CN101917984B - 用于预防和治疗动物中由革兰氏阳性细菌引起的感染的乳酸羧酸酯 - Google Patents

用于预防和治疗动物中由革兰氏阳性细菌引起的感染的乳酸羧酸酯 Download PDF

Info

Publication number
CN101917984B
CN101917984B CN200980102605.9A CN200980102605A CN101917984B CN 101917984 B CN101917984 B CN 101917984B CN 200980102605 A CN200980102605 A CN 200980102605A CN 101917984 B CN101917984 B CN 101917984B
Authority
CN
China
Prior art keywords
day
animal
formula
lactic acid
poultry
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN200980102605.9A
Other languages
English (en)
Other versions
CN101917984A (zh
Inventor
A·卡泽米尔
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Purac Biochem BV
Original Assignee
Purac Biochem BV
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Purac Biochem BV filed Critical Purac Biochem BV
Publication of CN101917984A publication Critical patent/CN101917984A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN101917984B publication Critical patent/CN101917984B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/215—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids
    • A61K31/22—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acyclic acids, e.g. pravastatin
    • A61K31/23—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acyclic acids, e.g. pravastatin of acids having a carboxyl group bound to a chain of seven or more carbon atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
    • A23K20/10—Organic substances
    • A23K20/105—Aliphatic or alicyclic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K50/00—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals
    • A23K50/70—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for birds
    • A23K50/75—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for birds for poultry
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K50/00—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals
    • A23K50/10—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for ruminants

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Fodder In General (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

本发明涉及抗细菌化合物用于预防或治疗由动物中革兰氏阳性细菌引起的肠道感染的用途，该抗细菌化合物选自：根据通式(1)的乳酸羧酸酯，通式(1)R2-COO-[-CH(CH3)-COO]n-R1或其Na、K、Ca、Mg、Fe(II)、Zn、NH4或Cu(II)盐，通式(2)的乙醇酸羧酸酯，通式(2)：R2-COO-[-CH2-COO]n-R1或其Na、K、Ca、Mg、Fe(II)、Zn、NH4或Cu(II)盐，通式(3)的乳酸酯，通式(3)：HO-CH(CH3)-COO-R2和/或通式(4)的乙醇酸酯，通式(4)：HO-CH2-COO-R2，其中R1选自H，n表示1-10的整数值，并且R2表示C1-C35烷基或烯基链，其可以是分支或未分支的。该化合物优选地是乳酸羧酸酯或其Na、K、Ca、Mg、Fe(II)、Zn、NH4或Cu(II)盐，其在梭菌的治疗或预防中特别有用。还要求了用于预防或治疗感染的动物营养组合物和方法。

