CN102050780B - 喹啉衍生物,其药物组合物及其用途 - Google Patents

Abstract

如结构式(I)所示的喹啉衍生物(1-13)，含其为有效量的化合物1-13及药用载体或赋形剂组成的药物组合物，该药物化合物喹啉衍生物(1-13)及其药物组合物的制备方法，及其在治疗人类疾病的药物中的应用，特别是在制备抗乙型肝炎抑制剂药物和治疗乙型肝炎药物中的应用。

Description

喹啉衍生物,其药物组合物及其用途

技术领域：

本发明属于药物技术领域，具体地说，涉及一种治疗乙型肝炎的药物组合物、其制备方法、以及在药物中的应用，特别是该药物及其组合物在抗乙型肝炎药物中的应用。

背景技术：

据世界卫生组织(WHO)统计，全球大约有20亿人感染过或者正在感染乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)，其中约4亿人为HBV慢性感染者，每年约有100多万人口死于乙肝引起的慢性肝炎、肝硬化和原发性肝炎。我国属于乙肝感染的高流行区，据卫生部统计结果测算，我国现有慢性乙肝病原携带者超过1.2亿人，其中包括慢性乙肝患者约2800-3000万例。乙型肝炎是乙型肝炎病毒引起的、以肝脏炎性病变为主并引起多器官损害的一种传染性疾病。乙型肝炎病毒感染是一个严重的公共卫生问题，而且治疗慢性肝炎的费用是相当昂贵的，估计每年因病毒性肝炎导致直接经济损失300亿～500亿人民币。近年来HBV疫苗免疫、各种抗病毒药物的应用在控制HBV感染取得了一定的效果，但同时也导致HBV变异株出现，HBeAg(hepatitis Bvirus e antigens，e抗原)阴性慢性乙型病毒性肝炎(Chronic HBV，CHBV)增多，停药后HBV易反弹，而且费用高。为了有效地控制HBV，需要研制不同类型的临床治疗药物。

乙型肝炎病毒属DNA嗜肝病毒科，特点为起病较缓，以亚临床型及慢性型较常见，无黄疸型HBsAg(hepatitis B virus surfaceantigens，HBsAg)续阳性者易慢性化，主要是通过血液制品、母婴和性接触等途径传播，且易转成慢性肝炎，是引发肝硬化、肝癌的主要病因之一。

乙型肝炎病毒的复制过程涉及5步：结合、侵入、转录、翻译、基因复制和包装。首先病毒颗粒通过受体附着于肝细胞，侵入胞浆后脱去外膜，形成核心颗粒。核心颗粒移至肝细胞核，HBV DNA核心颗粒脱壳而出，在细胞核内形成cccDNA(covalently closedcircularDNA，cccDNA)。cccDNA是乙型肝炎病毒复制的模板，是肝细胞长期持续受感染的关键物质。cccDNA有2种功能，其一是合成病毒颗粒的各种构件，如HBsAg(表面抗原，构成外膜)，HBcAg(hepatitis virus c antigens，核心抗原，构成内膜)，HBeAg(分泌到血液中)；其二是合成下一代HBV DNA。大部分新合成的HBV DNA用于新病毒颗粒的包装，部分则重新进入肝细胞核，成为cccDNA的另一个来源。部分新合成的HBV DNA首先与HBcAg组装成核心颗粒，进而与HBsAg组装成完整的HBV颗粒，向细胞外释放。过剩的HBsAg有时独自释放入血液，形成小球型颗粒或管型颗粒。

目前国际公认的疗效较好的抗乙肝病毒药物主要为核苷类药物如拉米夫定(lamivudine)、阿德福韦酯(adefovir dipivoxiil)、恩替卡韦(enticavir)、替比夫定(tibivudine)、泰诺福韦(tenofovir)。这些药物在体外或体内实验中，对HBV病毒有抑制作用。其作用机制为药物进入细胞内成为三磷酸化合物，通过底物的竞争，对病毒的聚合酶或反转录酶抑制，最终抑制病毒DNA的合成、病毒的增殖。核苷类似物抗HBV，具有疗效显著、服用方便、生物利用度高、患者耐受性良好等特点，不足之处是疗效欠持久、停药病情易反复，以及病毒发生耐药性变异。为控制乙型肝炎的蔓延，医学界还研究出有效的乙型肝炎疫苗，对公众进行免疫注射，主要用于预防，获得了良好的效果。但对已感染HBV则无效。

