CN101857632A - 脂肪酰甘氨酰甘氨酰组氨酸-铜(ⅱ)配合物的制备及应用 - Google Patents
脂肪酰甘氨酰甘氨酰组氨酸-铜(ⅱ)配合物的制备及应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101857632A CN101857632A CN201010168955A CN201010168955A CN101857632A CN 101857632 A CN101857632 A CN 101857632A CN 201010168955 A CN201010168955 A CN 201010168955A CN 201010168955 A CN201010168955 A CN 201010168955A CN 101857632 A CN101857632 A CN 101857632A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- gly
- preparation
- copper
- cooh
- amphipathic
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 67
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 43
- -1 n-octyl Chemical group 0.000 claims abstract description 19
- 108010009297 diglycyl-histidine Proteins 0.000 claims abstract description 18
- 239000003446 ligand Substances 0.000 claims abstract description 18
- JPVYNHNXODAKFH-UHFFFAOYSA-N Cu2+ Chemical compound [Cu+2] JPVYNHNXODAKFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 15
- 239000010949 copper Substances 0.000 claims description 30
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 26
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 claims description 16
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 13
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- PDAWDNVHMUKWJR-ZETCQYMHSA-N Gly-Gly-His Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CNC=N1 PDAWDNVHMUKWJR-ZETCQYMHSA-N 0.000 claims description 11
- OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-M Superoxide Chemical compound [O-][O] OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 9
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 claims description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 4
- 230000008878 coupling Effects 0.000 claims description 3
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 claims description 3
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 claims description 3
- GHVNFZFCNZKVNT-UHFFFAOYSA-N decanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCC(O)=O GHVNFZFCNZKVNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-N dodecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCC(O)=O POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- TUNFSRHWOTWDNC-UHFFFAOYSA-N tetradecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC(O)=O TUNFSRHWOTWDNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N hexadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 125000000896 monocarboxylic acid group Chemical group 0.000 claims description 2
- WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-N octanoic acid Chemical compound CCCCCCCC(O)=O WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- LVTJOONKWUXEFR-FZRMHRINSA-N protoneodioscin Natural products O(C[C@@H](CC[C@]1(O)[C@H](C)[C@@H]2[C@]3(C)[C@H]([C@H]4[C@@H]([C@]5(C)C(=CC4)C[C@@H](O[C@@H]4[C@H](O[C@H]6[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O6)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]6[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O6)[C@H](CO)O4)CC5)CC3)C[C@@H]2O1)C)[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 LVTJOONKWUXEFR-FZRMHRINSA-N 0.000 claims 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 abstract description 11
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 abstract description 6
- 150000004668 long chain fatty acids Chemical class 0.000 abstract description 4
- SNRUBQQJIBEYMU-UHFFFAOYSA-N Dodecane Natural products CCCCCCCCCCCC SNRUBQQJIBEYMU-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 3
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 abstract description 3
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 abstract description 3
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 abstract description 3
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 abstract 1
- 150000001879 copper Chemical class 0.000 abstract 1
