CN101879189A - 采用优化固体培养基生产安络痛菌粉的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种优化固体培养基生产安络痛菌粉的方法，属于生物发酵领域，为菌种培养提供了丰富的营养物质，解决了培养时间长，菌丝收得率低问题。一种采用优化固体培养基生产安络痛菌粉的方法，由固体培养基灭菌、接种培养、提取、浓缩、成粉几个步骤，其中所述固体培养基由以下重量份的组分组成：麦麸50-80份，稻谷壳20-30份，口服葡萄糖5-20份，磷酸二氢钾0.05-0.2份，硫酸镁0.025-0.1份，加水至100份。各种无机钾盐，尤其是磷酸钾盐可作为钾源。这些物质对小皮伞菌生长有促进作用，使得培养时间短，菌丝收得率高，从而缩短了生产时间，本发明固体培养基各组分原料便宜、易得，使得成本低，适合工业化生产。
Description
技术领域
本发明涉及一种安络痛菌粉的生产方法，具体的说是涉及一种用固体培养基生产安络痛菌粉的方法。
背景技术
安络痛具有通经活络和活血止痛的作用，用于治疗坐骨神经痛、三叉神经痛、风湿关节痛等疾病，其化学成分有甘露醇、氨基酸、对羟基肉桂酸、麦角甾醇。近年来的研究表明安络小皮伞菌药用和保健价值都很高，是对人体安全、无毒副作用的镇痛和抗风湿药物。安络痛粉是生产安络痛的主要成分，安络痛是采用白磨科皮伞属安络小皮伞菌经菌种培养，再经固体培养基培养干燥、提取、混合所得。目前所用固体培养基的组分是用麦麸、琼脂、蔗糖、稻谷壳和水。该固体培养基培养时间长，菌丝收得率低，因此生产时间长，制造成本高。
发明内容
本发明的目的就在于克服上述不足提供一种采用固体培养基生产安络痛菌粉的方法，该方法培养时间短、菌丝收得率高、生产时间短，节约了生产成本。
本发明的技术方案是：
一种采用优化固体培养基生产安络痛菌粉的方法，由以下步骤制备而成：
①.灭菌：采用固体培养基，将固体培养基装袋或装入培养瓶，经118℃-125℃灭菌2-4h，所述固体培养基由以下重量份的组分组成：麦麸50-80份，稻谷壳20-30份，口服葡萄糖5-20份，磷酸二氢钾0.05-0.2份，硫酸镁0.025-0.1份，加水至100份；
②.接种培养：常温接种，接白蘑科安络小皮伞菌菌种；
③.培养：23℃-27℃培养1.5-2个月，55℃-65℃干燥12-24h得含水量3-5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；
④.提取：分两次加入共6倍物料重量的95％乙醇，分两次提取，第一次加4倍量的乙醇，第一次煮沸1.5-2.5h，第二次加2倍量的乙醇，第二次煮沸1-2h；
⑤.浓缩：合并提取液，浓缩成含水20-30％的稠膏，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；
⑥.成粉：加入安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物和安络小皮伞菌及其培养基粉混合均匀，即得安络痛菌粉，其中安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物(按干燥品计算)∶安络小皮伞菌及其培养基粉＝0.8-1.2∶0.8-1.2。
上述采用固体培养基生产安络痛菌粉的方法，所述步骤①中固体培养基由以下重量份的组分组成：麦麸60份，稻谷壳25份，口服葡萄糖10份，磷酸二氢钾0.1份，硫酸镁0.05份，加水至100份。
上述采用固体培养基生产安络痛菌粉的方法，所述步骤①中固体培养基由以下重量份的组分组成：麦麸65份，稻谷壳25份，口服葡萄糖10份，磷酸二氢钾0.1份，硫酸镁0.05份，加水至100份。
上述采用固体培养基生产安络痛菌粉的方法，所述步骤①中固体培养基由以下重量份的组分组成：麦麸75份，稻谷壳25份，口服葡萄糖10份，磷酸二氢钾0.1份，硫酸镁0.05份，加水至100份。
上述采用固体培养基生产安络痛菌粉的方法，所述步骤③25℃培养1.8个月；步骤④60℃干燥18h至含水量25％，加入6倍物料重量的95份乙醇，分两次提取，第一次加4倍量的乙醇，第一次煮沸2h，第二次加2倍量的乙醇，第二次煮沸1.5h。
在安络小皮伞菌粉的生产过程中人们通常用的固体培养基是麦麸、琼脂、蔗糖、稻谷壳和水，从安络小皮伞菌粉问世以来，人们都认为用这种固体培养基生产是最好的方法，在这个领域内人们的思维已经固定在用麦麸、琼脂、蔗糖、稻谷壳和水作为固体培养基原料，而且认为用这种固体培养基效果最好。本发明克服了本领域的这种技术偏见，在固体培养基中加入了磷酸二氢钾、硫酸镁无机盐和微量元素，这些无机盐和微量元素在小皮伞菌在生长、繁殖的过程中以作为生理活性物质的组成或生理活性作用的调节物。这些物质在低浓度时对小皮伞菌生长有促进作用。磷：磷在菌体生长、繁殖和代谢活动中起着极其重要的作用。一方面磷是构成核酸、磷脂、许多辅酶或辅基以及高能磷酸化合物的重要原料，另一方面磷在代谢调节方面也起着很重要的作用。磷能促进糖代谢的进行，促进小皮伞菌的生长。硫：硫是菌体细胞蛋白质的组成部分，是参与合成含硫氨基酸的元素，一些酶的活性基，如辅酶A、生物素辅基，在生理作用上它是仅次于磷的一种重要元素，微生物从含硫无机盐或有机硫化物中得到硫，以硫酸镁的形式人为提供硫元素。钾：钾不参与生物细胞结构物质的组成，但它是细胞中重要的阳离子之一，它是许多酶的激活剂，还与原生质体的特性和细胞膜的通透性有关。各种无机钾盐，尤其是磷酸钾盐可作为钾源。这些物质对小皮伞菌生长有促进作用，使得培养时间短，菌丝收得率高，从而缩短了生产时间，本发明固体培养基各组分原料便宜、易得，使得成本低，适合工业化生产。
下表是安络小皮伞菌传统处方和本发明处方的组合考察
上表中处方5不在本发明的保护范围之内，处方6是传统的固体培养基，处方1-4是本发明所用的固体培养基，从表中可以看出用本发明固体培养基培养时间短，菌丝收得率高，从而缩短了生产时间。
具体实施方式
实施例1：采用固体培养基生产安络痛菌粉的方法，包括以下步骤：①.灭菌：称取麦麸50kg，稻谷壳20kg，口服葡萄糖5kg，磷酸二氢钾0.05kg，硫酸镁0.025kg，加水至100kg，装袋，经118℃灭菌2h；②.接种培养：常温接种；③.培养：23℃培养45天，55℃干燥12h得含水量3％的安络小皮伞菌及其培养基粉；④.提取：加入95％的乙醇分两次提取，第一次加4倍物料重量的乙醇，煮沸1.5h，第二次加2倍物料量的乙醇，煮沸1h；⑤.浓缩：合并提取液，浓缩至含水量20％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；⑥.成粉：加入安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物和安络小皮伞菌及其培养基粉混合均匀，即得安络痛菌粉，其中安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物∶安络小皮伞菌及其培养基粉＝0.8∶1，其中安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物是按干燥品计算。
实施例2：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸51kg，稻谷壳21kg，口服葡萄糖6kg，磷酸二氢钾0.06kg，硫酸镁0.03kg，加水至100kg，装袋，经118℃灭菌2h；步骤③培养温度和时间同实施例1制得含水量3.5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量22％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例1。
