CN101824065B - 人参皂苷次级苷Rh1的脂肪酸单酯类化合物及制备方法 - Google Patents
人参皂苷次级苷Rh1的脂肪酸单酯类化合物及制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101824065B CN101824065B CN 200910217947 CN200910217947A CN101824065B CN 101824065 B CN101824065 B CN 101824065B CN 200910217947 CN200910217947 CN 200910217947 CN 200910217947 A CN200910217947 A CN 200910217947A CN 101824065 B CN101824065 B CN 101824065B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- group
- compound
- fatty
- ginsenoside
- preparation
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Images
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明公开一种人参皂苷次级苷Rh1的脂肪酸单酯类化合物FRh1。具有以下结构式，其中，R为C8-C18的脂肪酸酰基。同时提供了人参皂苷Rh1与脂肪酸酰氯合成方法，以该化合物为活性成分的药物组合物，以及本发明化合物和药物组合物在制备抗癌药物中的应用。R为C8-C18的脂肪酰基。
Description
1技术领域
本发明涉及人参皂苷次级苷Rh1的脂肪酸单酯化合物，并公开了该化合物的分子结构、合成方法和以该化合物为活性成分的药物组合物，属于中药化学成分的半合成技术。
2背景技术
本发明所涉及的底物为次级人参皂苷Rh1，属于人参皂苷的肠内菌代谢产物，具有较强的抗癌活性。人参皂苷口服后，二醇组皂苷经过肠道代谢后生成M1，M1经过血液循环进入肝脏，在肝脏中代谢成为脂肪酸酯EM1，现代药理学研究表明，EM1与母体相比，对细胞的毒性降低，且在肝脏中选择性的保留时间增加，因而提高了其体内的抗肿瘤活性。EM1为人参皂苷在机体代谢后的主要抗肿瘤活性形式，肠内菌代谢产物M1可以直接发挥抗癌作用。而三醇组皂苷会部分代谢为Rh1，我们推测Rh1亦会经过肝脏代谢生成脂肪酸酯类物质，因此对其合成方法及其活性进行了研究。
经检索未见上述人工合成产物的文献报道。
3发明内容
本发明提供一种具有药用价值的人参皂苷次级苷Rh1的脂肪酸单酯类化合物：简称FRh1。
本发明还提供了人参皂苷Rh1与脂肪酰氯合成制备FRh1的方法，适于工业化生产，产量高，杂质少，底物反应完全。
本发明进一步提供了以该化合物为活性成分的药物组合物，用于抗癌研究。
本发明用人参皂苷Rh1与脂肪酸酰氯合成的单酯化合物，经过体内体外相 结合的药理活性筛选，对于肝癌、胃癌、肺癌等多种癌症有效。
本发明所述化合物具有以下结构式：
其中R为C8-C18脂肪酰基，该化合物简称为FRh1。
上述的C8-C18脂肪酰基为天然存在的饱和或不饱和直链脂肪酸的酰基、及人工合成的饱和或不饱和直链脂肪酸的酰基。本发明优选的化合物为具有以上通式的R为C8-C18的化合物，最优选的是R为C8饱和直链脂肪酸酰基的化合物。发明方法包括如下步骤：
(1)人参皂苷提取物经酶解制备得到人参次级苷Rh1，常规柱层析和重结晶相结合的方法纯化样品，得到纯品。
(2)取Rh1适量溶于500mL二氯甲烷中，备用。辛基酰氯、三乙胺适量置于500mL二氯甲烷溶液中，反应15-30min，后缓慢滴加Rh1的二氯甲烷溶液。反应12-24h；然后用水、饱和食盐水、二氯甲烷溶液洗涤4次，减压回收二氯甲烷，干物质用甲醇溶解，过滤，甲醇液减压回收得干物质。
(3)将所得物质经RP-HPLC，100％甲醇洗脱，得到20-(S)-原人参三醇-6-O-β-D-吡喃葡萄糖-6’-O-辛酸酯(以下简称ORh1)。收率以Rh1计为55-75％。
所得化合物用乙酸乙酯重结晶可得到本发明纯品。
因此，按照上述制备方法可制得R为C8-C18的FRh1，且化合物的收率均在50％左右。
经过药理学实验筛选，上述化合物具有抗癌生理活性。
本发明的药物组合物以上述化合物为主要活性成分，以及含有一种或多种药学上可以接受的载体。
本发明的化合物和组合物可用于治疗癌症。
上述所述的药学上可接受的载体为常规的药物载体，包括稀释剂、赋形剂、填充剂、黏合剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体，甜味剂等。
本发明化合物可以以组合物的形式通过口服、直肠、静脉、肌肉和胃肠外给药方式施用与癌症治疗的患者。也可以制备成片剂、冲剂、胶囊、栓剂、喷雾剂和注射剂；优选与直接作用在病灶部位的高效剂型。
本发明的药物组合物为5％-99.5％的活性成分FRh1。优选为8％-85％的活性成分。最优为本发明90％的活性成分。
本发明的施药量可根据给药途径，患者年龄、体重、疾病和患病患病程度等变化，日剂量为0.2-10mg/Kg。
4具体实施例
下述实施例可以帮助更好的理解本发明，但不以任何方式限制本发明。
实施例120-(S)-原人参三醇-6-O-β-D-吡喃葡萄糖-6’-O-辛酸酯的制备
人参皂苷提取物经酶解制备得到人参次级苷Rh1，常规柱层析和重结晶相结合的方法纯化样品，得到纯品。取Rh120g溶于500mL二氯甲烷中，备用。量取辛基酰氯24g，三乙胺24g，置于500mL二氯甲烷溶液中，反应15-30min，后缓慢滴加Rh1的二氯甲烷溶液。反应12-24h；然后用水、饱和食盐水、二氯甲烷溶液洗涤4次，减压回收二氯甲烷，干物质用甲醇溶解，过滤，甲醇液减压回收得干物质13.7g。
将所得物质经RP-HPLC，100％甲醇洗脱，得到20-(S)-原人参三醇-6-O-β-D- 吡喃葡萄糖-6’-O-辛酸酯(以下简称ORh1)。收率以Rh1计为55-75％。
上述化合物经光谱分析，分别具有如下理化特性：
ORh1为无色透明油状物，极易溶于氯仿，易溶于甲醇。Liebermann-Burchard反应呈阳性；Molish反应呈阳性。
TOF-MS谱中，m/z[M+Na]+为786，其分子量为763。m/z为499，提示为三醇苷元。
它的碳谱数据归属见下表。
实施例2ORh1体内抗肝癌H22细胞作用
1实验材料和方法
实验动物：ICR小鼠，♀♂各半，体重18-22g，12小时黑白循环，随时供应食物和水。
方法：取接种7d的种鼠腹水癌细胞，用生理盐水制成细胞个数为1×106/mL的细胞悬液，以每鼠0.1mL接种于小鼠右腋皮下，肿瘤细胞移植以后，小鼠被 随机分成不同的组，每组10只。对照组给生理盐水。所有的药物均采用生理盐水溶解。阴性组和受试药组为灌胃给药，阳性对照组腹腔注射，给药体积均为0.2mL/10g。所有的小鼠饲养在温度是22℃-24℃控制的室内，全天喂粮食和水。
第一批喂养连续10d，第11天称重后处死小鼠，摘取瘤块称重；
第二批实验观察小鼠生存期，计算生存率，观察时间为30天。
2数据统计处理
肿瘤抑制率＝(对照组平均瘤重-给药组平均瘤重)/对照组平均瘤重×100％。所有数据均进行均值和方差处理，参数值用均值±标准差(mean±SD)表示，组间比较采用了Dunnett’s Multiple Comparison test检验，p＜0.05为有显著性差异。抑瘤组间比较：显著性差异*p＜0.05，**p＜0.01；与阴性组比较，显著性差异□p＜0.05，□□p＜0.01。
3结果
各组对小鼠体重的影响结果见表2-1。从统计结果中我们可以看到与阴性对照体重相比，正常组和受试药高剂量组与其具有显著差异(P＜0.05)，阳性组和受试药低剂量组与其具有极显著差异(P＜0.01)。从统计结果中我们可以看出，与阴性对照组相比，阳性组(CTX)与其具有极显著性差异(p＜0.01)，而受试药高、低剂量组与其具有显著性差异(p＜0.05)。其三组的肿瘤明显缩小。各组的抑瘤作用统计结果见表2-2，存活率的统计结果表明受试药高、低剂量组分别为90％，90％，均高于对照组60％，表明受试药对瘤鼠具有一定延长生命的作用。统计结果见表2-3。各组肿瘤图片见图1.
表2-1小鼠体重的增重统计结果
| 组别 | 剂量(mg/kg/d) | 动物增重(g) |
| 正常组 | - | 2.16±1.82□ |
| 对照组(阴性) | 生理盐水 | -1.12±3.91 |
| CTX组(阳性) | 20 | 3.01±2.70□□ |
| 受试药低剂量 | 5 | 3.71±2.80□□ |
| 受试药高剂量 | 10 | 2.30±3.59□ |
注：与阴性相比，“□□”P＜0.01，“□”P＜0.05
表2-2各组的抑瘤率统计结果
| 组别 | 剂量(mg/kg) | 瘤重 | 抑瘤率 |
| 对照组 | 生理盐水 | 1.13±0.60 | - |
| CTX组 | 20 | 0.42±0.21** | 61.24％ |
| 受试药低剂量 | 5 | 0.61±0.25* | 41.12％ |
| 受试药高剂量 | 10 | 0.66±0.43* | 39.83％ |
注：与对照组相比，“**”P≤0.01，“*”P≤0.05
表2-3小鼠生存率的统计结果
| 组别 | 剂量(mg/kg/d) | 动物数 | 30大生存 期 | 生存率(％) |
| 对照组 | 生理盐水 | 10 | 6 | 60 |
| CTX组 | 20 | 10 | 9 | 90 |
| 人参低剂量 | 5 | 10 | 9 | 90 |
| 人参高剂量 | 10 | 10 | 9 | 90 |
实施例3ORh1体外抗肝癌H22细胞作用
1实验材料和方法
实验材料：细胞株：H22肝癌细胞株为吉林大学白求恩医学院药理教研室保存传代细胞株。合成产品ORh1。
方法：1、复苏H22细胞后，接种于昆明种小鼠腹部，接种量0.2ml，细胞浓度5×105个\mL，7天后见腹部隆起，去腹水，离心去除非肿瘤细胞，含10％小牛血清的DMEM培养基培养24h，在经无血清DMEM培养基培养24h。
2、选取上述处理后的H22细胞(处于对数生长期)，接种在96孔培养板中，每孔接种190μL，药物用配制成所需浓度加10μL，每组设3个平行孔，正常对照孔加200μL培养基，37℃下5％CO2培养24h后，每孔加入20μL的5mg/ml的MTT，37℃下5％CO2继续培养4h。小心弃上清，并加入150μLDMSO，用微型振荡器混匀后，在酶标仪上经波长为490nm测定光密度值(OD值)。
2数据统计
按此公式计算药物对肿瘤细胞生长的抑制率：肿瘤细胞生长的抑制率％＝(1-实验组光密度值/对照组光密度值)×100％。以同一样品的不同浓度对肿瘤细胞生长的抑制率作图可行到剂量反应曲线，从中求出样品的半数杀伤度IC50
3结果
ORh1的体外抗肿瘤活性测定结果见表3-1，剂量反应曲线见图2。ORh1在80μM浓度下，抑制率达到87.16％，IC50为42.44μM。
表3-1ORh1的体外抗肝癌H22细胞活性作用
实施例3抗癌片剂的制备：取实施例1制备的ORh15g，加入赋形剂药用环糊精15g，混合均匀，造粒压片，制得片剂，每片含ORh110mg。
实施例4抗癌胶囊的制备：取实施例1制备的ORh15g，加入赋形剂药用环糊精15g，造粒，装入胶囊，每粒含ORh110mg。
附图说明：
图1各组肿瘤图片(ORh1高、低剂量组、阳性对照组、阴性对照组)。
图2ORh1抗肝癌H22细胞剂量反应曲线。
Claims (3)
1.20-s-原人参三醇-6-O-β-D-吡喃葡萄糖-6′-O-辛酸酯 ，其结构如下：
2.如权利要求1所述化合物在制备治疗肝癌药物中的应用。
3.药物组合物，其中含有权利要求1所述化合物和药学上可接受的载体。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 200910217947 CN101824065B (zh) | 2009-12-03 | 2009-12-03 | 人参皂苷次级苷Rh1的脂肪酸单酯类化合物及制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 200910217947 CN101824065B (zh) | 2009-12-03 | 2009-12-03 | 人参皂苷次级苷Rh1的脂肪酸单酯类化合物及制备方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN101824065A CN101824065A (zh) | 2010-09-08 |
| CN101824065B true CN101824065B (zh) | 2013-05-01 |
Family
ID=42688250
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN 200910217947 Expired - Fee Related CN101824065B (zh) | 2009-12-03 | 2009-12-03 | 人参皂苷次级苷Rh1的脂肪酸单酯类化合物及制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN101824065B (zh) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103360442B (zh) * | 2012-03-30 | 2016-03-30 | 中国科学院上海有机化学研究所 | 一种原人参三醇类人参皂苷的制备方法 |
| CN102942610A (zh) * | 2012-11-26 | 2013-02-27 | 吉林农业大学 | 人参皂苷m1正丁酸酯的制备及其抗糖尿病医药用途 |
| CN103271891B (zh) | 2013-04-28 | 2016-01-06 | 福建南方制药股份有限公司 | 人参皂苷纳米胶束及其制备方法、应用和药物组合物 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1594341A (zh) * | 2004-06-28 | 2005-03-16 | 吉林农业大学 | 人参皂苷次级苷compound K的脂肪酸酯类化合物及制备方法 |
-
2009
- 2009-12-03 CN CN 200910217947 patent/CN101824065B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1594341A (zh) * | 2004-06-28 | 2005-03-16 | 吉林农业大学 | 人参皂苷次级苷compound K的脂肪酸酯类化合物及制备方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| Rongwei Teng等.Regioselective Acylation of Ginsenosides by Novozyme 435 to Generate Molecular Diversity.《Helvetica Chimica Acta》.2004,第87卷(第7期), * |
| 贾继明等.西洋参总皂苷乙酸水解产物的化学成分研究(Ⅰ).《中草药》.2009,第40卷(第8期), * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN101824065A (zh) | 2010-09-08 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN108358973B (zh) | 萘酰亚胺四价铂类化合物、制备方法及其在制备抗肿瘤药物中的应用 | |
| CN107556361A (zh) | 裂环羽扇豆烷衍生物及其抗肿瘤用途 | |
| CN101824065B (zh) | 人参皂苷次级苷Rh1的脂肪酸单酯类化合物及制备方法 | |
| CN102391346B (zh) | 一种齐墩果烷皂苷类化合物及其用途 | |
| CN104013636B (zh) | 瓦草五环三萜皂苷类化合物抗肿瘤的药物用途 | |
| CN112898371B (zh) | 一类人参三醇类化合物及其制备方法和医用用途 | |
| CN101402667B (zh) | 糖基化修饰的一氧化氮供体型齐墩果酸类化合物、其制备方法及用途 | |
| CN101302199B (zh) | 桂德霉素及其在制备抗肿瘤药物中的应用 | |
| CN102603847A (zh) | 人参皂苷Rh2脂肪酸酯类化合物制备方法及其医药用途 | |
| CN102030813B (zh) | 一种具有高效抗癌活性的黄姜盾叶新苷的制备方法及其用途 | |
| CN101229175A (zh) | 一对原人参二醇衍生物和它们混合体的医药用途 | |
| CN101485665B (zh) | 葫芦素的医药用途 | |
| CN110938033A (zh) | 硒氰化合物及其用途 | |
| CN102477039B (zh) | 瓜馥木内酰胺碱化合物的制备方法及其在制备抗肿瘤药物中的应用 | |
| CN101245089A (zh) | 一对新的人参皂苷元和其混合体的制备方法及其制剂 | |
| CN100484951C (zh) | 人参皂苷次级苷脂肪酸酯类化合物，其制备方法和以该化合物为活性成分的药物组合物 | |
| CN101085804A (zh) | 灰毡毛忍冬次皂苷乙的制备方法及其治疗肝癌、乳腺癌、子宫颈癌的应用 | |
| CN110423254B (zh) | 一种具有不对称单取代香豆素四价铂结构化合物、制备方法及其在制备抗肿瘤药物中的应用 | |
| CN102942610A (zh) | 人参皂苷m1正丁酸酯的制备及其抗糖尿病医药用途 | |
| CN101289453B (zh) | 鞣花酸化合物的制备方法 | |
| CN102603848A (zh) | 人参皂苷Rh2脂肪酸双酯的制备方法及其医药用途 | |
| CN101590035B (zh) | 异戊烯基取代的脱氢水飞蓟宾双醚化合物在制备抗癌药物中的应用 | |
| CN101336917A (zh) | 番荔枝内酯化合物在制备治疗肺癌或乳腺癌药物中的应用 | |
| CN108997473A (zh) | 一种非海参烷型海参皂苷及其制备方法与应用 | |
| CN103351383A (zh) | 5-氟尿嘧啶氮氧自由基抗肿瘤药物 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| C17 | Cessation of patent right | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20130501 Termination date: 20131203 |