CN101935318A

CN101935318A - 2，3-二氢-4(1h)-喹唑酮衍生物及其应用

Info

Publication number: CN101935318A
Application number: CN 201010254655
Authority: CN
Inventors: 夏广新; 沈竞康; 陈茜; 刘学军; 李萍
Original assignee: Shanghai Pharmaceuticals Holding Co Ltd
Current assignee: Shanghai Pharmaceuticals Holding Co Ltd
Priority date: 2010-08-17
Filing date: 2010-08-17
Publication date: 2011-01-05

Abstract

本发明公开了一种如式I所示的取代的2，3-二氢-4(1H)-喹唑酮衍生物、其药学上可接受的盐或溶剂化物、及含其的药物组合物和应用。本发明的化合物具有很好的抑制血管内皮细胞增殖的作用。可用于治疗需要抑制血管生成和/或发挥细胞毒作用的疾病。

Description

2，3-二氢-4(1H)-喹唑酮衍生物及其应用

技术领域

本发明具体的涉及一种2，3-二氢-4(1H)-喹唑酮衍生物、其药学上可接受的盐或溶剂化物，及含其的药物组合物和应用。

背景技术

血管生成(angiogenesis)是指从已存在的血管床中产生新生血管的过程。在正常情况下，血管生成被严格控制于某些短暂的、特定的生理过程，如：生殖过程、发育过程及伤口愈合过程等。而持续的血管生成是某些病变的表现，如：肿瘤组织的恶性增长、糖尿病性视网膜病变等。

研究表明，肿瘤是一种血管生成依赖性疾病，原发肿瘤的生长、侵袭和转移都需要新血管的生成。新生血管为肿瘤细胞提供充分的氧气和营养，其内皮细胞表达多种生长因子，刺激肿瘤细胞增殖。由于肿瘤细胞缺乏周细胞，基底膜不完整，容易进入血液循环，并在机体的其它部位继续生长和诱导血管形成，导致肿瘤转移。一般认为，血管较丰富的肿瘤容易发生转移，而且临床预后较差。因此研究者希望通过抑制新血管的生成来切断肿瘤的营养供应，从而抑制其持续的生长和扩散。因此，血管生成抑制剂已经成为肿瘤药物治疗的重要手段。

但是，目前临床使用的血管生成抑制剂也发现不同程度的毒副作用，且对直径小于1mm的肿瘤疗效不佳，通常需要联合使用细胞毒药物才能获得满意疗效。因此，还需要不断开发新的血管生成抑制剂。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供了一种与现有技术完全不同的2，3-二氢-4(1H)-喹唑酮衍生物、其药学上可接受的盐或溶剂化物，及含其的药物组合物和应用。本发明的化合物具有很好的抑制血管内皮细胞增殖的作用。可用于治疗需要抑制血管生成和/或发挥细胞毒作用的疾病。

本发明人经过大量艰苦的实验研究，发现了一类新的2，3-二氢-4(1H)-喹唑酮衍生物，其特征是含有2位五元杂环或苯并五元杂环取代，具有抑制血管内皮细胞增殖作用，完成了本发明。

因此本发明涉及一种如式I所示的取代的2，3-二氢-4(1H)-喹唑酮衍生物、其药学上可接受的盐或溶剂化物；

其中：

R₁为一到四个取代基，每个可独立地选自卤素、NO₂、氰基、H、C₁～C₆链烃基、C₁～C₆卤代链烃基、C₃～C₈环烃基、C₃～C₈杂环烃基、C₁～C₆脂肪酰基、C₆～C₁₂芳基、C₄～C₁₂杂芳基、C₄～C₁₀环烃基烷基、C₄～C₁₀杂环烃基烷基、C₇～C₁₄芳烷基或C₇～C₁₄杂芳烷基、NR₇R₈、NR₉C(O)R₁₀、OC(O)R₁₁、OC(O)NR₁₂R₁₃、C(O)OR₁₄、C(O)NR₁₅R₁₆、S(O)R₁₇、S(O)NR₁₈R₁₉、S(O)₂NR₂₀R₂₁、OR₂₂或SR₂₃；