另外治疗慢性乙型肝炎采用的药物是α-干扰素(IFN)，兼具有抗病毒和免疫调节功能。但干扰素治疗慢性乙型肝炎有其制约因素：其一，它从未获得真正成功，除非病人在治疗前已出现对HBV的实质性免疫反应。其二，在干扰素诱导的HBeAg血清转换之前，肝炎活动的突然一过性加重，表现为ALT(alanine aminotransferase，ALT，丙氨酸氨基转移酶)升高，可导致肝硬化病人发生肝功能衰竭，偶尔出现死亡。

综上所述，抗肝炎药物有非常大的市场需求，但是现在临床应用的抗肝炎药物普遍存在耐药性的问题，成功地开发出能解决药物的耐药性，临床效率高且毒副作用较小的新一代抗乙型肝炎的药物，将具有很强的市场竞争力和市场前景。

迄今，现有技术中没有喹啉衍生物(I)的报道，也没有其作为有效成分的药物组合物的报道，也没有其药物组合物在制备或治疗乙型肝炎药物中的应用报道。

发明内容：

本发明的目的在于提供一类新的具有药用价值的式(I)所示的喹啉衍生物1-13，含有治疗乙型肝炎有效量的喹啉衍生物(I)及药用载体或赋形剂的治疗乙型肝炎药物组合物，喹啉衍生物及其药物组合物的制备方法，该化合物或其药物组合物在制备抗乙型肝炎药物中的应用。

为了实现本发明的上述目的，本发明提供了如下的技术方案：

结构式(I)所示的喹啉衍生物1-13，

其中化合物1-13中基团R¹、R²分别为：

药物组合物，其中含有治疗有效量的式(I)喹啉衍生物1-13任一种和药学上可授受的载体。

所述的药物组合物，为治疗乙型肝炎的药物组合物。

式(I)喹啉衍生物1-13任一种在制备治疗人或动物疾病或病症的药物中的应用。

上述应用，所述的疾病是乙型肝炎。

上述药物组合物在制备治疗人或动物疾病或病症的药物中的应用。

上述应用，所述的疾病是乙型肝炎。

制备式(I)喹啉衍生物1-13的方法，以化合物A即4-苯基-6-氯-喹啉-2-酮为反应原料，合成喹啉衍生物1-13。

制备含喹啉酮衍生物喹啉衍生物1-13的药物组合物的方法是以化合物A即4-苯基-6-氯-喹啉-2-酮为反应原料，合成喹啉衍生物(I)，加入可药用载体或赋形剂。

合成化合物1-13的原料化合物A的合成方法在本发明人的专利申请“喹啉-2-酮类衍生物，其药物组合物及其应用”(申请号：200810058290.X，公开号：CN101260077，2008年9月10日)和论文(Cheng Pi，Zhang Quan，Ma Yun-Bao，Jiang Zhi-Yong，ZhangXue-Mei，Zhang Feng-Xue，Chen Ji-Jun.Bioorganic MedicinalChemistry Letters，2008，18：3787-3789)已详细报道。

本发明化合物用作药物时，可以直接使用，或者以药物组合物的形式使用。该药物组合物含有0.1-99％，优选为0.5-90％的本发明化合物，其余为药物学上可接受的，对人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。

所述的药用载体或赋形剂是一种或多种固体、半固体和液体稀释剂、填料以及药物制品辅剂。将本发明的药物组合物以单位体重服用量的形式使用。本发明的药物可经注射(静注、肌注)和口服两种形式给药。

具体实施方式：

为了更好地理解本发明的实质，下面将用本发明的试验例来说明本发明式(I)喹啉衍生物1-13的药理作用结果，但不以此试验例来限定本发明。

试验例1：

喹啉衍生物喹啉衍生物(I)对Hep G2.2.15细胞的药物毒性和对HBsAg、HBeAg分泌的抑制作用以及对HBV DNA复制的抑制作用

1材料和方法

1.1材料：喹啉衍生物(I)；拉米夫定(lamivudine)(葛兰素史克制药(苏州)有限公司，国药准字H20030581)；Hep G2.2.15细胞(引自广州空军医院)；高糖DMEM(GIBICO)；G418(GIBICO)；胎牛血清(天津血研所)；L-谷氨酰胺(AMRESCO)；青霉素，链霉素(石药集团中诺药业(石家庄)有限公司)。

