JP5689601B2 - 組成物 - Google Patents
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Description
(a)1又は複数の生菌ビフィドバクテリウム・ラクティス株と、
(b)糖成分と
を含み、
糖成分が、重合度2〜100のキシロオリゴ糖を含む組成物を提供する。
キシロオリゴ糖は、1,4−β−結合によって連結された五炭糖であるキシロース分子を含むが、他の結合も可能である。キシロオリゴ糖の重合度は、キシロース単位数を指す。したがって、キシロビオースは、1,4−β−結合によって連結されたキシロース分子2個からなり、重合度2である。同様に、キシロトリオースは、重合度3である。重合度又はdpは、重合反応の時間tにおける平均ポリマー鎖中の繰返し単位数である。
いずれのビフィドバクテリウム・ラクティス株を使用してもよい。
別の態様において、本発明は、本明細書に記載されたように、組成物を含む経口摂取用の製品に関する。このような経口摂取用の製品としては、食糧、又は経口サプリメントを挙げることができる。本明細書に記載する組成物は、このような経口摂取用の製品の成分である。
一態様において、本明細書に記載する組成物は薬学的組成物であり、これは、さらに薬学的に許容される担体、希釈剤、又は賦形剤を(それらの組合せを含めて)含む。
別の態様において、本発明は、キットであって、1又は複数の生菌ビフィドバクテリウム・ラクティス株を含む第1の容器と、糖成分を含む第2の容器とを備え、糖成分は重合度2〜100のキシロオリゴ糖を含むキットを提供する。
別の態様において、本発明は、本明細書に記載されたように、対象の腸でのビフィドバクテリウム・ラクティスの定着及び/又は活性を選択的に増大させる医薬品の製造における組成物又はキットの使用を提供する。
本明細書に記載されたように、組成物又はキットを対象に経口投与することによって、対象の腸でのビフィドバクテリウム・ラクティスの定着を選択的に増大させる方法。
糖成分(b)は、6.5重量%未満の単糖、好ましくは6.0重量%未満の単糖、好ましくは5.5%未満の単糖、好ましくは5.0%未満の単糖、好ましくは4.5%未満の単糖、好ましくは4.0%未満の単糖、好ましくは3.5%未満の単糖、好ましくは3.0%未満の単糖、好ましくは2.5%未満の単糖、好ましくは2.0%未満の単糖、好ましくは1.5%未満の単糖、好ましくは1.0%未満の単糖、好ましくは0.5%未満の単糖を含有してもよい。
[実施例]
RaftiloseP95は、Orafti、Belgiumから入手可能である。
α-D-グルコースは、Serva、Germanyから入手可能である。
de Man Rogosa Sharpe培地(MRS)は、(LabM)から入手可能である。
MRS 2は、グルコースを含まないMRS培地である。
トリプシンダイズブロス培地(TSB)は、Becton Dickinson、Franceから入手可能である。
ビフィドメディウム(Bifidomedium)(Bif58)の処方は、DSM、Deutsche Sammlung von Mikroorganismenから入手可能である。
ビフィドバクテリウム・ラクティスBl-07は、Danisco A/Sから入手可能である。
ビフィドバクテリウム・ラクティスBl-04は、Danisco A/Sから入手可能である。
ビフィドバクテリウム・ラクティスHN019(Howaru)は、Danisco A/Sから入手可能である。
ビフィドバクテリウム・ラクティスDN 173 010は、Groupe Danoneから入手可能である。
ビフィドバクテリウム・ラクティスBb-12は、Christian Hansen A/Sから入手可能である。
ビフィドバクテリウム・ラクティス420は、Danisco A/Sから入手可能である。
ビフィドバクテリウム・ブレーベBb-03は、Danisco A/Sから入手可能である。
ビフィドバクテリウム・ロンガムKC-1は、Danisco A/Sから入手可能である。
ビフィドバクテリウム・ロンガム913(Wisby)は、Danisco A/Sから入手可能である。
ラクトバチルス・アシドフィラスNCFMは、Danisco A/Sから入手可能である。
ラクトバチルス・ブルガリカス(Lactobacillus bulgaricus)1260は、Danisco A/Sから入手可能である。
