchard分析”)。
功能性拮抗/Schild分析
对CGRP受体复合物的激动剂刺激导致环磷腺苷(cyclic AMP)(3’5’-环状单磷酸腺苷)经由腺苷酸环化酶的Gs依赖性活化来产生(Juaneda C et al.，TiPS，2000；21：432-438)。因此，CGRP受体拮抗剂在天然表达CGRP受体复合物的SK-N-MC细胞中抑制由CGRP诱导的环磷腺苷形成(Doods H et al.，Br J Pharmacol，2000；129(3)：420-423)。实施例20阻断由CGRP诱导的cAMP形成的能力使用商购的cAMP HTRF试剂盒(目录编号62AM2PEC，CisBioInternational)来评价。使用Schild分析模式，其可用于研究拮抗机制。在该模式中，由CGRP刺激的cAMP产生的剂量响应在只存在CGRP和存在各种浓度的实施例20的情况下下来得到。简言之，将实施例20与SK-N-MC细胞一起预培养15分钟。加入各种浓度的CGRP并将细胞在室温培养30分钟。细胞用溶胞试剂溶解且cAMP浓度通过HTRF根据制造商说明书来确定。对使用已知量的cAMP得到的标准曲线进行平行评价以将HTRF比值换算为nM cAMP。然后所得到的曲线使用Gaddum/Schild方程[独立使用和与整体拟合联用](Prizm v4.0，Graphpad)来评价。实施例20引起CGRP EC50的右移但不改变最大响应。为了得到整体拟合，共享下述参数(顶值(top)、底值(bottom)、logEC50、Hill斜率和pA2)且同时拟合所有曲线。对于两次独立的实验，使用非限制性Schild斜率进行的整体拟合所得到的Schild斜率值为1.17和0.8，这与简单竞争性拮抗剂的预期为约1的Schild斜率一致(方法学参见Moltulsky et al.，2003，Graphpad Software Inc.)。实施例20的两组数据集的平均Kb(使用的Schild斜率为1)为247±40pM(在Schild斜率为1的情况下就实施例20所标绘的整体拟合数据集例如参见“图2.功能性拮抗/Schild分析”)。
测定小分子CGRP受体拮抗剂在哺乳动物中的体内效能的非末端方法
概述
已提出将对由降钙素基因相关肽(CGRP)诱导的级联事件(包括颅内动脉的神经性血管舒张)的阻断用于偏头痛的治疗(Edvinsson et al CNS Drugs200115：745；Benemei et al Curr Opin Pharmacol 20099：9)，然而新颖的小分子CGRP受体拮抗剂已显示出物种特异性差异，且在啮齿动物中显示出相对弱的活性(Mallee et al.J Biol Chem 2002277：14294)，这需要新的模型来评价体内效能。非人类灵长动物(例如狨猴)为已知具有人样CGRP受体药理学的唯一动物，这如下证实：在它们的RAMP1序列中存在特异性氨基酸残基(Trp74)，其是所述人类受体表型的特征(Mallee et al.J Biol Chem 2002277：14294)。因为目前的偏头痛模型主要使用大鼠(Escott et al.Brain Res1995669：93和Williamson et al.Cephalalgia 199717：525)或是在灵长动物中进行的侵入性末端操作(terminal procedure)(Doods et al.Br J Pharmacol 2000129：420)，所以开发出在非人类灵长动物中评价CGRP受体拮抗剂体内效能的新颖非侵入性存活模型。尽管已知三叉神经的活化既增加颅内血流(Goadsby & Edvinsson，1993)又增加面部血流(Doods et al.，2000)，但在同一动物中对面部血流和颅内动脉舒张之间的直接关系进行证实不是已知的。因此，开始在非人类灵长动物中进行研究前，在大鼠中直接对代表末端研究中颅内动脉舒张的面部血流进行激光多普勒测量，这在同一动物中既测量了颅内动脉直径又测量了面部血流改变(参见“图3.在大鼠中对代表颅内动脉舒张的面部血流进行的直接确定”)。在这两项测量中，可比较的增加通过静脉内给药CGRP来诱导且通过肽拮抗剂hαCGRP(8-37)来阻断。接着确定了通过静脉内给药CGRP来诱导面部血流改变的方法，其就用异氟烷麻醉的使用hαCGRP(8-37)的大鼠而言为恢复模型。然后在非人类灵长动物中实施该啮齿动物存活方法，并完成对静脉内给药CGRP活性进行表征的剂量-响应研究(参见“图4.在非人类灵长动物激光多普勒面部血流方面对hαCGRP的剂量响应”)。肽和小分子CGRP受体拮抗剂用于确定非人类灵长动物模型。用小分子拮抗剂或hαCGRP(8-37)进行的预处置剂量依赖性地抑制了由静脉内给药的CGRP刺激的灵长动物面部血流增加(参见“表2.在非人类灵长动物(例如普通狨猴)激光多普勒面部血流方面对由CGRP诱导的增加的抑制”)。用拮抗剂进行的后处置也逆转了由CGRP诱导的面部血流增加(未显示)。该存活模型提供了新颖的非侵入性恢复操作，其用于评价CGRP受体拮抗剂在非人类灵长动物或具有人类RAMP1(Trp74)且具有相似CGRP受体药理学的转基因动物中的预防和中断作用，其就对颅内动脉直径的活性而言作为代表性标志。
动物
成年雄性和雌性普通狨猴(Callithrix jacchus)购自Harlan且体重为350-550g者作为受试对象。
麻醉和手术准备
动物在诱导室中通过吸入异氟烷来麻醉(以4-5％快速诱导且以1-2.5％维持；Solomon et al.，1999)。麻醉如下维持：经由面罩或通过插管和换气(伴有血液气体监测)来持续递送空气∶氧气(50∶50)和异氟烷。体温通过置于具有直肠探头的自动化温度控制表面上来维持在38±0.5℃。通过施用脱毛膏和/或进行刮剃而由一侧面部或两侧面部除去一小片皮毛(约1.5cm2)。夹持手术区域并用聚维酮碘处理。将静脉内管线置于任意可用的静脉(例如隐静脉)中以给药测试化合物和CGRP受体激动剂，且如果需要，则抽取血液样品(最大2.5ml，10％)以进行血液气体监测和内容物分析。当研究结束时，静脉内给药5％葡萄糖溶液以维持血糖水平。麻醉深度如下监测：分别使用非侵入性臂套管方法和脉搏血氧计来测量血压和心率。可静脉内给药胍乙啶5-10mg/kg(按需补充有静脉内给药的5mg/kg)以稳定在反复刺激-诱导血流改变中观察到的面部血流峰值通量(Escott et al.，1999)。微血管血流如下监测：将自身具有粘性的激光多普勒流量探头与面部皮肤接附。
化合物给药
测试化合物可如下给药：静脉内给药(0.01-5ml/kg)、肌内给药(0.01-0.5ml/kg)、皮下给药(0.01-5ml/kg)或口服给药(0.1-10ml/kg)(Diehl et al.，2001)。CGRP受体激动剂可如下给药：静脉内给药(0.01-5ml/kg)、皮内给药(10-100μl/位点)或皮下给药(10-100μl/位点)。
激光多普勒流量计
面部血流的对照增加通过给药血管舒张剂诸如CGRP(静脉内给药0.05-100μg/kg或皮内给药2-20pmol/位点)来诱导。测试化合物或媒介物在重复给药血管舒张剂之前(预处置)或之后(后处置)来给药，这提供了评价预防作用或治疗作用的能力。持续监测血压以保证足够的麻醉深度，且调整麻醉剂以维持与预处置值匹配的稳定水平。在采集激光多普勒流量计数据期间，可将异氟烷减少至0.25-0.75％，这是因为在先前的狨猴电生理学研究中发现记录结果对异氟烷浓度是敏感的(Solomon，1999)。为了减少所用动物的数目，测试化合物对由静脉内给药的血管舒张剂诱导的血流改变的作用可在一个实验期中重复至多6次。
恢复
将动物放回至转运笼中，所述转运笼被置于温度控制表面上以使动物保持温暖直到完全苏醒且能活动。动物可在休息7-14天后来再次测试，且可按7-14天间隔根据动物健康情况来重复测试。
参见Diehl KH，Hull R，Morton D，Pfister R，Rabemampianina Y，Smith D，Vidal JM，van de Vorstenbosch C.A good practice guide to the administration ofsubstances and removal of blood，including routes and volumes.J Appl Toxicol.2001 Jan-Feb；21(1)：15-23；Doods H，Hallermayer G，Wu D，Entzeroth M，Rudolf K，Engel W，Eberlein W.Pharmacological profile of BIBN4096BS，thefirst selective small molecule CGRP-receptor antagonist.Br J Pharmacol.2000Feb；129(3)：420-3；Edvinsson L.Calcitonin gene-related peptide(CGRP)and thepathophysiology of headache：therapeutic implications.CNS Drugs 2001；5(10)：745-53；Escott KJ，Beattie DT，Connor HE，Brain SD.Trigeminal ganglionstimulation increases facial skin blood flow in the rat：a major role for calcitoningene-related peptide.Brain Res.1995 Jan 9；669(1)：93-9；Goadsby PJ，Edvinsson L.The trigeminovascular system and migraine：studies characterizingcerebrovascular and neuropeptide changes seen in humans and cats.Ann Neurol.1993 Jan；33(1)：48-56；Lassen LH，Haderslev PA，Jacobsen VB，Iversen HK，Sperling B，Olsen J.CGRP may play a causative role in migraine.Cephalalgia，2002，22，54-61；Mallee JJ，Salvatore CA，LeBourdelles B，Oliver KR，Longmore J，Koblan KS，Kane SA.RAMP1 determines the species selectivity ofnon-peptide CGRP receptor antagonists.J Biol Chem.2002 Feb 14[epub aheadof print]；Solomon SG，White AJ，Martin PR.Temporal contrast sensitivity in thelateral geniculate nucleus of a New World monkey，the marmoset Callithrixjacchus，J Physiol.1999 Jun 15；517(Pt 3)：907-17。
表2.在非人类灵长动物(例如普通狨猴)激光多普勒面部血流方面
对由CGRP诱导的增加的抑制
药物组合物及治疗方法
式I的化合物抑制CGRP受体。因此，它们可用于治疗与异常CGRP水平相关或其中对CGRP水平的调节可具有治疗益处的病症或障碍。
因此，本发明另一个方面为药物组合物，其包含式I的化合物及药用辅料、载体或稀释剂。
化合物通常以药物组合物的形式来给药，所述药物组合物由治疗有效量的式I的化合物或其药用盐及药用载体构成且可含有常规赋型剂。治疗有效量为本领域技术人员确定的提供有意义的患者益处所需要的量。药用载体为具有可接受安全性的常规已知载体。组合物涵盖所有常见的固体及液体形式，包括胶囊剂、片剂、锭剂和粉末剂及液体混悬剂、糖浆剂、酊剂和溶液剂。固体组合物可成形为定时释放制剂或持续释放制剂。组合物使用普通制剂技术及常规赋型剂(诸如粘合剂及润湿剂)和媒介物(诸如水及醇)来制备。
通常将固体组合物配制成每次给药时提供约1至约1000毫克活性成分的剂量单位。固体剂量单位的一些实例为0.1毫克、1毫克、10毫克、100毫克、500毫克及1000毫克。液体组合物的单位剂量范围通常为1-100毫克/毫升。液体剂量单位的一些实例为0.1毫克/毫升、1毫克/毫升、10毫克/毫升、25毫克/毫升、50毫克/毫升及100毫克/毫升。
本发明涵盖所有常规给药模式，包括口服方法、肠胃外方法、鼻内方法、舌下方法及经皮方法。典型地，日剂量将为每日0.01-100毫克/千克体重。通常，口服方法需要较多的化合物，而肠胃外方法需要较少的化合物。然而，具体的给药方案应该由医师使用合理的医药判断来确定。
在受体水平针对CGRP的抑制剂被视为可用于其中已出现过度CGRP受体活化的病生理病症。一些所述病症包括神经性血管舒张(neurogenicvasodilation)、神经性炎症(neurogenic inflammation)、偏头痛(migraine)、丛集性头痛(cluster headache)及其它头痛、热损伤(thermal injury)、循环性休克(circulatory shock)、更年期潮红(menopausal flushing)及哮喘(asthma)。CGRP受体的活化与偏头痛的发病相关(Edvinsson L.CNS Drugs 2001，15(10)，745-53；Williamson，D.J.Microsc.Res.Tech.2001，53，167-178；和Grant，A.D.Brit.J.Pharmacol.2002，135，356-362)。CGRP的血清水平在偏头痛期间是升高的(Goadsby P.J.等人，Ann.Neurol.1990，28，183-7)且用抗偏头痛药物进行的治疗使CGRP的水平恢复至与减轻头痛相符的正常水平(Gallai V.等人，Cephalalgia 1995，15：384-90)。偏头痛患者与对照患者相比呈现出升高的基线CGRP水平(Ashina M.等人，Pain 2000，86(1-2)，133-8)。静脉内输注的CGRP在偏头痛患者中产生持续的头痛(Lassen L.H.等人，Cephalalgia.2002，22(1)，54-61)。对狗及大鼠进行的临床前研究报导，用肽拮抗剂CGRP(8-37)阻断全身的CGRP不会改变静止时的全身血液动力学，也不会改变静止时的区域血流(Shen，Y-T.等人，J Pharmacol.Exp.Ther.2001，298，551-8)。因此，CGRP受体拮抗剂可作为用于偏头痛的新颖疗法，所述疗法可避免与非选择性5-HT1B/1D激动剂即“曲坦类”(例如舒马曲坦)相关的心血管倾向即活性血管收缩。
本发明另一个方面为抑制CGRP受体的方法，其包括使CGRP受体与式I的化合物或其药用盐接触。
本发明另一个方面为治疗伴有异常CGRP水平的病症的方法，其包括向患者给药治疗有效量的式I的化合物。
本发明另一个方面为式I的化合物在制备用于治疗与异常CGRP水平相关的病症的药物中的用途。
本发明另一个方面为治疗偏头痛或头痛的方法。
本发明另一个方面涉及治疗以下疾病的方法：炎症(尤其是神经性炎症)、疼痛、热损伤、循环性休克、糖尿病、雷诺综合征(Reynaud’s syndrome)、外周动脉不足(peripheral arterial insufficiency)、蛛网膜下/颅出血(subarachnoid/cranial hemorrhage)、肿瘤生长、与更年期相关的潮红及对其进行的治疗可通过给药包含本申请定义的式(I)的化合物的药物组合物来拮抗CGRP受体而发挥作用的其它病症。
本发明另一个方面涉及选自下述的方法：(a)在肠粘膜中进行免疫调节、(b)对心脏过敏性损伤(cardiac anaphylactic injury)采取保护性措施、(c)刺激或预防白介素-1b(IL-1b)对骨再吸收的刺激、(d)调节脊索神经元(spinal neuron)中NK1受体的表达及(e)治疗气道炎性疾病及慢性阻塞性肺疾病(包括哮喘)。参见：(a)Calcitonin Receptor-Like Receptor Is Expressed onGastrointestinal Immune Cells.Hagner，Stefanie；Knauer，Jens；Haberberger，Rainer；Goeke，Burkhard；Voigt，Karlheinz；McGregor，Gerard Patrick.Instituteof Physiology，Philipps University，Marburg，Germany.Digestion(2002)，66(4)，197-203；(b)Protective effects of calcitonin gene-related peptide-mediatedevodiamine on guinea-pig cardiac anaphylaxis.Rang，Wei-Qing；Du，Yan-Hua；Hu，Chang-Ping；Ye，Feng；Tan，Gui-Shan；Deng，Han-Wu；Li，Yuan-Jian.Schoolof Pharmaceutical Sciences，Department of Pharmacology，Central SouthUniversity，Xiang-Ya Road 88，Changsha，Hunan，Naunyn-Schmiedeberg’sArchives of Pharmacology(2003)，367(3)，306-311；(c)The experimental studyon the effect calcitonin gene-related peptide on bone resorption mediated byinterleukin-1.Lian，Kai；Du，Jingyuan；Rao，Zhenyu；Luo，Huaican.Departmentof Orthopedics，Xiehe Hospital，Tongji Medical College，Huazhong Universityof Science and Technology，Wuhan，Peop.Rep.China.Journal of Tongji MedicalUniversity(2001)，21(4)，304-307；(d)Calcitonin gene-related Peptide regulatesexpression of neurokinin 1 receptors by rat spinal neurons.Seybold VS，McCarson KE，Mermelstein PG，Groth RD，Abrahams LG.J.Neurosci.200323(5)：1816-1824.epartment of Neuroscience，University of Minnesota，Minneapolis，Minnesota 55455，and Department of Pharmacology，Toxicology，and Therapeutics，University of Kansas Medical Center，Kansas City，Kansas66160；(e)Attenuation of antigen-induced airway hyperresponsiveness inCGRP-deficient mice.Aoki-Nagase，Tomoko；Nagase，Takahide；Oh-Hashi，Yoshio；Shindo，Takayuki；Kurihara，Yukiko；Yamaguchi，Yasuhiro；Yamamoto，Hiroshi；Tomita，Tetsuji；Ohga，Eijiro；Nagai，Ryozo；Kurihara，Hiroki；Ouchi，Yasuyoshi.Department of Geriatric Medicine，Graduate School of Medicine，University of Tokyo，Tokyo，Japan.American Journal of Physiology(2002)，283(5，Pt.1)，L963-L970；(f)Calcitonin gene-related peptide as inflammatorymediator.Springer，Jochen；Geppetti，Pierangelo；Fischer，Axel；Groneberg，David A.Charite Campus-Virchow，Department of Pediatric Pneumology andImmunology，Division of Allergy Research，Humboldt-University Berlin，Berlin，Germany.Pulmonary Pharmacology & Therapeutics(2003)，16(3)，121-130；和(g)Pharmacological targets for the inhibition of neurogenic inflammation.Helyes，Zsuzsanna；Pinter，Erika；Nemeth，Jozsef；Szolcsanyi，Janos.Department ofPharmacology and Pharmacotherapy，Faculty of Medicine，University of Pecs，Pecs，Hung.Current Medicinal Chemistry：Anti-Inflammatory & Anti-AllergyAgents(2003)，2(2)，191-218。
本发明另一个方面涉及联用式I的化合物与选自COX-2抑制剂、NSAIDS、阿司匹林、对乙酰氨基酚、曲坦类、麦角胺及咖啡因的一种或多种药物来治疗偏头痛的方法。
“偏头痛”、“头痛”及相关术语如医师所理解的那样。偏头痛涵盖所有类型的偏头痛，包括普通型(common)、传统型(classic)、丛集型(cluster)、闪电型(fulgurating)、偏瘫型(hemiplegic)、眼肌麻痹型(opthalmoplegic)及opthomalmic。
“治疗有效”是指医师所理解的有意义的患者益处。
“患者”是指医师所确定的可得益于治疗的人们。
具体实施方式
缩写通常符合本领域的惯用意义。在说明书和实施例中使用的化学缩写如下定义：“NaHMDS”表示二(三甲基甲硅烷基)氨基钠；“DMF”表示N，N-二甲基甲酰胺；“MeOH”表示甲醇；“NBS”表示N-溴琥珀酰亚胺；“Ar”表示芳基；“TFA”表示三氟乙酸；“LAH”表示氢化锂铝；“BOC”表示叔丁氧羰基、“DMSO”表示二甲基亚砜；“h”表示小时；“rt”表示室温或保留时间(视情况而定)；“min”表示分钟；“EtOAc”表示乙酸乙酯；“THF”表示四氢呋喃；“EDTA”表示乙二胺四乙酸；“Et2O”表示乙醚；“DMAP”表示4-二甲基氨基吡啶；“DCE”表示1，2-二氯乙烷；“ACN”表示乙腈；“DME”表示1，2-二甲氧基乙烷；“HOBt”表示1-羟基苯并三唑水合物；“DIEA”表示二异丙基乙基胺，“Nf”表示CF3(CF2)3SO2-；且“TMOF”表示原甲酸三甲酯。