实施例3：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸55kg，稻谷壳23kg，口服葡萄糖8kg，磷酸二氢钾0.08kg，硫酸镁0.04kg，加水至100kg，装袋，经118℃灭菌2h；步骤③23℃培养45天，55℃干燥12h得含水量4％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量22％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例1。
实施例4：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸58kg，稻谷壳24kg，口服葡萄糖9kg，磷酸二氢钾0.1kg，硫酸镁0.05kg，加水至100kg，装袋，经118℃灭菌2h；步骤③23℃培养45天，55℃干燥12h得含水量4.5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量24％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例1。
实施例5：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸60kg，稻谷壳25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氢钾0.1kg，硫酸镁0.05kg，加水至100kg，装袋，经118℃灭菌2h；步骤③23℃培养45天，55℃干燥12h得含水量5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量25％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例1。
实施例6：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸65kg，稻谷壳25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氢钾0.1kg，硫酸镁0.05kg，加水至100kg，装袋，经118℃灭菌2h；步骤③23℃培养45天，55℃干燥12h得含水量3％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量30％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例1。
实施例7：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸75kg，稻谷壳25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氢钾0.1kg，硫酸镁0.05kg，加水至100kg，装袋，经118℃灭菌2h；步骤③23℃培养45天，55℃干燥12h得含水量3.5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量30％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例1。
实施例8：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸79kg，稻谷壳29kg，口服葡萄糖18kg，磷酸二氢钾0.15kg，硫酸镁0.09kg，加水至100kg，装袋，经118℃灭菌2h；步骤③23℃培养45天，55℃干燥12h得含水量4％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量26％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例1。
实施例9：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸80kg，稻谷壳30kg，口服葡萄糖20kg，磷酸二氢钾0.2kg，硫酸镁0.1kg，加水至100kg，装袋，经118℃灭菌2h；步骤③23℃培养45天，55℃干燥12h得含水量4.5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量26％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例1。
实施例10：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸64kg，稻谷壳26kg，口服葡萄糖15kg，磷酸二氢钾0.12kg，硫酸镁0.08kg，加水至100kg，装袋，经118℃灭菌2h；步骤③23℃培养45天，55℃干燥12h得含水量4.5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量27％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例1。
实施例11：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸74kg，稻谷壳28kg，口服葡萄糖16kg，磷酸二氢钾0.18kg，硫酸镁0.07kg，加水至100kg，装袋，经118℃灭菌2h；步骤③23℃培养45天，55℃干燥12h得含水量5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量27％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例1。
实施例12：采用固体培养基生产安络痛菌粉的方法，包括以下步骤：①.灭菌：称取麦麸50kg，稻谷壳20kg，口服葡萄糖5kg，磷酸二氢钾0.05kg，硫酸镁0.025kg，加水至100kg，装袋，经119℃灭菌2.5h；②.接种培养：常温接种；③.培养：24℃培养50天，58℃干燥14h得含水量3％的安络小皮伞菌及其培养基粉；④.提取：加入95％的乙醇分两次提取，第一次加4倍物料重量的乙醇，煮沸1.8h，第二次加2倍物料量的乙醇，煮沸1.3h；⑤.浓缩：合并提取液，浓缩至含水量20％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；⑥.成粉：加入安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物和安络小皮伞菌及其培养基粉混合均匀，即得安络痛菌粉，其中安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物∶安络小皮伞菌及其培养基粉＝1∶1，其中安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物是按干燥品计算。
实施例13：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸51kg，稻谷壳21kg，口服葡萄糖6kg，磷酸二氢钾0.06kg，硫酸镁0.03kg，加水至100kg，装袋，经119℃灭菌2.5h；步骤③培养温度和时间同实施例12制得含水量3.5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量22％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例12。
实施例14：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸55kg，稻谷壳23kg，口服葡萄糖8kg，磷酸二氢钾0.08kg，硫酸镁0.04kg，加水至100kg，装袋，经119℃灭菌2.5h；步骤③培养温度和时间同实施例12制得含水量4％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量22％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例12。