1.2Hep G2.2.15细胞，用高糖DMEM液培养，培养液添加10％胎牛血清，0.03％L-谷氨酰胺，100mg/L G418，10⁵IU/L青酶素，100mg/L链霉素，5％NaCO₃调pH至6.8-7.0。

1.3仪器：酶标仪Bio-RAD 680(美国)；CO₂培养箱Thermo Forma3310(美国)；倒置生物显微镜XD-101型(南京)等。

1.4实验过程用胰蛋白酶将Hep G2.2.15细胞消化，用添加了0.03％L-谷氨酰胺，100mg/L G418，100IU青酶素，100IU链霉素的高糖DMEM液制成单细胞悬液，每孔按3×10⁵×0.1mL^-1分种于96孔板，0.1mL/孔，24h后换用含2％的胎牛血清，380μg/mL的含药培养液，每种药物设四个药物浓度，每个浓度设三孔，四倍稀释，同时设三孔不加药物的细胞对照组及一孔空白细胞组，并以拉米夫定做阳性药物对照；7d后收集上清，用ELISA法测定HBsAg和HBeAg的分泌情况。同时用MTT法测定药物对细胞的毒性。

1.5药物对细胞半数毒性浓度(CC₅₀)的测定根据Mosmann建立的MTT法检测药物的细胞毒性(Y.Nakajima，Y.Saton，M.Katsumata，K.Tsujiyama，Y Ida，and J.Shoji，Phytochemistry 1994，36，119-127)。具体方法是：向吸去上清的细胞孔中加入0.4mg/mLMTT，0.1mL/孔，37℃5％CO₂培养4h，去上清，每孔加入0.1mL二甲基亚砜，孵育10min，在酶标仪上测定溶液在490nm下的吸光度值。药物对细胞的破坏百分率η_destroy＝(A_{细胞对照组}-A_{供试样品组})/(A_{细 胞对照组}-A_空白组)×100，50％毒性浓度(CC₅₀)为实验孔存活细胞为对照孔50％时的药物浓度。CC₅₀＝Anti lg[(C₅₀-＜50％破坏率的百分数)/(＞50％破坏率的百分数-＜50％破坏率的百分数)×C+lg B]，A：破坏率大于50％的药物浓度；B：破坏率小于50％的药物浓度；C＝lg A-lg B。

1.6药物对细胞半数抑制浓度的测定采用酶联免疫法(ELISA)测定。药物对HBsAg、HBeAg的抑制百分率η_inhibitory＝(A_{细胞对照组}-A_{供 试样品组})/A_{细胞对照组}-A_空白组)×100，50％抑制浓度(IC₅₀)为HBsAg或HBeAg以抑制率为50％时的药物浓度，计算方法同CC₅₀。

1.7药物对HBV DNV抑制细胞复制的半数浓度的测定HepG2.2.15细胞种于24孔培养基中，每孔细胞浓度5×10⁵。每2天换一次培养基，6天以后把化合物加入培养基中，接下来每天换一次培养基，连续6天。6天后根据TIANamp Gemomic DNA Kit(TIANGEN，China)手册方法分离、收集细胞和DNA。用PCR实时定量检测HBVDNA，用SYBR Green PCR Master Mix(Applied Biosystems)定量PCR检测HBV DNA载量。

2．结果：最终结果以选择指数(SI，为评价药物临床应用前景的参数，SI＝CC₅₀/IC₅₀)来评价，其中SI＞2为无毒有效，1＜SI＜2为有毒有效，SI＜1为有毒无效。具体结果见表2：

表2喹啉衍生物(I)在Hep G2.2.15细胞对HBsAg、HBeAg、HBV DNA

抑制效果和细胞毒性

3、结论：

实验结果显示，喹啉衍生物3、4、5、8、9、12、13在体外对Hep G2.2.15细胞分泌HBsAg和HBeAg有抑制作用；喹啉衍生物1-11、13对HBV DNA复制有抑制作用。

