CN101891808B

CN101891808B - 水稻根长发育控制基因OsSPR1编码的基因及蛋白质

Info

Publication number: CN101891808B
Application number: CN2010101272236A
Authority: CN
Inventors: 吴平; 毛传澡; 贾立强; 吴忠长; 陈婕妤
Original assignee: Zhejiang University ZJU
Current assignee: Zhejiang University ZJU
Priority date: 2010-03-18
Filing date: 2010-03-18
Publication date: 2012-02-22
Anticipated expiration: 2030-03-18
Also published as: CN101891808A

Abstract

本发明涉及植物基因工程领域，旨在提供一种水稻根长发育控制基因OsSPR1编码的蛋白质，以及编码该蛋白质的基因。该蛋白质具有SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列，该基因具有SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列。本发明利用一个短不定根及短侧根水稻突变体为研究材料，确定该基因参与调控水稻根长的发育。该基因的功能缺失突变体表现为叶片铁含量减少，根中铁的含量和野生型是一致的。而恢复该基因的表达则能恢复叶片中铁的含量。表明该基因能调控叶片中铁的含量。本发明提供了水稻根系生长发育以及铁离子体内转运的分子调控机制，并为通过基因工程手段调控水稻根系结构及铁的含量提供了基础。

Description

水稻根长发育控制基因OsSPR1编码的基因及蛋白质

技术领域

本发明属于植物基因工程领域。具体的说，本发明涉及水稻根长调控基因OsSPR1及其应用。

背景技术

植物的根系在高等植物的生长过程中起着非常重要的作用，不仅为地上部分提供物理支持，而且还从土壤中吸收营养元素和水分，维系着植株的生长发育。植物根系可以分为两大类，大多数双子叶植物所具有的直根系和大多数单子叶植物所具有的须根系。双子叶植物的根系主要由主根，侧根组成；而单子叶植物的根系主要由主根、不定根和侧根构成。水稻作为世界上最重要的粮食作物之一，其根系由种子根和大量的不定根以及侧根组成。在根构型参数中，根长被认为是对植物的生产力和抗逆能力关系最密切的一个参数。影响根系发育的因素既受自身内在机制的调控，也和外界环境有很大的关系(Beemster et al.，2003)。

根长是水稻生长中一个重要性状，但根长发育调控的分子机制目前所知还很少也很不系统，目前已经有一些根长相关基因得到克隆报道(Ge et al.，2004；Han et al.，2008；Li et al.，2006；Jiang et al.，2006；Jia et al.，2008)。Ge et al.(2004)报道了OsRAA1，增强表达该基因导致根长变短。Han et al.(2008)进一步明确了OsRAA1通过细胞周期来调控根生长发育。Li et al.(2006)研究表明谷氨酸(Glu)受体在早期的水稻的根分生区对维持细胞的分裂和活性起着重要的作用。这个基因突变就会使根分生区的细胞活性受到影响，同时还出现大量的调亡细胞，造成短根表型(Li et al.，2006)。另外，OsGNA1 and OsCYT-INV1的克隆表明糖代谢相关基因也对根生长起着重要作用，这两个基因突变也造成短根(Jia et al.，2008；Jiang et al.，2005)。

发明内容

本发明要解决的技术问题是，提供一种水稻根长发育控制基因OsSPR1编码的基因及蛋白质。

为了解决上述技术问题，本发明提供了一种水稻根长发育控制基因OsSPR1编码的蛋白质，具有SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列。

本发明中还提供了一种编码前述蛋白质的基因，该基因具有SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列。

本发明中所述的蛋白质，还包括下述氨基酸序列，该氨基酸序列是在SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列中添加、取代、插入和缺失一个或多个氨基酸生成的衍生物。

本发明中所述的基因，还包括下述核苷酸序列，该核苷酸序列是在SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列中添加、取代、插入和缺失一个或多个核苷酸生成的突变体、等位基因或衍生物。

