CN102000282B - 一种治疗复发性口腔溃疡纯中药贴片及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种治疗复发性口腔溃疡纯中药贴片及其制备方法。所说的治疗复发性口腔溃疡纯中药贴片，是以下述配比的中药为原料药制成：黄芪5份，丹皮5份，白芨5份，五倍子3份，青黛3份，三七1份，当归3份，凌霄花5份，黄精5份，生薏苡仁6份。制备时按处方比例称取各味中草药经水提，浓缩烘干研磨后制成药粉；药粉与配料混合后经消泡，涂布干燥，分切后制成贴膜。本发明的中药贴片能显著缩短溃疡愈合时间，同时取得延长发作间隔的功效。

Description

一种治疗复发性口腔溃疡纯中药贴片及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种治疗复发性口腔溃疡纯中药贴片及其制备方法。

背景技术

复发性口腔溃疡(RAU)是常见的口腔黏膜病损，发病率较高，一般人群患病率不低于10％。RAU发病原因复杂而且尚未明确，目前多认为其发病与患者自身免疫能力低下，维生素缺乏，局部微循环障碍，病毒感染等关系密切。在治疗方面多主张内服外治并用，溃疡期以外治为主(治标)，发作期间以内治为主(治本)，口服药物以预防发作。对于RAU发作期的治疗，近年来常采用散剂、油剂、膜剂、含片、含漱剂等局部治疗为主。而对于RAU发作间期预防溃疡复发的治疗，目前尚无有效的西药及中成药。

近年来，口腔药膜倍受患者青睐。口腔药膜在水浸后成为溶胶，粘附在黏膜表面，药物作用持久，并使病损部位得到保护，较上述其他给药方式更能减轻痛苦，提高疗效。目前使用的口腔药膜可以归纳为西药药膜，中西药合方药膜，中药药膜三类。前两类由于含抗生素激素等，均不宜长期应用，不适于反复发作性口腔溃疡。而当前纯中药药膜极少，而且用药片面，治疗效果欠理想。另外多数研究者在观察疗效时忽视本病反复发作、自行愈合的特点，以至观察方法欠合理、观察期限短不能真实的反映药物疗效。

本项研究发挥中医药综合治病的优势，辩证与辨病相结合，根据RAU的病因、病理特点，在溃疡发作期以自拟“愈溃膜”进行局部免疫调节并改善局部微循环，并通过动物实验以及临床实验指标的观察，进一步探讨其治疗机理，以达标本兼治、根除RAU的目的。

近年来许多学者研究认为，RAU是一种自身免疫性疾病，可能是由于机体免疫功能低下，特别是口腔局部分泌型IgA(SIgA)缺乏所致。SIgA对机体局部免疫如保护呼吸道，消化道粘膜等重要作用。由于外分泌液中SIgA含量多，又不易被一般蛋白酶破坏，故称为抗感染，抗过敏的一道重要免疫“屏障”。SIgA是局部粘膜的重要防卫机制。其在局部的作用方式可能是：(1)直接作用于细菌，制动、凝集、抑制细菌生长阻止其与粘膜粘附。(2)阻碍抗原对粘膜的穿透，其机制可能是与抗原形成不能吸收的免疫复合物；凝聚颗粒型抗原物质，加速粘膜纤毛的清除作用；(3)和细菌毒素或酶等产物结合，使其失活，并协助蛋白分解酶破坏细菌：(4)促进肺泡巨噬细胞(或其他部位的巨噬细胞)的吞噬作用：(5)和溶菌酶补体协同作用，增强杀菌能力。愈溃膜、分期治疗复发性口腔溃疡的局部免疫调节实验结果表明，RAU发病期SIgA低下，与健康人比较有显著性差异，这一点与国内外报道相符。实验结果还表明，应用愈溃膜治疗6天后，患者唾液SIgA值显著提高(P＜0.01)，而且治疗后唾液SIgA值与健康人组之间无显著差异。由此表明，提高局部SIgA是愈溃膜治疗RAU的作用机理之一，而乙酰螺旋霉素药膜则无此作用。

发明内容

本发明是要提供一种治疗复发性口腔溃疡纯中药贴片(也称愈溃膜)的制备方法。

本发明所说的治疗复发性口腔溃疡纯中药贴片，是以下述配比的中药为原料药制成的贴片：黄芪5份，丹皮5份，白芨5份，五倍子3份，青黛3份，三七1份，当归3份，凌霄花5份，黄精5份，生薏苡仁6份。