ラクトバチルス・パラカゼイ(Lactobacillus paracasei)Lpc-37は、Danisco A/Sから入手可能である。
ラクトバチルス・ラムノーサス(Lactobacillus rhamnosus)HN001(Howaru)は、Danisco A/Sから入手可能である。
ストレプトコッカス・サーモフィルス(Streptococcus thermophilus)715は、Danisco A/Sから入手可能である。
ATCC=American Type Culture Collection
DSM=Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen
CCUG=Culture Collection、University of Goteborg、Sweden
EELA=Finnish Food Safety Authority
プレバイオティクス候補及びそれらの組成物を表1に示す。
Abbr.=略語、Ster.=滅菌手順、F=濾過、UV=紫外線。
単一糖上での細菌増殖速度を決定する一般方法
マルチウェルプレート中の液体試料の吸光度の動的変化を記録する自動オンライン濁度計(Bioscreen C、Labsystems社製、Finland)で、嫌気性増殖を測定した。プレートの各ウェルに、20μlの10w/v%プレバイオティクス溶液を好気的状態で充填し、続いて適切な培地中1v/v%定常期初期試験細菌180μlを嫌気的に添加した。対照ウェルには、200μlの1v/v%定常期初期試験細菌又は当該の細菌を培養するのに使用した同じ培地しか含まれなかった。最終プレバイオティクス濃度は1w/v%であった。
χi=対象iの値
一般方法を用いて、一連のプロバイオティクス上でのビフィドバクテリウム・ラクティスBl−04の増殖を実施した。これらについての結果を表3に示し、このデータから得られた増殖曲線を図1に示す。
一般方法を用いて、一連のプロバイオティクス上でのラクトバチルス・アシドフィラスの増殖が実施されたと確定するために、2つの実験を行った。実験1の結果を図4に示し、実験2の結果を図5に示す。
一連の単一糖類上でのビフィドバクテリウムの様々な株の細菌増殖速度を、一般方法に従って確定した。培地を含まない増殖曲線下平均面積は、表5及び図6に示す通りであった。
一連の単一糖類を用いた乳酸桿菌の様々な株及びS.サーモフィルスの細菌増殖の速度を測定するために2つの実験を行った。一般方法に従って、細菌増殖速度を確定した。第1の実験では、培地を含まない増殖曲線下平均面積は、表7及び図8に示す通りであった。
一連の単一糖類を用いた結腸由来の様々な病原体及び他の微生物の増殖速度を測定するために、2つの実験を行った。一般方法に従って、増殖速度を確定した。第1の実験では、培地を含まない増殖曲線下平均面積は、表9及び図10に示す通りであった。
4つの並列ユニットV1〜V4からなる半連続4チャネル結腸シミュレーターモデルを使用して、いくつかの結腸シミュレーションを行った。ユニットの状態を、盲腸/上行結腸を表すV1から、遠位結腸/直腸を表すV4までヒト結腸の異なる区画を表すように調整した。結腸シミュレーションは、Makivuokko, H., et al. Nutr. Cancer, 52, (2005), 94-104;及びMakivuokko, H., et al. Biosci. Biotechnol. Biochem., 70, (2006), 2056-2063に記載されているように行った。
第1の容器(V1)に供給する培地容器から最後の容器(V4)まで、シミュレーターユニットは、容器に無酸素性N2を供給することによって嫌気的に維持した。4段階ユニットはそれぞれ、無菌シミュレーター培地中50mlに溶解した適切な糖1gを含み(Macfarlane, G. T., et al. Microb. Ecol., 35, (1998), 180-187を参照のこと)、嫌気性キャビネット内部のガラス血清瓶に封止した。対照シミュレーションユニットでは、50mlの無菌シミュレーター培地を同様にガラス血清瓶に封止した。シミュレーターユニットのすべての容器に、適切な細菌の試料を嫌気的に接種した。
一連の単一糖類を用いたビフィドバクテリウムの結腸シミュレーションの平均値結果(平均値のプラス又はマイナス標準誤差、+/−SE)を図12に示す。
