CN102058574A

CN102058574A - 富马酸衍生物在治疗心功能不全中的应用

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Publication number: CN102058574A
Application number: CN2010102746278A
Authority: CN
Inventors: 拉金德拉·库马尔·乔希; 汉斯-彼得·斯特雷贝尔; 克里斯蒂安·佐格; 米夏埃尔·塔姆
Original assignee: Fumapharm AG
Current assignee: Biogen International GmbH
Priority date: 2003-09-09
Filing date: 2004-09-03
Publication date: 2011-05-18
Anticipated expiration: 2024-09-03
Also published as: RU2007138216A; DE602004024143D1; JP2015155480A; ATE447946T1; HK1094650A1; JP5784877B2; RU2012115860A; NZ543708A; IL171987A0; RS51881B; CN102058574B; CN1829505A; ZA200601985B; RU2459621C2; JP2008529959A; CN1829505B; JP2010070563A; IL171987A; CY1107849T1; PT1663197E

Abstract

根据第一方面，本发明涉及选自以下组中的富马酸衍生物在制备用于治疗或预防心功能不全、尤其是左心室功能不全、心肌梗塞和心绞痛的药物中的应用：富马酸二烷基酯、富马酸氢单烷基酯、富马酸单烷基酯盐、富马酸单酰胺、富马酸单酰胺盐、富马酸二酰胺、富马酸单烷基酯单酰胺、这些化合物的碳环或氧杂碳环寡聚物以及其混合物。根据第二方面，本发明涉及选自以下组中的富马酸衍生物在制备用于治疗哮喘和慢性阻塞性肺病、尤其是由过敏、感染、镇痛药、工作条件或劳累造成的哮喘，哮喘的混合形式或心源性哮喘的药物中的应用：富马酸二烷基酯、富马酸氢单烷基酯、富马酸单烷基酯盐、富马酸单酰胺、富马酸单酰胺盐、富马酸二酰胺、富马酸单烷基酯单酰胺、这些化合物的碳环或氧杂碳环寡聚物以及其混合物。

Description

富马酸衍生物在治疗心功能不全中的应用

本发明专利申请是于2004年9月3日递交的第200480021724.9号中国发明专利申请的分案申请。

技术领域

本发明涉及富马酸衍生物在制备用于治疗心功能不全和哮喘的药物中的应用。

背景技术

富马酸二烷基酯和富马酸单烷基酯及其盐已经成功地用于治疗银屑病较长的时间。该应用已经记载在许多专利中，参见，例如，DE 2530372、DE 2621214或EP-B-0312697。

另外，已经记载有富马酸单酯和二酯在治疗自身免疫性疾病例如多发性关节炎或多发性硬化中的应用(参见DE 19721099.6和DE 19853487.6)以及在移植药物中的应用(参见DE 19853487.6和DE 19839566.3)。而且，从DE 10101307.8和DE 10000577.2中可以知道富马酸单酯和二酯在治疗NFκB-介导的疾病以及治疗线粒体病和/或作为NFκB抑制剂的应用。所有提及的出版物描述了富马酸单酯和二酯，其任选地以某种盐的形式存在。

另外，从DE 10133004.9可以知道富马酸单酰胺和二酰胺在治疗所述适应症中的应用。这些酰胺是由氨基酸形成，且优选地由特定肽形成。最后，从DE 10217314.1可知富马酸寡聚物和它们在治疗所述疾病中的应用。

突发性的、显著的呼吸窘迫称作哮喘(支气管哮喘)，约4-5％的工业国家人口患有该病，且有上升的趋势。该呼吸窘迫是因为由反应过度的支气管系统引起的呼吸道的可变的和可逆的阻塞，其由外源的和/或内源的刺激触发。这些刺激包括化学的或物理的刺激因素、感染、劳累(physical effort)和/或情感因素。在该病持续较长时间后，经常发生继发性疾病如慢性支气管炎、肺气肿、支气管扩张、肺膨胀不全或肺心病或呼吸心功能不全(respiratory cardiac insufficiency)。

根据病因，分为下述哮喘变体，即由过敏、感染、镇痛药、工作条件或劳累造成的哮喘，哮喘或心源性哮喘(asthma cardiale)、鼻性哮喘和尿毒性哮喘(asthma uremicum)的混合形式。特别地，由于在左心室功能不全的情况下肺循环的堵塞增加，心源性哮喘会导致呼吸窘迫。

现在，除经证实的仅避免触发哮喘的刺激的方法外，例如还在哮喘的药物治疗和/或在减轻哮喘中给药例如β-2拟交感神经药、皮质甾类、拟迷走神经药物、茶碱、抗炎药和抗过敏剂。

在分子水平，哮喘的特征似乎是肺中Th2淋巴细胞的活性升高，这又导致一些Th2细胞因子的释放增加，从而最终产生哮喘的已知特征，例如IgE同种型变换，粘液生成和嗜曙红细胞的募集和活化。另外，Th2细胞因子似乎通过称作JAK-STAT的信号转导途径导致其它Th2细胞的分化，从而产生自增强的循环。还观察到间充质细胞、尤其是支气管平滑肌细胞的增殖增加。

所谓的JAK-STAT信号转导途径(两面神激酶(Janus kinase)信号转导物和转录途径的活化剂)是用于将由信号肽如细胞因子传递的信息传递到细胞和/或核内部的途径。信号转导通过STAT蛋白发生，其存在于胞质中，且最初是无活性的；在人类中已知有7种不同的STAT蛋白。由于受体配体结合到细胞表面，这些STAT蛋白通过磷酸化的方式迅速活化，例如，通过两面神激酶。磷酸化导致STAT蛋白的均二聚化和杂二聚化，该二聚体能迅速被转运进核中，它们在那里结合目标启动子，并急剧增强该启动子的转录速率。

心脏在应激下(应激性功能不全(stress insufficiency))或在已经静息时(＝静息性功能不全(rest insufficiency))输出用于代谢的血液和/或接受静脉回流的急性或慢性的无能被称为心功能不全。功能不全可为纯左心室或右心室功能不全，但是也可以影响2个心室。

