CN110835602A - 一种可持续灌流的三维细胞培养瓶 - Google Patents

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戴晓宇
周毅
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Abstract

本发明涉及实验室用细胞培养容器技术领域,特别涉及一种可持续灌流的三维细胞培养瓶,包括培养瓶本体,所述的培养瓶本体内底部设有逐次降低的连续台阶,每一级台阶的台阶面一侧均设有侧壁,所述的侧壁的一端开设槽口,所述的台阶面上均布凸起,所述的连续台阶最低处的台阶面一端开设蓄液池,所述的蓄液池所在的台阶面连接支撑板,所述的支撑板的另一端延伸至瓶颈口处,所述的培养瓶本体侧壁上设有上灌入口与下流出口。本发明的有益效果是:创造了大面积的细胞三维粘附培养空间,增加了单瓶细胞培养数量,从而间接降低了细胞培养成本,并可以实现细胞培养液的可持续稳定灌流,保证了细胞生存环境的持续稳定性,适宜于各类贴壁细胞的生长和扩增。

Description

一种可持续灌流的三维细胞培养瓶
技术领域
本发明涉及实验室用细胞培养容器技术领域,特别涉及一种可持续灌流的三维细胞培养瓶。
背景技术
细胞培养可用于基础研究、药物研发和细胞治疗等多个领域。然而多数细胞培养瓶所营造的培养环境为二维培养环境,无法准确模拟细胞在体内的三维环境,如需用这些二维培养瓶强行进行三维培养,需要加入巢状载体、球形载体或脱细胞组织基质,材料准备和材料消毒费力又昂贵,细胞又不易洗脱收获,强行洗脱会造成大量细胞碎片。而且细胞在细胞培养瓶内培养,需1-3天换液一次,细胞代谢产物和葡萄糖浓度等忽高忽低,严重影响细胞状态。因此有必要寻找更高效、更实用的的用于细胞三维培养的实验室容器。
发明内容
为了解决现有技术的问题,本发明提供了一种可降低了细胞培养成本、可维持细胞生长环境的稳定可持续灌流的三维细胞培养瓶。
本发明所述技术方案如下:
一种可持续灌流的三维细胞培养瓶,包括培养瓶本体,所述的培养瓶本体内底部设有逐次降低的连续台阶,每一级台阶的台阶面一侧均设有侧壁,所述的侧壁的一端开设槽口,所述的台阶面上均布凸起,所述的连续台阶最低处的台阶面一端开设蓄液池,所述的蓄液池所在的台阶面连接支撑板,所述的支撑板的另一端延伸至瓶颈口处,所述的瓶颈口的中心线延长线与底面的夹角成锐角,所述的培养瓶本体侧壁上设有上灌入口与下流出口,所述的上灌入口和下流出口设在培养瓶本体的同一侧壁上,所述的上灌入口轴线与连续台阶的最高台阶面中线重合且能使液体从上灌入口顺利流入,所述的下流出口轴线与连续台阶最低台阶面中线重合且能使液体从下流出口顺利流出。
相邻两个所述侧壁上的槽口对向设置。
所述的连续台阶的顶端设在培养瓶本体内壁上,所述的连续台阶的底端下方通过立板支撑。
所述的上灌入口与下流出口上均设有塞盖。
所述的瓶颈口的顶端设有换气盖。
所述连续台阶的上一台阶面侧壁槽口的最低点高于下一台阶面,可使每一级台阶可以保持一定的液面高度,同时使液体可以顺利沿台阶从最高级顺次充分流经各级台阶至最低级流出口处。
所述的凸起的长宽高均为0.1mm-5mm,优选长宽高均为1mm,每个凸起间距0.1mm-5mm,优选间距为1mm。
所述的培养瓶本体的顶面上设有上凸的边沿,使底面可以刚好嵌入,从而可以使多个培养瓶摞列更好收纳。
所述的上灌入口、下流出口与塞盖之间的连接方式包括但不限于6%(鲁尔)圆锥接头(标准参见《GB/T 1962.1-2015》和《GB/T 1962.2-2015》)。
所述的培养瓶本体经过注塑成型和超声波焊接等工艺后,使用等离子技术进行表面修饰,使之能够更好的携带正电荷,并形成疏水性表面,使之适合于细胞贴壁,包装于密闭塑料袋后,可经γ射线等进行辐照消毒后使用。
本发明提供的技术方案带来的有益效果是:
通过在培养容器底面的连续台阶的台阶面上均匀设有凸起,增加了总培养面积,增加了可培养细胞的总数,从而降低了细胞培养成本;凸起的设置,细胞生在在凹凸不平的底面,构成了天然培养环境,由于这些凸起的三维环境本身就是细胞培养瓶的一部分,所以适宜于在超净工作台内的消化洗脱等作业,从而能更好的模拟细胞体内生存环境;通过逐次降低的连续台阶与两个鲁尔接口,配合蠕动泵等动力源,可实现细胞培养稳定的pH值、血糖浓度和营养浓度,细胞生长状态更好。而且由于我们采用了逐次降低的连续台阶,可以实现细胞培养液的可持续稳定灌流,保证了细胞生存环境的持续稳定性,适宜于各类贴壁细胞的生长和扩增。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例中的技术方案,下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为本发明去掉上顶面时的立体图的结构示意图。
图2为本发明去掉上顶面时的俯视图的结构示意图。
图3为本发明图1中A部放大结构示意图。
图4为本发明主视图的结构示意图;
图5为本发明沿A-A的剖视图;
图6为本发明的右视图的结构示意图;
图7为本发明的沿B-B的剖视图;