本申请使用的缩写如下定义：“1×”表示一次；“2×”表示两次；“3×”表示三次；“℃”表示摄氏度；“eq”表示当量；“g”表示克；“mg”表示毫克；“L”表示升；“mL”或“ml”表示毫升；“μL”表示微升；“N”表示当量浓度；“M”表示摩尔浓度；“mmol”表示毫摩尔；“min”表示分钟；“h”表示小时；“rt”表示室温；“RT”表示保留时间；“atm”表示大气压；“psi”表示磅每平方英寸；“conc.”表示浓的；“sat”或“sat’d”表示饱和的；“MW”表示分子量；“mp”表示熔点；“ee”表示对映异构体过量；“MS”或“Mass Spec”表示质谱；“ESI”表示电喷雾离子化质谱；“HR”表示高分辨率；“HRMS”表示高分辨率质谱；“LCMS”表示液相色谱-质谱；“HPLC”表示高效液相色谱；“RP HPLC”表示反相HPLC；“TLC”或“tlc”表示薄层色谱；“NMR”表示核磁共振光谱；“1H”表示质子；“δ”表示德尔塔；“s”表示单峰；“d”表示二重峰；“t”表示三重峰；“q”表示四重峰；“m”表示多重峰；“br”表示宽峰；“Hz”表示赫兹；及“α”、“β”、“R”、“S”、“E”和“Z”为本领域技术人员熟悉的立体化学符号。
在Bruker AC300或AC500上记录质子磁共振光谱(1H NMR)。所有光谱在所示溶剂中来确定，化学位移以相对于内标四甲基硅烷(TMS)处于低场的δ单位来报道，且质子间偶合常数以赫兹(Hz)来报道。裂分模式如下指定：s为单峰；d为二重峰；t为三重峰；q为四重峰；m为多重峰；br为宽峰。低分辨率质谱(MS)及表观分子量(MH+)或(M-H)+在Micromass Platform上来确定。元素分析以重量百分数来报道。产物如下纯化：制备性HPLC，使用色谱柱YMC S5ODS(30×100mm)，流速为40.0毫升/分钟，梯度时间为8.0分钟，溶剂组成以40％MeOH-60％H2O-0.1％TFA为起始，且溶剂组成以95％MeOH-5％H2O-0.1％TFA为结束。产物如下分析：HPLC仪器，使用XTERA色谱柱(3.0×50mm S7)，始于溶剂A(10％MeOH-90％水-0.1％三氟乙酸(TFA))，且历时2分钟的梯度时间达到溶剂B(10％水-90％甲醇-0.1％TFA)。流速为5毫升/分钟，且产物的保留时间以220nm的波长来测量。
中间体1
4-碘丁-1-烯
在烘干的500mL圆底烧瓶(t＝g)中将三苯基膦(22.40g，85mmol)和咪唑(5.82g，85mmol)在CH2Cl2(200mL)中的溶液冷却至0℃，得到无色溶液。小心加入碘(21.68g，85mmol)。15分钟后，逐滴加入3-丁烯-1-醇(7.0mL，81mmol)，并将混合物温热至室温过夜。将CH2Cl2真空除去但不进行加热(产物极易挥发！)，得到橙色浆液，其用戊烷稀释并过滤通过硅藻土垫和硅胶层。然后将溶剂真空除去而不进行温热。得到微黄色油状物即粗4-碘丁-1-烯(11.51g，78％)，其直接用于以下反应。
中间体2
5-(2，3-二氟苯基)壬-1，8-二烯-5-醇
在500mL圆底烧瓶(t＝g)中向Et2O(100mL)中加入粗4-碘丁-1-烯(11.51g，63.2mmol)，得到无色溶液。在氮气下冷却至-78℃后，经由注射器逐滴加入tBuLi(叔丁基锂)(80mL，136mmol)。将混合物缓慢温热至室温同时搅拌2小时。在室温保持20分钟后，将混合物冷却至-78℃并经由注射器逐滴加入2，3-二氟苯甲酸乙酯(4.28mL，28.7mmol)。历时30分钟将混合物逐渐温热至室温。反应混合物用水淬灭并将挥发物蒸发。将残留物在水和EtOAc之间分配。分离各层，有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到淡黄色油状物。用40％Et2O/己烷纯化，得到所需产物，其为无色油状物(1.41g，19％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.31-7.22(m，1H)，7.10-7.03(m，2H)，5.82-5.70(m，2H)，4.97-4.85(m，4H)，2.20-2.00(m，4H)，2.00-1.75(m，4H)。
中间体3
(Z)-1-(2，3-二氟苯基)环庚-4-烯醇
在500mL圆底烧瓶(t＝g)中向CH2Cl2(50mL)中加入5-(2，3-二氟苯基)壬-1，8-二烯-5-醇(1.15g，4.56mmol)，得到无色溶液。加入Grubbs II(0.193g，0.228mmol)，并将混合物在45℃加热19小时。TLC表明显著转化为极性较大的化合物。将物质与68908-184合并，浓缩至干且残留物用50％Et2O/己烷纯化。合并主峰并浓缩，得到无色油状物(0.761g，74.5％)。1H NMR显示大部分为所需产物(与稍后使用Grubbs I催化剂来合成的化合物相同)，且次要组分具有异构化的双键。
中间体4
(Z)-5-(2，3-二氟苯基)环庚-1-烯
在100mL圆底烧瓶(t＝g)中向CH2Cl2(16mL)中加入(Z)-1-(2，3-二氟苯基)环庚-4-烯醇(872mg，3.89mmol)，得到无色溶液。加入三乙基甲硅烷(3.11mL，19.44mmol)，接着加入TFA(8.00mL)。将混合物在室温搅拌2.5小时。TLC表明显著转化为极性较小的化合物。将其浓缩并通过FCC用20％Et2O/己烷纯化，得到所需产物，其为无色油状物(769mg，95％)。产物被快速洗脱出来。1H NMR证实所述结构(主峰与稍后合成的化合物相同)。
中间体5
5-(2，3-二氟苯基)-2-羟基环庚酮
参见Plietker，B.J.Org.Chem.2004，69，8287-8296)。向500mL圆底烧瓶(t＝g)中用搅拌棒加入碳酸氢钠(827mg，9.84mmol)。加入三氯化钌(III)(8.17mg，0.039mmol)(在参考文献中使用水溶液但其难以完全溶解)。向固体中加入水(3.94mL)、EtOAc(20ml)和MeCN(乙腈)(20ml)，得到棕色混悬液。一次性加入过一硫酸氢钾(1.21E+04mg，19.69mmol)，形成亮黄色混悬液。将混合物冷却至-20℃。加入(Z)-5-(2，3-二氟苯基)环庚-1-烯(820mg，3.94mmol)(用EtOAc/MeCN(1/1，7.2ml)洗涤)。颜色立即变为微黄褐色。将反应混合物在-20℃至-15℃搅拌1.5小时。TLC显示没有发生反应。温热至0℃且保持10分钟，但TLC显示反应无很大改善。将其温热至室温且保持15-20分钟。TLC显示一个极性较小的主要斑点消失(次要斑点保留)且出现极性较大的稍具紫外活性的斑点。将固体过滤并用EtOAc洗涤。有机溶液用NaHSO3水溶液洗涤。有机层用Na2SO4干燥并浓缩，得到无色油状物。其通过FCC用5％MeOH/CH2Cl2纯化。合并极性较大的峰并浓缩，得到无色油状物(169mg，18％)。其直接用于以下保护反应。
实施例1
4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-羧酸5-(2，3-二氟苯基)-2-氧代环庚基酯
在烘干的50mL圆底烧瓶(t＝g)中向THF(3mL)中加入5-(2，3-二氟苯基)-2-羟基环庚酮(22mg，0.092mmol)和氯甲酸4-硝基苯基酯(20.30mg，0.101mmol)，得到无色溶液。加入DMAP(15.66mg，0.128mmol)，并将混合物在室温搅拌3小时。TLC显示极性较小的新斑点(极性比上述氯化物大)但主要为起始原料。将反应混合物搅拌过夜(24小时)。向上述反应混合物中加入1-(哌啶-4-基)-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2(3H)-酮(53.6mg，0.184mmol)，接着加入许尼希(Hunig’s)碱(0.040mL，0.230mmol)。将所得到的混合物在室温搅拌过夜。LCMS显示两个接近的小峰，其分子量为484。22h：其用水稀释并用EtOAc萃取。有机层用水和盐水洗涤3次，用Na2SO4干燥并浓缩，得到黄褐色油状物。用8％MeOH/CH2Cl2进行FCC，得到所需产物，其为两种非对映异构体的混合物(11.7mg，26％)。LCMS：M+H＝485。
中间体6
壬-1，8-二烯-5-酮
在烘干的500mL圆底烧瓶(t＝g)中向THF(80mL)中加入4-戊烯酰氯(6.04mL，54.7mmol)，得到黄褐色溶液。冷却至-78℃后，历时90分钟经由注射器加入3-丁烯基溴化镁(115mL，57.5mmol)。温热至室温且保持3小时后，反应混合物用饱和NH4Cl溶液淬灭。将THF除去且残留物用EtOAc萃取。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到微黄色油状物。通过FCC用40％Et2O/己烷纯化(两批)，得到产物，其为无色油状物(5.13g，68％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ5.84-5.68(m，2H)，5.05-4.90(m，4H)，2.49(t，J＝7.4Hz，4H)，2.35-2.20(m，4H)。
中间体7
5-(2，3-二氟苯基)壬-1，8-二烯-5-醇
在烘干的250mL圆底烧瓶(t＝g)中向THF(60mL)中加入1-溴-2，3-二氟苯(2.304mL，20.58mmol)，得到无色溶液。冷却至-78℃后，经由注射器逐滴加入BuLi(丁基锂)(8.23mL，20.58mmol)。将混合物在-78℃搅拌20分钟，且经由导管逐滴加入壬-1，8-二烯-5-酮(2.37g，17.15mmol)(与无水苯共沸)(及用6ml THF淋洗)。历时1小时将混合物温热至室温。用水淬灭并除去THF溶剂。残留的混合物用EtOAc萃取。分离各层，有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到黄色油状物。残留物通过FCC用35％Et2O/己烷纯化。合并所需馏分并浓缩，得到产物，其为无色油状物(2.39g，55.3％)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.30-7.22(m，1H)，7.10-7.03(m，2H)，5.82-5.70(m，2H)，4.97-4.85(m，4H)，2.20-2.00(m，4H)，2.00-1.75(m，4H)。
中间体8
(Z)-1-(2，3-二氟苯基)环庚-4-烯醇
在1L圆底烧瓶(t＝g)中向CH2Cl2(600mL)中加入5-(2，3-二氟苯基)壬-1，8-二烯-5-醇(1.76g，6.98mmol)，得到无色溶液。加入Grubbs I(0.175g，0.209mmol)，并将混合物在40℃加热2小时。TLC表明显著转化为极性较大的化合物(一些杂质来自残留的起始原料)。与68908-198合并，浓缩至干且残留物用50％Et2O/己烷纯化(两次)。合并主峰并浓缩，得到淡绿色油状物(1.40g，89.2％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.34-7.25(m，1H)，7.08-7.00(m，2H)，5.90-5.80(m，2H)，2.60-2.48(m，2H)，2.21(t，J＝7.0Hz，2H)，2.10-1.98(m，2H)，1.90-1.75(m，2H)。
中间体9
(Z)-5-(2，3-二氟苯基)环庚-1-烯
在250mL圆底烧瓶(t＝g)中向CH2Cl2(40mL)中加入(Z)-1-(2，3-二氟苯基)环庚-4-烯醇(2.05g，9.14mmol)，得到无色溶液。加入三乙基甲硅烷(7.30mL，45.7mmol)，接着加入TFA(20mL)。将混合物在室温搅拌3小时。TLC显示完全转化(Rf＝0.42(纯己烷))。将其浓缩，得到双层油状物(下层不溶于己烷中)。通过FCC仅使用己烷来纯化，得到所需产物，其为无色油状物(1.684g，88％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.00-6.90(m，3H)，5.90-5.82(m，2H)，3.20-3.05(m，1H)，2.40-2.15(m，4H)，1.90-1.78(m，2H)，1.60-1.40(m，2H)。
中间体10
5-(2，3-二氟苯基)环庚烷-1，2-二醇
参见D.A.Spiegel et al.Tetrahedron 2002，58，6545-6554。在250mL圆底烧瓶(t＝g)中向丙酮(9mL)和水(0.18mL)中加入(Z)-5-(2，3-二氟苯基)环庚-1-烯(1.249g，6.00mmol)和NMO(1.546g，13.19mmol)，得到白色混悬液。加入四氧化锇(0.301mL，0.024mmol)(浓度为2.5wt％的2-甲基-2-丙醇溶液)。将混合物在室温搅拌。NMO历时30分钟逐渐溶解，得到黄色溶液。1h：TLC显示完全转化为极性大的化合物。加入亚硫酸氢钠(200mg)并继续搅拌30分钟。除去丙酮且残留物用EtOAc萃取三次。合并的有机层用盐水洗涤，干燥并浓缩，得到白色固体(粗重1.7g)。其直接用于以下反应。
中间体11
2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-5-(2，3-二氟苯基)环庚醇
在250mL圆底烧瓶(t＝g)中向DMF(20mL)中加入5-(2，3-二氟苯基)环庚烷-1，2-二醇(1.454g，6.0mmol)(与无水苯共沸的粗品)，得到无色溶液。加入TBS-Cl(0.995g，6.60mmol)和咪唑(0.980g，14.40mmol)，并将混合物在室温搅拌5小时。TLC(2/1己烷/EtOAc)表明完全转化为两种主要化合物。其用水稀释并用EtOAc萃取两次。合并的有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到无色油状物。通过FCC用30％EtOAc/己烷纯化，得到单保护的所需产物，其为宽峰。合并产物馏分并浓缩，得到无色油状物(1.79g，84％(两步))。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.02-6.85(m，3H)，3.98-3.70(m，2H)，3.18-3.02(m，1H)，2.15-1.82(m，4H)，1.80-1.45(m，4H)，0.91(s，9H)，0.90(2s，6H)。
中间体12和中间体13
(2R，5R)-2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-5-(2，3-二氟苯基)环庚酮
在250mL圆底烧瓶(t＝g)中向CH2Cl2(50mL)中加入2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-5-(2，3-二氟苯基)环庚醇(1.73g，4.85mmol)，得到无色溶液。一次性加入戴斯-马丁高碘剂(Dess-Martin Periodinane)(2.264g，5.34mmol)，并将混合物在室温搅拌过夜。17h：TLC显示完全转化。其用Et2O稀释并用40ml饱和Na2S2O3和Na2HCO3溶液(1/1混合物)处理直到乳状溶液变为澄清(10分钟)。分离各层且水层用Et2O萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到无色油状物(其中一些固体不溶于己烷中)。通过FCC用40％Et2O/己烷纯化，得到两个峰。将它们各自合并并浓缩。极性较小的主要物质(978mg，55％)为无色油状物。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.02-6.90(m，3H)，4.34(d，J＝4.6Hz，1H)，2.82-2.75(m，2H)，2.54-2.46(m，1H)，2.45-2.32(m，1H)，2.17-1.98(m，2H)，1.90-1.68(m，3H)，0.94(s，9H)，0.08(s，6H)；13CNMR(125MHz，CDCl3)δ213.4，150.7(dd，J＝247.6和13.4Hz)，147.8(dd，J＝245.7和13.4Hz)，137.5(d，J＝11.5Hz)，127.7，122.2，114.7(d，J＝17.3Hz)，79.0，40.0，39.2，33.2，30.7，29.4，25.8，18.2，-5.0。极性较大的次要物质在静置后固化，得到白色固体(698mg，39％)。其用己烷重结晶且X射线分析证实反立体化学(anti-stereochemistry)关系。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.10-6.97(m，2H)，6.97-6.90(m，1H)，4.34(dd，J＝3.0和9.7Hz，1H)，3.04-2.94(m，1H)，2.80-2.70(m，1H)，2.62-2.50(m，1H)，2.18-1.72(m，6H)，0.90(s，9H)，0.10(s，3H)，0.06(s，3H)；13C NMR(125MHz，CDCl3)δ211.0，150.8(dd，J＝248.6和13.5Hz)，148.1(dd，J＝246.7和12.5Hz)，136.4(d，J＝11.5Hz)，124.2，122.3，115.1(d，J＝17.3Hz)，78.4，40.3，39.4，34.3，33.0，30.4，25.9，18.5，-4.5，-5.1。
中间体14
(6，9-反式)-9-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶
在25mL烧瓶(t＝g)中向乙醇(4mL)中加入(2S，5S)-2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-5-(2，3-二氟苯基)环庚酮(279mg，0.787mmol)，得到无色溶液。加入四氯金(III)酸钠二水合物(sodium tetrachloroaurate(III)dihydrate)(9.39mg，0.024mmol)和炔丙基胺(0.101mL，1.574mmol)。将反应混合物在80℃加热5小时。将黄褐色混合物冷却至室温后，其用EtOAc稀释，过滤通过棉塞并浓缩，得到黄褐色油状物。用20％EtOAc/己烷进行FCC，得到所需产物[其为主峰(60.3mg，20％)]及少量回收的起始原料。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.45-8.40(m，1H)，7.32-7.29(m，1H)，7.08-7.04(m，1H)，7.04-6.92(m，2H)，6.92-6.80(m，1H)，5.13-5.07(m，1H)，3.30-3.00(m，3H)，2.32-2.10(m，2H)，2.10-1.90(m，2H)，0.91(s，9H)，0.074(s，3H)，0.042(s，3H)。
中间体15
(6，9-反式)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-醇
在50mL圆底烧瓶(t＝g)中向THF(3mL)中加入(6R，9R)-9-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶(60.3mg，0.155mmol)，得到无色溶液。加入TBAF(0.310mL，0.310mmol)，并将混合物在室温搅拌过夜。19h：LCMS和TLC显示完全转化。除去THF，残留物用EtOAc稀释，用水和盐水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到黄褐色油状物。用30％EtOAc/己烷进行FCC，得到一个峰，将其合并并浓缩，得到白色固体(35.7mg，84％)。LCMS：[M+H]＝276；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.42-8.40(m，1H)，7.47(d，J＝7.6Hz，1H)，7.16(dd，J＝7.2和5.0Hz，1H)，7.15-7.00(m，3H)，5.97(宽峰，1H)，4.88(dd，J＝11.6和1.6Hz，1H)，3.19(t，J＝12.8Hz，1H)，2.99-2.83(m，1H)，2.80(d，J＝14.4Hz，1H)，2.38-2.23(m，1H)，2.23-2.05(m，2H)，1.69-1.50(m，1H)；13C NMR(125MHz，CDCl3)δ160.7，150.8(d，J＝247.4Hz)，148.1(d，J＝261.2Hz)，145.1，137.8，136.5(d，J＝12.3Hz)，133.6，124.2，122.4，122.1，115.1(d，J＝16.9Hz)，71.8，40.5，37.6，36.2，35.8。
实施例2
4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-羧酸(6，9-反式)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基酯
在100mL圆底烧瓶(t＝g)中向THF(3mL)中加入(6R，9R)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-醇(22.2mg，0.081mmol)(与无水苯共沸)和4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-羧酸4-硝基苯基酯(93mg，0.242mmol)，得到黄褐色混悬液。一次性加入NaH(19.35mg，0.806mmol)(过量)。将混合物在室温和氮气下搅拌过夜。18h：LCMS显示完全转化。其用水淬灭(放出气体！)并用EtOAc萃取。分离各层且水层用EtOAc萃取(LCMS显示在水溶液中没有产物)。合并的有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩。通过FCC用8％MeOH/CH2Cl2纯化，得到产物，其为白色固体(28.6mg，68％)。LCMS：[M+H]＝520；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.5(宽峰，1H)，8.47(d，J＝3.6Hz，1H)，8.07(d，J＝4.4Hz，1H)，7.44(宽峰，2H)，7.15(宽峰，1H)，7.09-6.95(m，4H)，6.03(d，J＝10.8Hz，1H)，4.77-4.52(宽峰，2H)，4.52-4.30(宽峰，1H)，3.36(t，J＝12.6Hz，1H)，3.20-2.90(m，3H)，2.83(d，J＝14.4Hz，1H)，2.42-2.12(m，4H)，2.02-1.78(m，4H)；mp 248℃。
实施例3
4-(2-氧代-4，5-二氢-1H-苯并[d][1，3]二氮杂
-3(2H)-基)哌啶-1-羧酸(6，9-反式)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基酯
在100mL圆底烧瓶(t＝g)中向THF(2mL)中加入(6R，9R)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-醇(13.5mg，0.049mmol)(与无水苯共沸)和4-(2-氧代-4，5-二氢-1H-苯并[d][1，3]二氮杂