本发明的目的是提供一种从水稻根长突变体Qsspr1中克隆的新基因OsSPR1，如SEQ IDNO：1所示的cDNA序列，也包括与SEQ ID NO：1所示的cDNA序列至少有80％同源性的基因序列。本发明中的SEQ ID NO：2所示的蛋白质属于新的线粒体基因，其中进行一个或几个替换，插入或缺失所获得的功能类似物。另外，也包括在SEQ ID NO：2中添加、取代、插入或缺失一个或多个核苷酸而生成的突变体、等位基因或衍生物，具有相同功能的序列也能达到本发明的目的。

本发明的另一个目的是提供一种用OsSPR1基因进行高效的植物转化的方法，具体地说，本发明提供了具有SEQ ID NO：1所示的序列的基因片段的载体。

本发明还提供了一种利用植物表达载体转化植物细胞调控水稻根生长能力及铁含量的方法。

本发明的有益效果在于：

利用一个短不定根及短侧根水稻突变体为研究材料，通过图位克隆策略克隆到引起突变表型的基因，通过表型分析与生理分析以及对克隆到基因的亚细胞定位分析及功能回复验证，确定该基因参与调控水稻根长的发育。该基因的功能缺失突变体表现为叶片铁含量减少，根中铁的含量和野生型是一致的。而恢复该基因的表达则能恢复叶片中铁的含量。表明该基因能调控叶片中铁的含量。本发明提供了水稻根系生长发育以及铁离子体内转运的分子调控机制，并为通过基因工程手段调控水稻根系结构及铁的含量提供了基础。

附图说明

图1是OsSPR1基因在水稻第1染色体上的定位图和基因结构图。

图1中：A为OsSPP1基因精细定位结果，其位于STS标记STS1和STS2之间，该区域被BAC克隆P0506A10所覆盖；B为OsSPR1基因结构及等位突变体突变位点图。3个等位突变体分别为spr1-1(CDS 2533bp处C变为T)，spr1-2(CDS 1684bp处A变为T)，spr1-3(CDS 250bp处A变为T)，黑色方块代表外显子；C为OsSPR1蛋白结构图。图中方块依次为预测的线粒体导肽(1-29aa)、两个代表预测的夸膜结构域(427-447aa、500-518aa)、预测的卷曲螺旋结构域(740-835aa)。

图2是野生型和突变体Osspr1在Fe(II)和Fe(III)条件下的表型及组织Fe含量。

图2中：A为野生型(WT)和突变体(spr1)在Fe(II)、Fe(III)条件下生长15天苗的叶绿素含量；B为野生型(WT)和突变体(spr1-1，spr1-2)及突变体转正常OsSPR1基因的回复转基因株系(OV)在不同形态铁供应条件下15天苗叶片Fe的含量；C为在不同形态铁供应条件下15天苗根Fe的含量。

具体实施方式

下面结合附图对本发明的具体实施方式作进一步详细说明。

从浙江大学植物生理学与生物化学国家重点实验室发展的EMS(ethylmethylsulfonate)诱变的籼稻(Oryza Sativa L.ssp indica)地方品种Kasalath突变体库中筛选到一个水稻不定根及侧根长缺陷突变体Osspr1，该突变体是一个符合单基因控制遗传规律的隐性突变体。

为了分离OsSPR1基因，本发明采用基因图位克隆方法。首先创建了一个F₂定位群体，由Osspr1突变体为母本，野生型粳稻Nipponbare为父本杂交获得的F₂中的隐性个体组成。并利用SSR(Simple Sequence Repeats)分子标记对OsSPR1位点进行初步定位。定位结果表明，OsSPR1初步定位在第1染色体介于RM5759和RM13619两个标记之间。通过对两个标记之间的BAC序列分析，发展新的STS(Sequence Tagged Site)标记，将OsSPR1精确定位于BAC P0506A10上STS1和STS2标记之间，该区间有18.1kb大小(图1中A)，根据水稻基因注释信息，该区间有2个未知基因。突变体和野生型中2个基因的ORF测序结果表明，在突变体中，其中一个基因的ORF(LOC_Os01g67290)发生了一个单碱基突变在ORF的2533bp处C变为T，出现提前终止密码子，造成氨基末端136个氨基酸的缺失。接着我们对另外两个相似表型的突变体进行该基因的序列测定，结果也表明它们分别在该基因的1684bp处由A变为T及250bp处由A变为T都分别造成提前终止密码子。

