CN102020641B

CN102020641B - 一种从萝芙木根皮中提取阿义马林的方法

Info

Publication number: CN102020641B
Application number: CN 201010566122
Authority: CN
Inventors: 吴毅武; 陈秀秀; 扈银霞; 郑玉琳
Original assignee: GUANGZHOU PENXEN MEDICINE CO Ltd
Current assignee: GUANGZHOU PENXEN MEDICINE CO Ltd
Priority date: 2010-11-30
Filing date: 2010-11-30
Publication date: 2013-01-02
Anticipated expiration: 2030-11-30
Also published as: CN102020641A

Abstract

本发明属于植物有效部位提取技术领域，具体涉及一种从萝芙木根皮中提取阿义马林的方法。本发明在提取出阿义马林的同时还提取分离得到利血平，解决了在国内尚不能生产阿义马林的难题，填补了阿义马林全依赖于进口的空白。本发明通过对萝芙木根皮的有机溶剂提取物进行分步萃取，成盐沉淀，盐转换，脱盐，结晶等方法得到符合日本药典JP14要求的阿义马林，方法简便，工艺简单，适合放大生产。

Description

一种从萝芙木根皮中提取阿义马林的方法

技术领域

本发明属于植物有效部位提取分离技术领域，具体涉及一种从萝芙木根皮中提取阿义马林的方法。

背景技术

萝芙木中含有多种药理性生物碱，含量较多的生物碱主要有利血平、阿义马林、蛇根碱、阿吗碱、育享宾等。其中利血平的主要临床作用是降血压，阿义马林的主要临床作用是抗心律失常。国内云南与海南一带的萝芙木中生物碱含量比较高，而国外特别是非洲一些国家的萝芙木中生物碱的含量更高，其中利血平含量高达1.2％，阿义马林的含量也达到0.7％左右。萝芙木中存在与阿义马林结构非常相似的生物碱，导致从萝芙木中提取分离阿义马林相当困难，以至于日本药典JP14对阿义马林的含量要求下限只有96％。现有文献报导分离纯化阿义马林的方法主要有：(1)将萝芙木根皮粉碎，用乙酸乙酯、苯、酸性甲醇、酸性乙醇多次浸提，浓缩提取液后用酸性溶液溶解，用有机溶剂萃取掉弱碱性生物碱，余液调pH值至8-9，再用苯或氯仿等有机溶剂萃取，纯化结晶，得到阿义马林；(2)将萝芙木根皮粉碎后，用苯，乙酸乙酯提取得到浓缩液后，用乙酸或磷酸溶解，用氨水、碳酸钠溶液或氢氧化钠溶液调节溶液的酸碱度后分步萃取，得到pH值9-10部分的萃取液后纯化结晶得到阿义马林；(3)将萝芙木根皮粉碎，用乙酸乙酯、苯、酸性甲醇、酸性乙醇多次浸提，浓缩提取液后用酸性溶液溶解，用有机溶剂萃取弱碱性生物碱，余液调节pH值为8-9，再用苯或氯仿等有机溶剂萃取上高效制备液相柱，分离纯化得到阿义马林；(4)将萝芙木根皮粉碎，用乙酸乙酯，苯，酸性甲醇，酸性乙醇多次浸提，浓缩提取液后用酸性溶液溶解，用有机溶剂萃取掉弱碱性生物碱，余液调pH值至8-9，再用甲苯或氯仿等有机溶剂萃取，浓缩萃取液，析出粗品，加盐酸溶解，脱色，再调pH至碱性用甲苯萃取出来，结晶，丙酮甲醇反复结晶，得到阿义马林。这些方法的主要不足之处在于：(1)分离纯化过程复杂，不利于放大生产；(2)成本高，投入大，产率较低；(3)使用了大量有毒有机溶剂，对人体与环境造成较大危害；(4)上述第四种方法中，提取分离过程长时间在碱性条件下进行，容易使阿义马林分解，影响产品的质量，很难分离出符合日本药典JP14要求的阿义马林；(5)到目前为止，国内尚不能应用上述文献方法大量生产符合日本药典JP14标准的阿义马林。

