CN102056496A - 阪崎肠杆菌生长的抑制 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及糖醛酸糖用于阻止阪崎肠杆菌生长的用途。

Description

阪崎肠杆菌生长的抑制
技术领域
本发明涉及用于阻止制品中细菌生长以及用于治疗和/或预防感染特别是婴儿感染的方法。
背景技术
阪崎肠杆菌(Enterobacter sakazakii，E.sakazakii)可引起严重的感染，特别是在婴儿中。因此非常需要提供阪崎肠杆菌含量低的婴幼儿营养产品。
WO 2005049813涉及对阪崎肠杆菌株有强溶解活性的噬菌体分离物，以及它们在食品——特别是婴儿配方(infant formula)——中作为抗菌剂和用于使工厂环境卫生的用途。该文本还公开了食物组合物及用其制备的抗菌剂。
WO2007046698涉及含有非消化性寡糖的组合物用于制备用于肠内给予剖腹产婴儿的组合物的用途，特别涉及含有非消化性寡糖的组合物用于制备用于(i)治疗和/或预防剖腹产婴儿感染的组合物的用途，其中所述感染选自：大肠杆菌(Escherichia coli)感染、链球菌(Streptococcus)感染、梭菌(Clostridium)感染、杆菌(Bacillus)感染、假单胞菌(Pseudomonas)感染、肠杆菌(Enterobacter)感染、克雷伯氏菌(Klebsiella)感染、不动杆菌(Acinetobacter)感染、变形菌(Proteus)感染和气单胞菌(Aeromonas)感染。
发明内容
本发明人认识到，不仅生产无阪崎肠杆菌的婴儿配方是重要的，而且阻止即食型(液体)配方中阪崎肠杆菌的生长也是非常重要的。例如，当将粉状婴儿配方用水重溶时，可能违背配制说明书将它搁置一段时间或储存，例如在冰箱中。阪崎肠杆菌在保持于室温下的重溶婴儿配方中可以十分迅速地生长。这种微生物特别适合在37℃-44℃附近的温度下生长。因此，在这样的情况下，阪崎肠杆菌可能繁殖并达到无法接受的水平。因此，需要阻止其在液体制品中的生长。
本发明人发现果胶和果胶衍生的糖可以合适地用于阻止阪崎肠杆菌在组合物中生长和繁殖。已经发现，阪崎肠杆菌的生长在含有果胶衍生糖的液体营养组合物中被显著地抑制。
由于果胶降解产物对阪崎肠杆菌增殖的抑制作用，糖也可以用于阻止阪崎肠杆菌在口-胃-肠道中的生长，从而降低阪崎肠杆菌感染在哺乳动物特别是人中的发生率。
具体实施方式
本发明涉及酸性糖——优选糖醛酸糖(uronic acid saccharide)——用于阻止阪崎肠杆菌生长的用途，优选用于阻止组合物中的阪崎肠杆菌生长。本发明还涉及一种用于阻止阪崎肠杆菌生长的方法，优选用于阻止组合物中的阪崎肠杆菌生长，所述方法包括将糖醛酸糖包含于组合物中。所述组合物优选为一种食物制品。所述组合物优选适合给予至哺乳动物，优选婴儿。
在另一方面，本发明涉及(i)糖醛酸糖用于治疗和/或预防哺乳动物中阪崎肠杆菌感染的用途；(ii)一种用于治疗和/或预防哺乳动物中阪崎肠杆菌感染的方法，所述方法包括将糖醛酸糖给予所述哺乳动物。本发明还涉及含有糖醛酸寡糖的组合物用于制备一种用于治疗和/或预防哺乳动物中阪崎肠杆菌感染的组合物的用途。本发明还涉及糖醛酸寡糖用于治疗和/或预防哺乳动物中阪崎肠杆菌感染。
阪崎肠杆菌
阪崎肠杆菌(E.sakazakii)是一种肠杆菌属革兰氏阴性杆状致病菌。阪崎肠杆菌一种机会致病菌，可引起感染，例如坏死性小肠结肠炎、菌血症、脑膜炎和脑脓肿/损伤(Iversen et al.(2007)BMC Evol Biol 7：64)。
生长抑制
本发明涉及糖醛酸糖用于阻止阪崎肠杆菌生长的用途。具体地，本发明提供了在一种含有糖醛酸糖的液体组合物中减少的阪崎肠杆菌细菌计数，作为对比的是不含糖醛酸糖的同样组合物，特别是在制备所述组合物后经过一段时间更是如此。根据本发明，如下情形为生长显著降低，即在室温下孵育24小时后，含有糖醛酸糖的液体组合物中每毫升中的阪崎肠杆菌的菌落形成单位(cfu)数目优选地为与不含糖醛酸糖的同样组合物的至多1/10、更优选1/100、最优选1/1000。