实施例15：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸58kg，稻谷壳24kg，口服葡萄糖9kg，磷酸二氢钾0.1kg，硫酸镁0.05kg，加水至100kg，装袋，经119℃灭菌2.5h；步骤③培养温度和时间同实施例12制得含水量4.5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量24％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例12。
实施例16：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸60kg，稻谷壳25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氢钾0.1kg，硫酸镁0.05kg，加水至100kg，装袋，经119℃灭菌2.5h；步骤③培养温度和时间同实施例12制得含水量5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量25％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例12。
实施例17：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸65kg，稻谷壳25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氢钾0.1kg，硫酸镁0.05kg，加水至100kg，装袋，经119℃灭菌2.5h；步骤③培养温度和时间同实施例12制得含水量3％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量30％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例12。
实施例18：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸75kg，稻谷壳25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氢钾0.1kg，硫酸镁0.05kg，加水至100kg，装袋，经119℃灭菌2.5h；步骤③培养温度和时间同实施例12制得含水量3.5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量30％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例12。
实施例19：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸79kg，稻谷壳29kg，口服葡萄糖18kg，磷酸二氢钾0.15kg，硫酸镁0.09kg，加水至100kg，装袋，经119℃灭菌2.5h；步骤③培养温度和时间同实施例12制得含水量4％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量26％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例12。
实施例20：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸80kg，稻谷壳30kg，口服葡萄糖20kg，磷酸二氢钾0.2kg，硫酸镁0.1kg，加水至100kg，装袋，经119℃灭菌2.5h；步骤③培养温度和时间同实施例12制得含水量4.5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量26％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例12。
实施例21：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸64kg，稻谷壳26kg，口服葡萄糖15kg，磷酸二氢钾0.12kg，硫酸镁0.08kg，加水至100kg，装袋，经119℃灭菌2.5h；步骤③培养温度和时间同实施例12制得含水量4.5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量27％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例12。
实施例22：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸74kg，稻谷壳28kg，口服葡萄糖16kg，磷酸二氢钾0.18kg，硫酸镁0.07kg，加水至100kg，装袋，经119℃灭菌2.5h；步骤③培养温度和时间同实施例12制得含水量5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量27％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例12。
实施例23：采用固体培养基生产安络痛菌粉的方法，包括以下步骤：①.灭菌：称取麦麸50kg，稻谷壳20kg，口服葡萄糖5kg，磷酸二氢钾0.05kg，硫酸镁0.025kg，加水至100kg，装袋，经120℃灭菌2.8h；②.接种培养：常温接种；③.培养：25℃培养51天，59℃干燥16h得含水量3％的安络小皮伞菌及其培养基粉；④.提取：加入95％的乙醇分两次提取，第一次加4倍物料重量的乙醇，煮沸1.9h，第二次加2倍物料量的乙醇，煮沸1.4h；⑤.浓缩：合并提取液，浓缩至含水量20％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；⑥.成粉：加入安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物和安络小皮伞菌及其培养基粉混合均匀，即得安络痛菌粉，其中安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物∶安络小皮伞菌及其培养基粉＝1.2∶1，其中安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物是按干燥品计算。
实施例24：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸51kg，稻谷壳21kg，口服葡萄糖6kg，磷酸二氢钾0.06kg，硫酸镁0.03kg，加水至100kg，装袋，经120℃灭菌2.8h；步骤③培养温度和时间同实施例23制得含水量3.5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量22％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例23。
实施例25：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸55kg，稻谷壳23kg，口服葡萄糖8kg，磷酸二氢钾0.08kg，硫酸镁0.04kg，加水至100kg，装袋，经120℃灭菌2.8h；步骤③培养温度和时间同实施例23制得含水量4％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量22％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例23。