发明内容

为解决上述生产阿义马林的各种弊端，本发明提供了一种从萝芙木根皮中提取阿义马林的方法。

本发明的目的通过下述技术方案实现：一种从萝芙木根皮中提取阿义马林的方法，包括下述步骤：

(1)提取浓缩：将萝芙木根皮粉碎，得到萝芙木粉，用有机溶剂与酸的混合物浸提，提取完全，浓缩提取液，得到浓缩液。

(2)萃取分离：步骤(1)中得到的浓缩液加酸溶液调节pH值为1-2，用有机溶剂萃取至利血平提取完全，得到有机相和萃取余液，有机相经分离纯化得到利血平，萃取余液主要含有阿义马林。

(3)成盐粗品的制备：步骤(2)中得到的萃取余液，用碱调节pH值为6-7后，用有机溶剂多次萃取。合并有机相，减压浓缩至原体积四分之一左右，向其中加入过量盐酸，放置过夜，沉淀，过滤出固体物，用甲醇洗涤，得到阿义马林粗品的盐酸盐。

(4)成盐粗品的纯化：步骤(3)中得到的阿义马林粗品的盐酸盐，加入其质量10倍量的乙酸溶液，加热溶解，室温冷却后，将溶液冷藏过夜，过滤得到阿义马林盐酸盐白色固体。母液可反复浓缩，析晶，过滤得到阿义马林盐酸盐白色固体。

(5)氢碘酸阿义马林的制备：步骤(4)中得到的阿义马林盐酸盐白色固体，加入其质量6-10倍量的乙酸溶液，室温搅拌下溶解，过滤掉不溶物，搅拌下加入过量饱和碘化钾溶液，反应析出氢碘酸阿义马林，其它生物碱的氢碘酸盐因在酸性水溶液中溶解度较大而与之分离；过滤，用乙酸溶液冲洗，得到氢碘酸阿义马林白色固体。

(6)脱盐结晶纯化：步骤(5)中得到的氢碘酸阿义马林白色固体，加入其质量4-6倍量的甲醇，加热搅拌溶解，过滤，用碱调节滤液pH值为8-9；室温冷却后，将溶液冷藏过夜，过滤，得到阿义马林粗品；母液可反复浓缩，析晶，过滤得到阿义马林粗品。所得阿义马林粗品用有机溶剂重结晶，干燥，得到阿义马林。

步骤(1)中所述萝芙木为海南催吐萝芙木；所述有机溶剂与酸的混合物为甲醇与乙酸的混合物或乙醇与乙酸的混合物，混合物中乙酸的质量分数为3％-8％，有机溶剂与酸的混合物用量为萝芙木粉重量的4-6倍；所述浓缩为60℃以下减压浓缩。

步骤(2)中所述调节pH值的酸溶液为质量分数5％-10％的盐酸；所述有机溶剂为氯仿、二氯甲烷或二氯乙烷。

步骤(3)中所述调节pH值的碱为氨水、氢氧化钠溶液或碳酸钠溶液；所述有机溶剂为氯仿、二氯甲烷、二氯乙烷或乙酸乙酯；所述浓缩为60℃以下减压浓缩。

步骤(4)中所述乙酸溶液的质量分数为5％-10％；所述冷藏温度为5-10℃；所述加热溶解的温度为60-80℃；所述母液浓缩温度为60-80℃。

步骤(5)中所述乙酸溶液的质量分数为15-20％；溶解阿义马林盐酸盐白色固体所用乙酸溶液的量优选阿义马林盐酸盐白色固体质量的7-8.5倍。

步骤(6)中所述调节pH值的碱为氨水、氢氧化钠溶液或碳酸钠溶液；所述重结晶用的有机溶剂为体积比为1∶1或1∶2的氯仿与甲醇混合液，用量为阿义马林粗品质量的6-10倍。

步骤(6)中所述加热溶解的温度为50-60℃；所述冷藏温度为5-10℃；所述干燥为50-70℃干燥4-6小时。

与现在技术相比，本发明具有以下优点和有益效果：

a)本发明步骤简单，适合放大生产。

b)所得产品纯度高，按日本药典JP14非水滴定测定含量，含量均超过97％，高于日本药典JP14标准的96％。

c)步骤(4)中所得母液可浓缩后多次析晶，得到阿义马林盐酸盐，提高回收率，增加产量。

d)本发明利用阿义马林盐酸盐在有机溶剂中溶解度非常低的原理，向含有阿义马林的有机相中加入过量盐酸，析出阿义马林盐酸盐固体，母液中残余阿义马林非常少，大大提高了产率；而后利用阿义马林的氢碘酸盐在酸中溶解度低的原理，使之与其它生物碱相分离，然后碱化脱盐，重结晶，得到高纯度的阿义马林，从而在提高产率的基础上提高了阿义马林的纯度。