心功能不全的临床症象就病因学而言可归因于多种原因，尤其是心肌和心内膜的炎性和退行性病变(degenerative change)、冠状循环障碍、心肌梗塞和损伤。随后，心功能不全导致外周循环病变、呼吸障碍尤其是心源性哮喘、肾功能不全和电解质代谢障碍和水肿和骨骼肌功能受损(reduced functional capacity)。

适应症分为急性心功能不全、能量心功能不全(energetic cardiac insufficiency)、能量-动态心功能不全(energetic-dynamic cardiac insufficiency)和衰弱型心功能不全(hypodynamic cardiac insufficiency)(也称作HEGGLIN综合症II)、兴奋运动型心功能不全(excitomotoric cardiac insufficiency)、心律失常(cardiac arrythmics)引起的心功能不全、血氧不足性、潜在的、原发的、代偿性、相对或应激性功能不全和/或左心室功能不全。

现在，促进收缩物质用于心功能不全的药物治疗，今天仍然使用糖苷(尤其是地高辛和洋地黄毒苷)来治疗慢性形式。但是，在最近几年中，血管扩张剂(硝基化合物和双肼屈嗪、α阻断剂、钙拮抗剂和尤其是ACE抑制剂)越来越重要。ACE抑制剂对于长期治疗是最重要的。另外，使用了利尿剂。使用儿茶酚胺治疗急性形式，也可以使用氨力农。

本发明的一个目的是提供另一种用于治疗心功能不全和哮喘的药物。特别地，本发明的一个目的是提供一种在其相互重叠的领域内用于心源性哮喘和左心室功能不全的治疗剂。本发明的另一个目的是提供两种适应症单独的或在其相互重叠的领域的治疗剂，由于它的良好耐受性，该治疗剂适用于长期治疗。

通过富马酸衍生物在制备用于治疗特别是人类的哮喘和/或心功能不全的药物或药物制剂中的应用，达到了本发明的目的。

发明内容

根据第一方面，本发明涉及选自以下组中的富马酸衍生物在制备用于治疗或预防心功能不全、尤其是左心室功能不全、心肌梗塞和心绞痛的药物制剂中的应用：富马酸二烷基酯、富马酸氢单烷基酯、富马酸单烷基酯盐、富马酸单酰胺、富马酸单酰胺盐、富马酸二酰胺、富马酸单烷基酯单酰胺、这些化合物的碳环或氧杂碳环寡聚物以及其混合物。

根据第二方面，本发明涉及选自以下组中的富马酸衍生物在制备用于治疗哮喘和慢性阻塞性肺病、尤其是由过敏、感染、镇痛药、工作条件或劳累造成的哮喘、混合形式的哮喘或心源性哮喘的药物制剂中的应用：富马酸二烷基酯、富马酸氢单烷基酯、富马酸单烷基酯盐、富马酸单酰胺、富马酸单酰胺盐、富马酸二酰胺、富马酸单烷基酯单酰胺、这些化合物的碳环或氧杂碳环寡聚物以及其混合物。

如下面和所附权利要求书所述，本发明同样涉及抑制支气管平滑肌细胞摄入³H-胸苷的方法，以及抑制这些细胞增殖的方法。

最后，本发明涉及上述富马酸衍生物在抑制PDGF诱导的STAT1活化中的应用。

附图说明

图1中的柱状图所示为给药DMF后、局部缺血和对照组的梗塞程度。

图2所示为当加入DMF时对PDGF-诱导的³H-胸苷掺入支气管平滑肌细胞中的抑制百分比。

图3中的柱状图所示为在没有或有DMF和/或地塞米松存在的情况下，受到PDGF刺激的支气管平滑肌细胞的细胞增殖百分比。

图4中的柱状图所示为在没有或有DMF存在的情况下，食用高盐餐8周之前和之后的Dah1大鼠左心室扩张末期直径。

具体实施方式

根据其一个方面，本发明总体上涉及富马酸衍生物在制备用于治疗哮喘和慢性阻塞性肺病的药物制剂中的应用。优选地，该哮喘是由过敏、感染、镇痛药、工作条件或劳累造成的，特别优选为心源性哮喘。

根据其另一个方面，本发明还涉及富马酸衍生物在制备用于治疗或预防心功能不全、心肌梗塞和心绞痛的药物制剂中的应用。所涉及的心功能不全可以是任意类型的心功能不全，无论它的形式和/或病因。根据本发明将治疗的心功能不全的实例是急性心功能不全、能量心功能不全、能量-动态心功能不全和衰弱型心功能不全(也称作HEGGLIN综合症II)、兴奋运动心功能不全、心律不齐(cardiac irregularity)引起的心功能不全、血氧不足性、潜在的、原发的、代偿性、失代偿性、相对的或应激性功能不全和/或左心室功能不全，最优选为左心室功能不全。该组合物还可以有效地预防这些疾病和/或心肌梗塞，包括首次、再次或更多次的梗塞。

这些应用是基于下述发现，即富马酸衍生物能抑制PDGF-(血小板源生长因子)诱导的STAT1活化。如上所述，据认为在哮喘中，STAT活化会导致细胞因子模式的变换，并最终导致具有增强的Th2细胞活性的恶性循环和粘液分泌、IgE生成以及嗜曙红细胞招募的结果(A.B.Pernis，P.B.Rothman，″JAK-STAT signaling in asthma″，The J.of Clin.Investigation，vol.10，No.1，May 2002)。

在该文献中针对富马酸衍生物类物质所述的细胞因子模式从Th1至Th2的变换(参见前述专利说明书)反而会导致预期该恶性循环的强化。因此，它们不适用于治疗哮喘。令人意外地，发现富马酸衍生物可以抑制呼吸道平滑肌细胞的增殖。这似乎是通过抑制PDGF-诱导的转录因子STAT1发生的。可以具体地证实，富马酸衍生物可以抑制PDGF-诱导的STAT1活化和PDGF-刺激的胸苷掺入BSM(支气管平滑肌)细胞中。不受它的限制，该增殖抑制作用可以是富马酸衍生物治疗哮喘的有效性的原因。

