CN102016553A - 电压门控的金属增强荧光、化学发光或生物发光方法及系统 - Google Patents

电压门控的金属增强荧光、化学发光或生物发光方法及系统 Download PDF

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克里斯·D·格迪斯
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    • G01N33/54373—Apparatus specially adapted for solid-phase testing involving physiochemical end-point determination, e.g. wave-guides, FETS, gratings

Abstract

在本发明中，第一次证明了电流对表面等离子体激元放大荧光信号的能力的影响。跨过低电阻银岛薄膜(SiF)施加的直流电扰乱了紧邻荧光团的荧光增强。对于给定的施加电流来说，“恰好连续”的低电阻薄膜中的表面等离子体激元很少可用于荧光团偶极子耦合，因此随着所施加电流的变化对增强的荧光进行了门控。

Description

电压门控的金属增强荧光、化学发光或生物发光方法及系统
与相关申请的交叉参考
本申请要求2008年3月3日提交的美国临时专利申请No.61/033,231的优先权，所述申请的内容在此出于所有目的引为参考。
发明背景
技术领域
总的来说，本发明涉及金属增强荧光(MEF)，更具体来说涉及通过使直流电通过低电阻金属互连粒子来“打开和关闭”发射，以操纵MEF发射的能力。
相关技术
多年来，已经从发展对金属增强荧光(MEF)1-3现象的基本理解以及其次将荧光团的增强的光物理性质应用于生物学应用4的观点上，对荧光团接近等离子体激元(plasmon)共振粒子的效应进行了报道。在所有这些报道中，通过紧邻荧光团偶极子在近场诱导了表面等离子体激元，表面等离子体激元又辐射耦合量子，导致荧光放大，正如图4上部的图所示。耦合荧光在很大程度上与不存在金属情况下观察到的自由空间荧光非常类似，例外之处在于辐射寿命明显较短，这据认为是由等离子体激元衰变1-3和耦合发射的角度依赖性发射5造成的。
因为目前正在对金属-荧光团相互作用及其在生物学和临床诊断学中的应用正在进行深入研究，因此发现MEF的其他可应用的用途、例如能够(根据需要)打开或关闭MEF将是有利的，并可用于诸如芯片实验室(lab-on-a-chip)和光子检测器的技术。
发明概述
本发明涉及通过将直流电导入并使其通过具有低电阻的“恰好连续”的金属薄膜来“打开和关闭”发射，以操纵MEF发射的能力。
一方面，本发明涉及用于操纵来自金属增强荧光系统的发射的方法，所述方法包括：
a)在基材上提供导电金属表面，其中所述导电金属表面包含在所述基材上恰好连续的薄膜，并且其中所述基材包括玻璃、石英、铜或聚合材料；
b)将分子定位于所述导电金属表面附近，其中所述分子能够发射可检测的电磁能量，并且其中所述分子在距所述导电金属表面以增强发射的可检测电磁能量的强度的距离处定位；
c)施加电磁能量，所述电磁能量的波长足以激发所述分子并引起可检测的电磁能量发射；以及
d)将所述导电金属表面与电压源例如蓄电池、太阳能板、氢燃料电池或风源以及可致动开关相连，其中所述开关打开允许直流电通过所述导电金属表面输送，这减小或停止可检测的电磁能量发射，并且所述开关关闭为可检测的电磁能量发射提供可检测的电磁能量发射。
上面描述的方法可用于多种荧光检测系统中，包括但不限于微波加速的金属增强荧光(MAMEF)、微波触发的金属增强化学发光(MTMEC)或微波加速的表面增强拉曼散射(MASERS)。上面描述的方法可用于多种荧光检测系统中，包括但不限于微波加速的金属增强荧光(MAMEF)和微波加速的表面增强拉曼散射(MASERS)。此外，所述系统可以用于许多不同的分析中，包括但不限于免疫分析、杂交分析、共振能量转移分析、基于偏振/各向异性的分析、基于生物发光的分析、基于化学发光的分析、基于发光的分析或酶联免疫吸附分析。
在一个实施方案中，分子包含当与从UV或IR范围内的辐射接触时有能力发射荧光的荧光组分。优选，荧光组分是不干扰分析系统中任何化学反应的分子。
优选，导电金属表面采取“恰好连续”表面的形式，鉴于下述事实，它与连续导电表面和不连续表面不同：即“恰好连续”表面存在相连的金属材料或粒子网，所述金属材料或粒子包括但不限于纳米结构、岛、多孔金属基质、胶体或金属薄膜，所述薄膜厚度从约12到17nm并已被退火以提供具有粒子特性的破裂薄膜。金属材料可以包括任何形式的导电金属，包括银、金、铂、铝、铑和铜，并更优选金属材料是银或铜。
能够发射可检测的电磁能量的分子包括但不限于荧光团、发色团或发光团。能够发射荧光的化合物可以是固有荧光团或与外来荧光团结合的化合物。
另一方面，本发明涉及用于分析中的装置系统，所述系统包含：
a)基材上的导电金属表面，其中所述导电金属表面在所述基材上是几乎连续的并表现出低电阻，并且其中所述基材包括玻璃、石英或聚合材料；
b)位于导电金属表面上或其附近的分子，其中所述分子能够在激发时发射电磁能量；
c)用于激发所述分子并引起电磁能量发射的电磁能量源；
d)与所述导电金属表面相连、具有打开和关闭能力的直流电源，其中直流电由蓄电池、太阳能板、氢燃料电池或风源产生；以及
e)用于测量发射电磁能量的检测器和/或用于测量通过所述导电金属表面的直流电的检测器。
另一方面，本发明涉及为荧光信号在打开或关闭模式之间提供切换的、可用于检测装置中的方法和系统，其中强度的变化是定量的，并与发射分子的量相关。
从随后的公开内容和权利要求书中，本发明的其他方面和优点将更充分地显示。
附图说明
图1显示了在半连续的SiF上随着施加的“开”和“关”电压(2.1V，0.3A)，FITC的时间依赖性荧光发射(在544nm测量)(上图)。上图的插入图显示了半连续SiF薄膜的SEM图像。下图-SiF上的FITC随着2.1V，0.3A门控的开和关的荧光光谱。下图的插入图显示了实验设置的示意图和通过473nm陷波滤波器获得的照片。
图2显示了在几乎连续的SiF上随着施加的电压/电流门控的“开”和“关”(上图)，以及在不连续的SiF上随着施加的电压/电流门控的“开”和“关”(下图)，FITC的时间依赖性荧光发射(在544nm测量)。插入图显示了相应SiF的SEM图像。
图3显示了FITC随着施加的电压/电流门控的“开”和“关”的发射，其中当电流关闭时可检测到发射的强度。
