CN101821599A - 用于制备分析板的细胞密度自动调节方法 - Google Patents
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Abstract
本方法包括下述步骤:从样品瓶中提取细胞溶液样本;将取样的所述溶液置于倾析室(2)中,所述倾析室(2)设置在分析板(4)的上方;将溶液倾出,以将细胞分散于分析板(4)上。该方法包括测量取样的溶液的细胞密度的步骤,所述测量在倾析室(2)中完成。本发明还涉及用于制备细胞分析板的设备,该设备使实现所述方法成为可能。
Description
技术领域
本发明涉及一种细胞分析板(cell analysis plate)的制备方法,所述细胞分析板的类型包括设置在所述分析板上的待检测细胞薄层或细胞分散相(cell dispersion),所述方法包括下述步骤:
-从样品瓶中提取细胞溶液样本;
-将取样的溶液置于倾析室(decantation chamber)中,所述倾析室设置在分析板的上方;
-将所述溶液缓慢倾出,以在分析板上获得所述细胞薄层。本发明还涉及用于制备细胞分析板的装置,以使上述方法得以实施。
背景技术
例如,为了确定医学诊断而制备细胞分析板,为此目的,细胞沉淀需在载玻片上实现。
用样本刷提取细胞样本,例如,涂片时,将样本刷置于装有细胞溶液的样品瓶中。将部分细胞溶液的样本提取出后将该样本置于位于载玻片上方的倾析室内。在将细胞混合液进行倾析并吸收之后,在载玻片上得到细胞薄层或细胞分散相,并形成分析板。此方法在文献FR-2792333中有所记述。
获得具有恒定细胞密度,特别是存在足够的细胞以获得相关诊断的薄层或分散相是非常令人期待的。在一些应用中,例如,用于筛查子宫颈癌的涂片中,细胞数目必须符合巴氏分类法(Bethesda classification)这种使涂片诊断结果标准化的分类法,且每个分散相中必须含有5000个以上的细胞。因此,如果溶液中的细胞密度不够充足时,细胞取样的数目的调节可能就是必要的。
目前,细胞密度的测量是通过存在于样品瓶中的细胞来完成的。这就是说,提取样本并装入样品瓶中,样本在瓶中溶解,为了确定细胞悬浮液的量,需要将细胞添加到分析板上以在阅读诊断时具有足够的细胞数目,就要对样本进行密度测量。密度测量是,例如,通过浊度分析进行密度测量,这就是说,通过测量经过样品瓶的光的衍射情况进行密度测量。
然而,这类在样品瓶中的测量存在许多缺陷。首先,这种测量是非常不可靠的,因为,置于样品瓶中的样品刷或粘到样品瓶上用于识别样品瓶的管理标签会干扰测试。另一方面,所述测量方法包括存在于样品瓶中的所有细胞成分,如上皮细胞、红细胞、炎症细胞等等,对上述细胞不加区别而不允许对具有代表性的以及与样本诊断有关的细胞进行选择性测量。最后,在取样于样品瓶中时,如果可以直接调整细胞悬浮液的数量,就能立即获得具有适宜细胞密度的分析板,但还没有针对该过程的开放的全自动操作,也没有任何后续的品质操作可以给出确定(setting out)最初的样品瓶中溶液的低细胞密度的报告并可以将其在分析板上通过二次富集进行修正。
发明内容
本发明的一个目的是通过提供一种用于制备上述类型的分析板的方法来克服这些缺点,这种分析板可以可靠地、恰当地测量细胞密度,且如果需要修正则能进行优质后续操作(quality follow-up operation)。
为此,本发明涉及一种用于制备上述类型的分析板的方法,其中,该方法的特征在于,该方法包括测量取样的溶液的细胞密度的步骤,所述测量在倾析室中完成。
根据本方法的其它特征:
-所述制备方法包括将测量的细胞密度与阈值密度进行比较的步骤;
-如果测量的细胞密度小于阈值密度,该制备方法还包括取样额外的细胞溶液并将取样的该额外的细胞溶液添加到倾析室中的步骤;
-所述阈值密度基本上等于5000个细胞每细胞薄层;
-通过光的衍射或计数给定表面上的细胞来测量细胞密度;以及
-所述测量细胞密度的步骤包括照明倾析室的步骤。
本发明还涉及用于制备细胞分析板的设备,所述细胞分析板的类型包括至少一个细胞样品瓶,设置在分析板上的倾析室,用于从样品瓶中取样细胞溶液的装置以及用于将所述溶液导入倾析室中的装置,其特征在于,该设备还包括用于在倾析室中测量细胞密度的装置,以制备上述定义的分析板。