以下通过实施例来进一步阐明本发明的制备方法及药物组成。

实施例1：

喹啉衍生物(I)的制备：

以化合物4-苯基-6-氯-喹啉-2-酮(A)为原料，其合成见本申请人的专利申请“喹啉-2-酮类衍生物，其药物组合物及其应用”(申请号：200810058290.X，公开号：CN101260077，2008年9月10日)和发表论文(Cheng Pi，Zhang Quan，Ma Yun-Bao，Jiang Zhi-Yong，ZhangXue-Mei，Zhang Feng-Xue，Chen Ji-Jun.Bioorganic MedicinalChemistry Letters，2008，18：3787-3789)中。

化合物1的合成：将化合物A(50mg，0.15mmol)溶于无水吡啶(5mL)中，常温下缓慢滴入适当的酸酐(1.2equiv mmol)，反应液在室温下搅拌反应直至原料反应完全。将反应液缓慢倾入冰水(20mL)中，乙酸乙酯(20mL×3)萃取，乙酸乙酯层依次用5％盐酸(20mL×3)、5％碳酸氢钠(20mL×3)和饱和食盐水(15mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，减压浓缩得粗品。将粗品溶于2mL苯膦酰二氯，慢慢加热到100℃，100℃加热2h，用NH₄OH终止反应，用乙酸乙酯萃取，有机层用食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥，减压浓缩经硅胶柱层析，洗脱剂石油醚/丙酮(97∶3，v/v)，得到得化合物1(白色固体42mg，得率72％)。

分子式：C₁₉H₁₄Cl₃NO₂

分子量：393

性状：白色无定型粉末

波谱图数据：

¹H NMR(CDCl₃，500MHz)δ8.00(1H，d，J＝9.0Hz)，7.62(2H，m)，7.54-7.46(2H，m)，7.25(1H，d，J＝7.5Hz)，7.12(1H，d，J＝2.1Hz)，4,24-4.16(2H，m)，3.16-3.12(1H，m)，2.93-2.88(1H，m)，2.16(3H，s)；¹³C NMR(CDCl₃，100MHz)δ170.6，152.1，147.3，144.9，134.0，133.4，133.1，131.1，131.0，130.7，130.2，130.2，128.9，127.3，127.2，124.6，62.2，30.5，20.9；ESIMS：m/z 416[M+Na]⁺。

化合物2的合成：

将原料A(50mg，0.15mmol)溶于2mL苯膦酰二氯，慢慢加热到100℃，100℃加热2h，用NH₄OH终止反应，用乙酸乙酯萃取，有机层用食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥，减压浓缩经硅胶柱层析，洗脱剂石油醚/丙酮(100∶1，v/v)，得化合物2(白色固体50mg，得率91％)。

分子式：C₁₇H₁₁Cl₄N

分子量：369

性状：白色无定型粉末

波谱图数据：

¹H NMR(CDCl₃，500MHz)δ8.00(1H，d，J＝9.0Hz)，7.66-7.62(2H，m)，7.56-7.48(2H，m)，7.25(1H，dd，J＝7.5Hz，2.0Hz)，7.12(1H，d，J＝2.0Hz)，3.67-3.63(2H，m)，3.26-3.20(1H，m)，3.07-3.01(1H，m)；¹³C NMR(CDCl₃，125MHz)δ151.8，147.4，145.0，133.9，133.5，133.0，131.3，130.9，130.8，130.3，130.2，129.0，127.4，127.3，124.6，41.2，34.5；ESIMS：m/z 370[M+H]⁺.。

化合物3的合成：

化合物1(55mg，0.14mmol)溶于MeOH/H₂O(5ml，4∶1)中，加入醋酸铵(86mg，1.1mmol)，反应液室温搅拌，TLC检测直至反应结束。用乙酸乙酯萃取，有机层用食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥，减压浓缩经硅胶柱层析，洗脱剂石油醚/丙酮(100∶20，v/v)，得化合物3(白色固体41mg，得率84％)。

分子式：C₁₇H₁₂Cl₃NO

分子量：351

性状：白色无定型粉末

波谱图数据：

¹H NMR(CDCl₃，400MHz)δ7.95(1H，d，J＝9.0Hz)，7.61-7.57(2H，m)，7.50-7.42(2H，m)，7.24(1H，dd，J＝7.2，1.9Hz)，7.09(1H，d，J＝2.2Hz)，3.85-3.73(2H，m)，3.08-3.01(1H，m)，2.90-2.83(1H，m)；¹³CNMR(CDCl₃，100MHz)δ152.3，147.2，144.6，134.3，133.3，133.1，131.0，131.0，130.5，130.2，130.0，129.5，127.4，127.3，124.5，60.9，34.6；EIMS：m/z(％)351([M]⁺，24)，286(65％)，250(100％)，214(60％)。