Cy为取代的五元环A或B：

其中，Z选自S，O或NR₆；

R₂、R₃、R₄和R₅独立地选自卤素、NO₂、氰基、H、C₁～C₆链烃基、C₁～C₆卤代链烃基、C₃～C₈环烃基、C₃～C₈杂环烃基、C₁～C₆脂肪酰基、NR₂₄R₂₅、NR₂₆C(O)R₂₇、OC(O)R₂₈、OC(O)NR₂₉R₃₀、C(O)OR₃₁、C(O)NR₃₂R₃₃、S(O)R₃₄、S(O)NR₃₅R₃₆、S(O)₂NR₃₇R₃₈、OR₃₉或SR₄₀；但当Cy为A，R₁为H时，R₂不为甲基；较佳的，当Cy为A时，R₂、R₃和R₄独立的为H、卤素或C₁～C₃烷基，其中卤素优选Br或Cl，C₁～C₃烷基优选甲基。更佳的，R₄为H，R₂＝R₃＝Br，或R₂＝R₄＝H，R₃为Br，或R₂＝R₃＝H，R₄为甲基，或R₃＝R₄＝H，R₂为Cl，或R₃＝R₄＝H，R₂为Br。当Cy为B时，较佳的，R₂、R₃和R₅独立的为H或卤素，其中卤素优选Br或Cl，更佳的，R₂＝R₃＝H，R₅为Br，或者R₃＝R₅＝H，R₂为Cl。

或者

R₂与R₃，或R₃与R₄，以及与它们相连的原子共同构成稠合芳环，该稠合芳环可被卤素、NO₂、氰基、C₁～C₆链烃基、C₁～C₆卤代链烃基、NR₄₁R₄₂、NR₄₃C(O)R₄₄、OC(O)R₄₅、OC(O)NR₄₆R₄₇或OR₄₈取代；

R₆为H、C₁～C₆链烃基、C₁～C₆卤代链烃基、C(O)R₄₉、C(O)NR₅₀R₅₁、S(O)₂NR₅₂R₅₃；

R₇、R₈、R₉、R₁₂、R₁₃、R₁₅、R₁₆、R₁₈、R₁₉、R₂₀、R₂₁、R₂₄、R₂₅、R₂₆、R₂₉、R₃₀、R₃₂、R₃₃、R₃₅、R₃₆、R₃₇、R₃₈、R₄₃、R₄₆和R₄₇独立地为H、C₁～C₆烃基或C₁～C₆卤代烃基；

或者

当R₇、R₈、R₉、R₁₂、R₁₃、R₁₅、R₁₆、R₁₈、R₁₉、R₂₀、R₂₁、R₂₄、R₂₅、R₂₆、R₂₉、R₃₀、R₃₂、R₃₃、R₃₅、R₃₆、R₃₇、R₃₈、R₄₃、R₄₆和R₄₇中的两个取代基在同一个含氮的基团中出现，那么这两个取代基与它们相连的氮原子一起构成四到八元环，它可任选被取代，或者可以含有另一个选自于氧、硫和氮的杂原子；

R₉、R₁₀、R₁₁、R₁₄、R₁₇、R₂₂、R₂₃、R₂₇、R₂₈、R₃₁、R₃₄、R₃₉、R₄₀、R₄₄、R₄₅和R₄₈独立地为H、C₁～C₆烃基或C₁～C₆卤代烃基。

本发明中，所述的R₁较佳的为卤素、NO₂、氰基或H。其中，所述的卤素优选氯，进一步优选6位氯代(6-Cl)或7位氯代(7-Cl)。所述的硝基优选6位硝基(6-硝基)。

本发明中，所述的Z较佳的为S或O。

本发明中，所述的R₂与R₃，或R₃与R₄，以及与它们相连的原子共同构成稠合芳环时，优选的稠合环是苯环或吡啶环。

本发明还提供了所述式(I)化合物的制备方法。

本发明中，可以以有机合成领域及技术人员熟知的多种方法制备本发明的新颖化合物I，也可以使用下文中所描述的方法，与有机化学领域已知的合成方法一起或本领域技术人员所理解的在其上的变化来合成本发明的化合物I。

