CN102015768A - 与ed-b纤连蛋白特异性结合的放射性标记分子在治疗霍奇金淋巴瘤的方法中的用途 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及与ED-B纤连蛋白特异性结合的放射性标记分子在治疗霍奇金淋巴瘤、尤其是原发难治性霍奇金淋巴瘤或化疗后复发霍奇金淋巴瘤患者和治疗预定接受初步组合式疗法的霍奇金淋巴瘤患者的方法中的用途。

Description

与ED-B纤连蛋白特异性结合的放射性标记分子在治疗霍奇金淋巴瘤的方法中的用途
本发明涉及与ED-B纤连蛋白特异性结合的放射性标记分子在治疗霍奇金淋巴瘤(Hodgkin lymphoma)、尤其是原发难治性霍奇金淋巴瘤或化疗后复发霍奇金淋巴瘤的方法中的用途。
霍奇金淋巴瘤(HL)简述：
HL是一种罕见的恶性淋巴瘤，在西方世界每100,000人中的年发病率为2-3例，主要影响20-30岁的人群。HL占世界范围内每年新发生肿瘤的约1％，在美国每年确诊7500到8000个新的HL病例。通常位于颈结节口链的非触痛无痛淋巴结病是该疾病最常见的临床表现，存在于约75％的病例中。HL的诊断基于患病淋巴组织(通常是增大的淋巴结)中炎性细胞之间掺杂的极少数特征性和成因性巨细胞(Reed-Sternberg和霍奇金细胞)的鉴定。根据REAL分类和WHO概要，基于形态学、表型、基因型和临床发现，HL可以细分为两种主要类型：淋巴细胞为主型HL(全部病例的4-5％)和经典型HL(病例的96％)，其可以被进一步细分为结节硬化型，混合细胞型，淋巴细胞耗竭型和富于淋巴细胞经典型HL(Harris等，1999)。但是，对于典型性HL，组织病理学分类对治疗决策没有影响(Pileri等，2005；Diehl等，2005；Ng等，2007)。在绝大多数情况下(98％)，恶性Reed-Sternberg和霍奇金细胞来自于生发中心B细胞(Kuppers等，1994)。极少情况下它们来自于T细胞(Muschen等，2000)。由各种细胞因子的自分泌或旁分泌生成维持的活性环境可以代表患病淋巴组织中99％或更多的细胞群。由于目前未知病因学因素，HL在单个淋巴结的生发中心中发展，然后通过接触相邻的淋巴结链进行扩散。
当前的疾病控制：
应当进行可疑淋巴结的切除活检进行初步诊断。包括CT扫描(胸部，腹部，骨盆)的分期(staging)步骤、骨髓活检以及对全身症状和不良预后因素的分析是鉴定疾病的程度(根据Cotswolds modified Ann Arbor分类)以及后续确定个体患者最适疗法所必需的。
与组织病理学无关，按照临床危险因素和治疗结果可以将典型性HL患者分成3个主要亚组：早期良好HL，早期不良HL和晚期HL。对于这些患者组，限定标准的初步治疗法。不同的以及尚未明确的治疗选择当前用于治疗原发难治性疾病或化疗后复发疾病。当前大多数HL患者的初步治疗是组合式疗法，包括初始的多剂化疗，随后是累及野外线束放射。
标准疗法：
对于早期良好HL，当前治疗是变化的。直到最近，扩大野辐射(30-40Gy，累及和相邻淋巴结区域的辐射)被认为是标准疗法。但是，因为初始完全应答(90-98％)后的高复发率(30-40％)和致命性长期影响(继发性癌症，心血管和肺部问题)，扩大野放疗正被由有限量化疗(2-4个治疗循环)继之以累及野辐射(20-30Gy；Ferme等，2007)组成的组合形式方法取代。
为了促进放射野设计，根据用于分期的Rye分类将淋巴系统分为数个淋巴结区域(Lukes等，1966)。累及野不仅包括明显的(在CT扫描中)累及增大淋巴结，还包括相同淋巴结区域内的其他淋巴结。因此，在例如显示单个增大颈部淋巴结的患者中，累及野放疗将包括全部同侧颈部淋巴结链和所有锁骨上淋巴结，因为这些结被认为属于一个而且一样的淋巴结区域。就此而言，当前累及野(淋巴结区)是用于HL患者放疗的最小放射野大小。但是仍不清楚是否有可能将累及野辐射剂量降低到20Gy或更低，或将放射野限制到指定淋巴结区内实际增大的淋巴结上而不损害整体临床结果。
此外，在对HL研究患者(HL10，HL11)的全部诊断成象进行集中预测性审查中，一组独立的专家级放射肿瘤学家确定控制疾病发展和限定累及野辐射体积中的困难。2792个审查病例中的40％发现累及野覆盖度是最适度以下的(Eich等，2008)。
对于早期不良HL患者，组合式疗法被认为是标准的。但是，连同其他因素如最适化疗方式，以及化疗周期的数目，照射野大小以及在这些区域内的放射剂量都是引起激烈争论的主题。无论如何，在过去数十年中这类患者群的治疗结果被显著改善，主要归因于组合式疗法的使用。历史上，单独的放射或化疗伴随大约50％的高复发率。4个有效化疗周期后继之以30Gy的累及野放疗是用于不良预后早期HL患者的标准疗法。目前，大部分临床试验探索更有效化疗和进一步降低的辐射剂量的新组合以确定最佳疗法来减少晚期发病和致死率并保持不发生首次复发的高概率(Diehl等，2005)。
直至20世纪中叶，晚期HL患者都被认为是无药可治的。伴随多剂多周期化疗的出现，这类高风险患者群体的大部分可以实现完全缓解。但是，数份报道表明只接受化疗治疗的患者无法实现长期效果或主要在先前累及的结节位点继续进展(Fabian等，1994)。数个试验研究了具有差异化结果的初步化疗后巩固放疗的作用。在涉及超过1700位患者的14项研究的综合分析中，比较了两种研究设计：在额外设计中给相同化疗增加辐射，和在平行设计中将一个治疗臂中两个周期化疗替换为另一治疗臂中的放射治疗。在额外设计中，放疗将复发的危险比降低约40％。但是，对于被分析的任何亚组的患者来说没有检测到存活益处。在平行设计中，在无病存活方面没有显著差异，但在只接受化疗治疗的患者中整体存活率显著更高，因为除了HL以外的原因(包括白血病)导致组合形式组中更多的死亡(Loeffler等，1998)。在预测性EORTC研究中，化疗后完全缓解的患者被随机分配不接受进一步治疗或接受累及野放疗(30Gy)。在6个化疗周期后接受累及野放疗的部分缓解(33％)的患者明显受益于增加的放疗，因为与在6个化疗周期后经历完全缓解但不接受放疗治疗的患者相比，他们实现类似的无复发和整体生存率(Aleman等，2007)。因此，为晚期HL患者推荐的标准疗法是6-8个化疗周期加上对残余肿瘤和/或巨大疾病(bulky disease)的累及野放疗(20-30Gy)。
原发难治性HL或化疗后复发HL：在化疗后实现初次完全缓解后复发的患者可以利用补救疗法实现第二次完全缓解。这类补救疗法包括对先前未放射区域局部复发的放疗，常规的补救化疗，或结合自体血液干细胞疗法(ASCT；Josting等，2000)的高剂量化疗(HDCT)。利用常规化疗在只接受放射治疗后复发的患者中取得令人满意的结果。但是，初次化疗或组合化放疗后复发性疾病的治疗仍未被明确定义。可以尝试补救放疗，常规化疗，补救化疗和结合ASCT的HDCT。该环境下假定的最积极的疗法，在一项前瞻性研究中，结合ASCT的HDCT在55％的患者中不导致治疗失败(Schmitz等，2002)。
老年HL患者的治疗：与更年轻的患者相比，大于60岁的患者(所有患者中的10-15％)情况要更糟。在治疗期间这类患者群通常面临高比例的毒性和高频率的早期复发，表明需要更低的毒性以及有效的治疗形式。但是当前没有针对老年HL患者的特殊标准疗法。