Description

用于预防和治疗动物中由革兰氏阳性细菌引起的感染的乳酸羧酸酯
本发明涉及用于预防或治疗动物中由革兰氏阳性细菌引起的肠道感染的方法、用于预防或治疗动物中由革兰氏阳性细菌引起的肠道感染的特定组合物、特定组合物用于预防或治疗动物中由革兰氏阳性细菌引起的肠道感染的用途、包含有效预防或治疗动物中由革兰氏阳性细菌引起的肠道感染量的特定化合物的用于动物的营养组合物。
革兰氏阳性细菌通过革兰氏染色染成深蓝或紫色，这主要是由于它们的细胞壁中大量的肽聚糖引起的。革兰氏阳性细菌中特别包括的是病原菌肠球菌属(Enterococcus)、梭菌属(Clostridium)、利斯特氏属(Listeria)、葡萄球菌属(Staphylococcus)、各种芽孢杆菌属(Bacillus)种和链球菌属(Streptococcus)。尽管这些生物体中的一些主要是作为食品污染物而得到关注的，但其他一些可能在动物中引起疾病。
例如，梭菌在动物中引起多种变化很大的肠道疾病。因为其是在土壤、灰尘、粪便和饲料中容易发现的几乎普遍存在的细菌，因此非常难以使动物无梭菌。
梭菌相关的肠道疾病可能相当严重。例如，梭菌参与在鸡体内引起坏死性肠炎。在牛中，梭菌相关的肠炎会呈现出“猝死综合征”的形式，这特别会导致大量牛在一夜间死亡。在其他动物中，梭菌相关疾病也可能引起严重的损害。
已知将抗生素给予动物能保护它们免受肠道感染。在动物营养中包括这样的抗生素也是已知的。然而，对动物饲料中使用抗生素存在着日益递增的抗药性，并且目前许多国家已经立法禁止在动物饲料中使用抗生素。此外，抗生素必须以非常受控的量来给予。
因此，需要用于动物饲料的将有助于治疗或预防动物中由革兰氏阳性细菌引起的肠道感染的非抗生素方法和组合物，所述动物尤其是哺乳动物，包括反刍动物(例如，牛、绵羊、山羊、鹿)和单胃动物(例如，猪、马、兔子)；鸟类(例如，家禽、火鸡、雉鸡、鹌鹑)；鱼，包括海鱼(例如，鲑鱼、大比目鱼、金枪鱼)、淡水鱼(例如，鳟鱼、鲤鱼、罗非鱼)；软体动物(例如，牡蛎、贻贝、蛤蜊、蜗牛)和甲壳类(例如，螃蟹、龙虾、虾)。本发明还发现了在人类和毛皮兽(如水貂、白鼬、sabre和狐狸)中的应用。
此外，为了提高动物生长，可能需要抑制肠道中特定的革兰氏阳性细菌。认为这对于乳杆菌属的菌种(Lactobacillus spp.)可能特别重要。本发明还关注该应用。
本发明提供了用于动物饲料中的用于治疗或预防动物中由革兰氏阳性细菌引起的肠道感染的方法和组合物。根据本发明，使用选自以下的抗细菌化合物用于预防或治疗由革兰氏阳性细菌引起的肠道感染，
符合通式1的乳酸羧酸酯(lactylate)，
通式1：R2-COO-[-CH(CH3)-COO]n-R1
或其Na、K、Ca、Mg、Fe(II)、Zn、NH4或Cu(II)盐，
通式2的乙醇酸羧酸酯(glycolylate)，
通式2：R2-COO-[-CH2-COO]n-R1
或其Na、K、Ca、Mg、Fe(II)、Zn、NH4或Cu(II)盐，
通式3的乳酸酯，
通式3：HO-CH(CH3)-COO-R2
和/或通式4的乙醇酸酯，
通式4：HO-CH2-COO-R2
其中在以上通式中，R1选自H，n表示1-10的整数，而R2表示C1-C35烷基或烯基链，其可以是分支或未分支的。
本发明涉及预防或治疗动物中由革兰氏阳性细菌引起的肠道感染。本发明对于对抗由厌氧性或兼性厌氧性细菌(更特别的是厌氧性细菌)引起的肠道感染的用途特别有吸引力。在厌氧性细菌的组内，特别理想的是具有用于预防或治疗由形成孢子的细菌引起的肠道感染的方法，因为这些生物体倾向于难以控制。本发明对于由梭状芽孢杆菌引起的肠道感染的预防和治疗特别有兴趣。
在一个实施方案中，本发明涉及预防或治疗家禽(特别是鸡)中由梭菌(特别是产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens))引起的肠道感染。
在另一个实施方案中，本发明涉及预防或治疗牛中由梭菌(特别是破伤风梭菌(Clostridium tetanii)、诺氏梭菌(Clostridium novyi)(B型)、败毒梭菌(Clostridium septicum)、肖氏梭菌(Clostridiumchauvii)、索氏梭菌(Clostridium sordelii)、溶组织梭菌(Clostridiumhemolyticum)、艰难梭菌(Clostridium difficile)、肉毒梭菌(Clostridiumbotulinum)中的一种或多种)引起的肠道感染。
在进一步的实施方案中，本发明涉及减少乳酸杆菌的肠道生长。
注意到WO2004/107877描述了包含乳酸或其衍生物和无机酸的混合物的抗微生物组合物。通常将该组合物描述为抗微生物剂。特别指出了对抗沙门氏菌属(Salmonella)和大肠杆菌(Escherichia Coli)的用途。尽管乳酸羧酸酯作为可能的乳酸衍生物被提及，但没有进一步阐明其用途。在该参考文献中没有教导或提示已经发现了使用乳酸羧酸酯能显示出对抗动物中的革兰氏阳性细菌的特别功效。
进一步注意到GB115480描述了酰化α-羟基羧酸对抗细菌和真菌，例如霉菌(mould、mildews)和酵母。表明了该化合物可以用于人或其他动物食用或应用于人或其他动物，但这从未得到过阐明。在该参考文献中没有教导或提示使用乳酸羧酸酯能显示出对抗革兰氏阳性细菌的特别功效。
在本发明中，使用了选自以下所述的一种或多种抗细菌化合物：通式1的乳酸羧酸酯，或其Na、K、Ca、Mg、Fe(II)、Zn、NH4或Cu(II)盐；通式2的乙醇酸羧酸酯，或其Na、K、Ca、Mg、Fe(II)、Zn、NH4或Cu(II)盐；通式3的乳酸羧酸酯，和/或通式4的乙醇酸酯。
已经发现了使用通式1的乳酸羧酸酯或其盐是优选的。
在本发明的优选实施方案中，R2是具有6-20个碳原子的烷基或烯基链。更特别地，R2是具有6-18个碳原子的烷基或烯基链。在该实施方案中，合适的取代基包括具有6个碳原子(己基)、8个碳原子(辛基)、10个碳原子(癸酸)、12个碳原子(月桂基)、14个碳原子(肉豆蔻基)、16个碳原子(鲸蜡基、棕榈酰基)、18个碳原子(硬脂酰基)的基团。还可以使用两种或多种化合物的混合物。在使用盐的情况中，使用Na、K、Ca或Mg盐可能是特别优选的