-3(2H)-基)哌啶-1-羧酸4-硝基苯基酯(60.4mg，0.147mmol)，得到黄褐色混悬液。一次性加入NaH(11.77mg，0.490mmol)(过量)。将混合物在室温和氮气下搅拌过夜。18h：LCMS显示完全转化。其用水淬灭(放出气体！)并用EtOAc萃取。分离各层且水层用EtOAc萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩。通过FCC用8％MeOH/CH2Cl2纯化，得到产物，其为白色粉末。LCMS显示次要峰(M+Br)但1H NMR似乎正常。用NaHSO3在MeOH/水中的溶液处理2天但没有改善。在没有改变的情况下回收物质(19.5mg，73％)。LCMS：[M+H]＝547；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.41(d，J＝Hz，1H)，7.39(d，J＝Hz，1H)，7.12-6.95(m，5H)，6.88(t，J＝Hz，1H)，6.72(d，J＝Hz，1H)，6.65(s，1H)，5.98(d，J＝Hz，1H)，4.60-4.18(宽峰，3H)，3.51(宽峰，2H)，3.33(t，J＝Hz，1H)，3.15-2.89(m，6H)，2.82(d，J＝Hz，1H)，2.32-2.10(m，3H)，2.05-1.89(m，1H)，1.89-1.55(m，4H)。
中间体16
(6，9-反式)-6-(2，3-二氟苯基)-9-羟基-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-1-氧化物
在250mL圆底烧瓶中向CH2Cl2(4mL)中加入(6，9-反式)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-醇(191mg，0.694mmol)，得到无色溶液。加入mCPBA(间氯过氧苯甲酸)(202mg，0.902mmol)，并将混合物在室温搅拌24小时。LCMS表明完全转化为主要产物。其用EtOAc稀释并用0.5N NaOH处理。分离各层，有机层用水和盐水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到蜡状固体/油状物(粗品：100％)。LCMS：[M+H]＝292；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.06(s，1H)，7.24-6.40(m，5H)，5.27(宽峰，1H)，3.42-3.02(m，2H)，3.02-2.68(m，2H)，2.30-1.95(m，3H)，1.80-1.60(m，1H)。
中间体17
(6，9-反式)-6-(2，3-二氟苯基)-9-羟基-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-2-甲腈
在100mL圆底烧瓶中向CH2Cl2(4mL)中加入粗(6，9-反式)-6-(2，3-二氟苯基)-9-羟基-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-1-氧化物(0.202g，0.694mmol)(与无水苯共沸)，得到无色溶液。加入二甲基氨基甲酰氯(0.064mL，0.694mmol)。2小时后，加入三甲基甲硅烷基氰化物(0.111mL，0.833mmol)并将混合物在氮气下搅拌过夜(16小时)。再加入二甲基氨基甲酰氯(0.064mL，0.694mmol)和三甲基甲硅烷基氰化物(0.111mL，0.833mmol)。将混合物加热回流(浴温为45℃)22小时。LCMS显示多个峰且仅残留少量起始原料。其用饱和NaHCO3溶液淬灭并用EtOAc萃取。分离各层，有机层用盐水洗涤，干燥并浓缩，得到黄褐色油状物。将其溶于4ml THF中并用TBAF(0.694mL，0.694mmol)处理4小时。水层用EtOAc后处理，得到黄褐色残留物。通过FCC用80％EtOAc/己烷纯化，得到产物，其为无色固体(53mg，23％)。LCMS：[M+H]＝372；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.65-7.52(m，2H)，7.10-6.95(m，3H)，5.15(d，J＝4.0Hz，1H)，4.94(d，J＝11.6Hz，1H)，3.24(t，J＝12.8Hz，1H)，2.92-2.83(m，2H)，2.40-2.30(m，1H)，2.20-2.10(m，2H)，1.68-1.53(m，1H)。
实施例4
4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-羧酸(6，9-反式)-2-氰基-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基酯
在100mL圆底烧瓶中向THF(2mL)中加入(6，9-反式)-6-(2，3-二氟苯基)-9-羟基-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-2-甲腈(52.6mg，0.175mmol)(与无水苯共沸)和4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-羧酸4-硝基苯基酯(201mg，0.525mmol)，得到黄褐色混悬液。一次性加入NaH(42.0mg，1.752mmol)(过量)。将混合物在室温和氮气下搅拌过夜(16小时)。LCMS显示完全转化。其用水淬灭(放出气体！)并用EtOAc萃取。分离各层，有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩。通过FCC用10％MeOH/CH2Cl2纯化，得到产物，其为白色粉末(76mg，72％)。LCMS：[M+H]＝545；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.07(宽峰，1H)，7.75-7.24(m，4H)，7.20-6.90(m，4H)，5.98(d，J＝11.2Hz，1H)，4.83-4.20(m，3H)，3.40(t，J＝12.8Hz，1H)，3.28-2.75(m，3H)，2.60-2.10(m，5H)，2.10-1.78(m，4H)。
中间体18
2-溴-3-乙烯基吡啶
参见Spivey，A.C.；Shukla，L.；Hayler，J.F.Org.Lett.2007，9，891-894。在0℃将丁基锂(22.75mL，59.1mmol)加到甲基三苯基溴化鏻(21.13g，59.1mmol)的THF(450mL)混悬液中。溶液变为橙色，将反应混合物升至室温且保持30分钟，然后将其冷却回至0℃。经由导管将2-溴吡啶-3-甲醛(10g，53.8mmol)在50mL THF中的溶液加到反应溶液中。形成沉淀物并将反应混合物升至室温。反应混合物的颜色变为绿灰色。一段时间后，反应混合物的颜色再次变为橙色。将反应混合物在室温搅拌过周末。将大部分溶剂真空除去并将粗品在水和乙醚之间分配。分离有机层且水层用乙醚萃取两次。合并乙醚层，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。产物通过快速柱(用乙酸乙酯/己烷(10％)洗脱)来得到，其为黄色油状物(8.78g，89％)。MS(ESI)[M+H+]＝184.04；1HNMRδppm(400MHz，氯仿-d)8.21-8.29(m，1H)7.78(dd，J＝7.68，1.89Hz，1H)7.20-7.28(m，1H)6.96(dd，J＝17.37，11.08Hz，1H)5.72(d，J＝17.37Hz，1H)5.46(d，J＝11.08Hz，1H)。
中间体19
2-(戊-4-烯基)-3-乙烯基吡啶
在500mL圆底烧瓶中向THF(40mL)中加入2-溴-3-乙烯基吡啶(4.151g，22.56mmol)(与无水苯共沸)，得到无色溶液。在氮气下加入Pd(Ph3P)4(0.782g，0.677mmol)。经由注射器加入4-戊烯基溴化锌(46mL，23.00mmol)同时在氮气下搅拌，并将所得到的深色混合物在室温搅拌5分钟。然后将其加热回流(70℃)过夜(4:00pm)。17h：LCMS表明完全转化为所需产物。除去THF。反应混合物用NH4Cl溶液淬灭并用EtOAc稀释。分离各层，有机层用盐水洗涤，干燥并浓缩，得到黄色油状物。用30％EtOAc/己烷进行FCC，得到所需产物，其为无色油状物(2.54g，65％)。MS(ESI)[M+H+]＝174；1HNMR(400MHz，氯仿-d)δppm 8.39(dd，J＝4.78，1.51Hz，1H)7.69(dd，J＝7.81，1.76Hz，1H)7.07(dd，J＝7.81，4.78Hz，1H)6.89(dd，J＝17.37，11.08Hz，1H)5.80(dddd，J＝17.06，10.26，6.67，6.55Hz，1H)5.62(d，J＝17.37Hz，1H)5.34(d，J＝11.08Hz，1H)4.85-5.09(m，2H)2.76-2.92(m，2H)2.11(q，J＝7.13Hz，2H)1.67-1.83(m，2H)；13C NMR(101MHz，氯仿-d)δppm 159.17(s，1C)148.31(s，1C)138.38(s，1C)133.22(s，1C)，133.19(s，1C)，131.73(s，1C)121.40(s，1C)117.22(s，1C)114.87(s，1C)34.99(s，1C)33.64(s，1C)28.60(s，1C)。
中间体20
(Z)-8，9-二氢-7H-环庚并[b]吡啶
在2L圆底烧瓶中向乙醚(4ml)中加入2-(戊-4-烯基)-3-乙烯基吡啶(2.1g，12.12mmol)，得到无色溶液。加入HCl(30mL，60.0mmol)，并将混合物搅拌5分钟。将挥发物蒸发，得到无色油状物，然后将其与无水苯共沸，得到白色固体。然后将其溶于CH2Cl2(1L)(用氩气脱气)中，得到无色溶液。加入Grubbs II(0.515g，0.606mmol)，并在氮气下将混合物在40℃(油浴)加热5小时同时搅拌。LCMS表明完全转化(TLC显示极性小于起始原料的主要斑点)。将混合物浓缩，得到黄褐色油状物。将其溶于EtOAc中，用饱和NaHCO3溶液(含有少量0.5N NaOH溶液)和盐水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到黄褐色油状物。用40％EtOAc/己烷进行FCC，得到所需产物，其为黄褐色油状物(1.79g，92％)。MS(ESI)[M+H+]＝146.06；1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 8.20(d，J＝4.78Hz，1H)7.32(d，J＝7.55Hz，1H)6.99(dd，J＝7.55，5.04Hz，1H)6.21(dt，J＝12.28，2.05Hz，1H)5.90(dt，J＝12.34，4.41Hz，1H)2.93-3.06(m，2H)2.30-2.49(m，2H)1.82-2.02(m，2H)；13C NMR(101MHz，氯仿-d)δppm160.56(s，1C)146.26(s，1C)137.79(s，1C)134.18(s，1C)131.32(s，1C)127.24(s，1C)121.16(s，1C)39.10(s，1C)32.54(s，1C)24.87(s，1C)。
中间体21
乙酸6-溴-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-5-基酯
在氮气下在500mL圆底烧瓶中向乙酸(100mL)中加入(Z)-8，9-二氢-7H-环庚并[b]吡啶(5.16g，35.5mmol)和乙酸锂(9.38g，142mmol)，得到黄褐色混悬液。加入N-溴乙酰胺(5.00g，36.2mmol)。烧瓶用铝箔包覆并将混合物在室温搅拌过夜。16h：无固体剩余且LCMS显示完全转化为极性较大的所需产物(其为主峰)。在高真空下除去AcOH。残留物用水和EtOAc稀释。加入Na2CO3以中和混合物直到不再放出气体。分离各层且水层用EtOAc萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到稠厚黄褐色油状物(10.5g，100％)。粗品按原样使用。MS(ESI)[M+H+]＝284.17。
中间体22
乙酸6-溴-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-5-基酯环氧化物
在500mL圆底烧瓶中向THF(100mL)中加入乙酸6-溴-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-5-基酯(10.09g，35.5mmol)(与无水苯共沸)，得到黄褐色溶液。加入甲醇钠(9.59g，178mmol)并将混合物在室温和氮气下搅拌。2h：TLC显示完全转化为极性较大的产物。2.5h：除去THF并将残留物在水和EtOAc之间分配。水层用EtOAc萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到黄褐色油状物(5.71g，100％)，其直接用于以下反应。MS(ESI)[M+H+]＝162.21。
中间体23
6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-6-醇
在500mL圆底烧瓶中向MeOH(100mL)中加入上述环氧化物(5.72g，35.5mmol)和Pd/C(1.889g，1.775mmol)，得到黑色混悬液。将其在压力为1大气压的氢气(气囊)下搅拌2小时。LCMS表明残留少量起始原料。再加入0.95g Pd/C并再继续搅拌1小时。TLC显示没有改变(痕迹可能不是起始原料)。将其过滤并浓缩，得到黄褐色油状物(6g，100％)。其无需进一步纯化和表征即用于以下反应。
中间体24
8，9-二氢-5H-环庚并[b]吡啶-6(7H)-酮
在-55℃和氮气下在烘干的500mL圆底烧瓶中向CH2Cl2(100mL)中加入草酰氯(3.42mL，39.1mmol)，得到无色溶液。历时10分钟逐滴加入DMSO(5.54mL，78mmol)。将溶液再搅拌30分钟后，历时5分钟经由导管加入6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-6-醇(5.79g，35.5mmol)(与无水苯共沸)在20ml CH2Cl2中的溶液(及用20ml淋洗)。将反应混合物在-50℃至-55℃再搅拌40分钟(溶液变为乳状)。在-50℃经由注射器加入Et3N(三乙胺)(24.74mL，178mmol)并将反应混合物搅拌30分钟(凝胶样物质难以搅拌且需要在环境温度不时振摇)。加入100ml水并分离各层。水层用CH2Cl2(2×100ml)萃取。合并的有机层用Na2SO4干燥并浓缩，得到黄褐色油状物(含有一些固体)。通过FCC用10％MeOH/CH2Cl2纯化，得到所需产物，其为橙色油状物(4.947g，86％(4步))。1H NMR(500MHz，氯仿-d)δppm 8.28-8.38(m，1H)7.37(d，J＝7.63Hz，1H)7.00-7.13(m，1H)3.65(s，2H)3.10-3.18(m，2H)2.50-2.60(m，2H)2.01(dd，J＝6.71，4.88Hz，2H)；13C NMR(126MHz，氯仿-d)δppm 207.23(s，1C)160.24(s，1C)147.98(s，1C)137.20(s，1C)128.85(s，1C)122.25(s，1C)48.89(s，1C)43.96(s，1C)36.15(s，1C)24.70(s，1C)。
中间体25
6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-6-醇
在-78℃和氮气下在烘干的500mL圆底烧瓶中向THF(100mL)中加入BuLi(17.19mL，43.0mmol)，得到无色溶液。经由注射器逐滴加入1-溴-2，3-二氟苯(4.81mL，43.0mmol)。将混合物在-78℃搅拌20分钟，并经由导管逐滴加入8，9-二氢-5H-环庚并[b]吡啶-6(7H)-酮(4.947g，30.7mmol)(与无水苯共沸且在高真空下干燥)在10ml THF中的溶液(及用10ml THF淋洗)。历时1小时将混合物温热至室温。TLC显示部分转化为极性稍大的化合物。用饱和NH4Cl溶液淬灭后，除去THF。将残留的混合物在水和EtOAc之间分配。分离各层，有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到深色油状物。残留物通过FCC用10％MeOH/CH2Cl2纯化(极难分离)。合并不纯的馏分并通过FCC用EtOAc/CH2Cl2至纯EtOAc纯化。回收的起始原料：1.88g(38％)。合并产物馏分并浓缩，得到黄褐色固体，其用Et2O反复洗涤，得到黄褐色固体(1.79g，21％)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 8.27(dd，J＝4.91，1.38Hz，1H)7.38-7.47(m，1H)7.30-7.35(m，1H)6.97-7.12(m，3H)3.93(dd，J＝14.60，2.52Hz，1H)3.06-3.20(m，2H)2.86(dd，J＝14.60，1.76Hz，1H)2.37-2.68(m，2H)1.68-1.94(m，2H)1.17(t，J＝7.05Hz，1H)。
中间体26和27
(E)-6-(2，3-二氟苯基)-8，9-二氢-7H-环庚并[b]吡啶和(E)-6-(2，3-二氟苯基)-8，9-二氢-5H-环庚并[b]吡啶
向250mL圆底烧瓶中加入6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-6-醇(1.23g，4.47mmol)和HCl(20mL 6M溶液，120mmol)，并将混合物在100℃(回流)加热2小时。LCMS显示完全和显著转化。冷却至室温后，其用EtOAc稀释并缓慢用15ml10N NaOH碱化。分离各层，有机层用盐水洗涤，干燥并浓缩，得到黄褐色油状物。用80％EtOAc/己烷进行FCC，得到主要峰(1)(0.71g)及次要峰(2)(90mg)和两者的一些混合物(0.34g)。总计：1.14g(97％：对于1为约75％且对于2为约22％)。1H NMR证实两者的上述结构。对于(E)-6-(2，3-二氟苯基)-8，9-二氢-7H-环庚并[b]吡啶(1)：1HNMR(400MHz，氯仿-d)δppm 8.33(dd，J＝5.04，1.51Hz，1H)7.40-7.51(m，1H)6.98-7.18(m，4H)6.53(s，1H)3.04-3.22(m，2H)2.63(t，J＝6.55Hz，2H)2.17-2.32(m，2H)。对于(E)-6-(2，3-二氟苯基)-8，9-二氢-5H-环庚并[b]吡啶(2)：1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 8.35(dd，J＝4.91，1.38Hz，1H)7.39(d，J＝7.55Hz，1H)6.81-7.10(m，4H)5.67(t，J＝4.28Hz，1H)3.73(s，2H)3.23-3.34(m，2H)2.48-2.65(m，2H)。
中间体28
6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶
在250mL圆底烧瓶中向MeOH(4mL)中加入(E)-6-(2，3-二氟苯基)-8，9-二氢-5H-环庚并[b]吡啶(112mg，0.435mmol)，得到无色溶液。加入Pd/C(46.3mg，0.044mmol)，并将混合物在氢气气囊下搅拌2小时。TLC显示一个主峰(其为起始原料)且LCMS既显示起始原料母体离子又显示产物母体离子但两者是共洗脱的。再加入23mg Pd/C并将混合物在氢气下搅拌过夜(19小时)。LCMS显示完全转化(相应于唯一产物的单峰：M+H＝260)。将其过滤并用MeOH洗涤。将溶液浓缩，得到无色油状物(106mg，94％)。粗品1H NMR证实上述结构且显示高纯度。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 8.30(dd，J＝4.78，1.51Hz，1H)7.35(dd，J＝7.55，1.51Hz，1H)6.89-7.12(m，4H)3.17-3.31(m，1H)3.01-3.17(m，2H)2.88-3.00(m，1H)2.74(d，J＝14.10Hz，1H)2.01-2.19(m，2H)1.85-2.01(m，1H)1.46-1.70(m，1H)。
中间体29和30
外消旋的反式-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-醇和顺式-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-醇
在100mL圆底烧瓶中向CH2Cl2(4ml)中加入6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶(106mg，0.409mmol)，得到无色溶液。加入mCPBA(137mg，0.613mmol)并将所得到的溶液在室温搅拌过夜。19h：LCMS表明完全转化为N-氧化物。混合物用EtOAc稀释并用1N NaOH溶液洗涤。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并真空浓缩，得到白色固体。其无需进一步纯化和表征即用于以下反应。MS(ESI)[M+H+]＝276.13。
在100mL圆底烧瓶中向CH2Cl2(4mL)中加入6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-1-氧化物(113mg，0.409mmol)(淡黄色油状物且与无水苯共沸)，得到淡黄色溶液。冷却至0℃后，加入TFAA(0.144mL，1.023mmol)并将混合物在室温搅拌4小时。LCMS显示所需产物仅为10％且主要为起始原料(或可能是酰化的N-氧化物(缓慢重排))。再加入0.15ml TFAA并将混合物在室温搅拌过夜。LCMS显示稍有改善。将混合物在45℃回流4小时且反应没有改善。除去挥发物，加入2ml乙酸酐且将混合物在130℃(预加热的浴)加热1.5小时。LCMS显示无起始原料。将其冷却并用EtOAc稀释。用NaOH溶液碱化并分离各层。有机层用水洗涤并浓缩，得到黄褐色油状物。然后将其溶于2ml THF中并用1.5ml 1N NaOH处理1小时。LCMS显示一个主峰(其为所需产物)(M+H＝276)。将混合物在EtOAc和水之间分配。分离有机层，用盐水洗涤，干燥并浓缩，得到黄褐色油状物。通过FCC用50％EtOAc/己烷纯化，得到两个化合物(在TLC上是非常接近的斑点)即a和b。用80％EtOAc/己烷进一步洗脱，得到极性较大的峰(其为c)。如1H NMR所示，a为所需反式醇(32.3mg，29％)(分析数据与先前所述相同)；b为脱水产物(10.4mg，9.9％)；且c为上述顺式醇(36mg，32％)。顺式醇的极性比反式醇的极性大很多(就50％EtOAc/己烷而言，顺式的Rf＝0.16且反式的Rf＝0.77)。顺式醇的1H NMR：1H NMR(500MHz，氯仿-d)δppm 8.26(d，J＝4.58Hz，1H)7.30(d，J＝7.63Hz，1H)7.04(dd，J＝7.32，4.88Hz，1H)6.85-6.98(m，2H)6.79(t，J＝6.87Hz，1H)5.37(宽单峰，1H)5.01(dd，J＝7.17，3.81Hz，1H)3.28-3.52(m，2H)2.93(d，J＝13.73Hz，1H)2.17-2.33(m，1H)1.89-2.15(m，3H)。
