CN101804112A - 贯众乌梅中药组合物制备方法及应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种贯众乌梅中药组合物，其是由贯众的醇提物和乌梅的醇提物以及肉桂酸按照一定比例组成的混合物或者是乌梅和贯众按照一定比例混合后进行醇提的提取物，其还包括常规的药用辅料及赋形剂。本发明还提供了上述贯众乌梅中药组合物的制备方法及应用。本发明的贯众乌梅中药组合物对家禽细菌性疾病和病毒性疾病，特别针对大肠杆菌、衣原体所致家禽疾病以及法氏囊病毒、禽流感所致家禽疾病具有良好的预防和治疗效果；另外，本发明贯众乌梅中药组合物，其原料易得且成本较低，制备工艺方便易行。
Description
技术领域
本发明属于医药领域，涉及一种贯众乌梅中药组合物、其制备方法及应用。
背景技术
细菌耐药性的普遍产生和耐药感染已经成为影响现代畜牧业发展的一大难题。在养殖业方面，期望通过合理用药来减少耐药菌的产生并通过新药的开发来应对不断产生的耐药菌，而这恰好为中药抗感染研究提供了机会。畜禽重大疫病在全球不断爆发，禽流感、口蹄疫等重大公共卫生疾病严重影响了畜牧业的发展。因此，抗家禽细菌性疾病和病毒性疾病药物的研究已经成为当务之急。
贯众始载于《神农本草经》，为多年生常绿草本，味苦，性微寒，有小毒，有驱虫、止血、清热解毒的功效。近代医学证明其具有抗菌、抗肿瘤、抗流感病毒等作用，采用贯众与其它中草药合理配伍对预防和治疗病毒性疾病屡见报道，它作为我国的传统医药越来越受到重视。
乌梅(Fructus Mume)是由蔷薇科植物梅干燥未成熟果实加工而成，别名有梅实、熏梅、桔梅肉。该植物味酸、性涩、平，具有敛肺止咳、涩肠止泻、固崩止血、生津止渴、安蛔等功效。现代医学研究证明乌梅主要功能为抑菌、镇咳、安蛔、抗肿瘤、抗过敏、抗氧化和抗生育等。有报道称从乌梅中分离出来的3-羟基-3-羧基戊二酸二甲酯对肉鸡大肠杆菌具有一定的预防效果，体外最小抑菌浓度为3.125mg/mL。
目前，国内外尚无关于贯众和乌梅提取物一起配伍的报道，也未见二者提取物在防治家禽细菌性疾病和病毒性疾病方面疗效的报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种能够有效预防和治疗家禽细菌性疾病和病毒性疾病的贯众乌梅中药组合物。
本发明的另一目的是提供上述贯众乌梅中药组合物的制备方法。
本发明的进一步目的是提供上述贯众乌梅中药组合物在制备用于预防和治疗家禽细菌性疾病和病毒性疾病的药物中的应用。
为了实现本发明目的，本发明的一种贯众乌梅中药组合物，由下述重量份的原料药制成：贯众20～70、乌梅20～40、肉桂酸10～40。
优选地，前述的中药组合物，由下述重量份的原料药制成：贯众30～60、乌梅20～40、肉桂酸20～30。
更优选地，前述的中药组合物，贯众和乌梅的重量比为3∶2。
前述的中药组合物，其还包括常规的辅料如无水乙醇、吐温-20或吐温-80。
前述的中药组合物，其还包括常规的药用赋形剂如淀粉、糊精、乳糖、甜菊苷、蔗糖、甘草甜素、果葡糖浆、三氯蔗糖、木糖醇、山梨糖醇、葡萄糖、预胶化淀粉和/或羧甲基淀粉钠。
前述的中药组合物，是由贯众的醇提物和乌梅的醇提物按比例组成的混合物或乌梅和贯众按比例混合后进行醇提的提取物。
前述的中药组合物，其为片剂、颗粒剂、口服液、注射剂或冻干粉针剂。
上述贯众乌梅中药组合物口服液的制备方法，其包括：
方法I：贯众乌梅提取物口服液的单独制备方法，其包括步骤：
1)贯众提取物的制备
a、称取适量贯众，粉碎，用4～8倍体积60～80％乙醇浸泡8小时后，将贯众以及乙醇浸提液煮沸，保持沸腾状态持续1小时，将浸提液倒出并抽滤得上清液备用；b、向倒出浸提液的贯众中加入4倍体积60％～80％乙醇，煮沸，保持沸腾状态持续1小时，将浸提液倒出并抽滤得上清液备用；c、重复步骤b 2次；d、合并上述步骤得到的上清液，减压浓缩，得到浸膏备用；
2)乌梅提取物的制备
a、称取适量乌梅，用4～8倍体积60～80％乙醇浸泡8小时后，将乌梅以及乙醇浸提液煮沸，保持沸腾状态持续1小时，将浸提液倒出并抽滤得上清液备用；b、向倒出浸提液的乌梅中加入4倍体积60％～80％乙醇，煮沸，保持沸腾状态持续1小时，将浸提液倒出并抽滤得上清液备用；c、重复步骤b 2次；d、合并上述步骤得到的上清液，减压浓缩，得到浸膏备用；
3)贯众乌梅口服液的制备
分别用75％酒精溶解贯众、乌梅提取物浸膏，加入吐温-20，然后加入20％重量肉桂酸的无水乙醇溶液，摇匀即得；
其中，75％酒精的用量为终体积的30％，吐温-20的用量为终体积的40％，贯众、乌梅提取物与肉桂酸按照重量比6∶4∶5配伍。
方法II：贯众乌梅提取物口服液的混合制备方法，其包括步骤：
1)贯众乌梅提取物的制备
a、按照贯众和乌梅的重量比为3∶2分别称取原料药，用4～8倍体积60～80％乙醇浸泡8小时后，将贯众、乌梅以及乙醇浸提液煮沸，保持沸腾状态持续1小时，将浸提液倒出并抽滤得上清液备用；b、向倒出浸提液的贯众、乌梅中加入4倍体积60％～80％乙醇，煮沸，保持沸腾状态持续1小时，将浸提液倒出并抽滤得上清液备用；c、重复步骤b 2次；d、合并上述步骤得到的上清液，减压浓缩，得到浸膏备用；
2)贯众乌梅口服液的制备
用75％酒精溶解贯众、乌梅混合提取物浸膏，加入20％重量肉桂酸的无水乙醇溶液，然后加入吐温-20，摇匀即得；
其中，75％酒精的用量为终体积的30％，吐温-20的用量为终体积的40％，贯众、乌梅混合提取物与肉桂酸按照重量比2∶1配伍。
上述贯众乌梅中药组合物在制备用于预防和治疗家禽细菌性疾病和病毒性疾病的药物中的应用，其中，所述的家禽细菌性疾病包括大肠杆菌、衣原体所致疾病，所述的家禽病毒性疾病包括法氏囊病毒所致疾病、禽流感病毒，特别是IBDV LX毒株、禽流感H9N2毒株所致疾病。具体方法为：按照每天200～400mg/Kg体重的方式对家禽喂药，连续4-5天饮水或拌料给药。
本发明的优点在于：
(1)首次将贯众提取物和乌梅提取物进行科学配伍，得到本发明抗家禽细菌性疾病和病毒性疾病的中药组合物产品；
(2)本品贯众乌梅中药组合物对家禽细菌性疾病和病毒性疾病，特别针对大肠杆菌、衣原体所致家禽疾病以及法氏囊病毒、禽流感所致家禽疾病具有良好的预防和治疗效果；
(3)本发明贯众乌梅中药组合物，其原料易得且成本较低，制备工艺简便。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
实施例1贯众提取物的制备
a、取1Kg贯众，粉碎，用6倍体积75％乙醇浸泡8小时后，将贯众以及乙醇浸提液倒入三口烧瓶并放入电子调温电热套上，煮沸后保持沸腾状态持续1小时，将浸提液倒出并抽滤得上清液备用；
b、向倒出浸提液的贯众中加入4倍体积75％乙醇，煮沸，保持沸腾状态持续1小时，将浸提液倒出并抽滤得上清液备用；
c、重复步骤b2次；
d、合并上清液，减压浓缩，得到202克浸膏备用，得率20.2％。
实施例2乌梅提取物的制备
a、取1Kg乌梅，用6倍体积75％乙醇浸泡8小时后，将乌梅以及乙醇浸提液倒入三口烧瓶并放入电子调温电热套上，煮沸后保持沸腾状态持续1小时，将浸提液倒出并抽滤得上清液备用；
b、向倒出浸提液的乌梅中加入4倍体积75％乙醇，煮沸，保持沸腾状态持续1小时，将浸提液倒出并抽滤得上清液备用；
c、重复步骤b2次；
d、合并上清液，减压浓缩，得到307g浸膏备用，得率在30.7％左右。
实施例3复方贯众乌梅口服液的制备
分别用75％酒精溶解贯众提取物和乌梅提取物，加入吐温-20，然后加入20wt％肉桂酸的无水乙醇溶液。其中75％酒精的用量为终体积的30％，吐温-20占40％，水占30％。药物由贯众、乌梅提取物浸膏与肉桂酸按照重量比9∶1∶5配伍制成有效成分贯众乌梅的药物浓度为200mg/mL的液体。复方为深褐色液体，长时间储存有轻摇易散的浸膏，pH3～4，相对密度为1.05～1.08(要求应不低于1.01)。
实施例4复方贯众乌梅口服液的制备
分别用75％酒精溶解贯众提取物和乌梅提取物，加入吐温-20，然后加入20wt％肉桂酸的无水乙醇溶液。其中75％酒精的用量为终体积的30％，吐温-20/吐温-80占40％，水占30％。药物由贯众、乌梅提取物浸膏与肉桂酸按照重量比7∶3∶5配伍制成有效成分贯众乌梅的药物浓度为200mg/mL的液体。复方为深褐色液体，长时间储存有轻摇易散的浸膏，pH3～4，相对密度为1.05～1.08(要求应不低于1.01)
实施例5复方贯众乌梅口服液的制备
分别用75％酒精溶解贯众提取物和乌梅提取物，加入吐温-20/吐温-80，然后加入20wt％肉桂酸的无水乙醇溶液。其中75％酒精的用量为终体积的30％，吐温-20/吐温-80占40％，水占30％。药物由贯众、乌梅提取物浸膏与肉桂酸按照重量比6∶4∶5配伍制成有效成分贯众乌梅的药物浓度为200mg/mL的液体。复方为深褐色液体，长时间储存有轻摇易散的浸膏，pH3～4，相对密度为1.05～1.08(要求应不低于1.01)
实施例6复方贯众乌梅口服液的制备
分别用75％酒精溶解贯众提取物和乌梅提取物，加入吐温-20/吐温-80，然后加入20wt％肉桂酸的无水乙醇溶液。其中75％酒精的用量为终体积的30％，吐温-20/吐温-80占40％，水占30％。药物由贯众、乌梅提取物浸膏与肉桂酸按照重量比1∶1∶1配伍制成有效成分贯众乌梅的药物浓度为200mg/mL的液体。复方为深褐色液体，长时间储存有轻摇易散的浸膏，pH3～4，相对密度为1.05～1.08(要求应不低于1.01)。
实施例7复方贯众乌梅口服液的制备
分别用75％酒精溶解贯众提取物和乌梅提取物，加入吐温-20，然后加入20wt％肉桂酸的无水乙醇溶液。其中酒精的用量为终体积的30％，吐温-20占40％，水占30％。药物由贯众、乌梅提取物浸膏与肉桂酸按照重量比3∶7∶5配伍制成有效成分贯众乌梅的药物浓度为200mg/mL的液体。复方为深褐色液体，长时间储存有轻摇易散的浸膏，pH3～4，相对密度为1.05～1.08(要求应不低于1.01)
实施例8复方贯众乌梅提取物的制备
a、取360克贯众粉碎，加入240克乌梅，用6倍体积75％乙醇浸泡8小时后，将贯众、乌梅以及乙醇浸提液倒入三口烧瓶并放入电子调温电热套上，煮沸后保持沸腾状态持续1小时，将浸提液倒出并抽滤得上清液备用；
b、向倒出浸提液的贯众、乌梅中加入4倍体积75％乙醇，煮沸，保持沸腾状态持续1小时，将浸提液倒出并抽滤得上清液备用；
c、重复步骤b2次；
d、合并上述步骤得到的上清液，减压浓缩，得到144g浸膏备用，得膏率为24％。
实施例9复方贯众乌梅口服液的制备
用75％酒精溶解贯众和乌梅混合提取物，加入吐温-20/吐温-80，然后加入20wt％肉桂酸的无水乙醇溶液。其中75％酒精的用量为终体积的30％，吐温-20/吐温-80占40％，水占30％。药物由贯众乌梅混合提取物浸膏与肉桂酸按照重量比2∶1配伍制成有效成分贯众乌梅的药物浓度为200mg/mL的液体。复方为深褐色液体，长时间储存有轻摇易散的浸膏，pH3～4，相对密度为1.05～1.08(要求应不低于1.01)
实施例10复方贯众乌梅颗粒的制备
将实施例8制得的贯众乌梅混合提取物50g、糊精150g、蔗糖50g充分混合，制成颗粒，烘干，整粒，过16目筛，摇匀即得。
实验例1贯众乌梅制剂组方防治鸡法氏囊病组方筛选
1材料和方法
1.1实验动物：20日龄雏鸡随机分为8组，每组10只。
1.2药物分组：贯众乌梅3∶7组(实施例7)、贯众乌梅1∶1组(实施例6)、贯众乌梅3∶2组(实施例5)、贯众乌梅7∶3组(实施例4)、贯众乌梅9∶1组(实施例3)、卵黄抗体组(洛阳普莱柯生物工程有限公司，批号080324)、感染对照组、健康对照组。
1.3毒株和攻毒：人工感染毒株IBDV LX株(北京市农业科学院畜牧兽医研究所)，组织匀浆液每只雏鸡点眼、滴鼻共0.2mL。(参考Liu J，Zhou J，Kwang J.Virus Genes.2002，24：135-47)
1.4给药方式：攻毒24h后开始用药，连续使用5天。
1.5评价指标：
1.5.1临床发病特点和体重：试验期间，每天观察试验鸡的精神、食欲、活动及粪便情况，并做好记录，在试验开始和结束时，将试验鸡逐只称重，计算相对增重率。
1.5.2出血评价：用药结束后第7天，剖检，并逐个观察法氏囊的病变与肌肉出血情况，并根据病变与出血程度进行评分计算分值。剖检观察法氏囊出血程度以及是否有渗出，肾脏是否肿胀，肌胃腺胃交界处是否出血，胸肌腿肌是否条带出血纹，最后计算病变指数减少率。试验分组及药物用量情况如表1所示。
表1
2实验结果：
2.1不同组方对体重和成活率的影响
在成活率方面，从表2可以看出，贯众乌梅3∶7组、贯众乌梅1∶1组、贯众乌梅3∶2组、贯众乌梅7∶3组、贯众乌梅9∶1组成活率分别为70％，90％，100％，80％和80％。经过统计分析发现贯众乌梅3∶7组、贯众乌梅9∶1组与卵黄抗体组相比，结果差异不显著，但贯众乌梅3∶2组与卵黄抗体组相比差异显著(P＜0.05)。
相对增重率方面，贯众乌梅3∶7组、贯众乌梅1∶1组、贯众乌梅3∶2组、贯众乌梅7∶3组、贯众乌梅9∶1组分别为13.5％，14.0％，46.7％，44.4％和28.7％，卵黄抗体组为50.3％。经过统计性检验分析贯众乌梅3∶2组、贯众乌梅7∶3组与卵黄抗体组差异不显著，但以上三组与贯众乌梅9∶1组、贯众乌梅1∶1组、贯众乌梅3∶7组相比差异显著(P＜0.05)。
表2体重变化以及存活率
注：相对增重＝试验后体重-试验前体重；相对增重率＝试验组平均增重/空白对照组平均增重×100％；A-B同一列中字母标识不同为差异显著(P＜0.05)
2.2不同组方对靶器官病变、免疫器官指数的影响
结果见表3，贯众乌梅3∶7组、贯众乌梅1∶1组、贯众乌梅3∶2组、贯众乌梅7∶3组以及贯众乌梅9∶1组，各组靶器官相对病变减少率分别为59.0％，58.2％，93.5％，57.4％和53.3％。贯众乌梅3∶2组与卵黄抗体组相比差异显著(P＜0.05)。此外，法氏囊平均指数贯众乌梅3∶2组与卵黄抗体组差异不显著。
表3不同组方对病变和免疫器官指数影响
注：A-B同一列中字母标识不同为差异显著(P＜0.05)；相对病变减少率＝感染对照组综合病变指数-试验组综合病变指数/感染对照组综合病变指数×100％
因此，从以上成活率、相对增重率、病变减少率三个方面，可以看出贯众乌梅3∶2提取物具有较好的治疗法氏囊效果，且优于卵黄抗体组。因此，药物确定贯众与乌梅的配比关系为3∶2。
实验例2贯众乌梅不同剂量组对人工感染法氏囊病的治疗验证效果
1材料和方法
1.1动物：20日龄雏鸡随机分为6组，每组15只。
1.2感染毒株和剂量：人工感染毒株IBDV LX株(北京市农业科学院畜牧兽医研究所)，组织匀浆液每只雏鸡点眼、滴鼻共0.2mL。24h后开始用药，连续使用5天。
1.3药物分组：实施例5中的药物(贯众乌梅3∶2组)高剂量组、中剂量组和低剂量组、卵黄抗体组(洛阳普莱柯生物工程有限公司，批号080324)、感染对照组、健康对照组。随机每组15只鸡，具体分组情况及处理如表4所示。
1.4评价指标：
成活率和体重增重指标：试验期间，每天观察试验鸡的精神、食欲、活动及粪便情况，并做好记录，在试验开始和结束时，将试验鸡逐只称重，计算相对增重率。
病变指数评价：用药结束2天后剖检，并逐个观察内脏器官病变与肌肉出血情况，并根据病变与出血程度进行评分计算分值。剖检观察法氏囊出血程度以及是否有渗出，肾脏是否肿胀，肌胃腺胃交界处是否出血，胸肌腿肌是否条带出血。
表4试验分组情况及处理
2实验结果
从表5可以看出，贯众乌梅高、中、低三个剂量组的相对增重率分别为91.7％，117.4％，79.8％，成活率分别为100％，86.6％和80％。
表5贯众乌梅提取物对鸡成活率和增重的影响
从实验结果可以看出，用药各组的存活率高于感染对照组，其中复方高剂量组与卵黄抗体组的存活率最高。表6显示高剂量组、中剂量组的法氏囊病变减少率显著性高于卵黄抗体组(P＜0.05)，高剂量组的法氏囊指数也显著高于卵黄抗体组(P＜0.05)。
表6贯众乌梅提取物对人工感染鸡病变指数的影响
注：病变积分减少率＝(感染对照组病变积分-试验组病变积分)/感染对照组病变积分；法氏囊指数＝法氏囊体重/体重；脾指数＝脾脏重量/体重
实验例3贯众乌梅对人工感染大肠杆菌的治疗验证试验
1材料和方法
1.1动物：20日龄海兰褐雏鸡随机分为6组，每组15只。
1.2.药物和分组：实施例5的药物高剂量组(400mg/Kg)、中剂量组(200mg/Kg)、低剂量组(100mg/Kg)、利好组(作为阳性对照组，20％复方磺胺间甲氧嘧啶钠可溶性粉，四川拜耳动物保健有限公司，批号2008102409)、感染对照组(感染不给药)、空白对照组(不感染，不给药)，每组15只。
1.3攻毒：腹腔注射大肠杆菌临床分离株O15(半数致死量为8×108CFU)，0.5mL/只，攻毒后立即给药，按表7所示口服灌胃，连续给药5天，分上、下午两次给药。停药观察3天后剖检。(参考张发明，李应超，李树梅，斯建勇，何诚.科技导报，2008，26，71-74)
1.4评价指标：
死亡率：凡在试验期间，出现大肠杆菌病症状并死亡，剖检后气囊、肝脏、心脏有典型病变特征，病料能分离出大肠杆菌，判断为大肠杆菌感染死亡，计算死亡率。
相对增重率：根据试验开始及结束时每只鸡的体重，计算增重及每组鸡的平均增重，并以健康对照组增重为100％，各组增重与之相比得到各组相对增重率。
大肠杆菌检出率：实验结束后剖检存活鸡，观察心包炎、肝周炎等情况，并取肝脏，无菌取材后分离培养大肠杆菌，统计肝脏大肠杆菌检出率情况。
表7试验分组及给药情况
2结果
结果见表8所示，在成活率方面，复方高、中、低三个剂量组成活率分别为60％，53.3％和46.6％，利好对照组为80％，中剂量组、低剂量组与利好组差异显著。相对增重率分别为49.3％，68.8％和26.7％，利好对照组为67.3％，经过统计学分析，中剂量组与利好对照组差异不显著。
表8对鸡生产性能和成活率的影响
可见，贯众乌梅提取物按400mg/Kg口服，连续5天可以降低人工感染鸡大肠杆菌引起的死亡率，具有一定的疗效，可以部分替代抗菌素治疗大肠杆菌。
实验例4贯众乌梅提取物对临床衣原体与大肠杆菌混合感染的疗效观察
1材料和方法
1.1动物：28日龄发病的肉鸡，根据临床症状、剖检病变和实验室诊断为该病是由衣原体引起的呼吸道疾病，并继发大肠杆菌病。
1.2测试药物和分组：实施例3、5、6所配制的药物。从发病鸡群随机挑选病鸡分成4组，每组20只，分别为复方贯众乌梅1∶1口服液、复方贯众乌梅3∶2口服液、复方贯众乌梅9∶1口服液以及5％盐酸强力霉素(商品名为恒基普救康，天津恒基利德有限公司，批号20090305)对照组。各组采用饮水给药，连续使用5天，分组及用药方法如表9所示。用药完毕后再观察5天。
1.3临床疗效指标评价：
1.3.1成活率：根据存活鸡数计算成活率和相对成活率。
1.3.2相对增重率：根据试验开始及结束时每只鸡的体重，计算增重及每组鸡的平均增重，并以不用药物对照组增重为100％，各组增重与之相比得到各组相对增重率。
表9实验分组及给药剂量
2.1临床病症的诊断：用衣原体荧光抗体(ImageTM ChlamydiaOxoid Ltd，UK)染色从感染气囊中观察到大量的鹦鹉热衣原体包含体存在，从感染鸡群肝脏中分离到G-细菌，生化试验鉴定为致病性大肠杆菌。
2.2疗效评价：
临床症状：用药结束后观察鸡群，发现贯众乌梅3∶2口服液组、盐酸强力霉素对照组采食量明显上升，且“青蛙叫”的呼吸困难声消失，死亡减少。
剖检评价：将存活鸡只进行剖检，发现贯众乌梅3∶2口服液组心包炎、气囊炎、肝周炎等症状减轻，内脏病变较轻。
成活率、增重率的评价：复方贯众乌梅1∶1口服液、复方贯众乌梅3∶2口服液、复方贯众乌梅9∶1口服液以及5％盐酸强力霉素相对增重率分别为135.4％，213.7％，175.7％和230.8％。相对成活率方面分别为13.3％，26.6％，6.7％和20.0％。从实验结果可以看出，复方贯众乌梅3∶2口服液无论是在增重率还是在死亡率，与盐酸强力霉素相比差异不显著。但与贯众乌梅1∶1口服液、贯众乌梅9∶1口服液二组相比，差异显著(P＜0.05)。以上临床应用结果显示贯众乌梅3∶2口服液治疗临床家禽衣原体大肠杆菌混合感染具有一定的疗效。实验结果见表10。
表10临床试验结果
实验例5贯众乌梅提取物对临床高峰期产蛋感染禽流感H9亚型的疗效观察
1实验分组情况：
1.1实验动物：试验动物选择180日龄海蓝褐蛋种鸡21000只，试验组每组11000只，黄芪多糖对照组5000只和不用药对照组5000只。
1.2试验分组：分为3个组，含2个实验组和对照组。受试药物为实施例5所述贯众乌梅口服液，对照组含53％黄芪多糖(河北瑞高动物药业有限公司，批号200901116)，使用剂量见表11。
表11不同分组和用药方法
1.3禽流感H9亚型感染诊断：发病后分别从病理学剖检、病变组织PCR检测。病理学剖检发现气管、喉头粘膜充血、出血，有黄色的干酪样渗出物；单侧性肺脏出血，胸部气囊有干酪样渗出物，个别出现心包炎。根据Genbank登录的H9亚型禽流感引物，设计引物；取病变器官、肺脏组织提取RNA，进行特异性扩增，发现H9亚型特异性条带。依据临床病变和PCR结果诊断为H9亚型禽流感感染。
1.4考察指标：考察期为15天。试验蛋鸡自由采食和饮水，饲料为粉料，按照养殖场常规管理进行。每天观察鸡群采食情况、粪便形状、健康状况，观察指标如下：蛋畸形率、产蛋率、死淘率、初期产蛋和期末产蛋水平，计算产蛋增加水平。
2试验结果和分析
从表12可知，贯众乌梅口服液给药后连续观察10天，鸡蛋的合格率从78.1％提高到89％，提高了10.9％，而黄芪多糖组提高了3.8％。在增加产蛋性能方面，贯众乌梅口服液和黄芪多糖分别提高了15％和10％，不用药对照组减少了7％。
由表13可知，贯众乌梅口服液组、黄芪多糖组和对照组期末死淘率分别为0.02％，0.1％和0.9％。相对死淘汰减少率分别为370％、275％和100％。
表12给药后产蛋水平变化
注：产蛋相对增加率＝期末产蛋率-初始产蛋率
表13不给药后死亡、淘汰变化
注：相对死淘减少率＝实验组相对死淘率/不用药组相对死淘率
3结论
从贯众乌梅口服液组10天治疗观察期内可以看出，贯众乌梅口服液组以200mg/Kg进行口服，连续5天，可以有效治疗禽流感H9亚型流感散发所造成的产蛋性能下降、死淘率增加的病症，有望代替黄芪多糖防治禽流感。
虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
Claims (10)
1.一种贯众乌梅中药组合物，其特征在于，由下述重量份的原料药制成：贯众20～70、乌梅20～40和肉桂酸10～40。
2.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，由下述重量份的原料药制成：贯众30～60、乌梅20～40和肉桂酸20～30。
3.根据权利要求1或2所述的中药组合物，其特征在于，贯众和乌梅的重量比为3∶2。
4.根据权利要求1-3任一项所述的中药组合物，其特征在于，其还包括无水乙醇以及吐温-20或吐温-80。
5.根据权利要求1-3任一项所述的中药组合物，其特征在于，其还包括淀粉、糊精、乳糖、甜菊苷、蔗糖、甘草甜素、果葡糖浆、三氯蔗糖、木糖醇、山梨糖醇、葡萄糖、预胶化淀粉和/或羧甲基淀粉钠。
6.根据权利要求1-5任一项所述的中药组合物，其为片剂、颗粒剂、口服液、注射剂或冻干粉针剂。
7.一种权利要求6所述的贯众乌梅中药组合物口服液的制备方法，其特征在于，其包括：
方法I：贯众乌梅提取物口服液的单独制备方法，其包括步骤：
1)贯众提取物的制备
a、称取适量贯众，粉碎，用4～8倍体积60～80％乙醇浸泡8小时后，将贯众以及乙醇浸提液煮沸，保持沸腾状态持续1小时，将浸提液倒出并抽滤得上清液备用；
b、向倒出浸提液的贯众中加入4倍体积60％～80％乙醇，煮沸，保持沸腾状态持续1小时，将浸提液倒出并抽滤得上清液备用；
c、重复步骤b 2次；
d、合并上述步骤得到的上清液，减压浓缩，得到浸膏备用；
2)乌梅提取物的制备
梅以及乙醇浸提液煮沸，保持沸腾状态持续1小时，将浸提液倒出并抽滤得上清液备用；
b、向倒出浸提液的乌梅中加入4倍体积60％～80％乙醇，煮沸，保持沸腾状态持续1小时，将浸提液倒出并抽滤得上清液备用；
c、重复步骤b 2次；
d、合并上述步骤得到的上清液，减压浓缩，得到浸膏备用；
3)贯众乌梅复方口服液的制备
分别用75％酒精溶解贯众、乌梅提取物浸膏，加入吐温-20，然后加入20wt％肉桂酸的无水乙醇溶液，摇匀即得；
其中，75％酒精的用量为终体积的30％，吐温-20的用量为终体积的40％，贯众、乌梅提取物与肉桂酸按照重量比6∶4∶5配伍。
8.一种权利要求6所述的贯众乌梅中药组合物口服液的制备方法，其特征在于，其包括步骤：
1)贯众乌梅提取物的制备
a、按照贯众和乌梅的重量比为3∶2分别称取原料药，用4～8倍体积60～80％乙醇浸泡8小时后，将贯众、乌梅以及乙醇浸提液煮沸，保持沸腾状态持续1小时，将浸提液倒出并抽滤得上清液备用；
b、向倒出浸提液的贯众、乌梅中加入4倍体积60％～80％乙醇，煮沸，保持沸腾状态持续1小时，将浸提液倒出并抽滤得上清液备用；
c、重复步骤b 2次；
d、合并上述步骤得到的上清液，减压浓缩，得到浸膏备用；
2)贯众乌梅口服液的制备
用75％酒精溶解贯众、乌梅混合提取物浸膏，加入20wt％肉桂酸的无水乙醇溶液，然后加入吐温-20，摇匀即得；
其中，75％酒精的用量为终体积的30％，吐温-20的用量为终体积的40％，贯众、乌梅混合提取物与肉桂酸按照重量比2∶1配伍。
9.权利要求1-6所述的贯众乌梅中药组合物在制备用于预防和治疗家禽细菌性疾病和病毒性疾病的药物中的应用，其特征在于，按照每天200～400mg/Kg体重的方式对家禽喂药，连续4-5天饮水或拌料给药。
10.根据权利要求9的应用，其特征在于，所述的家禽细菌性疾病包括大肠杆菌、衣原体所致疾病，所述的家禽病毒性疾病包括法氏囊病毒、禽流感病毒所致疾病。
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