治疗结果和长期毒性：
过去50年中在开发针对HL的风险适应性治疗形式方面的进展真正反映在10年的无肿瘤生存率为80％-90％和以下事实：这些肿瘤幸存者将具有与同龄健康个体几乎相等的预期寿命。
令人遗憾地，在10-20年后，有高比例的初次疗法的晚期发生不良事件(至90年代中期)影响25％-30％的患者。治疗后(尤其是在上隔肌辐射后)的这类长期并发症，包括肺(例如纤维化)、心脏(例如心肌损伤引起的心脏功能不全)，甲状腺功能障碍，继发性癌症(急性骨髓性白血病，乳腺癌和肺癌)和生殖腺功能障碍(丧失性欲，性功能障碍，不孕)。大部分这种毒性实际上是由外线束野放射造成的，这是一种没有选择性的方法，其还破坏正常组织，尤其是在化疗后。这种并发症的比率抵销了大量无肿瘤幸存者的初始成功率并且由于治疗后果而不是原发性病引起的死亡导致生存曲线的晚期下降。因此，问题在于应允许多少过度治疗和长期毒性以调整原发性HL疗法(尤其是组合式疗法)的这类高成功率(Diehl等，2005)。
尽管利用减少的辐射野、降低剂量或剂量强度的现代组合式疗法将长期并发症率降调到一定程度，但从功效和长期毒性考虑，只有时间能说明现有的某些时候仍是侵入性的疗法(例如现在对于早期良好HL和对化疗部分应答的晚期HL或巨大疾病也是标准的组合式疗法)是否优于之前的治疗选择。已经设计临床试验探究降低强度组合式疗法，集中在将放疗剂量减少到最小，其可以是20Gy(结果仍然待定)。
控制HL患者的现存限制：
尽管大多数患者的HL可以被治愈，医疗领域的关心仍然存在，并且需要被解决：
1.原发难治性HL或多次化疗法后复发HL患者的不足治疗结果。
2.对于在预先照射的淋巴结区复发的HL患者的放疗选择的缺乏
(没有进一步显著的外线束放射，可能归因于在放射野体积中破坏正常组织)。
3.在治疗过程中假定，尤其是在初步治愈性组合式疗法的情况下(化放疗；对于所有HL亚组)。
4.将外线束放射限制到淋巴结区内增大的淋巴结(累及野内的共焦放射)可能使患者具有实现足够整体结果的风险。
5.就功效和更重要地毒性来说，对于老年HL患者(＞60岁；所有全体的15％)的不足疗法(尤其是组合式疗法)。
6.HL患者的外线束放射(EBR)在技术上是困难的，需要专业的额外训练。尤其是在质量控制审查中，在40％的HL被测患者中累及野覆盖度是最适度以下的(Eich等，2008)。
原则上，类似的限制还适用于表达ED-B纤连蛋白(Sauer等，2006)并接受组合式疗法治疗的其他恶性血液肿瘤，包括局部侵入性淋巴瘤(例如I期和II期弥散性大B细胞淋巴瘤)，局部惰性淋巴瘤(例如I期和II期滤泡性淋巴瘤，小淋巴细胞性淋巴瘤)，以及罕见非霍奇金淋巴瘤如MALT-淋巴瘤，外周T细胞淋巴瘤，间变性大细胞淋巴瘤和膜细胞淋巴瘤。
因此，医疗上迫切需要肿瘤靶向因而选择性放疗选择，如131I-L19-SIP放射免疫疗法，其可以与外线束放疗(EBR)、化疗结合或单独应用以进一步改善HL以及可能地其他淋巴瘤患者的整体治疗结果。
ED-B纤连蛋白：
到目前为止已知的与新血管发生和组织重建有关的最具选择性的癌胚胎标记物之一是纤连蛋白(FN)的额外结构域B(ED-B)(Castellani等，1994)。FN是高分子量细胞外基质(ECM)成分，在广泛的健康组织和体液中大量表达。由于在初始转录物水平的可变剪接产生各种不同的FN同种型。ED-B(91个氨基酸的小结构域，在小鼠和人中序列相同)通常不存在于血浆和组织纤连蛋白中，除了再生子宫内膜和卵巢的一些血管之外(Alessi等，2004)。重组抗体片段增加的结合亲和力以及化合价导致了改良的肿瘤血管发生的靶向作用(Viti等，1999)。但是，它可以在与新血管发生有关的活性组织重建期间插入纤连蛋白分子，从而围绕新血管和在恶性肿瘤基质以及经历重建和血管发生的其他组织中聚集。最近，已经产生大量对纤连蛋白ED-B结构域特异的优质抗体。尤其是人单链Fv抗体片段scFv(L19)(其显示对ED-B的皮摩尔结合亲和力)已在实验肿瘤模型(Viti等，1999)和癌症患者(Santimaria等，2003)中证实选择性靶向肿瘤新血管系统。最近显示在包括霍奇金淋巴瘤的各种恶性血液肿瘤中检测到相当量但可变的血管相关ED-B表达(Sauer等，Poster at ASH conference，2006)。
纤连蛋白的ED-B结构域是在小鼠、大鼠和人中相同的91个氨基酸序列，通过可变剪接插入纤连蛋白分子中，特异性聚集在新血管结构周围，代表了分子干涉的靶(Zardi等1987；Carnemolla等1989；Castellani等，1994)。使用针对ED-B结构域的人重组抗体L19，已经在不同肿瘤模型中证实了体内新血管系统靶向的可能性(Tarli等1999；Viti等1999)
特异性识别ED-B-纤连蛋白结构域的单克隆抗体描述于WO 97/45544。
单克隆抗体L19描述于WO 99/58570。
WO 01/62298在第8页第12行涉及Pini等(1998)J.Biol.Chem.273：21769-21776描述的L19VH和L19VL结构域序列。Pini等在第21772页表II中描述了L19的部分序列。L19具有EMBL登录号AJ 006113。
用于癌症治疗的放射性靶向的原理由Kassis AI(2005)在Expert Opin.Drug Delivery Vol.：2(6)，981-991中以及Press OW等(2000)在Seminars inOncology Vol.：27，No.6(Suppl.12)，62-73中描述。
L19-SIP及其用于放射免疫疗法的用途描述于WO 03/076469。Berndorff等(2005)Clin.Cancer Res.Vol.：11(19Suppl.)，7053S-7063S描述了131I-L19-SIP作为优选的抗体形式通过靶向额外结构域B纤连蛋白用于固体肿瘤的放射免疫疗法的用途。“SIP”代表小免疫蛋白(small immunoprotein)。L19-SIP是抗体形式，其中L19-scFv与IgE的εs2-CH4结构域连接且其中两条单体链形成通过S-S桥共价连接的同二聚体(参见例如WO03/076469；Borsi等，2002)。CH4是允许IgE分子中二聚化的结构域，εs2-同种型含羧基末端的半胱氨酸，其通过链间二硫键稳定IgE二聚体。在L19-SIP的最终SIP分子中，ScFv(L19)通过GGSG接头与εs2CH4结构域连接。援引加入WO03/076469的内容。
医疗上迫切需要有效治疗霍奇金淋巴瘤(尤其是原发难治性HL或化疗后复发HL)的药物。此外对于适于组合式疗法的所有亚组的HL患者来说医疗上迫切需要降低外线束放疗剂量或放疗野或以上两者以便降低该治疗的长期毒性率。
本发明涉及与ED-B纤连蛋白特异性结合的放射性标记分子在治疗霍奇金淋巴瘤患者的方法中的用途。
在优选的实施方案中，本发明涉及与ED-B纤连蛋白特异性结合的放射性标记分子在治疗原发难治性HL或化疗后复发HL的方法中的用途。
本发明还涉及治疗霍奇金淋巴瘤患者尤其是原发难治性HL或化疗后复发HL的方法，包括施用治疗有效量的与ED-B纤连蛋白特异性结合的放射性标记分子。