中间体31
(E)-6-(2，3-二氟苯基)-8，9-二氢-7H-环庚并[b]吡啶-9-醇
在250mL圆底烧瓶中向CH2Cl2(15ml)中加入(E)-6-(2，3-二氟苯基)-8，9-二氢-7H-环庚并[b]吡啶(546mg，2.122mmol)，得到无色溶液。加入mCPBA(571mg，2.55mmol)并将所得到的溶液在室温搅拌过夜。4h：LCMS显示仅残留痕量起始原料。21h：混合物用EtOAc稀释并用1N NaOH溶液洗涤。有机层用水和盐水洗涤，用Na2SO4干燥并真空浓缩，得到稠厚油状物(100％)。其无需进一步纯化和表征即用于以下反应。MS(ESI)[M+H+]＝274.19。参见Kaiser，S.；Smidt，S.P.；Pfaltz，A.Angew.Chem.Int.Ed.2006，45，5194-5197。在100mL圆底烧瓶中向CH2Cl2(16mL)中加入(E)-6-(2，3-二氟苯基)-8，9-二氢-7H-环庚并[b]吡啶-1-氧化物(0.580g，2.122mmol)(与无水苯共沸)，得到无色溶液。冷却至0℃后，加入TFAA(0.749mL，5.31mmol)并将混合物在室温搅拌4小时。将其置于冰箱中过周末。加入LiOH(6.37mL，6.37mmol)并将混合物搅拌2小时。其用EtOAc和水稀释并分离各层。有机层用盐水洗涤，干燥并浓缩，得到黄褐色油状物。通过FCC用50％EtOAc/己烷纯化，得到产物，其为微黄色油状物/固体(0.4g，69％(2步))。MS(ESI)[M+H+]＝274.19；1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm8.36(dd，J＝4.78，1.51Hz，1H)7.50(dd，J＝7.81，1.26Hz，1H)7.20(dd，J＝7.68，4.91Hz，1H)6.96-7.11(m，3H)6.44(s，1H)5.63(宽峰，1H)4.77(dd，J＝10.45，2.64Hz，1H)2.78-2.95(m，1H)2.64-2.77(m，1H)2.44-2.62(m，J＝13.60，5.48，5.48，2.64Hz，1H)1.92-2.15(m，1H)；13C NMR(101MHz，氯仿-d)δppm 158.49(s，1C)149.39-152.62(m，1C)146.03-149.25(m，1C)145.24(s，1C)143.70(s，1C)139.94(s，1C)138.79(s，1C)134.46(d，J＝10.79Hz，1C)128.51(d，J＝11.56Hz，1C)124.37(宽单峰，1C)123.81-124.14(m，1C)122.44(s，1C)116.24(d，J＝16.95Hz，1C)71.49(s，1C)34.88(s，1C)32.74(d，J＝3.08Hz，1C)。
中间体32和33
外消旋的反式-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-醇和顺式-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-醇
在500mL圆底烧瓶中向MeOH(20mL)中加入(E)-6-(2，3-二氟苯基)-8，9-二氢-7H-环庚并[b]吡啶-9-醇(660mg，2.415mmol)，得到无色溶液。加入Pd/C(257mg，0.242mmol)，并将混合物在氢气气囊下搅拌4小时。LCMS显示完全转化。过滤并浓缩，得到无色油状物。通过FCC用80％EtOAc/己烷纯化，得到两种产物即反式醇(104.3mg，16％)和顺式醇(492.8mg，74％)，两者均为白色固体。这两种醇的分析数据与先前所述一致。
中间体34
外消旋的(6，9-反式)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-醇
在100mL圆底烧瓶中向THF(15mL)中加入(6，9-顺式)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-醇(489mg，1.776mmol)(与无水苯共沸)，得到无色溶液。加入4-硝基苯甲酸(594mg，3.55mmol)和Ph3P(932mg，3.55mmol)，并将混合物冷却至0℃。逐滴加入偶氮二羧酸二异丙酯(0.699mL，3.55mmol)。将混合物温热至室温并搅拌5小时。LCMS表明完全转化为所需中间体和少量脱水产物。将其搅拌过夜且LCMS显示没有改变。加入LiOH(8.88mL，8.88mmol)，并将混合物在室温搅拌3小时。LCMS表明中间体完全转化为产物。除去THF并将残留物在EtOAc和0.2N NaOH之间分配。分离各层，有机层用盐水洗涤，干燥并浓缩，得到微黄褐色油状物。用50％EtOAc/己烷进行FCC，得到所需产物(378mg，77％)，其为白色固体。分析数据与先前所述一致。
中间体35
三异丙基(1-(2-乙烯基苯基)戊-4-烯基氧基)甲硅烷
1-溴-2-乙烯基苯(2.8146g，15.38mmol)用无水苯共沸两次，然后吸收在THF(50ml)中。将溶液冷却至-78℃。在-78℃将BuLi(6.77ml，16.91mmol)加到反应混合物中并在该温度搅拌20分钟。将戊4-烯醛(1.670ml，16.91mmol)加到反应混合物中并搅拌4小时同时浴温逐渐升高。将氯三异丙基甲硅烷(3.58ml，16.91mmol)加到反应混合物中并将反应混合物搅拌过夜同时将反应混合物温热至室温。真空除去大部分溶剂并将粗品在乙酸乙酯和水之间分配。分离乙酸乙酯层，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。产物通过快速色谱柱来纯化(用0至30％乙醚/己烷洗脱)(3.9g，74％收率)。MS(ESI)[M+H+]＝346.46。
中间体36
(Z)-9-(三异丙基甲硅烷基氧基)-8，9-二氢-7H-环庚并[b]吡啶
将氯化氢(5.64mL，11.28mmol)(10mL浓度为2M的乙醚溶液)加到2-(1-(三异丙基甲硅烷基氧基)戊-4-烯基)-3-乙烯基吡啶(3.9g，11.28mmol)的CH2Cl2(25mL)溶液中。真空除去溶剂且相应的盐酸盐用苯共沸两次。向反应混合物中加入CH2Cl2(500mL)并用氮气清洗10分钟，然后加入GrubbII(0.192g，0.226mmol)。将反应混合物加热至40℃且保持3小时，LCMS显示无起始原料残留。反应混合物用饱和NaHCO3溶液洗涤一次。分离CH2Cl2，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。进行快速色谱柱(0至25％乙醚/己烷)，得到所需产物，其为黄色油状物(2.54g，71％收率)。MS(ESI)[M+H+]＝318.35。
中间体37
乙酸6-溴-9-(三异丙基甲硅烷基氧基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-5-基酯
在室温和氮气下将N-溴乙酰胺(2.021g，14.65mmol)加到(Z)-9-(三异丙基甲硅烷基氧基)-8，9-二氢-7H-环庚并[b]吡啶(4.5597g，14.36mmol)和乙酸锂(3.79g，57.4mmol)的AcOH(100mL)混悬液中。烧瓶用铝箔包覆并在室温搅拌过夜。反应混合物变为澄清黄色溶液。溶剂通过高真空来蒸发。将粗品在水和乙酸乙酯之间分配。加入Na2CO3直到不再冒泡。分离有机层且水层用乙酸乙酯再次萃取。将合并的有机层干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩，得到黄褐色油状物(粗产物为6.37g)。粗品按原样使用。MS(ESI)[M+H+]＝458.36。
中间体38
乙酸6-溴-9-(三异丙基甲硅烷基氧基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-5-基酯环氧化物
在室温和氮气下将甲醇钠(3.77g，69.8mmol)加到乙酸6-溴-9-(三异丙基甲硅烷基氧基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-5-基酯(6.37g，13.95mmol)的THF(100mL)溶液中。将反应混合物搅拌2小时。TLC显示无起始原料且产物相对于起始原料为极性较大的斑点。将溶剂真空除去并将粗品在乙酸乙酯和水之间分配。水层用乙酸乙酯再次萃取。将合并的有机层干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩，得到粗产物，其为黄褐色油状物(粗产物为4.22g和91％)。MS(ESI)[M+H+]＝334.30。
中间体39
9-(三异丙基甲硅烷基氧基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-6-醇
上述环氧化物(4.22g，12.65mmol)和钯/炭(0.45g，0.423mmol)在MeOH(100mL)中的混合物在室温用氢气气囊氢化2小时。TLC显示无起始原料且所需产物为极性较大的斑点。将反应混合物过滤通过硅胶垫并用甲醇洗涤。将滤液浓缩，得到所需产物，其为黄褐色油状物(粗品为4.1g和97％)。MS(ESI)[M+H+]＝336.37。
中间体40
9-(三异丙基甲硅烷基氧基)-8，9-二氢-5H-环庚并[b]吡啶-6(7H)-酮
在氮气下向烘箱干燥的500mL圆底烧瓶中加入草酰氯(6.49mL，72.9mmol)和CH2Cl2(150mL)。将烧瓶冷却至-60℃并将DMSO(6.90mL，97mmol)逐滴加到反应混合物中。加完后，将反应混合物在-60℃搅拌30分钟，然后在-60℃经由导管将9-(三异丙基甲硅烷基氧基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-6-醇(8.1557g，24.31mmol)(溶于20mL CH2Cl2中并用20mLCH2Cl2淋洗)加到反应混合物中。将反应混合物在-55℃搅拌40分钟，然后加入TEA(16.94mL，122mmol)。反应混合物似乎变为稠厚混悬液。将反应混合物搅拌1小时并将水加到反应混合物中。分离有机层且水层用CH2Cl2萃取两次。合并CH2Cl2层，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。进行快速色谱柱(25％至50％乙酸乙酯/己烷)，得到产物，其为黄色油状物(1.49g，18.4％)。MS(ESI)[M+H+]＝334.30；1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 8.36(d，J＝5.04Hz，1H)7.46(d，J＝7.55Hz，1H)7.16(dd，J＝7.55，4.78Hz，1H)5.22(dd，J＝4.78，2.27Hz，1H)4.66(d，J＝14.35Hz，1H)3.26(d，J＝14.60Hz，1H)2.94-3.05(m，1H)2.42-2.55(m，1H)2.36(dd，J＝14.10，5.04Hz，1H)2.03-2.17(m，1H)1.03-1.16(m，3H)0.96-1.00(m，9H)0.89-0.92(m，9H)。
中间体41
三氟甲磺酸(E)-9-(三异丙基甲硅烷基氧基)-8，9-二氢-7H-环庚并[b]吡啶-6-基酯
在-78℃将LDA(3.73mL，7.45mmol)加到DMPU(2.073mL，17.20mmol)和9-(三异丙基甲硅烷基氧基)-8，9-二氢-5H-环庚并[b]吡啶-6(7H)-酮(1.9119g，5.73mmol)的THF(25mL)溶液中。将反应混合物在该温度搅拌2小时，然后加入1，1，1-三氟-N-苯基-N-(三氟甲基磺酰基)甲磺酰胺(2.66g，7.45mmol)。将反应混合物搅拌过夜同时将其逐渐温热至室温。将溶剂真空除去并将粗品加载至快速色谱柱上(用0％至15％至25％乙酸乙酯/己烷洗脱)，得到所需产物(2.3g，86％)。MS(ESI)[M+H+]＝466.33；1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm8.37(dd，J＝4.78，1.51Hz，1H)7.47-7.54(m，1H)7.20(dd，J＝7.81，4.78Hz，1H)6.43(d，J＝2.01Hz，1H)5.26(d，J＝7.55Hz，1H)3.16-3.32(m，1H)2.58-2.69(m，1H)2.29-2.39(m，1H)1.85-1.98(m，1H)1.01-1.09(m，3H)0.93-1.00(m，9H)0.85(d，J＝7.05Hz，9H)。
中间体42
(E)-6-(2，3-二氟苯基)-9-(三异丙基甲硅烷基氧基)-8，9-二氢-7H-环庚并[b]吡啶
将2，3-二氟苯基硼酸(0.936g，5.93mmol)、碳酸钠(4.57mL，9.14mmol)、三氟甲磺酸(E)-9-(三异丙基甲硅烷基氧基)-8，9-二氢-7H-环庚并[b]吡啶-6-基酯(2.3g，4.94mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(0.285g，0.247mmol)在甲苯(30mL)和MeOH(6mL)中的混合物在氮气下加热至80℃且保持3小时。LCMS显示无起始原料。反应混合物用乙酸乙酯稀释并用水洗涤一次。分离乙酸乙酯层，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。进行快速色谱柱(0至25％乙酸乙酯/己烷)，得到所需产物(0.8797g，54％)。MS(ESI)[M+H+]＝430.43。
中间体43
(E)-6-(2，3-二氟苯基)-8，9-二氢-7H-环庚并[b]吡啶-9-醇
将(E)-6-(2，3-二氟苯基)-9-(三异丙基甲硅烷基氧基)-8，9-二氢-7H-环庚并[b]吡啶(1.6072g，3.74mmol)和TBAF(7.48mL，7.48mmol)在THF(10mL)中的混合物在室温搅拌1小时。LCMS显示无起始原料且转化为所需产物。真空除去溶剂。反应混合物通过快速色谱柱来纯化(用0％至35％至50％乙酸乙酯/己烷洗脱)，得到所需产物。其为白色固体(0.825g，81％)。所有分析数据与先前所述一致。
中间体44
(R)-9-羟基-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-5-酮
在1L圆底烧瓶中向THF(300mL)中加入(S)-9-羟基-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-5-酮(19.14g，108mmol)(通过对上述二酮进行酶还原来得到)，得到淡橙色溶液。在氮气下加入4-硝基苯甲酸(27.1g，162mmol)和Ph3P(42.5g，162mmol)，并将混合物冷却至0℃。逐滴加入偶氮二羧酸二异丙酯(31.9mL，162mmol)。将混合物逐渐温热至室温并搅拌过夜(5:00pm)。颜色变为黄褐色。15h：LCMS显示完全转化。加入80ml水，接着加入LiOH(7.76g，324mmol)。将混合物在室温搅拌2小时(一些LiOH没有完全溶解)。2h：LCMS显示完全转化(产物/脱水产物为约7/1(通过积分))。除去THF且残留的混合物用40ml浓盐酸(12N)缓慢酸化。加入300ml EtOAc。将混合物在1L分液漏斗中振摇(加入10ml己烷以促进分离)。分离各层且有机层用水(2×50mL)萃取。合并的水层用EtOAc(4×100mL)洗涤。然后黄褐色水溶液用50mL 10N NaOH缓慢碱化，并用EtOAc(4×150mL)萃取。水层用NaCl饱和并用EtOAc(2×100mL)萃取。合并的黄褐色有机层(TLC显示出所需产物、脱水产物和一些基线)用盐水洗涤，干燥并浓缩，得到黄褐色油状物(粗品为19.24g和100％)，其直接用于以下步骤。MS(ESI)[M+H+]＝178.24。
中间体45
(R)-9-(三异丙基甲硅烷基氧基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-5-酮
在1L圆底烧瓶中向CH2Cl2(300mL)中加入(R)-9-羟基-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-5-酮(19.14g，108mmol)(与无水苯共沸)，得到黄褐色溶液。冷却至0℃后，经由注射器加入TIPS-OTf(29.3mL，108mmol)和Et3N(30.1mL，216mmol)，并将混合物在0℃搅拌1小时。LCMS表明完全转化。除去挥发物并将残留物在NaHCO3溶液和EtOAc之间分配。分离各层，有机层用盐水洗涤，干燥并浓缩，得到黄褐色油状物(37g)。其通过FCC用20％EtOAc/己烷纯化，得到产物，其为白色固体(26.3g，73％(两步))。MS(ESI)[M+H+]＝334.37。
中间体46
(6S，9R)-6-(2，3-二氟苯基)-9-(三异丙基甲硅烷基氧基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-5-酮
参见Fox，J.M.；Huang，X.；Chieffi，A.；Buchwald，S.L.J.Am.Chem.Soc.2000，122，1360-1370。在烘干的1L烧瓶中在氮气气囊中称量叔丁醇钠(13.19g，137mmol)、二乙酸钯(II)(0.948g，4.22mmol)和2-(二环己基膦基)-2’-甲基联苯(1.539g，4.22mmol)。在氮气下加入(R)-9-(三异丙基甲硅烷基氧基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-5-酮(35.21g，106mmol)、甲苯(106mL)(在初始瓶中用氮气脱气)和1-溴-2，3-二氟苯(14.18mL，127mmol)。在预热的油浴中将烧瓶在80℃搅拌20小时。除去挥发物并将残留物在EtOAc(400ml)和水(400ml)之间分配。分离各层。水层用EtOAc(50ml)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，干燥并浓缩，得到深色油状物。将其过滤通过硅胶垫(用CH2Cl2加载并用30％EtOAc/己烷洗脱)。得到粗产物，其为深红色油状物(86％质量收率)。1H NMR显示所需反式异构体与顺式异构体的比例为约6/1。MS(ESI)[M+H+]＝446.21。
中间体47
(6R，9R)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-醇
在250mL圆底烧瓶中向MeOH(50mL)中加入(9R)-6-(2，3-二氟苯基)-9-(三异丙基甲硅烷基氧基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-5-酮(9.59g，21.52mmol)，得到淡黄色溶液。加入NaBH4(1.628g，43.0mmol)，并将混合物在室温搅拌40分钟。LCMS表明完全转化(异构体的主要峰和次要峰)。1h：真空除去MeOH并将残留物在水和EtOAc之间分配。分离各层。有机层用盐水洗涤，干燥并浓缩，得到淡色油状物(9.63g，100％)。MS(ESI)[M+H+]＝448.40。在500mL圆底烧瓶中向CH2Cl2(100mL)中加入(9R)-6-(2，3-二氟苯基)-9-(三异丙基甲硅烷基氧基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-5-醇(9.63g，21.52mmol)(与无水苯共沸)，得到淡黄色溶液。在冰浴中冷却至0℃后，在氮气下经由注射器缓慢加入Ms-Cl(1.845mL，23.67mmol)和Et3N(9.00mL，64.6mmol)。30分钟后，移开冷却浴，并将混合物在室温搅拌2小时(颜色变为微红的黄褐色)。LCMS显示完全转化。除去溶剂并将残留物在NaHCO3溶液和EtOAc(150ml)之间分配。分离各层。有机层用盐水洗涤，干燥并浓缩，得到黄色油状物，并干燥过夜(10.82g，96％)。MS(ESI)[M+H+]＝526.28。在500mL圆底烧瓶中向THF(100mL)中加入甲磺酸(9R)-6-(2，3-二氟苯基)-9-(三异丙基甲硅烷基氧基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-5-基酯(11.31g，21.52mmol)，得到淡黄色溶液。在氮气下经由注射器缓慢加入LAH(16.14mL，32.3mmol)(浓度为2M的THF溶液)，并将混合物在室温搅拌1小时(颜色变为红色)。LCMS表明完全转化。加入无水Na2SO4且反应混合物用水缓慢淬灭。形成凝胶。将滤液和水性后处理液合并，得到淡黄色油状物。通过FCC用70％EtOAc/己烷纯化，得到第一个峰即所需产物，其为稠厚黄褐色油状物(干燥4天后为1.44g和24％)，所述油状物的1H NMR和HPLC/LCMS与上述外消旋体一致。可回收高达22％的各种水解二醇。
中间体48
(5S，6S，9R)-6-(2，3-二氟苯基)-9-(三异丙基甲硅烷基氧基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-5-醇
在1L圆底烧瓶中向环戊基甲基醚(400mL)中加入(9R)-6-(2，3-二氟苯基)-9-(三异丙基甲硅烷基氧基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-5-酮(48g，108mmol)，得到黄褐色溶液。在冰-MeOH浴中冷却至-15℃后，加入硼氢化锂(9.39g，431mmol)，历时4小时将混合物(非均匀)逐渐温热至10℃并在室温搅拌30分钟。LCMS表明转化很好。其用30ml MeOH缓慢淬灭并在高真空下除去大部分挥发物。残留物用EtOAc稀释并在充分搅拌下用水缓慢淬灭。将混合物在室温搅拌过夜。分离各层。深色有机层用盐水洗涤，干燥并浓缩，得到深色油状物(48g，100％)。其直接用于以下反应。MS(ESI)[M+H+]＝448.14。
中间体49
甲磺酸(5S，6S，9R)-6-(2，3-二氟苯基)-9-(三异丙基甲硅烷基氧基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-5-基酯
在1L圆底烧瓶中向C6H5CF3(500mL)中加入(5S，6S，9R)-6-(2，3-二氟苯基)-9-(三异丙基甲硅烷基氧基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-5-醇(47.17g，105mmol)(与无水苯共沸)，得到黄褐色溶液。在0℃和氮气下用滴液漏斗先后加入Ms-Cl(24.63mL，316mmol)和Et3N(73.4mL，527mmol)(11:00am)。逐滴加入Et3N后，将混悬液在室温搅拌2小时。LCMS主要显示出产物母体离子(在LCMS中与起始原料重叠)。除去溶剂且残留物用NaHCO3溶液(300ml)缓慢处理。加入EtOAc(400ml)。分离各层且水层用EtOAc(100ml)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，干燥并浓缩，得到黄褐色油状物，其无需进一步纯化和表征即用于以下反应。MS(ESI)[M+H+]＝526.14。
