CN101851580A - 放射性气体收集细胞培养器 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种放射性气体收集细胞培养器，其包括一培养皿底座，所述培养皿底座包括一小皿和一大皿，所述大皿的边沿上有螺纹结构，所述小皿与所述大皿底面同心并且固定在一起；其还包括一螺口盖子和一无螺口盖子，所述螺口盖子可旋合在所述大皿上，所述无螺口盖子与所述大皿之间过盈配合并可直接拆卸，所述螺口盖子的面板上设置有第一橡胶塞和第二橡胶塞，所述螺口盖子内设有一橡胶密封圈。本发明的培养器结构简单，使用方便，适用范围广，并能有效的收集放射性气体。
Description
技术领域
本发明涉及一种细胞培养器，具体的涉及一种放射性气体收集细胞培养器。
背景技术
如图1所示，现有装置的用途为实现对细胞代谢产生的放射性二氧化碳的收集。
底部液体为细胞培养液(Incubation Mixture)，细胞在瓶底贴壁生长。瓶底中间的柱子，为一支持物，作用是支撑上面的圆柱形的管子，管子内加上二氧化碳的收集液体氢氧化季胺(Hydroxide of Hyamine)，瓶子的侧臂内加入H2SO4。整个体系用橡胶盖密封。
使用方法：
1、预先在培养瓶侧壁中加入0.3ml 6N H2SO4，用橡胶盖密封整个体系；
2、用医用注射器通过橡胶盖，向瓶底加入细胞和细胞培养液5ml，进行培养，其中，细胞培养液中含有放射性的葡萄糖，可以使细胞通过有氧氧化而生成放射性的二氧化碳；
3、培养一段时间后，终止反应。通过注射，向圆柱形管子内加入氢氧化季胺0.5ml，同时将侧臂内的硫酸倒入细胞培养的部位，使硫酸杀死细胞，并充分释放出放射性的二氧化碳；
4、将整个体系放置在Dubnoff震荡器上，在37℃的条件下震荡3小时；
5、将收集有放射性二氧化碳的氢氧化季胺抽出来，加入闪烁瓶中，与闪烁液混匀，测量放射性二氧化碳的放射性计数。
经使用发现，现有装置(Warburg flask)具有以下不足之处：
1、不易培养贴壁细胞，此装置对于培养贴壁细胞，没有优势：(1)不易加入细胞悬液；(2)不易换液；(3)不易消化细胞和传代。
2、体积太大，不易放入培养箱内批量培养，不易满足批量实验的要求。
3、装置结构较为复杂，不易批量生产，从而增加了单件装置的成本。
4、整个装置空间较大，需要较长的震荡时间(3h以上)才能使放射性二氧化碳被充分吸收，并且整个还需要额外的震荡设备，才能实现充分吸收的目的。
5、装置结构较为复杂，不易达到细胞培养所需的无菌要求，灭菌、搬运过程容易损坏装置部件。
6、装置体积较大，作为放射性实验，一次性使用，相应地增加了放射性废物的体积。
发明内容
为克服现有技术中的不足，本发明的目的在于提供一种放射性气体细胞培养器，该装置结构简单，使用方便，适用范围广，并能有效的收集放射性气体。
为解决上述技术问题，达到上述技术目的，本发明采用如下技术方案：
一种放射性气体收集细胞培养器，其包括一培养皿底座，所述培养皿底座包括一小皿和一大皿，所述大皿的边沿上有螺纹结构，所述小皿与所述大皿底面同心并且固定在一起；其还包括一螺口盖子和一无螺口盖子，所述螺口盖子可旋合在所述大皿上，所述无螺口盖子与所述大皿之间过盈配合并可直接拆卸。
进一步的，所述螺口盖子的面板上设置有第一橡胶塞和第二橡胶塞。
进一步的，所述小皿的外直径小于所述大皿的内直径，所述小皿的高度小于所述大皿的高度。
优选的，所述小皿的外直径为30mm，内直径为27mm，高度为10mm；所述大皿的外直径为56mm，内直径为53mm，高度为16-20mm。
优选的，所述螺口盖子的高度为11-15mm。
优选的，所述螺口盖子旋合在所述大皿上时，所述第一橡胶塞的位置处于所述小皿的半径范围内，所述第二橡胶塞的位置处于在所述小皿的半径范围外。
优选的，所述螺口盖子内设有一橡胶密封圈，保证所述螺口盖子与所述大皿之间旋合后的密封效果。
与现有技术相比，本发明的放射性气体收集细胞培养器具有如下有点：
1、本装置较现有装置更适宜贴壁细胞的培养，从而大大增加了该装置的适用范围。并且该装置操作较现有装置简便，与操作普通细胞培养皿相似。
2、本装置的体积比现有装置明显小，与普通培养皿(60×15mm)相似，从而可以节约培养空间，比现有装置更适合批量培养，更能满足批量实验的要求。
3、可量产化：各部件均可以制作相应的模具，通过模具实现批量生产，从而降低单件部件的成本。
4、气体收集过程无需长时间震荡：由于通过螺口盖子密封后，整个皿的容积较小，并且收集液体与放射性气体有较大的接触面积，所以有利于气体的吸收，减少了震荡所需时间，只需要适当地震荡即可使气体充分被吸收。
5、细胞培养的灭菌简单：由于整个装置类似与现有的一次性塑料细胞培养皿，所以批量灭菌较现有装置简便。
6、放射性废物管理方便：由于装置形状结构较为规则，且体积较小，更易于批量运输、储存和管理，而且由于体积更小，减少了放射性废物的生成量。
7、由于尺寸设计可以比较灵活，所以，可以利用现成规格的60mm×15mm细胞培养皿的盖子，进行细胞培养，从而节省了成本。