尤其是霍奇金淋巴瘤选自经典型霍奇金淋巴瘤(cHL)，尤其是结节硬化型，混合细胞型，淋巴细胞耗竭型或富于淋巴细胞经典型霍奇金淋巴瘤。但是，实施方案还适用于淋巴细胞为主型霍奇金淋巴瘤(HL)，但治疗形式与经典型HL患者相比差异很大。尤其是组合式疗法很少用于淋巴细胞为主型霍奇金淋巴瘤，其趋向于在切除术后具有良性过程。
在尤其优选的实施方案中，对于患有原发难治性HL或化疗后复发HL的患者，没有提供进一步有效的治疗。这些患者被认为患有末期HL。
优选本发明的治疗和用途使得患者的无进展生存延长。
出人意料的发现利用131I-L19-SIP的治疗对于诱导接近完全缓解来说是非常有效的(18F-FDG-PET扫描和CT扫描)，同时其在患有末期经典型HL的晚期患者中也出人意料的被良好耐受。因此，放射性标记的分子出人意料的适合于HL的单一疗法，尤其适合于原发难治性HL或化疗后复发HL患者。
因此，在优选的实施方案中，放射性标记的分子可以出人意料的用于单一疗法。所述分子可作为单次治疗或重复治疗施用，例如每4-6周全量。由于131I-L19-SIP有利的短血清PK谱(大约24小时)及其长肿瘤选择性存在时间(至少96小时)，其他治疗计划(例如每天，每隔一天，每周，或每两周)也是可能的，取决于输送的放射性剂量和总体急性毒性。
根据使用方式和使用途径以及患者需求，施用的放射性标记分子(尤其是放射性标记的L19-SIP)的剂量将有变化。通常，人的单次剂量范围是约2-200MBq/kg体重(10-1,000μg/kg体重)。给予的放射性标记的抗体的剂量不会对体内最放射敏感的器官(剂量限制器官)造成毒性。在动物试验中，红骨髓被鉴定为131I标记抗体的剂量限制器官。
原发难治性HL患者或化疗后复发HL患者通常临床情况较差，经常受到之前治疗的不利作用以及癌症进展的困扰。尽管如此，有时这些患者还要接受利用外线束放疗(EBR)对多个部位的高剂量累及野放射。由于化疗后的EBR产生严重的不良事件和后期毒性，需要因为放射性照射减少而被更好耐受的放疗方式。类似地，作为所有风险组HL患者的初步或有时第二疗法的组合式疗法与相对高比例的后期毒性有关，主要归因于组合式疗法的放射部分(放射剂量，发生野大小)。因此，对于HL患者(包括全部风险组)的初步组合式疗法来说需要对后期毒性更好的耐受并且至少等效的放疗方式。
本发明还涉及治疗霍奇金淋巴瘤的方法，包括施用治疗有效量的至少一种与ED-B纤连蛋白特异性结合的放射性标记分子，继之以或伴有标准或降低放疗剂量的分次EBR。
本发明还涉及与ED-B纤连蛋白特异性结合的放射性标记分子在治疗霍奇金淋巴瘤的方法中的用途，所述霍奇金淋巴瘤优选为原发难治性霍奇金淋巴瘤患者或化疗后复发霍奇金淋巴瘤患者，包括施用治疗有效量的至少一种与ED-B纤连蛋白特异性结合的放射性标记分子，其中所述分子的施用继之以或伴有标准或降低放疗剂量的分次EBR。
因此，在另一个优选的实施方案中，放射性标记分子可以与EBR联合施用，这样的话应用放射性标记分子尤其是131I-L19-SIP，继之以或伴有一定时间段内标准(例如对于难治性疾病)或降低(例如对于初步治疗)放疗剂量的分次EBR。这样的时间段通常是1到50天，优选7到21天，取决于总体用量。131I-L19-SIP的使用时间通常是10分钟到数小时，尤其是约30分钟到5小时。尤其是使用时间为约60分钟。所述施用优选在静脉内进行。
本发明具体涉及一种治疗HL患者的方法，所述HL患者尤其是原发难治性HL患者或化疗后复发HL患者和预定进行初步组合式疗法的所有临床风险亚型的HL患者，包括
a)施用治疗有效量的与ED-B纤连蛋白特异性结合的放射性标记分子，和
b)将EBR仅仅输送到累及野
根据使用131I-L19-SIP后的放射量测定，EBR优选特别适合于降低的剂量(对于初步疗法来说)以便降低长期毒性或标准剂量(对于复发/难治患者来说)以便克服难治性疾病。
步骤a)和b)可以同时或相继进行。
累及野优选被理解为患病的淋巴结区。
更优选首先施用放射性标记抗体，然后在1-4周时间段内施用EBR。
因此，在进一步优选的实施方案中，可以给预定接受初步组合式疗法的HL患者施用放射性标记分子，其中在施用放射性标记分子的同时或之后给予EBR，所述放射性标记分子尤其是131I-L19-SIP，其中与标准EBR剂量相比，所述EBR剂量降低至少约20％，优选至少约30％，最优选至少约50％。
本发明还涉及一种治疗HL患者的方法，所述HL患者尤其是预定接受初步组合式疗法的老年HL患者，包括
a)施用治疗有效量的与ED-B纤连蛋白特异性结合的放射性标记分子，和
b)将EBR仅仅输送到累及野
这样的话与标准EBR剂量相比，步骤a)中的EBR剂量至少降低约20％，优选至少约30％，最优选至少约50％。
“标准EBR”表示约20到30Gy的放射剂量，在最多约4-6周的时间段内以每天约2Gy的分次方式输送。
在另一个优选的实施方案中，可以给HL患者施用放射性标记分子，所述HL患者预定接受初步组合式疗法，包括所有临床风险亚组，或预定接受放疗或化放疗的原发难治性HL或化疗后复发HL患者，其中在施用放射性标记分子(尤其是131I-L19-SIP)的同时或之后给予的EBR严格限制在最初增大的淋巴结。甚至更优选以共焦方式使用EBR以显著降低EBR放射野的大小。取决于个体临床情况，EBR剂量可以是标准的(20-30Gy)或降低至少约20％，优选至少约30％，最优选至少约50％。优选EBR剂量是减低的。这两种建议的对现有EBR方案的改变旨在基本上降低对HL患者的组合式化放疗的长期和/或后期毒性，但不损害抗肿瘤功效。
出人意料的，观察到131I-L19-SIP对HL病变选择性的精确定位，以及更出人意料的，与患者中可忽略毒性有关的极好治疗反应。
因此，本发明的治疗方法和用途为霍奇金淋巴瘤如继发性恶性肿瘤，心血管和肺部问题以及激素/生殖腺缺陷提供延长的无进展和总体存活和/或长期和/或后期毒性降低的组合式(化放疗)治疗。
因此，本发明还涉及与ED-B纤连蛋白特异性结合的放射性标记分子在降低霍奇金淋巴瘤患者的组合式(化放疗)治疗的长期和/或后期毒性的方法中的用途。在优选的实施方案中，所述长期和/或后期毒性选自继发性恶性肿瘤，心血管问题和精神运动性缺陷。
因此，本发明还涉及与ED-B纤连蛋白特异性结合的放射性标记分子在实现HL患者延长的无进展生存的方法中的用途。
本发明还涉及降低霍奇金淋巴瘤患者的组合化放疗治疗的长期和/或后期毒性的方法，所述毒性尤其选自继发性恶性肿瘤、心血管和肺部问题以及激素缺陷，包括施用治疗有效量的与ED-B纤连蛋白特异性结合的放射性标记分子。
在另一优选的实施方案中，本发明的放射性标记分子用于治疗高风险霍奇金淋巴瘤，尤其选自广泛性疾病(extensive disease)，巨大疾病和缓慢反应性霍奇金淋巴瘤患者。尤其是本发明的放射性标记分子在标准化疗(例如COPP/ABVD或BEACOPP疗法)后施用，继之以EBR。这种治疗出人意料的导致完全缓解(CR)机会的增加。
因此本发明涉及至少一种与ED-B纤连蛋白特异性结合的放射性标记分子在治疗霍奇金淋巴瘤患者的方法中的用途，所述患者尤其是预定接受组合式疗法的霍奇金淋巴瘤患者，其中所述分子的施用是在标准化疗之前并且继之以EBR。
由于极低的毒性，利用与ED-B纤连蛋白特异性结合的放射性标记分子的治疗甚至可以与化疗例如COPP/ABVD或BEACOPP疗法同时进行。