要根据本发明使用的富马酸衍生物可以是选自以下组中的一种或多种：富马酸二烷基酯(即，富马酸二烷基酯)、富马酸氢单烷基酯(即，富马酸单烷基酯)、生理学可接受的阳离子、尤其是碱金属或碱土金属阳离子或过渡金属阳离子例如Li⁺、Na⁺、K⁺、NH₄ ⁺、Mg²⁺、Ca²⁺、Fe²⁺、Mn²⁺以及Zn²⁺的富马酸单烷基酯盐(即，富马酸单烷基酯盐)、富马酸单酰胺和富马酸二酰胺和它们的盐，这些化合物的碳环和氧杂环寡聚物以及其混合物。

在一个优选的实施方案中，富马酸衍生物选自游离酸或其盐以及它们的混合物形式的任选地被取代的富马酸二烷基酯和富马酸单烷基酯。

在该情况下，特别优选的是如DE 19853487.6中所述的式(I)富马酸二烷基酯的应用，

其中R₁和R₂可以相同或不同，独立地代表C_1-24烷基或C_5-20芳基，且这些基团可以任选地被卤素(F、Cl、Br、I)、羟基、C_1-4烷氧基、硝基或氰基取代。特别优选地，该富马酸二烷基酯是富马酸二甲酯、富马酸二乙酯和/或富马酸甲乙酯。

通常，根据本发明，烷基应当理解为具有1-24个碳原子的饱和的或不饱和的、直链的、支链的或环状的烃基，其可以任选地被一个或多个取代基取代。优选地，烷基是甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、环戊基、2-乙基己基、己基、环己基、庚基、环庚基、辛基、乙烯基、烯丙基、2-羟乙基、2-羟丙基、3-羟丙基、2，3-二羟基丙基、2-甲氧基乙基、甲氧基甲基、2-甲氧基丙基、3-甲氧基丙基或2，3-二甲氧基丙基。甲基或乙基是最优选的。

根据本发明，芳基应当理解为具有5-20个碳原子的任选地被取代的芳基、烷基取代的芳基或芳烷基，优选具有6-10个碳原子的芳基、烷基取代的芳基或芳烷基。示例性基团是苯基、苄基、苯乙基、甲苯基、乙苯基、丙苯基和丁苯基，叔丁基苯基、苯基和苄基是特别优选的。

所述基团的取代基优选地选自以下组中：卤素(F、Cl、Br、I)、羟基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷基、硝基和氰基。

还可以有利地使用如DE 19721099.6所述的式(II)的富马酸单烷基酯，

其中R₁的定义如上，A是氢、碱金属或碱土金属阳离子或生理学可接受的过渡金属阳离子，优选地选自Li⁺、Na⁺、K⁺、Mg²⁺、Ca²⁺、Zn²⁺、Fe²⁺、和Mn²⁺，n等于1或2，且与A的价数对应。

式(I)和(II)的示例性化合物是富马酸二甲酯、富马酸二乙酯、富马酸甲乙酯、富马酸单甲酯、富马酸单乙酯、富马酸甲酯钙盐、富马酸乙酯钙盐、富马酸甲酯镁盐、富马酸乙酯镁盐、富马酸甲酯锌盐、富马酸乙酯锌盐、富马酸甲酯铁盐和富马酸乙酯铁盐。它们可以单独地或作为混合物使用。

优选地，要根据本发明使用的富马酸酰胺是DE 10133004.9所述的那些。它们对应着通式(III)，

其中

R_a代表OR₃或通过酰胺键结合的D-或L-氨基酸基团-NH-CHR₄-COOH，其中R₃是氢，直链的或支链的、任选地被取代的C_1-24烷基、苯基或C_6-10芳基或芳烷基，且R₄是天然的或合成的氨基酸的侧链；且

R_b代表通过酰胺键结合的D-或L-氨基酸基团-NH-CHR₅-COOH，其中R₅是天然或合成氨基酸的侧链，或通过酰胺键结合的具有2-100个每个氨基酸可以相同或不同的氨基酸的肽基团。

天然或合成氨基酸的侧链典型地是选自以下组中的侧链：Ala、Val、Leu、Ile、Trp、Phe、Met、Tyr、Thr、Cys、Asn、Gln、Asp、Glu、Lys、Arg、His、瓜氨酸、Hcy、Hse、Hyp、Hyl、Orn、Sar以及Me-Gly的侧链。Gly、Ala、Val、Ile、Leu和Me-Gly的侧链是优选的。如果R_a是L氨基酸基团-NH-CHR₄-COOH，且R_b是L-氨基酸基团-NH-CHR₅-COOH，则R₄和R₅可以相同或不同。更优选地，R₄和R₅相同。最优选地，R_a和R_b都是甘氨酸。

或者，R_a可以是基团OR₃，且R_b可以是L-氨基酸基团-NH-CHR₅-COOH或肽基团，R₅具有上面定义的含义。在该情况下，富马酸衍生物是富马酸单烷基酯单酰胺。

肽基团通过酰胺键结合，且具有2-100、优选2-30、最优选2-15个可以相同或不同的氨基酸。肽基团R_b最优选地选自以下组中：肽激素、生长因子、细胞因子、神经递质、神经肽、抗体片段、凝血因子和环孢霉素和其衍生物和片段。优选地，R_a是甲氧基或乙氧基，且R_b是Gly、Ala、Val、Ile、Leu和Me-Gly。

可以单独地或混合地使用上述的富马酸酰胺，或者也可以在与上述的富马酸单烷基酯或二烷基酯混合使用。

最后，如DE 10217314.1所述，也可以使用碳环的或氧杂碳环的富马酸寡聚物。它们含有2-10、优选2-6和最优选2-3个源自如上所述的富马酸和/或它的酯和/或酰胺的单元作为重复单元。