实施例26：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸58kg，稻谷壳24kg，口服葡萄糖9kg，磷酸二氢钾0.1kg，硫酸镁0.05kg，加水至100kg，装袋，经120℃灭菌2.8h；步骤③培养温度和时间同实施例23制得含水量4.5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量24％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例23。
实施例27：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸60kg，稻谷壳25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氢钾0.1kg，硫酸镁0.05kg，加水至100kg，装袋，经120℃灭菌2.8h；步骤③培养温度和时间同实施例23制得含水量5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量25％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例23。
实施例28：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸65kg，稻谷壳25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氢钾0.1kg，硫酸镁0.05kg，加水至100 kg，装袋，经120℃灭菌2.8h；步骤③培养温度和时间同实施例23制得含水量3％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量30％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例23。
实施例29：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸75kg，稻谷壳25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氢钾0.1kg，硫酸镁0.05kg，加水至100 kg，装袋，经120℃灭菌2.8h；步骤③培养温度和时间同实施例23制得含水量3.5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量30％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例23。
实施例30：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸79kg，稻谷壳29kg，口服葡萄糖18kg，磷酸二氢钾0.15kg，硫酸镁0.09kg，加水至100kg，装袋，经120℃灭菌2.8h；步骤③培养温度和时间同实施例23制得含水量4％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量26％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例23。
实施例31：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸80kg，稻谷壳30kg，口服葡萄糖20kg，磷酸二氢钾0.2kg，硫酸镁0.1kg，加水至100kg，装袋，经120℃灭菌2.8h；步骤③培养温度和时间同实施例23制得含水量4.5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量26％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例23。
实施例32：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸64kg，稻谷壳26kg，口服葡萄糖15kg，磷酸二氢钾0.12kg，硫酸镁0.08kg，加水至100kg，装袋，经120℃灭菌2.8h；步骤③培养温度和时间同实施例23制得含水量4.5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量27％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例23。
实施例33：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸74kg，稻谷壳28kg，口服葡萄糖16kg，磷酸二氢钾0.18kg，硫酸镁0.07kg，加水至100kg，装袋，经120℃灭菌2.8h；步骤③培养温度和时间同实施例23制得含水量5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量27％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例23。
实施例34：采用固体培养基生产安络痛菌粉的方法，包括以下步骤：①.灭菌：称取麦麸50kg，稻谷壳20kg，口服葡萄糖5kg，磷酸二氢钾0.05kg，硫酸镁0.025kg，加水至100kg，装袋，经121℃灭菌3h；②.接种培养：常温接种；③.培养：25℃培养52天，60℃干燥18h得含水量3％的安络小皮伞菌及其培养基粉；④.提取：加入95％的乙醇分两次提取，第一次加4倍物料重量的乙醇，煮沸2h，第二次加2倍物料量的乙醇，煮沸1.5h；⑤.浓缩：合并提取液，浓缩至含水量20％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；⑥.成粉：加入安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物和安络小皮伞菌及其培养基粉混合均匀，即得安络痛菌粉，其中安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物∶安络小皮伞菌及其培养基粉＝1.2∶0.8，其中安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物是按干燥品计算。
实施例35：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸51kg，稻谷壳21kg，口服葡萄糖6kg，磷酸二氢钾0.06kg，硫酸镁0.03kg，加水至100kg，装袋，经121℃灭菌3h；步骤③培养温度和时间同实施例34制得含水量3.5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量22％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例34。
实施例36：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸55kg，稻谷壳23kg，口服葡萄糖8kg，磷酸二氢钾0.08kg，硫酸镁0.04kg，加水至100kg，装袋，经121℃灭菌3h；步骤③培养温度和时间同实施例34制得含水量4％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量22％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例34。