因此本发明涉及至少一种与ED-B纤连蛋白特异性结合的放射性标记分子在治疗霍奇金淋巴瘤患者的方法中的用途，所述患者尤其是预定接受组合式疗法的霍奇金淋巴瘤患者，其中同时进行化疗例如COPP/ABVD或BEACOPP疗法。
本发明还涉及实现霍奇金淋巴瘤患者延长的无进展生存和/或降低霍奇金淋巴瘤患者的组合化放疗治疗的长期和/或后期毒性的方法，所述毒性尤其选自继发性恶性肿瘤、心血管和肺部问题以及激素缺陷，包括与化疗(例如COPP/ABVD或BEACOPP疗法)同时施用治疗有效量的与ED-B纤连蛋白特异性结合的放射性标记分子。
本发明还涉及一种治疗HL患者的方法，所述HL患者尤其是预定接受组合式疗法的那些患者，包括以下步骤：
a)进行标准化疗，
b)施用治疗有效量的至少一种与ED-B纤连蛋白特异性结合的放射性标记分子，和
c)输送EBR
EBR剂量可以是标准剂量或降低剂量或减少的放射野，例如仅仅限于患病淋巴结或累及组织。
所述患者优选是人。
各种施用途径是可能的，例如静脉内、皮下或腹腔内施用，其中静脉内施用是优选的。
通过将具有所需纯度的活性剂与任选的药学上可接受的载体、赋形剂或稳定剂(Osol，1980)以冻干制剂或水溶液的形式混合制备本发明所用活性剂的治疗制剂以便保存。
在优选的实施方案中，特异性识别ED-B纤连蛋白的分子是抗体或抗体模拟物，尤其是抗体。
优选所述抗体是人的。
在优选的实施方案中，所述抗体与纤连蛋白(FN)的ED-B结构域特异性结合。这类抗体是现有技术已知的，例如描述于WO 97/45544。51774A
在另一个实施方案中，特异性识别ED-B纤连蛋白的抗体结合隐含表位。这类抗体的实例是BC-1抗体。
优选与纤连蛋白ED-B结构域结合的这类抗体显示对FN的ED-B结构域的高亲和力，尤其是所述抗体以纳摩或亚纳摩亲和力与ED-B纤连蛋白结构域结合。现有技术已知这类抗体，例如描述于WO99/58570。51282A WO
尤其优选的是L19抗体。
特异性识别ED-B纤连蛋白的抗体，尤其是L19抗体，可以使用其各种抗体形式。优选的抗体形式是完整IgG，Fab，(Fab′)2，scFv，双抗体，minibody或小免疫蛋白(SIP)形式。对于L19抗体来说特别优选的是完整IgG，scFv和SIP形式。最优选的是scFv形式的L19抗体。数种免疫蛋白形式是现有技术中已知的，例如基于IgE的CH3结构域或εs2-CH4结构域。L19基于IgE的εs2-CH4结构域的优选SIP形式和完整IgG形式的L19例如描述于WO03/076469。L19-SIP 52291A
在进一步优选的实施方案中，所述抗体含L19抗体的至少一个CDR序列。
在尤其优选的实施方案中，所述抗体包括L19抗体的CDR序列；尤其它包括SEQ ID no.6到11所示的序列。
在进一步优选的实施方案中，所述抗体包含L19抗体的VL和VH链。在优选的实施方案中，它包括至少一条SEQ ID No.01所示的VH链或至少一条SEQ ID No.02所示的VL链。在尤其优选的实施方案中，它包括至少一条SEQ ID No.01所示的VH链和至少一条SEQ ID No.02所示的VL链。
在进一步优选的实施方案中，所述抗体包括一条SEQ ID No.01所示的VH链和一条SEQ ID No.02所示的VL链。在进一步优选的实施方案中，所述抗体包括两条SEQ ID No.01所示的VH链和两条SEQ ID No.02所示的VL链。
在进一步优选的实施方案中，VH和VL链由抗体接头连接。
在优选的实施方案中，所述抗体接头包括SEQ ID No.03所示的序列，或与SEQ.ID.No.03所示序列具有至少90％相同性的序列。
在进一步优选的实施方案中，所述抗体以二聚体形式存在。这类抗体可以是小免疫蛋白形式(SIP)，尤其是基于CH3或εs2CH4结构域，尤其优选的基于εs2CH4，最优选的基于SEQ ID No.4所示的εs2CH4结构域。
在尤其优选的实施方案中，单体形式的L19-SIP包括SEQ ID No.12所示的序列，最优选L19-SIP具有SEQ ID No.12所示序列。
优选的，所述抗体是人的。
抗体可以是单体的或多体的，例如二聚体的。二聚体或其他多聚体形式可以共价或非共价形成。L19(scFv)和AP39可使用单体形式。L19-SIP优选的使用二聚体形式。
尤其是对于L19-SIP来说，单体通过S-S桥连接，如Borsi等所述，Int.J.Cancer，2002，102：534-539。或者，L19抗体可以使用完整IgG形式。在优选的实施方案中，L19-SIP形成共价二聚体。
在另一个优选的实施方案中，所述抗体采用单体形式。尤其是L19抗体采用scFv形式，如WO99/58570所述，或采用带有标签的scFv形式，如WO 03/055917所述。尤其是可以根据本发明使用WO 03/055917中描述的AP38或AP39。
优选使用本领域技术人员已知的方法重组产生抗体。尤其是可以使用原核或真核表达系统，例如酵母或哺乳动物表达系统。
与ED-B纤连蛋白特异性结合的分子被放射性标记。
用于标记本发明抗体的方法公开于Berndorff等，Clin.Cancer Res.，2005；11(Suppl.)，p.7053s-7063s。
优选放射性同位素适合于治疗应用，尤其是人类中的治疗应用。
在优选的实施方案中，放射性同位素是选自以下元素的放射性同位素或其混合物：Re、In、Y、Lu或I。
在甚至更优选的实施方案中，放射性同位素选自124I，125I，131I，186Re，188Re 203Pb，67Ga，43Sc，47Sc，111In，97Ru，67Cu，90Y，121Sn，153Sm，166Ho，105Rh，177Lu，32P，33P，59Fe，77As，89Sr，109Pd，111Ag，117mSn，142Pr，161Tb，166Dy，169Er，194Ir，198Au，199Au，212Pb，225Ac，211At，212Bi，213Bi，223Ra，224Ra和/或172Lu或其混合物。
最优选的是使用131I和90Y。
许多合适的放疗剂是本领域已知的，将它们与例如抗体附着的方法也是本领域已知的(参见例如US 5,021,236和US 4,472,509)。一些附着方法涉及使用金属螯合物，使用例如有机螯合剂如DTPA与抗体附着(US4,472,509)。还可以通过接触碘化钠或碘化钾和化学氧化剂如次氯酸钠(Redshaw等，1974)或酶促氧化剂如乳过氧化物酶(Marchalonis等，1969)将放射性标记的抗体碘化。利用131I的放射性标记优选通过共价键合到抗体直接进行。
在本发明尤其优选的实施方案中，使用131I标记的抗体，其中采用其单体形式的抗体包括L19的CDR序列。
在甚至更优选的实施方案中，采用其单体形式的131I-标记抗体包括L19的Vl结构域，L19的Vh结构域和εs2-CH4结构域。
在尤其优选的实施方案中，使用选自L19(scFv)，AP39，AP38和L19-SIP的131I-标记抗体。
最优选的是使用131I标记的L19-SIP(131I-L19-SIP)。
抗体接头是任意接头，优选肽接头，其适合于将Vh与Vl结构域连接。合适的接头例如描述于Bird等，1988；Huston等，PNAS USA，85，5879-5883，1988；EP 0573551；EP 0623679和EP 0318554，援引加入这些文献。
