CN102037005A - 改善治疗功效的新光学纯化合物 - Google Patents

改善治疗功效的新光学纯化合物 Download PDF

Info

Publication number
CN102037005A
CN102037005A CN2008801293106A CN200880129310A CN102037005A CN 102037005 A CN102037005 A CN 102037005A CN 2008801293106 A CN2008801293106 A CN 2008801293106A CN 200880129310 A CN200880129310 A CN 200880129310A CN 102037005 A CN102037005 A CN 102037005A
Authority
CN
China
Prior art keywords
lys
aib
gly
pro
peptide
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN2008801293106A
Other languages
English (en)
Other versions
CN102037005B (zh
Inventor
J·P·布里昂
G·吉沙尔德
J·库尔蒂
R·齐默
C·德万
A·朗
H·张
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Elro Pharma
Centre National de la Recherche Scientifique CNRS
Original Assignee
Centre National de la Recherche Scientifique CNRS
ImmuPharma France SA
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Centre National de la Recherche Scientifique CNRS, ImmuPharma France SA filed Critical Centre National de la Recherche Scientifique CNRS
Publication of CN102037005A publication Critical patent/CN102037005A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN102037005B publication Critical patent/CN102037005B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06086—Dipeptides with the first amino acid being basic
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A61P27/06—Antiglaucoma agents or miotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
    • C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Psychology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)

Abstract

本发明涉及相对于先前已知复杂的立体异构体混合物而言显示改善抗癌活性的新光学纯化合物。这样的化合物是通式(I)：其中每个X独立代表任意氨基酸；n是0或1；m是0至3之间的整数；k是至少为3的整数；Psi是替代Lys和Pro之间的肽酰胺键的通式的还原键；并且其中所述通式(I)化合物的假肽单元中的Lys残基或者全部是L构型或者全部是D构型。还提供了制备这样化合物的方法和其治疗用途。合成方法包括用硼氢化物选择性还原二肽中间体中Lys和Pro之间的肽键。所述治疗用途可以对抗癌症、炎症和用于创伤愈合。