优选地通过C-C双键(对于碳环寡聚物)和/或C-C双键和单元的羰基氧(对于氧杂碳环寡聚物)的(烯烃)聚合得到这些富马酸寡聚物。优选地，源自富马酸的单元是源自选自以下组中的单体：如上定义的富马酸和富马酸二烷基酯、富马酸氢单烷基酯、富马酸单酰胺、富马酸二酰胺、富马酸单烷基酯单酰胺和它们的盐以及其混合物。更优选地，该寡聚物仅仅含有源自1个或2个单体的单元。最优选地，寡聚物仅含有相同的单体单元。

碳环寡聚物由源自富马酸的单元组成，其组成方式是这些单元通过共价的C-C键以能形成碳环寡聚物的方式结合到富马酸主链的碳原子2和3上。该寡聚物主链包含偶数个碳原子，且不含有任何其它单体和/或杂原子。该主链在每个碳原子处被构成该主链的富马酸单体单元的羧酸和/或羧酸酰胺基团之一取代。

氧杂碳环寡聚物由富马酸单体以能使这些单元通过醚桥在碳原子1和3处彼此结合的方式构成。同时，原子C₂和C₃的烯不饱和被转换成C₁和C₂烯不饱和。因而，根据本发明在氧杂碳环寡聚物的情况下，该环含有聚氧丙烯单元。

这里使用的术语″寡聚物″涉及若干至少2个富马酸单体的单元。通常，碳环富马酸寡聚物含有2-10、优选2-6和最优选2-3个源自富马酸的单元。优选地，作为环的取代基的羧酸和/或羧酸酰胺基团彼此都成反式。

在一个优选的实施方案中，使用了与下式(IVa)对应的碳环富马酸寡聚物，

其中基团R_c和R_d相同或不同，且选自胺基(-NR₁R₂)、氨基酸基团-NH-C(COOH)-R₅、具有2-100个氨基酸的肽基团、烷氧基(-OR₁)和羟基，R₁、R₂和R₅如上定义，且n是端点包括在内的2-10、优选为端点包括在内的2-6的整数。

优选地，基团R_c和R_d各自独立地是烷氧基或羟基，R_c和R_d不同时为羟基是最优选的。因而，单体优选地是一个或若干个富马酸氢单烷基酯。在另一个实施方案中，基团R_c和R_d都可以代表着烷氧基-OR₁，其更优选地是相同的。在该情况下，所述单体是富马酸二烷基酯。

非常优选地，根据本发明使用r-1，t-2，c-3，t-4-四(甲氧羰基)环丁烷或r-1，t-2，c-3，t-4，c-5，t-6-六(烷氧羰基)环己烷，优选为r-1，t-2，c-3，t-4-四(甲氧羰基)环丁烷和/或r-1，t-2，c-3，t-4，c-5，t-6-六(甲氧羰基)环己烷。

或者，使用式(IVb)的氧杂碳环寡聚物：

其中R_c和R_d如上定义，且n是端点包含在内的2-10、更优选端点包含在内的2-6的整数。

可根据已知的如DE 19721099.6、DE 10133004.9或DE 10217314.1中所述的方法制备根据本发明使用的富马酸衍生物。这些出版物的内容在这里引作参考。

所述药物制剂可以以适于经口施用、直肠施用、透皮施用、皮肤施用、眼部施用、鼻部施用、肺部施用或非胃肠道施用的形式存在。优选地，该药物制剂适用于经口给药。于是，其可以以下述形式存在：片剂、包衣的片剂、胶囊剂、颗粒剂、用于饮用的溶液、脂质体、纳米微粒、纳米胶囊、微囊剂、微片剂、丸片剂(pellet)或散剂，还可以下述形式存在：填充于胶囊或囊剂中的颗粒剂、填充于胶囊或囊剂中的微片剂、填充于胶囊或囊剂中的丸片剂、填充于胶囊或囊剂中的纳米颗粒、或填充于胶囊或囊剂中的散剂。优选地，药物以纳米微粒、丸片剂或微片的形式存在，其可以任选地装入囊剂或胶囊中。

优选地，可以为所有的固体经口剂型提供肠溶包衣。例如，该肠溶包衣可施于片剂、微片剂、丸片剂等，但是也可施用于含有它们的胶囊。

基本上，可以根据经典的压制方法以及通过直接压制制备根据本发明的经口药物形式，且可根据熔融法或通过喷雾干燥方法制成固体分散体。如果需要，可以在经典的包衣锅中将肠溶包衣逐步地倒入或喷到片芯上，或根据已知方法通过流化床装置来施用。随后，在已经完成干燥后，可以在相同的装置中施用薄膜包衣。

优选地，用于制备根据本发明的药物制剂的富马酸衍生物的使用量使得每剂量单位该药物制剂含有的一种或多种富马酸衍生物的量对应着和/或等于1-500mg、优选10-300mg、最优选10-200mg富马酸的量。

在通过(iv、im、sc、ip)注射非胃肠道给药的情况下，制剂以适于此给药的形式存在。可以使用所有适于注射的常规液体载体。

根据一个优选的实施方案，要根据本发明生产的药物可以单独地或混合地含有下述成分：10-500mg富马酸二烷基酯、尤其是富马酸二甲酯和/或富马酸二乙酯，10-500mg富马酸烷基酯钙盐、尤其是富马酸甲酯钙盐和/或富马酸乙酯钙盐，0-250mg富马酸烷基酯锌盐、尤其是富马酸甲酯锌盐和/或富马酸乙酯锌盐，0-250mg富马酸氢烷基酯、尤其是富马酸氢甲酯和/或富马酸氢乙酯，以及0-250mg富马酸烷基酯镁盐、尤其是富马酸甲酯镁盐和/或富马酸乙酯镁盐，所述量的总和对应着1-500mg、优选10-300mg和最优选10-200mg富马酸当量(equivalent)。

特别优选地使用的本发明的制剂仅含有10-300mg富马酸二甲酯。

根据一个特别优选的实施方案，药物制剂是以微片剂或丸片的形式存在。优选地，它们的大小和/或平均直径为≤5000微米、优选300-2500微米，尤其是丸片为300-1000微米，微片剂为1000-2500微米。由于施用根据本发明优选的微片剂形式的富马酸衍生物，可以进一步减少施用常规单一单位剂量片剂所无法避免的胃肠道刺激和/或副作用。据推测，这是因为下述事实，即微片、优选包有肠溶衣的微片已经分布在胃中，因而逐块地(boluswise)进入肠中，活性物质在该处以局部地更小的剂量释放出来，而总剂量是相同的。由于该原因，可以避免肠上皮细胞的局部刺激，由此得到比常规片剂更好的微片的胃肠耐受性。