生物信息学分析表明OsSPR1蛋白的1-29氨基酸为线粒体定位信号肽，为了观察OsSPR1的亚细胞定位情况，将OsSPR1氨基端108个氨基酸按通读框架构建到35S-sGFP表达载体内，用洋葱的瞬时表达系统来观察蛋白的亚细胞定位。提取该融合表达载体质粒及AOX融合RFP的质粒，用金粉分别包裹，进行基因枪轰击洋葱表皮细胞实验。轰击后于暗环境下培养1天后，用激光共聚焦显微镜观察。结果发现，和AOX融合RFP的对照载体一样，OsSPR1融合GFP的绿色荧光分布于线粒体中，两者的表达部位吻合的很好(图2)。表明OsSPR1为线粒体定位蛋白。

为了进一步证明突变体突变表型是由OsSPR1的突变引起的，对突变体进行了转基因回复验证。将由35S启动子驱动的完整的OsSPR1 ORF(SEQ ID NO：1)克隆到双元植物转基因载体pCAMBIA1300改中。将构建好的回复载体通过农杆菌介导转化突变体愈伤，进行诱导。T0的转基因苗直接观察不定根、侧根的情况。结果表明，转化了正常OsSPR1基因的突变体的不定根、侧根长度回复到Kasalath野生型的长度(表1)。而且地上部铁含量也回复到野生型的水平，在Fe(II)条件下根中铁的含量比野生型要高。抽提Kasalath野生型、突变体Osspr1和两个回复表型明显的转基因株系的叶片的RNA，逆转录成cDNA。半定量RT-PCR结果表明，根毛得到回复的转基因阳性植株的确超表达了OsSPR1基因。Southern杂交检测证明这两个回复株系为独立的转基因株系。上述结果证明了该突变体的确是由于OsSPR1的突变引起的，表明本发明获得了使突变体恢复正常功能的转基因水稻。

由这些结果表明，我们克隆的水稻OsSPR1基因具有调控植物根系生长发育及叶片组织中铁含量的作用，有较高的应用价值。我们可以通过利用该基因来调控根系的生长发育，从而提高根系吸收水分和各种养分的能力，进而提高作物的耐旱性和产量。此外还可以利用该基因来调控植物体的铁的分布，从而提高粮食作物的铁含量。

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明范围。

实施例1、突变体的筛选和表型

以EMS诱变的Kasalath突变体库为突变体筛选对象，M₂种子用蒸馏水冲洗干净，0.6％稀HNO₃破休眠处理16hr，37℃暗处催芽至露白。将露白的种子播于水稻培养液(培养液配方为国际水稻所标准配方)上浮着的尼龙网纱上面，在温度为30/22℃(昼/夜)左右、光照12小时条件下，培养7天，以根构型(不定根长，侧根长，不定根数，侧根数等)的改变为筛选标准进行突变体的筛选，从中筛选到一个不定根侧根皆短的突变体。该突变体的地上部长度与野生型之间没有显著性差异，主根长度稍短，但不定根长及侧根长则显著受到抑制(表1)。为了进一步观察突变体与野生型的之间的差异，我们将突变体和野生型分别在供应不同形态铁培养条件下培养15天，结果发现突变体在Fe(III)条件下明显比野生型要黄，类似于缺铁的症状。进一步用ICP-MS(inductively coupled plasma massspectrometry)测定根中及叶片中的铁表明突变体叶片中铁含量明显比野生要低，而在3价铁条件下则更低(图2)。