Description

改善治疗功效的新光学纯化合物
技术领域
本发明涉及与从前已知的立体异构体的复杂混合物相比显示改善抗癌活性的新光学纯化合物。这样的化合物为通式(I)：
[(X)n-Lys-Ψ-Pro-Arg-(X)m]k-支持物(I)
其中每个X独立代表任意氨基酸；n为0或1；m为0至3之间的整数；k为至少为3的整数；Ψ为替换Lys和Pro之间的肽酰胺键的通式(-CH2N-)的还原键；并且其中所述通式(I)的化合物的[(X)n-Lys-Ψ-Pro-Arg-(X)m]假肽(pseudopeptide)单元中的Lys残基或者全部是L构型或者全部是D构型。还提供了用于制备这样的化合物的方法和其治疗用途。
背景技术
细胞分裂或有丝分裂是允许细胞增殖从而修复或再生组织并替换死细胞的过程。在癌细胞中，这一过程的调节是有缺陷的，这就是为什么这些细胞混乱地分裂并产生肿瘤。因此，一种有效的防止癌症发展的治疗途径由使用具有抗有丝分裂性质的分子阻断癌细胞分裂组成。
另外，每种肿瘤需要营养和氧以便生长。这些元素由瘤内血管提供，这源于被称为血管发生的机制。事实上，如果没有这些血管，肿瘤细胞将进行细胞坏死过程，并且肿瘤生长变慢，然后停止。因此另一个抗癌治疗途径的例子由通过阻断控制该机制的分子而阻断血管发生过程组成。
因此非常有用的将是拥有可用的能够抑制肿瘤中肿瘤细胞增殖和血管发生过程的新的抗癌分子。
另外，大多数现在的抗癌剂对肿瘤细胞不是真正特异性的，因此也靶向健康的细胞，因此产生许多副作用并且有时产生严重的副作用。
另外与常规抗癌药物例如紫杉醇(paclitaxel)相关的另一个问题是这些分子通常是高疏水的，这使得需要开发复杂的和昂贵的药物制剂从而获得可接受的体内生物利用度。在使用核酸治疗的情况下体内生物利用度的问题更严重，因为其以有效的和特异性的方式达到其靶向细胞非常难。
因此非常有用的是拥有呈现下列特征的新抗癌分子：
-其对肿瘤增殖和血管发生的双重抑制作用引起更加改善的效力以至其可以无需使用常规的化学疗法或放射疗法而单独有效，因此极大地限制了与这些类型治疗相关的副作用，
-相当广泛的抗血管生成因子的活性谱从而防止对治疗的抗性，
-由于针对肿瘤细胞的更大特异性引起的非常小的副作用，
-容易适用于工业规模的合成过程，
-特别是由于更好的生物利用度和/或更长的体内半衰期，特别是由于对肿瘤细胞直接特异性所引起的更简易的使用，在水性介质中具有好的可溶性以及对体内分解过程具有增强的抗性。
WO2007/125210(1)(其全部内容通过参考并入本文)公开了对于癌症治疗特别有用的有前途的化合物。
这些化合物显示了几个有利的性质：
-由于对肿瘤增殖和血管发生的双重作用，其能够单独具有的高抗肿瘤效力，所述效力使得可以无需与常规化学治疗分子如紫杉醇(taxol)结合而设想单一治疗；
-其对特定类型的癌症不具有特异性而是具有对抗肿瘤细胞和激活的内皮细胞的广谱活性；
-由于相对于健康细胞的对肿瘤细胞和激活的内皮细胞的特异性，其具有非常小的体内副作用；
-其具有可以容易适用于工业规模的合成过程；以及
-其具有充分的体内生物利用度从而不需要开发特殊的药物形式。
因此这些化合物非常令人感兴趣，因为它们结合了许多对于研发新的、简易的、廉价的和有效的抗癌治疗所必须的优点。还发现它们是研发新的、简易的、廉价的和有效的抗炎剂的良好候选。
但是，总是需要改善现有化合物的抗肿瘤效力。因此非常有用的是发现具有较高效力的最佳化化合物但是保留这些有前途的化合物的所有其他优点。
WO2007/125210的化合物是由支持物组成的新假肽化合物，所述支持物上偶联了至少三个假肽单元。这样的化合物结合表面核仁素并显示抗癌(抗血管生成和抗有丝分裂)和抗炎活性。
据信这些化合物通过至少3个移植在支持物上的假肽单元与表面核仁素的RGG结构域相互作用而起作用。
优选的化合物具有肽支持物，特别是具有螺旋结构的线性肽支持物，在所述支持物上偶联了至少3个[Lys-Ψ-Pro-Arg](也称为KΨPR)单元。
在这一文献中，使用了常规方法制备KΨPR单元，如US20040002457A1(2)和Nisole等人(3)中描述的。在这一常规方法中含有第二个胺的脯氨酸衍生物与Boc-Lys(Boc)-CHO(醛)反应形成具有Lys残基上部分缺失手性的烯胺(5-10％)。因此，在这一常规反应的结尾，反应混合物含有90-95％L-Lys-Ψ-Pro-Arg单元和5-10％D-Lys-Ψ-Pro-Arg单元。
因此，当该混合物用于偶联至支持物肽的Lys残基的侧链的ε氨基上时，获得了立体异构体混合物。因为每个Lys-Ψ-Pro-Arg单元可以具有L或D赖氨酸，获得的立体异构体数目随着KΨPR单元的数目呈指数型增长。对于优选的具有5或6个单元的化合物，可获得的立体异构体的数目分别是32和64。
相似地，通过在存在氢化试剂时将Boc-Lys(Boc)-CHO与移植至固体支持物上的脯氨酸残基的次级胺反应直接在树脂上进行还原胺化步骤还引起立体异构体的混合物的产生。
使用这一常规方法，获得的假肽化合物不是光学纯的，相反由非常复杂的立体异构体的混合物组成，由于混合物的复杂性其不能被分离或纯化。事实上，混合物由太大数目的非常接近的立体异构体组成，因此不能通过常见的纯化技术分离出每种立体异构体。因此目的化合物的单个立体异构体不能使用制备这些化合物的常规方法从获得的复杂混合物中纯化。
发明人使用了用于制备KΨP二肽的新方法，其允许获得光学纯的L-Lys-Ψ-Pro或D-Lys-Ψ-Pro化合物。该方法已经从Cushman等人(4)的文章中做出了改变，所述文章描述了当使用常规方法制备Phe-Ψ-Pro二肽时的差相异构效应和用于制备纯的L-Phe-Ψ-Pro二肽的新方法。
然后发明人制备了由线性支持肽组成的光学纯化合物，在所述支持肽上偶联了至少3个L-Lys-Ψ-Pro-Arg或D-Lys-Ψ-Pro-Arg单元。在这样的光学纯化合物中，各种Lys-Ψ-Pro-Arg单元的赖氨酸残基或者全部是L构型或者全部是D构型。
令人惊讶的是，他们发现相对于含有相同化合物的立体异构体混合物的组合物，这些光学纯化合物显示显著更高的抗癌效力。
发明内容
因此本发明涉及通式(I)的化合物：
[(X)n-Lys-Ψ-Pro-Arg-(X)m]k-支持物(I)
其中
-每个X独立代表任意氨基酸；
-n是0或1；
-m是0至3之间的整数；
-k是至少为3的整数；
-Ψ是替代Lys和Pro之间的肽酰胺键的通式(-CH2N-)的还原键；并且
其中所述通式(I)化合物的[(X)n-Lys-Ψ-Pro-Arg-(X)m]假肽单元中的Lys残基或者全部是L构型或者全部是D构型。
在本发明的上下文中，术语“支持物”是指任何药学上可接受的分子，换句话说没有内源毒性，在其上可以移植至少3个通式(I)的假肽单元。因此可接受的支持物要有足够的大小以允许在其上移植至少3个通式(I)的假肽单元，优选3至8个通式(I)的假肽单元。还优选这样的可接受支持物足够大以便允许至少3个，优选3至8个通式(I)的假肽单元一起在一个或多个核仁素分子的RGG结构域中相互作用。另外，所述支持物必须没有免疫原性。
这样的支持物可以特别地选自：线性肽、线性的或环状的类肽(N取代的甘氨酸寡聚物)、分子折叠体(foldamer)(强烈倾向于在溶液中采取紧密的、清晰的和可预测构象的寡聚物或聚合物)、线性聚合物或球形树状聚合物(由根据树样过程在多功能中心核周围结合的聚合物/寡聚物组成的大分子)、糖或纳米颗粒。
优选地，所述支持物是线性肽。线性肽的使用实际上允许容易地合成支持物。
在本发明中作为支持物起作用的线性肽可以有利地含有大于25％比例的赖氨酸。更精确地，当线性肽被用作本发明中的支持物时，优选将假肽单元移植至赖氨酸的ε位置。当线性肽被用作本发明的支持物时，因此优选包括至少与待移植的假肽单元一样多数目的赖氨酸。因此，在根据本发明的化合物的优选的具体实施方案中，支持物是含有至少k赖氨酸残基的线性肽。
在本发明的上下文中，用于假肽单元的术语“移植的”意思是通过共价键(直接或通过假肽和支持物之间的间隔子化合物的中介)的方法结合至支持物。因此，在一个特定的具体实施方案中，假肽单元无需它们和支持物之间的间隔子化合物直接移植至支持物上。在另一个具体实施方案中，假肽单元通过间隔子的中介移植至支持物上。可接受的间隔子的例子包括乙二醇、哌嗪型之类的化合物或氨基己酸或β-丙氨酸型之类的氨基酸。
在支持物是线性或环状肽和假肽单元被直接移植至肽上的情况下，肽和假肽单元之间的键合优选在肽支持物的赖氨酸残基上进行，在α或ε位置的氨基上，优选在赖氨酸ε位置(在侧链上)的氨基上。因此，将假肽单元直接移植至肽支持物上优选通过假肽单元的C末端位置的氨基酸的酸性基团COOH和赖氨酸残基的氨基(优选赖氨酸的ε位置(在侧链上)的氨基)之间的酰胺键的方式有利地进行。
合适的线性支持肽包括具有选自下列序列的那些肽：Lys-Lys-Lys-Gly-Pro-Lys-Glu-Lys-Gly-Cys(SEQ ID NO：1)、Lys-Lys-Lys-Lys-Gly-Cys(SEQ ID NO：2)、Lys-Lys-Lys-Lys-Gly-Pro-Lys-Lys-Lys-Lys-Gly-Ala(SEQ IDNO：3)、Lys-Lys-Gly-Pro-Lys-Glu-Lys-AhxCONH2(SEQ ID NO：4)和Ac-Lys-Ala-Lys-Pro-Gly-Lys-Ala-Lys-Pro-Gly-Lys-Ala-Lys-Pro-Gly-CONH2(SEQ IDNO：5)，其中″AhxCONH2″代表己氨基酸且CONH2代表酸性基团被酰胺基团替代的事实，AhxCONH2代表(2S)-2-氨基己酰胺。
在线性肽中，已知一些采取螺旋结构。在优选的具体实施方案中，线性支持肽显示这样的螺旋结构。事实上，由于螺旋结构，KΨPR假肽单元非常规则地出现，这对于结合至表面核仁素的重复RGG结构域上是有用的。
具有螺旋结构的这样的线性支持肽包括含有至少3个，优选3至20之间，优选3至15之间，更优选3至12之间，还更优选3至10之间，甚至更优选3至8之间，最优选5或6个序列Aib-Lys-Aib-Gly(SEQ ID NO：6)或Lys-Aib-Gly(SEQ IDNO：7)的单元的肽，其中Aib是α-氨基异丁酸。