上述纯中药贴片的制备方法是：按处方比例称取各味中草药经水提，浓缩烘干研磨后制成药粉；药粉与配料混合后经消泡，涂布干燥，分切后制成贴膜。

具体的制备操作包括下述步骤：

1)按处方量称取中草药，加水浸泡24小时，水煎2次，每次20分钟，过滤取汁，浓缩后放入恒温57℃烤箱烘干，研药粉备用；

2)药膜制备：称取3克羧甲基纤维素钠溶于80毫升自来水中混匀制成75ml胶浆；

称取3克步骤1)中制备的药粉加入3毫升吐温-80加入1毫升甘油搅拌成糊状；

混匀上述胶浆和药糊制成乳浊液I；

称取冰片0.2克，硼砂0.1克薄荷脑0.1克，混匀研至共熔，加入0.5毫升吐温-80，加水5毫升制成乳浊液II；

将乳浊液I和II混匀，60℃保温15分钟消泡；

将消泡后的混合液均匀涂于涂有一层石蜡油的玻璃板上，50℃恒温干燥，启膜，切成小片分装，即得中药贴片产品(愈溃膜)。

本发明的愈溃膜分期治疗复发性口腔溃疡的临床研究结果表明，治疗组显效率和总有效率与对照组比较，均有非常显著性差异，证明愈溃膜能显著缩短溃疡愈合时间。溃疡复发的间隔与溃疡的自愈时间表现为负相关性，即缩短溃疡愈合时间也可同时取得延长发作间隔的功效。本组临床观察证实了这点，治疗组病人的复发间期确有不同程度的延长。

具体实施方式

以下具体实例仅用于说明本发明，而不用于限制本发明范围。

一.愈溃膜制备流程

处方(按重量份计)：

黄芪5份，丹皮5份，白芨5份，五倍子3份，青黛3份，三七1份，当归3份，凌霄花5份，黄精5份，生薏苡仁6份；

中药提取

按1)中处方取中草药适量，加水浸泡24小时，水煎2次，每次20分钟，过滤取汁，浓缩后放入恒温57℃烤箱烘干，研药粉备用(每克药粉含原生药3.16克)；

药膜制备

称取3克羧甲基纤维素钠溶于80毫升自来水中混匀制成75ml胶浆；

称取3克2)中制备的药粉加入3毫升吐温-80加入1毫升甘油搅拌成糊状；

混匀上述胶浆和药糊制成乳浊液I；

称取冰片0.2克，硼砂0.1克薄荷脑0.1克，混匀研至共熔，加入0.5毫升吐温-80，加水5毫升制成乳浊液II；

I+II混匀，60℃保温15分钟消泡；

将消泡后的混合液均匀涂于涂有一层石蜡油的玻璃板上(预先用75％酒精消毒)，50℃恒温干燥，启膜，切成3×4厘米小片分装，即得愈溃膜(含原生药24毫克/cm2)。

二.药效学研究

1)愈溃膜分期治疗复发性口腔溃疡的临床研究

1资料与方法

依照岳松龄主编《口腔内科学》的诊断标准。自1998年2月至1999年8月，其收治120例RAU患者(均为门诊病人)，其中男38例，女82例，年龄8-70岁，平均34.2岁；病程最短3个月，最长20余年，以2-10年占多数；复发间期一般为0.5-2个月，严重者溃疡此起彼伏，连续不断。溃疡好发区为舌、唇内及颊粘膜。随机分为治疗组80例、对照组40例，两组性别、年龄、病程、病情轻重，经统计学处理，均无显著性差异。

治疗组：发作期以愈溃膜治疗为主，清水漱口后，取略大于溃疡面药膜贴敷于患处，保持5分钟以上，每日3次，重型者可每2-3小时贴敷一次，对照组：发作期以乙酰螺旋霉素药膜(由第四军医大学口腔医院药局生产)治疗为主，用法同愈溃膜。于患者用药后第3、7天复查，分别记录疗效，并随访1年。同时，随机抽取两组部分患者，应用放射免疫测定技术检测其用药前后唾液SIgA值。

2疗效观察

疗效判定标准治愈：经治疗口腔溃疡愈合后，随访1年以上未再复发者。显效：用药后能止痛，1-3天溃疡修复；溃疡复发间期明显延长。有效：用药后能止痛，3-5天溃疡修复；溃疡复发间期明显延长。无效：用药后疼痛无明显缓解，6天溃疡未修复；溃疡仍反复发作。