表1.7天苗株高及主要根参数

	株高(cm)	主根长(cm)	平均不定根长(cm)	平均侧根长(cm)
					WT	14.6±1.0	13.7±2.0	3.8±0.7	0.33±0.02
spr1	13.6±0.6	11.6±0.5*	0.8±0.2*	0.04±0.01*
					OV	14.5±1.2	13.8±2.0	3.6±0.9	0.34±0.03

^*指突变体(spr1)和野生型(WT)间有显著性差异(t测验，P＜0.01)，OV为SPR1回复转基因株系。

实施例2、基因定位

F₂定位群体是由纯合体(OsSPR1)和粳稻品种Nipponbare杂交获得的，总共鉴定出1511个不定根、侧根长缺陷表型的F₂个体，采用水稻微量DNA的快速提取方法从水稻叶片中提取用于基因定位的基因组DNA。取大约0.1g水稻幼嫩叶片，经液氮冷冻，在1.5ml的离心管中将叶片磨成粉末，提取总DNA，获得的DNA溶解于200μl无菌水中。每个SSR和STS反应用2μl DNA样品。

在OsSPR1基因的初步定位试验中，对100个F₂个体进行SSR分析。根据公布的粳稻和籼稻创建的分子遗传图谱，选取近似均匀分布于各条染色体上的SSR引物，根据已知的反应条件进行PCR扩增，然后在7％的丙烯酰胺凝胶电泳分离，检测PCR产物的多态性。

在精细定位OsSPR1基因时，对由1511 F₂个体组成的群体进行STS分析。根据分子标记RM5759和RM13619之间的BAC序列和公布的kasalath BAC术端序列，我们设计了2个STS分子标记(STS1，STS2)，1个CAPS标记(CAPS1)，引物序列为：STS1U-5’CGTATAAAGGGAATCGAACC 3’，STS1L-5’CTTTTGGCTCAATGGAATATGTAT 3’，STS2U-5’GCGTGGGAATCCGTTACTG 3’，STS2L-5’GCTCCAATTTATCTATAGCCAATC 3’，CAPS1U-5’CCCATATTGTCCAGATCCATAA 3’，CAPS1L-5’GAGGAGCACAAATACAAATACACC 3’利用这3个分子标记对1511 F₂个体进行连锁分析。

实施例3、基因预测和序列分析

根据精细定位的结果，Osspr1基因位于BAC克隆P0506A10上STS1和STS2标记之间的18.1kb范围之内(图1中A)。根据TIGR(http://www.tigr.org/tdb/e2k1/osa1/)的水稻基因注释信息和EST数据库(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)，对定位的染色体区段内基因预测分析，该区间有2个未知基因。用Kasalath野生型和OsSPR1突变体根的cDNA为模板对两个基因进行扩增，扩增产物分别测序，测序结果进行比对分析。在突变体中，其中一个基因的ORF(LOC Os01g67290)发生了一个单碱基突变在基因的2533bp处C变为T，出现提前终止密码子，造成氨基酸末端136个氨基酸的缺失。接着我们对另外两个相似表型的突变体进行该基因的序列测定，结果也表明它们分别在该基因的1684bp处由A变为T及250bp处由A变为T都造成提前终止密码子(图1中B)。

因此，得到：OsSPR1基因具有SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列，其编码的蛋白质具有SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列。