本文使用的“特异性结合”或“特异性识别”是指结合相应靶。通常，结合分子、抗体、抗体片段或抗体模拟物以至少约1x10-7M、优选至少约1x10-9M的亲和力结合并且其与预定靶结合的亲和力至少比其与除了预定靶之外的非特异靶标(例如BSA，酪蛋白)或密切相关靶结合的亲和力大至少两倍。
本文使用的“抗体”涵盖全长抗体，包括天然抗体，单克隆抗体，多克隆抗体和多特异性抗体(例如双特异性抗体)，人抗体，人源化抗体，嵌合抗体和完整IgG抗体以及抗体片段。
术语“抗体片段”是指全长抗体的一部分，其中可变区或功能性能力(即与靶的特异性结合)被保留。抗体片段的实例包括但不限于Fab，Fab′，F(ab′)2，Fd，Fv，scFv和scFv-Fc片段，双抗体，线性抗体，小免疫蛋白形式，单链抗体，minibody，由抗体片段形成的双抗体和由抗体片段形成的多特异性抗体。抗体片段通常比完整抗体小。因此，药代动力学是不同的，一些抗体片段只由一条多肽链组成，这使得更容易制备。优选抗体片段是scFv，(scFv)2或小免疫蛋白形式。小免疫蛋白形式可以是基于CH3结构域(例如描述于US 5,837,821)或人IgE的εs2CH4-结构域(例如描述于WO03/076469)的形式。
术语“单克隆抗体”(mAb)是指获自基本上同质抗体群的抗体，即除了可能少量存在的天然发生的突变外，各个抗体包括相同的群。单克隆抗体对单个抗原决定簇(还被称为表位)是高度特异的。修饰词“单克隆”表示针对相同表位的基本上同质的抗体群，其不应被理解为要求通过任意特定方法制备抗体。单克隆抗体可以通过本领域已知任意技术或方法制备；例如，Koehler等最先描述的杂交瘤方法，1975，Nature 256：495，或本领域已知的重组DNA方法(参见例如美国专利号4,816,567)。在另一个实施例中，还可以使用以下描述的技术：Clackson等，1991，Nature 352：624-628，和Marks等，1991，J.Mol.Biol.222：581-597从噬菌体抗体文库分离单克隆抗体。
与此相反，制备多克隆抗体得到的抗体通常是免疫球蛋白同种型和/或类型的异质群，并且显示多样表位特异性。
本文使用的术语“嵌合”抗体是一种单克隆抗体类型，其中重链和/或轻链的一个或多个区域或结构域的一部分氨基酸序列或全部氨基酸序列与来自另一物种或属于另一免疫球蛋白类型或同种型的单克隆抗体的对应序列相同或同源，或是来自另一物种或属于另一免疫球蛋白类型或同种型的单克隆抗体的对应序列的变体，或来自共有序列。
可以通过对全长抗体的酶处理产生某些类型的抗体片段。抗体的木瓜蛋白酶消化产生两个相同的抗原结合片段，称为“Fab”片段，每个都具有单个抗原结合位点，剩余的“Fc”片段，这样称呼是因为其易结晶的能力。Fab片段还包含轻链的恒定区和重链的CH1结构域。胃蛋白酶处理产生F(ab′)2片段，所述片段具有两个抗原结合位点并且仍然能够交联抗原。
Fab′片段不同于Fab片段在于在CH1结构域的C端存在一些其他残基，包括来自抗体绞链区的一或多个半胱氨酸。此处将Fab′命名为Fab-SH，其中恒定区的半胱氨酸残基载有自由硫醇基。F(ab′)2抗体片段是由铰链区半胱氨酸残基连接的Fab′片段对。抗体片段的其他化学偶联也是已知的。
“Fv”是最小抗体片段，其包含完整的抗原识别和结合位点，其由紧密、非共价结合的一条重链和一条轻链可变区的二聚体组成。在这种构型中，每个可变区的3个CDR相互作用以在VH-VL二聚体表面限定出抗原结合位点。总的来说，6个CDR给抗体赋予抗原结合特异性。
“单链Fv”或“scFv”抗体片段是单链Fv变体，包括抗体的VH和VL结构域，其中所述结构域以单多肽链形式存在并且其能够识别和结合抗原。scFv多肽任选包含位于VH和VL结构域之间的多肽接头，其使scFv能够形成用于抗原结合的所需三维结构(参见例如Pluckthun，1994，In ThePharmacology of Monoclonal Antibodies，Vol.113，Rosenburg and Moore eds.，Springer-Verlag，New York，pp.269-315)。
术语“双抗体”是指具有两个抗原结合位点的小抗体片段。每个片段包含与轻链可变区(VL)连结的重链可变区(VH)。通过利用一种非常短以致相同链上的两个结构域不能配对的接头，连接的VH-VL结构域不得不与另一条链的互补结构域配对，产生两个抗原结合位点。
双抗体更全面的描述于例如EP 404,097；WO 93/11161和Hollinger等，1993，Proc.Nat.Acad.Sc.USA 90：6444-6448。
人源化抗体或人源化抗体片段包括免疫球蛋白氨基酸序列变体或其片段，它们能够结合预定抗原并且包括一或多个实质上具有人免疫球蛋白氨基酸序列的骨架区(FR)和一或多个实质上具有非人免疫球蛋白氨基酸序列的CDR。这种非人氨基酸序列在此处被称为“输入(import)”序列，其通常取自“输入”抗体结构域，尤其是可变区。通常，人源化抗体包括至少非人抗体的CDR或HVL，插入人重链或轻链可变区的FR之间。
“天然抗体”在此处被定义为异四聚体糖蛋白，通常约150,000道尔顿，由两条相同的轻(L)链和两条相同的重(H)链组成。每条轻链通过一个二硫键与重链共价连接以形成异二聚体。异四聚体通过这类异二聚体的两条相同重链之间的共价二硫键形成。尽管轻链和重链都通过一个二硫键连接，两条重链之间二硫键的数目随免疫球蛋白同种型而不同。每条重链和轻链还具有规则间隔的链内二硫键。每条重链在氨基端具有可变区(VH)，之后是3个或4个恒定区(CH1，CH2，CH3和CH4)，以及CH1和CH2之间的铰链区。每条轻链具有两个结构域，氨基端可变区(VL)和羧基端恒定区(CL)。VL结构域与VH结构域非共价缔合，而CL结构域通常通过二硫键与CH1结构域共价连接。特定氨基酸残基被认为在轻链和重链可变区之间形成界面(Chothia等，1985)。术语“高变”是指以下事实，可变区内的某些序列在抗体间序列普遍不同并且包含直接参与每种特定抗体对于特异性抗原决定簇的结合和特异性的残基。轻链和重链可变区的高变性集中于被称为互补决定区(CDR)或高变环(HVL)的3个节段。CDR通过序列比较确定，如Kabat等，1991，In：Sequences of Proteins of Immunological Interest，5th Ed.PublicHealth Service，National Institutes of Health，Bethesda，MD.，而HVL根据可变区的三维结构在结构上确定，如Chothia和Lesk所述，1987，J.Mol.Biol.196：901-917。
这两种方法产生稍有不同的CDR鉴定，而结构确定是优选的。通过Kabat确定，CDR-L1定位于轻链可变区的大约残基24-34，CDR-L2在轻链可变区的大约残基50-56，和CDR-L3在轻链可变区的大约残基89-97；CDR-H1定位于重链可变区的大约残基31-35，CDR-H2在重链可变区的大约残基50-65，CDR-H3在重链可变区的大约残基95-102。
术语“标记”是指可检测的化合物或组合物，它们与结合ED-B纤连蛋白的分子(尤其是抗体)直接或间接缀合。