中间体50
(6R，9R)-6-(2，3-二氟苯基)-9-(三异丙基甲硅烷基氧基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶
在2L烧瓶中向THF(300mL)中加入甲磺酸(5S，6S，9R)-6-(2，3-二氟苯基)-9-(三异丙基甲硅烷基氧基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-5-基酯(55.2g，105mmol)(与无水苯共沸)，得到黄褐色溶液。在氮气下经由滴液漏斗逐滴加入三乙基氢化硼锂(Superhydride)(525mL，525mmol)(浓度为1.0M的THF溶液)，并将混合物在室温搅拌4小时。除去THF并将黄褐色油状物在水(300ml)和EtOAc(400ml)之间分配。分离各层，有机层用盐水洗涤，干燥并浓缩，得到黄褐色油状物(约60g)。通过FCC(2.5L填充柱)用30％EtOAc/己烷纯化，不能实现良好纯化，但除去基线(无良好紫外活性)杂质(仅使用硅胶塞和＜10％EtOAc/己烷也能实现)。将所有收集的小极性馏分合并并浓缩，得到黄褐色油状物(33.58g)，其直接用于以下步骤。MS(ESI)[M+H+]＝432.19。
中间体51
(6R，9R)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-醇在1L圆底烧瓶中向THF(400mL)中加入(6R，9R)-6-(2，3-二氟苯基)-9-(三异丙基甲硅烷基氧基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶(19.58g，45.4mmol)，得到黄褐色溶液。经由注射器加入TBAF(54.4mL，54.4mmol)并将混合物在室温搅拌过夜。15h：LCMS表明完全转化。除去THF。将残留物与78213-100合并并在400ml EtOAc和300ml水之间分配。分离各层。水层用EtOAc(50ml)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，干燥并浓缩，得到黄褐色油状物。通过FCC用20％EtOAc/己烷小心纯化，这可除去极性稍小的斑点。所有产物用MeOH重结晶。得到X射线结构。相对于经TIPS保护的羟基酮的总收率超过26％。所有分析数据与先前所述一致。MS(ESI)[M+H+]＝276.15；1HNMR(500MHz，氯仿-d)δppm 8.45(d，J＝4.88Hz，1H)7.50(d，J＝7.63Hz，1H)7.20(dd，J＝7.48，5.04Hz，1H)7.01-7.11(m，3H)4.92(dd，J＝11.29，2.14Hz，1H)3.18-3.30(m，1H)2.90-2.99(m，1H)2.84(d，J＝14.04Hz，1H)2.33-2.43(m，1H)2.16-2.26(m，2H)1.56-1.73(m，1H)。
中间体52
6-(2，3-二氟苯基)-7，8-二氢-5H-环庚并[b]吡啶-9(6H)-酮
在-55℃和氮气下在烘干的100mL圆底烧瓶中向CH2Cl2(4mL)中加入草酰氯(0.131mL，1.497mmol)，得到无色溶液。历时10分钟逐滴加入DMSO(0.212mL，2.99mmol)。将溶液再搅拌30分钟后，历时5分钟经由导管加入(6R，9R)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-醇(206mg，0.748mmol)(外消旋的)(与无水苯共沸)在2ml CH2Cl2中的溶液(及用2ml淋洗)。将反应混合物在-50～-55℃再搅拌40分钟(溶液变为乳状)。在-50℃经由注射器加入Et3N(0.521mL，3.74mmol)并将反应混合物搅拌30分钟。加入水和EtOAc，并分离各层。水层用EtOAc萃取。合并的有机层用Na2SO4干燥并浓缩，得到黄褐色油状物。TLC(1/1EtOAc/己烷)显示出两个斑点：极性较大(与顺式醇相比)的主要斑点和少量的起始原料斑点。通过FCC用60％EtOAc/己烷纯化，得到所需产物[其为无色油状物(148mg，72％)]及回收的少量起始原料。MS(ESI)[M+H+]＝274.30。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm8.57(dd，J＝4.66，1.64Hz，1H)7.39(d，J＝7.81Hz，1H)7.20-7.31(m，1H)6.83-7.04(m，2H)6.72(t，J＝6.92Hz，1H)3.50(dd，J＝9.32，6.30Hz，1H)3.09(d，J＝6.30Hz，2H)2.84-2.99(m，1H)2.68-2.84(m，1H)2.03-2.17(m，1H)1.85-2.02(m，1H)；13C NMR(100MHz，氯仿-d)δppm 203.43，154.56，152.00-149.39(dd，J＝13.4和247Hz)，149.52-146.94(dd，J＝12.5和247Hz)，148.83，138.77，134.44，134.22(d，J＝11.0Hz)，125.87，124.16，122.36，115.40(d，J＝17.0Hz)，39.62，36.83，35.19，27.33。
中间体53
(E)-2-(6-(2，3-二氟苯基)-7，8-二氢-5H-环庚并[b]吡啶-9(6H)-亚基)乙酸乙酯
参见Nagarajan，S.R.et al.Bioorg.Med.Chem.2007，15，3390-3412。在100mL圆底烧瓶中向甲苯(6mL)中加入6-(2，3-二氟苯基)-7，8-二氢-5H-环庚并[b]吡啶-9(6H)-酮(148mg，0.542mmol)(与无水苯共沸)，得到无色溶液。加入(三苯基正膦亚基)乙酸乙酯(208mg，0.596mmol)，并将混合物加热回流过夜(4:30pm)。16h：LCMS显示完全转化为所需产物。TLC(1/1EtOAc/己烷)显示出一个极性较小的主要斑点(极性比起始原料反式醇小)。除去甲苯且残留物通过FCC用50％EtOAc/己烷纯化，得到所需产物，其为无色油状物(139mg，75％)。进行1H NMR和13C NMR并证实结构为单一异构体。MS(ESI)[M+H+]＝346.46；1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 8.43(dd，J＝4.78，1.76Hz，1H)7.33(dd，J＝7.55，1.51Hz，1H)7.13(dd，J＝7.55，4.78Hz，1H)6.91-7.00(m，2H)6.80-6.90(m，1H)6.36(s，1H)4.17(q，J＝7.05Hz，2H)3.25-3.43(m，2H)3.04-3.14(m，1H)2.93-3.05(m，1H)2.88(dd，J＝14.86，3.27Hz，1H)2.04-2.21(m，1H)1.83-2.02(m，1H)1.25(t，J＝7.05Hz，3H)；13CNMR(100MHz，氯仿-d)δppm 166.45，159.22，158.59，151.99-149.47(dd，J＝13.4和247Hz)，149.39-146.90(dd，J＝12.7和245Hz)，147.55，137.88，135.46(d，J＝11.4Hz)，133.41，123.98，123.25，122.43，120.89，115.09(d，J＝16.9Hz)，59.94，38.62，36.30，32.49，28.85，14.27。
中间体54
(E)-2-(6-(2，3-二氟苯基)-7，8-二氢-5H-环庚并[b]吡啶-9(6H)-亚基)乙酸
在50mL圆底烧瓶中向THF(1ml)中加入(E)-2-(6-(2，3-二氟苯基)-7，8-二氢-5H-环庚并[b]吡啶-9(6H)-亚基)乙酸乙酯(11.8mg，0.034mmol)，得到无色溶液。加入LiOH(0.2ml，0.200mmol)并将混合物在室温搅拌过夜(4:30pm)。16h：LCMS表明少量起始原料残留。加入0.5ml MeOH并将混合物再搅拌24小时。LCMS表明完全转化。浓缩并在高真空下进一步干燥以除去水，得到白色固体。其如下进一步干燥：与无水苯共沸并在高真空下干燥4小时。然后白色固体直接用于以下反应。MS(ESI)[M+H+]＝316.21。
中间体55
(E)-1-(1-(2-(6-(2，3-二氟苯基)-7，8-二氢-5H-环庚并[b]吡啶-9(6H)-亚基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2(3H)-酮
在100mL圆底烧瓶中向CH2Cl2(2ml)中加入(E)-2-(6-(2，3-二氟苯基)-7，8-二氢-5H-环庚并[b]吡啶-9(6H)-亚基)乙酸(10.72mg，0.034mmol)和1-(哌啶-4-基)-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2(3H)-酮(22.26mg，0.102mmol)(二盐酸盐)，得到无色混悬液。加入许尼希碱(0.030ml，0.170mmol)和3-(二乙氧基磷酰基氧基)-1，2，3-苯并三嗪-4(3H)-酮(20.35mg，0.068mmol)。反应混合物用DMF(0.5ml)稀释。大部分固体溶解。将其在室温搅拌44小时。其用EtOAc稀释并用水洗涤。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到黄褐色油状物/凝胶。通过FCC用8％MeOH/CH2Cl2纯化，得到所需产物，其为白色泡沫状物(18mg，100％)。MS(ESI)[M+H+]＝516.27；1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm11.18(宽单峰，1H)8.45(dd，J＝4.78，1.26Hz，1H)8.04(d，J＝5.04Hz，1H)7.39(d，J＝6.55Hz，1H)7.23-7.30(m，1H)7.15(dd，J＝7.68，4.91Hz，1H)6.84-7.08(m，4H)6.73(d，J＝2.52Hz，1H)4.91(d，J＝12.59Hz，1H)4.61(td，J＝12.15，3.65Hz，1H)4.34(d，J＝12.84Hz，1H)3.37(宽单峰，1H)3.02-3.31(m，3H)2.66-2.97(m，3H)2.05-2.36(m，4H)1.86-2.00(m，2H)。
中间体56和57
2-((6，9-反式)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基)乙酸乙酯和2-((6，9-顺式)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基)乙酸乙酯
在50mL圆底烧瓶中向MeOH(6mL)中加入(E)-2-(6-(2，3-二氟苯基)-7，8-二氢-5H-环庚并[b]吡啶-9(6H)-亚基)乙酸乙酯(113.6mg，0.331mmol)，得到无色溶液。加入Pd/C(35.2mg，0.033mmol)。将混合物在氢气气囊下搅拌4小时。将其过滤，洗涤并浓缩。用50％EtOAc/己烷进行FCC，得到两种所需产物，其均为无色油状物。得到1(50.0mg，40.5％)和2(66.7mg，54％)的1H NMR和13C NMR并证实上述结构。与氨基甲酸酯类似物相比，极性较小的一种产物(1)最可能为反式异构体(反式/顺式的比例为1/1.33)。MS(ESI)[M+H+]＝346.25(tR＝2.20和2.42分钟，在XBridge 4.6×50mm S5色谱柱上，进行4分钟)。反式产物：1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 8.32(dd，J＝4.78，1.51Hz，1H)7.36(dd，J＝7.43，1.64Hz，1H)6.93-7.09(m，4H)4.06-4.23(m，2H)3.68(ddd，J＝10.20，7.68，7.55Hz，1H)3.32-3.47(m，1H)3.22(dd，J＝16.24，7.93Hz，1H)2.85-3.00(m，1H)2.74(d，J＝14.10Hz，1H)2.59(dd，J＝16.12，7.05Hz，1H)2.04-2.17(m，2H)1.91(dt，J＝13.85，3.40Hz，1H)1.43-1.61(m，1H)1.17-1.28(m，3H)；13C NMR(100MHz，氯仿-d)δppm 173.58，162.50，152.01-149.41(dd，J＝13.3和246Hz)，149.41-146.73(dd，J＝24.0和244Hz)，146.28，136.95，136.86，135.45，124.15，122.10，121.41，114.88(d，J＝17.0Hz)，60.13，41.59，40.78，38.58，38.38，37.76，32.90，14.27。顺式产物：1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm8.35(dd，J＝4.91，1.64Hz，1H)7.29(dd，J＝7.30，1.51Hz，1H)7.02(dd，J＝7.55，4.78Hz，1H)6.89-6.97(m，2H)6.79-6.89(m，1H)4.03-4.16(m，2H)3.77(dt，J＝7.62，3.87Hz，1H)3.26(宽单峰，1H)3.10(d，J＝6.04Hz，2H)2.99(dd，J＝15.23，7.43Hz，1H)2.76(dd，J＝15.23，8.18Hz，1H)1.77-2.07(m，4H)1.14-1.25(m，3H)；13CNMR(100MHz，氯仿-d)δppm 172.62，161.47，152.00-149.40(dd，J＝13.7和247Hz)，149.53-146.75(dd，J＝20.2和245Hz)，146.90，137.97，136.72(d，J＝11.4Hz)，133.82，123.96，122.41，121.71，114.82(d，J＝17.1Hz)，60.34，39.41，36.84，36.70，35.68，31.42，29.64，14.21。
中间体58
2-((6，9-顺式)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基)乙酸
在50mL圆底烧瓶中向THF(2ml)中加入2-((6，9-顺式)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基)乙酸乙酯(66.7mg，0.193mmol)，得到无色溶液。加入LiOH(0.4ml，0.400mmol)并将混合物在室温搅拌过夜。16h：LCMS表明转化相对于起始原料是良好的。加入1ml MeOH并将混合物再搅拌24小时。LCMS表明完全转化。浓缩并在高真空下进一步干燥以除去水，得到白色固体。其如下进一步干燥：与无水苯共沸并在高真空下干燥4小时。然后白色固体直接用于以下反应。MS(ESI)[M+H+]＝318.22。
实施例5
1-(1-(2-((6，9-顺式)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2(3H)-酮
在100mL圆底烧瓶中向CH2Cl2(4ml)中加入2-((6，9-顺式)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基)乙酸(61.2mg，0.193mmol)和1-(哌啶-4-基)-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2(3H)-酮(126mg，0.579mmol)(二盐酸盐)，得到无色混悬液。加入许尼希碱(0.169ml，0.965mmol)和3-(二乙氧基磷酰基氧基)-1，2，3-苯并三嗪-4(3H)-酮(115mg，0.386mmol)。反应混合物用DMF(1ml)稀释。大部分固体溶解。将其在室温搅拌过夜。20h：LCMS显示无起始原料，且显示出产物及极性较小的峰。44h：极性较小的峰降低。其用EtOAc稀释并用水洗涤。分离各层。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到黄褐色油状物。通过FCC(ISCO)用8％MeOH/CH2Cl2纯化，得到所需产物，其为黄褐色泡沫状物(91mg，87％(2步))。LCMS：＞95％。1H NMR证实上述结构。MS(ESI)[M+H+]＝518.34；1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm11.57(宽单峰，1H)8.36(宽单峰，1H)8.04(d，J＝4.78Hz，1H)7.26-7.39(m，1H)7.17-7.27(m，1H)6.69-7.07(m，5H)4.81(t，J＝15.36Hz，1H)4.61(td，J＝12.21，4.03Hz，1H)4.16-4.39(m，1H)3.77-4.00(m，1H)3.07-3.49(m，4H)2.53-3.04(m，3H)1.65-2.47(m，8H)。
中间体59
2-((6，9-反式)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基)乙酸
在50mL圆底烧瓶中向THF(2ml)中加入2-((6，9-反式)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基)乙酸乙酯(50.0mg，0.145mmol)，得到无色溶液。加入LiOH(0.4ml，0.400mmol)并将混合物在室温搅拌过夜。16h：LCMS表明少量起始原料残留。加入1ml MeOH并将混合物再搅拌24小时。LCMS表明完全转化。将混合物浓缩并在高真空下进一步干燥以除去水，得到白色固体。其如下进一步干燥：与无水苯共沸并在高真空下干燥4小时。然后白色固体直接用于以下反应。MS(ESI)[M+H+]＝318.22。
实施例6和7
1-(1-(2-((6R，9S)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2(3H)-酮和1-(1-(2-((6S，9R)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2(3H)-酮
在100mL圆底烧瓶中向CH2Cl2(4ml)中加入2-((6，9-反式)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基)乙酸(46.0mg，0.145mmol)和1-(哌啶-4-基)-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2(3H)-酮(95mg，0.435mmol)(二盐酸盐)，得到无色混悬液。加入许尼希碱(0.127ml，0.725mmol)和3-(二乙氧基磷酰基氧基)-1，2，3-苯并三嗪-4(3H)-酮(87mg，0.290mmol)。反应混合物用DMF(1ml)稀释。大部分固体溶解。将其在室温搅拌过夜。44h：LCMS表明完全转化。其用EtOAc稀释并用水洗涤。分离各层。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到黄褐色油状物/凝胶。通过FCC(ISCO)用8％MeOH/CH2Cl2纯化，得到所需产物，其为黄褐色泡沫状物(68mg，86％(2步))。MS(ESI)[M+H+]＝518.27；1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 11.44(宽单峰，1H)8.25-8.42(m，1H)8.05(d，J＝5.29Hz，1H)7.38(t，J＝8.44Hz，1H)7.20-7.31(m，1H)6.83-7.10(m，5H)4.87(d，J＝12.34Hz，1H)4.53-4.73(m，1H)4.43(t，J＝15.36Hz，1H)3.81-4.00(m，1H)3.36-3.60(m，2H)3.24(t，J＝12.97Hz，1H)2.94(t，J＝11.21Hz，1H)2.33-2.80(m，4H)2.05-2.31(m，3H)1.80-2.05(m，3H)1.38-1.63(m，1H)。外消旋产物通过手性HPLC(Chiralpak AD-H分析性色谱柱4.6×250mm，5μm；流动相：40％MeOH/CO2；柱温：35℃；流速：2.0mL/min(历时26分钟)；注射量：5μL浓度为约2mg/mL的MeOH溶液)来拆分。化合物(6R，9S)为tR＝13.88分钟的第一个峰，而化合物(6S，9R)为tR＝19.19分钟的第二个峰。
中间体60
反式-2-(6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基)异二氢吲哚-1，3-二酮
在500mL圆底烧瓶中向CH2Cl2(40mL)中加入(6，9-顺式)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-醇(1.56g，5.67mmol)(与无水苯共沸)，得到无色溶液。在0℃加入异二氢吲哚-1，3-二酮(1.667g，11.33mmol)和三苯基膦(2.97g，11.33mmol)，接着加入DIAD(1.653mL，8.50mmol)。将混合物在氮气下温热至室温过夜。17h：LCMS显示完全转化。将其浓缩至干。直接用50％EtOAc/己烷进行FCC，得到两个接近的峰。将混合的峰(包括脱水的副产物)合并并浓缩，得到白色固体，其直接用于以下步骤。MS(ESI)[M+H+]＝405.23。
中间体61
反式-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-胺
在500mL圆底烧瓶中向MeOH(50mL)中加入2-((6，9-反式)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基)异二氢吲哚-1，3-二酮(2.293g，5.67mmol)，得到白色混悬液。加入肼(5mL，159mmol)(使用5ml水合肼)，并在预热的油浴中将混合物在70℃和氮气下搅拌5小时(固体逐渐消失且新固体逐渐析出)。LCMS显示完全转化。将残留物在0.5N NaOH和EtOAc之间分配。分离各层且水层用EtOAc萃取。合并的有机层用盐水洗涤，干燥并浓缩。用10％MeOH(含有2M氨)/CH2Cl2进行FCC，得到所需产物，其为无色油状物(0.65g，42％(2步)(一些可能在纯化期间损失))，所述油状物在静置后固化为白色固体。MS(ESI)[M+H+]＝275.26；1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 8.38(d，J＝4.78Hz，1H)7.30-7.41(m，1H)6.89-7.10(m，4H)4.28(d，J＝10.58Hz，1H)3.13-3.29(m，1H)2.63-3.00(m，4H)2.02-2.15(m，3H)1.51-1.70(m，1H)；13CNMR(100MHz，氯仿-d)δppm 170.83，151.85-149.39(dd，J＝13.3和246Hz)，149.29-146.72(d，J＝12.5和245Hz)，146.24，137.11，136.62(d，J＝11.6Hz)，134.30，124.17，122.10，121.78，114.95(d，J＝17.1Hz)，55.25，40.52，37.57，37.04，37.00。