n值优选地为1-5。更特别地，n具有1、2或3的值。
月桂酰乳酸羧酸酯、肉豆蔻酰乳酸羧酸酯及其钠盐的使用是特别优选的。在一个实施方案中，使用包含5-95wt.％月桂酰乳酸羧酸酯和95-5wt.％肉豆蔻酰乳酸羧酸酯的混合物，或使用这些化合物的钠盐，更特别地，使用包含25-75wt.％(更特别地40-60wt.％)月桂酰乳酸羧酸酯和75-25wt.％(更特别地40-60wt.％肉豆蔻酰乳酸羧酸酯)的混合物，或这些化合物的钠盐。
在本发明的一个实施方案中，将抗细菌化合物，特别是其乳酸羧酸酯或盐，与一种或多种抗球虫成分结合使用。这对于免疫抑制期间的家禽特别重要，免疫抑制期是鸡的生命过程中保护卵中的动物的免疫系统已经恶化但动物自身的免疫系统尚未完全发育的阶段。对于鸡，该阶段为动物生命过程的第10天至第20天。
提高鸡对肠道梭菌感染的抵抗力是特别重要的。更特别地，在鸡中，认为由梭菌引起的坏死性肠炎之前常常存在艾美耳球虫感染。认为艾美耳球虫损害肠壁，这使得对梭菌感染的抵抗力较低。因此使用乳酸羧酸酯与一种或多种抗球虫成分的组合将提供提高的鸡对抗坏死性肠炎的抵抗力。
合适的抗球虫成分是本领域已知的，它们应当提供的量也是已知的。合适的成分包括maduramycine、地克珠利、甲基盐霉素、尼卡巴嗪、莫能菌素、双氯苄氨胍、拉沙里菌素、常山酮、甲基盐霉素、盐霉素、地可喹酯和semduramycine。
可以将组合物作为常规动物饲料组合物的成分给予动物。在本发明的上下文中，术语“动物营养”包括固体饲料和液体饲料，如饮用水。因此，可以将组合物作为常规动物饲料组合物的固体或液体成分或在饮用水中给予动物。
也可以在分开的步骤中将组合物给予动物，与常规动物饲料组合物的提供无关。
在本发明的一个实施方案中，将抗细菌化合物，特别是乳酸羧酸酯或其盐，连接至支持物上。这为获得固体粉末形式的抗微生物组合物提供了一种常规方式。合适的支持物选自植物纤维材料、植物碳水化合物(如纤维素)和矿物支持物，如硅石、淀粉、石膏和石灰。
在另一个实施方案中，将抗微生物化合物加入到含有植物油(如玉米油、大豆油或橄榄油)的混合物中。
抗微生物化合物还可以是片剂或其他已知用于给动物提供药物成分的成形体的形式。
给予动物的抗微生物化合物(特别是乳酸羧酸酯)的量使得能有效治疗或预防给予该化合物的动物中由革兰氏阳性细菌引起的肠道感染。这样的量的合适范围为0.0001-5％，基于饲喂于动物的每种饲料的总重。在优选的实施方案中，该量的范围可以为0.001至2％，基于饲喂于动物的每种饲料的总重。已经发现与WO2004/107877中所述的使用乳酸相比，可以使用较低浓度的有效成分。尽管在WO2004/107877的实施例中，使用1.2wt％乳酸，例如，根据本发明的乳酸羧酸酯的使用使得可以使用降低含量的活性成分。因此，在本发明的一个实施方案中，该量的范围为0.001至1wt.％，更特别为0.001至0.5wt％，基于饲喂于动物的每种饲料的总重。测定所需的量在本领域技术人员的能力范围内。
如果需要的话，该量可以高于能有效治疗或预防动物中由革兰氏阳性细菌梭菌相关肠炎引起的感染的化合物所需的量。如果化合物也用于促进生长、改善饲料产出比和/或改善动物饲料中给予的氨基酸的消化性，情况可能如此。
如上所述，可以将抗细菌化合物作为常规动物饲料组合物的成分给予动物。常规动物饲料组合物可以包含小麦、淀粉、肉和骨粉、玉米(maize)、向日葵子饼粉、玉米(corn)、谷物、大麦、大豆粉、木薯、桔浆、豆荚、甜菜浆等等。根据本发明，为治疗或预防革兰氏阳性细菌引起的肠道感染给动物提供抗细菌化合物一般不结合提供抗生素。
在WO2004/107877中，将乳酸或乳酸衍生物与无机酸结合使用，所述无机酸选自含氮、硫和磷的酸。表明了认为在动物的整个世代过程中，无机酸能够降低食糜的pH，由此增加了未离解的乳酸的存在，未离解的乳酸可破坏病原体的外膜。
相反，本发明不依赖于未离解乳酸的存在。因此，本发明不需要无机酸的存在来降低食糜的pH。
因此，本发明还涉及如上所述的抗细菌化合物(特别是根据通式1的乳酸羧酸酯)在预防或治疗由革兰氏阳性细菌引起的肠道感染中的用途，其中这种用途不伴随着使用无机酸来增加未离解乳酸的存在，所述无机酸选自含氮、硫和磷的酸。
通过以下实施例来进一步说明本发明，这些实施例显示了本发明的创造性实质，而本发明并不限于此或受此限制。
实施例1：乳酸钠月桂酸酯和乳酸钠肉豆蔻酸酯的混合物对抗鸡 中坏死性肠炎的功效
通过在实验性产气荚膜梭菌感染模型中的Schothorst饲料研究来评价乳酸钠月桂酸酯和乳酸钠肉豆蔻酸酯的混合物对抗鸡中坏死性肠炎的功效，这些模型中已经产生了球虫病感染，球虫病感染用作产气荚膜梭菌的预触发物，使其定居于小肠中并引起坏死性肠炎。球虫病感染由致病性巨型艾美耳球虫(Eimeria maxima)引起，在球虫病感染的高峰，给家禽接种证明了对雏鸡致病的产气荚膜菌株。由巨型艾美耳球虫引起的球虫病感染(导致小肠中部区段的损伤)，接着是梭菌感染，形成了高度可重复的模型和评价坏死性肠炎损伤的简易而精确的方式，因为巨型艾美耳球虫和梭菌的损伤易于区别，尽管这两种病原体的损伤不发生在相同的小肠区段中。该实验是与Animal HealthService(GD)协作进行的。
该实验由一个处理和两个对照处理组成。所有处理均由六个同样的笼子组成，每个笼子19只雏鸡。表1中给出了这些处理。
表1处理和膳食编码的描述
  处理   第9天   第14、15和16天   添加剂的补充   备注
  接种物：
  1.   盐水   肝脏肉汤   -   对照
  2.   巨型艾美耳球虫   产气荚膜梭菌2)   -   对照/实验
  3.   巨型艾美耳球虫   产气荚膜梭菌   测试混合物(0.3％的混合物，该混合物为50wt.％乳酸钠月桂酸酯和50wt.％乳酸钠肉豆蔻酸酯)   实验