制备例

为了解释根据本发明的应用，下面给出了多个制备优选的药物制剂的实施例。实施例仅仅用于解释目的，而不是限制本发明。

实施例1

制备具有肠溶包衣的薄膜衣片剂，其含有100.0mg富马酸单甲酯钙盐，相当于78mg富马酸

采取必要的防范措施(呼吸面罩、手套、保护衣等)，粉碎10kg富马酸单甲酯钙盐，剧烈混合，并通过800目筛均化。然后，制备组成如下的赋形剂混合物：21kg淀粉衍生物(STA-RX：

)、2kg微晶纤维素(Avicel PH

)、0.6kg聚乙烯吡咯烷酮(PVP，

)、4kg0.3kg胶体硅酸

将活性成分加入整个粉末混合物中，混合，用200目筛均化，然后用2％聚乙烯吡咯烷酮

的水溶液按常规方法加工成粘合颗粒(binder granule)，然后再在干燥状态下与外相混合。外相由2kg所谓的FST复合物组成，其含有80％滑石、10％硅酸和10％硬脂酸镁。

然后，用常规方法将该混合物压制成重量为400mg，直径为10.0mm的凸片。除该典型的压制方法外，也可使用其他方法来制备片剂，例如直接压片或根据熔融法和喷雾干燥法的固体分散法。

肠溶包衣：

将2.250kg羟丙基甲基纤维素酞酸酯(HPMCP，Pharmacoat

)溶液溶于由2.50升去离子水、13升丙酮Ph.Helv.VII和13升乙醇(94重量％)组成的溶剂混合物中，然后将0.240kg的蓖麻油(Ph.Bur.II)加入溶液中。以常规方法，将溶液逐步地倒入或喷到包衣锅中的片芯上。

相应干燥后，随后进行薄膜包衣。所述的包衣(液)由

E12.5％4.8kg、滑石Ph.Eur.II 0.34kg、氧化钛(VI)Cronus RN

0.52kg、着色漆(coloured lacquer)ZLT-2蓝(Siegle)0.21kg、和聚乙二醇6000Ph.Helv.VII 0.12kg在由8.2kg 2-丙醇Ph.Helv.VII、0.06kg三乙酸甘油酯

和0.2kg去离子水组成的溶剂混合物中的溶液组成。均匀分布在包衣锅或流化床中之后，按照常规方法进行干燥并抛光。

实施例2

制备包有肠溶衣的胶囊，其含有86.5mg富马酸单乙酯钙盐和110.0mg富马酸二甲酯，这相当于共计150mg富马酸

采取必要的防范措施(呼吸面罩、手套、保护衣等)，将8.65kg富马酸单乙酯钙盐和11kg富马酸二甲酯与由15kg淀粉、6kg乳糖Ph.Helv.VII、2kg微晶纤维素

1kg聚乙烯吡咯烷酮和4kg

组成的混合物剧烈混合，并通过800目筛均化。

与2％聚乙烯吡咯烷酮

的水溶液一起，按常规方法将整个粉末混合物加工成粘合颗粒，并在干燥状态下与外相混合。所述的外相由0.35kg胶体硅酸

0.5kg硬脂酸镁和1.5kg滑石Ph.Helv.VII组成。将该均匀的混合物每份500.0mg填充在合适的胶囊中，然后按照已知的方法，为所述胶囊提供由羟丙基乙基纤维素酞酸酯和作为软化剂的蓖麻油组成的肠溶(抗胃酸的)包衣。

实施例3

制备在胶囊中的肠溶微片剂(“强化”片(“forte”tablet))，其含有87.0mg富马酸单乙酯钙盐、120mg富马酸二甲酯、5.0mg富马酸单乙酯镁盐和3.0mg富马酸单乙酯锌盐，这相当于共计164mg富马酸

采取必要的防范措施(呼吸面罩、手套、保护衣等)，粉碎8.7kg富马酸单乙酯钙盐、12kg富马酸二甲酯、0.5kg富马酸单乙酯镁盐和0.3kg富马酸单乙酯锌盐，剧烈混合，并用800目筛均化。制备具有以下组成的赋形剂混合物：18kg淀粉衍生物(STA-RX 1500)、0.3kg微晶纤维素(Avicel PH 101)、0.75kg PVP(Kollidon 120)、4kg Primogel、0.25kg胶体硅酸(Aerosil)。将所有粉末混合物加入活性成分混合物中，用200目筛均化，以常规方式用2％聚乙烯吡咯烷酮(Kollidon K25)水溶液处理得到粘合颗粒，并在干燥状态下与外相混合，所述的外相由0.5kg硬脂酸镁和1.5kg滑石组成。用常规方法将粉末混合物压制成总质量为10.0mg、直径为2.0mm的凸片。

在流化床装置中包肠溶(抗胃酸的)包衣。为实现对胃酸的抵抗，将2.250kg羟丙基甲基纤维素酞酸酯(HPMCP，Pharmacoat HP 50)的溶液溶解在由13升丙酮、13.5升94重量％且已用2％酮变性的乙醇和2.5升去离子水组成的溶剂混合物中。在上述得到的溶液中添加0.240kg蓖麻油作为软化剂，然后按照常规方法逐份地涂敷在片芯上。

薄膜包衣：完成干燥后，在相同的装置中涂敷具有以下组成的悬浮液作为薄膜包衣：在由8.17kg的2-丙醇、0.2kg的去离子水和0.6kg的三乙酸甘油酯(Triacetin)组成的溶剂混合物中的滑石0.340kg、氧化钛(VI)Cronus RN 560.4kg、着色漆L红漆868370.324kg、Eudragit E 12.5％4.8kg、和聚乙二醇6000pH 11XI 0.12kg。