化合物4的合成：

向50mL圆底烧瓶中加入化合物A(300mg，0.9mmoL)、三乙胺(109mg，1.1mmoL)和溶剂二氯甲烷15mL，室温搅拌下向反应液滴加MsCl(372mg，1.1mmoL)，室温搅拌至反应结束。将反应液倒入50mL水中，乙酸乙酯(80mL×3)萃取，依次用5％HCl，饱和食盐水(50mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂得到粗产品经硅胶柱层析石油醚/丙酮(100∶5，v/v)，得化合物4(36mg，收率8％)。

分子式：C₁₉H₁₇Cl₂NO₆S₂

分子量：489

性状：黄色无定型粉末

波谱图数据：

¹H NMR(CDCl₃，400MHz)δ7.95(1H，d，J＝8.9Hz)，7.65(2H，m)，7.52(2H，m)，7.28(1H，m)，6.86(1H，d，J＝1.7Hz)，4.34(2H，m)，3.78(3H，s)，3.13(1H，m)，2.97(1H，m)，2.92(3H，m)；¹³C NMR(CDCl₃，100MHz)δ155.2，149.7，143.1，133.3，133.2，133.0，131.4，131.2，130.9，130.3，129.9，127.5，127.4，124.8，121.1，67.2，41.9，37.2，28.0；FABMS：m/z 490[M+H]⁺.

化合物5的合成：

化合物1(300mg，0.76mmol)溶于MeOH/H₂O(15ml，4∶1)中，加入K₂CO₃(314mg，2.28mmol)，将反应溶液室温搅拌，直至TLC检测反应结束，用乙酸乙酯萃取，有机层用食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥，减压浓缩经硅胶柱层析，洗脱剂石油醚/丙酮(100∶5，v/v)，得化合物5(白色固体241mg，得率69％)。

分子式：C₁₈H₁₅Cl₂NO₂

分子量：347

性状：白色无定型粉末

波谱图数据：

¹H NMR(CDCl₃，400MHz)δ7.80(1H，d，J＝8.8Hz)，7.56-7.37(4H，m)，7.20(1H，dd，J＝7.2，2.0Hz)，7.02(1H，d，J＝2.3Hz)，4.12(3H，s)，3.70(2H，m)，2.88-2.81(1H，m)，2.71-2.62(1H，m)；¹³C NMR(CDCl₃，100MHz)δ161.1，145.8，143.7，134.8，133.3，131.1，130.0，129.9，129.5，128.7，127.1，125.4，124.4，122.0，61.4，53.8，31.6，21.6；ESIMS：m/z 370[M+Na]⁺。

化合物6和7的合成：

向50mL圆底烧瓶中加入化合物3(50mg，0.14mmol)、三乙胺(17mg，0.17mmol)和溶剂二氯甲烷5mL，室温搅拌下向反应液滴加MsCl(32mg，0.28mmoL)，室温搅拌至反应结束。将反应液倒入50mL水中，乙酸乙酯(80mL×3)萃取，依次用5％HCl，饱和食盐水(50mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂得到粗品。将粗品溶于3mL N，N-dimethylformamide，加入NaN₃(20mg，0.3mmol)，加热80℃，反应4h。将反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂得到粗品，经硅胶柱层析石油醚/丙酮(100∶1，v/v)洗脱得化合物6(20mg，得率37％)和7(18mg，得率34％)。

分子式：C₁₇H₁₁Cl₂N₇

分子量：383

性状：白色无定型粉末

分子式：C₁₇H₁₁Cl₃N₄

分子量：376

性状：白色无定型粉末

波谱图数据：

化合物6：¹H NMR(CDCl₃，500MHz)δ8.70(d，1H，J＝8.8Hz)，7.80(dd，1H，J＝8.8，2.1Hz)，7.66(m，1H)，7.60-7.53(m，2H)，7.36(dd，1H，J＝7.4，1.7Hz)，7.24(d，1H，J＝2.2Hz)，3.09-3.85(m，1H)，3.74-3.69(m，1H)，3.27-3.21(m，1H)，3.07-3.01(m，1H)；¹³C NMR(CDCl₃，100MHz)δ151.8，147.4，140.2，134.2，133.7，132.8，131.4，131.1，130.4，128.2，127.7，126.9，125.5，123.5，118.4，49.4，29.4；ESIMS：m/z 406[M+Na]⁺.