尽管纤连蛋白(FN)是单一FN基因的产物，获得的蛋白可以以除了翻译后修饰以外、源于其初始RNA转录物的可变剪接的多种形式存在。这种多态性(在人FN中导致多至20种不同同种型，从而产生具有不同溶解性、细胞粘附和配体结合特性的FN)为细胞提供了以组织特异性方式改变细胞外基质(ECM)组成的可能性。可变剪接发生在初始RNA转录物的3个区域：外显子使用或跳过(skipping)导致两种III型重复的包括或遗漏，额外结构域B(ED-B，也称为EIIIB或EDIII)，其插入FN III型重复III7和III8之间，或/和额外结构域A(EDA，也称为EIIIA或EDI)，插入FN III型重复III11和III12之间。这类剪接存在许多脊椎动物中，包括非洲爪蟾，鸡，大鼠，狗和人。“ED-B”结构域应被理解为人纤连蛋白的额外结构域B。它经常被称为ED-B，EIIIB或EDII。
“抗体模拟物”表示基于蛋白骨架(“支架”)的结合分子，其与靶特异性结合并且与抗体和抗体片段不同。这类支架描述于Binz等，2005，Nat.Biotechnol.23，1257-1268。与ED-B纤连蛋白特异性结合的抗体模拟物描述于Grabulovski等，J.Biol.Chem.，2007，282：3196-3204。
εS2-CH4定义于Erqiu Li等“Mammalian cell expression of dimeric smallimmuno proteins(SIP)”(1997)Protein Engineering Vol.：10，no.6第731-736页。结构域的序列显示于SEQ ID No.4。
SEQ ID No.1表示L19-SIP抗体的Vh链。
SEQ ID No.2表示L19-SIP抗体的Vl链。
SEQ ID No.3表示连接L19-SIP抗体Vl和Vh的抗体接头。
SEQ ID No.4表示L19-SIP的εs2-CH4结构域部分。
SEQ ID No.5表示连接L19-SIP的scFv部分和εs2-CH4结构域的接头。
SEQ ID No.6到11表示L19抗体的CDR序列。
SEQ ID No.12表示单体形式的L19-SIP的序列。
附图说明
图1：霍奇金淋巴瘤患者中淋巴瘤病变处的131I-L19-SIP摄取：
18F-FDG PET扫描显示多个肿大纵隔淋巴结，肺内病变(最左列，前4幅图像；肺内病变标记的)以及腰主动脉淋巴结(最低一行最左边的图像)处剧烈的葡萄糖代谢，提示临床活性淋巴瘤病变。该患者还接受185MBq的静脉注射，随后按照治疗意向，5.55GBq的131I-L19-SIP。在施用该剂量12天后获得全身和SPECT-CT图像以证实特异性肿瘤靶向。显示胸(第2-4行)以及上腹部(最下面一行)的SPECT-CT冠状(右上方栏)和经轴图像，证明131I-L19-SIP选择性摄入多个18F-FDG热点(avid)淋巴瘤病变处。
图2：用131I-L19-SIP放射免疫治疗前后霍奇金淋巴瘤患者的18F-FDGPET扫描：
基于肿瘤病变的选择性摄取和充分的骨髓放射量测定(病变/红髓吸收剂量比例≥10)，该霍奇金淋巴瘤患者在诊断剂量后接受治疗剂量的131I-L19-SIP(5.55GBq；150mCi)。在放射免疫治疗前(图2a)和4周后(图2b)进行18F-FDG PET扫描，显示治疗后多个淋巴结肿大处(包括之前外线束辐射过的腰主动脉淋巴结)的18F-FDG摄取几乎完全消失。该发现明确预示了霍奇金淋巴瘤患者中临床上有意义的肿瘤应答的诱导(Gallamini等2007and2008)。肺内靶病变(最大肺部病变，参见图1)吸收的放射性剂量据剂量测定法估算为大约14Gy，而相应的红骨髓剂量据估算为大约1.3Gy。在用131I-L19-SIP放射免疫治疗4周后，标准CT扫描显示，根据RECIST标准该患者实现非常好的部分反应(表1)。
参考文献：
Aleman BM，Raemaekers JM，Tomisic R等Involved-field radiotherapyfor patients in partial remission after chemotherapy for advanced Hodgkin’slymphoma.Int J Radiat Oncol Biol Phys 67：19-30，2007.
Alessi P，Ebbinghaus C，Neri D.，Viti F，Tarli L，Giovannoni L，Zardi L，Neri D.Molecular targeting of angiogenesis.Biochim Biophys Acta 1654：39-49，2004.
Berndorff等，Radioimmunotherapy of solid tumors by targeting extradomain B fibronectin：identification of the best-suited radioimmunoconjugate.Clin.Cancer Res.11(Suppl.)：7053s-7063s，2005
Bird等，Science 242，423-426，1988.
Bombardieri E，Coliva A，Chiesa C等Phase I study with antifibronectinI-131-L 19SIP：First dosimetric and therapeutic results.J Nuclear Med 48 suppl2.abs 1681pp.398p，2007
Borsi L，Balza E，Bestagno M等，Selective targeting of tumoral vasculature：comparison of different formats of an antibody(L 19)to the ED-B domain offibronectin.Int J Cancer 102：75-85，2002.
Carnemolla B，Balza E.Siri A等A tumor-associated fibronectin isoformgenerated by alternative splicing of messenger RNA precursors.J Cell Biol108：1139-1148，1989.
Castellani P，Viala G，Dorcaratto A等，The fibronectin isoform containingthe ED-B oncofetal domain：a marker of angiogenesis.Int J Cancer 59：612-618，1994.
Castellani P，Viale G，Dorcaratto A，Nicolo G，Kaczmarek J，Querze G，Zardi L.The fibronectin isoform containing the ED-B oncofetal domain：amarker of angiogenesis.Int J Cancer 59：612-8，1994.Erratum in：Int J Cancer62：118，1995.
