CN101993822A - 一种接种诱导植物离体器官发病的装置及其应用方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种接种诱导植物离体器官发病的装置及其应用方法。该装置由正方形操作面板、长方形支承板、长形“ㄩ”形支架、长形“ㄣ”形支架、玻璃罩、搪瓷小方盘和搪瓷大方盘组成。该装置的应用方法步骤如下：1)接种前准备；2)将植物离体材料展开靠在操作面板上，材料的生物学下端插入培养液或保鲜液中；3)实施精细的定位和定量接种，将接种后的植物材料封罩保湿，放在恒温条件下培养观察，植物材料可以采光生活。本发明的优点是：植物材料稳固展开，方便试验操作；准活体性，生活保鲜期长；可容纳较大的试验材料；结果清晰准确及重现性好；可拆装清洁，容易标准化。

Description

一种接种诱导植物离体器官发病的装置及其应用方法

技术领域

本发明涉及农业技术和生物技术。具体是一种接种诱导植物离体器官发病的装置及其应用方法。

背景技术：

一般地，在完整的活体寄主上接种发病，能真实反映寄主病原间的互作反应，但许多情况下(如在作物成株期接种，尤其是高大的果树上接种)，直接在活体寄主上进行接种却存在一些技术困难，如不易操作，太高大，无法固定，也不易进行局部条件控制(如温度和湿度等)，因此，经常需要用部分植物器官材料离体接种作为一种替代手段。在许多病害实例中，离体接种和活体接种的结果是一致的；而且离体接种能提高效率，更容易实现研究的目标。

在已有的离体接种报道中，虽然接种技术操作各色各样，但离体植物材料的接种处置可以归结为如下方式：1)将植物材料直接插入盛装营养液的培养瓶(或杯)内，材料依靠于瓶(或杯)口上。2)将植物材料竖直插入培养瓶(或培养皿)内的琼脂块上。3)将植物材料平放于培养皿(或小方盘)内的湿润滤纸或者纱布上。4)将植物材料直接漂浮于培养皿内的营养液面上。

这些接种处置方式多少有一些局限：1)材料易动无依靠，不便操作；2)离体材料太小(打孔叶盘)；3)植物材料不能充分展开(如较大而长的叶片)；4)植物材料易自行卷合或弯翘。因而不利于实施接种操作，特别是难以进行定位与定量接种，导致难以开展一些精细的试验设计。一些接种处置方式由于器具不配套而不利于保湿。一些接种处置方式由于离体材料平置，不便于吸水，或者使用非透明器具进行盖罩而致离体材料无法采光，因而不利于生活保鲜。

发明内容

本发明的目的是提供一种接种诱导植物离体器官发病的装置及其应用方法。

本发明解决上述技术问题的技术方案如下：

1.一种接种诱导植物离体器官发病的装置，该装置由正方形操作面板1、长方形支承板2、长形“ㄩ”形支架3、长形“ㄣ”形支架4、玻璃罩5、搪瓷小方盘6和搪瓷大方盘7组成；

在小方盘6内中部横向放置“ㄩ”形支架3；将支承板2长向作底、宽向作高、竖立于“ㄩ”形支架3的一端；取2条“ㄣ”形支架4，分别钩靠于支承板2板上缘的两头，平行排列；取操作面板1套入2～3个橡皮筋、再倾斜架靠在2条“ㄣ”形支架4上，操作面板1的下缘被2条“ㄣ”形支架4和1条“ㄩ”形支架3的另一端折钩同时钩住，形成一个倾斜的、稳定的操作面板架；取玻璃罩5将小方盘6及盘内的操作面板架全部罩在大方盘7内。

上述的操作面板1的倾斜角以20～40度为宜。

2.一种接种诱导植物离体器官发病的装置的应用方法，应用方法步骤如下：

1)接种前准备，包括：A.洁净接种诱导植物离体器官发病的装置的构件；B.配备离体材料培养液；C.按权利要求1所述组装接种诱导植物离体器官发病的装置；D.离体植物材料的获取。