分析耐胃酸的微片剂的成分，然后以对应的净重填充在硬明胶胶囊中并密封。

实施例4

制备在胶囊中的肠溶微片剂，其含有120.0mg富马酸二甲酯，这相当于96mg富马酸

采取必要的防范措施(呼吸面罩、手套、保护衣等)，粉碎12kg富马酸二甲酯，用800目筛均化。制备具有如下组成的赋形剂混合物：17.5kg淀粉衍生物

0.30kg微晶纤维素

0.75kg PVP

4kg0.25kg胶体硅酸将整个粉末混合物加入活性成分混合物中，混合，并用200目筛均化，用2％的聚乙烯吡咯烷酮

K25)水溶液按常规方法加工成粘合颗粒，并在干燥状态下与外相混合，所述外相由0.5kg硬脂酸镁和1.5kg滑石组成。

然后，用常规方法将粉末混合物压制成总质量为10.0mg、直径为2.0mm凸形微片。

为实现对胃酸的抵抗，将2.25kg羟丙基甲基纤维素酞酸酯(HPMCP，Pharmacoat

50)溶液逐份地例如溶解在由13升丙酮、13.5升乙醇(94重量％，已用2％酮变性)和1.5升去离子水组成的溶剂混合物中。在所得溶液中添加蓖麻油(0.24kg)作为软化剂，然后按照常规方法逐步地涂敷在片芯上。

完成干燥后，在相同的装置中涂敷具有以下组成的悬浮液作为薄膜包衣：在由8.17kg的2-丙醇、0.2kg的去离子水和0.6kg的三乙酸甘油酯(Triacetin)组成的溶剂混合物中的滑石0.34kg、氧化钛(VI)CronusRN 560.4kg、着色漆L红漆868370.324kg、Eudragit E 12.5％4.8kg、和聚乙二醇6000pH 11XI 0.12kg。

分析耐胃酸的微片剂的成分，然后以对应的净重量填充在硬明胶胶囊中并密封。

实施例5

制备在胶囊中的肠溶微片剂，其含有120.0mg富马酸二甘氨酸二酰胺，这相当于96mg富马酸

如上所述，粉碎并均化12kg富马酸二甘氨酸二酰胺。制备组成如下的赋形剂混合物：23.2kg微晶纤维素(

PH 200)、3kg羧甲基纤维素钠(AC-Di-SOL-SD-711)、2.5kg滑石、0.1kg无水硅酸(

200)和1kg硬脂酸镁。将整个粉末混合物加入活性成分混合物中，并均匀地混合。然后，通过直接压制将粉末混合物压制成总质量为10.0mg、直径为2.0mm的凸形微片剂。

随后，制备了0.94kg

在异丙醇中的溶液，其另外含有0.07kg酞酸二丁酯。将该溶液喷到片芯上。然后，制备17.32kg

LD-55和2.8kg微粉滑石(micro-talcum)、2kg Macrogol 6000以及0.07kgDimeticon的混合物在水中的分散体，并喷到片芯上。

随后，分析肠溶微片剂的成分，以对应的净重填充在硬明胶胶囊中并密封。

实施例6

制备在胶囊中的肠溶微片剂，其含有60.0mg r-1，t-2，c-3，t-4-四(甲氧羰基)环丁烷和30.0mg r-1，t-2，c-3，t-4，c-5，t-6-六(甲氧羰基)环己烷

粉碎6.0kg的r-1，t-2，c-3，t-4-四(甲氧羰基)环丁烷和3.0kgr-1，t-2，c-3，t-4，c-5，t-6-六(甲氧羰基)环己烷，剧烈混合，并通过800目筛均化。制备组成如下的赋形剂混合物：18kg淀粉衍生物(STA-RX

)、0.30kg微晶纤维素(Avicel PH 101)、0.75kgPVP(Kollidon 120)、4.00kg Primogel、0.25kg胶体硅酸(Aerosil)。将活性成分加入全部粉末混合物中，通过200目筛均化，以常规方式用2％聚乙烯吡咯烷酮(Kollidon K25)水溶液加工成粘合颗粒，并在干燥状态下与外相混合。所述的外相由0.50kg硬脂酸镁和1.50kg滑石组成。此后，用常规方法将粉末混合物压制成总质量为10.0mg、直径为2.0mm的凸形微片剂。

将肠溶(抗胃酸的)包衣倒到典型的包衣锅中的片芯上。为实现对胃酸的抵抗，将2.250kg羟丙基甲基纤维素酞酸酯(HPMCP，Pharmacoat HP50)的溶液逐份地溶解在由13.00升丙酮、13.5升94重量％且已用2％酮变性的乙醇以及2.50升去离子水组成的溶剂混合物中。向所得溶液中添加0.240kg蓖麻油作为软化剂，然后按照常规方法逐份地涂敷在片芯上。

薄膜包衣：干燥完成后，在相同的装置中涂敷组成如下的悬浮液作为薄膜包衣：在由8.170kg的2-丙醇、0.200kg的去离子水和0.600kg的三乙酸甘油酯(Triacetin)组成的溶剂混合物中的滑石0.340kg、氧化钛(VI)Cronus RN 560.400kg、着色漆L红漆868370.324kg、EudragitE 12.5％4.800kg、以及聚乙二醇6000pH 11XI 0.120kg。

随后，分析耐胃酸的微片剂的成分，然后以对应的净重填充在硬明胶胶囊中并密封。

实施例7

制备用于非胃肠道给药的混悬剂，其含有60.0mg r-1，t-2，c-3，t-4-四(甲氧羰基)环丁烷和30.0mg r-1，t-2，c-3，t-4，c-5，t-6-六(甲氧羰基)环己烷