1)1ml中10,000个巨型艾美耳球虫形成孢子的卵母细胞
2)1ml中1×108个cfu产气荚膜梭菌
动物、管理和程序
一天大的雄性Ross 308雏鸡由ProbFoed & Sloot B.V.，荷兰提供。在第0天，雏鸡到达Animal Health Service(Deventer，荷兰)的实验机构并在单独称重后圈养在消化性笼子里。基于重量-分类系统，将19只家禽分配至30个Schothorst铺草地板的消化性笼子里，使得每个笼子的平均体重较小。将雏鸡圈养在这些笼子中，直至第20天的实验结束。在第9天，如果没有发生死亡，将鸡的数量标准化至17，并再次测量家禽的重量。首先，除去具有明显视觉异常的家禽，其次，随机取出以将数量降至17。在整个实验阶段中的光照和温度时间表如下，从第0天至第9天的第一个阶段中，22小时光照，接着2小时黑暗，接着在剩余的实验过程中，为18小时光照和6小时黑暗。环境温度从开始时的32℃逐渐降至实验结束时的25℃。
从第0天开始供应饲料，用于随意摄入，除了接种(第9、14、15和16天)和选择(第15、16和20天)前5小时。在实验过程中可随意饮水。
饲料组成
从到达那天直至第9天给雏鸡提供基于小麦/大豆粉的起始膳食，直至实验结束(第20天)饲喂基于小麦/大麦的生长膳食。由于在饲料生产后需要均匀地混入测试产品中，因此以粗粉来饲喂生长膳食。膳食不含测试产品以外的任何球虫抑制剂或抗微生物饲料添加剂。实验膳食的营养组成依据荷兰(Dutch)标准以满足雏鸡的营养需求(CVB，2006)。
接种物
在第9天，在5小时的饲料停止阶段后，给雏鸡接种1ml盐水或巨型艾美耳球虫(1ml中10.000形成孢子的卵母细胞/鸡)。从第14天开始，在5小时饲料停止后，每天给雏鸡接种1ml肝脏肉汤(DIFCO)或产气荚膜梭菌一次，持续三天。不同处理的详细概况呈现于表1中。
致病性产气荚膜菌株获自荷兰迪温特的Animal Health Service(1ml中大约108cfu)。将菌株生长于绵羊血的琼脂上，并且通过CIDC(Lelystad的Central Institute of Animal Disease Control)将培养物定型为产α和β2毒素类型的产气荚膜梭菌。每天使用新鲜制备的接种物。
损伤评分
产气荚膜梭菌：肉眼损伤和显微镜损伤通常发生在小肠中，特别是在最接近的部位。使用了以下的评分方法：
0：无损伤
1：1至5个小损伤(小于1mm直径的点)
2：超过5个小损伤(小于1mm直径的点)或1至5个较大的损伤(1至2mm直径的点)
3：超过5个较大的损伤(1至2mm直径)或糜烂区域
4：死亡的家禽，在尸检后具有阳性坏死性肠炎诊断
所有家禽都是“盲”评分的，即，给家禽损伤评分的人员不具有家禽治疗的知识。
测量
在实验过程中，测量了以下参数：
·到达那天的个体体重以及实验第9天和第20天的每个笼子的平均值。
·尸体解剖之前的家禽体重。
·在第0天至第9天的阶段中每个笼子的饲料摄入和第9天至第20天大的每日饲料摄入。
·在实验的第15天、第16天和第20天每个处理的24只家禽的小肠粘膜中的球虫病损伤和坏死性肠炎损伤(每个处理总共72只家禽)。
·从第0天至第20天大小的每个笼子的死亡率。
每日保持记录所有的常规研究活动、健康紊乱和死亡率(及其最可能的诱因)
统计学分析
分析原始数据的逸出值。从统计学分析中排除明显的逸出值。通过Fisher Exact测试分析NE-损伤的发生率(受侵害家禽的％)，而使用Genstat统计学软件通过方差分析(ANOVA)来分析损伤的严重程度和每日饲料摄入测量。通过最小显著差(LSD)比较处理平均值。认为P≤0.05是统计学显著的，而认为0.05＜P≤0.10是近显著趋向。
结果和讨论
损伤的发病率和严重程度
第15天(感染后1天)的损伤评分
在表2中，给出了正评分家禽(具有NE损伤)的百分比，以及所有正评分家禽的平均损伤评分。因为所有检测的家禽(受侵害以及未受侵害的)的平均损伤评分给出了该群体更有代表性的描述，对这些结果进行了统计学分析(参见表2的第五栏)。正和负评分家禽中的损伤严重程度都以0至4的等级来表示(参见“损伤评分”部分)。
表2：使用NE(％)观察的家禽和第15天(p.i.1天)评分的平均损伤严重程度
  组   处理   剂量   正家禽(％)   损伤严重程度   损伤严重程度(正家禽)1)
  1   负对照   -   0a   0.0a   0.0
  2   正对照   -   16ab   0.5b   3.0
  3   测试混合物   0.3％   17ab   0.4b   2.5
a，b栏中不具有相同上标的值是差异显著的(P≤0.05)
1)NE-正评分家禽的损伤严重程度
对NE发病率观察到明显的处理效果。如所预期的，在未感染的对照处理中观察到最低的，但结果与补充测试混合物的处理和未补充的感染对照的结果相当。
基于ANOVA，推断第15天时对坏死损伤的严重程度存在明显的治疗效果(P＜0.001)。关于损伤严重程度，明显的是感染处理、未补充以及补充中损伤比未感染对照处理更严重，后者中不存在正评分家禽。在感染处理中，没有观察到统计学差异。
第16天(感染后第2天)的损伤评分
在表3中，给出了第16天的正评分家禽的百分比和家禽的平均损伤评分。
表3：用NE(％)观察的家禽和第16天(p.i.2天)所有尸体解剖家禽中评分的平均损伤严重程度
  组   处理   剂量   正家禽(％)   损伤严重程度   损伤严重程度(正家禽)1)
  1   负对照   -   0a   0.0a   0.0
  2   正对照   -   68b   2.1c   3.2
  3   测试混合物   0.3％   41b   1.1b   2.7
a，b栏中不具有相同上标的值是差异显著的(P≤0.05)
在第16天，将NE发病率和损伤严重程度的结果与第15天的结果比较，明显的感染后2天的感染严重程度较高。尽管对NE发病率再次观察到明显的治疗效果，清楚这是由于未感染对照处理和感染处理之间的差异引起的，这和预期的一样，而在感染处理中，没有观察到明显的差异。