化合物7：¹H NMR(CDCl₃，400MHz)δ8.00(d，1H，J＝8.9Hz)，7.65-7.61(m，2H)，7.55-7.47(m，2H)，7.24(d，1H，J＝1.6Hz)，7.12(d，1H，J＝2.0Hz)，3.46-3.42(m，2H)，3.05-3.00(m，1H)，2.91-2.85(m，1H)；¹³C NMR(CDCl₃，100MHz)δ151.8，147.3，144.9，134.0，133.5，133.1，131.2，130.81，130.78，130.3，130.2，129.0，127.5，127.3，124.6，49.4，30.8；ESIMS：m/z 399[M+Na]⁺。

化合物8的合成：

50mL圆底烧瓶中加入化合物A(50mg，0.15mmoL)、DIEA(1mL)和溶剂DMF 2mL，室温搅拌下向反应液滴加TBDPSCl(74mg，0.27mmoL)，室温搅拌至反应结束。将反应液倒入50mL水中，乙酸乙酯(80mL×3)萃取，饱和食盐水(50mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂得到粗产品；将粗品溶于丙酮(5mL)中，加入无水K₂CO₃(35mg，0.225mmol)，适当的2，6-二氟苄基溴(42mg，0.204mmol)，反应液在室温下搅拌直至原料反应完全。将反应液过滤，滤液减压浓缩得粗品；将粗品溶于无水THF(5mL)中，在冰水浴冷却下，向该混合液中加入TBAF(0.5mL)，将反应液在室温下搅拌反应直至原料反应完全。将反应液减压浓缩，将粗品经硅胶柱层析(石油醚/丙酮，80∶20，v/v)纯化得目标化合物8(36mg，得率53％)。

分子式：C₂₄H₁₇Cl₂F₂NO₂

分子量：459

性状：白色无定型粉末

波谱图数据：

¹H NMR(CDCl₃，400MHz)δ7.86(1H，d，J＝8.8Hz)，7.56-7.22(6H，m)，7.04(1H，d，J＝2.2Hz)，6.96(2H，m)，5.68(2H，m)，3.70(2H，t，J＝6.8Hz)，2.86-2.79(1H，m)，2.69-2.62(1H，m)；¹³C NMR(CDCl₃，100MHz)δ163.4，160.8，160.2，146.1，143.5，134.8，133.4，131.2，130.6，130.03，129.98，129.9，129.6，128.8，127.1，125.6，124.4，122.1，112.8，111.5，111.3，61.5，56.3，31.6；ESIMS：m/z 482[M+Na]⁺。

化合物9的合成：

50mL圆底烧瓶中加入化合物A(50mg，0.15mmoL)、DIEA(1mL)和溶剂DMF 2mL，室温搅拌下向反应液滴加TBDPSCl(74mg，0.27mmoL)，室温搅拌至反应结束。将反应液倒入50mL水中，乙酸乙酯(80mL×3)萃取，饱和食盐水(50mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂得到粗产品；将粗品溶于丙酮(5mL)中，加入无水K₂CO₃(35mg，0.225mmol)，适当的2，6-二氯苄基溴(48mg，0.204mmol)，反应液在室温下搅拌直至原料反应完全。将反应液过滤，滤液减压浓缩得粗品；将粗品溶于无水THF(5mL)中，在冰水浴冷却下，向该混合液中加入TBAF(0.5mL)，将反应液在室温下搅拌反应直至原料反应完全。将反应液减压浓缩，将粗品经硅胶柱层析(石油醚/丙酮，80∶20，v/v)纯化得目标化合物9(40mg，得率54％)。