实施例37：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸58kg，稻谷壳24kg，口服葡萄糖9kg，磷酸二氢钾0.1kg，硫酸镁0.05kg，加水至100kg，装袋，经121℃灭菌3h；步骤③培养温度和时间同实施例34制得含水量4.5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量24％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例34。
实施例38：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸60kg，稻谷壳25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氢钾0.1kg，硫酸镁0.05kg，加水至100kg，装袋，经121℃灭菌3h；步骤③培养温度和时间同实施例34制得含水量5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量25％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例34。
实施例39：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸65kg，稻谷壳25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氢钾0.1kg，硫酸镁0.05kg，加水至100kg，装袋，经121℃灭菌3h；步骤③培养温度和时间同实施例34制得含水量3％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量30％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例34。
实施例40：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸75kg，稻谷壳25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氢钾0.1kg，硫酸镁0.05kg，加水至100kg，装袋，经121℃灭菌3h；步骤③培养温度和时间同实施例34制得含水量3.5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量30％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例34。
实施例41：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸79kg，稻谷壳29kg，口服葡萄糖18kg，磷酸二氢钾0.15kg，硫酸镁0.09kg，加水至100kg，装袋，经121℃灭菌3h；步骤③培养温度和时间同实施例34制得含水量4％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量26％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例34。
实施例42：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸80kg，稻谷壳30kg，口服葡萄糖20kg，磷酸二氢钾0.2kg，硫酸镁0.1kg，加水至100kg，装袋，经121℃灭菌3h；步骤③培养温度和时间同实施例34制得含水量4.5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量26％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例34。
实施例43：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸64kg，稻谷壳26kg，口服葡萄糖15kg，磷酸二氢钾0.12kg，硫酸镁0.08kg，加水至100kg，装袋，经121℃灭菌3h；步骤③培养温度和时间同实施例34制得含水量4.5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量27％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例34。
实施例44：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸74kg，稻谷壳28kg，口服葡萄糖16kg，磷酸二氢钾0.18kg，硫酸镁0.07kg，加水至100kg，装袋，经121℃灭菌3h；步骤③培养温度和时间同实施例34制得含水量5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量27％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例34。
实施例45：采用固体培养基生产安络痛菌粉的方法，包括以下步骤：①.灭菌：称取麦麸50kg，稻谷壳20kg，口服葡萄糖5kg，磷酸二氢钾0.05kg，硫酸镁0.025kg，加水至100kg，装袋，经122℃灭菌3.5h；②.接种培养：常温接种；③.培养：26℃培养54天，62℃干燥20h得含水量3％的安络小皮伞菌及其培养基粉；④.提取：加入95％的乙醇分两次提取，第一次加4倍物料重量的乙醇，煮沸2.2h，第二次加2倍物料量的乙醇，煮沸1.7h；⑤.浓缩：合并提取液，浓缩至含水量20％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；⑥.成粉：加入安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物和安络小皮伞菌及其培养基粉混合均匀，即得安络痛菌粉，其中安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物∶安络小皮伞菌及其培养基粉＝0.8∶1.2，其中安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物是按干燥品计算。
实施例46：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸51kg，稻谷壳21kg，口服葡萄糖6kg，磷酸二氢钾0.06kg，硫酸镁0.03kg，加水至100kg，装袋，经122℃灭菌3.5h；步骤③培养温度和时间同实施例45制得含水量3.5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量22％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例45。
实施例47：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸55kg，稻谷壳23kg，口服葡萄糖8kg，磷酸二氢钾0.08kg，硫酸镁0.04kg，加水至100kg，装袋，经122℃灭菌3.5h；步骤③培养温度和时间同实施例45制得含水量4％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量22％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例45。
实施例48：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸58kg，稻谷壳24kg，口服葡萄糖9kg，磷酸二氢钾0.1kg，硫酸镁0.05kg，加水至100kg，装袋，经122℃灭菌3.5h；步骤③培养温度和时间同实施例45制得含水量4.5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量24％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例45。