所述设备还包括用于在样品室中测量细胞密度的装置,以制备与上述方法相一致的分析板。
根据所述设备的其它特征:
-用于测量细胞密度的装置包括用于照明倾析室的装置以及用于测量光的衍射或计数给定表面上的细胞的装置;
-用于测量光的衍射或计数给定表面上的细胞的装置包括照相机;以及
-照相机由活动臂支撑,所述活动臂在多个倾析室的上方移动,所述多个倾析室设置在多个分析板的上方。
附图说明
本发明的其它方面和优点将以实施例的方式并参考附图在下面的描述中予以说明,其中:
图1是说明根据本发明的一个具体实施方式的用于制备分析板的设备的示意性局部透视图;
图2是说明图1中的设备在对存在于倾析室中的溶液进行细胞密度测量步骤时的示意图。
为简化起见,没有在图中说明用于制备分析板的设备的全部。
具体实施方式
所述设备通常包括至少一个细胞样品瓶(未示出),至少一个倾析室2,所述倾析室设置在分析板4的上方,用于从样品瓶中取样细胞溶液并将所述细胞溶液导入倾析室2中的装置(未示出)。
所述样品瓶和所述倾析室2设置在平板6上,所述平板6至少配备有一个用于容纳位于倾析室2下方的分析板4的外壳(housing)。实际上,多个倾析室2和分析板4装配在用于构建系列分析板的平板6上的相应的缺口中。
所述倾析室2为无底容器,如此可以使导入倾析室内的物质倾泻于分析板上,例如,在文献FR-279333中有所描述。分析板4为用于此类应用的传统的载玻片。
所述取样装置和导入装置包括,例如,自动移液管(未示出),该移液管可以从样品瓶移动至倾析室2,并驱动该移液管,以从样品瓶中对内容物进行取样,并将样本导入倾析室2中。
根据一个具体实施方式,所提供的移液管还可以提取用于稀释取自样品瓶的细胞溶液的液体样本,并将所述液体样本与移液管中的溶液混合,以稀释取样的溶液并将混合溶液再次导入倾析室2中。
取一涂片并放置于样品瓶中,在该位置,经过一个众所周知的过程选择与分析有关的细胞。通过取样设备对得到的溶液进行取样,并可以将所述溶液稀,然后将所述溶液自动导入倾析室2中。
将溶液轻轻倒出并倾入室2中,以此通过吸收溶液中的液体获得分析板4上的细胞薄层或细胞分散相。
所述分析板包括,在最外侧部分的识别装置,例如,条形码8。根据其它具体实施方式,识别装置可以是不同的,例如,附有信息的标签或带有无线射频芯片的集成电路芯片,其包含信息可以通过读出设备远距离读出。
位于平板6上方的臂10是可移动的,所述臂10携有照相机12,该照相机可以记录平板6的图像,这就是说,倾析室2中的内容物和分析板4上的物质已经分别通过图1和图2中的箭头F和F’示出。
在图1所示的第一步骤中,臂10以这样的方式放置,照相机12朝向条形码8并读出分析板4的识别信息。所述信息是,例如,这些信息被传递给数据处理系统,该系统导出多块分析板的优质后续操作并且联合关于每块板上细胞薄层或细胞分散相的信息。
根据图示的具体实施方式,照相机12也形成用于测量处于倾析室中的样本溶液的细胞密度的装置。
为此,降低所述臂10(如图2中箭头F”所示),并移动至倾析室2的上方,以获取如箭头F’所示的倾析室中的内容物的照片。所述移动可以伸长至与倾析室接触,以获得遮光的效果,产生一个暗室环境,从而优化得到图片的质量。
用于测量细胞密度的装置还包括用于照明倾析室的装置,以使照相机12实现密度测量。根据如图所示的具体实施方式,臂10携有光源14,该光源设置在具有弹性和有回弹力的金属板16的最外侧。如图2所示,当降低臂10时,光源14被移入并与分析板4的边缘接触,此时,当将臂10移至倾析室2的上方时,金属板16发生形变以修正光源14的位置。臂10的移动使光源14位于迎着分析板2的位置,以此优化光的传输。光源14在分析板上将光扩散开,如图2中箭头F”’所示,因此,倾析室2的照明是从侧向实现的。光源14可以是,例如,电致发光二极管(ELD)。所述照明装置极具优势,因为它是独立于平板6的,且易于保养,实现此装置花费也不多。
所述照相机12通过测量经过细胞溶液的光的衍射或通过计数给定平面的细胞数目来测量细胞密度。这些测量方法是公知的,故将不再进行详细描述。所述照相机12具有细胞解析功能,其功能能够满足这类测量需求。
根据另一个未示出的具体实施方案,除照相机12之外,还可提供一个用于测量密度的特殊照相机用于读取识别装置8。所述特殊照相机也由臂10支撑,它比照相机12更有效,特别是在解析方面,且特别适用于测量细胞密度。
根据另一个未示出的具体实施方案,所述倾析室2的照明是以不同的方式实现的。在这种方式中,这里提供了,例如,光引导装置,如光纤维类,将所述装置设置在平板6上,以与分析板4的边缘接触,以从侧向实现对倾析室2的照明。作为选择,光源可以设置在臂10上,以从上方对倾析室2进行照明。光源布置须避免妨碍倾析室2中样本溶液表面光反射的情况。根据另一选择,光源从下方照明倾析室2,改造平板并在平板上开检查孔,以使光线通过。
将通过上述装置测量的密度与基本等于所得到的最小密度的阈值密度相比较,则可获得细胞薄层或细胞分散相的相关分析。例如,所述比较可以通过例如上述的数据处理系统来实现。根据一个具体实施方式,按巴氏分类法规定,阈值密度基本等于5000个细胞每细胞分散相。
如果测量的密度比阈值密度低,用于制备分析板的方法还包括调节分散相细胞密度的附加步骤。用取样装置从样品瓶中补取一定体积的细胞溶液样本,并将该样本导入倾析室2中,以在倾析后向细胞薄层和细胞分散相添加细胞。例如,补加样本的体积预先经过数据处理系统计算并由自动取样装置进行相应地控制。
根据已经执行密度调节的信息,通过与分析板4的特性有关的数据处理系统记录相关信息,以使细胞样本的优质后续操作得以进行。
上述方法和设备可以获得可靠的密度测量,这是因为测量不是在样品瓶中而是直接在倾析室2中进行的。所述测量还包括仅与分析相关的细胞。所述测量还可以带来优质后续操作,及报告测定样品瓶中的低细胞密度的过程并能对其在分析板上通过二次富集进行修正。
Claims (11)
1.用于制备细胞分析板(4)的方法,所述细胞分析板(4)包括置于分析板(4)上的待分析的细胞薄层,所述方法包括下述步骤:
-从样品瓶中提取细胞溶液样本,
-将取样的溶液置于倾析室(2)中,所述倾析室(2)设置在所述分析板(4)的上方,
-将所述溶液缓慢倾出,以在分析板(4)上获得所述细胞薄层,
所述方法的特征在于,该方法还包括测量取样的溶液的细胞密度的步骤,所述测量在倾析室(2)中完成。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,该方法还包括将测量的细胞密度与阈值密度相比较的步骤。
3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,如果测量的细胞密度小于阈值密度,该方法还包括取样额外的细胞溶液并将取样的该额外的细胞溶液添加到倾析室(2)中的步骤。
4.根据权利要求2或3所述的制备方法,其特征在于,所述阈值密度基本上等于5000个细胞每细胞薄层。
5.根据权利要求1-4中任意一项所述的制备方法,其特征在于,通过光的衍射或计数给定表面上的细胞来测量细胞密度。
6.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述测量细胞密度的步骤包括照明倾析室(2)的步骤。
7.用于制备细胞分析板的设备,该设备包括至少一个细胞样品瓶,设置在分析板(4)上的倾析室(2),用于从样品瓶中取样细胞溶液的装置以及用于将所述细胞溶液导入倾析室(2)中的装置,其特征在于,该设备还包括用于在倾析室(2)中测量细胞密度的装置,以制备与根据权利要求1-6中的任意一项所述的方法相一致的分析板(4)。
8.根据权利要求7所述的设备,其特征在于,所述用于测量细胞密度的装置包括用于照明倾析室(2)的装置以及用于测量光的衍射或计数给定表面上的细胞的装置。
9.根据权利要求8所述的设备,其特征在于,用于测量光的衍射或计数给定表面上的细胞的装置包括照相机(12)。
10.根据权利要求9所述的设备,其特征在于,所述照相机由活动臂(10)支撑,所述活动臂(10)在多个倾析室(2)的上方移动,所述多个倾析室(2)设置在多个分析板(4)的上方。
11.根据权利要求10所述的设备,其特征在于,所述活动臂(10)还携有光源(14),所述光源(14)位于固定于活动臂(10)上的具有弹性的、有回弹力的金属板(16)的最外部分,所述光源构成倾析室(2)的侧向照明装置。
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