在感染后2天损伤严重程度产生非常明显的区别。与感染的未补充对照相比，补充测试混合物的处理导致损伤明显减轻，尽管平均损伤评分仍然高于未感染对照。
第20天(感染后6天)的损伤评分
在第20天，在处理之间没有观察到明显差异。所有处理从NE恢复，至少基于显微镜评价，发病率为0％，损伤严重明显地为0.0。
死亡率
死亡率是测量禽群中梭菌感染严重程度的参数之一。在该实验中，比较处理之间的死亡率。感染对照处理(处理2)中的死亡率为14.6％，未感染对照中为0％。测试混合物的补充导致死亡率下降(5.1％)。
生产参数
除了损伤评分以外，在试验过程中测量了生产力参数，如体重和日饲料摄入。
所有处理组中一天大的雏鸡的体重大约为47g。因为从第0天至第9天的处理是相似的，在该阶段中，观察到体重增加和饲料摄入没有差异。
在从第9天至第20天的感染期中，生产参数明显受到单独处理的影响。如所预期的，未感染对照中的体重增加最高，而感染的未补充处理中的雏鸡显示出最低的体重增加。这导致在第20天时最终体重降低30％(523g相对于749g)。与感染的未补充对照相比，感染的补充处理导致饲料摄入和体重增加明显较高。与未感染对照组相比时，生产参数的降低可以降低10％，表明大约20％的最终体重损失(大约583g相对于749g)。推断测试混合物明显提高了亚临床梭菌感染过程中的生产力性能。
实施例2：乳酸羧酸酯对抗梭菌的体外测试
将产气荚膜梭菌ATCC 13124的液体培养物在螺纹盖盖住的试管中(100×16mm)30℃培养24小时，试管中含有10ml心脑浸液肉汤(Oxoid CM225，贝辛斯托克，英国)。制备含有各种含量乳酸羧酸酯的心脑浸液肉汤。用9M硫酸将培养基的pH调节至6.0，使用装备有Blueline 16pH(微)探针的Handylab pH 12pH计(no.285129163)。通过使用0.45μm醋酸纤维素滤器(Minisart注射器滤器，无菌和无热原，16555号，Sarto-rius，
Figure BPA00001184821500121
德国)(9)的过滤将所有培养基灭菌。将300μl的每种培养基转移至一块无菌Bioscreenhoneycombe 100孔平板(Thermo electron Oy，Vantaa，芬兰)中。将完成的孔平板储存在-30℃，直至进一步使用。
使用无菌Hamilton重复分配器(Hamilton，Bonaduz，瑞士)给孔平板接种3μl培养物。在30℃下使用Bioscreen C培养系统(OyGrowth Curves AB Ltd，Helsinki，芬兰)测定测试生物体的生长速率。为确保低氧条件，将Bioscreen置于装备有M-12氧传感器的厌氧密室内(In Vivo2400缺氧工作台，Biotrace International Plc，Brid-gend，英国)。使用Ruskinn气体混合器模块(BiotraceInternational Plc)在0％氧下调节氧压。Bioscreen C通过垂直光度测定法同时在多达200个孔中在动力学上测量了浑浊的产生。以固定的时间间隔在420-580nm下使用宽带滤器自动测量了培养物的光密度。
表4显示了对心脑浸液肉汤中的产气荚膜梭菌ATCC 13124测试的各种乳酸羧酸酯的MIC值。在括号中，给出了重复的次数。MIC表示最小抑制浓度，这是其中培养物吸光度的增加没有超过极限值的最低浓度，将其限定为空白加三次标准偏差的吸光度值的平均增加。
显示出即使在非常低的浓度下，乳酸羧酸酯能够抑制产气荚膜梭菌的生长。
表4.不同乳酸羧酸酯的MIC值
  乳酸羧酸酯   MIC值(％)
  C8乳酸羧酸酯   0.05％(2x)
  C10乳酸羧酸酯   0.04％(2x)
  C12乳酸羧酸酯   0.002％(2x)
  C14乳酸羧酸酯   0.001％(2x)
  C16乳酸羧酸酯   0.002％(2x)
  C18∶1乳酸羧酸酯   0.02％(2x)
  1∶1C10/C12乳酸羧酸酯混合物   0.002％(3x)
  1∶1C12/C14乳酸羧酸酯混合物   0.001％(3x)
实施例3：乳酸钠月桂酸酯和乳酸钠肉豆蔻酸酯对抗鸡中坏死性 肠炎的剂量-反应研究和预防研究
与实施例1类似，研究了化合物剂量的影响。此外，研究了混合物对之前未受艾美耳球虫和梭菌感染的鸡的用途。
所进行的处理概括于表5中：
表5.处理的描述
  处理描述
  1.未感染2.未感染+0.3％测试混合物3.感染1)4.感染+0.6％测试混合物5.感染+0.3％测试混合物6.感染+0.3％测试混合物(硅石)7.感染+0.15％测试混合物8.感染+0.075％测试混合物9.感染+0.038％测试混合物10.感染+0.019％测试混合物11.感染+0.010％测试混合物12.感染+0.005％测试混合物
测试混合物由50wt.％乳酸钠月桂酸酯和50wt.％肉豆蔻酰乳酸羧酸酯构成。
结果可以概括如下。
在该实验中，用巨型艾美耳球虫和产气荚膜梭菌相继感染导致在感染后头两天期间56％的坏死性肠炎发病率和1.6的平均损伤评分。给家禽膳食补充测试混合物降低了受感染家禽的数目并且观察了剂量应答效应，在0.6％和0.3％处理中显示出最高的功效。由于测试混合物补充明显降低了损伤严重程度，在该参数上也强烈存在剂量应答功效。用最高剂量测试混合物的处理中损伤不太严重。以纯化形式补充的测试混合物导致略优于通过硅石载体提供的测试混合物的应答。补充0.6％测试混合物导致死亡率明显降低(4.6％)，并且没有明显高于未受感染的对照处理。使用0.3％测试混合物的结果支持在损伤评分中观察到的结果。
关于生产性能，与使用或未用测试混合物补充的健康家禽相互比较时，观察到了功效。测试混合物的提供趋向在开始阶段和生长阶段中增加体重。给受感染的家禽补充较高剂量的测试混合物使得家禽具有与根本未受感染的家禽相似的终体重(第37天)。
通过显示出较低的发病率和严重程度较低的损伤，可以推断出测试混合物，尤其是0.3wt％或较高的剂量，能有效防止雏鸡中坏死性肠炎的发展。