- 125000002704 decyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 abstract 1
- 125000003438 dodecyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 abstract 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 abstract 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 abstract 1
- 125000001421 myristyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 abstract 1
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 60
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 31
- 102000019197 Superoxide Dismutase Human genes 0.000 description 21
- 108010012715 Superoxide dismutase Proteins 0.000 description 21
- 229940032362 superoxide dismutase Drugs 0.000 description 21
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N N-Methylmorpholine Chemical compound CN1CCOCC1 SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 150000004699 copper complex Chemical class 0.000 description 18
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical group CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 17
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 14
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 13
- ADFXKUOMJKEIND-UHFFFAOYSA-N 1,3-dicyclohexylurea Chemical compound C1CCCCC1NC(=O)NC1CCCCC1 ADFXKUOMJKEIND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 11
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 11
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 10
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 10
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 10
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 10
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 10
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 10
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 7
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 7
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 244000178870 Lavandula angustifolia Species 0.000 description 6
- 235000010663 Lavandula angustifolia Nutrition 0.000 description 6
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000006837 decompression Effects 0.000 description 6
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 6
- 239000001102 lavandula vera Substances 0.000 description 6
- 235000018219 lavender Nutrition 0.000 description 6
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 6
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 6
- 229960001866 silicon dioxide Drugs 0.000 description 6
- 230000008569 process Effects 0.000 description 5
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 5
- HWBAHOVOSOAFLE-UHFFFAOYSA-N 2-[[2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]acetyl]amino]acetic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)NCC(=O)NCC(O)=O HWBAHOVOSOAFLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical class [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 4
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000863 peptide conjugate Substances 0.000 description 4
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 4
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 4
- LJCWRJYVPJJTMB-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]acetate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)NCC(=O)ON1C(=O)CCC1=O LJCWRJYVPJJTMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 3
- 229910000071 diazene Inorganic materials 0.000 description 3
- 125000000487 histidyl group Chemical group [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1 0.000 description 3
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 3
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 3
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 3
- GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N (±)-α-Tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VRPJIFMKZZEXLR-UHFFFAOYSA-N 2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]acetic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)NCC(O)=O VRPJIFMKZZEXLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YYROPELSRYBVMQ-UHFFFAOYSA-N 4-toluenesulfonyl chloride Chemical compound CC1=CC=C(S(Cl)(=O)=O)C=C1 YYROPELSRYBVMQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LRFVTYWOQMYALW-UHFFFAOYSA-N 9H-xanthine Chemical compound O=C1NC(=O)NC2=C1NC=N2 LRFVTYWOQMYALW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 2
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 2
- MVEAAGBEUOMFRX-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;hydrochloride Chemical compound Cl.CCOC(C)=O MVEAAGBEUOMFRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 2
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hydrogen chloride Substances Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910000041 hydrogen chloride Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 2
- KYEACNNYFNZCST-UHFFFAOYSA-N 1-methylpyrrolidine-2,5-dione Chemical compound CN1C(=O)CCC1=O KYEACNNYFNZCST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 1
- WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N Benzyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 description 1
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 1
- XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N Cyclohexane Chemical compound C1CCCCC1 XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 229940123457 Free radical scavenger Drugs 0.000 description 1
- 208000007882 Gastritis Diseases 0.000 description 1
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- UPYKUZBSLRQECL-UKMVMLAPSA-N Lycopene Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1C(=C)CCCC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2C(=C)CCCC2(C)C UPYKUZBSLRQECL-UKMVMLAPSA-N 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 229930003427 Vitamin E Natural products 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 125000000637 arginyl group Chemical group N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)* 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003236 benzoyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 229960004217 benzyl alcohol Drugs 0.000 description 1
- 235000019445 benzyl alcohol Nutrition 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000005473 carotenes Nutrition 0.000 description 1
- 150000001746 carotenes Chemical class 0.000 description 1
- 239000012230 colorless oil Substances 0.000 description 1
- 230000000536 complexating effect Effects 0.000 description 1
- 238000010668 complexation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000562 conjugate Substances 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 1
- 238000004807 desolvation Methods 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- OMBRFUXPXNIUCZ-UHFFFAOYSA-N dioxidonitrogen(1+) Chemical compound O=[N+]=O OMBRFUXPXNIUCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000007323 disproportionation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003810 ethyl acetate extraction Methods 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N gamma-tocopherol Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC1CCC2C(C)C(O)C(C)C(C)C2O1 WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 150000002460 imidazoles Chemical class 0.000 description 1
- 125000002883 imidazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000013507 mapping Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 description 1
- MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N nitrogen oxide Inorganic materials O=[N] MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006186 oral dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000007935 oral tablet Substances 0.000 description 1
- 229940096978 oral tablet Drugs 0.000 description 1
- 230000005408 paramagnetism Effects 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 239000002516 radical scavenger Substances 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 238000012916 structural analysis Methods 0.000 description 1