分子式：C₂₄H₁₇Cl₄NO₂

分子量：493

性状：白色无定型粉末

谱图数据：

¹H NMR(CDCl₃，500MHz)δ7.89(1H，d，J＝8.8Hz)，7.57-7.52(2H，m)，7.46-7.39(4H，m)，7.24(2H，m)，7.06(1H，d，J＝2.2Hz)，5.86(1H，d，J＝11.5Hz)，5.81(1H，d，J＝11.5Hz)，3.69(2H，t，J＝7.0Hz)，2.84-2.78(1H，m)，2.68-2.62(1H，m)；¹³C NMR(CDCl₃，125MHz)δ160.4，146.1，143.6，137.1，134.8，133.4，132.4，131.2，130.4，130.0，130.0，129.9，129.6，128.8，128.5，127.1，125.7，124.4，122.0，63.5，61.5，31.6；ESIMS：m/z 516[M+Na]⁺。

化合物10的合成：

50mL圆底烧瓶中加入化合物A(50mg，0.15mmoL)、DIEA(1mL)和溶剂DMF 2mL，室温搅拌下向反应液滴加TBDPSCl(74mg，0.27mmoL)，室温搅拌至反应结束。将反应液倒入50mL水中，乙酸乙酯(80mL×3)萃取，饱和食盐水(50mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂得到粗产品；将粗品溶于二氯甲烷(5mL)中，加入吡啶(0.25mmol，20mg)、二异丙基乙基胺(29mg，0.02mmol)，三氟甲烷磺酸酐((57mg，0.025mmol)，反应液在室温下搅拌直至原料反应完全。将反应液减压浓缩得粗品，经硅胶柱层析石油醚/乙酸乙酯(100∶1，v/v)，得化合物10(29mg，得率56％)。

分子式：C₃₈H₄₀Cl₂N₂OSi

分子量：638

性状：无色油状

谱图数据：

¹H NMR(CDCl₃，500MHz)δ7.75(d，1H，J＝11.0Hz)，7.44-7.15(m，14H)，6.95(dd，1H，J＝9.4Hz，2.0Hz)，6.88(d，1H，J＝2.8Hz)，3.66-3.56(m，2H)，3.12-3.05(m，4H)2.99-2.92(m，1H)，2.78-2.71(m，1H)，1.68-1.54(m，6H)，0.86(s，9H)；¹³C NMR(CDCl₃，100MHz)δ163.0，145.6，144.4，135.6，135.34(4C)，135.33，133.73，133.69，133.4，131.6，129.9，129.7，129.5，129.4(2C)，129.2，127.5(4C)，126.8，126.5，125.8，124.1，62.8，52.3(2C)，33.1，26.8(3C)，26.1(2C)，24.6，19.1；ESIMS：m/z 639[M+H]⁺。

化合物11的合成：

向TBDPSCl保护的化合物A(100mg，0.14mmol)，1-氨基苯并三唑(37mg，0.28mmol)，二异丙基胺(46mg，0.36mmol)加入3mL丙酮溶剂，回流5h.反应液在室温下搅拌直至原料反应完全。将反应液减压浓缩得粗品，经硅胶柱层析石油醚/乙酸乙酯/二乙胺(50∶50∶1，v/v/v)得到化合物11(70mg，得率72％)。

分子式：C₃₉H₃₅Cl₂N₅OSi

分子量：687

性状：白色无定型粉末

波谱数据：

1H NMR(CDCl₃，500MHz)δ7.65(1H，d，J＝6.0Hz)，7.61(1H，d，J＝6.4Hz)，7.46-7.16(17H，m)，7.03(1H，d，J＝7.4Hz)，6.70(1H，d，J＝2.0Hz)，3.84-3.73(2H，m)，2.88-2.83(1H，m)，2.61-2.55(1H，m)，0.90(9H，s)；¹³C NMR(CDCl₃，125MHz)δ164.1，146.9，135.6，135.4，135.3，134.7，134.0，133.3，132.7，130.4，130.3，130.1，129.5，129.3，128.3，125.4，121.3，117.1，61.9，31.8，26.7，26.6，26.4；ESI：m/z 688[M+H]⁺。

化合物12的合成：

将化合物10(50mg，0.078mmol)溶于在3mL的THF中，在冰水浴冷却下，向该溶液中加入TBAF(0.16mmol，160μL)，将反应液室温搅拌12h，将反应液减压浓缩的粗品，经硅胶柱层析(石油醚/丙酮，80∶20，v/v)，得化合物12(25mg，得率81％)。