在有利的具体实施方案中，所述螺旋线性支持肽由选择下列的序列组成：Aib-Lys-Aib-Gly-Aib-Lys-Aib-Gly-Aib-Lys-Aib-Gly-Aib-Lys-Aib-Gly-Aib-Lys-Aib-Gly(SEQ ID NO：8)、Lys-Aib-Gly-Lys-Aib-Gly-Lys-Aib-Gly-Lys-Aib-Gly-Lys-Aib-Gly(SEQ ID NO：9)、Ac-Aib-Lys-Aib-Gly-Aib-Lys-Aib-Gly-Aib-Lys-Aib-Gly-Aib-Lys-Aib-Gly-Aib-Lys-Aib-Gly-CONH2(SEQ ID NO：10)、Ac-Lys-Aib-Gly-Lys-Aib-Gly-Lys-Aib-Gly-Lys-Aib-Gly-Lys-Aib-Gly-CONH2(SEQ ID NO：11)、Ac-Aib-Lys-Aib-Gly-Aib-Lys-Aib-Gly-Aib-Lys-Aib-Gly-Aib-Lys-Aib-Gly-Aib-Lys-Aib-Gly-Aib-Lys-Aib-Gly-CONH2(SEQ ID NO：12)或Ac-Lys-Aib-Gly-Lys-Aib-Gly-Lys-Aib-Gly-Lys-Aib-Gly-Lys-Aib-Gly-Lys-Aib-Gly-CONH2(SEQ ID NO：13)，其中“Ac”代表乙酰基，且任意“氨基酸-CONH2”代表其中COOH酸功能团的OH基团被NH2基团替换的所述氨基酸，因此产生酰胺CONH2功能团而不是酸COOH功能团。
在本发明的化合物中，对于结合至核仁素的RGG结构域必需的假肽单元是通式(II)的亚单元：
Lys-Ψ-Pro-Arg(II)
尽管如此，在一端或另一端存在由几个如上所述氨基酸组成的该必需亚单元并不阻碍结合至核仁素。这就是为什么通式(II)必需亚单元可以在一端和/或另一端包括在通式(I)中分别以(X)n和(X)m代表的0至3个任意氨基酸，其中n等于0或1，m是0至3之间的整数。有利地，存在于通式(II)的必需亚单元的一端和/或另一端的氨基酸的数目少，换句话说，n有利地是0，m有利地是0至2之间的整数，有利地为0或1，有利地为0。因此在有利的具体实施方案中，n和m等于0。
在本发明的上下文中，“任意氨基酸”的术语意思是任意天然或合成的氨基酸，其可能通过一个或多个取代物的存在被修饰。更精确地术语氨基酸意思是具有下列一般结构的α胺化的氨基酸：
Figure BPA00001256655900051
其中R代表氨基酸的侧链。在本发明的上下文中，因此R代表天然或非天然氨基酸的侧链。术语“天然氨基酸”的意思是在活体的体内天然发现的任意氨基酸。因此天然氨基酸包括在翻译过程中整合进入蛋白质的mRNA编码的氨基酸以及是代谢过程产物或副产物的在体内天然发现的其他氨基酸，如例如通过精氨酸酶的尿素产生过程自L-精氨酸产生的鸟氨酸。在本发明中，使用的氨基酸因此可以是天然的或不是天然的。即天然氨基酸通常具有L构型但是还根据本发明，氨基酸可以具有L或D构型。另外，R当然不限于天然氨基酸的侧链，而可以自由选择。
在根据本发明的化合物中，至少3个假肽单元被移植至支持物上。事实上，用WO2007/125210中非光学纯化合物获得的结果显示结合至核仁素RGG结构域对于这些化合物非凡的抗肿瘤效应的重要性。结合至核仁素的RGG结构域是通过多价呈现几个假肽单元如整合进入通式(I)的那些单元的方式获得的。特别地，显示3个单元以下(k＜3)，结合至核仁素的效率较低，抗肿瘤效率可能较小。因此根据本发明的化合物包括至少3个移植至支持物上的假肽单元，k是大于或等于3的整数。根据本发明的化合物有利地代表3-20(3≤k≤20)，优选为3-15，优选3-12，更优选为3-10，还更优选为3-8个移植至支持物上的假肽单元。另外，发明人显示具有移植至支持物上的5或6个假肽单元时(k＝5)活性最佳，因为结合至核仁素的效率不随着假肽单元的较大数目而增加。有利地，在通式(I)的化合物中，因此k至少是3，优选在3至20之间，优选在3至15之间，优选在3至12之间，更优选在3至10之间，优选在3至8之间，更优选在4至7之间，在4至6之间，在4至5之间，或在5至6之间。甚至更有利地，在通式(I)的化合物中，k等于5或6。
在正常的肽单元中，氨基酸通过通式(-CONH-)的酰胺键连接。这样的键对蛋白酶的作用敏感。术语“蛋白酶”也称为“肽酶”或“蛋白水解酶”，意思是切割蛋白质中标准肽键的任何酶。这一过程称为蛋白水解切割。其包括使用水分子，这就是为什么蛋白酶被归类为水解酶。蛋白酶即包括被称为N-肽酶(进行蛋白质N末端切割)的蛋白酶。这些蛋白酶在没有经修饰的肽键的肽的体内稳定性中特别不方便，这是为什么通式(I)化合物的假肽单元在Lys和Pro之间包括通式(-CH2N-)的还原Ψ以便结合至核仁素所必需的通式Lys-Ψ-Pro-Arg(II)的亚单元对于这些N-肽酶的抗性显著增加。这使得显著增加通式(I)化合物在体内和体外的半衰期成为可能。因此在赖氨酸和脯氨酸残基之间存在还原的Ψ键是非常重要的。
虽然只有假肽单元中的Lys和Pro之间的Ψ键系统地出现在通式(I)的化合物中，还可能的是假肽单元的其它肽键可以被修饰从而获得比通式(-CONH-)的标准肽键更显著地对至少一个蛋白酶有抗性的键。这样的键包括通式(-CH2N-)的Y键(或者(-CH2NH-)，如果氨基酸显示伯氨基，与脯氨酸相反)，但是还包括其它经修饰的键如反向倒转(retro-inverso)键(-NHCO-)、亚甲基氧键(-CH2-O-)、硫亚甲基(-CH2-S-)、carba键(-CH2-CH2-)、亚甲基酮键(-CO-CH2-)、羟次乙基键(-CHOH-CH2-)、(-N-N-)键、E-烯烃键或(-CH＝CH-)键。另外经修饰的键的存在使得可以进一步增加通式(I)化合物对蛋白酶的抗性。尽管如此，与Lys和Pro之间存在第一Ψ键相关的增加已经非常显著，加入其它经修饰的键使得假肽单元的合成变复杂，因此有可能但不是优选的。
事实上，如在导论中提及的，WO2007/125210中使用的KΨPR单元的经典合成过程引起含有90-95％L-Lys-Ψ-Pro-Arg单元(即其中赖氨酸残基是通常的L构型的单元)和5-10％D-Lys-Ψ-Pro-Arg单元(即其中赖氨酸残基是D构型的单元)。因此，当这个混合物用于偶联至支持肽的Lys残基的侧链的ε氨基上时，获得了不可分离的立体异构体的复杂混合物。
相反，使用本申请中描述的新方法，发明人能够合成光学纯化合物，其中通式(I)化合物的[(X)n-Lys-Ψ-Pro-Arg-(X)m]假肽单元中的Lys残基或者全部是L构型或者全部是D构型。
如之前提及的，氨基酸被限定为具有下列一般结构的α胺化的氨基酸：
Figure BPA00001256655900071
其中R代表氨基酸的侧链。
除了甘氨酸以外，其侧链R是H，所有的氨基酸具有手性中心，因此可以作为两个不同的对应异构体存在，即L和D。“L”和“D”构型涉及左旋物(levogyre)和右旋物构型，不是氨基酸本身，而是对应的甘油醛。为了确定氨基酸是L或D构型，分析了相应甘油醛的绝对构型：如果其对应于甘油醛的L型，那么氨基酸被称为L-氨基酸，如果其对应于甘油醛的D构型，那么氨基酸被称为D氨基酸。对于特定的氨基酸，对应的甘油醛如下：
Figure BPA00001256655900072
特别地，对于赖氨酸残基，L和D构型可以如下表示：
Figure BPA00001256655900073
天然氨基酸是L构型的。特别地，除了[(X)n-Lys-Ψ-Pro-Arg-(X)m]假肽单元的赖氨酸残基，通式(I)化合物中的所有氨基酸都是L构型的(或者在支持物中或者在[(X)n-Lys-Ψ-Pro-Arg-(X)m]假肽单元中)。
因此，在通式(I)化合物中，[(X)n-Lys-Ψ-Pro-Arg-(X)m]假肽单元都是具有相同的下列通式：
在根据本发明的光学纯化合物的优选具体实施方案中，所述化合物选自：
Figure BPA00001256655900091
Figure BPA00001256655900101
Figure BPA00001256655900111
Figure BPA00001256655900121
其中通式(I)的[(X)n-Lys-Ψ-Pro-Arg-(X)m]单元中的Lys残基或者全部是L构型或者全部是D构型。
有利地，所述化合物选自：
Figure BPA00001256655900131
Figure BPA00001256655900141
Figure BPA00001256655900151
其中通式(I)的[(X)n-Lys-Ψ-Pro-Arg-(X)m]单元中的Lys残基或者全部是L构型或全部是D构型。
根据本发明的优选化合物是化合物
Figure BPA00001256655900152
其中通式(I)的[(X)n-Lys-Ψ-Pro-Arg-(X)m]单元中的Lys残基或者全部是L构型或者全部是D构型。还更优选的化合物是被称为通式的Nucant 6L的化合物：
Figure BPA00001256655900161
其中通式(I)的[(X)n-Lys-Ψ-Pro-Arg-(X)m]单元中的Lys残基都是L构型。
如在导论中解释的，特异性的非常规方法必须用于制备KΨP二肽从而能够制备根据本发明的光学纯化合物。
光学纯(L)Lys-Ψ-Pro或(D)Lys-Ψ-Pro二肽的合成包括用正常的肽酰胺键制备纯的(L)Lys-Pro或(D)Lys-Pro二肽，然后使用硼氢化物BH3还原氨基中的酰胺，如下列图解1A和1B中显示的和实施例1中更详细地解释的。
图解1A：光学纯(L)Lys-Ψ-Pro二肽的合成
Figure BPA00001256655900162
用于本申请的化学缩写包括：
Boc     丁氧基羰基
Bzl     苄基
DCHA    二环己基胺
DCM     二氯甲烷
DIEA    二异丙基乙胺，
DMF     二甲基酰胺
HOBt    羟基苯并三唑
IPE     二异丙基醚
NMR     核磁共振
t-Bu    叔丁基
TLC     薄层色谱
THF     四氢呋喃，
        1-乙基-3-[3-(N，N-二甲氨基)-丙基]碳化二亚胺-
WSCD    Z苄氧羰基。
一旦合成了光学纯的(L)Lys-Ψ-Pro或(D)Lys-Ψ-Pro二肽，其可以用于制备根据本发明的化合物，其中通式(I)的[(X)n-Lys-Ψ-Pro-Arg-(X)m]单元中的Lys残基或者全部是L构型或者全部是D构型。
特别地，当支持物是具有k赖氨酸残基的线性肽时，根据本发明的最终光学纯化合物可以使用固相肽合成然后是Fmoc/tBu方法制备。
因此本发明还涉及制备根据本发明的化合物的方法，其中支持物是具有k赖氨酸残基的线性肽，所述方法包括：
a)制备通式(II)或(III)的二肽
L-Lys-Pro(II)
D-Lys-Pro(III)
b)将所述通式(II)或(III)的二肽与硼氢化物BH3反应获得通式(IV)或(V)的二肽
L-Lys-Ψ-Pro(IV)
D-Lys-Ψ-Pro(V)
c)提供具有连接至固相的k赖氨酸残基的线性支持肽，
d)使用Fmoc/tBu方法通过固相合成相继将(X)m残基、Arg残基、Lys-Ψ-Pro二肽和(X)n残基偶联至支持肽上。
用于实现该方法的更特异性反应条件在实施例1.3中有描述。