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036269 ulceration Effects 0.000 description 1
- NCYCYZXNIZJOKI-UHFFFAOYSA-N vitamin A aldehyde Natural products O=CC=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C NCYCYZXNIZJOKI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019154 vitamin C Nutrition 0.000 description 1
- 239000011718 vitamin C Substances 0.000 description 1
- 235000019165 vitamin E Nutrition 0.000 description 1
- 229940046009 vitamin E Drugs 0.000 description 1
- 239000011709 vitamin E Substances 0.000 description 1
- 229940075420 xanthine Drugs 0.000 description 1
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
本发明属于生物医药领域,涉及脂肪酰甘氨酰甘氨酰组氨酸-铜(Ⅱ)配合物的制备及应用。本发明将正八,十,十二,十四,十六烷基脂肪酸分别与Gly-Gly-His肽段相缀合,对其进行疏水性修饰,合成了具备两亲性的不同长链脂肪酸和Gly-Gly-His肽缀合物,即配体化合物CnH2n+1CO-Gly-Gly-His-OH,(n=7,9,11,13,15)。之后,将不同长链脂肪酸和Gly-Gly-His肽的缀合物分别与Cu2+进行配合,合成了以铜(Ⅱ)为配位中心离子,不同长链脂肪酸和Gly-Gly-His肽缀合物为配体的配合物,即铜配合物Cu-(CnH2n+1CO-Gly-Gly-His)4,(n=7,9,11,13,15)。
Description
技术领域
本发明属于生物医药领域,涉及SOD模拟物—铜(II)配合物及其制备方法,尤其涉及铜配合物构建以及鉴定方法。本发明还涉及到铜配合物在SOD样活性中的应用。
背景技术
自由基的定义是指任何包含一个未成对电子的原子或原子团。生物体系中自由基广泛存在,主要是氧自由基,例如超氧阴离子自由基(O2 -.)、羟自由基(OH)、脂氧自由基、二氧化氮和一氧化氮自由基。在正常生命过程中自由基为生命所必需,大量实验表明,自由基参与了许多重要的生命过程。自由基的特点可以总结为三点,一是反应性强,二是具有顺磁性,三是寿命短。
在正常情况下,人体内存在大量的抗氧化剂,如维生素C、维生素E、胡萝卜素,超氧化物歧化酶、过氧化氢酶等。它们能清除自由基,使体内的自由基处于不断产生与清除的动态平衡中,但当自由基过多或清除过慢时,动态平衡被打乱,就会对生物体产生一系列损害。自由基对体内生物大分子的损伤主要是对维持生命活动具有重要作用的蛋白质和DNA的损伤。科学家认为自由基与衰老、癌症、胃炎、消化性溃疡、高血压、动脉粥样硬化、缺血-灌注再损伤、帕金森、休克、糖尿病等疾病都息息相关。
超氧化物歧化酶(SOD)是一类广泛存在于动物、植物和微生物多种生物体内的金属酶,该酶是生物体内一种重要的氧自由基清除剂,其作用在于催化体内超氧阴离子自由基O2 -.的歧化反应。SOD结构如式1所示,为每个铜原子除分别与4个组氨酸残基(His44,46,61,118)的咪唑氮配位外,还与一轴向水分子形成远距离的第5配位,Zn则与3个组氨酸残基(His61,69,78)和1个天冬氨酸(D81)配位。Cu、Zn共同连接组氨酸61组成“咪唑桥”结构。
研究证明,Cu和Zn与酶蛋白分子中的组氨酸残基咪唑环上的N原子之间的配位关系以及Cu和Zn之间的“咪唑桥”连接部位对酶活性的发挥是至关重要的。而锌离子在催化过程中不起作用,只起到稳定酶的作用,Cu2+则与酶的活性有直接关系。Cu,Zn-SOD的三维结构由衍射晶体结构分析得到:每个酶分子由两个亚基通过非共价健的疏水相互作用缔合成二聚体,肽链内部由半胱氨酸的巯基(-SH)构成的二硫桥对业基缔合起重要作用。每个亚基活性中心金属的配位结构如式2所示,由两个亚基组成的SOD活性部位正好是以Cu为中心的一个“疏水口袋”。这一疏水微环境有利于反应的进行,口袋边有一带正电的精氨酸残基Arg141,它可以在催化过程中提供质子,使酶催化反应得以进行并使催化速度大为加快,同时Arg141带正电荷,可以引导O2 -.进入活性中心。其他氨基酸对SOD活性的影响应该从整个酶结构来考虑。
式1.、SOD活性中心金属配位结构
式2、Cu,Zn-SOD酶活性中心结构
目前,对SOD模拟物的研究主要是对合成SOD的微环境进行改造。SOD活性是由于其活性中心处于酶的疏水微环境之中,此环境对SOD催化活性的影响主要体现在以下几方面:1)存在静电导引、定位作用。酶表面带负电荷,而在活性中心附近带正电荷,引导O2 -.顺利进入活性中心,定位到中心原子铜原子上。2)由于微环境具有疏水性和介电常数低的特点,O2 -.可比较容易地去溶剂化而参与反应。3)能够提供质子,质子是催化反应中必需的反应物。因此给中心模拟物提供一个疏水微环境将会大大提高其SOD样的活性。
发明内容
本发明的目的之一是提供一种具有两亲性的配体化合物及其制备方法。
本发明的目的之二是提供一种与Cu,Zn-SOD具有相似结构的铜(II)配合物及其制备方法。
本发明的目的之三是提供铜(II)配合物在SOD样活性中的应用。
本发明所述的具有两亲性的系列配体化合物,其分子式为:
CnH2n+1CO-Gly-Gly-His-OH,
其中,n代表不同长链烷基脂肪酸的碳数,优选为7、9、11、13或15。
本发明所述的具有两亲性的系列配体化合物,其制备方法为:
将不同长链烷基脂肪酸分别与Gly-Gly-His进行缀合,即得。
本发明所述的具有两亲性的系列配体化合物,其具体的制备方法为:
将不同长链烷基脂肪酸CH3(CH2)6COOH、CH3(CH2)8COOH、CH3(CH2)10COOH、CH3(CH2)12COOH、CH3(CH2)14COOH分别与保护基保护的Gly-Gly-His偶联,脱去保护基,即得配体化合物。
本发明还提供一种与Cu,Zn-SOD具有相似结构的铜(II)配合物,即:Cu-(CnH2n+1CO-Gly-Gly-His)4,(n=7,9,11,13,15)。
本发明所述的铜(II)配合物粒径为290~450nm,Zeta电位为-23~-37mV。
本发明所述铜(II)配合物,其制备方法为:
将本发明所述具有两亲性的系列配体化合物分别与Cu2+进行配合,合成了以铜(II)为配位中心离子,不同长链烷基脂肪酸和Gly-Gly-His肽缀合物为配体的配合物,即Cu-(CnH2n+1CO-Gly-Gly-His)4,(n=7,9,11,13,15)。
本发明所述铜(II)配合物,具体的制备方法为:
将本发明所述具有两亲性的系列配体化合物,即:CnH2n+1CO-Gly-Gly-His-OH,(n=7,9,11,13,15),分别与Cu2+进行配合,合成了以铜(II)为配位中心离子,不同长链脂肪酸和Gly-Gly-His肽缀合物为配体的配合物,即铜(II)配合物:Cu-(CnH2n+1CO-Gly-Gly-His)4,(n=7,9,11,13,15)。
本发明所述铜(II)配合物,更加具体的制备方法为:
(1)按照常规技术合成保护基保护的Gly-Gly-His;
(2)将保护基保护的Gly-Gly-His与CH3(CH2)6COOH、CH3(CH2)8COOH、CH3(CH2)10COOH、CH3(CH2)12COOH或CH3(CH2)14COOH偶联,脱去保护基,即得具有两亲性的系列配体化合物:CnH2n+1CO-Gly-Gly-His-OH,(n=7,9,11,13,15);
(3)将上述具有两亲性的系列化合物作为配体与Cu2+进行配合,合成了以铜(II)为配位中心离子,不同链长的烷基脂肪酸和Gly-Gly-His肽缀合物为配体的配合物,即铜(II)配合物:Cu-(CnH2n+1CO-Gly-Gly-His)4,(n=7,9,11,13,15)。
以上所述的Cu2+是指含有Cu2+的物质如:CuSO4溶解或熔融后得到的Cu2+。因此本发明所述的配合反应,加入的反应物为含有Cu2+的物质。
所述保护基是指常规的羟基或羧基保护基,如苯甲酰基等。
