CN101912573B - 一种治疗癌症的靶向中药制剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种治疗癌症的靶向中药制剂及其制备方法,所述制备方法包括下列步骤:由莪术40~80份、粗榧40~80份、平地木40~80份、虎杖40~80份、猫爪草30~60份、半枝莲30~60份、蛇莓30~50份、三白草30~50份药物组合物制备到的生药;在生药中加入纳米级超细磁流体充分混合,加入乳化剂制成生药磁流体乳化液;再将医用高分子单体淀粉加入乳化剂或用增溶的方法使其高度分散后,加入到生药磁流体乳化液中,将生药和超细磁流体包裹成毫微球或毫微囊或脂质体,即得。所述治疗癌症的靶向中药制剂。具有高效、低毒、直接命中癌瘤细胞,且具高滞留性抑癌的特点。
Description
技术领域
本发明属于中药领域,具体是涉及一种治疗恶性增殖肿瘤的中药靶向制剂及其制备方法。
背景技术
癌症是人类最主要的死亡原因之一,近几十年发病率一直持续上升,人类的生命受到严重威胁。目前,癌症的治疗大多依赖西药,但西药存在很大的毒副作用,严重影响患者的生活质量。而传统中药在这方面具有显著优势,能够提高患者免疫力,减轻放、化疗不良反应,提高患者生活质量,延长患者生存期,在癌症治疗中具有重要作用。因此,开发研制抗癌中药具有重要意义。
中药靶向制剂是中药制剂的新型给药体系,已成为当前中药新剂型研究的热点之一。
靶向抗癌中药制剂亦称靶向给药系统(targeting drug system TDS),或叫靶向治疗,即在特定的导向机制作用下,将药物输送到特定靶器官从而充分发挥治疗作用。这类药物的载体系统被称为“神奇子弹”(magic buuet)或“生物导弹(biomissile)”,它是由药物、导向和载体3部分构成;其中载体的重要作用是将药物通过局部给药或全身血液循环而有选择地定位于靶区(靶组织、靶器官、靶细胞或细胞内结构),使靶区药物浓度高于其他正常组织,达到提高疗效、降低全身不良反应的给药系统。尤其是在抗癌药研制方面,作为靶向抗癌制剂,无论是在给药途径、靶向的专一性与持效性、药物类型和临床运用方面都有突破性的进展。特别是近年来材料科学及现代分子生物技术的不断创新,更推动了中药靶向制剂的发展,突显出靶向中药制剂在治疗癌症等疑难杂症方面的强劲作用,为中医药进入国际市场奠定了一定的基础。
靶向制剂(靶向给药)在抗癌药物方面已取得重大成效,其原理是将抗癌物与铁磁性材料包封于高分子骨架材料中,制成的超微球控释制剂在体外磁场导向下聚集滞留在靶区的癌组织上,缓慢释放药物,对癌细胞进行有效的攻击,既可避免伤害正常细胞,又可减少用药量和降低毒性,提高疗效。靶向制剂的作用机制是将药物包裹或嵌入液品、液膜、脂质、类脂蛋白以及生物降解高分子物质中,制成微粒、复合型乳剂、脂质体等各种类型的胶体或混悬系统,通过多种给药方式,这些微粒选择性的聚积于肝、脾、淋巴等部位释放而发挥疗效。应用这种靶向制剂的主要优点在于减少用药剂量,降低对机体的毒副作用,持续产生药效,长时间保持靶目标的有效药物浓度。其关键作用是通过药物的主要成分选择性地与靶组织在细胞或亚细胞水平上发生反应,使药物能够可控性地分布。特别是靶向制剂可以提高药物的溶出度和稳定性,增加药物对靶区(癌瘤病灶)的指向性(专杀癌细胞),从而降低对正常细胞的毒性,使药物具有药理活性的专一性,减少剂量,提高药物的生物利用度,适于临床运用。