分子式：C₂₂H₂₂Cl₂N₂O

分子量：400

性状：白色无定型粉末

波谱数据：

¹H NMR(CDCl₃，500MHz)δ7.90(1H，d，J＝8.9Hz)，7.58-7.52(2H，m)，7.45-7.41(2H，m)，7.19(1H，d，J＝7.3Hz)，7.04(1H，d，J＝1.8Hz)，3.76(1H，m)，3.59(1H，m)，3.30(2H，m)，3.18(2H，m)，2.80(1H，m)，2.51(1H，m)，1.80(4H，m)，1.67(2H，m)；¹³C NMR(CDCl₃，125MHz)δ162.8，145.4，144.3，135.2，134.7，133.2，131.1，130.0，129.9，129.8，129.6，128.9，127.1，126.5，124.2，63.2，52.5(2C)，32.4，25.7(2C)，24.0；EIMS：m/z(％)400([M]⁺，55)，366(100)，251(63)，214(70)，84(87)。

化合物13的合成：

将化合物11(32mg，0.046mmol)溶于在3mL的THF中，在冰水浴冷却下，向该溶液中加入TBAF(0.093mmol，93μL)，将反应液室温搅拌12h，将反应液减压浓缩的粗品，经硅胶柱层析(石油醚/丙酮，50∶50，v/v)，得化合物13(10mg，得率50％)。

分子式：C₂₃H₁₇Cl₂N₅O

分子量：449

性状：白色无定型粉末

波谱数据：

¹H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.50(1H，J＝7.5Hz)，7.40-7.23(7H，m)，7.13(1H，d，J＝6.8Hz)，6.75(2H，m)，3.29(2H，m)，2.69-2.64(1H，m)，2.52-2.48(1H，m)；¹³C NMR(CDCl₃，100MHz)δ163.9，146.7，135.4，134.1，132.7，130.7，130.3，130.2，130.0，128.3，128.2，127.72，127.67，127.4，127.3，127.2，125.4，121.2，116.9，115.9，115.7，61.2，31.4；ESI：m/z 450[M+H]⁺。

实施例2：

按实施例1的方法先制得2-(1H)喹啉衍生物1-13，分别用少量的DMSO溶解后，按常规加注射用水，精滤，灌封灭菌制成注射液。

实施例3：

按实施例1的方法先制得2-(1H)喹啉衍生物1-13，分别用少量的DMSO溶解后，将其溶于无菌注射用水中，搅拌使溶解，用无菌抽滤漏斗过滤，再无菌精滤，分装于安瓿中，低温冷冻干燥后无菌熔封得粉针剂。

实施例4：

将所分离得到的2-(1H)喹啉衍生物1-13，分别按其与赋形剂重量比为9∶1的比例加入赋形剂，制成粉剂。

实施例5：

按实施例1的方法先制得2-(1H)喹啉衍生物1-13，分别按其与赋形剂重量比为5∶1的比例加入赋形剂，制粒压片。

实施例6：

按实施例1的方法先制得2-(1H)喹啉衍生物1-13，分别按常规口服液制法制成口服液。

实施例7：

按实施例1的方法先制得2-(1H)喹啉衍生物1-13，分别按其与赋形剂重量比为5∶1的比例加入赋形剂，制成胶囊。

实施例8：

按实施例1的方法先制得2-(1H)喹啉衍生物1-13，分别按其与赋形剂重量比为3∶1的比例加入赋形剂，制成胶囊。

Claims (7)

1.结构式(I)所示的喹啉衍生物1-13，

其中化合物1-13中基团R¹、R²分别为：

2.药物组合物，其中含有治疗有效量的权利要求1所述式(I)喹啉衍生物1-13任一种和药学上可接受的载体。

3.如权利要求2所述的药物组合物，为治疗乙型肝炎的药物组合物。

4.权利要求1所述式(I)喹啉衍生物1-13任一种在制备治疗乙型肝炎的药物中的应用。

5.权利要求2所述药物组合物在制备治疗乙型肝炎的药物中的应用。

6.制备权利要求1所述式(I)喹啉衍生物1-13的方法，以化合物A即3-(2-羟基乙基)-4-(2-氯苯基)-6-氯-1H-喹啉-2-酮为反应原料，合成喹啉衍生物1-13。

7.制备权利要求2所述的药物组合物的方法，以化合物A即3-(2-羟基乙基)-4-(2-氯苯基)-6-氯-1H-喹啉-2-酮为反应原料，合成喹啉衍生物1-13，分别加入可药用载体。