Chothia等，1985，J Mol.Biol.186：651-663
Chothia and Lesk，1987，J.Mol.Biol.196：901-917
Clackson等，1991，Nature 352：624-628，
Diehl V，Re D，Josting A.Hodgkin lymphoma：clinical manifestations，staging，and therapy.Chapter 75，pp 1347-1377.In Hematology，basic principlesand practice，4th edition，ed.R.Hoffman，EJ Benz，S.Shattil，B.Furie，H.Cohen，L.Silberstein，P.McGlave.2005 Elsvier Inc，Philadelphia PA.
Eich HT，Engenhart-Cabillic R，Hansemann K等Quality control ofinvolved field radiotherapy in patients with early-favorable(HD 10)andearly-unfavorable(HD11)Hodgkin’s lymphoma：an analysis of the GermanHodgkin Study Group.Int J Radiat Oncol Biol Phys.2008EPUB
Fabian C，Mansfield C，Dahlberg S等Low-dose involved field radiationafter chemotherapy in advanced Hodgkin lymphoma：A Southwest OncologyGroup randomized study.Ann Intern Med 120：903-912，1994.
Ferme C，Eghbali H，Meerwaldt JH等Chemotherapy plus involved-fieldradiation in early-stage Hodgkin lymphoma.N Engl J Med 357：1986-71，2007
Gallamini A，Hutchings M，Rigacci L等Early interim2(18F(fluoro-2-deoxy-d-glucose positron emission tomography is prognosticallysuperior to international prognostic score in advanced-stage Hodgkin’slymphoma：a report from a joint Italian-Danish study.J Clin Onc 25：3746-3752，2007.
Gallamini A，Hutchings M，Ariqdor A，Polliack A.Early interim PET scanin Hodgkin lymphoma：where do we stand？(Review)Leuk Lymphoma49：659-62，2008.
Harris NL，Jaffe ES，Diebold J等World Health Organization classificationof neoplastic disease of the hematopoietic and lymphoid tissues：report of theclinical advi sory committee meeting-Airlie House，Virginia，November 1997.J Clin Oncol 17：3835-3849，1999.
Hollinger等，1993，Proc.Nat.Acad.Sc.USA 90：6444-6448
Huston等，PNAS USA.85，5879-5883，1988.
Josting A，Wolf J，Diehl V.Hodgkin lymphoma：prognostic factors andtreatment strategies.Curr Opin Oncol 12：403-411，2000.
Kabat等，1991，In：Sequences of Proteins of Immunological Interest，5thEd.Public Health Service，National Institutes of Health，Bethesda，MD.
Kassis AI in Expert Opin.Drug Delivery 2：981-99，2005.
Koehler等，1975，Nature 256：495
Kuppers R，Rajewski K，Zhao M等Hodgkin lymphoma：Hodgkin andReed-Sternberg cells picked from histological sections show clonalimmunoglobuline rearrangements and appear to be derived from B cells atvarious stages of development.Proc Natl Acad Sci U S A 91：10962-10966，1994.
Loeffler M，Brosteanu O，Hasenclever D等Meta-analysis ofchemotherapy versus combined modality treatment trials in Hodgkin’s disease.International Database on Hodgkin’s disease.Overview Study Group.J ClinOnc 16：818-829，1998.
Lukes RJ，Carver LF，Hall TC等Report of the nomenclature committee insymposium：Obstacles to the control of Hodgkin lymphoma.Cancer Res26：1311，1966.
Marchalonis J.J.，Biochem.J.，113，299，1969
Marks等，J Mol Biol 222：581-597，1991
Muschen M，Raj ewski K，Brauninger A等Rare occurrence of classicalHodgkin lymphoma as a Tcell lymphoma.JExp Med 191：387-394，2000.
Ng A，Weiss L，Fredman A.Hodgkin lymphoma.Chapter 73；pp 1689-1711.In Clinical Radiation Oncology，2nd edition，2007；eds Gunderson and Tepper，Elsevier，Churchill Livingston，Philadelphia，PA.
Osol A.Ed.Remington′s Pharmaceutical Sciences 16th edition，1980.
Pileri SA，Falini B，Stein H.Pathobiology of Hodgkin’s lymphoma.Chapter 74，pp 1325-1346.In Hematology，basic principles and practice，4thedition，ed.R.Hoffman，EJ Benz，S.Shattil，B.Furie，H.Cohen，L.Silberstein，P.McGlave.2005 Elsvier Inc，Philadelphia，PA.
Pini A，Viti F，Satuccia A等Design and use of a phage display library.Human antibodies with subnanomolar affinity against a marker of angiogenesiseluted from a two-dimensional gel.J Biol Chem 273：21769-21776，1998
Pluckthun，1994，In The Pharmacology of Monoclonal Antibodies，Vol.113，Rosenburg and Moore eds.，Springer-Verlag，New York，pp.269-315
Press OW等Seminars in Oncology 27(Suppl.12)：62-73，2000.
Redshaw M.R.，Lynch S.S.，J.Endocrinol.，60，527，1974.
Santimaria M，Moscatelli G，Viale GL，Giovannoni L，Neri G，Viti F，Leprini A，Borsi L，Castellani P，Zardi L，Neri D，Riva P.Immunoscintigraphicdetection of the ED-B domain of fibronectin，a marker of angiogenesis，inpatients with cancer.Clin Cancer Res 9：571-579，2003.
Sauer等，AACR Proceedings of the 87th Annual Meeting，Washington Apr1-52006，Cancer Res 2006
Schmitz N，Pfistner B，Sextro M 等Aggressive conventionalchemotherapy compared with high-dose chemotherapy with autologoushaematopoietic stem-cell transplantation for relapsed chemosensitive Hodgkin’sdisease.A randomized trial.Lancet 359：2065-2071，2002.
Tarli等(1999)Blood，Vol.：94，pages 192-198
Viti等(1999)Cancer Res.Vol.：347
Viti F，Tarli L，Giovannoni L，Zardi L，Neri D.Increased binding affinityand valence of recombinant antibody fragments lead to improved targeting oftumoral angiogenesis.Cancer Res 1999；59：347-352.