可以从易于获得的起始原料使用以下的一般性方法和过程来制备本发明的化合物。可理解的是当给出典型的或优选的工艺操作条件(即，反应温度、时间、反应物的摩尔比、溶剂、压力，等等)时，还可以使用其他工艺操作条件，除非另有说明。最佳反应条件可以随所用的具体反应物或溶剂而变化，但这些条件可以由本领域技术人员通过常规最佳化过程加以确定。

在此所描述的方法可以根据本领域已知的任何适宜的方法加以监控。例如，核磁共振、红外光谱、分光光度、质谱分析、HPLC或薄层色谱来监控产物的生成。

化合物I的制备过程中可以涉及多个化学基团的保护和脱保护。对于保护和脱保护的需要，以及对适当的保护基的选择可以由本领域技术人员容易的加以确定，上保护基和脱保护基的化学过程可在例如Greene等人，Protective Groups in Organic Synthesis，第二版，Wiley&Sons，1991，中找到，在此将其以整体的形式引入作为参考。

可以在适宜的溶剂中进行在此所描述的方法反应，有机合成领域技术人员容易地选择溶剂。适宜的溶剂基本不与原料、中间体或产物在所描述的反应进行的温度下起反应，所述的反应的温度可以为从溶剂的冰点到溶剂的沸点温度范围内变化的温度，所给定的反应可以在一种溶剂或多种溶剂的混合物中进行。根据具体的反应步骤，可以选择适宜于具体反应步骤的溶剂。

通常，可以使用如下所述的两种反应路线及工艺制备本发明的化合物，但并不限于反应条件中的试剂和溶剂。

方法一：

采用2-氨基苯甲酰胺(C)和杂芳基醛(A-1或B-1)为原料，在酸或碱催化下，在适当的溶剂中进行反应，制备I-A或I-B化合物，均为式(I)化合物。

其中，所述的反应温度均较佳的为0-200℃，优选20-50℃。反应时间均较佳的为1分钟～72小时，优选1小时以内。

所述的催化剂酸为有机酸或无机酸，包括Lweis酸、酸式盐、或强酸弱碱盐等广义酸，优选对甲苯磺酸、甲酸、乙酸、草酸、盐酸、硫酸、磷酸、氯化锌、氯化铵、氯化铟、硫酸氢铵、硫酸氢钾、硫酸氢钠、硫酸镍、硫酸亚铁、硫酸钾铝、硫酸铜或硝酸铜，优选硫酸氢铵、硫酸氢钾或硫酸氢钠。

所述的催化剂碱较佳的为强碱，优选氢氧化物、或碱金属烷氧化物。

所述的溶剂较佳的为醇(例如叔丁醇、乙醇、甲醇、异丙醇、乙二醇和乙二醇单甲醚中的一种或多种)、卤代烃、乙腈、四氢呋喃、二氧六环、二甲亚砜、N，N-二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯烷-2-酮和有机酸中的一种或多种，优选乙醇。当原料C的取代基R₁为硝基时，所述的溶剂和催化剂均优选甲酸。

方法二：

以原料(D)、杂芳基醛(A-1或B-1)和铵盐为原料，在酸催化下或无催化剂条件下反应，制备式(I)化合物。

所述的铵盐较佳的为氯化铵、或乙酸铵、或碳酸铵。

所述的反应的温度较佳的为0-200℃，优选40-90℃。反应时间较佳的为1分钟～72小时，优选1小时。

所述的催化剂酸为无机酸或有机酸，包括Lweis酸和酸性离子交换树脂，优选对甲苯磺酸、硫酸钾铝、Ga(OTf)₃、氯化铟或Montmorillonite K-10。

所述的溶剂较佳的为水、醇(例如叔丁醇、乙醇、甲醇、异丙醇、乙二醇和乙二醇单甲醚中的一种或多种)、三氟乙醇、卤代烃、乙腈、四氢呋喃、二氧六环、二甲亚砜、N，N-二甲基甲酰胺和N-甲基吡咯烷-2-酮中的一种或多种，优选乙醇、水和三氟乙醇中的一种或多种。

本发明的制备方法中，上述各优选条件可在不违背本领域常识的基础上任意组合，即得本发明的各较佳实例。

本发明还涉及一种包括所述式(I)化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物及药学上可接受的载体的药物组合物。