3疗效结果

治疗组治愈11例(占13.75％)，显效62例(占77.50％)，有效7例(占8.75％)，总有效率为100％；对照组无一例治愈，显效19例(占49.00％)，有效14例(占35.00％)，无效7例(占17.50％)，总有效效率为84.00％。两组治愈率比较X²＝4.320，P＜0.05；显效率比较X²＝9.615，P＜0.005；总有效率比较X²＝11.852，P＜0.005.(见表1)

表1治疗一年后疗效评价结果

注：两组比较，^※表示P＜0.05，^※※表示P＜0.005

表2两组治疗前后SIgA值与健康人SIgA值的比较

注：唾液SIgA正常参考值为206.4±117.9μg/ml。

2)愈溃膜皮肤刺激实验

实验方法：取8只家兔，均为雌性，体重为1.5-1.8kg。在家兔躯干选取4个2.5平方厘米面积的去毛区，其面积总和约为体表面积的1/10。选定部位后，先用弯剪刀小心剪毛，接着用脱毛剂(硫化钡3份、肥皂粉1份、面粉7份，混合均匀，使用前加水做成糊状)，均匀地在去毛区涂一薄层，经3-5分钟，用玻璃棒轻轻刮动去毛，并用棉球蘸温水轻轻擦拭，洗净脱毛剂，并在去毛区涂少许羊毛脂，然后归笼观察24小时后备用。次日，先予去毛区编号，其中4只家兔在去毛区内用大头针将皮肤划成“#”形擦伤口，以观察药物对擦伤皮肤的刺激作用。在1、2号区分别用愈溃膜2倍液(相当于含原生药0.2g/ml)和5倍液(相当于含原生药0.5g/ml)进行皮肤斑贴实验。斑贴块用折叠成2.5平方厘米大小的2层纱布，以药液浸透(约用0.5ml)，敷贴在去毛部位皮面，外隔一略大于纱布块的塑料薄膜，用胶布固定好，避免乱动或抓搔。经4小时后去斑贴，用清水擦拭干净，观察局部反应。并分别于12、24、48、72小时观察反应。结果：无划痕区，于敷药4h时无发红，无水肿；12、24、48、72h时，均未出现充血、红斑、结痂及水肿等表现。有划痕区，于敷药4h时划痕处轻微发红且轻微水肿略高出周围皮面，周围皮面无异常表现；12h、24h、72h时敷贴部位均无充血发红及水肿，划痕处24h后均已结痂愈合。后又按上述方法每天涂敷4种药液1次，连续10天，局部仍未出现任何刺激症状。故可认为愈溃膜对皮肤基本无刺激作用。

3)愈溃膜急性毒性试验研究

实验动物：昆明种小白鼠

试剂：愈溃膜液(浓度：含原生药0.5g/ml)。

实验方法：取已隔夜禁食的20只小鼠，雌雄各半。给愈溃膜液按0.2ml/10g体重的剂量灌胃，给药均为10g/kg体重。2h内禁食禁水。观察各动物灌胃后的症状表现。在灌胃后2h内，动物活动有所减少，有的闭目静卧，分析可能与灌胃量较大有关。3h后小鼠逐渐恢复，6h后完全恢复正常。观察72h动物均未发现任何异常表现。由于灌胃量已经达到10000mg/kg体重而未见动物死亡，根据联合国世界卫生组织(WHO)推荐的急性毒性分级的五级标准，达此标准不需要进行LD50测定，应属于微毒以下或实际无毒。

愈溃膜抑菌试验研究

上海第二医科大学附属第九人民医院口腔内科

药液配制：愈溃膜药粉直接溶于无菌蒸馏水中，配制成浓度5％与4％的药物原液，原液各自以无菌蒸馏水等倍稀释备用。

菌液制备：国际参考菌株：血链球菌、轻链球菌及奈瑟氏菌经活化、鉴定后，接种于TSA平板。血链球菌、轻链球菌在含氮95％，二氧化碳5％的微需氧条件下，奈瑟氏菌在需氧条件下16-18小时至对数生长期，取一菌落混悬于TSB液体培养基中，配制成浓度为1.5x10∧6CFU/ml的菌悬液。

