CN101798292A - ABT-263衍生的新型Bcl-2蛋白抑制剂的制备 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种抗肿瘤新药ABT-263衍生的新型Bcl-2蛋白抑制剂化合物5的制备方法。主要步骤如下：化合物1和化合物2在碱的作用下反应得到化合物3，化合物3和化合物4在DMAP条件下室温反应36小时，浓缩旋干后柱层析分离，得到化合物5。本发明设计合成的一类化合物5具有潜在的生物活性，国内外还未见文献报道，并且制备工艺简单，易于控制，收率高。

Description

ABT-263衍生的新型Bcl-2蛋白抑制剂的制备

技术领域

本发明涉及一类新型Bc1-2蛋白抑制剂的合成。

背景技术

ABT-263是一种可诱导细胞凋亡的小分子Bc1-2抑制剂，药理学研究显示，ABT-263对小细胞肺癌(SCLC)和急性淋巴细胞性白血病(ALL)小鼠的总有效率为100％；在接种了Bc1-2依赖的SCLC细胞系的小鼠中，本品的疗效明显高于紫杉醇、长春新碱和依托泊苷等药。目前ABT-263已经进入临床研究，适应症包括淋巴瘤、慢性淋巴性白血病和一些实体肿瘤。本发明制备的化合物5是一种新化合物，和ABT-263结构相似，其主要差别在于母核双键位置的不同，是一种具有潜在抗肿瘤活性的新的化学实体。关于该化合物的结构目前还未见文献报道。

发明内容

本发明的目的是设计并制备一种新型的Bc1-2抑制剂化合物5，其结构如下：

其中基团R₁为：

基团R₂，R₃，R₄，R₅，R₆为氢原子、氯原子、氟原子，可以相同也可以不同。

本发明的另外一个目的是制备一类化合物5，并优化合成工艺使其操作简单，易于控制，收率高。

为实现本发明的目的，本发明采用的技术方案如下：

1.化合物2的合成

(1)(R)-N-叔丁氧羰基天门冬氨酸-4-甲酯溶于有机溶剂中，-10℃加入碱，滴加氯甲酸乙酯，反应1小时，一次性加入还原剂，然后缓慢滴加甲醇，反应结束后加入水，乙酸乙酯萃取，干燥浓缩，柱层析得到化合物2-1。所述有机溶剂为乙醚、二氧六环或四氢呋喃；所述碱为N-甲基吗啡啉；所述还原剂为硼氢化钠；其中化合物2-1的结构式为：

(2)偶氮二甲酸二乙酯和三苯基磷溶于干燥的有机溶剂，滴加化合物2-1，然后加入苯硫酚，室温反应18小时，旋干后过柱分离得化合物2-2，所述溶剂为二氯甲烷或者四氢呋喃；其中化合物2-2的结构式为：

(3)化合物2-2溶于有机溶剂，分批加入还原剂，回流4-6小时，反应完毕后，加入水，乙酸乙酯萃取，干燥浓缩，柱层析得到化合物2-3。所用溶剂为无水甲醇；所用还原剂为硼氢化钠；其中化合物2-3的结构式为：

(4)化合物2-3溶于乙酸乙酯，加入IBX，回流2-3小时，冷却过滤，滤液旋干得到化合物2-4。其中化合物2-4的结构式为：

(5)将所述化合物2-4溶于有机溶剂，加入胺和还原剂，反应12小时，加入水，二氯甲烷萃取，干燥浓缩，柱层析得化合物2-5。所述有机溶剂为1，2-二氯乙烷；所用胺为二甲胺、吗啡啉、哌嗪、N-甲基哌嗪、四氢吡咯；所用还原剂为氰基硼氢化钠或三乙酰基硼氢化钠；其中化合物2-5的结构式为：

其中R₁基团为以下结构：

(6)化合物2-5溶于有机溶剂，通入HCl气体，反应完毕后，用碱调节pH到8，二氯甲烷萃取，干燥浓缩得化合物2。所述溶剂为乙醚、二氧六环或者二氯甲烷；所用碱为氢氧化钠或氢氧化钾。