成分 mg/ml

r-1，t-2，c-3，t-4-四(甲氧羰基)环丁烷 60

r-1，t-2，c-3，t-4，c-5，t-6-六(甲氧羰基)环己烷 30

甲基纤维素 0.25

柠檬酸钠二水合物 30

苯甲醇 9.00

对羟基苯甲酸甲酯 1.8

对羟基苯甲酸丙酯 1.2

注射用水 q.s.a.d.1.00

使用标准技术将前述成分加工成非胃肠道混悬剂。

应用例

实施例A

使用大鼠模型用DMF治疗心功能不全的体内数据。

在本实验中使用大鼠的急性局部缺血和再灌注模型检测富马酸二甲酯的作用。为此目的，将健康的雌性大鼠分成3组，每组17只。在实验中，通过堵塞动脉同时暴露心脏造成缺血45分钟，随后进行再灌注120分钟。最后，通过再次堵塞造成心肌梗塞，并通过酞菁蓝染色测定危险区域。

在开始首次堵塞时，静脉内给药受试物质。对照组接受0.02％DMSO(0.5ml/kg体重)，DMF组接受在0.02％DMSO中的10mg富马酸二甲酯(0.5ml/kg体重)。在第2组中，对动物进行缺血预处理(局部缺血和再灌注分别两次，各5分钟)。

结果显示在图1中。显然，在我们的实验中，富马酸二甲酯(DMF)和缺血预处理(IPC)统计学显著地限制了梗塞的大小，危险区域在所有的3组中类似。因而，数据证实了使用的富马酸二甲酯可以显著减小梗塞的大小，并从而预防心功能不全。

实施例B

对PDGF-诱导的胸苷掺入的抑制

哮喘的成功治疗涉及3种不同的途径：(1)减少变态反应中炎性介导物的释放，(2)抑制T-淋巴细胞侵入，和(3)抑制间充质细胞增殖。糖皮质激素是治疗哮喘的选择，已经证实其能抑制间充质细胞增殖。因而，该实验可以用于筛选治疗哮喘的可能的其它活性物质。

在有和没有10^-5M富马酸二甲酯的情况下，在0、1、5、10和20ng/mlPDGF存在的情况下，在37℃下于RPMI、0.3％白蛋白和0.1％DMSO中培养BSM(支气管平滑肌)。

经过预定的时间后，将5μCi的³H-胸苷加入培养基中，并继续再温育24小时。最后通过离心结束掺入，去除上清液，洗涤并裂解细胞。通过在液体闪烁装置中与对照组对比确定裂解物中的放射性，从而测定³H-胸苷的掺入。结果如图2所示，表示为与对照组(100％)相比的百分比值。PDGF的加入明显增强了³H-胸苷的掺入，并从而增强了细胞增殖，而在加入富马酸二甲酯时该增强显著减少。

实施例C

使支气管平滑肌细胞在96孔板中生长，直到它们达到60-70％汇合。然后，在无血清的含有0.3％白蛋白的RPMI培养基中使细胞饥饿48小时。在用10ng/ml PDGF刺激细胞增殖前1小时，用(a)10^-5M DMF，(b)10^-8M地塞米松(dexa)，或(c)10^-5M DMF和10^-8M dexa处理细胞。使用未处理的细胞(仅缓冲液)作为对照。处理细胞36小时，此后加入4uCi的³H-胸苷另外8小时。裂解细胞，使掺入DNA的³H-胸苷结合到滤膜上，在液体闪烁装置中测量掺入的cpm。结果如图3所示，表示为对照组(100％)的百分比，并与PDGF诱导的增殖进行对比。

当只用治疗上恰当剂量的dexa(10^-8M)处理细胞时，细胞增殖减少至约116±11％。在用10^-5M的DMF处理时，观察到了类似的减少(117±4％)。组合给药这些浓度的DMF和dexa使细胞增殖协同地降低至接近基线水平(95±11％)。这些结果表明，DMF可以单独使用或通常与地塞米松或糖皮质激素组合使用以治疗哮喘。

在一个特别优选的治疗哮喘和慢性阻塞性肺病的实施方案中，这种治疗这样与糖皮质激素组合。可以以同一剂量单位或分开的剂量单位给药。也可以平行地或依次地给药。优选地，糖皮质激素选自以下组中：地塞米松、可的松、氢化可的松、泼尼松龙、泼尼松、甲泼尼龙、氟可龙、曲安西龙、倍他米松、倍氯米松、budenoside、flunisonide、氟替卡松、以及其药物学可接受的盐和衍生物。最优选地，该糖皮质激素是地塞米松。

实施例D

每天向对盐敏感的Dah1大鼠给药不同剂量的DMF，并进食高盐餐。在治疗8周后，通过超声心动图分析测定受试组和对照组的左心室扩张末期直径。所测量的组是对照组(0mg DMF；n＝9)；组1(2×5mgDMF/kg/d；n＝9)和组2(2×15mg DMF/kg/d；n＝11)。

在超声波心动图分析中，DMF以剂量依赖性方式阻止了高盐餐8周后左心室的扩张。具体而言，在DMF组中左心室的内径保持在与基线相同的范围内(见图4)。相反，对照组中的动物表现出扩大的左心室，表明左心室扩张。重要的是，左心室的扩张标志着代偿性肥大向失代偿性心力衰竭的转变。所以，DMF能延缓向心力衰竭的转变，从而能预防心肌梗塞。

Claims

1.选自以下组中的富马酸衍生物在制备用于治疗或预防心功能不全、心肌梗塞和心绞痛的药物中的应用：富马酸二烷基酯、富马酸氢单烷基酯、富马酸单烷基酯盐、富马酸单酰胺、富马酸单酰胺盐、富马酸二酰胺、富马酸单烷基酯单酰胺、这些化合物的碳环或氧杂碳环寡聚物以及其混合物。

2.根据权利要求1的应用，其中所述心功能不全选自急性心功能不全、能量心功能不全、能量-动态心功能不全和衰弱型心功能不全、兴奋运动型心功能不全、心律失常引起的心功能不全、血氧不足性心功能不全、潜在的心功能不全、原发的心功能不全、代偿性心功能不全、失代偿性心功能不全、相对或应激性功能不全和左心室功能不全。