当单元不包括(X)m或(X)n残基时，即当n和m为0，单元为KΨPR单元时，可以特别实现这样的方法。
所述的方法还可以特别地与上述优选的线性支持肽一起使用，所述肽包括下列序列的肽：SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：4，和具有螺旋结构的线性肽，包括含有3至8，优选5或6个序列SEQ ID NO：6或SEQ IDNO：7的单元的肽；特别是由选自下列序列组成的螺旋线性支持肽：SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：12或SEQ ID NO：13。
本发明进一步涉及含有任何上述根据本发明的化合物的药物，并涉及含有任何上述根据本发明的化合物的药物组合物和药学上可接受的载体。
“药学上可接受的”载体或赋形剂意思是不造成被给予患者任何不利效应的载体或赋形剂。这样的药学上可接受的载体和赋形剂在本领域中是熟知的。
药物组合物或药物还可以包括另外的化合物如稀释剂、赋形剂或甚至另一个可以与根据本发明的化合物联合使用的活性分子。
所述药物组合物的药物可以结合几个根据本发明的化合物。特别地，所述药物组合物的药物可以特别含有一个或多个上述的化合物：HB 19、Nucant 2、Nucant3、Nucant 4、Nucant 6、Nucant 7、Nucant 8和Nucant 9，其中所述通式(I)化合物的[(X)n-Lys-Ψ-Pro-Arg-(X)m]假肽单元中的Lys残基或者全部是L构型或者全部是D构型。
根据本发明的药物或药物组合物可以用于治疗任何疾病，其中根据本发明的化合物具有一些治疗效应。
特别地，根据本发明的药物或药物组合物可以用于治疗任何涉及细胞增殖和/或血管发生失调控的疾病。
术语“涉及细胞增殖和/或血管发生失调控的疾病”在本发明的上下文中的意思是任何影响一个或多个器官(其中观察到一个或多个异常细胞增殖现象)以及细胞组或组织和/或异常新血管形成的人类或动物疾病。
显然，这样的疾病包括所有类型的癌症，如腺瘤、肉瘤、癌瘤、淋巴瘤、及特别是下列癌症：卵巢癌、乳腺癌、胰腺癌、淋巴结癌、皮肤癌、血癌、肺癌、脑癌、肾癌、肝癌、鼻咽腔癌、甲状腺癌、中枢神经系统癌、前列腺癌、结肠癌、直肠癌、子宫癌、宫颈癌、头颈癌、睾丸癌或膀胱癌。其还包括皮肤的非癌症疾病如表皮或真皮囊肿、牛皮癣、血管瘤以及眼科疾病如衰老相关的黄斑变性(ARMD)、糖尿病性视网膜病变或新生血管性青光眼。神经变性疾病如多发性硬化、帕金森和阿尔茨海默病或自身免疫病如狼疮、牛皮癣、克隆氏病或类风湿性多关节炎以及与动脉粥样硬化相关的疾病。
在优选的具体实施方案中，因此根据本发明的药物或药物组合物可以用于治疗癌症。
事实上，根据本发明的化合物被证明具有非常高的治疗癌症的效力(见实施例2)。可以使用根据本发明的光学纯化合物治疗的癌症的例子包括所有上述的那些。
另外，之前描述的立体异构体混合物已经被描述为具有抗炎性质，根据本发明的化合物还可以用于治疗炎症性疾病。因此，在另一个优选的具体实施方案中，根据本发明的药物或药物组合物因此可以用于治疗炎症性疾病。
术语“炎症性疾病”意思是任何炎症性反应对于生物体有病理后果的疾病。特别地，本发明上下文中的炎症性疾病包括自身免疫病(如狼疮或类风湿性多关节炎)、败血病、败血症性休克、心脏炎症性疾病(心脏炎，特别是心内膜炎、心包炎、心肌炎，特别是那些感染起因的如那些由金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)造成的心肌炎)、移植排斥、外伤、关节的炎症性疾病(特别是不同形式的关节炎)、胃肠系统的炎症性疾病(特别是大肠炎、肠炎、胃炎、胃肠炎和肠慢性炎症性疾病如克隆氏病和出血性直肠结肠炎(HRC))、皮肤炎症性疾病(湿疹、过敏性接触性皮炎、牛皮癣、皮肤病)、呼吸系统的炎症性疾病特别是慢性阻塞性肺病(COPD)和过敏症。
在有利的具体实施方案中，炎症性疾病是自身免疫病，特别是狼疮或类风湿性关节炎。在另一个有利的具体实施方案中，炎症性疾病是败血症性休克。在另一个有利的具体实施方案中，炎症性疾病是心内膜炎，特别是感染起因的心内膜炎，如由金黄色葡萄球菌造成的心内膜炎。
根据本发明的药物或药物组合物还可以用于改善创伤愈合。
本发明设想的典型创伤是开放性和闭合性创伤，包括慢性创伤像慢性腿部溃疡、糖尿病溃疡、压疮、急性创伤(如擦伤、刀割)，所述创伤将从创伤愈合促进作用中获益，难以愈合的创伤如但不限于被感染的创伤、坏死创伤、(不同程度的)灼伤包括晒伤、手术后创伤、皮肤移植物和外伤性创伤。
特别地，它们可以用于改善皮肤创伤的瘢痕形成。
根据本发明的药物或药物组合物可以通过任何适当的给药途径给予，包括但不限于口服、皮下、静脉内、大脑内、鼻内、局部、经皮肤、腹膜内、肌肉内、肺内、经阴道、经直肠、眼内或任何其它可接受的方式。
本发明还涉及治疗涉及其有需要的受试者的细胞增殖和/或血管发生失调控的疾病的方法，其包括给予治疗有效量的上述根据本发明的化合物。
在优选的具体实施方案中，本发明涉及用于治疗其需要的受试者的癌症的方法，其包括给予治疗有效量的上述根据本发明的化合物。
在另一个优选的具体实施方案中，本发明进一步涉及用于治疗任何其需要的受试者的所述炎症性疾病的方法，其包括给予治疗有效量的上述根据本发明的化合物。
本发明还针对用于改善有需要的受试者的创伤愈合的方法，其包括给予治疗有效量的上述根据本发明的化合物。
本发明进一步通过下列图和实验实施例说明。提供这些数据只是为了说明的目的，不应该被认为是限制本发明的范围。
附图说明
图1：NucAnts 6，6D和6L对3H-胸腺嘧啶脱氧核苷掺入NIH 3T3细胞的活性。将NIH 3T3细胞(2x105)植于48多孔板中并孵育24小时以便粘附。在有或无肽的情况下用5％FBS刺激细胞18小时之前将其用血清饥饿处理24小时。然后，将1μCi的[3H]-胸腺嘧啶脱氧核苷加入每个孔中，并延长孵育6小时。用PBS洗涤孔，用冰冷的10％三氯乙酸沉淀DNA。然后在0,2N NaOH中裂解细胞，掺入的[3H]-胸腺嘧啶脱氧核苷用闪烁计数器测定。所有的实验以三次重复进行。条，±sem(n＝3)，*p＜0.05，**p＜0,01，***p＜0.001，与对照相比统计学上显著(Student t检验)。
图2：NucAnts 6，6D和6L对MDA-MB 435增殖的活性。将2x104细胞植于24多孔板中并孵育24小时以便粘附。通过除去培养基每天处理细胞，处理3天。在第五天，用结晶紫染色将细胞计数。那么，用PBS将其洗涤两次，并用无水乙醇固定5分钟。然后，用0,2％结晶紫、2％乙醇溶液将细胞染色15分钟，用蒸馏水洗涤两次并在室温干燥45分钟。然后用500μl 1％的SDS溶解结晶紫。使用微量板读出器用100μl每个样品评估595nm处的吸光度。
图3：NucAnts 6，6D和6L对T29增殖的活性。将T29细胞铺在24孔板中(每孔有5000个细胞)。用肽处理细胞一次并保持在37℃5％CO2中3天。然后用台盼蓝将细胞染色并在Mallassez室(cell)中计数。条，±sem(n＝3)，*p＜0.05，**p＜0,01，***p＜0.001，与对照相比统计学上显著(Student t检验)。
具体实施方式
实施例1.具有所有通式(I)中Lys残基为L构型的Nucant 6化合物的合成或者具有所有通式(I)中Lys残基为D构型的Nucant 6化合物的合成
1.1化合物Nucant 6、Nucant 6L和Nucant 6D的定义
Nucant 6代表具有序列Ac-Lys-Aib-Gly-Lys-Aib-Gly-Lys-Aib-Gly-Lys-Aib-Gly-Lys-Aib-Gly-Lys-Aib-Gly-CONH2(SEQ ID NO：13)的线性支持肽的假肽，在其上6个KΨPR单元偶联至线性支持肽的6个赖氨酸残基的侧链上。其显示下列通式：
Figure BPA00001256655900201
其中每个KΨPR单元的赖氨酸残基可以是L构型或者D构型。
如在概述中解释的，制备KΨP单元的通常的方法(基于还原性胺化Boc-Lys(Boc)-CHO(醛)和脯氨酸(带有氨基))引起赖氨酸残基的差相异构作用。因此得到的KΨP单元是不可分离的(L)KΨP和(D)KΨP二肽单元的混合物。使用这样的混合物将这些KΨP单元偶联至支持物上将产生其中各种KΨP单元每个可以是L构型或D构型的假肽。可以获得假肽的非对应异构体的混合物。
下面，Nucant 6对应于这样的非对应异构体的混合物。
相反，Nucant 6L是指具有上面通式的假肽，其中KΨP单元中的所有赖氨酸残基是L构型，而Nucant 6D是指具有上面通式的假肽，其中KΨP单元中的所有赖氨酸残基是D构型。
1.2.K-Ψ-P单元的非对应异构体的混合物的合成
使用常规方法(见参考文献2和3)，首先制备了通式Ac-Lys(Mtt)-Aib-Gly-Lys(Mtt)-Aib-Gly-Lys(Mtt)-Aib-Gly-Lys(Mtt)-Aib-Gly-Lys(Mtt)-Aib-Gly-Lys(Mtt)-Aib-Gly-Rink酰胺MBHA的Mtt保护的线性支持肽的树脂。
然后用二氯甲烷(DMC)-三异丙基硅烷-三氯乙酸(TFA)(体积为93∶5∶2)混合物分开Mtt保护基团(5次，每次5分钟)，并用DCM和DMF洗涤树脂数次。如上所述将Fmoc-Lys(Mtt)-OH偶联和Mtt去保护再重复三次。然后用25％DMF中的哌啶去除Nα-Fmoc保护基团。随后用15倍过量的Fmoc-Arg(Pbf)-OH和Fmoc-Pro-OH酰化游离胺功能团。
然后Lys和Pro之间还原的酰胺键通过用含有1％乙酸的二甲基酰胺中的脯氨酸还原胺化N保护的氨基醛Boc-Lys(Boc)-CHO(2.5倍过量，两次)1小时而在树脂上形成10)。
1.3.纯(L)K-Ψ-P单元的合成
(L)K-Ψ-P单元(其中所有的赖氨酸残基是L构型)的合成如图解1A中所述进行(见第17页)。
更确切地，使用了下列规程：
步骤1：Boc-L-Lys(Boc)-Pro-OBzl(化合物1)的合成
将Boc-L-Lys(Boc)-OH.DCHA(75g，0.142摩尔)溶于AcOEt(375ml)和KHSO4(1M)(375ml)的混合物。有机相用KHSO4(1M)(200ml)，水(200ml)和NaCl sat.(100ml)洗涤。获得的产物在Na2SO4上干燥并浓缩至干。
将残余物溶于DMF(200ml)中。加入HCl.H-Pro-OBzl(32.6g，0.135摩尔)，HOBt.H2O(23.9g，0.156摩尔)和DIEA(23.2ml，0.135摩尔)。将介质冷却至0-5℃。部分地引入WSCD(32.7g，0.171摩尔)，在室温下3小时内搅拌反应混合物。