Zardi等(1987)EMBO J.Vol.：6pages 2337-2342
实施例
给患有结节硬化性霍奇金淋巴瘤的28岁男性患者静脉内注射131I-L19-SIP。该患者接受多次先前化疗，对腰主动脉淋巴结肿大的外线束放射疗法(总共36Gy)和免疫疗法均告失败。他表现为复发病，这是CT和18F-FDG PET-CT扫描记录的。首先给该患者施用185MBq(5mCi)的131I-L19-SIP用于生物分布鉴定和放射量测定。因为观察到与红骨髓相比淋巴瘤结节中极好的131I-L19-SIP摄取比例，随后用治疗剂量的131I-L19-SIP(5.5GBq；150mCi)治疗该患者。这种治疗在临床上是没有事故的，只伴有轻度、简单和瞬时的血小板减少，它们是自限性的(spontaneously resolved)。按照(Bombardieri等，2007)的描述，在131I-L19-SIP注射后的不同时间点获得全身、点(spot)和SPECT-CT图像(GE InfiniaTM
Figure BPA00001253325000221
)。特别地，本文所示的131I-L19-SIP SPECT-CT图像是在放射免疫疗法剂量注射后12天获得的。在使用诊断剂量的131I-L19-SIP(185MBq)后估算针对正常器官和淋巴瘤病变的放射量测定作为吸收剂量(单位为Gy)。
出人意料的发现在用131I-L19-SIP放射免疫治疗4周后，标准CT扫描显示，根据RECIST标准该患者实现非常好的部分反应(表1)。
此外在放射免疫治疗前(图2a)和4周后(图2b)进行的18F-FDG PET扫描中出人意料的发现治疗后多个淋巴结肿大处(包括之前外线束辐射过的腰主动脉淋巴结)的18F-FDG摄取几乎完全消失。
表1.用131I-L19-SIP放射免疫治疗前后霍奇金淋巴瘤患者中CT记载的淋巴瘤病变
  治疗前(mm)   治疗后4周(mm)
  上叶，右肺   9.5x8   7.56.4
  上叶，左肺   11.3x7   7.8x3
  主动脉后淋巴结   28x15   14x7.6
  腔静脉后淋巴结   18   12
Figure IPA00001253324500011
Figure IPA00001253324500021
Figure IPA00001253324500031
Figure IPA00001253324500051

Claims (21)

1.与ED-B纤连蛋白特异性结合的放射性标记分子在治疗霍奇金淋巴瘤患者的方法中的用途，所述患者优选选自患有原发难治性霍奇金淋巴瘤的患者或化疗后复发霍奇金淋巴瘤患者。
2.与ED-B纤连蛋白特异性结合的放射性标记分子在实现霍奇金淋巴瘤患者延长的无进展生存或总体生存和/或降低霍奇金淋巴瘤患者的组合化放疗治疗的长期和/或后期毒性的方法中的用途，其中在化疗同时施用与ED-B纤连蛋白特异性结合的放射性标记分子。
3.权利要求1的用途，其中所述治疗是单一疗法。
4.权利要求1到2任一项的用途，其中另外地与使用特异性结合ED-B纤连蛋白的放射性标记分子同时或相继只对患者的累及野给予EBR。
5.权利要求4的用途，其中所述EBR剂量与标准EBR剂量相比至少降低约20％，优选至少约30％，最优选至少约50％。
6.权利要求1到5任一项的用途，其中所述霍奇金淋巴瘤患者是老年患者。
7.权利要求4到6任一项的用途，其中所述EBR野与标准EBR野相比在大小上被限制到只在指定淋巴结区域当前受影响的那些淋巴结，其中放射优选以共焦方式进行并且放射剂量是标准的或降低至少约20％。
8.权利要求1、2和4到7任一项的用途，其中所述分子的施用是在标准化疗之前并继之以EBR。
9.与ED-B纤连蛋白特异性结合的放射性标记分子在治疗霍奇金淋巴瘤的方法中的用途，所述霍奇金淋巴瘤优选为原发难治性霍奇金淋巴瘤患者或化疗后复发霍奇金淋巴瘤患者，包括施用治疗有效量的至少一种与ED-B纤连蛋白特异性结合的放射性标记分子，其中所述分子的施用继之以或伴有标准或降低放疗剂量的分次EBR。
10.与ED-B纤连蛋白特异性结合的放射性标记分子在降低霍奇金淋巴瘤患者的组合式疗法(化放疗)的长期和/或后期毒性的方法中的用途，所述毒性尤其选自继发恶性肿瘤，心血管和肺部问题以及激素和生殖腺缺陷。
11.至少一种与ED-B纤连蛋白特异性结合的放射性标记分子在治疗霍奇金淋巴瘤患者的方法中的用途，其中同时进行化疗。
12.权利要求1到11任一项的用途，其中所述与ED-B纤连蛋白特异性结合的分子是抗体或抗体模拟物。
13.权利要求12的用途，其中所述抗体与纤连蛋白的ED-B结构域特异性结合。
14.权利要求12或13的用途，其中所述抗体包括L19抗体的CDR序列。
15.权利要求12到14任一项的用途，其中所述抗体是完整IgG，Fab，(Fab′)2，scFv，双抗体，minibody或小免疫蛋白(SIP)形式。
16.权利要求14或15的用途，其中所述抗体选自L19(scFv)，AP38和AP39。
17.权利要求15到16任一项的用途，其中小免疫蛋白(SIP)形式的抗体包括εs2CH4结构域。
18.权利要求17的用途，其中所述抗体是L19-SIP。
19.权利要求1到18任一项的用途，其中与ED-B纤连蛋白特异性结合的分子利用选自以下的放射性同位素或其混合物进行标记：Re，In，Y，Lu或I。
20.权利要求19的用途，其中所述与ED-B纤连蛋白特异性结合的分子利用131I或90Y进行放射性标记。
21.权利要求1到20任一项的用途，其中所述与ED-B纤连蛋白特异性结合的放射性标记分子是131I-L19-SIP。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2017084017A1 (zh) * 2015-11-16 2017-05-26 合肥立方制药股份有限公司 Ed-b蛋白在诊断组织增生中的应用

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE102009047243A1 (de) 2009-11-27 2011-06-01 Orgentec Diagnostika Gmbh Monospezifische Polypeptidreagenzien

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1639195A (zh) * 2002-03-11 2005-07-13 菲洛根股份公司 应用抗体分子对肿瘤血管进行选择性定向
WO2007047609A2 (en) * 2005-10-19 2007-04-26 Center For Molecular Medicine And Immunology INHIBITION OF PLACENTA GROWTH FACTOR (PlGF) MEDICATED METASTASIS AND/OR ANGIOGENESIS

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4957939A (en) 1981-07-24 1990-09-18 Schering Aktiengesellschaft Sterile pharmaceutical compositions of gadolinium chelates useful enhancing NMR imaging
US4472509A (en) 1982-06-07 1984-09-18 Gansow Otto A Metal chelate conjugated monoclonal antibodies
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
DE3856559T2 (de) 1987-05-21 2004-04-29 Micromet Ag Multifunktionelle Proteine mit vorbestimmter Zielsetzung
DE3920358A1 (de) 1989-06-22 1991-01-17 Behringwerke Ag Bispezifische und oligospezifische, mono- und oligovalente antikoerperkonstrukte, ihre herstellung und verwendung
ATE241011T1 (de) 1991-02-27 2003-06-15 Micromet Ag Serin-reiche peptidlinker
DK1136556T3 (da) 1991-11-25 2005-10-03 Enzon Inc Fremgangsmåde til fremstilling af multivalente antigen-bindende proteiner
DE69232604T2 (de) 1992-11-04 2002-11-07 City Of Hope Duarte Antikörperkonstrukte
GB9610967D0 (en) 1996-05-24 1996-07-31 Cambridge Antibody Tech Specific binding members,materials and methods
TWI259837B (en) 1998-05-11 2006-08-11 Eidgenossische Tech Hochscule Specific binding molecules for scintigraphy, conjugates containing them and therapeutic method for treatment of angiogenesis
US8623373B2 (en) 2000-02-24 2014-01-07 Philogen S.P.A. Compositions and methods for treatment of angiogenesis in pathological lesions
RU2352582C2 (ru) 2002-01-03 2009-04-20 Шеринг Акциенгезельшафт Конъюгаты, содержащие антитело, специфическое для ed-в-домена фибронектина, и их применение для обнаружения и лечения опухолей

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1639195A (zh) * 2002-03-11 2005-07-13 菲洛根股份公司 应用抗体分子对肿瘤血管进行选择性定向
WO2007047609A2 (en) * 2005-10-19 2007-04-26 Center For Molecular Medicine And Immunology INHIBITION OF PLACENTA GROWTH FACTOR (PlGF) MEDICATED METASTASIS AND/OR ANGIOGENESIS

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
STEFANIE SAUER ET AL.: "Expression of ED-B Fibronectin in Tissues from Human Hematologic Malignancies", 《BLOOD(ASH ANNUAL MEETING ABSTRACTS)》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2017084017A1 (zh) * 2015-11-16 2017-05-26 合肥立方制药股份有限公司 Ed-b蛋白在诊断组织增生中的应用
CN108291915A (zh) * 2015-11-16 2018-07-17 合肥立方制药股份有限公司 Ed-b蛋白在诊断组织增生中的应用

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CA2723323A1 (en) 2009-11-12

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