Claims (4)

1.符合式1的乳酸羧酸酯与一种或多种抗球虫成分联合用于制备提供提高的鸡对抗坏死性肠炎的抵抗力的组合物的用途，
式1  R2-COO-[-CH(CH3)-COO]n-R1
其中，R1选自H，n表示1-10的整数值，并且R2表示C1-C35烷基或烯基链，其可以是分支或未分支的。
2.根据权利要求1的用途，其中R2是C6-C18烷基或烯基链。
3.根据权利要求1的用途，其中n是1、2或3。
4.根据权利要求1的用途，其中组合物是动物营养组合物。
CN200980102605.9A 2008-01-25 2009-01-23 用于预防和治疗动物中由革兰氏阳性细菌引起的感染的乳酸羧酸酯 Active CN101917984B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP08100911.0 2008-01-25
EP08100911A EP2082739A1 (en) 2008-01-25 2008-01-25 Lactylates for the prevention and treatment of infections caused by gram-positive bacteria in animals
PCT/EP2009/050770 WO2009092787A1 (en) 2008-01-25 2009-01-23 Lactylates for the prevention and treatment of infections caused by gram-positive bacteria in animals

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201310629600.XA Division CN103655536A (zh) 2008-01-25 2009-01-23 用于预防和治疗动物中由革兰氏阳性细菌引起的感染的乳酸羧酸酯

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN101917984A CN101917984A (zh) 2010-12-15
CN101917984B true CN101917984B (zh) 2014-03-26

Family

ID=39596319

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN200980102605.9A Active CN101917984B (zh) 2008-01-25 2009-01-23 用于预防和治疗动物中由革兰氏阳性细菌引起的感染的乳酸羧酸酯
CN201310629600.XA Pending CN103655536A (zh) 2008-01-25 2009-01-23 用于预防和治疗动物中由革兰氏阳性细菌引起的感染的乳酸羧酸酯

