CN101879205A - 一种当归和红花中药组合物及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种中药组合物及其应用,该中药复方组合物由10~40份当归和10~20份红花组成,本发明对大量古今方剂进行深入研究,筛选出在方剂中出现频率高的当归和红花进行配伍组成药对,并通过现代分析仪器和药理活性实验研究表明,本发明提供的当归、红花按一定比例配伍后,有效成分溶出率明显提高,且与等量的单味当归或红花药材相比,当归和红花科学配比后,能明显延长体外凝血时间,并具有很好的抗血小板聚集和抗氧化清除自由基的活性,证明本发明提供的当归和红花不是简单量的叠加,两者组成药对后,具有协同增效的作用,对指导方剂的临床用药具有重要意义。
Description
技术领域
本发明涉及一种中药药物,具体涉及一种当归和红花的中药组合物及其应用。
背景技术
随着人口老龄化的加剧、生活节奏加快、生活环境和饮食习惯的改变,心脑血管疾病的发病率和死亡率呈逐年上升趋势,日益危害着人类生命健康。血栓的形成在心脑血管疾病、动脉粥样硬化、高血压和糖尿病并发症等的发病和发展过程中起着重要的作用(Viles-Gonzalez JF,Fuster V,Badimon JJ.Links between inflammation and thrombogenicityin atherosclerosis[J].Curr.Mol.Med.2006,6:489-499.),而血小板聚集和凝血功能异常是血栓形成的主要诱因(Esmon CT.Regulation of blood coagulation[J].Biochim.Biophys.Acta 2000,1477:349-360.)。中医药在治疗血栓性疾病方面具有独特的优势,临床上也有许多有效的中药复方。复方的配伍理论和规律是中药方剂理论的核心问题,也是近年来备受关注的一个中医药理论问题。不论中药单方还是复方,其临床疗效的产生都是通过方中的活性成分或活性成分群来发挥作用。汤剂为中医复方临床用药的传统剂型,中药饮片在水煎制过程中发生着化学物质的相互作用和动态变化,因此,汤剂是一个内涵丰富的复杂化学体系。药对是中药配伍中的最小单位,组成简单,但具备中药配伍的基本特点,故为复方药理研究的重要内容之一。当归和红花是传统的中药材,临床上经常配伍使用,从方剂数据库中挖掘当归配伍红花的用药次数,其配伍次数高达到1222次之多,当归配伍红花常见于中药方剂的活血化瘀方中,如桃红四物汤、血府逐瘀汤、补阳还五汤、生化汤等。但如何科学合理的确定当归、红花配比剂量,精简用量,寻求二者最佳用量比、确定最大用量及最小剂量,阐明和揭示当归、红花量效关系的基本特征和配伍关联规律,已成为当前亟待解决的关键科学问题。
发明内容
发明目的:本发明所要解决的技术问题是克服现有技术的不足,提供一种配比严谨科学,功效好、用量精简、副作用小、有效成分明确的中药组合物,本发明另一个目的是提供该中药组合物在制备治疗血栓性疾病药物和制备抗氧剂中的应用。
技术方案:为了实现以上目的,本发明采取的技术方案为:
一种中药组合物,它是由下列重量份数的原料组成:当归10~40份,红花10~20份。
作为优选方案,以上所述的中药组合物,当归和红花的重量比为1∶1。
作为另一优选方案,以上所述的中药组合物,当归和红花的重量比为2∶1。
作为其它优选方案,以上所述的中药组合物,当归和红花的重量比为4∶1。
作为其它优选方案,以上所述的中药组合物,当归和红花的重量比为1∶2。