96孔微板先以75％酒精浸泡半小时，取出后紫外线光照2小时灭菌备用。

实验方法：用无菌微量加样器吸取50ul不同浓度的药液分别加入96孔微板中，再加入等量菌液，同时设立阳性对照(有菌无药)及阴性对照(有药无菌)。一式二份，置于振荡器上1分钟混匀。血链球菌、轻链球菌在含氮95％，二氧化碳5％的微需氧条件下，奈瑟氏菌在需氧条件下培养。奈瑟氏菌于培养24小时候取出，血链球菌、轻链球菌于培养48小时后取出，用无菌接种环取肉眼观察无细菌生长的微板孔中细菌，划线接种于TSA平板。培养24-48小时，观察结果。

实验结果：2％以上浓度的愈溃膜对奈瑟氏菌具有杀菌作用。

讨论：血链球菌、轻链球菌及奈瑟氏菌，均为口腔内的常见菌，正常情况下是不致病的，但在口腔的内环境改变时(如口腔溃疡等)则亦可引起继发感染。本实验结果表明，愈溃膜对于口腔溃疡的治疗作用，可能不是以杀菌、抑菌为主的，但本事样亦显示，愈溃膜对口腔内的细菌有一定的抑制作用。

4)愈溃膜镇痛实验研究

方法：以39名健康人，男女不限，随机分为一、二两组，选取右前臂内侧腕横纹上2cm处，用神经肌电检查仪的刺激电极按同一程度轻轻放置于皮肤上，调节刺激电极强度，能够使被试者刚刚感到刺激作用时，作为其最小痛阈值。然后在一、二组被试者测试部位分别涂敷4％的药物原液稀释液(相当于含原生药0.2g/ml)5％的药物原液稀释液(相当于含原生药0.5g/ml)，30分钟后，以清水将药液擦去，再按上述方法检测用药后的最小痛阈值。采用统计学软件SPSS9.0对实验数据进行分析，以用药前后最小痛阈值的差的均值进行t检验，结果愈溃膜2倍液组，t＝-4.134，P＝0.001；愈溃膜5倍液组，t＝-4.747，P＜0.001。如表3，4，5，6所示两组用药前后最小痛阈值之间均有非常显著性差异。表明愈溃膜局部外用有镇痛作用。

表3一组用药前后最小痛阈值测量结果：

序号     前(X1)             后(X2)

1        1.70                1.70

2        1.30                2.30

3        2.10                2.60

4        4.00                4.60

5        1.60                1.50

6        1.10                1.20

7        1.40                1.50

8        2.00                2.20

9        1.50                2.10

10       1.30                1.20

11       2.00                2.00

13       2.10                3.00

14       1.00                1.80

15       2.20                2.10

16       1.60                2.30

17       2.30                3.50

18       2.10                2.10

19       1.40                2.30

20        1.60        1.60

21        1.20        1.60

22        2.20        2.40

表4.愈溃膜2倍液组用药前后最小痛阈值的变化

表5二组用药前后最小痛阈值测量结果：

序号         前(X’1)        后(X’2)

1            2.20            3.00

2            1.40            2.30

3            1.10            1.90

4            1.80            3.60

5            1.20            3.10

6            1.80            2.40

7            2.10            2.40

8            2.10            2.90

9            2.20            2.30

10           1.40            2.00

11           2.20            3.30

12           1.60            1.60

13           2.00            2.60

14           1.70            2.20

15           1.60            1.70

16           1.20            1.40

17           1.80            1.80

18           1.80            2.10

19           1.7             1.9

20           1.5             1.5

t检验结果如下：

表6愈溃膜5倍液组用药前后最小痛阈值的变化

5)愈溃膜对微循环指标影响的实验研究

试剂：愈溃膜2倍液(相当于含原生药约0.2g/ml)；

仪器：WX-5型摄影体视微循环显微镜(由无锡石塘湾太湖电子医疗仪器厂生产)；

方法：以健康成人10名，年龄21～25岁，男女各半。观察部位：左手无名指甲襞部。用药方法：以试剂在被试者左手无名指甲襞部位涂敷2滴(0.1ml)，30分钟后以清水将药液擦去。观察用药前后甲襞微循环情况。观察项目：管袢密度，输入枝管径，输出枝管径，袢顶管径，管袢长度(用药前后分别以A1、A2，B1、B2，C1、C2，D1、D2，E1、E2表示)。采用统计学软件SPSS9.0对实验数据进行分析，以用药前后上述各值的差的均值进行t检验。如表7，8所示，用药后，局部微循环明显改善。

表7愈溃膜组微循环检查结果

t检验结果如下：

表8愈溃膜组用药前后微循环指标比较

6)愈溃膜局部免疫调节实验研究

试剂：SIgA放射免疫试剂盒，由中国原子能科学研究院提供。

仪器：FJ-2011γ免疫计数器，由西安二六二厂生产

样本来源：①选择发作期RAU患者，随机分为愈溃膜组和乙酰螺旋霉素组，于用药前和6天后各采集清晨口腔唾液1ml；②另选15名体检口腔卫生条件好，无口腔及呼吸系统、消化系统等疾病的健康成人为健康对照组，亦取其清晨口腔唾液各1ml。

方法：按SIgA放射免疫试剂盒说明书的要求进行测定。

结果：R＝0.992.采用统计学软件SPSS9.0对实验数据进行分析，以各组用药前后唾液SIgA值之差的均值及各组SIgA均值及健康人组的均值进行t检验.结果如表9，10，11所示，用药后唾液SIgA值明显升高。

表9

       X1       X2        X3       X4       X0

1号    36.06    80.34     57.90    73.50    96.98

2号    55.56    165.72    31.40    34.30    114.86

3号    15.26    59.36     73.90    51.50    86.30

4号    143.80   187.71    169.50   251.70   280.76

5号    37.80    39.00     18.00    15.00    108.58

6号    85.08    90.00     44.80    40.80    145.80

7号    110.00   140.60    53.90    57.10    183.60

8号    63.10    77.30     131.40   170.80   136.90

9号    65.20    71.88     61.00    20.80    86.50

10号   65.70    80.70     25.50    38.80    152.40

11号   79.57    79.97     .        .        240.70

12号   15.65    .         .        .        127.50

13号   80.93    .         .        .        69.80

14号   176.50   .         .        .        186.70

15号   124.60   .         .        .        97.30

16号   90.20    .         .        .        .

17号   120.88   .         .        .        .

18号   45.67    .         .        .        .

19号   18.22    .         .        .        .

20号   32.70    .         .        .        .

注：X1、X2为RAU患者用愈溃膜前、后的唾液SIgA值；X3、X4为RAU患者用乙酰螺旋霉素药膜前、后的唾液SIgA值。X0为健康成人唾液SIgA值。

表10两组治疗前后SIgA值变化的比较

表11两组治疗前后SIgA值与健康人SIgA值的比较

注：唾液SIgA正常参考值为206.4±117.9μg/ml。

Claims (2)

1.一种治疗复发性口腔溃疡纯中药贴片，其特征在于，是以下述配比的中药为原料药制成的贴片：黄芪5份，丹皮5份，白芨5份，五倍子3份，青黛3份，三七1份，当归3份，凌霄花5份，黄精5份 ，生薏苡仁6份；制备步骤为：

1）按上述处方量称取中草药，加水浸泡24小时，水煎2次，每次20分钟，过滤取汁，浓缩后放入恒温57℃烤箱烘干，研药粉备用；

2）药膜制备：称取3克羧甲基纤维素钠溶于80毫升自来水中混匀制成75ml胶浆；

称取3克 步骤1）中制备的药粉加入3毫升吐温-80加入1毫升甘油搅拌成糊状；

混匀上述胶浆和药糊制成乳浊液Ⅰ；

称取冰片0.2克，硼砂0.1克薄荷脑0.1克，混匀研至共熔，加入0.5毫升吐温-80，加水5毫升制成乳浊液Ⅱ；

将乳浊液Ⅰ和Ⅱ混匀，60℃保温15分钟消泡；

将消泡后的混合液均匀涂于涂有一层石蜡油的玻璃板上， 50℃恒温干燥，启膜，切成小片分装，即得中药贴片产品。

2.权利要求1所述治疗复发性口腔溃疡纯中药贴片的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）按处方量称取中草药，加水浸泡24小时，水煎2次，每次20分钟，过滤取汁，浓缩后放入恒温57℃烤箱烘干，研药粉备用；

2）药膜制备：称取3克羧甲基纤维素钠溶于80毫升自来水中混匀制成75ml胶浆；

称取3克 步骤1）中制备的药粉加入3毫升吐温-80加入1毫升甘油搅拌成糊状；

混匀上述胶浆和药糊制成乳浊液Ⅰ；

称取冰片0.2克，硼砂0.1克薄荷脑0.1克，混匀研至共熔，加入0.5毫升吐温-80，加水5毫升制成乳浊液Ⅱ；

将乳浊液Ⅰ和Ⅱ混匀，60℃保温15分钟消泡；

将消泡后的混合液均匀涂于涂有一层石蜡油的玻璃板上， 50℃恒温干燥，启膜，切成小片分装，即得中药贴片产品。