靶向制剂的纳米靶向给药系统中的纳米粒,是由天然高分子物质(如白蛋白、明胶、乙基纤维素等)或合成高分子物质(如聚氰基丙烯酸烷酯(PACA)、丙烯酸共聚物等)制成粒径为nm级固态胶体粒子,分为药库膜壳型纳米囊和基质骨架型纳米粒。这类载体制剂的优点是可生物降解、低免疫性、制剂形成多样化、包封率高、稳定性好。如用乳化法制备的125I-白蛋白-黄芪多糖纳米粒(168±62)nm,研究表明小鼠口服后主要分布在肝、脾、肺中;又如采用热融分散技术制备的喜树碱固体抗癌脂质体纳米,实验表明,该制剂在癌症病人体内有良好的靶向性。且在靶向载药量的最新研究发现,甘油三酯和油类连合的固液二相载药系统,比传统的硬脂酸载药系统具有更大的载药量,并且更适合于临床运用。
发明内容
本发明的目的之一是提供一种治疗癌症的高效复方中药组合物。
实现上述目的的技术方案如下:
一种治疗癌症的中药组合物,它的活性成分由下列重量份的原料药制成:莪术40~80份、粗榧(枝叶)40~80份、平地木40~80份、虎杖40~80份、猫爪草30~60份、半枝莲30~60份、蛇莓30~50份、三白草30~50份。
本发明所述治疗癌症的中药组合物,其诸原料有以下功用:
莪术:辛、苦,温;归肝、脾经。行气破血,消积止痛。
猫爪草:甘、辛,微温。归肝、肺经。化痰散结,解毒消肿。
虎杖:微苦,微寒。归肝、胆、肺经。清热解毒,利胆退黄,祛风利湿,散瘀定痛,止咳化痰。
蛇莓:微寒,味甘、酸;花果有小毒。归经:肺经;肝经;大肠经。清热,凉血,消肿,解毒。
半枝莲:辛、苦,寒。归肺、肝、肾经。清热解毒,化瘀利尿。
平地木:化痰止咳药;利湿药;活血药。
粗榧(枝叶):苦;涩;性寒抗癌。主治白血病、恶性淋巴瘤。
三白草:肺;脾;胃;大肠经。清热利水;解毒消肿。
本发明的另一目的是提供一种根据上述治疗癌症的中药组合物制得的靶向中药制剂。
所述治疗癌症的靶向中药制剂,其是由以下方法制备得到的:
a)药材前处理:以下重量份的莪术40~80份、粗榧40~80份、平地木40~80份、虎杖40~80份、猫爪草30~60份、半枝莲30~60份、蛇莓30~50份、三白草30~50份,浸泡过夜;
b)制备生药:
将上述各种药材,用水煎煮二次,每次25~40min,合并两次药液,浓缩,按体积比2∶2.5~3.5加入无水乙醇,静置,离心,取上清液,蒸干,加入重蒸水溶解,0.45um微孔滤膜过滤,得到混合生药;或按照常规方法,分别提取上述各种药材的抗癌有效成份,然后混合得到生药;
c)磁流体乳化液的制备:在生药中加入纳米级超细磁流体,充分混合,生药与纳米级超细磁流体的比例为2.4∶1.6~2.6,加入乳化剂(优选阿拉伯胶)制成众生药磁流体乳化液;再将医用高分子单体淀粉加入乳化剂或用增溶的方法使其高度分散后,加入到生药磁流体乳化液中,众生药磁流体乳化液与医用高分子单体淀粉的重量配比为1∶2~4,使其中的高分子单体聚合,将生药和超细磁流体包裹成平均粒径为50~500nm的毫微球或毫微囊或脂质体,即得。
将步骤c)得到的毫微球或毫微囊或脂质体中加入适量的辅料,可制成片剂、颗粒剂及胶囊剂等各种剂型。
本抗癌中药莪术等诸生药的提取物与铁磁性材料包封于高分子骨架材料中,制成超微球控释制剂(由生药、磁铁粒子及骨架材料组成),在体外磁场作用下进行磁性靶向给药;该药物在外磁场引导下通过静脉,动脉导管,经口服给药或直接注射等途径选择性地到达并定位于肿瘤靶区,使药物在肿瘤组织的细胞、亚细胞或分子水平上发挥药效,而对正常组织(正常细胞)则无不良影响。具有高效、低毒、直接命中癌瘤细胞,且具高滞留性抑癌的特点。且其制备降低了生产成本,利于推广。
本发明的优点是:该药物在肿瘤组织的细胞或亚细胞水平上发挥药效,而对正常组织(正常细胞)则无不良影响。具有高效、低毒、直接命中癌瘤细胞,且具高滞留性抑癌的特点。而对正常组织无太大影响。