3.根据权利要求1或2的应用，其与选自以下组中的糖皮质激素组合：地塞米松、可的松、氢化可的松、泼尼松龙、泼尼松、甲泼尼龙、氟可龙、曲安西龙、倍氯米松、budenoside、flunisonide、氟替卡松、倍他米松、以及其药物学可接受的盐和衍生物。

4.选自以下组中的富马酸衍生物在制备用于抑制PDGF诱导的STAT1活化的药物中的应用：富马酸二烷基酯、富马酸氢单烷基酯、富马酸单烷基酯盐、富马酸单酰胺、富马酸单酰胺盐、富马酸二酰胺、富马酸单烷基酯单酰胺、这些化合物的碳环或氧杂碳环寡聚物以及其混合物。

5.选自以下组中的富马酸衍生物在制备用于抑制PDGF诱导的支气管平滑肌细胞摄入胸苷的药物中的应用：富马酸二烷基酯、富马酸氢单烷基酯、富马酸单烷基酯盐、富马酸单酰胺、富马酸单酰胺盐、富马酸二酰胺、富马酸单烷基酯单酰胺、这些化合物的碳环或氧杂碳环寡聚物以及其混合物。

6.根据权利要求1-5之一的应用，其中所述富马酸衍生物选自一种或多种式I的富马酸二烷基酯

其中R₁和R₂可以相同或不同，且独立地代表直链的、支链的或环状的、饱和的或不饱和的C_1-24烷基或C_5-20芳基，且其中所述的基团可以任选地被卤素、羟基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷基、硝基或氰基取代。

7.根据权利要求1-5之一的应用，其中所述富马酸衍生物选自一种或多种式II的富马酸单烷基酯

其中

R₁代表直链的、支链的或环状的、饱和的或不饱和的C_1-24烷基或C_5-20芳基，

A代表氢、选自Li⁺、Na⁺、K⁺、Mg²⁺、Ca²⁺、Zn²⁺、Fe²⁺、以及Mn²⁺的碱金属或碱土金属阳离子或生理学可接受的过渡金属阳离子，

n等于1或2，且与A的价数对应。

8.根据前面权利要求中任一项的应用，其中所述富马酸衍生物选自一种或多种式(I)和(II)的化合物以及其混合物。

9.根据权利要求8的应用，其中所述富马酸衍生物选自以下组中：富马酸二甲酯、富马酸二乙酯、富马酸甲乙酯、富马酸氢甲酯、富马酸氢乙酯、富马酸甲酯钙盐、富马酸乙酯钙盐、富马酸甲酯镁盐、富马酸乙酯镁盐、富马酸甲酯锌盐、富马酸乙酯锌盐、富马酸甲酯铁盐、富马酸乙酯铁盐以及其混合物。

10.根据权利要求1-5之一的应用，其中所述富马酸衍生物选自一种或多种通式III的富马酸酰胺

其中

R_a代表OR₃或通过酰胺键结合的D-或L-氨基酸基团-NH-CHR₄-COOH，其中R₃是氢、直链的或支链的、任选地被取代的C_1-24烷基、苯基或C_6-10芳烷基，且R₄是天然的或合成的氨基酸的侧链；且

R_b代表通过酰胺键结合的D-或L-氨基酸基团-NH-CHR₅-COOH，其中R₅是可以与R₄相同或不同的天然的或合成的氨基酸的侧链，或代表通过酰胺键结合的具有2-100个可以相同或不同的氨基酸的肽基团。

11.根据权利要求10的应用，其中所述天然的或合成的氨基酸的侧链选自以下组中的侧链：Ala、Val、Leu、Ile、Trp、Phe、Met、Tyr、Thr、Cys、Asn、Gln、Asp、Glu、Lys、Arg、His、瓜氨酸、Hey、Hse、Hyp、Hyl、Orn、Sar和Me-Gly。

12.根据权利要求10的应用，其中所述天然的或合成的氨基酸的侧链选自以下组中的侧链：Gly、Ala、Val、Ile、Leu和Me-Gly。

13.根据权利要求10的应用，其中R_a是基团-OR₃，且R_b是L-氨基酸基团-NH-CHR₅-COOH或肽基团，R₅如权利要求8所定义。

14.根据权利要求1-5之一的应用，其中所述富马酸衍生物是含有2-10个富马酸基团作为重复基团的碳环寡聚物，其中所述富马酸基团是源自选自以下组中的单体：富马酸、富马酸二烷基酯、富马酸氢单烷基酯、富马酸单酰胺、富马酸二酰胺、富马酸单烷基酯单酰胺以及其盐和混合物。

15.根据权利要求6、7和10之一的应用，其中C_1-24烷基选自以下组中：甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、环戊基、2-乙基己基、己基、环己基、庚基、环庚基、辛基、乙烯基、烯丙基、2-羟基乙基、2或3-羟基丙基、2，3-二羟基丙基、2-甲氧基乙基、甲氧基甲基、2-甲氧基丙基、3-甲氧基丙基或2，3-二甲氧基丙基。

16.根据权利要求15的应用，其中C_1-24烷基选自甲基和乙基。

17.根据前面权利要求中的任一项的应用，其中以适于经口施用、直肠施用、透皮施用、皮肤施用、眼部施用、鼻部施用、肺部施用或非胃肠道施用的形式提供所述药物。

18.根据权利要求17的应用，其中以下述形式提供所述药物：片剂、包衣的片剂、胶囊剂、颗粒剂、用于饮用的溶液、脂质体、纳米微粒、纳米胶囊、微囊剂、微片剂、丸片剂或散剂，还可以下述形式提供所述药物：填充于胶囊或囊剂中的颗粒剂、填充于胶囊或囊剂中的微片剂、填充于胶囊或囊剂中的丸片剂、填充于胶囊或囊剂中的纳米颗粒、或填充于胶囊或囊剂中的散剂。

19.根据权利要求17的应用，其中所述药物以纳米微粒、丸片剂或微片的形式存在，它们可以任选地装入囊剂或胶囊中。

20.根据权利要求17-19中任一项的应用，其中固体经口剂型具有肠溶包衣。

21.根据前面权利要求中任一项的应用，其中所述药物含有相当于1-500mg富马酸的量的富马酸衍生物。