所述的载体为常规的药用辅料，药用辅料的选择因施用途径和作用特点而异，通常是填充剂、稀释剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、润滑剂、乳化剂或助悬剂。

本发明的药物组合物可以口服、注射(静脉、肌肉、皮下和冠状动脉内)、舌下、经颊、经直肠、经尿道、经阴道、经鼻、吸入或局部途径施用。优选的途径是口服。

本发明还涉及式(I)化合物、其药学上可接受的盐、溶剂化物或包含它们中的一种或多种的可药用的组合物在制备人用药物中的用途。

其中，所述的人用药物较佳的为治疗需要抑制血管生成和/或发挥细胞毒作用的疾病的人用药物。所述的疾病进一步优选癌症、类风湿性关节炎、糖尿病性视网膜病、早产儿视网膜病、角膜移植排斥、新生血管性青光眼和晶状体后纤维组织增生、流行性角膜炎、干燥综合症、酒渣鼻、近视、眼凹、施塔加特病、扁平部睫状体炎、慢性视网膜剥离、高粘滞综合症、弓形虫病、创伤或激光后并发症等疾病。其中，所述的癌症的肿瘤优选多发性骨髓瘤、乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌、子宫颈癌、皮肤癌、黑素瘤、胰腺癌、结肠直肠癌、肾癌、中枢神经系统癌、非小细胞癌或肺癌。

除特殊说明外，本发明涉及的原料和试剂均市售可得。

本发明的积极进步效果在于：

本发明的化合物具有很好的抑制血管内皮细胞增殖作用，可用于治疗需要抑制血管生成和/或发挥细胞毒作用的疾病。

具体实施方式

下面用实施例来进一步说明本发明，但本发明并不受其限制。

化合物制备实施例

实施例1、2-(4，5-二溴-2-噻吩基)-6-硝基-2，3-二氢喹唑啉-4(1H)-酮

步骤：

依次称量5-硝基-2-氨基苯甲酰胺(0.181g，1mmol)和4，5-二溴-2-噻吩醛(0.270g，1mmol)于5mL圆底烧瓶中，加入3mL甲酸，室温搅拌，有大量黄色固体析出，5分钟后TLC检测反应完全，停反应，过滤黄色固体，40℃真空干燥6个小时，得0.380g黄色固体，产率88％，HPLC检测纯度为98.29％，m.p.：261-263℃。

¹H NMR(DMSO-d₆，ppm)δ：9.03(1H，d，J＝1.2Hz)，8.73(1H，s)，8.42(1H，d，J＝2.7Hz)，8.15(1H，dd，J＝9.0，3.0Hz)，7.15(1H，d，J＝0.6Hz)，6.89(1H，d，J＝9.0Hz)，6.27(1H，t，J＝2.4Hz)

EI-MS(m/z)：431(M^+.C₁₂H₇ ⁷⁹Br₂N₃O₃S，50)，352(M-⁷⁹Br，55)，192(80)，165(100)，146(30)，119(30)

实施例2、2-(4-溴-2-噻吩基)-6-硝基-2，3-二氢喹唑啉-4(1H)-酮

操作步骤同实施例1，黄色固体，m.p.：243-247℃

¹H NMR(DMSO-d₆，ppm)δ：8.99(1H，s)，8.72(1H，s)，8.42(1H，d，J＝3.0Hz)，8.14(1H，dd，J＝9.0，2.4Hz)，7.64(1H，d，J＝1.8Hz)，7.16(1H，d，J＝1.2Hz)，6.88(1H，d，J＝9.0Hz)，5.29(1H，t，J＝2.4Hz)

EI-MS(m/z)：353(M⁺.C₁₂H₈ ⁷⁹BrN₃O₃S，100)，323(M-⁷⁹Br，80)，274(40)，192(29)，165(85)，146(15)，134(16)，119(25)，90(45)

实施例3、2-(4-溴-2-噻吩基)-7-氯-2，3-二氢喹唑啉-4(1H)-酮，

步骤：

依次称量4-氯-2-氨基苯甲酰胺(0.181g，1mmol)和4，-溴-2-噻吩醛(0.270g，1mmol)于5mL圆底烧瓶中，加入5mL乙醇，室温搅拌，有大量白色固体析出，TLC检测反应完全后停反应，减压浓缩，过硅胶柱层析，得0.380g白色固体，产率88％，m.p.：201-202℃。