将混合物倒入NaHCO3(5％)(2L)。用AcOEt(750ml)提取产物。用3xNaHCO3(5％)(300mL)，2xK2CO3(5％)(300ml)，2xKHSO4(1M)(300ml)和NaCl sat.(200ml)洗涤有机相。获得的产物在Na2SO4上干燥并浓缩至干。用环己烷(200ml)将残余物共蒸发两次。获得78g油。产率＞100％。HPLC：96.9％.MS ES+533.9(M+1)。
步骤2Boc-L-Lys(Boc)-Ψ(CH2-N)-Pro-OBzl(化合物2)的合成
将Boc-L-Lys(Boc)-Pro-OBzl(33.4g，62.6毫摩尔)溶于无水THF(50ml)中并冷却至C。在30分钟内逐滴加入BH3/THF(1M)(125ml，125毫摩尔)溶液，同时将温度保持在0-4℃。将其在0-4℃孵育30分钟然后在20℃孵育21小时。HPLC对照(40-100％)：39.3％
将介质冷却至0℃。加入KHSO4(1M)(300ml)的溶液，同时保持温度＜10℃，然后将介质在20℃搅拌1小时。然后将其浓缩以除去THF。用K2CO3(83g/100ml水)溶液中和介质以到达pH 9.8。
用450ml DCM提取产物，在Na2SO4上干燥并浓缩至干(28.1g)。使用AcOEt/环己烷(4/6)作为洗脱剂在二氧化硅柱(800g)上纯化粗产物。收集合适的组分并浓缩至干。获得11.8g油(产率为37％)。
分析：苄甲醇的HPLC 68.2％和29.9％(s/s)。估计92％纯(p/p)。
步骤3：Boc-L-Lys(Boc)-Y(CH2-N)-Pro-OH(化合物3)的合成
将化合物2(11.8g，22.7毫摩尔，在92％p/p下估计)溶于乙醇(120ml)。
加入Pd/C(50％水)(600mg)。将真空氮气(void-nitrogen)除气两次，将混合物在氢气下氢化过夜。
TLC对照：AcOEt/环己烷(5/5)
催化剂通过过滤去除，并将滤液浓缩至干。加入IPE(100ml)。
过滤沉淀并用IPE(50ml)洗涤两次。获得9.2g固体(产率为94％)。HPLC分析87％。
将粗产物溶于DCM(50ml)中。将不溶物过滤，并将IPE加入滤液从而沉淀，从第一C获得4.5g产物：HPLC 99.3％；MS ES+430.1(M+1)。用环己烷和IPE沉淀剩余溶液。从该第二V获得2.4g(HPLC 75.4％)。总产率：70.7％。
结果
进行了两个氢化实验。结果总结在下列表1中：
由于化合物3在UV(210nm)中的低吸光度，化合物3可以以＞95％的HPLC纯度获得。
1.4.纯(D)K-Ψ-P单元的合成
使用与上面相同的规程制备Boc-D-Lys(Boc)-Ψ(CH2-N)-Pro-OH，除了使用Boc-D-Lys(Boc)-OH.DCHA而不是Boc-L-Lys(Boc)-OH.DCHA，如图解1B中显示(见第17页)。
从100g Boc-D-Lys(Boc)-OH.DCHA获得27.7g Boc-D-Lys(Boc)-Ψ(CH2-N)-Pro-OH。总产率为36％。由于化合物3在UV(210nm)中的低吸光度和难以沉淀(D)衍生物，我们没能获得＞95％HPLC纯度的产物。使用TLC和NMR 1H估计了产物的质量。用NMR 1H估计苄甲醇的量为2％。
1.5.两个(L)和(D)衍生物的差别
将两种化合物3(L和D)共同注射进入HPLC引起了两种非对应异构体的明显分离。
1.6.Nucant 6、Nucant 6L和Nucant 6L的合成
引言
使用KΨP(见§1.2)单元、纯(L)KΨP单元(见§1.3)或纯的(D)KΨP单元(见§1.4)的非对应异构体的混合物，使用固相合成并根据Fmoc/tBu方法合成了三种假肽。氨基酸偶联在Rink酰胺PS树脂上一步一步地进行。去除赖氨酸的Mtt基团后，将Arg和Lys-Ψ(CH2N-Pro)偶联至线性支持肽的6个赖氨酸的侧链上。在TFA/H2O中进行分开。用RP-HPLC纯化粗肽以得到纯肽。
Mtt保护的线性支持肽的制备：
Ac-Lys(Mtt)-Aib-Gly-Lys(Mtt)-Aib-Gly-Lys(Mtt)-Aib-Gly-Lys(Mtt)-Aib-Gly-Lys(Mtt)-Aib-Gly-Lys(Mtt)-Aib-Gly-Rink酰胺MBHA树脂。
线性肽被组装至1毫摩尔作为固体支持物的Rink酰胺MBHA树脂上(0.33mequi/g)。Fmoc-氨基酸的偶联和去保护在下面描述：
将2eq的Fmoc-氨基酸、2eq的偶联剂溶于DMF中(每毫摩尔氨基酸2-3mL)。将溶液倒入含有树脂的反应混合物中，并加入4-5eq DIEA。
表2.反应条件
Figure BPA00001256655900231
*用凯撒测试(Kaiser test)测定偶联的完成。
**用于洗涤和去保护的溶剂体积为10mL/克的肽-树脂。
为了组装使用了下列条件(表3)：
Mtt的去保护
线性肽
Ac-Lys-Aib-Gly-Lys-Aib-Gly-Lys-Aib-Gly-Lys-Aib-Gly-Lys-Aib-Gly-Lys-Aib-Gly-Rink酰胺MBHA树脂
使用20％的六氟异丙醇/DCM 2小时去除6个Mtt基团(10ml/g树脂)。
Nucant 6L的最终合成
将氨基酸偶联至侧链
表4.将氨基酸偶联至侧链的反应条件
  氨基酸 PyBOP/HOBt DIC/HOBt DIEA
  Fmoc-Arg(Pbf)-OH   12eq   12eq/12eq   --   60eq
  Boc-Lys(Boc)-Ψ(CH2N-Pro)-OH   9eq   --   9eq/9eq   --
使用2eq氨基酸、HATU和DIEA将Fmoc-Arg(Pbf)-OH和Boc-Lys(Boc)-Ψ(CH2N-Pro)-OH偶联至赖氨酸的侧链上。
分开
使用TFA/H2O(95/5)进行被保护肽从树脂上的分开并产生4.67g粗产物。
纯化
使用作为洗脱剂的含有0.1％TFA的水/乙腈通过RP-HPLC纯粗产物(4.67g)。收集纯度＞95％的组分并冷冻干燥从而产生657mg作为TFA盐的粉末。纯化的产率：14.1％。使用Dowex 1x2以AcOH交换TFA盐从而提供524mg粉末(肽的净含量：76.7％)。
Nucant 6和Nucant 6D的最终合成
使用相似的过程进行Nucant 6和Nucant 6D的最终合成。
对于Nucant 6D，从1毫摩尔树脂中获得293mg的AcOH盐(肽的净含量：77.2％)。总产率为5.9％。
实施例2.化合物Nucant 6、Nucant 6L和Nucant 6D对肿瘤细胞体外生长的影响
2.1.材料和方法
使用的化合物
使用了实施例1中定义为Nucant 6、Nucant 6L和Nucant 6D的化合物。
对NIH 3T3细胞体外增殖的抑制活性的测试
将NIH 3T3细胞(2x105)植于48多孔板中并孵育24小时以便粘附。在有或无肽时用5％FBS刺激细胞18小时前，将细胞血清饥饿24小时。然后，在每孔中加入1μCi[3H]-胸腺嘧啶脱氧核苷并延长孵育6小时。用PBS洗涤孔，用冰冷的10％三氯乙酸沉淀DNA。然后将细胞裂解在0,2N NaOH中，在闪烁计数器中测定掺入的[3H]-胸腺嘧啶脱氧核苷。
对MDA-MB 435细胞体外增殖的抑制活性的测试
将MDA-MB 435细胞(2x104)植于24多孔板中并孵育24小时以便粘附。通过培养基的去除每天处理细胞，处理3天。在第五天，通过结晶紫染色计数细胞。那么用PBS将其洗涤两次并用无水乙醇固定5分钟。然后，用0,2％的结晶紫、2％乙醇溶液将细胞染色15分钟，用蒸馏水洗涤两次并在室温干燥45分钟。然后用500μl 1％SDS溶解结晶紫。使用微量板读出器用100μl的每个样品评估595nm处的吸光度。
对T29细胞体外增殖的抑制活性的测试
将T29细胞铺在24孔板中(每孔5000个细胞)。用肽处理细胞一次并保持在37℃，5％CO2中3天。然后，用台盼蓝将细胞染色并在Mallassez室中计数。
2.2.结果
已经测试了各种Nucant 6化合物(使用常规合成方法获得的复杂的不确定的和不可分离的混合物，L，D)对NIH 3T3(图1)、MDA-MB 435(图2)或T29细胞(图3)细胞增殖的抑制活性。
对于NIH 3T3(图1)、MDA-MB 435(图2)和T29(图3)细胞，结果显示相对于化合物Nucant 6，化合物Nucant 6L和Nucant 6D对于细胞增殖具有增加的抑制活性(使用常规合成方法获得的复杂的不确定的和不可分离的混合物)。
这些结果明确证明相对于非光学纯的Nucant 6化合物，具有[(X)n-Lys-Ψ-Pro-Arg-(X)m]假肽单元中的赖氨酸残基或者全部是L构型或者全部是D构型的光学纯化合物具有增加的抗增殖活性。
2.3.结论
上面的结果明确显示相对于由使用常规合成方法系统地获得的复杂的不确定的和不可分离的立体异构体混合物组成的Nucant 6化合物，根据本发明的化合物Nucant 6L或D具有增加的抗增殖能力。
参考文献
1.WO2007/125210
2.US20040002457A1
3.Nisole S.等人.″The HB-19 pseudopeptide 5[Kpsi(CH2N)PR]-TASP inhibitsattachment of T lymophocyte-and macrophage-tropic HIV to permissive cells.″AIDSRes Hum Retroviruses.2000 Feb 10；16(3)：237-49.
4.M.Cushman，Y-i.Oh，T.D.Copeland，S.W.Snyder，and Stephen Oroszlan，″Development of Methodology for the Synthesis of Stereochemically PurePheΨ[CH2N]Pro Linkages in HIV Protease Inhibitors，″J.Org.Chem.56，4161(1991).
Figure IPA00001256655300011
Figure IPA00001256655300031
Figure IPA00001256655300041
Figure IPA00001256655300051
Figure IPA00001256655300061
Figure IPA00001256655300091
Figure IPA00001256655300101
Figure IPA00001256655300111
Figure IPA00001256655300121
Figure IPA00001256655300151
Figure IPA00001256655300161
Figure IPA00001256655300171
Figure IPA00001256655300181