实施例4、突变体中OsSPR1基因的功能互补验证。

根据OsSPR1基因的ORF序列，设计引物如下：F5’：ggatccAGAAGATGGGGGTGATGT 3’；R 5’：ggatccCTATCGCCCAGCAGCTCT 3’。以籼稻Kasalath的根部cDNA为模板，扩增出OsSPR1基因的编码区，与pUCm-T连接，连接产物热激转化大肠杆菌DH5α感受态细胞。测序确定序列正确后继续以下操作。T-OsSPR1用BamHI酶切，连入用BamHI酶切的pCAMBIA1300改载体中，连接产物热激转化大肠杆菌DH5α感受态细胞。酶切检测正确方向插入后备用。pCAMBIA1300改为本实验室改造载体，该载体是以pCAMBIA-1300载体(该载体购自Cambia公司)为基本骨架，在多克隆位点插入35S启动子和Nos终止子而得到的增强表达载体(图2)。将得到的正确克隆的质粒通过农杆菌株系EHA105介导的水稻遗传转化体系导入到突变体Osspr1中，经过预培养、侵染、共培养、筛选具有潮霉素抗性的愈伤、分化、生根、练苗移栽，得到转基因植株。农杆菌(EHA105)介导的水稻遗传转化体系主要应用Hiei等人(1994)报道的方法基础上进行优化。

为了检测不定根侧根长得到回复的转基因阳性植株是否超表达了OsSPR1基因，采用Trizol法分别提取Kasalath和2个转基因回复株系叶片的总RNA(我们构建的回复载体为CaMV 35S组成型表达启动子，如果为转基因阳性植株，那么原本不表达的地上部也会超表达Osspr1基因)，逆转录成cDNA。半定量反应时，各样品的cDNA模板量先通过OsActin基因的表达量调成一致(扩增条件：58℃，26个循环)，再扩增目的基因。目的基因的引物同上面的ORF引物，扩增条件为：68℃，30个循环。半定量RT-PCR结果如图3C。

为了检测这两个回复的转基因株系是不是独立株系，进行了Southern杂交检测，剪取叶片按CTAB法提取总DNA，分别用HindIII酶切后，进行0.8％琼脂糖凝胶电泳，转移到尼龙膜上，用600bp潮霉素基因片段作为探针，使用Roche公司的DIG High Prime DNA Labelingand Detection Starter Kit II试剂盒进行探针的标记和杂交检测。

实施例5、OsSPR1的线粒体定位实验

设计如下引物来扩增包含有OsSPR1N端108氨基酸序列，5-ggggtaccAGAAGATGGGGGTGATGTC和5-cgggatccGATCCTTGCATGAACACAGAA以野生型的cDNA为模板，扩增SLR1蛋白的N端序列，长度为324bp，其中下划线部分分别为BamHI和KpnI酶切位点。经BamHI和KpnI双酶切后，连入同样酶切的35S-sGFP载体中(35S-sGFP为实验室在pCAMBIA1300的多克隆位点引入35S-MCS-sGFP-NOS表达盒所构建的sGFP表达载体)，转化DH5α。所得阳性克隆经测序确定正确。

提取构建好的质粒及AOX-RFP融合的线粒体定定位质粒各2g用金粉包裹，用Bio-rad公司的PDS-1000/He型基因枪进行轰击，采用1100psi的氦压轰击洋葱表皮。轰击后于暗培养1天后，用激光共聚焦显微镜观察。结果说明：OsSPR1为线粒体定位蛋白。

最后，还需要注意的是，以上列举的仅是本发明的若干个具体实施例。显然，本发明不限于以上实施例，还可以有许多变形。本领域的普通技术人员能从本发明公开的内容直接导出或联想到的所有变形，均应认为是本发明的保护范围。