图4显示了目前对金属增强荧光(上图)、用施加的电压/电流扰动的金属增强荧光(下图)进行说明的图示。F-荧光团，MEF-金属增强荧光，Ag-银纳粒。
图5显示了平均SiF电阻对不同SiF制备时间的图(上图)。对于几乎连续的、≈7Ω的薄膜来说，随着电压/电流门控的“开”和“关”，来自SiF的时间依赖性背景发射(在544nm测量)(下图)。
图6显示了SiF随着施加的电压/电流而变的吸收光谱(上图)。加热到不同温度的SiF的吸收光谱(下图)。
图7显示了施加电压/电流门控的“开”时，在几乎连续的SiF(7Ω)上FITC的荧光光谱(上图)。比色杯中的FITC随着温度而变的荧光光谱(下图)。
图8显示了随着施加的电压/电流门控的“开”和“关”，掺入到旋涂在半连续SiF上的0.25％PVA中的FITC的时间依赖性荧光发射(在524nm测量)(上图)。随着施加的电压/电流门控的“开”和“关”，SiF上的FITC的荧光光谱(下图)。
发明详述
在本发明中，第一次证明了电流对表面等离子体激元放大荧光信号的能力的影响，即对金属增强荧光(MEF)的影响。跨过低电阻的银岛薄膜(SiF)施加的直流电扰乱了紧邻荧光团的荧光增强。对于给定的施加电流来说，“恰好连续”的低电阻薄膜中的表面等离子体激元可用于荧光团偶极子耦合的很少，因此增强的荧光随着所施加电流的变化被门控。对于较厚的低电阻薄膜来说，这时在MEF被较低程度扰乱的金属中存在足够的载荷子，容易地在表面上形成由紧邻偶极子诱导的表面等离子体激元。
本文中使用的术语“恰好连续的薄膜”的意义是指具有从约2到200欧姆、更优选从约5到约60欧姆、最优选从约7到25欧姆的电阻的导电金属薄膜，其中与导电金属薄膜交通连接的直流电与没有接通直流电的薄膜相比，导致由邻近的荧光团、发色团或发光团发出的电磁发射强度的降低。
本发明的方法和系统可以用于众多的系统和方法中，包括在下列专利申请中描述的系统和方法：题为“使用金属增强荧光用于病原体检测的高灵敏度分析”(HIGH-SENSITIVITY ASSAYS FORPATHOGEN DETECTION USING METAL ENHANCEDFLUORESCENCE)的美国专利申请No.US 10/536,502；题为“基于金属增强荧光的传感方法”(METAL-ENHANCEDFLUORESCENCE-BASED SENSING METHODS)的美国专利申请No.11/917,804；题为“来自塑料基材的金属增强荧光”(METAL-ENHANCED FLUORESCENCE FROM PLASTICSUBSTRATES)的美国专利申请No.11/718,560；题为“微波加速的分析”(MICROWAVE ACCELERATED ASSAYS)的美国专利申请No.11/719,731；题为“微波加速的等离子体光子学”(MICROWAVEACCELERATED PLASMONICS)的美国专利申请No.11/695,397；题为“荧光微波显微术”(FLUORESCENCE MICROWAVEMICROSCOPY)的国际专利申请No.PCT/US08/65801；题为“微波聚焦的化学发光”(MICROWAVE FOCUSED CHEMILUMINESCENCE)的美国专利申请No.12/036,402；题为“角度依赖性金属增强荧光”(ANGULAR DEPENDENT METAL-ENHANCED FLUORESCENCE)的美国专利申请11/750,119；题为“金属增强的单线态氧产生”(METAL-ENHANCED SINGLET OXYGEN GENERATION)的美国专利申请No.12/020,571；题为“使用来自贵重金属纳米结构的等离子体散射的生物分析”(BIOASSAYS USING PLASMONIC SCATTERINGFROM NOBLE METAL NANOSTRUCTURES)的美国专利申请No.11/917,075；和题为“用于极化成像和受体/配体量子化的纳米结构”(NANOSTRUCTURES FOR POLARIZED IMAGING ANDRECEPTOR/LIGAND QUANTIZATION)的美国专利申请No.11/997,778，这些申请的内容在此出于所有目的引为参考。
已知导电金属表面能够对振荡偶极子的荧光团做出响应，并改变作为固有辐射衰变速率的发射速率和所发出的辐射的空间分布。理论家将这种效应描述为是由于靠近荧光团的光子模式密度的变化所致。在大多数分光测定中，溶液或介质对发射的和取样的辐射来说都是透明的。但是，对于自由空间条件来说存在几种重要的例外。一个众所周知的例子是表面增强的拉曼散射(SERS)。已知金属表面的存在能够将拉曼信号增加103到108倍，有报道甚至出现过1014-1016倍的更高增强。邻近的金属薄膜、岛或粒子的存在也能改变荧光团的发射性质。最熟知的效应是荧光被邻近金属淬灭。在金属表面50
Figure BPA00001248619100061
范围内的荧光团的发射几乎被完全淬灭。这种效应使用在用渐逝波激发的荧光显微术中。来自石英-水界面附近的细胞膜区域的发射被淬灭，允许选择性观察来自距固体-液体界面更远的细胞质区域的发射。除了淬灭之外，已知金属表面或粒子能够引起荧光的显著增加。引人注目的是，取决于距离和几何形状，金属表面或粒子对于荧光团的荧光发射来说能够产生几千倍的增强倍数。
在本文中可以互换使用的“荧光团”和“荧光标记物”，是指当被某种波长(激发波长)的辐射照射时能够发出具有不同波长(发射波长)的电磁能量例如光的任何物质，并打算包含能够与样品中的目标被分析物特异性相互作用或反应以提供一种或多种光信号的化学或生物化学分子或其片段。此外，荧光团包括外来和固有荧光团。外来荧光团是指与另一种物质结合的荧光团。固有荧光团是指其自身是荧光团的物质。示例性荧光团包括但不限于在《分子探针目录》(Molecular Probes Catalogue)中列出的荧光团，该文献在此引为参考。
代表性的荧光团包括但不限于Alexa
Figure BPA00001248619100071