2.化合物3的合成

化合物1和化合物2、碱溶于二甲基亚砜，室温反应7-10小时，加入水和二氯甲烷，分层。有机相水洗，饱和氯化钠洗，干燥浓缩，柱层析得到化合物3。所述碱为碳酸钠和碳酸钾。

其中化合物1结构式为：

化合物2的结构式为：

3.合成化合物4

(1)将多聚甲醛，4，4-二甲基环己酮和4-哌嗪基苯甲酸叔丁酯加入有机溶剂中，滴加5当量的浓盐酸，回流3-4小时，加入饱和碳酸钠水溶液，调节pH＝6-8，二氯甲烷萃取，干燥浓缩，柱层析得到化合物4-1。所述有机溶剂为叔丁醇，或者正丁醇，其中化合物4-1的结构式为：

(2)化合物4-1溶于新干燥的有机溶剂中，-50℃--70℃滴加到格氏试剂中，滴加完毕后升温至室温，反应2小时，加入饱和氯化铵，二氯甲烷萃取，干燥浓缩，柱层析得到化合物4-2。所述有机溶剂为无水乙醚或四氢呋喃。其中格氏试剂的结构为：

化合物4-2的结构为：

(3)化合物4-2在酸中回流4-8小时，用碱中和，二氯甲烷萃取，干燥浓缩，柱层析得到化合物4。所述酸为三氟乙酸、浓盐酸和浓硫酸，所述碱为碳酸氢钠、碳酸钠、碳酸氢钾、碳酸钾或氢氧化钠、氢氧化钾。

4.合成化合物5

化合物3和化合物4、EDCI、DMAP，溶于有机溶剂，室温反应36小时，浓缩旋干，柱层析后得到化合物5。

附图说明

附图1为化合物2的合成路线；

附图2为化合物4的合成路线；

附图3为化合物5合成路线。

具体实施方式

以下是具体实施例来说明本发明技术方案，但并非用于限定本发明。(

R₂，R₃，R₅，R₆为氢原子，R₄为氯原子为例)

实施例1：

化合物2-1的合成

在装有机械搅拌的1L三口烧瓶中，将(R)-N-叔丁氧羰基天门冬氨酸-4-甲酯37g(149.6mmol)溶于400mL THF，冷却到-10℃。搅拌下逐滴加入15.1g(149.6mmol)N-甲基吗啡啉，滴加完毕后16.2g(179.6mmol)氯甲酸乙酯缓慢加入，温度控制在-10℃--5℃。反应1个小时，一次性加入17g(448mmol)硼氢化钠，0℃下逐滴加入100mL甲醇，搅拌1个小时，加入400mL水，乙酸乙酯萃取(4*200mL)，合并有机相，干燥浓缩，柱层析后得31g产物，产率86％。

化合物2-2的合成

在装有磁力搅拌的三口瓶中，将偶氮二甲酸二乙酯32.5g(186.5mmol)和三苯基磷48.9g(186.5mmol)溶于500mL无水二氯甲烷，氮气保护下滴加29g(124.3mmol)化合物2-1，随后加入苯硫酚20.5g(186.5mmol)，室温搅拌18小时，反应完毕后浓缩旋干，柱层析后得24.5g产物，产率60％。

化合物2-3的合成

在装有磁力搅拌的三口瓶中，将化合物2-224g(73.8mmol)溶于300mL甲醇，冷却至0℃，加入硼氢化钠14g(368.8mmol)。反应升温至50℃反应4小时，反应完毕后加水200mL催灭反应，乙酸乙酯萃取，合并有机相，干燥浓缩，柱层析后得产物21g，产率96％。

化合物2-4的合成

在装有磁力搅拌的三口瓶中，将化合物2-320g(67.2mmol)溶于乙酸乙酯，加入IBX 72g(257mmol)，回流2.5小时，冷却过滤，滤液旋干得到化合物2-415g，产率75％。

化合物2-5的合成

在装有磁力搅拌的三口瓶中，将化合物2-414g(47.4mmol)溶于150mL 1，2-二氯乙烷，加入吗啡啉5.6g(64.3mmol)和三乙酰基硼氢化钠15.4g(72.7mmol)，反应12小时，加入水，二氯甲烷萃取，干燥浓缩，柱层析得产物11g，产率63.3％。

化合物2的合成

在装有磁力搅拌的三口瓶中，将化合物2-510g(27.3mmol)溶于100mL无水乙醚，通入HCl气体，反应完毕后，用氢氧化钠水溶液调节pH到8，二氯甲烷萃取，干燥浓缩得产物6.7g，产率92％。

化合物3的合成

在装有磁力搅拌的三口瓶中，将化合物16.6g(21.5mmol)和化合物26g(22.5mmol)、二异丙基乙胺12mL溶于二甲基亚砜，室温反应10小时，加入水和二氯甲烷，分层。有机相水洗，饱和氯化钠洗，干燥浓缩，重结晶得产物9g，产率，75％。

化合物4-1的合成

在装有磁力搅拌的三口瓶中，将多聚甲醛3.4g(113mmol)，4，4-二甲基环己酮16g(126mmol)和4-哌嗪基苯甲酸叔丁酯30g(113mmol)加入600mL叔丁醇中，滴加11mL的浓盐酸，回流3小时，加入饱和碳酸钠水溶液，调节pH＝8，二氯甲烷萃取，干燥浓缩，柱层析得到产物20g，产率44％。

化合物4-2的合成

在装有磁力搅拌的三口瓶中，将化合物4-119g(47.5mmol)溶于新干燥的100mL THF中，-50℃--70℃滴加到5当量的格氏试剂中，滴加完毕后升温至室温，反应2小时，加入饱和氯化铵，二氯甲烷萃取，干燥浓缩，柱层析得产物15g，产率62％。

化合物4的合成

在装有磁力搅拌的三口瓶中，将化合物4-214g(27mmol)在100mL三氟乙酸中回流5小时，用饱和碳酸氢钠中和至pH＝8，二氯甲烷萃取，干燥浓缩，柱层析得产物9g，产率81％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ＝7.87-8.03(d，J＝8.61Hz，2H)，7.21-7.27(d，J＝3.26Hz，2H)，7.10-7.21(d，J＝8.32Hz，2H)，6.76-6.91(d，J＝8.70Hz，2H)，5.78(s，1H)，3.33(d，J＝2.71Hz，4H)，2.80-3.02(m，1H)，2.50-2.67(d，J＝4.42Hz，2H)，2.28-2.47(m，1H)，1.77-2.20(m，2H)，1.21-1.40(m，1H)，1.02(s，3H)，0.96(s，3H).

化合物5的合成

在装有磁力搅拌的三口瓶中，将化合物36.5g(11.8mmol)和化合物45g(11.8mmol)、EDCI 4.6g(23.6mmol)、DMAP 2.9g(23.6mmol)，溶于100mL二氯甲烷，室温反应36小时，浓缩旋干，柱层析后得产物9g，产率82％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ＝8.23(d，J＝2.03Hz，1H)，7.87-8.03(d，J＝8.61Hz，2H)，7.82(dd，J＝9.19，2.08Hz，1H)，7.20-7.47(m，6H)，7.10-7.21(d，J＝8.32Hz，2H)，7.03(d，J＝8.60Hz，1H)，6.76-6.91(d，J＝8.70Hz，2H)，6.63(d，J＝9.33Hz，1H)，5.78(s，1H)，3.81-4.02(m，1H)，3.66(t，J＝4.20，4.20Hz，4H)，3.33(d，J＝2.71Hz，4H)，2.80-3.07(m，3H)，2.07-2.57(m，12H)，1.57-1.73(m，1H)，1.21-1.40(m，1H)，1.02(s，3H)，0.96(s，3H)；MS(ESI)m/z 974.3(M+H)+.

Claims (5)

1.一种具有潜在抗肿瘤活性的新的化学实体5，其主要结构如下：

其中基团R₁为：

基团R₂，R₃，R₄，R₅，R₆为氢原子、氯原子、氟原子，可以相同也可以不同。

2.一种制备新型化合物5的方法，其特征在于，主要包括以下步骤：

(1)合成化合物4

(a)将多聚甲醛，4，4-二甲基环己酮和4-哌嗪基苯甲酸叔丁酯加入有机溶剂中，滴加5当量的浓盐酸，回流3-4小时，加入饱和碳酸钠水溶液，调节pH＝6-8，二氯甲烷萃取，干燥浓缩，柱层析得到化合物4-1。所述有机溶剂为叔丁醇，或者正丁醇，其中化合物4-1的结构式为：

(b)化合物4-1溶于新干燥的有机溶剂中，-50℃--70℃滴加到格氏试剂中，滴加完毕后升温至室温反应2小时，加入饱和氯化铵，二氯甲烷萃取，干燥浓缩，柱层析得到化合物4-2。所述有机溶剂为无水乙醚或四氢呋喃。其中格氏试剂的结构为：

化合物4-2的结构为：

(c)化合物4-2在酸中回流4-8小时，用碱中和，二氯甲烷萃取，干燥浓缩，柱层析得到化合物4。所述酸为三氟乙酸、浓盐酸和浓硫酸，所述碱为碳酸氢钠、碳酸钠、碳酸氢钾、碳酸钾或氢氧化钠、氢氧化钾。

(2)合成化合物5

化合物3和化合物4、EDCI、DMAP，溶于有机溶剂，室温反应36小时，浓缩旋干，柱层析后得到化合物5。其中化合物3的结构式为：

3.按照权利要求2合成化合物5的方法，其特征是

所述R₁基团为以下结构：

所述基团R₂，R₃，R₄，R₅，R₆为氢原子、氯原子、氟原子，可以相同也可以不同。

4.按照权利要求2合成化合物5的方法，其特征是，所述化合物3的合成方法如下：

化合物1和化合物2、碱溶于二甲基亚砜，室温反应7-10小时，加入水和二氯甲烷，分层。有机相水洗，饱和氯化钠洗，干燥浓缩，重结晶得到化合物3。其中所述碱为碳酸钠和碳酸钾。

化合物1结构式为：

化合物2的结构式为：

5.按照权利要求4所述的合成化合物5的方法，其特征是，所述化合物2的合成步骤如下：

(1)将(R)-N-叔丁氧羰基天门冬氨酸-4-甲酯溶于有机溶剂中，-10℃加入碱，滴加氯甲酸乙酯，反应1小时，一次性加入还原剂，然后缓慢滴加甲醇，反应结束后加入水，乙酸乙酯萃取，干燥浓缩，柱层析得到化合物2-1。所述有机溶剂为乙醚、二氧六环或四氢呋喃；所述碱为N-甲基吗啡啉；所述还原剂为硼氢化钠；其中化合物2-1的结构式为：

(2)将偶氮二甲酸二乙酯和三苯基磷溶于干燥的有机溶剂，滴加化合物2-1，然后加入苯硫酚，室温反应18小时，旋干后过柱分离得化合物2-2，所述溶剂为二氯甲烷或者四氢呋喃；其中化合物2-2的结构式为：

(3)化合物2-2溶于有机溶剂，回流，分批加入还原剂，回流4-6小时，反应完毕后，加入水，乙酸乙酯萃取，干燥浓缩，柱层析得到化合物2-3。所用溶剂为无水甲醇；所用还原剂为硼氢化钠；其中化合物2-3的结构式为：

(4)化合物2-3溶于乙酸乙酯，加入IBX，回流2-3小时，冷却过滤，滤液旋干得到化合物2-4。其中化合物2-4的结构式为：

(5)将所述化合物2-4溶于有机溶剂，加入胺和还原剂，反应12小时，加入水，二氯甲烷萃取，干燥浓缩，柱层析得化合物2-5。所述有机溶剂为1，2-二氯乙烷；所用胺为二甲胺、吗啡啉、哌嗪、N-甲基哌嗪、四氢吡咯；所用还原剂为氰基硼氢化钠或三乙酰基硼氢化钠；其中化合物2-5的结构式为：

其中R₁基团为以下结构：

(6)化合物2-5溶于有机溶剂，通入HCl气体，反应完毕后，用碱调节pH到8，二氯甲烷萃取，干燥浓缩得化合物2。所述溶剂为乙醚、二氧六环或者二氯甲烷；所用碱为氢氧化钠或氢氧化钾。

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