以下通过一些实验数据,说明本发明制剂的治疗效果:
(1)动物分组和给药
随机将大鼠分为空白对照组、生药组(指上述的莪术、猫爪草、虎杖、蛇莓、半枝莲、平地木、粗榧、三白草的抗癌有效成分提取组合物,参见实施例1;至于各种生药抗癌有效成分的提取方法,可按《中华人民共和国药典》2010年版(一部)附录的高效液相色谱法或其它相适宜的方法进行分离提取与测定,如前所述)、阳性对照组。空白对照组用生理盐水,阳性对照组用地塞米松(80me,/kg),各中药组均按2.5×103mg/kg剂量,连续灌胃给药6d后处死动物,取肝组织。
(2)CYP3A酶活性的测定
采用钙沉淀法制备大鼠肝微粒体,微粒体蛋白浓度采用Lowery法测定;采用CO还原差示光谱法测定肝微粒体的CYP450总含量和分光光度法测定红霉素N-脱甲基酶(ERD)活性,红霉素的终浓度为8mmol/L。
(3)RT-PCR法测定CYP3A1和CYP3A2的mR-NA表达水平
按Trizol试剂盒说明书中方法提取大鼠肝组织的总RNA。取总RNA 2trg,加入Oligo(dt)18-DEPC.treated/free Water 4-,混匀3~5s,70℃温浴5rain后,冰上预冷数秒;加入5×reac-tion buffer 8出、Rib inhibitor 2肛1、dNTP 4斗1,混匀后37℃温浴5min;加入加M.Mulv Transcriptase 2m,42℃温浴1h;最后70qc温浴10min,冰上预冷。以上述逆转录产物为模板,进行PCR扩增目的基因片段。PCR反应条件为:94℃预变性4min,进行PCR扩增(94℃45s,56℃1min,72℃1min),经26个循环后,在72℃延伸7min。取10山反应液在1.5%琼脂糖凝胶上电泳,检测时以CYC基因的RT-PCR产物为内参,计算CYP3AI和CYI码A2基因与CYC基因扩增条带表达量像素灰度的比值,作为CYP3AmRNA表达的相对水平。
表1 对大鼠肝脏CYP450含量的影响
表2 莪术等提取物对大鼠肝脏CYP3A酶活性的影响
根据本发明实施例制得的靶向中药制剂,经过临床试用,疗效统计如下:
表3 Ⅲ期临床靶向中药制剂治疗337例癌症病人的疗效统计(2009.3~2010.6)
从以上表3的Ⅲ期临床靶向中药制剂治疗337例癌症病人的疗效统计数据可以看出,各种癌症病人服用靶向中药胶囊制剂10天即可起效,用药25天最高总有效率为89.5%,服药个半月(45天)最高总有效率达98.1%,对癌症的靶向治疗十分有效。
具体实施方式
本发明首先提供了一种治疗癌症的中药组合物,然后根据该中药组合物,制备得到一种治疗癌症的靶向中药制剂。
所述中药组合物的有效成份,可以根据本发明的混合生药的提取方法得到,也可以通过现有技术,分别提取每种原料的抗癌有效成分的提取方法,即可按《中华人民共和国药典》2010年版(一部)附录的高效液相色谱法或其它相适宜的方法进行分离提取与测定,具体操作方法在此省略;或者也可根据不同成分所需而分别选用微波浸取技术、分离纯化新技术、大孔吸附树脂技术和膜分离技术。以下简述后面这几种提取技术:
①微波浸取技术:是利用微波能来提高浸取率的新技术,微波一可使极性分子超高速旋转,平均动能迅速增加,使其温度迅速升高;二是通过离子传导,离子化的物质在超高频电磁场中以超高速运动,做转向及定向排列,产生撕裂和相互摩擦引发热效应。在微波萃取本抗癌物质时,辐射导致细胞内的极性物质尤其是水分子吸收微波能量产生大量的热量,使胞内温度迅速上升,液态水汽化产生的压力将细胞膜和细胞壁冲破形成微小的孔洞。随后,细胞内部和细胞壁水分减少,细胞收缩,表面出现裂纹。孔洞和裂纹的存在使细胞外溶剂进入细胞内溶解并释放细胞内的有效物质。微波浸取技术具有选择性高、操作时间短、溶剂耗量少、有效成分收率高的特点。微波辅助强化浸取技术是一种很有潜力的萃取技术。