350、丹磺酰氯(DNS-Cl)、5-(碘代乙酰胺)荧光素(5-IAF)、荧光素5-异硫氰酸酯(FITC)、四甲基罗丹明5-(和6-)异硫氰酸酯(TRITC)、6-丙烯酰基-2-二甲基氨基萘(丙烯酰丹)、7-硝基苯并-2-噁-1，3，-二唑-4-基氯化物(NBD-Cl)、溴化乙锭、荧光黄、5-羧基罗丹明6G盐酸盐、丽丝胺罗丹明B磺酰氯、德克萨斯红TM、磺酰氯、BODIPYTM、萘胺磺酸包括但不限于1-苯胺基萘-8-磺酸(ANS)和6-(对甲苯胺基)萘-2-磺酸(TNS)、蒽酰脂肪酸、DPH、十八碳四烯酸、TMA-DPH、芴基脂肪酸、荧光素-磷脂酰乙醇胺、德克萨斯红-磷脂酰乙醇胺、芘基-磷脂酰胆碱、芴基-磷脂酰胆碱、部花青540、1-(3-磺酸根合丙基)-4-[-β-[2[(二正丁基氨基)-6-萘基]乙烯基]吡啶鎓甜菜碱(Naphtyl Styryl)、3，3’-二丙基硫杂二羰花青(diS-C3-(5))、4-(对二戊基氨基苯乙烯基)-1-甲基吡啶鎓(di-5-ASP)、Cy-3碘代乙酰胺、Cy-5-N-羟基琥珀酰亚胺、Cy-7-异硫氰酸酯、罗丹明800、IR-125、噻唑橙、天青B、尼罗蓝、A1酞花青、噁嗪1，4′，6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)、Hoechst 33342、TOTO、吖啶橙、乙锭同二聚体、N(乙氧基羰甲基)-6-甲氧基喹啉鎓(MQAE)、Fura-2、钙绿、羧基SNARF-6、BAPTA、香豆素、phytofluors、晕苯和金属-配体复合物。
代表性的固有荧光团包括但不限于具有芳环结构的有机化合物，包括但不限于NADH、FAD、酪氨酸、色氨酸、嘌呤、嘧啶、脂类、脂肪酸、核酸、核苷酸、核苷、氨基酸、蛋白、肽、DNA、RNA、糖类和维生素。其他适合的荧光团包括酶-辅因子、镧系元素、绿色荧光蛋白、黄色荧光蛋白、红色荧光蛋白或其突变体和衍生物。
适合的化学发光标记物的实例包括但不限于过氧化物酶、细菌萤光素酶、萤火虫萤光素酶、官能化的铁-卟啉衍生物、鲁米那、异鲁米诺、吖啶酯、磺酰胺等。最近的化学发光标记物包括以次黄嘌呤作为底物的黄嘌呤氧化酶。触发剂包括过硼酸盐、Fe-EDTA复合物和鲁米诺。具体的化学发光标记物的选择取决于几种因素，包括制备标记成员的成本、用于与检测分子共价偶联的方法以及检测分子和/或化学发光标记物的大小。因此，化学发光触发剂的选择将取决于所使用的具体化学发光标记物。
优选，生物发光产生系统的组分是萤光素酶和萤光素。生物发光产生系统可以选自从栉水母、腔肠动物、软体动物、鱼、介形动物、昆虫、细菌、甲壳纲、环节动物和蚯蚓分离的系统。萤光素酶可以选自发光水母、海萤(vargula)、海肾、螅蛋白、珍蟾鱼、齿裂虫、奇巨口鱼、厚巨口鱼、萤火虫和细菌的系统。
金属增强荧光提供了增加的强度，同时缩短了发射寿命。发射增强可以根据待检测荧光团的类型和金属材料的类型、形状，在一定距离处观察到，注意到了薄膜与金属岛或胶体之间的区别。例如，当荧光团位于距金属表面约7nm到约40nm的距离时，可以观察到发射增强。优选的距离是距金属表面约7nm到约30nm，更优选为10nm到约20nm。
荧光可以使用装置进行检测，装置包括但不限于带有光源和检测器的荧光分光光度计。其他检测器可以包括GaAs-阴极PMT。还有的检测器可以包括光电倍增管。此外，对于装置来说具有单色器是有利的，以便可以使用特定波长的光来激发分子或在特定波长处检测发射。
激发光源可以包括弧灯和激光、激光二极管和发光二极管光源、以及单个和多个光子激发源。在另一个实施方案中，Ti-蓝宝石激光、激光二极管(LD)或发光二极管光源(LEDs)的使用可以与本发明的RNA分析一起使用。例如，使用700-1000nm处的2-光子激发，并且也使用短脉冲宽度(＜50pi)、高重复频率(1-80MHz)的激光二极管和LED(1ns，1-10MHz)光源)。可以通过使用连续稀释的RNA，开始用Ti-蓝宝石系统，然后使用LED和LD，来显示使用2-光子激发与1-光子相比的分析灵敏度的增加。如果荧光团同时吸收两个光子，它将吸收足够的能量升高到激发态。然后荧光团发出单个光子，其波长依赖于所使用的荧光团，典型在可见光谱内。使用具有红外光的TI-蓝宝石激光具有附加的益处，即较长的波长散射较少，这有利于高分辨率成像。重要的是，通过利用靠近金属粒子的局部激发，使用2-光子激发与1-光子激发相比获得的背景信号水平降低了。
当含有荧光团、发色团或发光团的样品被暴露于一定量激发辐射或参与发光化学反应时，荧光团、发色团或发光团发出可检测的辐射。当金属粒子与荧光团、发色团或发光团之间的距离为约5nm到约200nm时，发射强度可以对激发辐射的量做出响应而增加。发射强度的增强部分是由于荧光团在与金属表面紧邻时的局部激发，并导致发射分子的光稳定性增加。此外，与金属材料表面上的等离子体激元的相互作用和偶联提供了额外的增强。
在一个实施方案中，可以通过使用各种还原剂还原金属离子来制备金属粒子。例如，可以将氢氧化钠添加到快速搅拌的硝酸银溶液中，形成棕色沉淀。然后加入氢氧化铵重新溶解沉淀。将溶液冷却，向烧杯中加入干燥的石英玻片，然后加入葡萄糖。在搅拌2分钟后，将混合物加温到30℃。10-15分钟后，混合物转为黄绿色并变浑浊。银粒子的薄膜形成在玻片上，可以从它们的棕绿色看出。值得注意的是，玻片在混合物中保留的时间长度提供了不同的薄膜厚度。例如，如果沉积过程进行约5到10分钟，沉积的薄膜将被认为是“恰好连续的”。优选的金属是银和金。同样地，因为金在较短波长处的吸收，可以使用金。
银岛薄膜也可以通过在石英表面上对银盐进行化学还原来形成，其制作相对简单。
通过在玻璃或聚合物基材上放置官能性化学基团例如氰化物(CN)、胺(NH2)或硫醇(SH)，可以将能够形成恰好连续薄膜的量的金属材料结合到表面上。
可以通过使用薄膜来实现将生物分子或金属粒子定位在所需距离上。薄膜可以是聚合物薄膜、Langmuir-Blodgett薄膜或氧化物薄膜。
此外，金属薄膜可以通过真空气相沉积来制备。在沉积金属薄膜之前，可以将基材在1×10-4mbar下用空气等离子体预处理3分钟。银线可以在灯丝上熔化，在＜1×10-7mbar的压力下蒸发，并沉积在玻璃载片上。沉积速度可以通过灯丝电流进行调整(1埃/秒)，薄膜的厚度可以使用沉积室中位置与玻璃基材接近的石英晶体微天平来测量。优选，薄膜厚度在约12到17nm之间，然后薄膜可以在约200℃下退火约1小时。退火过程在不存在氧气的情况下进行，在退火过程开始之前，可以通过轮流地用超高纯度氮气(Airgas，MD)吹扫系统和泵抽真空来消除氧气。
方法和材料
具有不同电阻的银岛薄膜(SiF)的制备