本发明提供的中药组合物,其活性成分包括0.046~0.090%阿魏酸、0.140~1.30%羟基红花黄色素A、0.013~0.04%绿原酸和0.001~0.016%香豆酸。其中阿魏酸是当归主要活性成分,是中国药典规定的当归药材指标,具有清除自由基、调节免疫、降血脂和抗动脉粥样硬化、抗血栓、改善心肌缺血的作用,并且是很好的天然抗氧化剂。羟基红花黄色素A是中国药典规定的红花药材指标,可抑制血小板激活因子诱发的血小板聚集与释放,可竞争性地抑制血小板激活因子与血小板受体的结合,可用于治疗心脑血管缺血性疾病。当归中的绿原酸和红花中的香豆酸,同样具有很好的抗氧化活性。
中医方药存在着与功效相关的量的规定性,在不同的组方配伍中,各个药物有不同的用量范围,共同发挥相辅相成或相反相成的综合作用,本发明前期对古今方剂进行筛选,在中医药理论的指导下,配伍组方,并经现代仪器分析和药理实验筛选,确定当归和红花的最佳配比,组合物中当归补血养血力佳,又能行血和血,调经止痛;红花活血通经,祛瘀止痛,二药合用,使活血化瘀力增强,且有祛瘀而不伤血,养血补虚而无碍瘀之妙。当归配伍红花符合中医药理论,可成为组成复方的有效药对。
本发明提供的中药组合物有效成分的提取方法包括以下步骤:
按比例称取当归、红花药材,粉碎至粒径为40目,加水煎煮2次,第1次加10倍量水煎煮2h,第2次加8倍量水煎煮1.5h,合并两次的提取液,减压浓缩至浓度为500mg生药/ml,即得到中药组合物的有效提取物。
本发明提供的中药组合物在制备防治血栓性疾病药物中的应用,作为更优选方案,本发明提供的中药组合物在制备治疗脑血栓、脑梗塞、血管性头痛、心绞痛和冠心病等血栓性性疾病中的应用。
作为优选方案,把中药组合物的提取物和药学上可接受的载体制成胶囊剂、片剂、颗粒剂、喷雾剂、注射剂、微囊剂型的药物。
本发明提供的中药组合物在制成片剂时把中药组合物的提取物和载体乳糖或玉米淀粉,需要时加入润滑剂硬脂酸镁,混合均匀,然后压片制成片剂。本发明提供的中药组合物制成胶囊剂时把中药组合物的提取物和载体乳糖或玉米淀粉混合均匀,整粒,然后装胶囊制成胶囊剂。本发明提供的中药组合物制成颗粒剂时,把中药复方提取物和稀释剂乳糖或玉米淀粉混合均匀,整粒,干燥,制成颗粒剂。
本发明提供的中药组合物在制备抗氧化剂中的应用。
有益效果:本发明提供的中药组合物具有以下优点:
本发明提供的中药组合物,对古今大量方剂进行筛选,并根据中医药理论选取方剂中使用频率高的当归和红花进行配伍组成药对,当归和红花配比严谨、科学合理,用量精简,通过现代仪器分析,当归和红花配比组合后,阿魏酸、羟基红花黄色素A、绿原酸和香豆酸等有效成分溶出率增高,并经药理实验表明,当归和红花配比后提取物具有很好的延长家兔凝血时间和抗血小板聚集的作用,效果明显优于单用当归或红花,并且经实验结果表明,本发明提供的当归和红花药对,具有很好的清除自由基的活性。本发明提供的中药组合物配伍精简合理,可以方便的和药学上可接受的载体制备成各种剂型的药物,方便服用。
具体实施方式
根据下述实施例,可以更好地理解本发明。然而,本领域的技术人员容易理解,实施例所描述的具体的物料配比、工艺条件及其结果仅用于说明本发明,而不应当也不会限制权利要求书中所详细描述的本发明。
实施例1
1、一种中药组合物,其配比组成为:当归1千克,红花1千克。
2、取当归1千克,红花1千克组成药对,粉碎过粉碎至粒径为40目,加水煎煮2次,第1次加药材10倍量水煎煮2h,第2次加药材8倍量水煎煮1.5h,合并两次的提取液,减压浓缩至浓度为500mg生药·ml-1,即得到中药组合物的有效提取物。经高效液相分析含有阿魏酸、羟基红花黄色素A、绿原酸和香豆酸化合物。