实施例49：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸60kg，稻谷壳25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氢钾0.1kg，硫酸镁0.05kg，加水至100kg，装袋，经122℃灭菌3.5h；步骤③培养温度和时间同实施例45制得含水量5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量25％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例45。
实施例50：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸65kg，稻谷壳25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氢钾0.1kg，硫酸镁0.05kg，加水至100kg，装袋，经122℃灭菌3.5h；步骤③培养温度和时间同实施例45制得含水量3％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量30％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例45。
实施例51：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸75kg，稻谷壳25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氢钾0.1kg，硫酸镁0.05kg，加水至100kg，装袋，经122℃灭菌3.5h；步骤③培养温度和时间同实施例45制得含水量3.5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量30％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例45。
实施例52：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸79kg，稻谷壳29kg，口服葡萄糖18kg，磷酸二氢钾0.15kg，硫酸镁0.09kg，加水至100kg，装袋，经122℃灭菌3.5h；步骤③培养温度和时间同实施例45制得含水量4％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量26％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例45。
实施例53：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸80kg，稻谷壳30kg，口服葡萄糖20kg，磷酸二氢钾0.2kg，硫酸镁0.1kg，加水至100kg，装袋，经122℃灭菌3.5h；步骤③培养温度和时间同实施例45制得含水量4.5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量26％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例45。
实施例54：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸64kg，稻谷壳26kg，口服葡萄糖15kg，磷酸二氢钾0.12kg，硫酸镁0.08kg，加水至100kg，装袋，经122℃灭菌3.5h；步骤③培养温度和时间同实施例45制得含水量4.5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量27％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例45。
实施例55：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸74kg，稻谷壳28kg，口服葡萄糖16kg，磷酸二氢钾0.18kg，硫酸镁0.07kg，加水至100kg，装袋，经122℃灭菌3.5h；步骤③培养温度和时间同实施例45制得含水量5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量27％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例45。
实施例56：采用固体培养基生产安络痛菌粉的方法，包括以下步骤：①.灭菌：称取麦麸50kg，稻谷壳20kg，口服葡萄糖5kg，磷酸二氢钾0.05kg，硫酸镁0.025kg，加水至100kg，装袋，经123℃灭菌3.8h；②.接种培养：常温接种；③.培养：27℃培养55天，64℃干燥22h得含水量3％的安络小皮伞菌及其培养基粉；④.提取：加入95％的乙醇分两次提取，第一次加4倍物料重量的乙醇，煮沸2.4h，第二次加2倍物料量的乙醇，煮沸1.9h；⑤.浓缩：合并提取液，浓缩至含水量20％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；⑥.成粉：加入安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物和安络小皮伞菌及其培养基粉混合均匀，即得安络痛菌粉，其中安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物∶安络小皮伞菌及其培养基粉＝0.8∶1.2，其中安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物是按干燥品计算。
实施例57：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸51kg，稻谷壳21kg，口服葡萄糖6kg，磷酸二氢钾0.06kg，硫酸镁0.03kg，加水至100kg，装袋，经123℃灭菌3.8h；步骤③培养温度和时间同实施例56制得含水量3.5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量22％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例56。
实施例58：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸55kg，稻谷壳23kg，口服葡萄糖8kg，磷酸二氢钾0.08kg，硫酸镁0.04kg，加水至100kg，装袋，经123℃灭菌3.8h；步骤③培养温度和时间同实施例56制得含水量4％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量22％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例56。
实施例59：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸58kg，稻谷壳24kg，口服葡萄糖9kg，磷酸二氢钾0.1kg，硫酸镁0.05kg，加水至100kg，装袋，经123℃灭菌3.8h；步骤③培养温度和时间同实施例56制得含水量4.5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量24％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例56。