SiF按照以前发表的4进行制备。在典型的SiF制备中，在干净的100mL玻璃烧杯中制备硝酸银溶液(0.5g在60ml去离子水中)。在室温下向连续搅拌的硝酸银溶液中加入200μL新鲜制备的5％(w/v)氢氧化钠溶液和2ml氢氧化铵。随后通过将烧杯放置在冰浴中，将溶液冷却到5℃，然后将硅烷-prepTM玻璃载片浸泡在溶液中，并加入新鲜的D-葡萄糖溶液(0.72g在15ml水中)。然后将混合物的温度加温到30℃。当混合物的颜色从黄绿色转变成黄棕色时，将烧杯移除加热，根据所需的电阻将玻片在溶液中保持5-30分钟。然后将玻片从混合物中取出，用水洗涤，在N2下干燥，使用GDT-11伏特计(GBInstrumentsTM)测量玻片电阻。
在表面上制备干样品
将300μL FITC(2.5mM)乙醇溶液滴在具有不同电阻的SiF表面上。将溶剂蒸发并研究样品。对于氧化和偶极子重新定向研究(对照样品)来说，将100μL FITC滴在1mL 0.25％(w/v)PVA水溶液中，并旋涂在SiF上(≈7欧姆)。该步骤产生了≈37nm厚的薄膜(使用AFM测量)，其阻止了氧气的扩散和电流流动过程中荧光团偶极子重新定向。
吸收和荧光测量
在Varian Cary 50UV-Vis分光光度计上记录吸收光谱。使用来自Ocean Optics，Inc.的Fiber Optic光谱仪(HD2000)，使用与玻璃/镀银表面成45度入射的473nm激发光，在与表面成90度的角度上收集荧光测量值。
电压门控实验
将直流电(Extech Instruments 382213)施加到具有不同电阻的SiF上，如图1下图插入图，并在荧光测量期间门控“开”和“关”。
SEM测量
在日立SU-70仪器上进行扫描电子显微术(SEM)。切取样品并固定在铝支持物上。使用20kV的高电压，以14994x放大倍数研究样品。
结果和讨论
有趣的是，具有高电阻的不连续薄膜使用直流电时没有显示出效应，具有低电阻的厚连续薄膜如以前所述6根本不适合于等离子体激元耦合。随后，本文提出的发现表明，具有低电阻的恰好连续的薄膜能够用于门控MEF“开和关”，并事实上具有“居间的”发射强度。由于最近对MEF用途的兴趣，这些发现对于基于芯片实验室的技术以及开发新的直接测量耦合量子/荧光的荧光检测器7，将是非常重要的。
以前被用于MEF的SiF4，8，沉积在胺涂层的玻璃载片上(Sigma)，该步骤被修改以允许SiF沉积更长的时间，以改变表面的电阻，如图5上图中所示。具体来说，沉积＞15分钟的薄膜被发现是完全导电的(电阻＜1Ω)，而沉积＜5分钟的薄膜是不导电的(电阻＞106Ω)。在约5-13分钟之间沉积的薄膜是“恰好”导电的，薄膜具有最高几百欧姆的电阻。表面的扫描电子显微镜(SEM)图像显示了薄膜的颗粒(高电阻)到连续(低电阻)性质，参见图1和2的插入图。
图1显示了施加的电压对涂层在半连续(恰好连续)薄膜(7Ω)上的荧光素(FITC)的影响，实验设置显示在图1下图的插入图中。显然，当电压被门控时，可以看到FITC荧光分别上升和下降。除了强度波动的幅度之外，门控过程中荧光发射光谱在光谱上原本是一致的。图1下图插入图中的照片显示了门控过程中真实的荧光。
在一系列详细的对照实验中，作为效应的可能原因，消除了银背景发射(图5下图)和如图6中所示的等离子体激元吸收随着所施加的电流/电压的变化。有趣的是，随着电压和电流被逐渐改变，FITC发射随后被相应地门控(图7上图)，强烈地表明观察到的现象是所施加的直流电的结果。
如图8中所示，表面氧化和偶极子重新定向也被考虑作为效应的可能原因。但是，在氮气吹扫的厚的0.25％w/v PVA薄膜(≈37nm)中，仍然容易观察到荧光门控效应。有趣的是考虑观察到的荧光信号变化的幅度。从图1上图中看到了电流门控过程中信号的≈50％的变化，但是据认为几种因素造成了荧光信号没有以甚至更大的程度变化：
(1)FITC分子涂层在银岛之上和之间，因此一大部分可能没有受到所施加电流的影响；
(2)在门控过程中存在轻微的升温，这增加了FITC发射，抵消了观察到的效应的幅度。图7下图显示了FITC发射随着温度而增加，因此不能造成门控现象。就此而言，SiF的等离子体激元吸收也显示出不被温度升高所扰乱，如图6下图中所示；以及
(3)门控和未门控情况下荧光信号随时间的总体降低，被认为是由于用恒定的CW 473nm激光激发的FITC的光稳定性。
因此，取决于可激发分子，电流门控过程中信号的变化可以高于在FITC中发现的50％。
图2研究了直流电对非常厚和薄的、即分别为低和高电阻的薄膜的效应。有趣的是，对于较厚的薄膜来说，MEF效应的幅度与图1中显示的低电阻薄膜、即190a.u相比明显较低(在t＝0时55a.u)。该观察结果与目前对MEF的理解和解释1-4，8完全相符，其中在本文使用的条件下，连续薄膜不能支持表面等离子体激元的产生，因此不能支持MEF的产生。具有非常高电阻(即低电流)的不连续薄膜，显示出较高的起始MEF效应，即＝260a.u.，如图2下图所示，与来自SiF的MEF的其他报道1-4，8相符。有趣的是，作为图1中显示的银薄膜，两种表面都显示出不太显著的荧光门控效应，表明对于“恰好连续的”薄膜来说效应更加显著。
理论上认为，导致如图1和2所示的观察到的结果的可能机制，包括当施加电流时，图1中显示的具有低电阻的恰好连续薄膜中的等离子体激元不可用于偶极子耦合和MEF，因此MEF效应被门控。对于图2上图中的厚薄膜来说，薄膜厚度足以允许电流流动，等离子体激元可自由用于MEF，观察到的荧光的净变化小得多。对于不连续薄膜来说，它是MEF的理想基材，对电流流动的电阻非常高，因此不能观察到门控效应，图2下图。图4下图绘出了对电压/电流门控的MEF效应提出的机制。
最后，将在本实验中发现的结果放在最近出版物的环境中，在所述最近出版物中，使用了扫描隧道显微镜在金属纳粒中激发了由于尖端的局部场引起的局部等离子体激元共振9，10。随后，Iwasaki等显示了与纳粒紧邻的发光团被随后激发，产生了分子发光10。本发明的系统在本质上是宏观的，事实上几乎是相反的机制。在光激发和诱导表面等离子体激元后，另外施加跨过纳粒薄膜的电流降低了荧光团偶极子耦合的程度，减小了总体MEF效应(图4下图)。有趣的是，尽管这些其他的报告是基于单个纳粒和无纳粒的薄膜10，但我们还未能在不需要附加的光激发的情况下同样地观察到荧光。与Iwasaki等的相似，本文提出的发现不依赖于极性，通过简单地在电导线各处进行切换获得了同样的结果(数据未显示)。