实施例2
1、一种中药组合物,其配比组成为:当归2千克,红花1千克。
2、取当归2千克,红花1千克组成药对,粉碎过粉碎至粒径为40目,加水煎煮2次,第1次加药材10倍量水煎煮2h,第2次加药材8倍量水煎煮1.5h,合并两次的提取液,减压浓缩至浓度为500mg生药·ml-1,即得到中药组合物的有效提取物。经高效液相分析含有阿魏酸、羟基红花黄色素A、绿原酸和香豆酸化合物。
实施例3
1、一种中药组合物,其配比组成为:当归4千克,红花1千克。
2、取当归4千克,红花1千克组成药对,粉碎过粉碎至粒径为40目,加水煎煮2次,第1次加药材10倍量水煎煮2h,第2次加药材8倍量水煎煮1.5h,合并两次的提取液,减压浓缩至浓度为500mg生药·ml-1,即得到中药组合物的有效提取物。经高效液相分析含有阿魏酸、羟基红花黄色素A、绿原酸和香豆酸化合物。
实施例4
1、一种中药组合物,其配比组成为:当归1千克,红花2千克。
2、取当归1千克,红花2千克组成药对,粉碎过粉碎至粒径为40目,加水煎煮2次,第1次加药材10倍量水煎煮2h,第2次加药材8倍量水煎煮1.5h,合并两次的提取液,减压浓缩至浓度为500mg生药·ml-1,即得到中药组合物的有效提取物。经高效液相分析含有阿魏酸、羟基红花黄色素A、绿原酸和香豆酸化合物。
实施例5
1、一种中药组合物,其配比组成为:当归3千克,红花2千克。
2、取当归3千克,红花2千克组成药对,粉碎过粉碎至粒径为40目,加水煎煮2次,第1次加药材10倍量水煎煮2h,第2次加药材8倍量水煎煮2h,合并两次的提取液,减压浓缩至浓度为500mg生药·ml-1,即得到中药组合物的有效提取物。经高效液相分析含有阿魏酸、羟基红花黄色素A、绿原酸和香豆酸化合物。
实施例6当归、红花配伍后阿魏酸、羟基红花黄色素A、绿原酸和香豆酸化合物等有效成分溶出率测定实验
1、含量测定方法学考察
1.1色谱条件
以GRACE-Apollo-C 18column(5μm,250mm×4.6mm)柱为固定相;以甲醇溶液为流动相A,0.2%磷酸为流动相B,进行梯度洗脱28.0-33.5%A(0-15min);33.5-39%A(15-20min),流速为1.0ml/min,柱温为30℃。各成分在最大吸收波长下检测,检测波长为:阿魏酸323nm,羟基红花黄色素A 405nm,绿原酸323nm,香豆酸310nm。
1.2混合对照品的制备
精密称取对照品阿魏酸、羟基红花黄色素A、绿原酸、香豆酸适量,加甲醇稀释配制成浓度分别为0.103mg·ml-1、1.17mg·ml-1、0.0375mg·ml-1、0.0103mg·ml-1的混合溶液,即得。
1.3供试品溶液的制备
按配比称取当归、红花药材,经粉碎至粒径为40目,水煎煮2次,第1次10倍量水煎煮2h,第2次8倍量水煎煮1.5h。合并两次的提取液,减压浓缩至500mg生药·ml-1,同法分别提取当归,红花药材,作为供试品储备液,备用。精密量取供试品储备液2ml,置10ml的容量瓶,加蒸馏水稀释至刻度,摇匀,0.45μm的微孔滤膜过滤后,作为供试品溶液。
1.4线性关系考察
分别精密吸取“1.2”项下混合对照品溶液0.5,2,4,8,16,32,40μL,进样测定,记录峰面积,以峰面积Y对进样量X(μg)进行线性回归,得阿魏酸、羟基红花黄色素A、绿原酸、香豆酸回归方程及线性范围见表1。
表1回归方程及线性范围考察结果
2、检测结果
按“1.3”项下方法制备供试品溶液。按上述色谱条件测定,外标法计算当归红花不同配比前后阿魏酸、羟基红花黄色素A、绿原酸、香豆酸含量,配比前含量为C0,配比后含量为C,变化比率(%)=(C-C0)/C0*100%,具体实验结果如表2至表5所示:
表2当归红花不同配比前后阿魏酸含量变化比率
表3当归红花不同配比前后羟基红花黄色素A含量变化比率
表4当归红花不同配比前后绿原酸含量变化比率
表5当归红花不同配比前后香豆酸含量变化比率
通过以上含量测定结果表明,当归和红花按一定比例配比提取后,有效成分芳香酸类化合物阿魏酸、绿原酸、香豆酸和黄酮类化合物羟基红花黄色素A含量与配比前单个当归和红花提取物相比明显增加,表明当归和红花科学配比后,能够增加有效成分的溶出率,从而发挥更好的药效,尤其是当归和红花以1∶1~1∶2配比后阿魏酸、羟基红花黄色素A、绿原酸和香豆酸含量均较高。说明本发明提供的当归和红花配比科学,具有重要意义。
实施例7凝血时间检测实验和抗血小板聚集实验
1、凝血时间检测实验:取兔子劲总动脉取血,3000r·min-1离心10min制备待测血浆,在测试杯中加入待测血浆40μL,37℃预温3min后加入共同预温的0.1mol·L-1pH 7.4Tris-HCl缓冲液稀释的15U·ml-1凝血酶溶液40μL和药物20μL,加入药物的终浓度为50和100mg生药·ml-1,在加入凝血酶和药物溶液的同时启动凝血因子分析仪记录凝血时间TT,具体实验结果如表6所示:
2、抗血小板聚集实验:本测定按常规ADP诱导的血小板聚集实验法,即用比浊法进行血小板聚集实验。取健康雄性家兔,30mg·kg-1家兔体重的戊巴比妥钠生理盐水溶液耳缘静脉注射麻醉,手术分离颈总动脉取血,收集于塑料离心管中,3.8%枸橼酸钠水溶液抗凝(血与抗凝剂体积比为9∶1)。800r·min-1离心10min,制备富血小板血浆(Platelet-richplasma,PRP),3000r·min-1离心10min,制备贫血小板血浆(Platelet-poor plasma,PPP)。将不同配比的当归和红花提取物样品和单个当归和红花药材提取物配成终浓度分别为1、5、10、50、100mg生药·ml-1的溶液作为受试样品。在测试杯中加入280μL PRP、受试样品10μL,在37℃预温孔内预温3min,将测试杯转入测试通道,加入诱导剂ADP(终浓度5μmol·L-1)10μL,观察记录6min内最大聚集率(Maximum aggregation rate,MAR)。用溶媒水作空白对照(Control),计算血小板聚集抑制率(Aggregation inhibition rate,AIR)以及各受试样品的50%聚集抑制浓度(IC50),具体实验结果如表6所示:
表6当归红花不同配比及单味当归、红花对凝血时间的影响和抗血小板聚集结果
由以上表6实验结果表明,本发明提供的不同配比的当归和红花比单味当归和红花具有更好的延长凝血时间和抗血小板聚集的功效。且凝血时间的延长随当归红花不同配比浓度的增加而增加,其中,当归∶红花=1∶1,当归∶红花=2∶1,当归∶红花=1∶2,三种配比延长时间较显著。当归红花不同配比对凝血时间的延长均大于同等生药剂量的当归药材。当归∶红花=1∶1,当归∶红花=2∶1等配比对凝血时间的延长大于同等生药剂量的红花药材。说明本发明提供的药对当归和红花不是简单的相加,二者配伍后具有协同增效的作用。
实施例8抗氧化活性DPPH清除率的测定