中间体62
4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-羧酸苯甲酯
在烘干的500mL圆底烧瓶中向CH2Cl2(50mL)中加入1-(哌啶-4-基)-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2(3H)-酮二盐酸盐(2.91g，9.99mmol)，得到黄褐色混悬液。在氮气下加入Et3N(5.57mL，40.0mmol)。经由注射器逐滴加入氯甲酸苯甲酯(1.421mL，9.99mmol)。将混合物在室温搅拌过夜(2:00pm)。LCMS显示良好转化(一些起始原料残留)。反应混合物用EtOAc和水稀释。分离各层。有机层用盐水洗涤，干燥并浓缩。残留物通过FCC用8％MeOH/CH2Cl2纯化，得到所需产物，其为无色油状物(2.17g，62％)。MS(ESI)[M+H+]＝353.30。其无需进一步表征即用于以下步骤。
中间体63
4-(2-氧代-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-羧酸苯甲酯
在500mL圆底烧瓶中向THF(40mL)中加入4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-羧酸苯甲酯(1.62g，4.60mmol)，得到无色溶液。加入NaH(0.552g，22.99mmol)(过量)。在氮气下搅拌5分钟后，加入SEM-Cl(0.897mL，5.06mmol)。将混合物在室温搅拌过夜。16h：LCMS显示良好转化。反应混合物用EtOAc稀释并用水缓慢淬灭(放出气体！)。分离各层。有机层用盐水洗涤，干燥并浓缩，得到微绿色油状物。
TLC(10％MeOH/CH2Cl2)显示出蓝色的主要斑点(Rf为约0.25)(极性比起始原料稍小)。通过FCC用10％MeOH/CH2Cl2纯化，得到所需产物，其为无色油状物(1.92g，87％)。MS(ESI)[M+H+]＝483.33；1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm7.25-7.40(m，6H)6.82-6.94(m，1H)6.60(t，J＝7.05Hz，1H)5.66(s，2H)5.11(s，2H)4.45-4.63(m，1H)4.33(宽单峰，2H)3.55-3.69(m，2H)2.88(d，J＝1.01Hz，2H)2.06(d，J＝9.06Hz，2H)1.80(d，J＝11.58Hz，2H)0.82-1.00(m，2H)-0.13至-0.03(m，9H)。
中间体64
1-(哌啶-4-基)-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2(3H)-酮
在500mL圆底烧瓶中向MeOH(30mL)中加入4-(2-氧代-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-羧酸苯甲酯(1.85g，3.83mmol)，得到无色溶液。加入Pd/C(0.408g，0.383mmol)，并将混合物在氢气气囊下搅拌过夜。17h：LCMS表明完全转化。将其过滤，洗涤并在高真空下浓缩，得到无色泡沫状物(1.31g，100％)。MS(ESI)[M+H+]＝349.29；1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 9.55(宽峰，1H)7.64-8.06(m，1H)7.42(宽单峰，1H)6.81(宽单峰，1H)5.66(宽单峰，2H)4.73(d，J＝13.85Hz，1H)3.42-3.89(m，4H)3.08-3.42(m，2H)2.88(宽单峰，2H)1.72-2.16(m，2H)0.76-0.94(m，2H)-0.22至-0.08(m，9H)。
中间体65
N-((6，9-反式)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基)-4-(2-氧代-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-甲酰胺
在烘干的100mL圆底烧瓶中向CH2Cl2(8mL)中加入1-(哌啶-4-基)-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2(3H)-酮(262mg，0.752mmol)，得到无色溶液。在氮气下加入Et3N(0.192mL，1.379mmol)并将混合物冷却至-20℃。逐滴加入氯甲酸三氯甲基酯(0.061mL，0.502mmol)。将混合物在搅拌下逐渐温热至10℃且保持1小时，在此期间溶液变为微黄色。TLC(10％MeOH/CH2Cl2)显示出极性较小的亮蓝色主要斑点且在基线无起始原料斑点。将其在真空下浓缩至干(白色固体)且在高真空下进一步干燥。在室温经由导管加入(6，9-反式)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-胺(172mg，0.627mmol)和Et3N(0.192mL，1.379mmol)在1ml THF中的溶液(及用2ml淋洗)。再加入Et3N(0.192mL，1.379mmol)。将所得到的浅黄色混悬液在氮气下搅拌过夜。16h：LCMS显示完全转化。其用水和EtOAc稀释。分离各层。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩。通过FCC用10％MeOH/CH2Cl2纯化，得到所需产物(465mg，93％)。MS(ESI)[M+H+]＝649.34；1H NMR(500MHz，氯仿-d)δppm 8.36(d，J＝4.88Hz，1H)7.96-8.09(m，1H)7.55(d，J＝4.27Hz，1H)7.46(d，J＝7.63Hz，1H)7.29(d，J＝7.93Hz，1H)7.13(t，J＝6.10Hz，1H)6.97-7.09(m，3H)6.93(dd，J＝7.32，5.49Hz，1H)5.39(s，2H)5.11(dd，J＝10.38，3.66Hz，1H)4.53-4.66(m，1H)4.33(t，J＝11.29Hz，2H)3.70(t，J＝8.24Hz，2H)3.25-3.44(m，1H)2.84-3.05(m，3H)2.77(d，J＝14.04Hz，1H)2.19-2.50(m，4H)2.11(d，J＝14.04Hz，1H)1.91(d，J＝11.29Hz，2H)1.53(t，J＝12.05Hz，1H)0.95(t，J＝8.24Hz，2H)-0.06(s，9H)。
实施例8和9
N-((6R，9R)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基)-4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-甲酰胺和N-((6S，9S)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基)-4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-甲酰胺
在250mL圆底烧瓶中向CH2Cl2(4mL)中加入N-((6，9-反式)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基)-4-(2-氧代-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-甲酰胺(外消旋的)(200mg，0.308mmol)，得到黄褐色溶液。加入TFA(1.000mL)，并将混合物在室温搅拌1小时。LCMS表明完全转化。除去挥发物。将残留物在0.5N NaOH和EtOAc之间分配。分离各层且水层用EtOAc萃取(LCMS表明在水层中没有产物)。合并的有机层用盐水洗涤，干燥并浓缩，得到黄褐色泡沫状物。通过FCC用10％MeOH/CH2Cl2纯化，得到所需外消旋产物(118mg，74％)，其为无色泡沫状物/固体。LCMS表明纯度＞95％。MS(ESI)[M+H+]＝519.24。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 11.78(宽单峰，1H)8.23-8.41(m，1H)7.98(d，J＝4.28Hz，1H)7.56(d，J＝4.28Hz，1H)7.34-7.47(m，1H)7.19-7.33(m，1H)7.07(dd，J＝7.43，4.91Hz，1H)6.90-7.02(m，3H)6.87(dd，J＝7.81，5.29Hz，1H)5.12(dd，J＝10.45，3.90Hz，1H)4.46-4.64(m，1H)4.19-4.42(m，2H)3.28(t，J＝12.59Hz，1H)2.88-3.05(m，2H)2.77-2.86(m，1H)2.71(d，J＝13.85Hz，1H)2.41(d，J＝13.35Hz，1H)2.14-2.34(m，3H)2.04(d，J＝12.09Hz，1H)1.86(d，J＝10.32Hz，2H)1.37-1.58(m，1H)。外消旋产物通过手性HPLC(Chiralpak AD-H分析性色谱柱4.6×250mm，5μm；流动相：40％MeOH/CO2；柱温：35℃；流速：2.0mL/min(历时32分钟)；在292nm进行紫外检测；注射量：5μL浓度为约2mg/mL的MeOH溶液)来拆分。化合物(6R，9R)为tR＝15.26分钟的第一个峰，而化合物(6S，9S)为tR＝24.98分钟的第二个峰。
中间体66
(E)-6-苯基-9-(三异丙基甲硅烷基氧基)-8，9-二氢-7H-环庚并[b]吡啶
在氮气下将苯基硼酸(0.060g，0.495mmol)、碳酸钠(0.382mL，0.764mmol)、三氟甲磺酸(E)-9-(三异丙基甲硅烷基氧基)-8，9-二氢-7H-环庚并[b]吡啶-6-基酯(0.1922g，0.413mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(0.024g，0.021mmol)在甲苯(5mL)和MeOH(1mL)中的混合物加热至80℃且保持3小时。LCMS显示无起始原料。反应混合物用乙酸乙酯稀释并用水洗涤一次。分离乙酸乙酯层，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩，得到粗产物。粗品按原样使用。MS(ESI)[M+H+]＝394.32。
中间体67
(E)-6-(2，5-二氟苯基)-9-(三异丙基甲硅烷基氧基)-8，9-二氢-7H-环庚并[b]吡啶
在氮气下将2，5-二氟苯基硼酸(0.088g，0.554mmol)、碳酸钠(0.427mL，0.854mmol)、相应的反应物和四(三苯基膦)钯(0)(0.027g，0.023mmol)在甲苯(5mL)和MeOH(1mL)中的混合物加热至80℃且保持3小时。LCMS显示无起始原料。反应混合物用乙酸乙酯稀释并用水洗涤一次。分离乙酸乙酯层，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩，得到粗产物。粗品按原样使用。MS(ESI)[M+H+]＝430.29。
中间体68
(E)-6-(3，4-二氟苯基)-9-(三异丙基甲硅烷基氧基)-8，9-二氢-7H-环庚并[b]吡啶
在氮气下将3，4-二氟苯基硼酸(0.083g，0.527mmol)、碳酸钠(0.406mL，0.813mmol)、三氟甲磺酸(E)-9-(三异丙基甲硅烷基氧基)-8，9-二氢-7H-环庚并[b]吡啶-6-基酯(0.2045g，0.439mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(0.025g，0.022mmol)在甲苯(5mL)和MeOH(1mL)中的混合物加热至80℃且保持3小时。LCMS显示无起始原料。反应混合物用乙酸乙酯稀释并用水洗涤一次。分离乙酸乙酯层，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩，得到粗产物。粗品按原样使用。MS(ESI)[M+H+]＝430.36。
中间体69
(E)-6-苯基-8，9-二氢-7H-环庚并[b]吡啶-9-醇
在室温将TBAF(1.041mL，1.041mmol)加到(E)-6-苯基-9-(三异丙基甲硅烷基氧基)-8，9-二氢-7H-环庚并[b]吡啶(0.2049g，0.521mmol)的THF(5mL)溶液中。将反应混合物在室温搅拌6小时。真空除去溶剂，得到粗产物。MS(ESI)[M+H+]＝238.25。
中间体70
(E)-6-(2，5-二氟苯基)-8，9-二氢-7H-环庚并[b]吡啶-9-醇
在室温将TBAF(0.954mL，0.954mmol)加到(E)-6-(2，5-二氟苯基)-9-(三异丙基甲硅烷基氧基)-8，9-二氢-7H-环庚并[b]吡啶(0.2049g，0.477mmol)的THF(5mL)溶液中。将反应混合物在室温搅拌6小时。真空除去溶剂且产物通过快速色谱柱来纯化(用0％至50％至100％乙酸乙酯/己烷洗脱)(102.2mg，78％)。MS(ESI)[M+H+]＝274.23。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 8.37(dd，J＝4.78，1.26Hz，1H)7.51(dd，J＝7.81，1.26Hz，1H)7.17-7.27(m，1H)6.87-7.05(m，3H)6.44(s，1H)5.74(宽单峰，1H)4.77(dd，J＝10.45，2.64Hz，1H)2.79-2.93(m，1H)2.66-2.77(m，1H)2.48-2.60(m，J＝13.53，5.45，5.45，2.77Hz，1H)1.97-2.11(m，1H)。
中间体71
(E)-6-(3，4-二氟苯基)-8，9-二氢-7H-环庚并[b]吡啶-9-醇
在室温将TBAF(0.878mL，0.878mmol)加到(E)-6-(3，4-二氟苯基)-9-(三异丙基甲硅烷基氧基)-8，9-二氢-7H-环庚并[b]吡啶(0.189g，0.439mmol)的THF(5mL)溶液中。将反应混合物在室温搅拌6小时。真空除去溶剂且产物通过快速色谱柱来纯化(用0％至50％至100％乙酸乙酯/己烷洗脱)(93.5mg，78％)。MS(ESI)[M+H+]＝274.23。
一般还原方法：底物(来自TBAF脱保护)及Pd/C(10％活性炭)(5％mol)在MeOH(5mL)中的溶液在室温用氢气气囊氢化过夜。将反应混合物过滤通过硅藻土塞并用乙酸乙酯洗涤。将滤液浓缩且产物通过快速色谱柱来纯化(用0％至50％至100％乙酸乙酯/己烷洗脱)。反式产物(作为次要产物)首先洗脱出来，而顺式产物(作为主要产物)是极性较大的。
中间体72
(6，9-反式)-6-苯基-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-醇
由0.224mmol起始原料得到15mg产物。与顺式异构体的合并收率为98％。MS(ESI)[M+H+]＝240.32。
中间体73
(6，9-顺式)-6-苯基-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-醇
由0.224mmol起始原料得到38mg产物。与反式异构体的合并收率为98％。MS(ESI)[M+H+]＝240.32。
中间体74
(6，9-反式)-6-(2，5-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-醇
由0.374mmol起始原料得到19.3mg产物(反式产物，极性较小的斑点，Rf为约0.7(25％乙酸乙酯/己烷))。与顺式异构体的合并收率为90％。1HNMR(400MHz，氯仿-d)δppm 8.36-8.45(m，1H)7.46(dd，J＝7.55，1.26Hz，1H)7.16(dd，J＝7.43，4.91Hz，1H)6.94-7.04(m，2H)6.83-6.92(m，1H)4.87(dd，J＝11.33，2.01Hz，1H)3.05-3.19(m，1H)2.74-2.89(m，2H)2.25-2.35(m，1H)2.06-2.17(m，2H)1.56-1.68(m，2H)。
中间体75
(6，9-顺式)-6-(2，5-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-醇
由0.374mmol起始原料得到92.4mg产物(顺式产物，极性较大的峰，Rf为约0.5(50％乙酸乙酯/己烷))。与反式异构体的合并收率为90％。1HNMR(400MHz，氯仿-d)δppm 8.18-8.33(m，1H)7.22-7.35(m，1H)7.03(dd，J＝7.55，5.04Hz，1H)6.93(td，J＝9.25，4.66Hz，1H)6.70-6.87(m，2H)4.92-5.07(m，1H)3.34-3.45(m，1H)3.29(t，J＝8.44Hz，1H)2.89(dd，J＝14.10，2.27Hz，1H)2.14-2.30(m，1H)1.91-2.11(m，3H)。
中间体76
(6，9-反式)-6-(3，4-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-醇
由0.342mmol起始原料得到15mg产物。与顺式异构体的合并收率为86％。MS(ESI)[M+H+]＝276.23；1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 8.30-8.48(m，1H)7.41-7.49(m，1H)6.88-7.18(m，4H)5.93(宽单峰，1H)4.85(dd，J＝11.21，2.14Hz，1H)3.10(dd，J＝14.10，11.58Hz，1H)2.71-2.85(m，1H)2.47-2.57(m，1H)2.27-2.36(m，1H)1.97-2.18(m，2H)1.47-1.68(m，1H)。
中间体77
(6，9-顺式)-6-(3，4-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-醇
由0.342mmol起始原料得到66.4mg产物。与反式异构体的合并收率为86％。MS(ESI)[M+H+]＝276.23；1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 8.33(dd，J＝5.04，1.51Hz，1H)7.23-7.31(m，1H)7.07(dd，J＝7.43，4.91Hz，1H)6.93-6.99(m，1H)6.80-6.85(m，1H)6.75(dd，J＝4.15，2.14Hz，1H)5.27(宽单峰，1H)4.95(dd，J＝9.19，2.64Hz，1H)3.15-3.33(m，1H)3.00-3.13(m，2H)2.01-2.25(m，3H)1.83-1.97(m，1H)。
实施例10
4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-羧酸(6，9-反式)-6-苯基-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基酯
在室温将NaH(0.025g，1.003mmol)加到4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-羧酸4-硝基苯基酯与三乙胺(1∶3)三盐酸盐(0.080g，0.100mmol)和(6R，9R)-6-苯基-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-醇(0.016g，0.067mmol)的THF(5mL)混悬液中。将反应混合物在室温搅拌4小时。反应混合物通过加入水来淬灭。将反应混合物进一步在乙酸乙酯和水之间分配。分离乙酸乙酯层，用水洗涤两次，然后干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。进行快速色谱柱(用0％至5％至10％甲醇/CH2Cl2洗脱)(31.1mg，87％)。MS(ESI)[M+H+]＝484.20；1H NMR(500MHz，氯仿-d)δppm 8.45(d，J＝4.58Hz，1H)8.08(d，J＝5.19Hz，1H)7.40(d，J＝7.32Hz，2H)7.33(t，J＝7.78Hz，2H)7.23(d，J＝7.93Hz，3H)7.12(宽单峰，1H)6.93-7.00(m，1H)6.05(d，J＝10.99Hz，1H)4.64(宽单峰，3H)3.33(dd，J＝13.89，11.75Hz，1H)3.05(宽单峰，2H)2.88(d，J＝14.34Hz，1H)2.61(td，J＝11.06，3.20Hz，1H)1.79-2.35(m，9H)。
实施例11
4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-羧酸(6，9-反式)-6-(2，5-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基酯
在室温将NaH(0.036g，1.417mmol)加到4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-羧酸4-硝基苯基酯与三乙胺(1∶3)三盐酸盐(0.113g，0.142mmol)和(6R，9R)-6-(2，5-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-醇与(6S，9S)-6-(2，5-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-醇(1∶1)(0.052g，0.094mmol)的THF(5mL)混悬液中。将反应混合物在室温搅拌4小时。反应混合物通过加入水来淬灭。将反应混合物进一步在乙酸乙酯和水之间分配。分离乙酸乙酯层并，用水洗涤两次，然后干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。进行快速色谱柱(用0％至5％至10％甲醇/CH2Cl2洗脱)，得到所需产物(32.2mg，63％)。MS(ESI)[M+H+]＝520.25；1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 10.77(宽单峰，1H)8.45(d，J＝4.03Hz，1H)8.07(d，J＝4.78Hz，1H)7.42(d，J＝6.80Hz，2H)7.13(宽单峰，1H)6.93-7.05(m，3H)6.84-6.92(m，1H)6.02(d，J＝10.83Hz，1H)4.34-4.81(m，3H)3.30(t，J＝12.59Hz，1H)2.87-3.19(m，3H)2.81(d，J＝14.35Hz，1H)2.63(宽单峰，1H)2.23-2.39(m，2H)2.12-2.22(m，2H)1.90(宽单峰，3H)；19FNMR(376MHz，氯仿-d)δppm-118.29(d，J＝17.24Hz，1F)-124.51(d，J＝17.24Hz，1F)。
实施例12
4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-羧酸(6，9-反式)-6-(3，4-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基酯