2)将植物离体材料展开靠在操作面板上，并用橡皮筋夹稳固定，材料的生物学下端插入培养液或保鲜液中。

3)实施精细的定位和定量接种。

4)将接种后的植物材料封罩保湿，放在恒温条件下培养观察，植物材料可以采光生活；

5)对于果实或块茎类材料，则可以去掉操作面板和支架片，直接将支承板平放于小方盘上，再将材料摆放于支承板上，然后进行接种操作和保湿处理。本发明的优点是：

1.植物材料稳固展开，方便试验操作；

2.准活体性，生活保鲜期长；

3)可容纳较大的试验材料；

4)结果清晰准确及重现性好；

5)可拆装清洁，容易标准化。

附图说明

图1是本发明一种接种诱导植物离体器官发病的装置的结构示意图。

图中：正方形操作面板1，长方形支承板2，长形“ㄩ”形支架3，长形“ㄣ”形支架4，玻璃罩5，搪瓷小方盘6，搪瓷大方盘7。

图2是本发明操作面板装载植物叶片的正面视图。

图3是本发明接种稻纹枯病结果图。

图4是本发明接种玉米小班病结果图。

图5是本发明接种莴苣霜霉病结果图。

图6是本发明接种芒果炭疽病结果图。

图7是本发明接种甘蓝黑斑病结果图。

图8是本发明接种九里香白粉病结果图。

具体实施方式

下面结合附图和实施例对本发明作进一步描述。

装置如图1所示，一种接种诱导植物离体器官发病的装置，该装置由正方形操作面板1、长方形支承板2、长形“ㄩ”形支架3、长形“ㄣ”形支架4、玻璃罩一个5、搪瓷小方盘一个6和搪瓷大方盘一个7组成。

在小方盘6内中部横向放置“ㄩ”形支架3；将支承板2长向作底、宽向作高、竖立于“ㄩ”形支架3的一端；取2条“ㄣ”形支架4，分别钩靠于支承板2板上缘的两头，平行排列；取操作面板1套入2～3个橡皮筋、再倾斜架靠在2条“ㄣ”形支架4上，操作面板1的下缘被2条“ㄣ”形支架4和1条“ㄩ”形支架3的另一端折钩同时钩住，形成一个倾斜的、稳定的操作面板架；取玻璃罩5将小方盘6及盘内的操作面板架全部罩在大方盘6内。

装置的应用方法：

1.接种前准备

1)洁净构件构件在组装前可用洁净剂洗涤干净，必要时可进行常规表面消毒。操作面板和支架片等可用锅头蒸煮消毒。

2)配备离体材料培养液一般用清水即行，试验要求延长保鲜时间的，可依具体植物的生理要求，配备合适的植物器官离体培养保鲜液。

3)配套装置的组装先在操作面板上套上2个(也可多个)洁净的橡皮筋，然后按前述组装方法组装配套装置。在小方盘内加注入离体材料培养液至约2/3的深度，以液面可浸过后面放置的植物材料基部为宜。

4)离体植物材料的获取在(野外、田间、或温室栽培)活体寄主上，选取健康无病、干净的器官材料(如叶片、枝条或茎杆)，用剪刀剪下置于盛水的烧杯或提桶内，带回实验室内备用。

2.植物材料摆置将离体植物材料(如叶片或枝条)剪成长度和宽度不超过操作面板的大小，摆放在操作面板上，移动和扣动橡皮筋，夹住材料两端或中间，使材料平展于面板上，材料的基部浸入小方盘的培养液中(图2)。

3.接种体准备按常规方法培养及配备病原菌接种体，可以是特定浓度的孢子液、细菌液、菌丝碎液，也可以是特定大小的菌丝块、或病组织块等形式。液体接种体可根据需要加入湿展剂。