核苷酸或氨基酸序列表

SEQ ID NO：1

atgggggtga tgtcgcggcg ggtgctgcct gcctgcagca gcctctgcta cttctgcccc 60

tcgctgcggg cgcgctcgcg tcagcccgtc aagaggtaca agaagatcat cgcggagatc 120

taccagcttc caccggatgg tgaaccgaat gataggagga ttgggaagct ctgcgattat 180

gtctcgagaa atccgacgcg gatacccaag atcacagagt accttgagga gaggtgctat 240

aaagatctga gacatgagaa tttcaccttg gccaaagttg taccatgtat atacaggaag 300

cttctgtgtt catgcaagga tcatacacca ttgctggcca caagcacatt gagcattatt 360

cgtactcttc tcgatcagag aatgaatgat gatttgcggg tcctgggttg tctaatgctt 420

gttgactttc tcaacggcca ggttgatagc acgcatatgt ttaatctgga aggcctcata 480

ccaaaacttt gccaaattag tcaagaacta agggaagatg acaaagggtt ccgcctccga 540

tgtgctgcac ttcaggctct tgcttctatg gtccaataca tgggtgacca ctcacacatt 600

tccatggaac ttgatgaagc tgtgtccgtg atcgtaagtt gttatgaggt taatcaaact 660

ctctcaataa aagaggttgt caggcttcaa gatgatgatg atttggtaat caatggaagt 720

ctgactgggt tgccagtatc tgggcaaaat agtgccaaag tggcatctga tacaatgtct 780

gcatctgaaa atccagcaca ttgggcaagg gtttgcttac gtaatatggc cagtatcgcc 840

aaggaggcaa caacagtgcg gcgtgttctt gatcctcttt tccgcctttt tgatagccac 900

aactattggt ctcctgaaaa tgggattgca ttttctattc tacaagaaat gcaggcactg 960

atggacaaat cagggcaaaa tggccatttg ctgttatctt tcaccataaa acacatagat 1020

cataagagtg ttgccaagaa gcctgccaag caaacaagca ttttaaaagt tgcttcgctt 1080

cttgcaaaac atgcaaagtt gaaggcgtcg gtgacaatag caagtgcaac aagcgactta 1140

ataaagcact tgcgcaaatg catgcattgt gctgttgaat caccaaatgc tcaaaatgat 1200

gttgacaagt ggaacagtgc actttatgtg gccttggagg agtgcctggt gcaattgaca 1260

gaaaaggttg gtgatgttgg gcctgttctt gacatggtgg gagtaatgct tgagaatctc 1320

tcttgtactg ccaccattgc cagaacaaca atttcatcag ttttccgcac agtgcaaata 1380

gcagcttcca tccacaagtc attgtacaac cagaaggcat ttcctgaagc tttgtttcat 1440

cagcttctct tagcaatgat gcacccagac aaaaagacaa gggttggttc acatcgtgtc 1500

ctatccacca ttattgcacc ttcacttcta tgcccatggt caggcataag ttttcctatc 1560

cctgtgaagg gcaatgattc acagagcatt actttgttgg ctctttctgc cttttcttct 1620

gaggccgtaa tggatgaagt ccggatcaaa agcaggaccc atgaacagtt acaaaacaat 1680

gtaaaaccag aaactgtagt tggctctgag aacggataca cacatacaga accaaattca 1740

aggaagagcc ctggtcttgg aattccattg aaagatgaaa atcttaagtt catgaagctg 1800

aacagtagcc aacttgttct cctcctttca tcaatttgga gtcaagcacc tctagaagat 1860

aactcaccag caaattttga agcaatgtgc catacctaca atattgcttt attgtgttca 1920

atgacaaaga gctctagtca cgcagcatta gttcgatgtt tccagttggc cttctctctc 1980

aggaggatgt cccttaacca agaaaatggt ttgcagccat cacgtaggag gtgtttgtat 2040