在室温将NaH(0.056g，2.231mmol)加到4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-羧酸4-硝基苯基酯与三乙胺(1:3)三盐酸盐(0.178g，0.223mmol)和相应的反应物的THF(5mL)混悬液中。将反应混合物在室温搅拌4小时。反应混合物通过加入水来淬灭。将反应混合物进一步在乙酸乙酯和水之间分配。分离乙酸乙酯层，用水洗涤两次，然后干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。进行快速色谱柱(用0％至5％至10％甲醇/CH2Cl2洗脱)，得到所需产物(33.7mg，41.9％)。MS(ESI)[M+H+]＝520.27；1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 10.75(宽单峰，1H)8.45(d，J＝3.78Hz，1H)8.07(d，J＝5.04Hz，1H)7.40(d，J＝7.05Hz，2H)6.86-7.16(m，5H)6.00(d，J＝10.83Hz，1H)4.33-4.76(m，3H)3.26(dd，J＝13.85，11.58Hz，1H)3.03(宽单峰，2H)2.80(s，1H)2.50-2.66(m，1H)1.82-2.21(m，6H)1.19-1.28(m，2H)；19F NMR(376MHz，氯仿-d)δppm-138.37至-135.13(m，1F)-141.92-139.34(m，1F)。
中间体78
2’-氧代-1’，2’-二氢螺[哌啶-4，4’-吡啶并[2，3-d][1，3]噁嗪]-1-羧酸4-硝基苯基酯
在50mL圆底烧瓶中向CH2Cl2(6mL)中加入螺[哌啶-4，4’-吡啶并[2，3-d][1，3]噁嗪]-2’(1’H)-酮(187mg，0.853mmol)(与无水苯共沸)和氯甲酸4-硝基苯基酯(174mg，0.861mmol)，得到黄褐色溶液。加入Et3N(0.238mL，1.706mmol)，将混合物在室温和氮气下搅拌过夜(4:00pm)，然后过周末。混合物仍含有一些固体。加入5ml CHCl3以溶解固体并将澄清黄色溶液再搅拌一天。TLC显示无起始原料胺。将其浓缩至干并在高真空下进一步干燥。然后残留物按原样使用。
实施例13
2-氧代-1，2-二氢螺[苯并[d][1，3]噁嗪-4，4’-哌啶]-1’-羧酸(6，9-反式)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基酯
在100mL圆底烧瓶中向THF(5mL)中加入(6，9-反式)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-醇(79.3mg，0.288mmol)(与无水苯共沸)和2’-氧代-1’，2’-二氢螺[哌啶-4，4’-吡啶并[2，3-d][1，3]噁嗪]-1-羧酸4-硝基苯基酯(221mg，0.576mmol)，得到黄褐色混悬液。在氮气下加入NaH(69.1mg，2.88mmol)(过量)。将混合物在室温和氮气下搅拌过夜。17h：LCMS显示出两个小峰，其中一个可能为产物。其用水淬灭(放出气体！)并用EtOAc萃取。分离各层且水层用EtOAc萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩。通过FCC用8％MeOH/CH2Cl2纯化，得到所需产物，其为无色固体(10.8mg，7.2％)。MS(ESI)[M+H+]＝521.39；1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm9.88(宽单峰，1H)8.23-8.53(m，2H)7.50(宽单峰，1H)7.36-7.45(m，1H)6.91-7.18(m，5H)5.99(d，J＝10.32Hz，1H)4.39(宽单峰，2H)3.22-3.71(m，3H)2.90-3.05(m，1H)2.81(d，J＝14.35Hz，1H)1.85-2.55(m，6H)1.67(s，2H)。
中间体79
(6R，9R)-6-(2，3-二氟苯基)-3-硝基-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-醇在500mL圆底烧瓶中向CH2Cl2(80mL)中加入(6R，9R)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-醇(2.912g，10.58mmol)(手性的)(与无水苯共沸)和四丁基硝酸铵(6.44g，21.16mmol)，得到无色溶液。在氮气下经由注射器逐滴加入TFAA(3.29mL，23.27mmol)(3:00pm)。将混合物在室温搅拌过夜(4:00pm)。17h：除去挥发物并将残留物溶于60ml THF中。加入15ml水和氢氧化锂(1.267g，52.9mmol)。将混合物在室温搅拌2小时。LCMS显示CF3CO-产物被水解。其用EtOAc稀释。分离各层。有机层用盐水洗涤，干燥并浓缩，得到黄褐色油状物。通过FCC用50％EtOAc/己烷纯化，得到极性较小的峰(通过1H NMR确定可能为硝酸酯)、起始原料(0.54g，18.5％)和产物(376mg，11％)。MS(ESI)[M+H+]＝321.11；1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm9.29(d，J＝2.27Hz，1H)8.32(d，J＝2.27Hz，1H)7.00-7.18(m，3H)5.48(d，J＝3.02Hz，1H)5.06(d，J＝11.58Hz，1H)3.28-3.44(m，1H)2.88-3.08(m，2H)2.36-2.48(m，1H)2.16-2.34(m，2H)1.66-1.74(m，1H)。
中间体80
N-((6R，9R)-6-(2，3-二氟苯基)-3-硝基-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基)-4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-甲酰胺
在100mL圆底烧瓶中向THF(4mL)中加入(6R，9R)-6-(2，3-二氟苯基)-3-硝基-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-醇(76.3mg，0.238mmol)(与无水苯共沸)和4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-羧酸4-硝基苯基酯(285mg，0.357mmol)，得到黄色混悬液。在室温和氮气下加入NaH(57.2mg，2.382mmol)(过量)。将混合物在室温和氮气下搅拌4小时。反应混合物用水缓慢淬灭并用EtOAc萃取。分离各层。有机层用盐水洗涤，干燥并浓缩。深色油状物通过FCC用10％MeOH/CH2Cl2纯化。将所需产物(其为主峰)浓缩，得到淡橙色固体(17.1mg，13％)。MS(ESI)[M+H+]＝565.03。
实施例14
N-((6R，9R)-3-氨基-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基)-4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-甲酰胺
在100mL圆底烧瓶中向MeOH(2mL)中加入4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-羧酸(6R，9R)-6-(2，3-二氟苯基)-3-硝基-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基酯(17.1mg，0.030mmol)，得到黄褐色混悬液。加入Pd/C(17mg，0.016mmol)，并将混合物在氢气(气囊)下搅拌4小时(10:30am)。LCMS表明完全转化。将其过滤并浓缩。残留物通过FCC用10％MeOH/CH2Cl2纯化，得到所需产物，其为白色固体(7.0mg，39％)。MS(ESI)[M+H+]＝535.05；1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 10.05(宽单峰，1H)8.05-8.15(m，1H)8.00(宽单峰，1H)7.36-7.59(m，1H)7.28(s，1H)6.91-7.13(m，4H)5.97(d，J＝10.32Hz，1H)4.28-4.80(m，3H)3.54-4.04(m，1H)3.16-3.36(m，1H)3.04(宽单峰，3H)2.76(d，J＝14.35Hz，1H)2.23-2.44(m，2H)2.05-2.23(m，3H)1.77-2.05(m，4H)。
中间体81
(6R，9R)-3-氨基-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-醇
将Pd/C(37mg，0.035mmol)和(6R，9R)-6-(2，3-二氟苯基)-3-硝基-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-醇(300mg，0.937mmol)在甲醇(10mL)中的混合物在氢气(气囊)下氢化4小时。LCMS显示反应完成。将反应混合物过滤通过硅藻土塞。将滤液浓缩，得到粗产物。MS(ESI)[M+H+]＝291.29；1HNMR(400MHz，氯仿-d)δppm 7.84(宽单峰，1H)7.02(宽单峰，3H)6.79(宽单峰，1H)5.90(宽单峰，1H)4.74(d，J＝10.32Hz，1H)3.87(宽单峰，2H)3.06(t，J＝12.34Hz，1H)2.86(宽单峰，1H)2.62(d，J＝13.85Hz，1H)2.26(d，J＝12.34Hz，1H)1.96-2.12(m，3H)1.52(宽单峰，1H)。
中间体82
(6R，9R)-6-(2，3-二氟苯基)-3-(二甲基氨基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-醇
在室温将氰基硼氢化钠(242mg，3.86mmol)加到(6R，9R)-3-氨基-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-醇(56mg，0.193mmol)和甲醛(1mL，13.43mmol)的乙腈(2mL)溶液中。将反应混合物在室温搅拌4小时。将乙酸(0.5mL，8.73mmol)加到反应混合物中(注意：观察到引起乙腈回流的放热)并将反应混合物搅拌过夜。真空除去大部分挥发物，将NaOH(1N)加到粗品中，且用乙酸乙酯萃取两次。将乙酸乙酯层干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。进行快速色谱柱(0％至4％甲醇/CH2Cl2)，得到所需产物(27.6mg，45％)。MS(ESI)[M+H+]＝319.35。
实施例15
4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-羧酸(6R，9R)-6-(2，3-二氟苯基)-3-(二甲基氨基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基酯
(6R，9R)-6-(2，3-二氟苯基)-3-(二甲基氨基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-醇(27.6mg，0.087mmol)在搅拌下用苯共沸。在室温将氢化钠(20.80mg，0.867mmol)加到(6R，9R)-6-(2，3-二氟苯基)-3-(二甲基氨基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-醇(27.6mg，0.087mmol)和4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-羧酸4-硝基苯基酯(43.2mg，0.113mmol)的THF(3mL)混悬液中。将反应混合物在该温度搅拌过夜。反应混合物用水淬灭并在乙酸乙酯和水之间分配。乙酸乙酯层用水再洗涤两次，然后干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。进行快速色谱柱(0％至4％至8％甲醇/CH2Cl2)，得到所需产物(19.8mg，36％)。MS(ESI)[M+H+]＝563.35；1H NMR(500MHz，氯仿-d)δppm10.30(宽单峰，1H)8.08(d，J＝5.49Hz，1H)7.95-8.05(m，1H)7.37-7.53(m，1H)6.94-7.14(m，4H)6.79(宽单峰，1H)6.00(d，J＝10.38Hz，1H)4.66(宽多重峰，3H)3.32(t，J＝12.67Hz，1H)3.08(宽多重峰，2H)2.91-3.02(m，6H)2.29(d，J＝13.73Hz，2H)2.13-2.24(m，2H)1.86-2.07(m，2H)1.20-1.40(m，3H)0.75-0.98(m，1H)。
中间体83
(6R，9R)-6-(2，3-二氟苯基)-9-(三异丙基甲硅烷基氧基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-1-氧化物
在室温将mCPBA(间氯过氧苯甲酸)(1.239g，5.53mmol)加到(6R，9R)-6-(2，3-二氟苯基)-9-(三异丙基甲硅烷基氧基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶(2.17g，5.03mmol)的CH2Cl2(30mL)溶液中。将反应混合物在室温搅拌过夜。真空除去溶剂。产物通过快速色谱柱来纯化(用0％至50％至85％乙酸乙酯/己烷洗脱)。色谱柱用85％乙酸乙酯/己烷洗脱，由此得到产物(1.572g，69％)。MS(ESI)[M+H+]＝448.21；1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm8.14(宽单峰，1H)6.94-7.11(m，2H)6.84-6.92(m，2H)6.66-6.72(m，1H)6.42(t，J＝4.28Hz，1H)4.04(dd，J＝14.73，4.41Hz，1H)3.73-3.88(m，1H)2.96(dd，J＝14.48，5.41Hz，1H)2.50(d，J＝5.79Hz，1H)2.13-2.25(m，2H)1.80-1.94(m，1H)1.18-1.32(m，3H)1.09(d，J＝7.55Hz，9H)1.00(d，J＝7.55Hz，9H)。
中间体84
(6R，9R)-6-(2，3-二氟苯基)-9-羟基-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-1-氧化物
在室温将TBAF(4.18mL，4.18mmol)加到(6R，9R)-6-(2，3-二氟苯基)-9-(三异丙基甲硅烷基氧基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-1-氧化物(1.56g，3.48mmol)的THF(10mL)溶液中。将反应混合物在室温搅拌2小时且LCMS显示反应完成。真空除去溶剂，将粗品加载至快速色谱柱上并用0％至10％甲醇/CH2Cl2洗脱，得到所需产物(0.7662g，75％)，其为黄色固体。MS(ESI)[M+H+]＝292.10；1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 8.16-8.26(m，1H)7.14-7.20(m，1H)6.98-7.12(m，3H)6.90(td，J＝7.55，1.76Hz，1H)5.38-5.48(m，1H)3.24-3.47(m，2H)3.02(dd，J＝14.60，1.76Hz，1H)2.27-2.44(m，3H)1.79-1.94(m，1H)。
中间体85
(R)-6-(2，3-二氟苯基)-9-氧代-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-1-氧化物
在室温将戴斯-马丁高碘剂(1.227g，2.89mmol)加到(6R，9R)-6-(2，3-二氟苯基)-9-羟基-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-1-氧化物(0.7662g，2.63mmol)的CH2Cl2(8mL)溶液中。将反应混合物在室温搅拌1小时。将反应混合物直接加载至色谱柱上并用10％甲醇/CH2Cl2分离(梯度为0％至10％)(0.54g，42％)。MS(ESI)[M+H+]＝290.03。
中间体86
(R)-2-(叔丁基氨基)-6-(2，3-二氟苯基)-7，8-二氢-5H-环庚并[b]吡啶-9(6H)-酮
在0℃将4-甲基苯磺酸酐(0.930g，2.85mmol)加到(R)-6-(2，3-二氟苯基)-9-氧代-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-1-氧化物(0.412g，1.424mmol)和2-甲基丙-2-胺(0.604mL，5.70mmol)的三氟甲苯(3mL)/CH2Cl2(3.00mL)混悬液中。将反应混合物在0℃搅拌30分钟，然后用乙酸乙酯稀释。粗品用NaOH(1N)洗涤两次，分离乙酸乙酯层，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。进行快速色谱柱(0％至40％至60％乙酸乙酯/己烷)，得到所需产物(0.1861g，38％)。MS(ESI)[M+H+]＝345.1；1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 7.18(d，J＝8.56Hz，1H)6.95-7.10(m，2H)6.82-6.95(m，1H)6.60(d，J＝8.56Hz，1H)4.95(宽单峰，1H)3.45-3.58(m，1H)2.91-3.05(m，3H)2.73-2.85(m，1H)2.13-2.27(m，1H)1.95-2.11(m，1H)1.43(s，9H)。
中间体87
(6R，9R)-2-(叔丁基氨基)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-醇
在室温将硼氢化钠(0.072g，1.893mmol)加到(R)-2-(叔丁基氨基)-6-(2，3-二氟苯基)-7，8-二氢-5H-环庚并[b]吡啶-9(6H)-酮(0.2173g，0.631mmol)的MeOH(10mL)溶液中。将反应混合物在室温搅拌1小时。LCMS显示反应完成。真空除去溶剂。粗品通过快速色谱柱来分离(用0％至35％至65％乙酸乙酯/己烷洗脱)，得到两个化合物。标题化合物为极性较小的化合物(134.9mg，61％)。HPLC tR＝2.43分钟；MS(ESI)[M+H+]＝347.33；1HNMR(400MHz，氯仿-d)δppm 7.18(d，J＝8.06Hz，1H)6.99-7.11(m，3H)6.28(d，J＝8.06Hz，1H)4.76(dd，J＝11.33，2.01Hz，1H)4.53(宽单峰，1H)3.03(d，J＝13.85Hz，1H)2.89(d，J＝4.28Hz，1H)2.64(d，J＝14.10Hz，1H)2.28(dd，J＝12.59，2.01Hz，1H)2.13(dd，J＝9.82，3.78Hz，2H)1.58-1.71(m，1H)1.42-1.55(m，9H)。
中间体88
(6R，9S)-2-(叔丁基氨基)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-醇
标题化合物为由上述反应得到的极性较大的化合物(51.1mg，23％)。HPLC tR＝2.31分钟；MS(ESI)[M+H+]＝347.33；1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 6.85-7.10(m，3H)6.72-6.79(m，1H)6.24(d，J＝8.31Hz，1H)4.84(dd，J＝9.69，3.15Hz，1H)4.40-4.56(m，1H)3.44-3.56(m，1H)2.92-3.07(m，2H)2.14-2.25(m，1H)2.05-2.13(m，2H)1.84-1.99(m，1H)1.38-1.55(s，9H)。
实施例16
4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-羧酸(6R，9R)-2-(叔丁基氨基)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基酯
(6R，9R)-2-(叔丁基氨基)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-醇(69.1mg，0.199mmol)在搅拌下用苯共沸。在室温将氢化钠(47.9mg，1.995mmol)加到(6R，9R)-2-(叔丁基氨基)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-醇(69.1mg，0.199mmol)和4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-羧酸4-硝基苯基酯与三乙胺(1∶3)三盐酸盐(238mg，0.299mmol)的THF(3mL)混悬液中。将反应混合物在室温搅拌过夜。反应混合物用水淬灭并在乙酸乙酯和水之间分配。乙酸乙酯层用水洗涤两次，然后干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。进行快速色谱柱(0％至10％甲醇/CH2Cl2)，得到所需产物，其为白色固体。产物通过制备性HPLC来进一步纯化(69.2mg，26％)。1H NMR(500MHz，氯仿-d)δppm 8.07(d，J＝5.19Hz，1H)7.34-7.44(m，1H)6.96-7.15(m，4H)6.08-6.28(m，1H)5.83-5.99(m，1H)4.42-4.77(m，3H)3.16-3.25(m，1H)2.86-3.14(m，3H)2.62-2.72(m，1H)2.11-2.38(m，5H)1.94(d，J＝11.90Hz，3H)1.52-1.60(m，1H)1.46(s，9H)。
实施例17
4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-羧酸(6R，9R)-2-氨基-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基酯