Claims (14)

1.一种通式(I)的化合物：
[(X)n-Lys-Ψ-Pro-Arg-(X)m]k-支持物(I)
其中
-每个X独立代表任意氨基酸；
-n是0或1；
-m是0至3之间的整数；
-k是至少为3的整数；
-Ψ是替换Lys和Pro之间的肽酰胺键的通式(-CH2N-)的还原键；并且
其中所述通式(I)化合物的[(X)n-Lys-Ψ-Pro-Arg-(X)m]假肽单元中的赖氨酸残基或者全部是L构型或者全部是D构型。
2.根据权利要求1所述的化合物，其中n是0且m是0。
3.根据权利要求1或2所述的化合物，其中k在3至8之间。
4.根据权利要求1-3任一项所述的化合物，其中k是5或6。
5.根据权利要求1-4任一项所述的化合物，其中所述支持物是含有至少k Lys残基的线性肽。
6.根据权利要求5所述的化合物，其中所述线性支持肽具有选自下列的序列：Lys-Lys-Lys-Gly-Pro-Lys-Glu-Lys-Gly-Cys(SEQ ID NO：1)、Lys-Lys-Lys-Lys-Gly-Cys(SEQ ID NO：2)、Lys-Lys-Lys-Lys-Gly-Pro-Lys-Lys-Lys-Lys-Gly-Ala(SEQ IDNO：3)、Lys-Lys-Gly-Pro-Lys-Glu-Lys-AhxCONH2(SEQ ID NO 4)和Ac-Lys-Ala-Lys-Pro-Gly-Lys-Ala-Lys-Pro-Gly-Lys-Ala-Lys-Pro-Gly-CONH2(SEQ ID NO：5)。
7.根据权利要求5所述的化合物，其中所述线性支持肽显示螺旋结构。
8.根据权利要求7所述的化合物，其中所述螺旋线性支持肽含有至少3个，优选3至8，优选5或6个序列Aib-Lys-Aib-Gly(SEQ ID NO：6)或Lys-Aib-Gly(SEQID NO：7)的单元。
9.根据权利要求8所述的化合物，其中所述螺旋线性支持肽由选自下列的序列组成：Aib-Lys-Aib-Gly-Aib-Lys-Aib-Gly-Aib-Lys-Aib-Gly-Aib-Lys-Aib-Gly-Aib-Lys-Aib-Gly(SEQ ID NO：8)、Lys-Aib-Gly-Lys-Aib-Gly-Lys-Aib-Gly-Lys-Aib-Gly-Lys-Aib-Gly(SEQ ID NO：9)、Ac-Aib-Lys-Aib-Gly-Aib-Lys-Aib-Gly-Aib-Lys-Aib-Gly-Aib-Lys-Aib-Gly-Aib-Lys-Aib-Gly-CONH2(SEQ ID NO：10)、Ac-Lys-Aib-Gly-Lys-Aib-Gly-Lys-Aib-Gly-Lys-Aib-Gly-Lys-Aib-Gly-CONH2(SEQ ID NO：11)、Ac-Aib-Lys-Aib-Gly-Aib-Lys-Aib-Gly-Aib-Lys-Aib-Gly-Aib-Lys-Aib-Gly-Aib-Lys-Aib-Gly-Aib-Lys-Aib-Gly-CONH2(SEQ ID NO：12)或Ac-Lys-Aib-Gly-Lys-Aib-Gly-Lys-Aib-Gly-Lys-Aib-Gly-Lys-Aib-Gly-Lys-Aib-Gly-CONH2(SEQ ID NO：13)。
10.根据权利要求1所述的化合物，其选自：
Figure FPA00001256655800041
Figure FPA00001256655800051
Figure FPA00001256655800061
其中通式(I)的[(X)n-Lys-Ψ-Pro-Arg-(X)m]单元中的赖氨酸残基或者全部是L构型或者全部是D构型。
11.一种制备根据权利要求5所述的化合物的方法，其包括：
e)制备通式(II)或(III)的二肽
L-Lys-Pro(II)
D-Lys-Pro(III)
f)将所述通式(II)或(III)的二肽与硼氢化物BH3反应以获得通式(IV)或(V)的二肽
L-Lys-Ψ-Pro(IV)
D-Lys-Ψ-Pro(V)
g)提供含有与固相连接的至少k赖氨酸残基的线性支持肽，
h)使用Fmoc/tBu方法通过固相合成将(X)m残基、Arg残基、Lys-Ψ-Pro二肽和(X)n残基相继偶联至支持肽上。
12.一种药物组合物，其含有根据权利要求1-10任一项所述的化合物和药学上可接受的载体。
13.根据权利要求12所述的药物组合物，其用于治疗癌症或炎症性疾病。
14.根据权利要求12所述的药物组合物，其用于改善创伤愈合。
CN200880129310.6A 2008-05-22 2008-05-22 改善治疗功效的新光学纯化合物 Active CN102037005B (zh)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PCT/IB2008/053469 WO2009141687A1 (en) 2008-05-22 2008-05-22 New optically pure compounds for improved therapeutic efficiency

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN102037005A true CN102037005A (zh) 2011-04-27
CN102037005B CN102037005B (zh) 2017-03-29

Family

ID=40957783

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN200880129310.6A Active CN102037005B (zh) 2008-05-22 2008-05-22 改善治疗功效的新光学纯化合物

Country Status (8)

Country Link
US (1) US9243030B2 (zh)
EP (1) EP2291390B1 (zh)
JP (1) JP5548866B2 (zh)
CN (1) CN102037005B (zh)
AU (1) AU2008356840B2 (zh)
BR (1) BRPI0822661A2 (zh)
CA (1) CA2724818C (zh)
WO (1) WO2009141687A1 (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104356221A (zh) * 2014-10-24 2015-02-18 杭州阿德莱诺泰制药技术有限公司 一种制备培西加南的方法
CN109381362A (zh) * 2018-12-19 2019-02-26 浙江神首生物科技有限公司 一种焕活生机修复乳液及其制备方法

Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2900341B1 (fr) 2006-04-27 2012-09-14 Centre Nat Rech Scient Utilisation de ligands synthetiques multivalents de la nucleoline de surface pour le traitement du cancer
JP5548866B2 (ja) 2008-05-22 2014-07-16 サントル ナスィオナル ド ラ ルシェルシュ スィアンティフィク（セ．エン．エル．エス．） 治療効果の改善のための新規の光学的に純粋な化合物
EP2624849A2 (en) 2010-10-04 2013-08-14 Centre National de la Recherche Scientifique (C.N.R.S.) Multivalent synthetic compounds as antibiotic treatment
RU2458663C1 (ru) * 2010-12-27 2012-08-20 Общество с ограниченной ответственностью предприятие "Репер НН" Трансплантат для склеропластики
CN109071602B (zh) * 2015-11-11 2022-09-13 西兰制药公司 靶向α4β7整联蛋白的环肽
WO2018085921A1 (en) 2016-11-11 2018-05-17 Encycle Therapeutics, Inc. CYCLIC PEPTIDES MULTIMERS TARGETING α4β7 INTEGRIN
CN110891964A (zh) 2017-05-10 2020-03-17 循环治疗学公司 靶向α4β7整合素的均环肽
WO2022223544A1 (en) 2021-04-19 2022-10-27 Centre National De La Recherche Scientifique (Cnrs) COMBINATION THERAPY OF NUCANT AND mTOR INHIBITORS FOR TREATING CANCER

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2007125210A2 (fr) * 2006-04-27 2007-11-08 Centre National De La Recherche Scientifique (Cnrs) Utilisation de ligands synthetiques multivalents de la nucleoline de surface pour le traitement du cancer ou de l'inflammation

Family Cites Families (26)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NL154598B (nl) 1970-11-10 1977-09-15 Organon Nv Werkwijze voor het aantonen en bepalen van laagmoleculire verbindingen en van eiwitten die deze verbindingen specifiek kunnen binden, alsmede testverpakking.
US3817837A (en) 1971-05-14 1974-06-18 Syva Corp Enzyme amplification assay
US3939350A (en) 1974-04-29 1976-02-17 Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Fluorescent immunoassay employing total reflection for activation
US3996345A (en) 1974-08-12 1976-12-07 Syva Company Fluorescence quenching with immunological pairs in immunoassays
US4277437A (en) 1978-04-05 1981-07-07 Syva Company Kit for carrying out chemically induced fluorescence immunoassay
US4275149A (en) 1978-11-24 1981-06-23 Syva Company Macromolecular environment control in specific receptor assays
FR2437213A1 (fr) 1978-09-28 1980-04-25 Cm Ind Produits cytotoxiques formes par liaison covalente de la chaine a de la ricine avec un anticorps et leur procede de preparation
US4366241A (en) 1980-08-07 1982-12-28 Syva Company Concentrating zone method in heterogeneous immunoassays
US4957939A (en) 1981-07-24 1990-09-18 Schering Aktiengesellschaft Sterile pharmaceutical compositions of gadolinium chelates useful enhancing NMR imaging
US4472509A (en) 1982-06-07 1984-09-18 Gansow Otto A Metal chelate conjugated monoclonal antibodies
FR2719049B1 (fr) 1994-04-22 1996-06-14 Pasteur Institut Multireprésentation d'un analogue peptidique du substrat de la DPPIV, notamment de type KPR, afin d'inhiber l'entrée du HIV dans les cellules.
US5891737A (en) 1995-06-07 1999-04-06 Zymogenetics, Inc. Combinatorial non-peptide libraries
US6121236A (en) 1998-03-24 2000-09-19 The Children's Medical Center Corporation Multivalent ligands which modulate angiogenesis
ES2296615T3 (es) 1999-04-08 2008-05-01 Antisoma Research Limited Actividad antiproliferativa de oligonucleotidos ricos en g y procedimiento de uso de los mismos para su union a la nucleolina.
US6783952B1 (en) 1999-09-16 2004-08-31 Warner-Lambert Company Secreted soluble α2δ-2, α2δ-3 or α2δ-4 calcium channel subunit polypeptides and screening assays using same
FR2809960B1 (fr) 2000-06-07 2004-04-23 Pasteur Institut Composition adjuvante de la reponse immunitaire comprenant la proteine fha ou un fragment de la proteine fha sous forme libre, et composition immunogene ou vaccinale contenant une telle composition adjuvante
FR2828207B1 (fr) 2001-08-02 2004-12-24 Centre Nat Rech Scient Milieux de reaction pour l'activite thymidylate synthase de la thyx
US20040002457A1 (en) 2002-03-12 2004-01-01 Hovanessian Ara V. Inhibition of virus anchorage by RGG domain of a cell surface-expressed protein, polynucleotide coding for said RGG domain, therapeutic uses thereof by inhibition of microorganism or protein ligand binding to the cell-surface-expressed protein
US7544767B2 (en) 2002-04-05 2009-06-09 Burnham Institute For Medical Research HMGN2 peptides and related molecules that selectively home to tumor blood vessels and tumor cells
US7357928B2 (en) 2002-04-08 2008-04-15 University Of Louisville Research Foundation, Inc. Method for the diagnosis and prognosis of malignant diseases
FR2840307B1 (fr) 2002-05-30 2006-07-07 Centre Nat Rech Scient Nouvelles molecules multimeriques, leur procede de preparation, et leur utilisation pour la preparation de medicaments
TW200504210A (en) 2003-07-30 2005-02-01 Chin-Tarng Lin A nucleolin antisense inhibiting growth of cancer cell
US20080234464A1 (en) 2005-04-22 2008-09-25 Hisafumi Ikeda Compound Having Amino Acid Residue or Peptide Residue and Process for Producing the Same
DE602007010459D1 (de) 2007-09-04 2010-12-23 Inst Nat Sante Rech Med Verwendung von Verbindungen, die die EF-Tu-Nucleolin Wechselwirkung vehindern, zur Verhinderung oder Behandlung von Tularämie
JP5548866B2 (ja) 2008-05-22 2014-07-16 サントル ナスィオナル ド ラ ルシェルシュ スィアンティフィク（セ．エン．エル．エス．） 治療効果の改善のための新規の光学的に純粋な化合物
EP2624849A2 (en) 2010-10-04 2013-08-14 Centre National de la Recherche Scientifique (C.N.R.S.) Multivalent synthetic compounds as antibiotic treatment

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2007125210A2 (fr) * 2006-04-27 2007-11-08 Centre National De La Recherche Scientifique (Cnrs) Utilisation de ligands synthetiques multivalents de la nucleoline de surface pour le traitement du cancer ou de l'inflammation

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ADACHI KENICHI ET AL: "Selective BH3-reduction of amide carbonyl groups of lithium salts of N-tert-butoxycarbonyl-（s）-O-benzyltyrosyl-（s）-proline and N，N"-ethylene-bridged dipeptides", 《SYNTHESIS》 *
CALLEBAUT C. ET AL: "Inhibition of HIV infection by pseudopeptides blocking viral envelop glycoprotein-mediated membrane fusion and celldeath", 《VIROLOGY》 *
CUSHMAN M. ET AL: "Development of methodology for the synthesis of stereochemically pure pheΨ[CH2N]pro linkages in HIV protease inhibitors", 《JOURNAL OF ORGANIC CHEMISTRY》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104356221A (zh) * 2014-10-24 2015-02-18 杭州阿德莱诺泰制药技术有限公司 一种制备培西加南的方法
CN109381362A (zh) * 2018-12-19 2019-02-26 浙江神首生物科技有限公司 一种焕活生机修复乳液及其制备方法

Also Published As

Publication number Publication date
CA2724818A1 (en) 2009-11-26
JP5548866B2 (ja) 2014-07-16
CN102037005B (zh) 2017-03-29
EP2291390A1 (en) 2011-03-09
BRPI0822661A2 (pt) 2015-06-30
AU2008356840B2 (en) 2013-05-16
WO2009141687A1 (en) 2009-11-26
JP2011523418A (ja) 2011-08-11
US20110201559A1 (en) 2011-08-18
US9243030B2 (en) 2016-01-26
CA2724818C (en) 2015-06-16
EP2291390B1 (en) 2014-11-05
AU2008356840A1 (en) 2009-11-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN102037005A (zh) 改善治疗功效的新光学纯化合物
AU2006266609B2 (en) Treatment of tumors
JP3957751B2 (ja) 新規ドラスタチン誘導体、その製法及び使用
KR101730680B1 (ko) 치료용 펩티드
US9415114B2 (en) Conformations of divergent peptides with mineral binding affinity
KR20110022594A (ko) 신규한 이중 표적화 항종양성 접합체
US20240033318A1 (en) Peptidyl inhibitors of calcineurin-nfat interaction
CN111744020A (zh) 一种主动靶向响应型多肽药物、其制备方法和应用
JPH02500517A (ja) ペプチド化合物
US9481712B2 (en) Peptidomimetics possessing photo-controlled biological activity
EP1593686B1 (en) Antineoplastic peptides
AU2020380902A1 (en) Polypeptide having MMP2-inhibitory effect
JP2022518695A (ja) Ｃａｉｘに特異的な二環式ペプチドリガンド
JPH06306096A (ja) ペプチド誘導体及びその用途
JP3190765B2 (ja) ペプチド誘導体及びその用途
JPH06298797A (ja) ペプチド誘導体およびその用途
CN106589064A (zh) 高活性的肿瘤抑制剂及其制法和应用
US20170051017A1 (en) Peptidomimetics possessing photo-controlled biological activity
TWI535467B (zh) 具礦質親和能力之多歧狀胜肽構型（一）

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C53 Correction of patent of invention or patent application
CB03 Change of inventor or designer information

Inventor after: Briand Jean Paul

Inventor after: Guichard Gilles

Inventor after: Courty Jose

Inventor after: Zimmer Robert

Inventor after: Devin Chantal

Inventor after: A *lang

Inventor after: H *zhang

Inventor after: Hovanessian Ara

Inventor before: Briand Jean Paul

Inventor before: Guichard Gilles

Inventor before: Courty Jose

Inventor before: Zimmer Robert

Inventor before: Devin Chantal

Inventor before: A *lang

Inventor before: H *zhang

COR Change of bibliographic data

Free format text: CORRECT: INVENTOR; FROM: PAUL BRIAND JEAN GILLES GUICHARD JOSE COURTY ROBERT ZIMMER CHANTAL DEVIN ANNIE LANG ZHANG HUIQING TO: PAUL BRIAND JEAN GILLES GUICHARD JOSE COURTY ROBERT ZIMMER CHANTAL DEVIN ANNIE LANG ZHANG HUIQING ARA HOVANESSIAN

GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
TR01 Transfer of patent right

Effective date of registration: 20180418

Address after: France

Co-patentee after: Elro Pharma

Patentee after: National Center for scientific research

Address before: France

Co-patentee before: Immupharma France

Patentee before: National Center for scientific research

TR01 Transfer of patent right