许多SOD的模拟物即铜与肽的配合物具有消除超氧阴离子自由基的活性,但是SOD样活性是由于其活性中心处于酶的疏水微环境之中,因此给SOD模拟物提供一个疏水微环境将会大大提高其SOD样的活性。所以本发明将不同长链烷基脂肪酸与Gly-Gly-His肽段相缀合,对其进行疏水性修饰,合成了具备两亲性的配体化合物,之后,将不同长链烷基脂肪酸和Gly-Gly-His肽的缀合物分别与Cu2+进行络合,合成了以铜(II)为配位中心离子,不同长链烷基脂肪酸和Gly-Gly-His肽缀合物为配体的配合物。这样配体上缀合的不同长链烷基脂肪酸为铜配合物提供类似酶作用的疏水微环境,使得具SOD样活性大大提高。
本发明以NBT还原法评价了制备的铜配合物清除超氧阴离子自由基(O2 -.)的活性,结果显示制备的本发明的铜(II)配合物比对照组具有更优异的清除超氧阴离子自由基的活性。
本发明还包括,
所述的铜(II)配合物在制备具有清除超氧自由基作用的药物中的应用。
所述的铜(II)配合物所制备成的纳米级粒子具有清除超氧自由基的用途。
所述的具有两亲性的配体化合物在制备具有清除超氧自由基作用的药物中的应用。
所述的具有两亲性的配体化合物所制备成的纳米级粒子具有清除超氧自由基的用途。
在应用的过程中还将包括将本发明的铜(II)配合物制备成适合服用的药物组合物,如适合口服的片剂,胶囊,口服液等,也可制备成非口服剂型如注射剂,外用制剂等,最好制备成纳米粒制剂。
通过本发明所述的铜(II)配合物所制备成的纳米级粒子在清除超氧自由基中有很好的效果。
具体实施方式
为了进一步阐述本发明,下面给出一系列实施例。这些实施例完全是例证性的,它们仅用来对本发明进行具体描述,不应当理解为对本发明的限制。
实施例1、Boc-Gly-Gly-OH的制备
1)Boc-Gly-OSu的制备
将0.875g(5.0mmol)Boc-Gly-OH溶于15ml无水THF,往得到的溶液中加入0.819g(5.5mmol)N-甲基琥珀酰亚胺(HOSu),并使完全溶解。冰浴下,加入1.34g(6.5mmol)用无水THF溶解的二环己基羰二亚胺(DCC)。冰浴下搅拌1h,再室温搅拌4h,TLC(氯仿/甲醇,10∶1)显示Boc-Gly-OH消失。滤除二环己基脲(DCU),旋干THF,残留物用50ml乙酸乙酯溶解,再次过滤DCU。得到的溶液依次用饱和NaHCO3水溶液洗三次、饱和NaCl水溶液洗三次。乙酸乙酯层用无水Na2SO4干燥,过滤,滤液减压浓缩至干,得到1.24g(81%)标题化合物,为白色固体。
2)Boc-Gly-Gly-OH的制备
将白色固体1.53g(5.0mmol)Boc-Gly-OSu用15ml无水THF溶解得到反应液(I),将0.375g(5.0mmol)Gly溶于15ml蒸馏水中得到反应液(II)。把反应液(II)加入反应液(I)中,冰浴下用N-甲基吗啉(NMM)调pH至8-9。过夜反应后,TLC(氯仿/甲醇,10∶1)显示Boc-Gly-OSu消失。反应混合物用饱和KHSO4调pH至7,旋干THF。残留物用饱和KHSO4调pH至2,用乙酸乙酯萃取三次。合并的乙酸乙酯层用饱和NaCl水溶液洗至中性,然后用无水Na2SO4干燥,过滤,滤液减压浓缩至干,得0.882g(76%)标题化合物,为白色固体。(ESI-MS(m/z):231.2[M-H]-,232.3[M]-,463.3[2M-H]-)
实施例2、Tos·His-OBzl的制备
将5g(32mmol)H-His-OH,6.8g(36mmol)对甲苯磺酸及7.3g(38mmol)对甲苯磺酰氯用90ml苯甲醇溶解,再加入32ml环己烷,油浴80℃下回流48h。反应溶液加入大量乙醚有固体析出,经乙醚磨洗得到14g(100%)标题化合物,为白色固体。(ESI-MS(m/z):246.4[M+H]+,247.5[M+2H]+)
实施例3、Boc-Gly-Gly-His-OBzl的制备
将1.16g(5.0mmol)Boc-Gly-Gly-OH溶于15ml无水THF,往得到的溶液中加入0.742g(5.5mmol)N-羟基苯并三氮唑(HOBt),并使完全溶解。冰浴下加入1.34g(6.5mmol)用无水THF溶解的二环己基羰二亚胺(DCC)得到反应液,待用。20分钟后把2.17g(5.0mmol)Tos·His-OBzl加入到反应液中,然后用N-甲基吗啉(NMM)调pH至8-9。冰浴下搅拌1h,再室温搅拌12h,TLC(氯仿/甲醇,10∶1)显示Boc-Gly-Gly-OH消失。滤除二环己基脲(DCU),旋干THF,残留物用50ml乙酸乙酯溶解,再次过滤DCU,得到的溶液依次用饱和NaHCO3水溶液洗三次、饱和NaCl水溶液洗三次。乙酸乙酯层用无水Na2SO4干燥、过滤、滤液减压浓缩至干,得到2.30g(100%)粗产物,为黄色油状物。硅胶柱(氯仿/甲醇,45∶1)纯化后得0.872g(38%)纯标题化合物,为白色固体。(Mp.131.7~132.4℃;[α]25 D=-0.963(c1,MeOH);ESI-MS(m/z):460.5[M+H]+,482.5[M+Na]+,483.5[M+Na+H]+)
实施例4、HCl·Gly-Gly-His-OBzl的制备
将0.92g(2.0mmol)Boc-Gly-Gly-His-OBzl溶解在20ml 4mol/L氯化氢-乙酸乙酯溶液中,室温搅拌4小时,TLC(氯仿/甲醇,10∶1)显示原料点消失,减压浓缩除去乙酸乙酯,残留物反复加少量乙醚进行减压浓缩以除去氯化氢气。最后加少量乙醚将残留物研磨成0.767g(97%)标题化合物,为固体粉末,直接用于下一步反应。
实施例5、C7H15CO-Gly-Gly-His-OH的制备
1)C7H15CO-Gly-Gly-His-OBzl的制备
将0.288g(2.0mmol)C7H15COOH溶于15ml无水THF,往得到的溶液中加入0.297g(2.2mmol)N-羟基苯并三氮唑(HOBt),并使完全溶解。冰浴下加入0.536g(2.6mmol)用无水THF溶解的二环己基羰二亚胺(DCC)得到反应液,待用。20分钟后把0.791g(2.0mmol)HCl·Gly-Gly-His-OBzl加入到反应液中,然后用N-甲基吗啉(NMM)调pH至8-9。冰浴下搅拌1h,再室温搅拌12h,TLC(氯仿/甲醇,10∶1)显示C7H15COOH消失。滤除二环己基脲(DCU),旋干THF,残留物用50ml氯仿溶解,再次过滤DCU,得到的溶液依次用饱和NaHCO3水溶液洗三次、饱和NaCl水溶液洗三次。氯仿层用无水Na2SO4干燥、过滤、滤液减压浓缩至干,得到0.97g(100%)粗产物,为黄色油状物。硅胶柱(氯仿/甲醇,35∶1)纯化后得0.368g(38%)纯标题化合物,为黄色固体。(Mp.164.1~165.9℃;[α]25 D=-3.40(c1,MeOH);ESI-MS(m/z):486.5[M+H]+,508.4[M+Na]+,509.5[M+Na+H]+)
2)C7H15CO-Gly-Gly-His-OH的制备
将3.8mg(7.8μmol)C7H15CO-Gly-Gly-His-OBzl置于25ml茄形瓶中,用适量乙醇溶解,加入1mg Pd/C(5%),通H2(0.02Mba),室温搅拌,(氯仿/甲醇,10∶1)显示原料点消失。滤除Pd/C,滤液减压浓缩至干,残留物反复用乙醚研磨,得3.0mg(99%)标题化合物,为黄色固体。(Mp.99.3~100.1℃;[α]25 D=-3.67(c1,MeOH);ESI-MS(m/z):394.4[M-H]-,395.2[M]-)
实施例6、C9H19CO-Gly-Gly-His-OH的制备
1)C9H19CO-Gly-Gly-His-OBzl的制备
按照C7H15CO-Gly-Gly-His-OBzl的制备方法由0.344g(2.0mmol)C9H19COOH和0.791g(2.0mmol)HCl·Gly-Gly-His-OBzl制得标题化合物。硅胶柱纯化后得0.164mg(16%)纯标题化合物,为黄色固体。(Mp.166.2~168.2℃;[α]25 D=-0.54(c1,MeOH);ESI-MS(m/z):514.2[M+H]+,536.4[M+Na]+,537.6[M+Na+H]+)
2)C9H19CO-Gly-Gly-His-OH的制备
按照C7H15CO-Gly-Gly-His-OH的制备方法由4.0mg(7.8μmol)C9H19CO-Gly-Gly-His-OBzl的制得3.2mg(99%)标题化合物,为黄色固体。(Mp.108.8~111.4℃;[α]25 D=-3.80(c1,MeOH);ESI-MS(m/z):422.3[M-H]-,423.2[M]-)
实施例7、C11H23CO-Gly-Gly-His-OH的制备
1)C11H23CO-Gly-Gly-His-OBzl的制备
按照C7H15CO-Gly-Gly-His-OBzl的制备方法由0.400g(2.0mmol)C11H23COOH和0.791g(2.0mmol)HCl·Gly-Gly-His-OBzl制得标题化合物。硅胶柱纯化后得0.216g(20%)纯标题化合物,为黄色固体。(Mp.166.6~167.6℃;[α]25 D=-1.73(c1,MeOH);ESI-MS(m/z):542.6[M+H]+,543.6[M+H]+,564.6[M+Na]+,565.6[M+Na+H]+)