图8为本发明立体图的结构示意图;
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚,下面将结合附图对本发明实施方式作进一步地详细描述。
如图1-8所示,一种可持续灌流的三维细胞培养瓶,包括培养瓶本体1,所述的培养瓶本体1内底部设有逐次降低的连续台阶2,每一级台阶的台阶面13一侧均设有侧壁15,所述的侧壁15的一端开设槽口12,所述的台阶面13上均布凸起14,所述的连续台阶2最低处的台阶面13一端开设蓄液池11,便于实时检测以及引出培养瓶本体1内液体,所述的蓄液池11所在的台阶面13连接支撑板4,所述的支撑板4的另一端延伸至瓶颈口3处,所述的瓶颈口3的中心线延长线与底面的夹角成锐角,所述的培养瓶本体1侧壁上设有上灌入口21与下流出口22,所述的上灌入口21和下流出口22设在培养瓶本体1的同一侧壁上,所述的上灌入口21轴线与连续台阶2的最高台阶面中线重合且能使液体从上灌入口21顺利流入,所述的下流出口22轴线与连续台阶2最低台阶面中线重合且能使液体从下流出口22顺利流出。
相邻两个所述侧壁15上的槽口12对向设置。
所述的连续台阶2的顶端设在培养瓶本体1内壁上,所述的连续台阶2的底端下方通过立板5支撑。
所述的上灌入口21与下流出口22上均设有塞盖6。
所述的瓶颈口3的顶端设有换气盖7。
所述连续台阶2的上一台阶面侧壁槽口12的最低点高于下一台阶面13,可使每一级台阶可以保持一定的液面高度,同时使液体可以顺利沿台阶从最高级顺次充分流经各级台阶至最低级流出口处。
所述的凸起14的长宽高均为0.1mm-5mm,优选长宽高均为1mm,每个凸起间距0.1mm-5mm,优选间距为1mm。
所述的培养瓶本体1的顶面上设有上凸的边沿8,使底面可以刚好嵌入,从而可以使多个培养瓶摞列更好收纳。
所述的上灌入口21、下流出口22与塞盖6之间的连接方式包括但不限于6%(鲁尔)圆锥接头(标准参见《GB/T 1962.1-2015》和《GB/T 1962.2-2015》),可以通过外接鲁尔接口与软管相连,并保持密封无菌,软管可通过蠕动泵或注射泵,持续的输注的新鲜培养进入培养体系,给培养的细胞提供持续稳定的营养与微环境。
所述的培养瓶本体1在经过注塑成型和超声波焊接等工艺后,可使用等离子技术进行表面修饰,使之能够更好的携带正电荷,并形成疏水性表面,使之适合于细胞贴壁,包装于密闭塑料袋后,可经γ射线等进行辐照消毒后使用。
以上所述仅为本发明的较佳实施例,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种可持续灌流的三维细胞培养瓶,包括培养瓶本体,其特征在于,所述的培养瓶本体内底部设有逐次降低的连续台阶,每一级台阶的台阶面一侧均设有侧壁,所述的侧壁的一端开设槽口,所述的台阶面上均布凸起,所述的连续台阶最低处的台阶面一端开设蓄液池,所述的蓄液池所在的台阶面连接支撑板,所述的支撑板的另一端延伸至瓶颈口处,所述的瓶颈口的中心线延长线与底面的夹角成锐角,所述的培养瓶本体侧壁上设有上灌入口与下流出口,所述的上灌入口和下流出口设在培养瓶本体的同一侧壁上,所述的上灌入口轴线与连续台阶的最高台阶面中线重合且能使液体从上灌入口顺利流入,所述的下流出口轴线与连续台阶最低台阶面中线重合且能使液体从下流出口顺利流出。
2.根据权利要求1所述的一种可持续灌流的三维细胞培养瓶,其特征在于,相邻两个所述侧壁上的槽口对向设置。
3.根据权利要求1所述的一种可持续灌流的三维细胞培养瓶,其特征在于,所述的连续台阶的顶端设在培养瓶本体内壁上,所述的连续台阶的底端下方通过立板支撑。
4.根据权利要求1所述的一种可持续灌流的三维细胞培养瓶,其特征在于,所述的上灌入口与下流出口上均设有塞盖。
5.根据权利要求1所述的一种可持续灌流的三维细胞培养瓶,其特征在于,所述的瓶颈口的顶端设有换气盖。
6.根据权利要求1所述的一种可持续灌流的三维细胞培养瓶,其特征在于,所述连续台阶的上一台阶面侧壁槽口的最低点高于下一台阶面。
7.根据权利要求1所述的一种可持续灌流的三维细胞培养瓶,其特征在于,所述的凸起的长宽高均为0.1mm-5mm,优选长宽高均为1mm,每个凸起间距0.1mm-5mm,优选间距为1mm。
8.根据权利要求1所述的一种可持续灌流的三维细胞培养瓶,其特征在于,所述的培养瓶本体的顶面上设有上凸的边沿。
9.根据权利要求1所述的一种可持续灌流的三维细胞培养瓶,其特征在于,所述的上灌入口、下流出口与塞盖之间的连接方式包括但不限于6%(鲁尔)圆锥接头,通过外接鲁尔接口与软管相连,并保持密封无菌,软管可通过蠕动泵或注射泵,持续的输注的新鲜培养进入培养体系,给培养的细胞提供持续稳定的营养与微环境。
10.根据权利要求1所述的一种可持续灌流的三维细胞培养瓶,其特征在于,所述的培养瓶本体在经过注塑成型后,使用等离子技术进行表面修饰,使之能够更好的携带正电荷,并形成疏水性表面,使之适合于细胞贴壁,包装于密闭塑料袋后,可经γ射线等进行辐照消毒后使用。
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