②分离纯化新技术:分离纯化的目的是将无效和有害组分除去,尽量保留有效成份或有效部位,为不同类别中药制剂提供合格的原料或半成品。
③大孔吸附树脂技术:即称大孔树脂吸附分离技术。大孔吸附树脂是一种具有大孔结构的有机高分子共聚体,是一类人工合成的有机高聚物吸附剂。因其具多孔性结构而具筛选性,又通过表面吸附、表面电性或形成氢键而具吸附性。该技术在皂苷、黄酮、生物碱及其他类化合物的分离中已经得到了广泛的应用。与传统的分离纯化方法和其它工艺相比,采用大孔树脂吸附分离技术对中药提取液进行精制,从中提取有效部位(群)或有效成分(群),有着明显的优势。一般情况,中药复方提取液经该技术处理后,得到的固形物一般仅为原生药的2%~5%,而且吸湿性极强的糖、氨基酸、多肽等水溶性杂质被除去,便于后续工序的操作,有效部位或成分含量纯度可提高10~14倍,而传统的水煮法约为30%,醇沉法约为15%;临床用药剂量可明显降低。
④膜分离技术:主要利用膜的选择性分离实现料液的不同组分的分离、纯化和浓缩。主要采用超滤和微滤技术,超滤技术分离的粒径范围为<0.2μm的微粒或截留分子量3000~80000,微滤技术截留的粒径范围为>0.1μm的微粒;所采用的滤膜材质主要是醋酸纤维素(CA)、聚砜(PS)、聚砜酰胺(PSA)、聚丙烯腈(PNA)等;在生产过程中,主要采用膜组件形式,包括中空纤维、螺旋卷式、管式和板框式。膜分离技术在中药制剂研制中的应用已比较广泛,主要用途是澄清药液,除去微粒、细菌、大分子杂质(如胶质、鞣质、蛋白质、多糖)或脱色等。膜分离技术与传统的生产工艺相比,具有操作简单、效率高、能耗低、产品质量稳定等优点,应用前景非常广阔。
以下将通过具体实施例进一步对发明作出详细的阐述,但不作为对本发明的限定。
实施例1:
本实施例所述的中药组合物,它的活性成分由下列重量份的原料药制成:
莪术50g、猫爪草50g、虎杖50g、蛇莓50g、半枝莲50g、平地木50g、粗榧(枝叶)50g、三白草50g。
本实施例所述的治疗癌症的靶向中药的片剂的制备如下:
a)前处理:莪术、猫爪草、虎杖、蛇莓、半枝莲、平地木、粗榧、三白草药材各50g浸泡过夜;
b)制备生药:上述各药材,用水煎煮二次,每次30min,合并两次药液,浓缩至20ml,按药液与无水乙醇的体积比2∶3加入无水乙醇,静置,离心,取上清液,蒸干,加入重蒸水20ml溶解,0.45um微孔滤膜过滤,得到混合生药,浓度为2.5×103mg;
c)磁流体乳化液的制备:加入纳米级超细磁流体(Magnetic Liquid,湖南株洲维格磁流体有限公司生产——纳米级超细磁流体与生药的用量比为2∶2.4)充分混合,加入乳化剂(阿拉伯胶)制成磁流体乳化液;再将医用高分子单体淀粉加入乳化剂或用增溶的方法使其高度分散后,加入磁流体乳化液(医用高分子单体淀粉与磁流体乳化液的重量配比为3∶1),使高分子单体聚合,并将抗癌药物(莪术、猫爪草、虎杖、蛇莓、半枝莲、平地木、粗榧、三白草提取出来的生药有效成分)和超细磁流体包裹成毫微球或毫微囊或脂质体(平均粒径50~500nm);
d)将取得到的毫微球或毫微囊或脂质体,拌入0.5%硬脂酸,压成片剂,得到所述治疗癌症的靶向中药片剂。
实施例2:
本实施例所述的中药组合物,它的活性成分由下列重量份的原料药制成:
莪术40g、猫爪草30g、虎杖40g、蛇莓30g、半枝莲30g、平地木40g、粗榧(枝叶)40g、三白草30g。
所述治疗癌症的靶向中药胶囊剂的制备:
a)莪术、猫爪草、虎杖、蛇莓、半枝莲、平地木、粗榧、三白草等药材的前处理如实施例1;
b)莪术、猫爪草、虎杖、蛇莓、半枝莲、平地木、粗榧、三白草用水煎煮二次,每次30min,合并两次药液,浓缩至20ml,按体积比2∶2.5加入无水乙醇,静置,离心,取上清液,蒸干,加入重蒸水20ml溶解,0.45um微孔滤膜过滤;
c)磁流体乳化液的制备:加入纳米级超细磁流体(Magnetic Liquid,湖南株洲维格磁流体有限公司生产——纳米级超细磁流体与生药的用量比为2.6∶2.4)充分混合,加入乳化剂(阿拉伯胶)制成磁流体乳化液;再将医用高分子单体淀粉加入用增溶的方法使其高度分散后,加入磁流体乳化液(医用高分子单体淀粉与磁流体乳化液的重量配比为4∶1),使高分子单体聚合,同时将抗癌药物和超细磁流体包裹成毫微球或毫微囊或脂质体(平均粒径50~500nm);
d)取得到的毫微球或毫微囊或脂质体,加入1%的羧甲基纤维素钠,混匀、制粒、充填,制成胶囊剂,得到所述治疗癌症的靶向中药胶囊剂。
实施例3:
本实施例所述的中药组合物,它的活性成分由下列重量份的原料药制成:
莪术80g、粗榧(枝叶)80g、平地木80g、虎杖80g、半枝莲60g、猫爪草60g、蛇莓50g、三白草50g。
所述治疗癌症的靶向中药颗粒剂的制备:
a)莪术、猫爪草、虎杖、蛇莓、半枝莲、平地木、粗榧、三白草等药材的前处理如实施例1;
b)莪术、猫爪草、虎杖、蛇莓、半枝莲、平地木、粗榧、三白草分别按照现有技术的分离提取方法(《中华人民共和国药典》2010年版(一部)附录的高效液相色谱法),获得治疗癌症的活性成份,混合,得到小分子复合的生药;
c)磁流体乳化液的制备:在生药中加入纳米级超细磁流体(Magnetic Liquid,湖南株洲维格磁流体有限公司生产——纳米级超细磁流体与生药的用量比为1.6∶2.4)充分混合,加入乳化剂(阿拉伯胶)制成磁流体乳化液;再将医用高分子单体淀粉加入适量乳化剂使其高度分散后,加入磁流体乳化液(医用高分子单体淀粉与磁流体乳化液的重量配比为2∶1),使高分子单体聚合,同时将抗癌药物和超细磁流体包裹成毫微球或毫微囊或脂质体(平均粒径50~500nm);
d)取得到的毫微球或毫微囊或脂质体,加入适量糊精,混匀,制成颗粒剂,得到所述治疗癌症的靶向中药颗粒剂。
Claims (6)
1.一种治疗癌症的中药组合物,其特征是,所述中药组合物是由下列重量份的原料药制成的磁流体靶向制剂:莪术40~80份、粗榧40~80份、平地木40~80份、虎杖40~80份、猫爪草30~60份、半枝莲30~60份、蛇莓30~50份、三白草30~50份;所述中药组合物的制备方法包括以下步骤:
a)药材前处理:将上述重量份的原料药浸泡过夜;
b)制备生药:
将上述各种药材,用水煎煮二次,每次25~40min,合并两次药液,浓缩,按体积比2∶2.5~3.5加入无水乙醇,静置,离心,取上清液,蒸干,加入重蒸水溶解,0.45um微孔滤膜过滤,得到混合生药;
c)磁流体乳化液的制备:在生药中加入纳米级超细磁流体,充分混合,生药与纳米级超细磁流体的比例为2.4∶1.6~2.6,加入乳化剂阿拉伯胶制成众生药磁流体乳化液;再将医用高分子单体淀粉加入乳化剂或用增溶的方法使其高度分散后,加入到生药磁流体乳化液中,众生药磁流体乳化液与医用高分子单体淀粉的重量配比为1∶2~4,使其中的高分子单体聚合,将生药和超细磁流体包裹成平均粒径为50~500nm的毫微球或毫微囊,即得。