将4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-羧酸(6R，9R)-2-(叔丁基氨基)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基酯(0.1537g，0.117mmol)和TFA(4mL，1.18E+04mmol)的混合物加热至70℃且保持1小时。LCMS显示大多数起始原料转化为所需产物。没有迹象表明氨基甲酸酯水解为醇。真空除去TFA并将粗品在乙酸乙酯和NaOH(1N)之间分配。分离乙酸乙酯层，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。进行快速色谱柱(0％至3.5％至5％甲醇/CH2Cl2)。所需产物在此时没有洗脱出来。快速色谱柱继续用5％甲醇/CH2Cl2洗脱，得到所需产物，其为白色固体(64.8mg，90％)。MS(ESI)[M+H+]＝535；1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 11.44(宽单峰，1H)8.13(d，J＝4.53Hz，1H)7.36(宽单峰，1H)7.14-7.24(m，1H)6.99-7.10(m，4H)6.37(d，J＝7.55Hz，1H)5.87(d，J＝10.32Hz，1H)5.57(d，J＝1.51Hz，1H)4.48-4.83(m，2H)4.17(宽单峰，1H)3.23(dd，J＝13.72，11.96Hz，1H)2.95(d，J＝10.32Hz，3H)2.69(d，J＝14.10Hz，2H)2.08-2.31(m，3H)1.83-2.08(m，3H)1.19-1.35(m，1H)0.81-0.95(m，1H)。
实施例18
4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-羧酸(6R，9R)-6-(2，3-二氟苯基)-2-(二甲基氨基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基酯
在室温将氰基硼氢化钠(108mg，1.721mmol)加到4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-羧酸(6R，9R)-2-氨基-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基酯(46mg，0.086mmol)和甲醛(1mL，13.43mmol)的乙腈(2mL)溶液中。将反应混合物在室温搅拌4小时。将乙酸(0.5mL，8.73mmol)加到反应混合物中并将反应混合物搅拌过夜。真空除去大部分挥发物，将NaOH(1N)加到粗品中且在室温搅拌1小时，然后用乙酸乙酯萃取。将乙酸乙酯层干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。进行快速色谱柱(0％至4％至8％甲醇/CH2Cl2)，得到所需产物(19.8mg，39％)。MS(ESI)[M+H+]＝563.42。
实施例19
4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-羧酸(6R，9R)-2-氯-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基酯
在-5℃向4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-羧酸(6R，9R)-2-氨基-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基酯(45mg，0.084mmol)和盐酸(3mL，36.5mmol)的混合物中加入氯化亚铜(I)(16.67mg，0.168mmol)和硝酸钠(21.47mg，0.253mmol)。将反应混合物在该温度搅拌1小时并在室温搅拌1小时。将NaOH(1N)加到反应混合物中，然后用乙酸乙酯萃取两次。乙酸乙酯层用盐水洗涤，然后分离，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。进行快速色谱柱(0％至4％至8％甲醇/CH2Cl2)，得到所需产物(6.4mg，12％)。MS(ESI)[M+H+]＝554.09。
中间体89
4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-羧酸4-硝基苯基酯
将2-氧代-1-(哌啶鎓-4-基)-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-4-鎓氯化物(2-oxo-1-(piperidinium-4-yl)-2，3-dihydro-1H-imidazo[4，5-b]pyridin-4-iumchloride)(10.41g，35.8mmol)在THF(300mL)和DMF(167mL)中的混合物在室温和氮气下搅拌10分钟。反应混合物在此时仍为混悬液。将4-甲基吗啉(27.5mL，250mmol)缓慢加到反应混合物中。内部反应温度由20℃变为22℃。将反应混合物再搅拌10分钟，然后在室温一次性加入4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-羧酸4-硝基苯基酯。反应温度升至27℃。将反应混合物搅拌2小时。将1000mL水缓慢加到反应混合物中，所有混悬液溶解，然后溶液变为混浊。将反应混合物在室温搅拌过夜。将反应混合物过滤且固体用水和CH3CN洗涤。将产物与79044-022合并，其为灰白色粉末(7.4g，54％)且按原样使用。
实施例20
4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-羧酸(6R，9R)-2-氯-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基酯
在氮气下在烘干的1L圆底烧瓶中向DMF(200mL)中加入(6R，9R)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-醇(12.74g，46.3mmol)(纯度＞99.9％)和4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-羧酸4-硝基苯基酯(26.6g，69.4mmol)，得到淡黄色混悬液。用MeOH-冰浴冷却至-15℃后，逐滴加入NaHMDS(139mL，139mmol)。形成凝胶(加入1.5当量碱)后，移开冷却浴并逐滴加入剩余的碱。将混合物在室温和氮气下搅拌2小时。LCMS显示完全转化。3h：其用饱和NaHCO3溶液(400ml)淬灭。将混悬液在500ml水和700ml EtOAc之间分配。分离各层且水层用EtOAc(2×250ml)萃取。LCMS证实在水层中无产物残留。合并的有机层用300ml饱和NaHCO3、2×300ml水和300ml盐水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到黄色泡沫状物/固体。粗产物通过FCC(约900g硅胶)用4％MeOH/CH2Cl2纯化。所得到的产物(其为黄褐色固体)通过用iPrOH重结晶来进一步纯化(21.64g，90％)，其为白色结晶粉末(用于HPLC-MS分析：99.2％，且对映异构体过量(ee)评价：100％ee)；熔点为248℃。
单晶X射线测量
配备有Cu Kα辐射
旋转阳极发生器的BrukerAPEX2Kappa CCD衍射仪用于在室温采集衍射数据。用APEX2软件包/程序组(APEX2 Data Collection and Processing User Interface：APEX2 User Manual，v1.27；BRUKER AXS，INc.，5465 East Cheryl Parkway，Madison，WI 53711USA)对所测量的强度数据进行索引和处理。最终晶胞参数使用全部数据集来确定。
结构通过直接法来解析，并通过全矩阵最小二乘法技术使用SHELXTL软件包(Sheldrick，GM.1997，SHELXTL.Structure Determination Programs.Version 5.10，Bruker AXS，Madison，Wisconsin，USA)来精修。在精修中被最小化的函数为∑w(|Fo|-|Fc|)2。将R定义为∑||Fo|-|Fc||/∑|Fo|，而Rw＝[∑w(|Fo|-|Fc|)2/∑w|Fo|2]1/2，其中w是基于强度观测误差的适当加权函数。在精修的所有阶段检查差异傅立叶图(difference Fourier map)。所有非氢原子通过各向异性热置换参数(anisotropic thermal displacement parameter)来精修。在最终差异傅立叶图中对与氢键相关的氢原子进行定位，而其它氢原子的位置通过具有标准键长度与标准键角度的理想化几何方法来计算。它们通过各向同性温度因子(isotropic temperature factor)来指定，且包括在具有固定参数的结构因子计算方法中。
实施例20化合物的晶体数据如下显示。分级原子坐标列于表2中。本领域技术人员应该理解的是，坐标中的微小变化是可能的且被认为在本发明范围内。温度：室温；波长：0.71070；晶系，空间群：斜方晶，P2(1)2(1)2(1)；晶胞尺寸：a＝7.5941(1)A，α＝90°；b＝13.8789(2)A，β＝90°；c＝24.7319(3)A，γ＝90°；体积：2606.69(6)A3；Z，计算密度：4，1.324Mg/m3。
| 原子 | X | Y | Z | U(eq) |
| O(1) | -3138(3) | -3128(1) | -795(1) | 52(1) |
| O(2) | -4445(3) | -2737(1) | -1587(1) | 59(1) |
| O(3) | 874(3) | -7046(2) | -2345(1) | 76(1) |
| N(1) | -249(3) | -2383(2) | -1185(1) | 59(1) |
| N(2) | -3324(3) | -4230(2) | -1451(1) | 58(1) |
| N(3) | 752(3) | -5384(2) | -2444(1) | 59(1) |
| N(4) | 2908(4) | -6179(2) | -2849(1) | 60(1) |
| N(5) | 4345(4) | -4861(2) | -3287(1) | 67(1) |
| F(1) | -5198(4) | 864(2) | -133(1) | 120(1) |
| F(2) | -6096(7) | 2376(2) | 450(2) | 169(2) |
| C(1) | -4103(7) | 1133(3) | 266(1) | 86(1) |
| C(2) | -4607(9) | 1936(3) | 572(2) | 110(2) |
| C(3) | -3566(11) | 2247(3) | 987(2) | 117(2) |
| 原子 | X | Y | Z | U(eq) |
| C(4) | -2071(10) | 1750(4) | 1105(2) | 115(2) |
| C(5) | -1557(6) | 961(3) | 798(2) | 88(1) |
| C(6) | -2606(5) | 631(2) | 368(1) | 69(1) |
| C(7) | -2092(4) | -273(2) | 61(1) | 60(1) |
| C(8) | -1890(5) | -73(2) | -550(1) | 66(1) |
| C(9) | -732(4) | -785(2) | -837(1) | 59(1) |
| C(10) | 892(5) | -517(3) | -1040(1) | 75(1) |
| C(11) | 1939(5) | -1169(3) | -1310(1) | 76(1) |
| C(12) | 1308(4) | -2088(3) | -1376(1) | 66(1) |
| C(13) | -1215(4) | -1750(2) | -914(1) | 51(1) |
| C(14) | -2915(4) | -2126(2) | -662(1) | 50(1) |
| C(15) | -2877(4) | -2071(2) | -46(1) | 54(1) |
| C(16) | -3363(4) | -1096(2) | 186(1) | 60(1) |
| C(17) | -3664(3) | -3316(2) | -1307(1) | 49(1) |
| C(18) | -3817(4) | -4559(2) | -1991(1) | 66(1) |
| C(19) | -2208(4) | -4617(2) | -2360(1) | 67(1) |
| C(20) | -805(4) | -5238(2) | -2104(1) | 60(1) |
| C(21) | -320(4) | -4856(2) | -1544(1) | 60(1) |
| C(22) | -1952(5) | -4816(2) | -1191(1) | 65(1) |
| C(23) | 1452(4) | -6298(2) | -2527(1) | 59(1) |
| C(24) | 3110(4) | -5225(2) | -2978(1) | 54(1) |
| C(25) | 4272(5) | -3902(3) | -3342(2) | 79(1) |
| C(26) | 3046(6) | -3334(3) | -3100(2) | 85(1) |
| C(27) | 1738(5) | -3728(2) | -2770(2) | 73(1) |
| C(28) | 1776(4) | -4716(2) | -2715(1) | 56(1) |
实施例21
1-(1-(((6R，9R)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基氧基)羰基)哌啶-4-基)-2-氧代-1，2-二氢咪唑并[4，5-b]吡啶-3-阴离子钾盐
在烘干的100mL圆底烧瓶中向乙醇(10mL)中加入4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-羧酸(6R，9R)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基酯(1.08g，2.079mmol)，得到无色溶液。一次性加入叔丁醇钾(0.233g，2.079mmol)。加热枪用于轻微加热溶液同时转动直到固体完全溶解。除去挥发物，得到白色泡沫状物/粉末。将粉末在高真空下进一步干燥且不时温热(50℃浴)，然后在室温和高真空下干燥3天。得到LCMS和HPLC。HPLC显示纯度为98％且无单一杂质纯度＞0.5％。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)8.44(s，1H)，7.61-7.55(m，2H)，7.31-7.21(m，4H)，6.91(s，1H)，6.41(s，1H)，5.93(d，J＝12Hz，1H)，4.38(宽峰，2H)，4.11(宽峰，1H)，3.50-3.41(m，1H)，3.21-2.78(m，5H)，2.30-1.50(m，7H)。
本领域技术人员应该理解的是，本公开不限于上述示意性实施例，且它可在不偏离其本质属性的情况下以其它具体形式来实施。因此，实施例无论如何都应该是示意性而非限制性的，应该参考所附权利要求书而非上述实施例，因此在权利要求书的等价含义和范围内进行的所有变化都将涵盖在本申请中。
Claims (22)
1.式I的化合物或其药用盐：
其中
R1为氢、氰基、卤素、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、烷基SO2、氨基、烷基氨基或二烷基氨基；
R2为取代有选自下述的一个取代基的哌啶基：
其中，R2为N-哌啶基且在4位是取代的；
或R2为
R3为氢、卤素、氰基、烷基、卤代烷基、烷氧基或卤代烷氧基；
R4为氢、卤素、氰基、烷基、卤代烷基、烷氧基或卤代烷氧基；
Ar1为取代有选自下述的0-3个取代基的苯基：氰基、卤素、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基和烷基SO2；
X为O、CH2或NH；且
Y为化学键、O、CH2或NH，
其中烷基或卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、烷基SO2、烷基氨基、或二烷基氨基的烷基部分是指由1至6个碳构成的直链或支链烷基。
2.权利要求1的化合物，其具有下述立体化学：
3.权利要求2的化合物或其药用盐，其中
R1为氢、卤素、氰基、氨基、烷基氨基或二烷基氨基；
R2为取代有选自下述的一个取代基的哌啶基：
R3为氢或卤素；
R4为氢或卤素；
Ar1为取代有0-2个卤素取代基的苯基；
X为O、CH2或NH；且
Y为O。
4.权利要求3的化合物或其药用盐，其中R1为氢、氯、氰基、氨基、二甲基氨基或叔丁基氨基；R2为取代有选自下述的一个取代基的哌啶基：
Ar1为苯基或二氟苯基；X为O、CH2或NH；且Y为O。
5.权利要求1的化合物，其中R1为氢、卤素或氰基。
6.权利要求1的化合物，其中所述取代基为
7.权利要求1的化合物，其中Ar1为取代有2个卤素取代基的苯基。
8.权利要求1的化合物，其中Ar1为2，3-二氟苯基。
9.权利要求1的化合物，其中X为O。
10.权利要求1的化合物或其药用盐，所述化合物选自：
4-(2-氧代-4，5-二氢-1H-苯并[d][1，3]二氮杂
-3(2H)-基)哌啶-1-羧酸(6，9-反式)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基酯；和
2-氧代-1，2-二氢螺[苯并[d][1，3]噁嗪-4，4’-哌啶]-1’-羧酸(6，9-反式)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基酯。
11.权利要求1的化合物或其药用盐，所述化合物选自：
4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-羧酸(6，9-反式)-2-氰基-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基酯；
4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-羧酸(6R，9R)-2-氯-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基酯；
4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-羧酸(6，9-反式)-6-苯基-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基酯；
4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-羧酸(6，9-反式)-6-(2，5-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基酯；和
4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-羧酸(6，9-反式)-6-(3，4-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基酯。
12.权利要求1的化合物或其药用盐，所述化合物选自：
1-(1-(2-((6，9-顺式)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2(3H)-酮；
1-(1-(2-((6R，9S)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2(3H)-酮；
1-(1-(2-((6S，9R)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基)乙酰基)哌啶-4-基)-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2(3H)-酮；
N-((6R，9R)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基)-4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-甲酰胺；和
N-((6S，9S)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基)-4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-甲酰胺。
13.权利要求1的化合物或其药用盐，所述化合物选自：
4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-羧酸(6R，9R)-2-(叔丁基氨基)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基酯；
4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-羧酸(6R，9R)-2-氨基-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基酯；
4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-羧酸(6R，9R)-6-(2，3-二氟苯基)-2-(二甲基氨基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基酯；
N-((6R，9R)-3-氨基-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基)-4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-甲酰胺；和
4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-羧酸(6R，9R)-6-(2，3-二氟苯基)-3-(二甲基氨基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基酯。
14.权利要求1的化合物或其药用盐，所述化合物选自：
4-(2-氧代-2，3-二氢-1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-基)哌啶-1-羧酸(6，9-反式)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基酯；和
1-(1-(((6R，9R)-6-(2，3-二氟苯基)-6，7，8，9-四氢-5H-环庚并[b]吡啶-9-基氧基)羰基)哌啶-4-基)-2-氧代-1，2-二氢咪唑并[4，5-b]吡啶-3-阴离子钾盐。
15.化合物或其药用盐，所述化合物为：
16.权利要求15的化合物，其中所述药用盐为钾盐。
17.一种组合物，其包含权利要求1的化合物或其药用盐及药用载体。
18.权利要求17的组合物，其中所述权利要求1的化合物为下述化合物或其药用盐：
19.权利要求1的化合物或其药用盐在制备用于治疗与异常CGRP水平相关的病症的药物中的用途。
20.权利要求19的用途，其中所述病症为偏头痛。
21.权利要求19的用途，其中所述权利要求1的化合物为下述化合物或其药用盐：
22.权利要求21的用途，其中病症为偏头痛。
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