¹H NMR(DMSO-d₆，ppm)δ：8.67(1H，s)，7.62(1H，s)，7.59(2H，s)，7.12(1H，s)，6.81(1H，s)，6.73(1H，dd，J＝8.4，1.2Hz)，6.06(1H，s)EI-MS(m/z)：342(M^+.C₁₂H₈ ⁷⁹Br³⁵ClN₂OS，44)，263(M-⁷⁹Br，23)，181(45)，154(100)，126(40)

实施例4、2-(2-苯并噻吩基)-6-氯-2，3-二氢喹唑啉-4(1H)--酮

操作步骤同实施例3，白色固体，m.p.：242-245℃

¹H NMR(DMSO-d₆，ppm)δ：8.80(1H，s)，7.90-7.93(1H，m)，7.80-7.83(1H，m)，7.63(1H，s)，7.56(1H，d，J＝2.7Hz)，7.42(1H，s)，7.30-7.38(3H，m)，6.83(1H，d，J＝8.4Hz)，6.16(1H，s)

EI-MS(m/z)：314(M^+.C₁₆H₁₁ ³⁵ClN₂OS，100)，181(32)，154(48)，134(45)，126(18)

实施例5、2-(3-甲基-2-噻吩基)-6-氯-2，3-二氢喹唑啉-4(1H)-酮

操作步骤同实施例3，白色固体，m.p.：160-163℃，

¹H NMR(DMSO-d₆，ppm)δ：8.41(1H，s)，7.55(1H，d，J＝2.4Hz)，7.37(1H，d，J＝4.8Hz)，7.27-7.31(2H，m)，6.84(1H，d，J＝5.1Hz)，6.77(1H，d，J＝9.0Hz)，6.11(1H，s)，2.22(3H，s)

EI-MS(m/z)：278(M^+.C₁₃H₁₁ ³⁵ClN₂OS，88)，181(32)，154(100)，126(39)

实施例6、2-(5-氯-2-噻吩基)-6-氯-2，3-二氢喹唑啉-4(1H)-酮

操作步骤同实施例3，白色固体，m.p.：220-223℃，

¹H NMR(DMSO-d₆，ppm)δ：8.73(1H，s)，7.54-7.55(2H，m)，7.32(1H，dd，J＝8.7，2.4Hz)，6.99(2H，s)，6.81(1H，d，J＝8.4Hz)，5.99(1H，s)

EI-MS(m/z)：298(M^+.C₁₂H₈ ³⁵Cl₂N₂OS，91)，262(M，100)，181(32)，154(58)

实施例7、2-(2-溴-3-噻吩基)-6-氯-2，3-二氢喹唑啉-4(1H)-酮

操作步骤同实施例3，白色固体

¹H NMR(DMSO-d₆，ppm)δ：8.66(1H，s)，7.64(1H，d，J＝5.1Hz)，7.58(1H，d，J＝2.4Hz)，7.48(1H，s)，7.33(1H，dd，J＝8.7，2.7Hz)，7.09(1H，d，J＝5.4Hz)，6.80(1H，d，J＝8.4Hz)，6.07(1H，s)

EI-MS(m/z)：344(M^+.C₁₂H₈BrClN₂OS，75)，263(M-⁸¹Br，34)，181(44)，154(100)，126(32)

实施例8、2-(5-溴-2-噻吩基)-6-氯-2，3-二氢喹唑啉-4(1H)-酮

操作步骤同实施例3，白色固体，m.p.：211-215℃

¹H NMR(DMSO-d₆，ppm)δ：8.72(1H，s)，7.54(1H，d，J＝2.7Hz)，7.54(1H，s)，7.32(1H，dd，J＝8.7，2.7Hz)，7.10(1H，d，J＝3.6Hz)，6.95(1H，d，J＝3.6Hz)，6.80(1H，d，J＝8.7Hz)，6.01(1H，t，J＝0.6Hz)

实施例8、2-(5-溴-2-噻吩基)-6-氯-2，3-二氢喹唑啉-4(1H)-酮

操作步骤同实施例3，白色固体，m.p.：211-215℃

EI-MS(m/z)：342(M^+。，4)，262(28)，195(100)，154(30)

实施例9、2-(4-溴-2-噻吩基)-6-氯-2，3-二氢喹唑啉-4(1H)-酮

操作步骤同实施例3，白色固体，m.p.：218-220℃

¹H NMR(DMSO-d₆，ppm)δ：8.74(1H，s)，7.59(1H，d，J＝1.5Hz)，7.56(1H，s)，7.54(1H，d，J＝2.4Hz)，7.32(1H，dd，J＝8.7，2.4Hz)，7.12(1H，m)，6.80(1H，d，J＝8.7Hz)，6.04(1H，s)

EI-MS(m/z)：342(M^+.C₁₂H₈ ⁷⁹Br³⁵ClN₂OS，44)，262(M-⁷⁹Br，100)，181(26)，153(88)，126(40)，111(45)

实施例10、2-(2-噻吩基)-6-氯-2，3-二氢喹唑啉-4(1H)-酮

操作步骤同实施例3，白色固体，m.p.：217-220℃

¹H NMR(DMSO-d₆，ppm)δ：8.66(1H，s)，7.54(1H，d，J＝2.4Hz)，7.49(1H，s)，7.47(1H，d，J＝5.1Hz)，7.30(1H，dd，J＝8.4，2.4Hz)，7.12(1H，d，J＝3.3Hz)，

¹H NMR(DMSO-d₆，ppm)δ：8.60(1H，d，J＝2.4Hz)，7.89-7.92(1H，m)，7.79-7.92(1H，m)，7.63(1H，d，J＝7.5Hz)，7.24-7.41(5H，m)，6.78(1H，d，J＝8.4Hz)，6.71(1H，t，J＝7.2Hz)，6.11(1H，s)

EI-MS(m/z)：280(M⁺.C₁₆H₁₂N₂OS，60)，147(72)，119(100)，92(59)

实施例12、2-(5-氯-2-噻吩基)-2，3-二氢喹唑啉-4(1H)-酮

操作步骤同实施例3，白色固体，m.p.：178-180℃

¹H NMR(DMSO-d₆，ppm)δ：8.53(1H，s)，7.62(1H，d，J＝8.1Hz)，7.25-7.32(2H，m)，6.99(2H，s)，6.70-6.78(2H，m)，5.95(1H，t，J＝2.4Hz)

EI-MS(m/z)：264(M⁺C₁₂H₉ ³⁵ClN₂OS，67)，227(37)，147(49)，120(100)，92(38)

实施例13、2-(5-氯-3-噻吩基)-2，3-二氢喹唑啉-4(1H)-酮

操作步骤同实施例3，白色固体，m.p.：172-175℃

¹H NMR(DMSO-d₆，ppm)δ：8.53(1H，s)，7.62(1H，d，J＝7.5Hz)，7.25-7.32(2H，m)，6.99(1H，s)，6.98(1H，s)，6.70-6.78(2H，m)，5.94(1H，s)

实施例14、2-(2-溴-3-噻吩基)-2，3-二氢喹唑啉-4(1H)-酮

操作步骤同实施例3，白色固体

¹H NMR(DMSO-d₆，ppm)δ：8.46(1H，s)，7.62-7.67(1H，m)，7.31(1H，s)，7.29(1H，m)，7.24(1H，s)，708(1H，dd，J＝5.4，0.6Hz)，6.73-6.78(2H，m)，6.04(1H，s)

EI-MS(m/z)：308(M^+.C₁₂H₉ ⁷⁹BrN₂OS，100)，228(M-Br，26)，149(33)，119(22)，92(17)

实施例15、2-(5-溴-2-噻吩基)-2，3-二氢喹唑啉-4(1H)-酮

操作步骤同实施例3，白色固体，m.p.：168-172℃

¹H NMR(DMSO-d₆，ppm)δ：8.52(1H，d，J＝2.1Hz)，7.61(1H，dd，J＝7.8，1.2Hz)，7.31(1H，s)，7.28(1H，m)，7.09(1H，d，J＝3.6Hz)，6.95(1H，d，J＝3.6Hz)，6.70-6.78(2H，m)，5.96(1H，s)

EI-MS(m/z)：280(M^+.C₁₂H₉ ⁷⁹BrN₂OS，60)，228(M-Br，100)，147(52)，120(82)，92(30)

制剂实施例

实施例1、胶囊剂

处方

活性化合物 50.0g

淀粉 80.0g

乳糖 60.0g

微晶纤维素 35g

10％聚乙烯吡咯烷酮乙醇溶液适量

硬脂酸镁 0.5g

共制 1000粒

将活性化合物及各种辅料过80目筛，按处方量称取，以10％聚乙烯吡咯烷酮乙醇溶液为粘合剂，用16目筛制成适宜的颗粒，65℃干燥，14目筛整粒，加入硬脂酸镁混合均匀，测颗粒含量，计算装量，装入胶囊，即得。

实施例2、片剂(粉末压片法))

处方

活性化合物 200g

微晶纤维素 300g

无水乳糖 450g

聚乙烯吡咯烷酮 30g

微粉硅胶 2g

硬脂酶镁 5g

共制 10000片

将活性化合物与微晶纤维素、无水乳糖、聚乙烯吡咯烷酮、微粉硅胶于混合机中混匀，然后加入硬脂酸镁混匀，压片即得。

实施例3、片剂(湿制粒法))

处方

活性化合物 200g

乳糖 1200g

微晶纤维素 400g

8％淀粉浆适量

羧甲基淀粉钠 100g

硬脂酸镁 10g

共制 10000片

将活性化合物、微晶纤维素、乳糖、羧甲基淀粉钠过80目筛，混匀，用8％淀粉浆制软材，16目制粒，干燥、整粒后，加入硬脂酸镁混合均匀，测定颗粒含量，计算片重，压片，即得。

效果实施例：

本发明化合物对人脐静脉内皮细胞的增殖抑制作用

采用CCK-8法检测化合物对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的抑制作用，CCK-8中含有WST-8(2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2，4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐)，它在电子载体(1-Methoxy PMS)的作用下被细胞线粒体中的细胞脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲臜物，生成的甲臜量与活细胞数量成正比，可用于进行简便而准确的细胞增殖和毒性分析。

单一药物浓度筛选：人脐静脉内皮细胞悬液100μl

接种于96孔板，37℃，5％CO₂培养箱中培养24h后，加入10^-5M化合物1μl每孔，另设相应的细胞对照及培养液本底对照，细胞对照中加入1μl100％DMSO。37℃，5％CO₂培养箱中培养48h。结束培养后用酶标仪于450nM处测定OD值。OD值测定后，每孔加入10μlCCK-8，轻轻振摇后，37℃，5％CO₂培养箱中培养2小时。培养结束后，用酶标仪于450nM处测定OD值。

抑制率％＝【1-(OD_{药物处理细胞}/OD_{药物未处理细胞})】×100％

IC₅₀的测定：人脐静脉内皮细胞悬液100μl接种于96孔板，37℃，5％CO₂培养箱中培养24h后，加入不同浓度化合物1μl每孔，另设相应的细胞对照及培养液本底对照，细胞对照中加入1μl100％DMSO。37℃，5％CO₂培养箱中培养48h。结束培养后用酶标仪于450nM处测定OD值。OD值测定后，每孔加入10μlCCK-8，轻轻振摇后，37℃，5％CO₂培养箱中培养2小时。培养结束后，用酶标仪于450nM处测定OD值。

所有数据均以平均数方式表示，所有各项指标检查结果经Excel 2003和origin5.0统计软件处理。根据实验结果绘制剂量-反应曲线，计算出IC₅₀值，结果见表1。

表1

实施例	抑制率(％)	IC₅₀(μM)
			1	67.9	/
2	68.0	16.13
			3	80.29	/
4	67.4	6.84
			8	60.1	4.07
9	68.4	/
			10	74.4	10.4
11	80.5	5.38
			13	81.1	13.9
15	75.7	4.82

Claims

1.一种如式I所示的取代的2，3-二氢-4(1H)-喹唑酮衍生物、其药学上可接受的盐或溶剂化物；

其中：

R₁为一到四个取代基，每个独立地选自卤素、NO₂、氰基、H、C₁～C₆链烃基、C₁～C₆卤代链烃基、C₃～C₈环烃基、C₃～C₈杂环烃基、C₁～C₆脂肪酰基、C₆～C₁₂芳基、C₄～C₁₂杂芳基、C₄～C₁₀环烃基烷基、C₄～C₁₀杂环烃基烷基、C₇～C₁₄芳烷基或C₇～C₁₄杂芳烷基、NR₇R₈、NR₉C(O)R₁₀、OC(O)R₁₁、OC(O)NR₁₂R₁₃、C(O)OR₁₄、C(O)NR₁₅R₁₆、S(O)R₁₇、S(O)NR₁₈R₁₉、S(O)₂NR₂₀R₂₁、OR₂₂或SR₂₃；

较佳的，所述的R₁为卤素、NO₂(优选6位硝基)、氰基或H；其中所述的卤素优选氯，进一步优选6位氯代或7位氯代；

Cy为取代的五元环A或B：

其中，Z选自S，O或NR₆(优选S或O)；

R₂、R₃、R₄和R₅独立地选自卤素、NO₂、氰基、H、C₁～C₆链烃基、C₁～C₆卤代链烃基、C₃～C₈环烃基、C₃～C₈杂环烃基、C₁～C₆脂肪酰基、NR₂₄R₂₅、NR₂₆C(O)R₂₇、OC(O)R₂₈、OC(O)NR₂₉R₃₀、C(O)OR₃₁、C(O)NR₃₂R₃₃、S(O)R₃₄、S(O)NR₃₅R₃₆、S(O)₂NR₃₇R₃₈、OR₃₉或SR₄₀；但当Cy为A，R₁为H时，R₂不为甲基；

或者

2.如权利要求1所述的化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于：当Cy为A时，R₂、R₃和R₄独立的为H、卤素(优选Br或Cl)或C₁～C₃烷基(优选甲基)，更佳的，R₄为H，R₂＝R₃＝Br，或R₂＝R₄＝H，R₃为Br，或R₂＝R₃＝H，R₄为甲基，或R₃＝R₄＝H，R₂为Cl，或R₃＝R₄＝H，R₂为Br；当Cy为B时，R₂、R₃和R₅独立的为H或卤素(优选Br或Cl)，更佳的，R₂＝R₃＝H，R₅为Br，或者R₃＝R₅＝H，R₂为Cl。

3.如权利要求1所述的化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物，其特征在于：所述的R₂与R₃，或R₃与R₄，以及与它们相连的原子共同构成稠合芳环时，稠合环是苯环或吡啶环。

4.如权利要求1～3任一项所述的化合物的制备方法，其特征在于包含下列步骤：

采用2-氨基苯甲酰胺(C)和杂芳基醛A-1或B-)为原料，在酸或碱催化下，在溶剂中进行反应，制备I-A或I-B化合物，即式(I)化合物；

5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于：所述的反应温度均为0-200℃，优选20-50℃；反应时间均为1分钟～72小时，优选1小时以内。

6.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于：所述的催化剂酸为对甲苯磺酸、甲酸、乙酸、草酸、盐酸、硫酸、磷酸、氯化锌、氯化铵、氯化铟、硫酸氢铵、硫酸氢钾、硫酸氢钠、硫酸镍、硫酸亚铁、硫酸钾铝、硫酸铜或硝酸铜；所述的催化剂碱为氢氧化物、或碱金属烷氧化物。

7.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于：所述的溶剂为叔丁醇、乙醇、甲醇、异丙醇、乙二醇、乙二醇单甲醚、卤代烃、乙腈、四氢呋喃、二氧六环、二甲亚砜、N，N-二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯烷-2-酮和有机酸中的一种或多种。

8.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于：当原料C的取代基R₁为硝基时，所述的溶剂和催化剂均为甲酸。

9.一种包括权利要求1～3任一项所述的式(I)化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物及药学上可接受的载体的药物组合物。

10.如权利要求1～3任一项所述的式(I)化合物、其药学上可接受的盐、溶剂化物或包含它们中的一种或多种的可药用的组合物在制备治疗需要抑制血管生成和/或发挥细胞毒作用的疾病的人用药物中的用途。