从图1中，可以看到当电压被门控时荧光发射几乎以双指数丧失，最终在几百秒、即＜3分钟内达到平台。有趣的是，在开始施加电流时，荧光强度事实上在几秒内非常快速地下降。后来，发射的丧失速度就慢得多。荧光的这种快速然后慢速的衰减据认为由两个竞争性的过程造成。开始时，由于如同前面讨论的，表面等离子体激元不能偶极子耦合因而不能增强荧光，因此荧光由电流通过而被关门控。在后来的时间中，观察到了银岛薄膜已轻微升温，如图7下图中所示，这导致了荧光素(FITC)荧光的增加。随后，快速的关门控效应、然后是由于薄膜对电流的电阻导致的缓慢表面加热，被认为造成了图1上图中观察到的荧光的双指数丧失。
尽管最初认为表面加热似乎使荧光门控观察结果复杂化，但据认为表面样品的轻微加热能够很好地促进快速分析的开发，正如最近通过使用聚焦低功率微波和金属纳粒所报道的11-13。
总之，在本发明中显示了通过跨过恰好连续的银薄膜添加施加的电流，第一次观察到了门控MEF。结果表明，对于具有施加的电流的恰好连续的薄膜来说，表面等离子体激元不是那样容易地可用于近场偶极子耦合，当使用较厚金属时效应消失，从根本上增加了可用于电流的载荷子的数量，并释放出表面等离子体激元用于偶极子耦合。
参考文献
本文引用的参考文献的内容在此出于所有目的引为参考。
(1)Geddes，C.D.；Lakowicz，J.R.，Journal of Fluorescence，2002，121-129.
(2)Aslan，K.；Gryczynski，I.；Malicka，J.；Matveeva，E.；Lakowicz，J.R.；Geddes，C.D.，Current Opinion in Biotechnology 2005，16，55-62.
(3)Zhang，Y.；Aslan，K.；Previte，M.J.；Geddes，C.O.，J Fluoresc2007，17，627-631.
(4)Aslan，K.；Geddes，C.D.，Analytical Chemistry 2005，77，8057-8067.
(5)Aslan，K.；Malyn，S.N.；Geddes，C.D.，Analyst 2007，132，1112-1121.
(6)Chowdhury，M.H.；Aslan，K.；Malyn，S.N：；Lakowicz，J.R.；Geddes，C.D.，Applied Physics Letters，2006，88，173104.
(7)Boehm，D.A.；Gottlieb，P.A.；Hua，S.Z.，Sensors and ActuatorsB-Chemical 2007，126，508-514.
(8)Aslan，K.；Zhang，Y.；Hibbs，S.；Baillie，L.；Previte，M.J.；Geddes，C D.，Analyst 2007，132，1130-8.
(9)Makinen，A.J.；Foos，E.E.；Wilkinson，J.；Long，J.P.，Journal ofPhysical Chemistry C，2007，111，8188-8194.
(10)Liu.H.W.；Ie，Y.；Nishitani R.；Aso，Y.；Iwasaki，H.，PhysicalReview B，2007，75.
(11)Aslan，K.；Geddes，C.D.，Analytical Chemistry，2005，77，8057-8067.
(12)Aslan，K.；Geddes，C.D.，Plasmonic，s 2006，1，53-59.
(13)Aslan，K.；Geddes，C.D.，Anal Chem，2007，79，2131-6.

Claims (20)

1.一种用于分析中的装置系统，所述系统包含：
a)基材上的导电金属表面，其中所述导电金属表面是沉积在所述基材上的恰好连续的薄膜并表现出低电阻，并且其中所述基材包括玻璃、石英或聚合材料；
b)位于导电金属表面上或其附近的分子，其中所述分子能够在激发时发射电磁能量；
c)用于激发所述分子并引起电磁能量发射的电磁能量源；
d)与所述导电金属表面相连、具有打开和关闭能力的直流电源；以及
e)用于测量发射电磁能量的检测器和/或用于测量通过所述导电金属表面的直流电的检测器。
2.权利要求1的系统，其中所述分子是荧光团、发色团或发光团。
3.权利要求1的系统，其中所述导电金属表面由选自金、银、铝和铜的金属制成。
4.权利要求1的系统，其中所述恰好连续的薄膜是电阻在约2到200欧姆范围内的导电金属薄膜。
5.权利要求1的系统，其中所述恰好连续的薄膜是电阻在约5到25欧姆范围内的导电金属薄膜。
6.权利要求1的系统，其中与所述导电金属薄膜交通连接的直流电的通过，导致与其中没有连接直流电的薄膜相比，由邻近的荧光团、发色团或发光团发射的电磁发射强度降低。
7.权利要求1的系统，其中电压源是蓄电池、太阳能电池或氢燃料电池。
8.权利要求1的系统，其中荧光团、发色团或发光团位于距所述金属表面约10到20nm处。
10.权利要求8的系统，其中所述系统用于免疫分析、杂交分析、共振能量转移分析、和基于偏振/各向异性的分析、基于生物发光的分析、基于化学发光的分析、基于发光的分析或酶联免疫吸附分析。
11.权利要求1的系统，其中所述激发电磁能量在从UV或IRE的范围内。
12.一种用于操纵来自金属增强荧光系统的发射的方法，所述方法包括：
a)在基材上提供导电金属表面，其中所述导电金属表面包含在所述基材上恰好连续的薄膜，并且其中所述基材包括玻璃、石英、铜或聚合材料；
b)将分子定位于所述导电金属表面附近，其中所述分子能够发射可检测的电磁能量，并且其中所述分子在距所述导电金属表面以增强发射的可检测电磁能量的强度的距离处定位；
c)施加电磁能量，所述电磁能量的波长足以激发所述分子并引起可检测的电磁能量发射；以及
d)将所述导电金属表面与电压源和可致动开关相连，其中所述开关打开允许直流电通过所述导电金属表面输送，这减小或停止可检测的电磁能量发射，且所述开关关闭为可检测的电磁能量发射提供可检测的电磁能量发射。
13.权利要求12的系统，其中所述分子是荧光团、发色团或发光团。
14.权利要求12的系统，其中所述导电金属表面由选自金、银、铝和铜的金属制成。
15.权利要求12的系统，其中所述恰好连续的薄膜是电阻在约2到200欧姆范围内的导电金属薄膜。
16.权利要求12的系统，其中所述恰好连续的薄膜是电阻在约5到25欧姆范围内的导电金属薄膜。
17.权利要求12的系统，其中与所述导电金属薄膜交通连接的直流电的通过，导致与其中没有连接直流电的薄膜相比，由邻近的荧光团、发色团或发光团发射的电磁发射强度降低。
18.权利要求12的系统，其中电压源是蓄电池、太阳能电池或氢燃料电池。