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201310629600.XA Pending CN103655536A (zh) 2008-01-25 2009-01-23 用于预防和治疗动物中由革兰氏阳性细菌引起的感染的乳酸羧酸酯

Country Status (12)

Country Link
US (3) US10898457B2 (zh)
EP (2) EP2082739A1 (zh)
JP (1) JP5461432B2 (zh)
CN (2) CN101917984B (zh)
AU (1) AU2009207626B9 (zh)
BR (1) BRPI0906503B8 (zh)
CA (1) CA2712448C (zh)
ES (1) ES2505140T3 (zh)
MX (1) MX2010008010A (zh)
PL (1) PL2249824T3 (zh)
RU (1) RU2484818C2 (zh)
WO (1) WO2009092787A1 (zh)

Families Citing this family (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011026796A1 (en) 2009-09-01 2011-03-10 Basf Se Synergistic fungicidal mixtures comprising lactylates and method for combating phytopathogenic fungi
PL2729015T3 (pl) * 2011-07-08 2019-07-31 Purac Biochem Bv Aktywna formulacja do stosowania w produktach paszowych
WO2013150058A1 (en) 2012-04-05 2013-10-10 Purac Biochem Bv Method for improving economic performance in poultry husbandry
CN105682472A (zh) * 2013-10-30 2016-06-15 普拉克生化公司 生产饲料产品的方法
RU2564014C2 (ru) * 2013-12-10 2015-09-27 федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Вятский государственный университет" (ВятГУ) Антибактериальное средство и способ лечения кишечного иерсиниоза или псевдотуберкулеза или эшерихиоза
CA2971311C (en) 2014-12-22 2019-04-02 Purac Biochem Bv Lactylate purification process
BR112018000026A2 (pt) 2015-07-02 2018-11-06 Board Of Regents Of The Univ Of Oklahoma tensoativos aniônicos
US9801845B2 (en) 2015-07-02 2017-10-31 Novus International, Inc. Antimicrobial compositions and uses thereof
CN105746908B (zh) * 2016-02-23 2018-08-28 广州英赛特生物技术有限公司 肉豆蔻酸衍生物在制备动物生长促进剂中的应用
CN105724781A (zh) * 2016-02-23 2016-07-06 广州英赛特生物技术有限公司 一种饲用组合物及其在制备动物饲料添加剂中的应用
BR112019004338A2 (pt) * 2016-09-06 2019-05-28 Purac Biochem Bv meio de fermentação, inoculante para um meio de fermentação, uso, método para impedir ou reduzir infecções microbianas e método para obter um produto de fermentação
CN107375413B (zh) * 2017-06-08 2021-01-26 广东省农业科学院动物卫生研究所 肉豆蔻精油和罗勒精油在防治鸡坏死性肠炎中的应用
US10584306B2 (en) 2017-08-11 2020-03-10 Board Of Regents Of The University Of Oklahoma Surfactant microemulsions
JP7212787B2 (ja) * 2019-01-09 2023-01-25 ピュラック バイオケム ビー． ブイ． Ｐｌａベースの物品の熱成形
WO2020229202A1 (en) 2019-05-15 2020-11-19 Purac Biochem B.V. Lactylate blend for preservative/antimicrobial system
JP7541590B2 (ja) 2020-07-03 2024-08-28 ピュラック バイオケム ビー． ブイ． 安定な液体動物用飼料原料
NL2028053B1 (en) * 2021-04-23 2022-11-02 Forfarmers Corp Services B V Method to treat ruminant animals

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004037177A2 (en) * 2002-10-21 2004-05-06 Eveready Battery Company, Inc. Antibacterial shaving foam/gel formulations
US20060062832A1 (en) * 2004-09-20 2006-03-23 Lopes John A Sanitizing wipes with microbicidal properties cross-reference to related applications
US20070010856A1 (en) * 2005-07-11 2007-01-11 Matthew Cohen Antimicrobial sutures and methods of making them