4.接种操作：

根据不同的试验目的及不同的病害或病菌材料等，可选取与在寄主活体上接种类同的常规接种操作方式，如喷雾接种等。本技术体系特别适合采用如下接种方式：

1)微滴点接用微量移液器吸取5～10ul接种体液，轻轻定点注放于植物材料表面上。需要伤口接种的，可直接用移液器的吸管头轻轻按刺材料，形成刺伤，然后将接种液点注于伤口上。

2)涂抹接种用毛笔或棉签蘸取接种体液，轻轻定点涂抹或全部涂抹在植物材料表面上。需要伤口接种的，可先用解剖针(刀)在接种点轻轻刺(或刮)出小伤口，再行涂抹接种。

3)团块接种挑取在琼脂培养基或其它固体或液体培养基上的菌丝团块、菌核，或者剪取寄主上的病组织块，轻轻定点置放于植物材料表面上。同样，需要伤口接种的，可先用解剖针(刀)在接种点轻轻刺(或刮)出小伤口，再行接种。

5.保湿培育

接种后罩上玻璃罩，并向大方盘内注入薄层水，使试验材料处于封闭的高湿条件。将整个装置放于适合的环境，如光照培养箱内，常温室内窗口边或灯光下等；有条件的置于可控温控光的培养室；进行后续的保湿和培养观察。

实施例

应用本发明一种接种诱导植物离体器官发病的装置及其应用方法接种稻纹枯病、玉米小班病、莴苣霜霉病、芒果炭疽病、甘蓝黑斑病和九里香白粉病的结果如下。

1.接种稻纹枯病结果图如图3所示。

2.接种玉米小班病结果如图4所示。

3.接种莴苣霜霉病结果如图5所示。

4.接种芒果炭疽病结果如图6所示。

5.接种甘蓝黑斑病结果如图7所示。

6.接种九里香白粉病结果如图8所示。

Claims (3)

1.一种接种诱导植物离体器官发病的装置，其特征在于，该装置由正方形操作面板(1)、长方形支承板(2)、长形“ㄩ”形支架(3)、长形“ㄣ”形支架(4)、玻璃罩(5)、搪瓷小方盘(6)和搪瓷大方盘(7)组成；

在小方盘(6)内中部横向放置“ㄩ”形支架(3)；将支承板(2)长向作底、宽向作高、竖立于“ㄩ”形支架(3)的一端；取2条“ㄣ”形支架(4)，分别钩靠于支承板(2)板上缘的两头，平行排列；取操作面板(1)套入2～3个橡皮筋、再倾斜架靠在2条“ㄣ”形支架(4)上，操作面板(1)的下缘被2条“ㄣ”形支架(4)和1条“ㄩ”形支架(3)的另一端折钩同时钩住，形成一个倾斜的、稳定的操作面板架；取玻璃罩(5)将小方盘(6)及盘内的操作面板架全部罩在大方盘(7)内。

2.根据权利要求1所述的一种接种诱导植物离体器官发病的装置，其特征在于，所述的操作面板(1)的倾斜角以20～40度为宜。

3.一种接种诱导植物离体器官发病的装置的应用方法，其特征在于，应用方法步骤如下：

1)接种前准备，包括：A.洁净接种诱导植物离体器官发病的装置的构件；B.配备离体材料培养液；C.按权利要求1所述组装接种诱导植物离体器官发病的装置；D.离体植物材料的获取；

2)将植物离体材料展开靠在操作面板上，并用橡皮筋夹稳固定，材料的生物学下端插入培养液或保鲜液中；

3)实施精细的定位和定量接种；

4)将接种后的植物材料封罩保湿，放在恒温条件下培养观察，植物材料可以采光生活；

5)对于果实或块茎类材料，则可以去掉操作面板和支架片，直接将支承板平放于小方盘上，再将材料摆放于支承板上，然后进行接种操作和保湿处理。

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