2)C11H23CO-Gly-Gly-His-OH的制备
按照C7H15CO-Gly-Gly-His-OH的制备方法由4.2mg(7.8μmol)C11H23CO-Gly-Gly-His-OBzl的制得3.4mg(98%)标题化合物,为黄色固体。(Mp.113.5~115.5℃;[α]25 D=-1.20(c1,MeOH);ESI-MS(m/z):450.6[M-H]-,451.5[M]-)
实施例8、C13H27CO-Gly-Gly-His-OH的制备
1)C13H27CO-Gly-Gly-His-OBzl的制备
按照C7H15CO-Gly-Gly-His-OBzl的制备方法由0.456g(2.0mmol)C13H27COOH和0.791g(2.0mmol)HCl·Gly-Gly-His-OBzl制得标题化合物。硅胶柱纯化后得0.228g(20%)纯标题化合物,为黄色固体。(Mp.159.0~160.1℃;[α]25 D=-0.30(c1,MeOH);ESI-MS(m/z):570.4[M+H]+,571.3[M+2H]+)
2)C13H27CO-Gly-Gly-His-OH的制备
按照C7H15CO-Gly-Gly-His-OH的制备方法由4.4mg(7.8μmol)C13H27CO-Gly-Gly-His-OBzl的制得3.7mg(99%)标题化合物,黄色固体。(Mp.109~111.8℃;[α]25 D=-1.96(c1,MeOH);ESI-MS(m/z):478.5[M-H]-,479.4[M]-)
实施例9、C15H31CO-Gly-Gly-His-OH的制备
1)C15H31CO-Gly-Gly-His-OBzl的制备
按照C7H15CO-Gly-Gly-His-OBzl的制备方法由0.512g(2.0mmol)C15H31COOH和0.791g(2.0mmol)HCl·Gly-Gly-His-OBzl制得标题化合物。硅胶柱纯化后得0.107g(9%)纯标题化合物,为黄色固体。(Mp.142.4~143.7℃;[α]25 D=-4.07(c1,MeOH);ESI-MS(m/z):598.6[M+H]+,599.6[M+2H]+)
2)C15H31CO-Gly-Gly-His-OH的制备
按照C7H15CO-Gly-Gly-His-OH的制备方法由4.6mg(7.8μmol)C15H31CO-Gly-Gly-His-OBzl的制得4.0mg(100%)标题化合物,为黄色固体。(Mp.112.2~111.4℃;[α]25 D=-6.07(c1,MeOH);ESI-MS(m/z):506.6[M-H]-,507.5[M]-)
实施例10、HCl·Gly-Gly-His-OH
1)Boc-Gly-Gly-His-OH的制备
将3.6mg(7.8μmol)Boc-Gly-Gly-His-OBzl置于50ml茄形瓶中,用适量乙醇溶解,加入1mg Pd/C(5%),通H2(0.02Mba),室温搅拌至原料点消失。滤除Pd/C、滤液减压浓缩至干,残留物反复用乙醚研磨,得2.9mg(100%)标题化合物,为无色油状物。
2)HCl·Gly-Gly-His-OH的制备
将2.9mg(7.8μmol)Boc-Gly-Gly-His-OH溶解在5ml 4mol/l氯化氢-乙酸乙酯溶液中,室温搅拌4小时至原料点消失,减压浓缩除去乙酸乙酯,残留物反复加少量乙醚进行减压浓缩以除去氯化氢气。最后加少量乙醚将残留物研磨成2.4mg(99%)标题化合物,白色固体。(Mp.118.6~120.4℃;[α]25 D=-1.48(c1,MeOH);ESI-MS(m/z):268.3[M-H]-,269.3[M]-)
实施例11、Cu-(C7H15CO-Gly-Gly-His-OH)4的制备(a)
将3.1mg(7.8μmol)C7H15CO-Gly-Gly-His-OH溶于碳酸盐缓冲液(PH=9.16)中,加入0.48ml CuSO4储备液(4×10-3mol/L)(MCu2+∶M配体=1∶4),用碳酸盐缓冲液(PH=9.16)定容至10ml,得到淡紫色透明溶液。(λmax=513nm;ε=86.7M-1cm-1)
实施例12、Cu-(C9H19CO-Gly-Gly-His-OH)4的制备(b)
按照Cu-(C7H15CO-Gly-Gly-His-OH)4的制备方法由3.3mg(7.8μmol)C9H19CO-Gly-Gly-His-OH和0.48ml CuSO4储备液(4×10-3mol/L)得到淡紫色透明溶液。(λmax=507nm;ε=116.7M-1cm-1)
实施例13、Cu-(C11H23CO-Gly-Gly-His-OH)4的制备(c)
按照Cu-(C7H15CO-Gly-Gly-His-OH)4的制备方法由3.5mg(7.8μmol)C11H23CO-Gly-Gly-His-OH和0.48ml CuSO4储备液(4×10-3mol/L)得到淡紫色透明溶液。(λmax=510nm;ε=93.3M-1cm-1)
实施例14、Cu-(C13H27CO-Gly-Gly-His-OH)4的制备(d)
按照Cu-(C7H15CO-Gly-Gly-His-OH)4的制备方法由3.7mg(7.8μmol)C13H27CO-Gly-Gly-His-OH和0.48ml CuSO4储备液(4×10-3mol/L)得到淡紫色透明溶液。(λmax=514nm;ε=110.0M-1cm-1)
实施例15、Cu-(C15H31CO-Gly-Gly-His-OH)4的制备(e)
按照Cu-(C7H15CO-Gly-Gly-His-OH)4的制备方法由4.0mg(7.8μmol)C15H31CO-Gly-Gly-His-OH和0.48ml CuSO4储备液(4×10-3mol/L)得到淡紫色透明溶液。(λmax=520nm;ε=106.7M-1cm-1)
实施例16、Cu-(Gly-Gly-His-OH)4的制备(f)
按照Cu-(C7H15CO-Gly-Gly-His-OH)4的制备方法由2.4mg(7.8μmol)HCl·Gly-Gly-His-OH和0.48ml CuSO4储备液(4×10-3mol/L)得到淡紫色透明溶液。(λmax=525nm;ε=113.3M-1cm-1)
实施例17、铜配合物的粒度测定
样品配制:配置铜配合物a~f(3.8×10-4mol/L)
实验方法:样品置于样品池中,用电位粒度仪测定其粒度,重复三次,取均值。
实验结果见表1
表1.铜配合物a~f的粒径数据
Compound Particle size(nm)
a 292.4
b 360.6
c 370.1
d 307.1
e 369.3
f 442.5
铜配合物a~f为带有乳光的均一溶液,粒径分布集中在290nm~450nm之间。
实施例18、铜配合物的Zeta电位测定
样品配制:配置铜配合物a~f(3.8×10-4mol/L)
实验方法:样品置于样品池中,用电位粒度仪在25℃下测定Zeta电位,重复三次,取均值。实验结果见表2
表2.铜配合物a~f的Zeta电位数据
Compound Zeta potential(mV)
a -32.62±3.61
b -36.30±5.82
c -26.09±4.74
d -23.96±3.90
e -36.79±5.33
f -29.65±4.57
铜配合物a~f的Zeta电位在-23mV~-37mV之间,粒子成负电性,具有一定的稳定性。
实施例19、铜配合物清除O2 -.的活性评价
实验方法:黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶体系可以产生超氧阴离子自由基,其与NBT发生反应生成紫色化合物,在560nm处可测得吸光度。在紫外循环恒温水浴(37±0.2)℃的条件下,在样品池中加入500ul 1.5mM的黄嘌呤溶液、500ul 1.5mM的NBT溶液及适量的PBS,之后加入不同浓度的配合物(上述实施例11-16),在样品池中混匀,最后加入4ul 20mg/ml的黄嘌呤氧化酶,使反应物总体积为3ml。混匀,20s后开始测定,在560nm条件下,利用UV动力学模块,记录吸光度随时间的变化值,每30s读取一次吸光度,共读取300s。吸光度A对时间t作图,由公式inhibition%=[(ΔA/Δt)0-(ΔA/Δt)m]/(ΔA/Δt)0×100%得到配合物不同浓度对O2 -.的抑制率。用抑制率对浓度作图,得到半数抑制浓度IC50。实验结果见表3
表3.铜配合物IC50值
Conpound IC50(X±SDμmol/L)
a 0.805±0.018**,##
b 0.776±0.009**,##
c 0.577±0.016##
d 0.635±0.009*,##
e 0.785±0.042**,##
f 4.062±0.309**
*对比于c组有显著意义(P<0.05),**对比于c组有极显著意义(P<0.01),##对比于对照组f有极显著意义(P<0.01).