实施例60：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸60kg，稻谷壳25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氢钾0.1kg，硫酸镁0.05kg，加水至100kg，装袋，经123℃灭菌3.8h；步骤③培养温度和时间同实施例56制得含水量5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量25％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例56。
实施例61：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸65kg，稻谷壳25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氢钾0.1kg，硫酸镁0.05kg，加水至100kg，装袋，经123℃灭菌3.8h；步骤③培养温度和时间同实施例56制得含水量3％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量30％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例56。
实施例62：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸75kg，稻谷壳25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氢钾0.1kg，硫酸镁0.05kg，加水至100kg，装袋，经123℃灭菌3.8h；步骤③培养温度和时间同实施例56制得含水量3.5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量30％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例56。
实施例63：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸79kg，稻谷壳29kg，口服葡萄糖18kg，磷酸二氢钾0.15kg，硫酸镁0.09kg，加水至100kg，装袋，经123℃灭菌3.8h；步骤③培养温度和时间同实施例56制得含水量4％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量26％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例56。
实施例64：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸80kg，稻谷壳30kg，口服葡萄糖20kg，磷酸二氢钾0.2kg，硫酸镁0.1kg，加水至100kg，装袋，经123℃灭菌3.8h；步骤③培养温度和时间同实施例56制得含水量4.5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量26％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例56。
实施例65：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸64kg，稻谷壳26kg，口服葡萄糖15kg，磷酸二氢钾0.12kg，硫酸镁0.08kg，加水至100kg，装袋，经123℃灭菌3.8h；步骤③培养温度和时间同实施例56制得含水量4.5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量27％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例56。
实施例66：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸74kg，稻谷壳28kg，口服葡萄糖16kg，磷酸二氢钾0.18kg，硫酸镁0.07kg，加水至100kg，装袋，经123℃灭菌3.8h；步骤③培养温度和时间同实施例56制得含水量5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量27％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例56。
实施例67：采用固体培养基生产安络痛菌粉的方法，包括以下步骤：①.灭菌：称取麦麸50kg，稻谷壳20kg，口服葡萄糖5kg，磷酸二氢钾0.05kg，硫酸镁0.025kg，加水至100kg，装袋，经125℃灭菌4h；②.接种培养：常温接种；③.培养：27℃培养60天，65℃干燥24h得含水量3％的安络小皮伞菌及其培养基粉；④.提取：加入95％的乙醇分两次提取，第一次加4倍物料重量的乙醇，煮沸2.5h，第二次加2倍物料量的乙醇，煮沸2h；⑤.浓缩：合并提取液，浓缩至含水量20％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；⑥.成粉：加入安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物和安络小皮伞菌及其培养基粉混合均匀，即得安络痛菌粉，其中安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物∶安络小皮伞菌及其培养基粉＝1∶1，其中安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物是按干燥品计算。
实施例68：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸51kg，稻谷壳21kg，口服葡萄糖6kg，磷酸二氢钾0.06kg，硫酸镁0.03kg，加水至100kg，装袋，经125℃灭菌4h；步骤③培养温度和时间同实施例67制得含水量3.5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量22％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例67。
实施例69：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸55kg，稻谷壳23kg，口服葡萄糖8kg，磷酸二氢钾0.08kg，硫酸镁0.04kg，加水至100kg，装袋，经125℃灭菌4h；步骤③培养温度和时间同实施例67制得含水量4％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量22％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例67。
实施例70：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸58kg，稻谷壳24kg，口服葡萄糖9kg，磷酸二氢钾0.1kg，硫酸镁0.05kg，加水至100kg，装袋，经125℃灭菌4h；步骤③培养温度和时间同实施例67制得含水量4.5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量24％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例67。
实施例71：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸60kg，稻谷壳25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氢钾0.1kg，硫酸镁0.05kg，加水至100kg，装袋，经125℃灭菌4h；步骤③培养温度和时间同实施例67制得含水量5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量25％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例67。