acaatggcat cagcaatgct gattttttca gcaaaagttg ctgatattcc tcagacaatt 2100

cctcttgtga aagcagcagt tccagagaaa atggtcgacc ctcatctttg cctgattgat 2160

gattgcagac tcgttattag ttcaccacag tcatctaaca gtgggatagt ttatggttct 2220

gaggaagatg aaagCgatgc acgcaatttt ctttcttgtg taaataaaaa tgatacacag 2280

ttaaaagaaa ttgtgatatc ccacttcaag gagaagtttg aaaatctatc agagaagttt 2340

aatggtatag aagagcagct tcttcaggag ttttccctgg atgattcatt ccctctcagt 2400

gctccactat tcatggaaac accacactct tgttcgatgt acgctgaaaa ggatgaccat 2460

tgttttgatg aggaagtcat tccttgtgag atggatgatg acgatgacat cgtttttgaa 2520

cacagtggat cgcaatctga caggaaaacc tctggatcta tggcttcatc agatgttcta 2580

aacgtcaatc aactaataga atcggttcat gagacagcaa ggcaggttgc taatgctcca 2640

gtttctgcca accttgtacc ctacgatcaa atgaagagcc aatgcgaagc cctagtcatg 2700

gagaagcaac agaagatgtc tgttctcctg agcttcaaac actcgaggac cgattcccgt 2760

ggctcgactg cagaaaatgg actggaaaca aacgagtcat ctgctcggtc tgagcctgag 2820

acgcagtcga cgaggaagga gcgaatgcga cgcagcgact cggcatcaag cgaatctgac 2880

cggtcgttca ggctgccacc tgcaagccca tatgacaagt tcatgagagc tgctgggcga 2940

tag 2943

SEQ ID NO：2

15 Met Gly Val Met Ser Arg Arg Val Leu Pro Ala Cys Ser Ser Leu

30 Cys Tyr Phe Cys Pro Ser Leu Arg Ala Arg Ser Arg Gln Pro Val

45 Lys Arg Tyr Lys Lys Ile Ile Ala Glu Ile Tyr Gln Leu Pro Pro

60 Asp Gly Glu Pro Asn Asp Arg Arg Ile Gly Lys Leu Cys Asp Tyr

75 Val Ser Arg Asn Pro Thr Arg Ile Pro Lys Ile Thr Glu Tyr Leu

90 Glu Glu Arg Cys Tyr Lys Asp Leu Arg His Glu Asn Phe Thr Leu

105 Ala Lys Val Val Pro Cys Ile Tyr Arg Lys Leu Leu Cys Ser Cys

120 Lys Asp His Thr Pro Leu Leu Ala Thr Ser Thr Leu Ser Ile Ile

135 Arg Thr Leu Leu Asp Gln Arg Met Asn Asp Asp Leu Arg Val Leu

150 Gly Cys Leu Met Leu Val Asp Phe Leu Asn Gly Gln Val Asp Ser

165 Thr His Met Phe Asn Leu Glu Gly Leu Ile Pro Lys Leu Cys Gln

180 Ile Ser Gln Glu Leu Arg Glu Asp Asp Lys Gly Phe Arg Leu Arg

195 Cys Ala Ala Leu Gln Ala Leu Ala Ser Met Val Gln Tyr Met Gly

210 Asp His Ser His Ile Ser Met Glu Leu Asp Glu Ala Val Ser Val

225 Ile Val Ser Cys Tyr Glu Val Asn Gln Thr Leu Ser Ile Lys Glu

240 Val Val Arg Leu Gln Asp Asp Asp Asp Leu Val Ile Asn Gly Ser

255 Leu Thr Gly Leu Pro Val Ser Gly Gln Asn Ser Ala Lys Val Ala

270 Ser Asp Thr Met Ser Ala Ser Glu Asn Pro Ala His Trp Ala Arg

285 Val Cys Leu Arg Asn Met Ala Ser Ile Ala Lys Glu Ala Thr Thr

300 Val Arg Arg Val Leu Asp Pro Leu Phe Arg Leu Phe Asp Ser His