结果显示:
铜配合物a~f对黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶体系产生超氧阴离子自由基都具有明显的消除作用。通过结果分析可以看出其中a~e比对照组f(实施例16)的IC50小很多,说明a~e消除超氧阴离子自由基的活性均明显高于对照组f,有极显著性差异(P<0.01),说明配体上缀合的不同长链烷基脂肪酸为铜配合物的中心提供了类似酶作用的疏水微环境,使得其消除超氧阴离子自由基的活性大为提高;另外,IC50值的大小为a>b>c<d<e,形成一个类似于波谷似的形式,在c组即Cu-(C11H23CO-Gly-Gly-His-OH)4处出现了IC50值的最小值,c组的IC50值明显低于a,b,e组,有极显著性差异(P<0.01),c组的IC50值低于d组,有显著性差异(P<0.05),这说明以十二烷基脂肪酸修饰Gly-Gly-His肽为配体的铜配合物消除超氧阴离子自由基的活性是最好的,其配体上缀合的十二烷基脂肪酸为铜配合物的中心提供的疏水环境与天然SOD最为相近。
Claims (10)
1.一种铜(II)配位化合物,其分子式为:Cu-(CnH2n+1CO-Gly-Gly-His)4,其中n=7、9、11、13或15。
2.权利要求1所述的铜(II)配合物的制备方法,其特征在于,由具有两亲性的系列配体化合物CnH2n+1CO-Gly-Gly-His-OH与Cu2+进行配合制成,其中,n为7、9、11、13或15。
3.权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述CnH2n+1CO-Gly-Gly-His-OH化合物由CnH2n+1COOH与Gly-Gly-His进行缀合得到,其中n=7、9、11、13或15。
4.权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述CnH2n+1COOH化合物,选自CH3(CH2)6COOH、CH3(CH2)8COOH、CH3(CH2)10COOH、CH3(CH2)12COOH或CH3(CH2)14COOH。
5.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)按照常规技术合成保护基保护的Gly-Gly-His;
(2)将保护基保护的Gly-Gly-His与CnH2n+1COOH偶联,脱去保护基,即得具有两亲性的系列配体化合物;其中n=7、9、11、13或15;
(3)将上述具有两亲性的系列化合物作为配体与Cu2+进行配合。
6.具有两亲性的系列配体化合物,分子式为:CnH2n+1CO-Gly-Gly-His-OH,其中,n为7、9、11、13或15。
7.权利要求1所述的铜(II)配合物在制备具有清除超氧自由基作用的药物中的应用。
8.权利要求1所述的铜(II)配合物所制备成的纳米级粒子具有清除超氧自由基的用途。
9.权利要求6所述的具有两亲性的配体化合物在制备具有清除超氧自由基作用的药物中的应用。
10.权利要求6所述的具有两亲性的配体化合物所制备成的纳米级粒子具有清除超氧自由基的用途。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201010168955A CN101857632A (zh) | 2010-05-12 | 2010-05-12 | 脂肪酰甘氨酰甘氨酰组氨酸-铜(ⅱ)配合物的制备及应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201010168955A CN101857632A (zh) | 2010-05-12 | 2010-05-12 | 脂肪酰甘氨酰甘氨酰组氨酸-铜(ⅱ)配合物的制备及应用 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN101857632A true CN101857632A (zh) | 2010-10-13 |
Family
ID=42943817
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201010168955A Pending CN101857632A (zh) | 2010-05-12 | 2010-05-12 | 脂肪酰甘氨酰甘氨酰组氨酸-铜(ⅱ)配合物的制备及应用 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN101857632A (zh) |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN103272218A (zh) * | 2013-05-21 | 2013-09-04 | 首都医科大学 | 铜(ⅱ)-(脂肪酰甘氨酰天冬氨酰组氨酸)配合物的制备及其sod样活性研究 |
CN106279715A (zh) * | 2016-08-30 | 2017-01-04 | 武汉大学 | 一种铜‑肽多孔配位聚合物及其制备方法和应用 |
CN111570820A (zh) * | 2020-04-21 | 2020-08-25 | 武汉理工大学 | 一种铜纳米团簇的制备方法及其应用 |
CN111662342A (zh) * | 2020-06-08 | 2020-09-15 | 太原理工大学 | 一种单宁-组氨酸金属络合物的制备方法 |
-
2010
- 2010-05-12 CN CN201010168955A patent/CN101857632A/zh active Pending
Non-Patent Citations (8)
Title |
---|
19980831 Photobiology Laboratory等 Copper(II) as an efficient scavenger of singlet molecular oxygen 208-215 1-9 第35卷, 第4期 * |
20010131 谢英等 铜-(Ⅳ-正十二碳酰双甘肽)配合物模拟SOD研究 67-69 1-9 第22卷, 第1期 * |
20011231 Ryoichi Nagane等 The DNA-bound orientation of Cu(II) Xaa-Gly-His metallopeptides 17-23 1-7 第83卷, * |
20041231 刘临等 微量元素铜及铜锌超氧化物歧化酶的模拟化学 57-59,67 6,9 第21卷, 第6期 * |
20091231 丁杨等 甘氨酰甘氨酸-铜(II)-多吡啶配合物合成、表征及SOD 活性 922-926 1-7 , 第10期 * |
RYOICHI NAGANE等: "The DNA-bound orientation of Cu(II) Xaa-Gly-His metallopeptides", <JOURNAL OF INORGANIC BIOCHEMISTRY> * |