本发明涉及糖醛酸糖用于阻止阪崎肠杆菌生长的用途，特别是在含有蛋白质、脂肪和糖的组合物中，优选在液体组合物中。因此，所述糖醛酸糖优选用于液体食品，特别是婴儿配方。在本发明的组合物中，所述脂质组分优选提供5％至50％的总热量，所述蛋白质组分优选提供5％至50％的总热量，所述糖组分优选提供15％至90％的总热量。优选地，在本发明的组合物中，所述脂质组分提供35％至50％的总热量，所述蛋白质组分提供7.5％至12.5％的总热量，所述糖组分提供40％至55％的总热量。为计算蛋白质组分的总热量％，需要纳入由蛋白质、肽和氨基酸提供的总能量。用于营养制品的蛋白质组分优选地选自非人动物的蛋白(优选乳蛋白)、植物蛋白(优选大豆蛋白和/或稻蛋白)、上述物质的水解产物、游离氨基酸和上述物质的混合物。所述组合物优选地包含至少一种可消化的糖，选自蔗糖、乳糖、葡萄糖、果糖、固体玉米糖浆、淀粉和麦芽糊精及其混合物，更优选乳糖。因此，液体形式的组合物的热量密度优选是0.1至2.5kcal/ml，甚至更优选是0.5至1.5kcal/ml，最优选0.6至0.8kcal/ml。
以每100g本发明组合物的干重计，所述组合物优选包含0.01至10g的DP为2至250(优选地DP为2至100)的糖醛酸糖；更优选每100g干重中0.05至6g，甚至更优选0.2至2g。以每100g本发明组合物的干重计，所述组合物优选包含0.01至10g的DP为2至250(优选地DP为2至100)的半乳糖醛酸寡糖，更优选0.05至6g，甚至更优选0.2至2g。以每100g本发明组合物的干重计，所述组合物优选包含0.01至10g的DP为2至250(优选地DP为2至100)的果胶降解产物，更优选0.05至6g，甚至更优选0.2至2g。
因此，在一个实施方案中，本发明涉及糖醛酸糖用于阻止液体组合物中阪崎肠杆菌生长的用途，所述组合物包含脂质、蛋白质和糖，其中所述脂质提供5％至50％的总热量，所述蛋白质提供5％至50％的总热量，所述糖提供15％至90％的总热量，并且以100g所述组合物的干重计，所述组合物包含0.01至10g的DP为2至250的糖醛酸糖。
感染抑制
本发明还涉及糖醛酸糖在制备用于治疗和/或预防哺乳动物中阪崎肠杆菌感染的组合物中的用途。本发明发现的特异性生长抑制效应还可有利地用于人。口服糖醛酸寡糖可阻止肠道中阪崎肠杆菌的生长，从而降低阪崎肠杆菌感染的发生率和严重程度。
阪崎肠杆菌感染在新生儿脑膜炎和坏死性小肠结肠炎的发生中起作用。因此，在一个优选实施方案中，本发明涉及糖醛酸糖在制备用于治疗和/或预防新生儿脑膜炎和/或坏死性小肠结肠炎——更优选由阪崎肠杆菌诱发的新生儿脑膜炎和/或坏死性小肠结肠炎——的组合物中的用途。具体地，本发明涉及糖醛酸糖用于治疗和/或预防哺乳动物中阪崎肠杆菌感染、新生儿脑膜炎和/或坏死性小肠结肠炎。优选地，本发明涉及对年龄0至2岁的人婴儿进行治疗和/或预防。
优选地，将所述糖醛酸糖和一种营养组合物组合或混合施用。优选的营养组合物在上文中有描述。在本发明的一个实施方案中，所述糖醛酸糖存在于液体组合物中，所述组合物包含脂质、蛋白质和糖，其中所述脂质提供5％至50％的总热量，所述蛋白质提供5％至50％的总热量，所述糖提供15％至90％的总热量，并且以100g所述组合物de干重计，所述组合物包含0.01至10g的DP为2至250的糖醛酸糖，优选的DP为2至200。
糖醛酸糖
本发明使用的术语糖醛酸糖是指含有糖醛酸单糖单元的糖，所述糖中优选至少25％，优选至少50％的单糖单元是糖醛酸。含有糖醛酸单糖单元的本发明糖醛酸糖优选地选自：古洛糖醛酸(guluronic acid)、艾杜糖醛酸(iduronic acid)、核糖醛酸(riburonic acid)、甘露糖醛酸、半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸。在一个优选实施方案中，所述糖醛酸糖包含半乳糖醛酸，优选以糖醛酸糖中总糖醛酸单元计至少50％的半乳糖醛酸。优选地，所述糖醛酸糖是果胶、藻酸盐(alginate)、果胶的降解产物或者藻酸盐的降解产物，最优选果胶的降解产物。用果胶降解产物已达到良好的阪崎肠杆菌抑制作用。