315 Asn Tyr Trp Ser Pro Glu Asn Gly Ile Ala Phe Ser Ile Leu Gln

330 Glu Met Gln Ala Leu Met Asp Lys Ser Gly Gln Asn Gly His Leu

345 Leu Leu Ser Phe Thr Ile Lys His Ile Asp His Lys Ser Val Ala

360 Lys Lys Pro Ala Lys Gln Thr Ser Ile Leu Lys Val Ala Ser Leu

375 Leu Ala Lys His Ala Lys Leu Lys Ala Ser Val Thr Ile Ala Ser

390 Ala Thr Ser Asp Leu Ile Lys His Leu Arg Lys Cys Met His Cys

405 Ala Val Glu Ser Pro Asn Ala Gln Asn Asp Val Asp Lys Trp Asn

420 Ser Ala Leu Tyr Val Ala Leu Glu Glu Cys Leu Val Gln Leu Thr

435 Glu Lys Val Gly Asp Val Gly Pro Val Leu Asp Met Val Gly Val

450 Met Leu Glu Asn Leu Ser Cys Thr Ala Thr Ile Ala Arg Thr Thr

465 Ile Ser Ser Val Phe Arg Thr Val Gln Ile Ala Ala Ser Ile His

480 Lys Ser Leu Tyr Asn Gln Lys Ala Phe Pro Glu Ala Leu Phe His

495 Gln Leu Leu Leu Ala Met Met His Pro Asp Lys Lys Thr Arg Val

510 Gly Ser His Arg Val Leu Ser Thr Ile Ile Ala Pro Ser Leu Leu

525 Cys Pro Trp Ser Gly Ile Ser Phe Pro Ile Pro Val Lys Gly Asn

540 Asp Ser Gln Ser Ile Thr Leu Leu Ala Leu Ser Ala Phe Ser Ser

555 Glu Ala Val Met Asp Glu Val Arg Ile Lys Ser Arg Thr His Glu

570 Gln Leu Gln Asn Asn Val Lys Pro Glu Thr Val Val Gly Ser Glu

585 Asn Gly Tyr Thr His Thr Glu Pro Asn Ser Arg Lys Ser Pro Gly

600 Leu Gly Ile Pro Leu Lys Asp Glu Asn Leu Lys Phe Met Lys Leu

615 Asn Ser Ser Gln Leu Val Leu Leu Leu Ser Ser Ile Trp Ser Gln

630 Ala Pro Leu Glu Asp Asn Ser Pro Ala Asn Phe Glu Ala Met Cys

645 His Thr Tyr Asn Ile Ala Leu Leu Cys Ser Met Thr Lys Ser Ser

660 Ser His Ala Ala Leu Val Arg Cys Phe Gln Leu Ala Phe Ser Leu

675 Arg Arg Met Ser Leu Asn Gln Glu Asn Gly Leu Gln Pro Ser Arg

690 Arg Arg Cys Leu Tyr Thr Met Ala Ser Ala Met Leu Ile Phe Ser

705 Ala Lys Val Ala Asp Ile Pro Gln Thr Ile Pro Leu Val Lys Ala

720 Ala Val Pro Glu Lys Met Val Asp Pro His Leu Cys Leu Ile Asp

735 Asp Cys Arg Leu Val Ile Ser Ser Pro Gln Ser Ser Asn Ser Gly

750 Ile Val Tyr Gly Ser Glu Glu Asp Glu Ser Asp Ala Arg Asn Phe

765 Leu Ser Cys Val Asn Lys Asn Asp Thr Gln Leu Lys Glu Ile Val

780 Ile Ser His Phe Lys Glu Lys Phe Glu Asn Leu Ser Glu Lys Phe

795 Asn Gly Ile Glu Glu Gln Leu Leu Gln Glu Phe Ser Leu Asp Asp

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975 Arg Ser Phe Arg Leu Pro Pro Ala Ser Pro Tyr Asp Lys Phe Met

980 Arg Ala Ala Gly Arg

Claims

1.一种水稻根长发育控制基因OsSPR1编码的蛋白质，其特征在于，该蛋白质的氨基酸序列与SEQ ID NO：2所示的序列一致。

2.一种编码权利要求1所述蛋白质的基因，其特征在于，该基因的核苷酸序列与SEQ IDNO：1所示的序列一致。