丁杨等: "甘氨酰甘氨酸-铜(II)-多吡啶配合物合成、表征及SOD 活性", <化学通报> * |
谢英等: "脉冲辐解法研究Cu(Ser)2和Cu(Gly-Gly)2催化O2歧化反应的动力学", <北京师范大学学报自然科学版> * |
Cited By (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN103272218A (zh) * | 2013-05-21 | 2013-09-04 | 首都医科大学 | 铜(ⅱ)-(脂肪酰甘氨酰天冬氨酰组氨酸)配合物的制备及其sod样活性研究 |
CN103272218B (zh) * | 2013-05-21 | 2014-12-10 | 首都医科大学 | 铜(ⅱ)-(脂肪酰甘氨酰天冬氨酰组氨酸)配合物的制备及其sod样活性研究 |
CN106279715A (zh) * | 2016-08-30 | 2017-01-04 | 武汉大学 | 一种铜‑肽多孔配位聚合物及其制备方法和应用 |
CN111570820A (zh) * | 2020-04-21 | 2020-08-25 | 武汉理工大学 | 一种铜纳米团簇的制备方法及其应用 |
CN111570820B (zh) * | 2020-04-21 | 2022-01-11 | 武汉理工大学 | 一种铜纳米团簇的制备方法及其应用 |
CN111662342A (zh) * | 2020-06-08 | 2020-09-15 | 太原理工大学 | 一种单宁-组氨酸金属络合物的制备方法 |
CN111662342B (zh) * | 2020-06-08 | 2022-09-23 | 太原理工大学 | 一种单宁-组氨酸金属络合物的制备方法 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Deschamps et al. | The saga of copper (II)–l-histidine | |
Pierre et al. | Imidazolate-bridged dicopper (II) and copper-zinc complexes of a macrobicyclic ligand (Cryptand). A possible model for the chemistry of Cu-Zn superoxide dismutase | |
CN108030921B (zh) | 一种白蛋白负载金属卟啉配合物纳米颗粒的制备方法及其应用 | |
JPH02500275A (ja) | 潰瘍の予防のための方法及び組成物 | |
JP2012097097A (ja) | スーパーオキシドジスムターゼ活性を有する置換型ピリジノペンタアザ大環錯体 | |
CN107235945B (zh) | 一种响应谷胱甘肽杀灭肿瘤细胞的光敏感靶向抗肿瘤前药及其制备方法与应用 | |
AU2019268215A1 (en) | Process for preparing intermediate of antibody drug conjugate | |
CN101857632A (zh) | 脂肪酰甘氨酰甘氨酰组氨酸-铜(ⅱ)配合物的制备及应用 | |
JPS6187691A (ja) | 白金配位化合物 | |
CN109293702B (zh) | 一种四价铂多胺配合物、其制备方法及应用 | |
JP2001503376A (ja) | コバルト・シッフ塩基化合物 | |
JP2002515010A (ja) | コバルト・シッフ塩基化合物 | |
CN111718395B (zh) | 一种前药激活化合物、前药体系及其制备方法和应用 | |
Yu et al. | Development of the aza-crown ether metal complexes as artificial hydrolase | |
WO1996018402A9 (en) | Cobalt schiff base compounds | |
JP2013241385A (ja) | 新規ニッケル錯体およびその誘導体、その製造方法、ならびに抗酸化剤への応用 | |
Le Duc et al. | Carbonic anhydrases activation with 3-amino-1H-1, 2, 4-triazole-1-carboxamides: Discovery of subnanomolar isoform II activators | |
WO2012133884A1 (ja) | ボロン酸化合物を含有したブロック共重合体を含む医薬組成物 | |
Kumbhar et al. | Light uncages a copper complex to induce nonapoptotic cell death | |
EP1713723A2 (en) | Fullerene based amino acids | |
Mundwiler et al. | Picolylamine-methylphosphonic acid esters as tridentate ligands for the labeling of alcohols with the fac-[M (CO) 3]+ core (M= 99mTc, Re): synthesis and biodistribution of model compounds and of a 99mTc-labeled cobinamide | |
Kim et al. | Origin of rate-acceleration in ester hydrolysis with metalloprotease mimics | |
US20230087950A1 (en) | Method for synthesizing dopa oligopeptide intermediate and use, composition and preparation thereof | |
CZ271198A3 (cs) | Biokonjugáty manganu nebo komplexy železa makrocyklických ligandů obsahujících dusík, působící jako katalyzátory pro dismutaci superoxidu | |
EP0688313B1 (en) | Ligands and metal complexes thereof |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C12 | Rejection of a patent application after its publication | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20101013 |