19.权利要求12的系统，其中所述荧光团、发色团或发光团位于距所述金属表面约10到20nm处。
20.权利要求19的系统，其中所述系统用于免疫分析、杂交分析、共振能量转移分析、和基于偏振/各向异性的分析、基于生物发光的分析、基于化学发光的分析、基于发光的分析或酶联免疫吸附分析。
21.权利要求12的系统，其中所述激发电磁能量在从UV或IR的范围内。
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110770552A (zh) * 2017-06-14 2020-02-07 陈敬红 高灵敏度光学检测系统
CN113529075A (zh) * 2020-04-20 2021-10-22 厦门大学 一种液态金属复合多孔膜及其制备方法和应用
CN114371199A (zh) * 2021-12-29 2022-04-19 复旦大学 采用电化学方法评估PATP-Au-MTI/AAO异质结膜的方法

Families Citing this family (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9500590B2 (en) 2006-02-13 2016-11-22 University Of Maryland, Baltimore County Assays for pathogen detection using microwaves for lysing and accelerating metal-enhanced fluorescence
US9719923B2 (en) 2007-07-18 2017-08-01 University Of Maryland, Baltimore County Tuning of metal enhanced emissions of long-lived luminescent compounds
CA2737048A1 (en) 2008-09-11 2011-03-18 University Of Maryland, Baltimore County Sonication-assisted metal-enhanced fluorescence (samef)-based bioassays
CA2739309C (en) 2008-09-17 2014-08-26 University Of Maryland, Baltimore County Plasmonic electricity
EP2504687B1 (en) 2009-11-25 2017-04-05 University of Maryland, Baltimore County System for detecting metal enhanced fluorescence from metallic nanoburger structures
WO2011081896A2 (en) * 2009-12-14 2011-07-07 University Of Maryland, Baltimore County Plasmonic electricity
WO2011084671A2 (en) 2009-12-17 2011-07-14 University Of Maryland, Baltimore County Mixed-metal substrates for metal-enhanced fluorescence
WO2011137325A2 (en) * 2010-04-30 2011-11-03 Pharmaseq, Inc. Metal nanoparticle structures for enhancing fluorescence-based assays
JP5716406B2 (ja) * 2011-01-13 2015-05-13 ソニー株式会社 細胞核観察基板及び細胞核観察装置
US8735175B2 (en) 2011-03-18 2014-05-27 Chris D. Geddes Multicolor microwave-accelerated metal-enhanced fluorescence (M-MAMEF)
EP2686683A4 (en) 2011-03-18 2014-10-01 Chris Geddes PHOTOLUMINESCENCE INCREASED BY METAL FROM CARBON NANOPOINTS
US9244012B2 (en) 2011-09-26 2016-01-26 University Of Maryland, Baltimore County Enhanced luminescence from nanopolished surfaces and plate wells
US9816990B2 (en) 2013-02-28 2017-11-14 University Of Maryland, Baltimore County Ultra-fast pathogen toxin detection assay based on microwave-accelerated metal-enhanced fluorescence
US8984800B2 (en) * 2013-03-15 2015-03-24 Technology Sg, L.P. Radiating systems for affecting insect behavior
US10379050B2 (en) 2015-01-13 2019-08-13 University Of Maryland, Baltimore County Spectral shifts and modifications in metal-enhanced fluorescence, phosphorescence and alpha-fluorescence
US10294451B2 (en) 2015-04-22 2019-05-21 University Of Maryland, Baltimore County Flow and static lysing systems and methods for ultra-rapid isolation and fragmentation of biological materials by microwave irradiation
US11561180B2 (en) 2015-07-22 2023-01-24 University Of Maryland, Baltimore County Hydrophilic coatings of plasmonic metals to enable low volume metal-enhanced fluorescence
AT517746B1 (de) * 2015-09-16 2018-03-15 Fianostics Gmbh Substrat

Family Cites Families (36)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5017009A (en) 1986-06-26 1991-05-21 Ortho Diagnostic Systems, Inc. Scattered total internal reflectance immunoassay system
GB8807488D0 (en) 1988-03-29 1988-05-05 Ares Serono Res & Dev Ltd Method of assay
CA2076709A1 (en) 1992-08-24 1994-02-25 Ulrich J. Krull Amplified fluorescence emission for chemical transduction
AT403961B (de) 1995-03-17 1998-07-27 Avl Verbrennungskraft Messtech Optochemisches messsystem mit einem fluoreszenzsensor
US5926284A (en) * 1997-04-30 1999-07-20 Fuji Photo Film Co., Ltd. Surface plasmon sensor
US7267948B2 (en) 1997-11-26 2007-09-11 Ut-Battelle, Llc SERS diagnostic platforms, methods and systems microarrays, biosensors and biochips
US6238909B1 (en) * 1999-05-04 2001-05-29 Motorola, Inc. Method and apparatus for obtaining electric field-enhanced bioconjugation
JP3783826B2 (ja) * 2000-01-17 2006-06-07 横河電機株式会社 バイオチップ読み取り装置
US7348182B2 (en) 2000-10-03 2008-03-25 Mirari Biosciences, Inc. Directed microwave chemistry
ATE537264T1 (de) 2000-10-03 2011-12-15 Mirari Biosciences Inc Verfahren und zusammensetzungen für die gerichtete mikrowellenchemiie
EP1373872A4 (en) * 2001-02-26 2009-04-22 Yeda Res & Dev CHEMICAL ANALYSIS METHOD AND DEVICE
AU2003221788A1 (en) 2002-04-30 2003-11-17 University Of Maryland, Baltimore Fluorescence sensing
US7095502B2 (en) 2002-08-06 2006-08-22 Joseph Lakowicz Optical structures for metal-enhanced sensing
AU2003268537A1 (en) 2002-09-10 2004-04-30 University Of Maryland, Baltimore Use of metallic particles to improve fluorescence imaging
EP1583948B1 (en) 2002-11-26 2010-09-01 University of Maryland Biotechnology High-sensitivity assays for pathogen detection using metal-enhanced fluorescence
US20040157237A1 (en) * 2003-02-10 2004-08-12 Americal Environmental Systems, Inc. Optochemical sensing with multi-band fluorescence enhanced by surface plasmon resonance
US20050053974A1 (en) 2003-05-20 2005-03-10 University Of Maryland Apparatus and methods for surface plasmon-coupled directional emission
US7384792B1 (en) * 2003-05-27 2008-06-10 Opto Trace Technologies, Inc. Method of fabricating nano-structured surface and configuration of surface enhanced light scattering probe
EP1644330B1 (en) 2003-06-27 2011-08-17 The University Of Maryland Quaternary nitrogen heterocyclic compounds for detecting aqueous monosaccharides in physiological fluids
EP1671118B1 (en) 2003-09-17 2011-11-02 University of Maryland, Baltimore County Cyanide sensing compounds and uses thereof
US7253452B2 (en) 2004-03-08 2007-08-07 Massachusetts Institute Of Technology Blue light emitting semiconductor nanocrystal materials
US7511285B2 (en) * 2004-07-16 2009-03-31 The Charles Stark Draper Laboratory, Inc. Methods and apparatus for biomolecule identification
WO2006052548A1 (en) * 2004-11-05 2006-05-18 University Of Maryland Biotechnology Institute Metal-enhanced fluorescence from plastic substrates
US8034633B2 (en) 2004-11-19 2011-10-11 University Of Maryland, Baltimore County Microwave accelerated assays
JP2006177725A (ja) 2004-12-21 2006-07-06 Sony Corp 物質間の相互作用検出部と該検出部を用いるバイオアッセイ用基板、装置及び方法
EP1856520B1 (en) 2005-01-03 2015-06-17 University Of Maryland Baltimore County Microwave accelerated plasmonics
CA2655079C (en) 2005-06-15 2013-12-10 University Of Maryland Biotechnology Institute Bioassays using plasmonic scattering from noble metal nanostructures
CA2656004A1 (en) 2005-06-17 2006-12-28 University Of Maryland Biotechnology Institute Metal-enhanced fluorescence-based sensing methods
CA2659640C (en) 2005-08-02 2011-11-15 University Of Maryland Biotechnology Institute Nanostructures for polarized imaging and receptor/ligand quantization: breaking the diffraction limit for imaging
US7648834B2 (en) 2006-01-17 2010-01-19 Moore Wayne E Plasmon fluorescence augmentation for chemical and biological testing apparatus
US8008067B2 (en) 2006-02-13 2011-08-30 University Of Maryland, Baltimore County Microwave trigger metal-enhanced chemiluminescence (MT MEC) and spatial and temporal control of same
US8980179B2 (en) 2006-05-17 2015-03-17 University Of Maryland, Baltimore County Angular-dependent metal-enhanced fluorescence
US9339485B2 (en) 2007-03-02 2016-05-17 University Of Maryland, Baltimore County Plasmonic engineering of singlet oxygen and/or superoxide generation
WO2008151247A1 (en) 2007-06-04 2008-12-11 University Of Maryland Biotechnology Institute Fluorescence microscope in a microwave cavity
US9023372B2 (en) 2007-07-18 2015-05-05 University Of Maryland Metal-enhanced fluorescence nanoparticles
WO2009148634A2 (en) 2008-01-30 2009-12-10 University Of Maryland Biotechnology Institute Conversion of just-continuous metallic films to large particulate substrates for metal-enhanced fluorescence

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110770552A (zh) * 2017-06-14 2020-02-07 陈敬红 高灵敏度光学检测系统
CN110770552B (zh) * 2017-06-14 2023-09-12 陈敬红 高灵敏度光学检测系统
CN113529075A (zh) * 2020-04-20 2021-10-22 厦门大学 一种液态金属复合多孔膜及其制备方法和应用
CN114371199A (zh) * 2021-12-29 2022-04-19 复旦大学 采用电化学方法评估PATP-Au-MTI/AAO异质结膜的方法

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Publication number Publication date
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AU2009241631A1 (en) 2009-11-05

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