实施例72：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸65kg，稻谷壳25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氢钾0.1kg，硫酸镁0.05kg，加水至100kg，装袋，经125℃灭菌4h；步骤③培养温度和时间同实施例67制得含水量3％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量30％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例67。
实施例73：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸75kg，稻谷壳25kg，口服葡萄糖10kg，磷酸二氢钾0.1kg，硫酸镁0.05kg，加水至100kg，装袋，经125℃灭菌4h；步骤③培养温度和时间同实施例67制得含水量3.5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量30％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例67。
实施例74：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸79kg，稻谷壳29kg，口服葡萄糖18kg，磷酸二氢钾0.15kg，硫酸镁0.09kg，加水至100kg，装袋，经125℃灭菌4h；步骤③培养温度和时间同实施例67制得含水量4％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量26％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例67。
实施例75：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸80kg，稻谷壳30kg，口服葡萄糖20kg，磷酸二氢钾0.2kg，硫酸镁0.1kg，加水至100kg，装袋，经125℃灭菌4h；步骤③培养温度和时间同实施例67制得含水量4.5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量26％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例67。
实施例76：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸64kg，稻谷壳26kg，口服葡萄糖15kg，磷酸二氢钾0.12kg，硫酸镁0.08kg，加水至100kg，装袋，经125℃灭菌4h；步骤③培养温度和时间同实施例67制得含水量4.5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量27％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例67。
实施例77：本实施例中步骤①固体培养基取以下原料：称取麦麸74kg，稻谷壳28kg，口服葡萄糖16kg，磷酸二氢钾0.18kg，硫酸镁0.07kg，加水至100kg，装袋，经125℃灭菌4h；步骤③培养温度和时间同实施例67制得含水量5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；步骤⑤合并提取液，浓缩至含水量27％，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；其他步骤同实施例67。
上述实施例中的各原料在市场上容易买到。
本发明还可以将固体培养基装瓶灭菌，都可以实现本发明的目的。
Claims (5)
1.一种采用优化固体培养基生产安络痛菌粉的方法，由以下步骤制备而成：
①.灭菌：采用固体培养基，将固体培养基装袋或装入培养瓶，经118℃-125℃灭菌2-4h，所述固体培养基由以下重量份的组分组成：麦麸50-80份，稻谷壳20-30份，口服葡萄糖5-20份，磷酸二氢钾0.05-0.2份，硫酸镁0.025-0.1份，加水至100份；
②.接种培养：常温接种，接白蘑科安络小皮伞菌种；
③.培养：23℃-27℃培养1.5-2个月，55℃-65℃干燥12-24h得含水量3-5％的安络小皮伞菌及其培养基粉；
④.提取：加入95％的乙醇，分两次提取，第一次加4倍物料重量的乙醇，煮沸1.5-2.5h，第二次加2倍物料重量的乙醇，煮沸1-2h；
⑤.浓缩：合并提取液，浓缩成含水20-30％的稠膏，回收乙醇，得安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物；
⑥.成粉：加入安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物和安络小皮伞菌及其培养基粉混合均匀，即得安络痛菌粉，其中安络小皮伞菌及其培养基乙醇提取物∶安络小皮伞菌及其培养基粉＝0.8-1.2∶0.8-1.2。
2.根据权利要求1所述的采用固体培养基生产安络痛菌粉的方法，其特征是：所述步骤①中固体培养基由以下重量份的组分组成：麦麸60份，稻谷壳25份，口服葡萄糖10份，磷酸二氢钾0.1份，硫酸镁0.05份，加水至100份。
3.根据权利要求1所述的采用固体培养基生产安络痛菌粉的方法，其特征是：所述步骤①中固体培养基由以下重量份的组分组成：麦麸65份，稻谷壳25份，口服葡萄糖10份，磷酸二氢钾0.1份，硫酸镁0.05份，加水至100份。
4.根据权利要求1所述的采用固体培养基生产安络痛菌粉的方法，其特征是：所述步骤①中固体培养基由以下重量份的组分组成：麦麸75份，稻谷壳25份，口服葡萄糖10份，磷酸二氢钾0.1份，硫酸镁0.05份，加水至100份。
5.根据权利要求2、3或4中任一项所述的采用固体培养基生产安络痛菌粉的方法，其特征是：所述步骤③25℃培养1.8个月；步骤④60℃干燥18h至含水量25％，加入6倍物料重量的95份乙醇，分两次提取，第一次加4倍量的乙醇，第一次煮沸2h，第二次加2倍量的乙醇，第二次煮沸1.5h。
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Cited By (3)
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|---|---|---|---|---|
| CN104073531A (zh) * | 2014-07-15 | 2014-10-01 | 江苏神华药业有限公司 | 一种深层液态发酵生产安络小皮伞胞外多糖的方法 |
| CN107677746A (zh) * | 2017-09-30 | 2018-02-09 | 江苏正大清江制药有限公司 | 一种控制测定安络痛浸膏中甘露醇的方法 |
| CN108617406A (zh) * | 2018-08-24 | 2018-10-09 | 湖北欣恺生物科技有限公司 | 一种安络小皮伞固体培养基及干菌体的制备方法 |
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2009
- 2009-05-04 CN CN2009100647720A patent/CN101879189A/zh active Pending
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