CN101849964A - 一种卤虫卵微粉的制备方法及其在保健品中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种卤虫卵微粉的制备方法及其在保健品中的应用，属于海洋生物技术领域，将刚采捕的新鲜卤虫卵清洗精选后，进行冷冻干燥，干燥后低温超细粉碎，粉碎后的粒度为120-500目，再进行紫外线消毒，制成卤虫卵微粉。这种卤虫卵微粉，可充分利用卤虫卵中的有效成分在人体保健上的作用，动物体内、外实验表明，卤虫卵微粉抗疲劳、提高免疫、抗氧化损伤、增强机体消除自由基能力及抑制过氧化生成的作用突出，可将卤虫卵进一步开发为提高免疫能力、抗肝损伤和抗辐射的系列保健品及医药产品。

Description

一种卤虫卵微粉的制备方法及其在保健品中的应用

技术领域

本发明涉及一种卤虫卵制成品的制备方法及其在保健品中的应用，属于海洋生物技术领域。

背景技术

海洋生物卤虫(Artemia)，也称盐水卤虫、咸水丰年虫，中国民间也称盐虫子或丰年虾，分类上属于节肢动物门，甲壳纲，鳃足亚纲，无甲目，卤虫科，卤虫属。卤虫是繁生于高盐度水域中的一种小型甲壳动物，卤虫卵是卤虫成虫产下的休眠卵。我国沿海盐田面积达30余万公顷，内陆大、中型盐湖有近千个，蕴藏着丰富的卤虫资源，是世界上三大卤虫卵资源国之一。

世界上对卤虫的研究始于1775年，已有200多年的历史。直到20世纪30年代美国和挪威的科学家发现卤虫无节幼体是仔幼鱼的优质饵料，此后卤虫才被应用于水产养殖上。进入20世纪60年代后，包括我国在内的多个国家相继对卤虫进行了增殖、养殖试验，并获得迅速发展。而近年来的相关研究表明，卤虫不仅是一种古老的生物，而且卤虫卵能够在高盐度、高寒、高辐射的恶劣条件下长期保持生命力，原因在于，卤虫卵具有特殊的体内渗透压调节机制和特殊的蛋白质组分，以及多种活性酶，有较强的抗氧化、抗分化作用，为其生命的存在提供了保障。因此，对卤虫、卤虫卵化学成分的研究以及在保健食品和临床药物开发前景的应用研究都开始被逐渐重视。

据文献报道，成体卤虫富含有不饱和脂肪酸、氨基酸、核黄素、血球蛋白和β-胡萝卜素等营养物质，同时含有一定的Ca、Fe、Mg、P、K、Na、Zn等人体必需的微量元素。这些元素可参与各种酶的组成，促进机体的新陈代谢，增强机体的免疫能力，防止疾病的发生。据测定卤虫卵中含有：蛋白质58.91％，脂肪5.63％，灰分8.92％；17种氨基酸总量为干物质的57.73％，必需氨基酸含量占氨基酸总量的36.60％；卤虫卵中含有多种不饱和脂肪酸，其中EPA占8.54％；卤虫卵壳含有多种无机元素，其中钙为13865.23μg/g，铁为9928.17μg/g。因此卤虫卵的营养成分极高。

应用方面，卤虫作为一种蛋白源也在西方国家受到高度重视，并形成一项新的产业-蛋白源产业。美国、加拿大、比利时等国近几年已投入大量资金，开发出系列饵料、鱼虾用卤虫强化系列饲料。在我国的部分沿海地区也有长期食用卤虫的习惯。然而，无论是从卤虫的研究报道或对卤虫的实际应用，其结果均显示，国内及国际都缺乏对卤虫作为保健食品或临床药物的基础和应用的系统研究，使得卤虫这一绿色天然资源并没有得到合理和广泛的应用。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，提供一种卤虫卵微粉的制备方法，以充分利用卤虫卵的保健作用。

本发明所要解决的另一技术问题是，卤虫卵微粉在保健品的应用。

本发明是这样实现的，一种卤虫卵微粉的制备方法，将刚采捕的新鲜卤虫卵清洗精选后，进行冷冻干燥，干燥后低温超细粉碎，粉碎后的粒度为120-500目，再进行紫外线消毒，制成卤虫卵微粉。

卤虫卵微粉在保健品中的应用。

卤虫卵微粉在具有抗疲劳作用的保健品中的应用。

卤虫卵微粉在具有提高免疫作用的保健品中的应用。

卤虫卵微粉在具有抗氧化损伤作用的保健品中的应用。

卤虫卵微粉在具有增强机体消除自由基能力的保健品中的应用。

卤虫卵微粉在具有抑制过氧化生成作用的保健品中的应用。

这种卤虫卵微粉，可充分利用卤虫卵中的有效成分在人体保健上的作用，动物体内、外实验表明，卤虫卵微粉抗疲劳、提高免疫、抗氧化损伤、增强机体消除自由基能力及抑制过氧化生成的作用突出，可将卤虫卵进一步开发为提高免疫能力、抗肝损伤和抗辐射的系列保健品及医药产品。

具体实施方式

下面进一步说明本发明。

将刚采捕的新鲜卤虫卵清洗精选，除去其中的泥土、卵壳等杂质。冷冻干燥，在冷冻干燥机内进行。低温超细粉碎，在低温超细粉碎机内进行。冷冻干燥、低温超细粉碎、紫外线消毒，均采用常规工艺。

本发明中，通过动物药理试验确定卤虫卵微粉的功效。其中，通过建立小鼠负重游泳模型，观察小鼠力竭性游泳时间，确定卤虫卵微粉的抗疲劳功效；通过对正常小鼠、酒精性肝损伤小鼠模型及辐射性损伤小鼠模型的免疫器官胸腺、脾脏重量的影响，确定卤虫卵微粉的提高免疫作用的功效；通过建立小鼠酒精性肝损伤模型及小鼠辐射性损伤模型，分别测定的MDA值、GSH值及SOD值，确定卤虫卵微粉的抑制过氧化生成、抗氧化损伤及增强机体消除自由基能力的功效作用。

以下是实验情况：

所用实验动物为昆明种小鼠，体重为(21±3.5)g，购于沈阳药科大学动物中心。动物的饲养和灌胃均在窒温(22±2)℃、相对湿度为(65±5)％的实验室内饲养，光照时间同自然变化，自由饮食，食料为沈阳药科大学实验动物室提供机制料块，饮自来水。实验小鼠均经一周适应期后进入试验。试验用MDA、GSH及SOD试剂盒均由南京建成生物工程研究所提供。

一、卤虫卵微粉对小鼠游泳时间的影响

取40只18-22g雄性昆明种小鼠，分别称重、编号，按体重随机均分为4组，每组各10只。给药组I，取卤虫卵微粉混悬液按1.63g/kg剂量灌胃给药；给药组II，取卤虫卵微粉混悬液按3.25g/kg剂量灌胃给药；阳性对照组，取螺旋藻混悬液按1.76g/kg剂量灌胃给药；空白组，取相等体积的生理盐水灌胃给药；以上4组均连续给药7日，每日1次，末次给药后24小时进行实验。每只小鼠每次灌胃给药的各混悬液、生理盐水的体积均为0.4ml。上述混悬液分别由卤虫卵微粉与水、螺旋藻与水混合制成的，剂量为每kg小鼠体重的卤虫卵微粉或螺旋藻的用量，如卤虫卵微粉混悬液按3.25g/kg剂量，是指小鼠每kg体重，给3.25g的卤虫卵微粉。取相等体积的生理盐水，是指生理盐水的体积与各混悬液的体积相等，均为每只小鼠0.4ml/次。下同。

将玻璃缸内加水，水深20cm，水温保持在20±0.5℃。在小鼠尾部同一位置束一个1/10小鼠体重的相同的重物，将小鼠分别放入玻璃缸内游泳，并计时。当小鼠头部沉入水中30s不能浮出水面者即为体力耗竭，停止计时，记录小鼠游泳时间。所得数据与对照组比较并进行统计学处理，测其显著性，结果见表1。

表1卤虫卵微粉对小鼠游泳时间的影响(mean±s)

*p＜0.05vs空白组

由表1可见，卤虫卵微粉按3.25g/kg剂量灌胃给药，可延长小鼠的力竭性游泳时间，与空白组比较差异显著，说明卤虫卵微粉具有抗疲劳作用功效，卤虫卵微粉能够在具有抗疲劳作用的保健品中应用。

二、卤虫卵微粉对小鼠免疫器官的影响

取40只体重18-22g昆明小鼠，雌雄各半，分别称重、编号，按体重性别随机均分为4组，每组各10只。给药组I，取卤虫卵微粉混悬液按1.63g/kg剂量灌胃给药；给药组II，取卤虫卵微粉混悬液按3.25g/kg剂量灌胃给药；阳性对照组，取螺旋藻混悬液按1.76g/kg剂量灌胃给药；空白组，取相等体积的生理盐水灌胃给药；以上4组均连续给药7日，每日1次，于末次给药24h后，称体重，眼球放血处死，摘出胸腺及脾脏称重，以公式计算胸腺或脾脏指数：脾(胸腺)指数＝脾(胸腺)(mg)/体重(10g)。所得数据与空白组比较并进行统计学处理，测其显著性，结果见表2。

表2卤虫卵微粉对小鼠免疫器官的影响(mean±s)

*p＜0.05vs空白组

由表2可见，卤虫卵微粉按3.25g/kg剂量灌胃给药，可使小鼠的胸腺、脾免疫器官重量增加，与空白组比较差异显著，表明卤虫卵微粉在一定剂量范围内具有提高免疫作用的功效，卤虫卵微粉能够在具有抗氧化损伤作用的保健品中应用。

三、卤虫卵微粉对肝损伤小鼠的保护作用

取60只体重18--22g昆明小鼠，雌雄各半，分别称重、编号，按体重性别随机均分为4组，每组各10只。给药组I，取卤虫卵微粉混悬液按1.63g/kg剂量灌胃给药；给药组II，取卤虫卵微粉混悬液按3.25g/kg剂量灌胃给药；阳性对照组，取鱼油按0.52g/kg剂量灌胃给药；空白组，取相等体积的生理盐水灌胃给药；以上4组均每日1次连续给药30日，禁食12h后根据筛选的最大耐受量12ml/kg为造模剂量灌胃给予50％乙醇，继续禁食12h后，分别进行下列试验：①眼眶取血，按脂质过氧化终产物丙二醛(MDA)试剂盒的说明测定MDA值；②将小鼠处死，取肝制成10％匀浆，按抗氧化剂谷胱甘肽(GSH)试剂盒的说明测定GSH值；③取处死后小鼠的脾脏，称重，按公式计算脾脏指数：脾指数＝脾重(mg)/体重(g)。所得数据与模型组比较并进行统计学处理，测其显著性，结果见表3。

表3卤虫卵微粉对肝损伤小鼠的保护作用(mean±s)

*p＜0.05vs空白组

据文献报道，脂质过氧化反应在酒精性肝损伤的发病机制中起重要作用。大量酒精的一次性投予诱导肝细胞产生强烈的氧应急，使得具有抗氧化作用的谷胱甘肽(GSH)含量下降，脂质过氧化终产物MDA含量上升，从而导致肝细胞流动性降低，易引起肝组织代谢能力的下降和高脂血症。

由表3可见，卤虫卵微粉按1.63g/kg、3.25g/kg剂量，可使小鼠的过氧化终产物MDA值下降，谷胱甘肽(GSH)值上升，二者与模型组比较均具有显著性差异；同时，卤虫卵微粉按3.25g/kg剂量灌胃给药时，试验小鼠脾指数较模型组差异显著，表明卤虫卵微粉在一定剂量范围内具有保护肝损伤小鼠免疫器官的能力。本试验说明，卤虫卵微粉对机体肝损伤有保护及治疗的功效，具有抑制过氧化生成、抗氧化损伤及增强机体消除自由基能力的功效作用，能够分别在具有抗氧化损伤作用的保健品、具有增强机体消除自由基能力的保健品和具有抑制过氧化生成作用的保健品中应用。

四、卤虫卵微粉对辐射小鼠的保护作用

取80只体重18-22g昆明小鼠，雌雄各半，分别称重、编号，按体重性别随机均分为4组，每组各10只。给药组I，取卤虫卵微粉混悬液按1.63g/kg剂量灌胃给药；给药组II，取卤虫卵微粉混悬液按3.25g/kg剂量灌胃给药；阳性对照组，取螺旋藻混悬液按1.76g/kg剂量灌胃给药；空白组，取相等体积的生理盐水灌胃给药；以上4组均每日1次连续给药30日，根据筛选的最大耐受量2Gy为造模辐射量，用X射线进行全身照射1次。照射3天后进行眼眶取血，按超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒的说明测定SOD值；照射10天后称重，颈椎脱臼处死，测定小鼠脾重量，按公式计算脾脏指数：脾指数＝脾重(mg)/体重(g)。所得数据与模型组比较并进行统计学处理，测其显著性，结果见表4。

表4卤虫卵微粉对辐射小鼠的保护作用(mean±s)

*p＜0.05vs模型组

据文献报道，辐射可产生免疫系统的毒性，中等以上剂量的全身照射可诱发和加重急性放射损伤引起的感染，辐射损伤还将诱导脂质过氧化物生成，并使其在发展过程中产生的内源性活性氧通过间接作用产生自由基，干扰机体的正常功能。本试验所选择的超氧化物歧化酶(SOD)和免疫器官重量两个活性标志，分别代表机体的抗氧化能力和免疫学功能。

由表4可见，卤虫卵微粉按3.25g/kg剂量灌胃给药，可使小鼠的超氧化物歧化酶(SOD)值上升，与模型组比较均具有显著性差异；同时，卤虫卵微粉按3.25g/kg剂量灌胃给药，试验小鼠脾指数较模型组差异显著，表明卤虫卵微粉在一定剂量范围内具有保护受辐射小鼠免疫器官的能力。本试验说明，卤虫卵微粉对辐射损伤后机体具有保护及治疗的功效，具有抑制过氧化生成、抗氧化损伤及增强机体消除自由基能力的功效作用，能够分别在具有抗氧化损伤作用的保健品、具有增强机体消除自由基能力的保健品和具有抑制过氧化生成作用的保健品中应用。

一种含有卤虫卵微粉的片剂的制备方法：

取卤虫卵微粉、糖粉、硬脂酸镁及50％乙醇，按下述过程完成制备：将卤虫卵微粉、糖粉粉碎成细粉，过筛，混匀，以50％乙醇制成湿颗粒，干燥，整粒，加入硬脂酸镁，混匀，压制成片，包薄膜衣，即得。

一种含有卤虫卵微粉的胶囊剂的制备方法：

取卤虫卵微粉、淀粉及50％乙醇，按下述过程完成制备：将卤虫卵微粉，加淀粉，混匀，以50％乙醇制成湿颗粒，干燥，整粒，填入空胶囊中，即得。

Claims (7)

1.一种卤虫卵微粉的制备方法，其特征在于，将刚采捕的新鲜卤虫卵清洗精选后，进行冷冻干燥，干燥后低温超细粉碎，粉碎后的粒度为120-500目，再进行紫外线消毒，制成卤虫卵微粉。

2.如权利要求1所述的卤虫卵微粉在保健品中的应用。

3.如权利要求1所述的卤虫卵微粉在具有抗疲劳作用的保健品中的应用。

4.如权利要求1所述的卤虫卵微粉在具有提高免疫作用的保健品中的应用。

5.如权利要求1所述的卤虫卵微粉在具有抗氧化损伤作用的保健品中的应用。

6.如权利要求1所述的卤虫卵微粉在具有增强机体消除自由基能力的保健品中的应用。

7.如权利要求1所述的卤虫卵微粉在具有抑制过氧化生成作用的保健品中的应用。