2.根据权利要求1所述的治疗癌症的中药组合物,其特征是,所述各原料药的配比为同等份量。
3.一种治疗癌症的靶向中药制剂的制备方法,其特征是,包括以下步骤:
a)药材前处理:以下重量份的莪术40~80份、粗榧40~80份、平地木40~80份、虎杖40~80份、猫爪草30~60份、半枝莲30~60份、蛇莓30~50份、三白草30~50份,浸泡过夜;
b)制备生药:
将上述各种药材,用水煎煮二次,每次25~40min,合并两次药液,浓缩,按体积比2∶2.5~3.5加入无水乙醇,静置,离心,取上清液,蒸干,加入重蒸水溶解,0.45um微孔滤膜过滤,得到混合生药;
c)磁流体乳化液的制备:在生药中加入纳米级超细磁流体,充分混合,生药与纳米级超细磁流体的比例为2.4∶1.6~2.6,加入乳化剂阿拉伯胶制成生药磁流体乳化液;再将医用高分子单体淀粉加入乳化剂或用增溶的方法使其高度分散后,加入到生药磁流体乳化液中,所述生药磁流体乳化液与医用高分子单体淀粉的重量配比为1∶2~4,使其中的高分子单体聚合,将生药和超细磁流体包裹成平均粒径为50~500nm的毫微球或毫微囊,即得。
4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征是,步骤c)中,所述生药磁流体乳化液与医用高分子单体淀粉的配比为1∶3。
5.根据权利要求3-4任一项所述的制备方法,其特征是,所述莪术、猫爪草、虎杖、蛇莓、半枝莲、平地木、粗榧、三白草配比量为同等份。
6.根据权利要求3-5任一项所述方法制备得到的治疗癌症的靶向中药制剂。
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
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C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C53 | Correction of patent for invention or patent application | ||
CB03 | Change of inventor or designer information |
Inventor after: Xu Liang Inventor after: Cen Lihua Inventor after: Xu Hui Inventor before: Xu Liang |
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COR | Change of bibliographic data |
Free format text: CORRECT: INVENTOR; FROM: XU LIANG TO: XU LIANG CEN LIHUA XU HUI |
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C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20120523 Termination date: 20140730 |
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EXPY | Termination of patent right or utility model |