附图说明

图1为本发明从萝芙木根皮中提取阿义马林的方法的工艺流程图。

具体实施方式

下面结合实施例及附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。

实施例一

如图1所示，一种从萝芙木根皮中提取阿义马林的方法，包括如下步骤：

(1)提取浓缩：将100公斤野生海南催吐萝芙木根皮粉碎，得到萝芙木粉，加入500公斤甲醇与乙酸的混合物浸提，混合物中乙酸的质量分数为5％，共提取五次，60℃真空浓缩提取液后合并浓缩液，回收至50公斤。

(2)萃取分离：步骤(1)中得到的浓缩液，用质量分数10％的盐酸溶液调节pH值为1-2，用氯仿萃取三次，每次氯仿用量为30公斤，共得到萃取余液48公斤，萃取余液中主要含阿义马林。

(3)成盐粗品的制备：步骤(2)中得到的48公斤萃取余液，用氨水调节pH值为6-7后，用氯仿萃取5次，每次氯仿的用量为20公斤，合并有机溶剂相，于60℃减压浓缩至26公斤，向其中加入过量盐酸，放置过夜，沉淀，过滤，用甲醇洗涤固体物，得到阿义马林粗品的盐酸盐1.6公斤。

(4)成盐粗品的纯化：步骤(3)中得到的1.6公斤阿义马林粗品的盐酸盐，加入16公斤质量分数为5％的乙酸溶液，于60℃加热溶解，过滤掉不溶物，室温冷却滤液，再于7℃冷藏，过夜析出晶体，过滤得到白色固体0.8公斤；60℃浓缩母液，析晶，过滤得到白色固体0.4公斤。合并白色固体共1.2公斤。

(5)氢碘酸阿义马林的制备：步骤(4)中得到的1.2公斤白色固体，加入10公斤质量分数为15％的乙酸溶液于室温搅拌溶解，过滤掉不溶物，搅拌下向滤液中加入过量饱和碘化钾溶液，反应析出氢碘酸阿义马林；过滤，用少量质量分数为15％的乙酸溶液抽洗，得到氢碘酸阿义马林1.04公斤。

(6)脱盐结晶纯化：步骤(5)中得到的1.04公斤氢碘酸阿义马林，加入5公斤甲醇，60℃加热溶解，再于60℃加热条件下用氨水调节pH值为8-9；室温冷却后，于10℃冷藏析晶，过滤，得到白色晶体0.45公斤；母液再浓缩，结晶，过滤得到白色晶体0.2公斤。合并白色晶体共0.65公斤，用4.5公斤体积比为1∶1的氯仿与甲醇混合溶液重结晶一次，过滤，所得固体于70℃干燥4小时，得到阿义马林0.36公斤。所得样品为白色结晶性粉未，微苦，易溶于乙酸酐与氯仿，微溶于甲醇、95％乙醇、丙酮、二乙醚，几乎不溶于水，溶于低浓度的高氯酸。经检测：比旋光度为+148度，吸收系数E_(1cm)～(1％)(249nm)为264，E_(1cm)～(1％)(292nm)为89，熔点为158-160℃，非水滴定其含量为97.7％，符合日本药典JP14阿义马林的各项指标。

实施例二

(1)提取浓缩：将100公斤海南催吐萝芙木根皮粉碎，得到萝芙木粉，加入600公斤甲醇与乙酸的混合物浸提，混合物中乙酸的质量分数为3％，共提取六次，55℃真空浓缩提取液后合并浓缩液，回收至51公斤。

(2)萃取分离：步骤(1)中得到的浓缩液，用质量分数8％的盐酸溶液调节pH值为1-2，用二氯乙烷萃取三次，每次二氯乙烷用量为30公斤，共得到萃取余液48.8公斤，萃取余液中主要含阿义马林。

(3)成盐粗品的制备：步骤(2)中得到的48.8公斤萃取余液，用质量分数10％的氢氧化钠溶液调节pH值为6-7，用二氯甲烷萃取6次，每次二氯甲烷的用量为20公斤，合并有机溶剂相，于55℃减压浓缩至30公斤，向其中加入过量盐酸，放置过夜，沉淀，过滤，用甲醇洗涤固体物，得到阿义马林粗品的盐酸盐1.8公斤。

(4)成盐粗品的纯化：步骤(3)中得到的1.8公斤阿义马林粗品的盐酸盐，加入18公斤质量分数为10％的乙酸溶液，于70℃加热溶解，过滤掉不溶物，室温冷却滤液，再于7℃冷藏，过夜析出晶体，过滤得到白色固体0.88公斤；70℃浓缩母液，析晶，过滤得到白色固体0.4公斤。合并白色固体共1.28公斤。

(5)氢碘酸阿义马林的制备：步骤(4)中得到的1.28公斤白色固体，加入10公斤质量分数为20％的乙酸溶液于室温搅拌溶解，过滤掉不溶物，搅拌下向滤液中加入过量饱和碘化钾溶液，反应析出氢碘酸阿义马林；过滤，用少量质量分数为20％的乙酸溶液抽洗，得到氢碘酸阿义马林1.14公斤。

(6)脱盐结晶纯化：步骤(5)中得到的1.14公斤氢碘酸阿义马林，加入5公斤甲醇，60℃加热溶解，再于60℃加热条件下用质量分数10％的氢氧化钠溶液调节pH值为8-9；室温冷却后，于7℃冷藏析晶，过滤，得到白色晶体0.55公斤；母液再浓缩，结晶，过滤得到白色晶体0.21公斤。合并白色晶体共0.76公斤，用5公斤体积比为1∶2的氯仿与甲醇混合溶液重结晶一次，过滤，所得固体于60℃干燥6小时，得到阿义马林0.43公斤。所得样品为白色结晶性粉未，微苦，易溶于乙酸酐与氯仿，微溶于甲醇，95％乙醇，丙酮，二乙醚，几乎不溶于水，溶于低浓度的高氯酸，经检测：比旋光度为+138度，吸收系数E_(1cm)～(1％)(249nm)为260，E_(1cm)～(1％)(292nm)为87，熔点为158-161℃，非水滴定含量为98.2％，符合日本药典JP14阿义马林的各项指标。

实施例三

(1)提取浓缩：将100公斤海南催吐萝芙木根皮粉碎，得到萝芙木粉，加入500公斤乙醇与乙酸的混合物浸提，混合物中乙酸的质量分数为8％，共提取六次，50℃真空浓缩提取液后合并浓缩液，回收至52.2公斤。

(2)萃取分离：步骤(1)中得到的浓缩液，用质量分数7％的盐酸溶液调节pH值为1-2，用二氯甲烷萃取三次，每次二氯甲烷用量为30公斤，共得到萃取余液50公斤，萃取余液中主要含阿义马林。

(3)成盐粗品的制备：步骤(2)中得到的50公斤萃取余液，用质量分数10％的氢氧化钠溶液调节pH值为6-7，用乙酸乙酯萃取6次，每次乙酸乙酯的用量为20公斤，合并有机溶剂相，于60℃减压浓缩至28公斤，向其中加入过量盐酸，放置过夜，沉淀，过滤，用甲醇洗涤固体物，得到阿义马林粗品的盐酸盐1.98公斤。

(4)成盐粗品的纯化：步骤(3)中得到的1.98公斤阿义马林粗品的盐酸盐，加入19.8公斤质量分数为6％的乙酸溶液，于75℃加热溶解，过滤掉不溶物，室温冷却滤液，再于5℃冷藏，过夜析出晶体，过滤得到白色固体0.98公斤；70℃浓缩母液，析晶，过滤得到白色固体0.45公斤。合并白色固体共1.43公斤。

(5)氢碘酸阿义马林的制备：步骤(4)中得到的1.43公斤白色固体，加入12公斤质量分数为18％的乙酸溶液于室温搅拌溶解，过滤掉不溶物，搅拌下向滤液中加入过量饱和碘化钾溶液，反应析出氢碘酸阿义马林，过滤，用少量质量分数为18％的乙酸溶液抽洗，得到氢碘酸阿义马林1.45公斤。

(6)脱盐结晶纯化：步骤(5)中得到的1.45公斤氢碘酸阿义马林，加入8公斤甲醇，55℃加热溶解，再于55℃加热条件下用质量分数为10％的氢氧化钠溶液调节pH值为8-9；室温冷却后，于5℃冷藏析晶，过滤，得到白色晶体0.75公斤；母液再浓缩，结晶，过滤得到白色晶体0.26公斤。合并白色晶体共1.01公斤，用7公斤体积比为1∶2的氯仿与甲醇的混合液重结晶一次，过滤，所得固体于60℃干燥6小时，得到阿义马林0.45公斤。所得样品为白色结晶性粉未，微苦，易溶于乙酸酐与氯仿，微溶于甲醇，95％乙醇，丙酮，二乙醚，几乎不溶于水，溶于低浓度的高氯酸，经检测：比旋光度为+145度，吸收系数E_(1cm)～(1％)(249nm)为262，E_(1cm)～(1％)(292nm)为93，熔点为158-161℃，非水滴定含量为97.2％，符合日本药典JP14阿义马林的各项指标。

实施例四

(1)提取浓缩：将100公斤海南催吐萝芙木根皮粉碎，得到萝芙木粉；加入400公斤甲醇与乙酸的混合物浸提，混合物中乙酸的质量分数为6％，共提取六次；50℃真空浓缩提取液后合并浓缩液，回收至51.6公斤。

(2)萃取分离：步骤(1)中得到的浓缩液，用质量分数5％的盐酸溶液调节pH值为1-2，加入用二氯甲烷萃取三次，每次二氯甲烷用量为30公斤，共得到萃取余液50.5公斤，萃取余液中主要含阿义马林。

(3)成盐粗品的制备：步骤(2)中得到的50.5公斤萃取余液，用质量分数为5％的碳酸钠溶液调节pH值为6-7，用二氯乙烷萃取6次，每次二氯乙烷的用量为20公斤，合并有机溶剂相，于60℃减压浓缩至32公斤，向其中加入过量盐酸，放置过夜，沉淀，过滤，用甲醇洗涤固体物，得到阿义马林粗品的盐酸盐1.78公斤。

(4)成盐粗品的纯化：步骤(3)中得到的1.78公斤阿义马林粗品的盐酸盐，加入17.8公斤质量分数为5％的乙酸溶液，于80℃加热溶解，过滤掉不溶物，室温冷却滤液，再于5℃冷藏，过夜析出晶体，过滤得到白色固体0.9公斤；80℃浓缩母液，析晶，过滤得到白色固体0.45公斤。合并白色固体共1.35公斤。

(5)氢碘酸阿义马林的制备：步骤(4)中得到的1.43公斤白色固体，加入10公斤质量分数为18％的乙酸溶液于室温搅拌溶解，过滤掉不溶物，搅拌下向滤液中加入过量饱和碘化钾溶液，反应析出氢碘酸阿义马林，过滤，用少量质量分数为18％的乙酸溶液抽洗，得到氢碘酸阿义马林1.35公斤。

(6)脱盐结晶纯化：步骤(5)中得到的1.35公斤氢碘酸阿义马林，加入8公斤甲醇，50℃加热溶解，再于50℃加热条件下用质量分数为5％的碳酸钠溶液调节pH值为8-9；室温冷却后，于5℃冷藏析晶，过滤，得到白色晶体0.7公斤；母液再浓缩，结晶，过滤得到白色晶体0.26公斤。合并白色晶体共0.96公斤，用7公斤体积比为1∶1的氯仿与甲醇的混合液重结晶一次，过滤，所得固体于50℃干燥5小时，得到阿义马林0.41公斤。所得样品为白色结晶性粉未，微苦，易溶于乙酸酐与氯仿，微溶于甲醇，95％乙醇，丙酮，二乙醚，几乎不溶于水，溶于低浓度的高氯酸，经检测：比旋光度为+143度，吸收系数E_(1cm)～(1％)(249nm)为260，E_(1cm)～(1％)(292nm)为95，熔点为158-161℃，非水滴定含量为97.8％，符合日本药典JP14阿义马林的各项指标。

上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims

1.一种从萝芙木根皮中提取阿义马林的方法，其特征在于：包括以下步骤：

（1）提取浓缩：将萝芙木根皮粉碎，得到萝芙木粉，用有机溶剂与酸的混合物浸提，提取完全后浓缩提取液，得到浓缩液；

（2）萃取分离：步骤（1）中得到的浓缩液用酸溶液调节pH值为1-2，用有机溶剂萃取至利血平提取完全，得到有机相和萃取余液，有机相经分离纯化得到利血平；

（3）成盐粗品的制备：步骤（2）中得到的萃取余液，用碱调节pH值为6-7后，用有机溶剂萃取；合并有机溶剂相，浓缩至原体积的四分之一，向其中加入过量盐酸，放置过夜，沉淀，过滤出固体物，用甲醇洗涤，得到阿义马林粗品的盐酸盐；

（4）成盐粗品的纯化：步骤（3）中得到的阿义马林粗品的盐酸盐，加入其质量10倍量的乙酸溶液，加热溶解，过滤掉不溶物，滤液室温冷却后冷藏过夜，过滤得到阿义马林盐酸盐白色固体；反复浓缩母液，析晶，过滤得到阿义马林盐酸盐白色固体；

（5）氢碘酸阿义马林的制备：步骤（4）中得到的阿义马林盐酸盐白色固体，加入其质量6-10倍量的乙酸溶液，室温搅拌下溶解，过滤掉不溶物，搅拌下向滤液中加入过量饱和碘化钾溶液，反应析出氢碘酸阿义马林；过滤，用乙酸溶液抽洗，得到氢碘酸阿义马林白色固体；

（6）脱盐结晶纯化：步骤（5）中得到的氢碘酸阿义马林白色固体，加入其质量4-6倍量的甲醇，加热搅拌溶解，过滤，用碱调节滤液pH值为8-9；室温冷却后，将溶液冷藏过夜，过滤，得到阿义马林粗品；用有机溶剂重结晶阿义马林粗品，干燥，得到阿义马林；

步骤（1）中所述有机溶剂与酸的混合物为甲醇与乙酸的混合物或乙醇与乙酸的混合物，混合物中乙酸的质量分数为3%-8%，有机溶剂与酸的混合物用量为萝芙木粉重量的4-6倍；

步骤（2）中所述调节pH值的酸溶液为质量分数为5%-10%的盐酸；所述有机溶剂为氯仿、二氯甲烷或二氯乙烷；

步骤（3）中所述调节pH值的碱为氨水、氢氧化钠溶液或碳酸钠溶液；所述有机溶剂为氯仿、二氯甲烷、二氯乙烷或乙酸乙酯；所述浓缩为60℃以下减压浓缩；

步骤（6）中所述调节pH值的碱为氨水、氢氧化钠溶液或碳酸钠溶液；所述重结晶用的有机溶剂为体积比为1∶1或1∶2的氯仿与甲醇的混合液，用量为阿义马林粗品质量的6-10倍。

2.根据权利要求1所述一种从萝芙木根皮中提取阿义马林的方法，其特征在于：步骤（1）中所述萝芙木为海南催吐萝芙木；所述浓缩为60℃以下真空浓缩。

3.根据权利要求1所述一种从萝芙木根皮中提取阿义马林的方法，其特征在于：步骤（4）中所述乙酸溶液的质量分数为5%-10%。

4.根据权利要求1所述一种从萝芙木根皮中提取阿义马林的方法，其特征在于：步骤（4）中所述冷藏温度为5-10℃；所述加热溶解的温度为60-80℃；所述母液浓缩温度为60-80℃。

5.根据权利要求1所述一种从萝芙木根皮中提取阿义马林的方法，其特征在于：步骤（5）中所述乙酸溶液的质量分数为15-20%。

6.根据权利要求1所述一种从萝芙木根皮中提取阿义马林的方法，其特征在于：步骤（6）中所述加热溶解的温度为50-60℃；所述冷藏温度为5-10℃；所述干燥为50-70℃干燥4-6小时。