所述果胶降解产物优选地为一种果胶水解产物(通过水解制备)和/或果胶裂解产物(lyasate)(通过β-脱去反应制备)。果胶降解产物优选由水果或蔬菜果胶制备，更优选由苹果果胶、柑橘果胶和/或糖用甜菜果胶制备。所述果胶降解产物优选通过裂解酶和/或温度和压力变化来制备，更优选通过β-消除反应制备。所述果胶降解产物优选为果胶裂解产物。
本发明的组合物优选地包含具有如下聚合度(DP)的糖醛酸糖：2至250，更优选2至100，甚至更优选2至50，最优选2至20。优选地，以组合物中糖醛酸总重计，本发明组合物包含25重量％至100重量％，更优选50重量％至100重量％的具有如下DP的糖醛酸糖：2至250，更优选2至100，甚至更优选2至50，最优选2至20。所述糖醛酸糖优选是一种果胶的降解产物。
在一个优选的实施方案中，所述糖醛酸糖的至少一个末端己糖醛酸单元含有一个双键，该双键优选位于所述末端己糖醛酸单元的C4和C5之间的位置。所述糖醛酸糖的优选至少5％，更优选至少10％，甚至更优选至少25％的末端己糖醛酸单元是不饱和己糖醛酸单元。由于每个糖醛酸糖个体优选地仅包含一个不饱和末端己糖醛酸单元，因此优选少于50％的末端己糖醛酸单元是不饱和己糖醛酸单元(即包含双键)。
所述糖醛酸糖可被衍生化。所述糖醛酸糖可被甲氧基化和/或被酰胺化。在一个优选实施方案中，所述糖醛酸糖的特征在于20％以上被甲氧基化为特征，优选30％以上、50％以上或甚至70％以上的甲氧基化度。本文中使用的“甲氧基化度”(也称作DE或“酯化度”)意指糖醛酸糖中所含的自由羧酸基团被酯化(例如通过甲基化作用)的程度。在另一个实施方案中，所述糖醛酸糖的甲基化度20％以上、优选大于30％以上、大于50％以上或甚至大于70％以上。
本发明上下文中的酸性糖被定义为在中性pH下溶解于水中时带负电的糖，优选带负电的羧酸。
实施例
糖醛酸糖的抗病原体作用
研究了糖醛酸糖特别是果胶衍生的寡糖对微生物生长的抑制作用。本研究使用了浓度为14mg/ml、甲基化度为36％的果胶裂解产物。
用NaCl-蛋白胨溶液稀释阪崎肠杆菌(DSM 4485)，并孵育过夜。样品的初始接种物等于10cfu/测量单位，以BiMedia 001B(Sy-Lab，Austria)作为富含糖醛酸糖的基础培养基。在孵育开始后0、6和24小时通过常规平板培养法对样品进行分析。下表1给出了细菌生长的结果。
表1：细菌生长
  微生物形成数目(cfu/ml)
  阪崎肠杆菌(24h)
  对照   1.109
  果胶裂解产物   0.5
上表显示了糖醛酸糖对阪崎肠杆菌的出人意料之外的有效和特异性抑制作用，这证明了酸性糖用于阻止组合物中微生物的生长的用途，同时还表明了在治疗和/或预防阪崎肠杆菌感染中的有益用途。

Claims (6)

1.糖醛酸糖用于阻止阪崎肠杆菌(Enterobacter sakazakii)生长的用途。
2.权利要求1的用途，用于在液体组合物中阻止阪崎肠杆菌生长，所述组合物包含脂质、蛋白质和糖，其中所述脂质提供5％至50％的总热量，所述蛋白质提供5％至50％的总热量，所述糖提供15％至90％的总热量，并且以100g所述组合物的干重计，所述组合物包含0.01至10g的DP为2至250的糖醛酸糖。
3.糖醛酸糖在制备用于治疗和/或预防(i)哺乳动物中阪崎肠杆菌感染；(ii)新生儿脑膜炎；和/或(iii)坏死性小肠结肠炎的组合物中的用途。
4.权利要求3的用途，其中所述治疗和/或预防是对年龄为0至2岁的人类婴儿。
5.权利要求3或4的用途，其中糖醛酸糖在于液体组合物中，所述组合物包含脂质、蛋白质和糖，其中所述脂质提供5％至50％的总热量，所述蛋白质提供5％至50％的总热量，所述糖提供15％至90％的总热量，并且以100g所述组合物的干重计，所述组合物包含0.01至10g的DP为2至250的糖醛酸糖。
6.前述权利要求任一项的用途，其中的糖醛酸糖是果胶降解产物。
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