附图说明
图1为现有的放射性气体收集细胞培养装置。
图2为本发明的放射性气体收集细胞培养器的小皿大皿组合结构示意图。
图3为本发明的放射性气体收集细胞培养器的螺口盖子的结构示意图。
图4为本发明的放射性气体收集细胞培养器的无螺口盖子的结构示意图。
图5为本发明的放射性气体收集细胞培养器的一装配示意图。
图6为本发明的放射性气体收集细胞培养器的另一装配示意图。
图中标号说明：1.小皿，2.大皿，3.螺口盖子，4.无螺口盖子，301.第一橡胶塞，302.第二橡胶塞。
具体实施方式
下面结合附图，对本发明的优选实施例进行详细的介绍。
请参见图2、图3、图4、图5所示，一种放射性气体收集细胞培养器，其一培养皿底座，所述培养皿底座包括一小皿1和一大皿2，所述大皿2的边沿上有螺纹结构，所述小皿1与所述大皿2底面同心并且固定在一起；其还包括一螺口盖子3和一无螺口盖子4，所述螺口盖子3可旋合在所述大皿2上，所述无螺口盖子4与所述大皿2之间过盈配合并可直接拆卸。
进一步的，所述螺口盖子3的面板上设置有第一橡胶塞301和第二橡胶塞302。
进一步的，所述小皿1的外直径小于所述大皿2的内直径，所述小皿1的高度小于所述大皿2的高度。
优选的，所述小皿1的外直径为30mm，内直径为27mm，高度为10mm；所述大皿2的外直径为56mm，内直径为53mm，高度为16-20mm。
优选的，所述螺口盖子3的高度为11-15mm。
优选的，所述螺口盖子3旋合在所述大皿2上时，所述第一橡胶塞301的位置处于所述小皿1的半径范围内，所述第二橡胶塞302的位置处于在所述小皿1的半径范围外。
优选的，所述螺口盖子3内设有一橡胶密封圈(图中为示意)，保证所述螺口盖子3与所述大皿2之间旋合后的密封效果。
利用本发明的放射性气体收集细胞培养皿的使用步骤如下：
首先将所有部件均经过辐射灭菌，分别包装好。
1、在细胞培养专用的超净工作台中，取出包装中的培养皿底座，在小皿1的范围内，加入培养基和细胞悬液约1ml，盖上无螺口盖子4，在细胞培养箱中培养24h(37℃，5％CO2)使细胞贴壁。
2、24h后，取出培养皿底座，在大皿2与小皿1之间的范围加入放射性二氧化碳收集液约3～4ml，用移液管吸走小皿1内原有培养基，取螺口盖子3，将之与大皿2旋紧。
3、使用医用一次性注射器，通过螺口盖子3的内侧的第一橡胶塞301向培养皿底座的小皿1内加入含有放射性葡萄糖的培养基(注意加的过程中尽量使液体贴小皿侧壁下流，避免将细胞冲走)。将培养皿底座放入培养箱中培养1h左右。(此步在通风橱内进行)
4、终止反应，将培养皿底座从培养箱中取出，用医用一次性注射器，通过螺口盖子3的内侧的第一橡胶塞301向培养皿底座的小皿1中加入0.1ml左右4N H2SO4，适当摇晃培养皿使放射性二氧化碳气体被吸收液充分吸收(注意摇晃过程中应保持培养皿水平，防止大皿2、小皿1内的液体互混)。
5、使用医用一次性注射器，通过螺口盖子3的外侧的第二橡胶塞302将小皿1外侧的收集有放射性二氧化碳的液体抽出，加入事先加有闪烁液的闪烁瓶，旋紧闪烁瓶盖，将瓶内液体混匀，避光一段时间后，放入液体闪烁计数器内进行放射性计数测量。(此步在通风橱内进行)
以上对本发明实施例所提供的放射性气体收集细胞培养皿及其使用方法进行了详细介绍，对于本领域的一般技术人员，依据本发明实施例的思想，在具体实施方式及应用范围上均会有改变之处，因此凡依本发明设计思想所做的任何改变都在本发明的保护范围之内。
Claims (6)
1.一种放射性气体收集细胞培养器，包括一培养皿底座，其特征在于：所述培养皿底座包括一小皿(1)和一大皿(2)，所述大皿(2)的边沿上有螺纹结构，所述小皿(1)与所述大皿(2)底面同心并且固定在一起；其还包括一螺口盖子(3)和一无螺口盖子(4)，所述螺口盖子(3)可旋合在所述大皿(2)上，所述无螺口盖子(4)与所述大皿(1)之间过盈配合并可直接拆卸。
2.根据权利要求1所述的放射性气体收集细胞培养器，其特征在于：所述螺口盖子(3)的面板上设置有第一橡胶塞(301)和第二橡胶塞(302)。
3.根据权利要求1所述的放射性气体收集细胞培养器，其特征在于：所述小皿(1)的外直径小于所述大皿(2)的内直径，所述小皿(1)的高度小于所述大皿(2)的高度。
4.根据权利要求1或3所述的放射性气体收集细胞培养器，其特征在于：所述小皿(1)的外直径为30mm，内直径为27mm，高度为10mm；所述大皿(2)的外直径为56mm，内直径为53mm，高度至少为16mm。
5.根据权利要求2所述的放射性气体收集细胞培养器，其特征在于：所述螺口盖子(3)旋合在所述大皿(2)上时，所述第一橡胶塞(301)的位置处于所述小皿(1)的半径范围内，所述第二橡胶塞(302)的位置处于在所述小皿(1)的半径范围外。
6.根据权利要求1所述的放射性气体收集细胞培养器，其特征在于：所述螺口盖子(3)内设有一橡胶密封圈。
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