一連の単一糖類を用いたビフィドバクテリウム・ラクティスの結腸シミュレーションの結果を図13に示す。
一連の単一糖類を用いたビフィドバクテリウム・ロングムの結腸シミュレーションの結果を図14に示す。
一連の単一糖類を用いたクロストリジウム・パーフリンゲンスの結腸シミュレーションの結果を図15に示す。
一連の単一糖類を用いた全短鎖脂肪酸の結腸シミュレーションの結果を図16に示す。全短鎖脂肪酸という用語は、C1−C5鎖脂肪酸、特に酢酸、プロピオン酸、及び酪酸を指す。
これらの結腸シミュレーションから、キシロオリゴ糖種は、B.ロングムやCl.パーフリンゲンスなどの他の種よりビフィドバクテリウム・ラクティスに対してはるかに高い選択性を示すことが理解できる。
Claims (18)
- (a)1又は複数の生菌ビフィドバクテリウム・ラクティス株と、
(b)糖成分と
を含み、前記糖成分が、重合度2〜10のキシロオリゴ糖を含み、
糖成分(b)における重合度3のキシロオリゴ糖の割合が、少なくとも10%である組成物であって、107〜1010CFUのビフィドバクテリウム・ラクティス当たり2〜10gのキシロオリゴ糖を含む、ビフィドバクテリウム・ラクティス株の選択的増殖促進用組成物。 - 糖成分(b)における重合度2のキシロオリゴ糖の割合が、少なくとも50%である、請求項1に記載の組成物。
- 糖成分(b)における重合度2のキシロオリゴ糖の割合が、少なくとも70%である、請求項1に記載の組成物。
- 糖成分(b)における重合度が少なくとも4であるキシロオリゴ糖の割合が、少なくとも30%である、請求項1に記載の組成物。
- 糖成分(b)における重合度が少なくとも5であるキシロオリゴ糖の割合が、50%超である、請求項1に記載の組成物。
- キシロオリゴ糖がキシランである、請求項1に記載の組成物。
- 1又は複数の生菌ビフィドバクテリウム・ラクティス株が、B.ラクティスBl−04、B.ラクティスBi−07、B.ラクティス420、B.ラクティスDN 173 010、B.ラクティスHN019、B.ラクティスBb−12、B.ラクティスDSM10140、及びそれらの混合物から選択される、請求項1〜6のいずれかに記載の組成物。
- 食品組成物である、請求項1〜7のいずれかに記載の組成物。
- 食品組成物が、1食当たり1×106〜1×1012コロニー形成単位のビフィドバクテリウム・ラクティス株を含む、請求項8に記載の組成物。
- 請求項1〜9のいずれかに記載の組成物を含む経口摂取用の製品であって、ドライ経口サプリメント、液体経口サプリメント、牛乳、ヨーグルト、チーズ、アイスクリーム、穀類で製造された製品、乳児用調製粉乳、粉末飲料、菓子、栄養バー、及び粉乳から選択される製品。
- 1又は複数の生菌ビフィドバクテリウム・ラクティス株を含む第1の容器と、
糖成分を含む第2の容器とを備え、前記糖成分が重合度2〜10のキシロオリゴ糖を含み、前記糖成分における重合度3のキシロオリゴ糖の割合が、少なくとも10%であり、107〜1010CFUのビフィドバクテリウム・ラクティス当たり2〜10gのキシロオリゴ糖を含むキット。 - ビフィドバクテリウム・ラクティス株が、丸剤又はヨーグルトに組み込まれている、請求項11に記載のキット。
- キシロオリゴ糖が、果汁、及び穀類で製造された製品から選択される食糧に組み込まれている、請求項11又は12に記載のキット。
- 対象の腸でのビフィドバクテリウム・ラクティスの定着及び/又は活性を選択的に増強させる医薬品の製造における、請求項1〜9のいずれかに記載の組成物、又は請求項11〜13のいずれかに記載のキットの使用。
- 対象の腸でのクロストリジウム・パーフィンジェンスの定着を低減又は抑制する医薬品の製造における、請求項1〜9のいずれかに記載の組成物、又は請求項11〜13のいずれかに記載のキットの使用。
- 発酵食品中のビフィドバクテリウム・ラクティスのレベルを上昇させる医薬品の製造における、請求項1〜9のいずれかに記載の組成物、又は請求項11〜13のいずれかに記載のキットの使用。
- 下痢の治療用の医薬品の製造における、請求項1〜9のいずれかに記載の組成物、又は請求項11〜13のいずれかに記載のキットの使用。
- 腸機能を改善する医薬品の製造における、請求項1〜9のいずれかに記載の組成物、又は請求項11〜13のいずれかに記載のキットの使用。
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