在96孔板中加入不同配比当归和红花和单味当归和红花提取物各100μL,加入药物的终始浓度为0.25、0.5、2.5mg生药·ml-1。加入受试药物后,加入溶于无水乙醇的终浓度为0.05mg·mL-1DPPH溶液,避光反应30min后在517nm波长下测定其吸光度为A0。同时作空白对照,在517nm波长下测定其吸光度为A1。为扣除药物本底颜色对实验的影响,在加入终始浓度为0.25、0.5、2.5mg生药·ml-1的药物后加入无水乙醇在517nm波长下测定其吸光度A2。按照下列公式进行计算各受试药物对DPPH清除率(%):A1-(A0-A2)/A1*100,计算IC50。具体实验结果如表7所示:
表7当归红花不同配比及单味当归、红花抗氧化活性测定结果
由表7抗氧化清除DPPH实验结果表明,对自由基DPPH清除率随当归红花不同配比浓度的增加而增加,呈现较好的量效关系,其中,当归∶红花=1∶1,当归∶红花=2∶1,当归∶红花=1∶2三种配比对自由基DPPH清除率最为显著。由实验结果表明当归红花不同配比对自由基DPPH清除率均大于同等生药剂量的当归药材。当归∶红花=1∶1,当归-红花=2∶1,当归∶红花=1∶2,等配比对自由基DPPH清除率大于同等生药剂量的红花药材。由以上实验结果进一步表明,当归和红花按一定比例配比后,抗氧化活性也明显强于单味当归或红花的活性,证明本发明提供的当归和红花不是简单量的叠加,二者科学配比后具有协同增效的作用。
本发明对大量古今方剂进行深入研究,筛选出在方剂中出现频率高的当归和红花进行配伍组成药对,并运用现代分析仪器和药理活性实验确定当归和红花的最佳配比,并通过实验结果表明本发明提供的当归、红花按一定比例组对后,有效成分溶出率明显提高,说明两味中药在煎制过程中发生着化学物质的相互作用和动态变化,促进有效成分的溶出。为验证当归和红花配伍后的药理活性,进行凝血时间,抗血小板聚集和抗氧化清除自由基实验,实验结果均表明,与等量的单味当归或红花药材相比,当归和红花科学配比后,能明显延长体外凝血时间,并具有很好的抗血小板聚集和抗氧化清除自由基的活性,证明本发明提供的当归和红花不是简单量的叠加,两者组成药对后,具有协同增效的作用,对指导方剂的临床用药具有重要意义。
以上实施方式只为说明本发明的技术构思及特点,其目的在于让熟悉此项技术的人了解本发明内容并加以实施,并不能以此限制本发明的保护范围,凡根据本发明精神实质所做的等效变化或修饰,都应涵盖在本发明的保护范围内。
Claims (9)
1.一种中药组合物,其特征在于,它是由下列重量份数的原料组成:当归10~40份,红花10~20份。
2.根据权利要求1所述的中药组合物,其特征在于,当归和红花的重量比为1∶1。
3.根据权利要求1所述的中药组合物,其特征在于,当归和红花的重量比为2∶1。
4.根据权利要求1所述的中药组合物,其特征在于,当归和红花的重量比为4∶1。
5.根据权利要求1所述的中药组合物,其特征在于,当归和红花的重量比为1∶2。
6.根据权利要求1至5任一项所述的中药组合物,其特征在于,中药组合物的活性成分包括阿魏酸、羟基红花黄色素A、绿原酸和香豆酸。
7.权利要求1至5任一项所述的中药组合物在制备防治血栓性疾病药物中的应用。
8.根据权利要求7所述的中药组合物在制备治疗血栓性疾病药物中的应用,其特征在于把中药组合物的提取物和药学上可接受的载体制成胶囊剂、片剂、颗粒剂、喷雾剂、注射剂、微囊剂型的药物。
9.权利要求1至5任一项所述的中药组合物在制备抗氧化剂中的应用。
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C12 | Rejection of a patent application after its publication | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20101110 |