Family Cites Families (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB115480A (en) 1917-05-08 1918-05-08 Reginald Fairfax Wells Improvements in or relating to Aerial Railways.
US2864705A (en) * 1954-08-31 1958-12-16 Glenn Lab Liquid shortenings
US3275503A (en) 1964-08-26 1966-09-27 Patterson Co C Method for the protection of loci susceptible to the growth of undesired microorganisms
HU193294B (en) * 1984-08-15 1987-09-28 Gyogyszerkutato Intezet Preparation influencing the digestion of ruminants advantageously
IT1185550B (it) 1985-04-12 1987-11-12 Dox Al Italia Spa Miscele non polverose di sfarinati o farine con principi attivi per mangimistica
CH688172A5 (fr) 1994-10-26 1997-06-13 Crina Composition d'additif pour aliments destinés à la volaille.
US5663155A (en) 1994-11-30 1997-09-02 The University Hospital Compositions for the treatment of parasitic infections
CA2222563C (en) * 1995-05-26 2012-01-10 Ropapharm B.V. Pharmaceutical compositions, based on etheric oils obtained from plants for use in the human and veterinary medical field
RU2096969C1 (ru) * 1996-05-13 1997-11-27 Закрытое акционерное общество "Холдинг-Созвездие" Премикс
US5958974A (en) * 1996-07-31 1999-09-28 Abbott Laboratories Nutritional formulations containing water-miscible lipid derivatives as antibacterial agents
US5911981A (en) * 1997-10-24 1999-06-15 R.I.T.A. Corporation Surfactant blends for generating a stable wet foam
UA44962A (uk) * 1999-06-01 2002-03-15 Леонід Сергійович Прокопенко Передстартовий комбікорм-концентрат для поросят раннього молочного періоду і спосіб його виготовлення
EP1202640A1 (en) * 1999-07-27 2002-05-08 Rhodia Inc. Hops acid antibacterial compositions
US6953772B2 (en) * 2000-07-18 2005-10-11 Lopes John A Concentrated sanitizing compositions for cleaning food and food contact surfaces
EP1483975A1 (en) 2003-06-05 2004-12-08 PURAC Biochem BV Antimicrobial composition comprising a mixture of lactic acid or a derivative thereof and an inorganic acid
CN1867251A (zh) 2003-09-09 2006-11-22 3M创新有限公司 抗菌组合物和方法
US7780873B2 (en) 2004-02-23 2010-08-24 Texas A&M University System Bioactive complexes compositions and methods of use thereof
US20060051384A1 (en) * 2004-09-07 2006-03-09 3M Innovative Properties Company Antiseptic compositions and methods of use
CN101053368A (zh) * 2007-04-25 2007-10-17 广州市维特福生物科技有限公司 一种饲料添加剂

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004037177A2 (en) * 2002-10-21 2004-05-06 Eveready Battery Company, Inc. Antibacterial shaving foam/gel formulations
US20060062832A1 (en) * 2004-09-20 2006-03-23 Lopes John A Sanitizing wipes with microbicidal properties cross-reference to related applications
US20070010856A1 (en) * 2005-07-11 2007-01-11 Matthew Cohen Antimicrobial sutures and methods of making them

Also Published As

Publication number Publication date
US20100311832A1 (en) 2010-12-09
US20190046494A1 (en) 2019-02-14
RU2010133717A (ru) 2012-02-27
RU2484818C2 (ru) 2013-06-20
US11517551B2 (en) 2022-12-06
US10898457B2 (en) 2021-01-26
MX2010008010A (es) 2010-08-10
CA2712448C (en) 2017-01-03
BRPI0906503B1 (pt) 2019-06-25
CA2712448A1 (en) 2009-07-30
CN103655536A (zh) 2014-03-26
US20180193301A1 (en) 2018-07-12
US11517550B2 (en) 2022-12-06
JP2011510045A (ja) 2011-03-31
EP2249824B1 (en) 2014-07-16
AU2009207626B2 (en) 2014-07-24
JP5461432B2 (ja) 2014-04-02
WO2009092787A1 (en) 2009-07-30
AU2009207626A1 (en) 2009-07-30
EP2082739A1 (en) 2009-07-29
BRPI0906503A2 (pt) 2015-07-14
CN101917984A (zh) 2010-12-15
PL2249824T3 (pl) 2014-12-31
AU2009207626B9 (en) 2015-02-19
ES2505140T3 (es) 2014-10-09
EP2249824A1 (en) 2010-11-17
BRPI0906503B8 (pt) 2021-05-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101917984B (zh) 用于预防和治疗动物中由革兰氏阳性细菌引起的感染的乳酸羧酸酯
US8962683B2 (en) Medium chain fatty acids applicable as anti-microbial agents
Cromwell Antimicrobial and promicrobial agents
Lim et al. Organic acids and their salts
KR19990082623A (ko) 동물 사료
JP4199685B2 (ja) 新規な乳酸菌
Tesfaye et al. The effects of probiotics supplementation on milk yield and composition of lactating dairy cows
KR100857771B1 (ko) 바실러스 폴리퍼멘티쿠스, 바실러스 리케니포르미스 및사카로마이세스 세르비지에를 포함하는 어류사료첨가용조성물
JP2014133736A (ja) 腸絨毛伸長組成物及び抗コクシジウム組成物
US20130017174A1 (en) Compositions and methods for increasing health and reducing pathogenic bacteria in animals
Moore et al. The effect of an experimental chlorate product on Salmonella recovery of turkeys when administered prior to feed and water withdrawal
KR100557869B1 (ko) 사료 첨가제
Stanley et al. Sensitivity of Escherichia coli 0157: H7 strain 932 to selected anticoccidial drugs in broiler chicks
KR20170117382A (ko) 동물장내 유용균 증가제 및 이것을 사용한 가축장내 환경개선방법
JPS62138148A (ja) 水産養魚用飼料添加剤
Ivanov Laboratory study to determine the effect of a probiotic mixture on chicken-broiler
Sharma et al. Effects of Supplementation of Acidifiers in the Diet of Poultry
Buchko Influence of formic acid upon metabolism in an organism of piglet
Kampf et al. Spore forming probiotic Bacillus subtilis C-3102 in pig and poultry diets
Theobald Control of E. coli, Salmonella and other potential pathogens
KR20160091711A (ko) 크릴 새우의 영양성분을 혼합하여 제공되는 항균성 양계 급이수
WO2011152742A2 (en) Feed additive of antimicrobial properties, concentrate, use of feed additive to obtain concentrate and method of manufacturing feed additive

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant