CN101792791A - 一种检测阴道分泌物中细菌菌群的试剂盒及其制备方法 - Google Patents
一种检测阴道分泌物中细菌菌群的试剂盒及其制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101792791A CN101792791A CN200910244266A CN200910244266A CN101792791A CN 101792791 A CN101792791 A CN 101792791A CN 200910244266 A CN200910244266 A CN 200910244266A CN 200910244266 A CN200910244266 A CN 200910244266A CN 101792791 A CN101792791 A CN 101792791A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- preparation
- reacting
- hole
- solution
- substrate solution
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Images
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明提供了一种AV/BV联合检测试剂盒，由反应装置、样品稀释液、显色剂A和显色剂B组成，其中反应装置上设置有过氧化氢反应孔、唾液酸苷酶反应孔、白细胞酯酶反应孔、β-葡萄糖醛酸酶反应孔和凝固酶反应孔，反应孔中有相应的反应垫。本发明还提供了该检测试剂盒的制备方法。本发明的检测试剂盒通过对过氧化氢的测定以及对唾液酸苷酶、白细胞酯酶、β葡萄糖醛酸酶和凝固酶的活性的测定，从而直接鉴定出阴道分泌物中的需氧菌/厌氧菌和兼性厌氧菌等菌群，该方法操作简便快速，准确性高，适于临床常规特别是医院门诊的使用。
Description
技术领域
本发明涉及一种检测微生物的试剂盒及其制备方法，具体地说，涉及一种检测阴道分泌物中需氧菌/厌氧菌和兼性厌氧菌的试剂盒及其制备方法。
背景技术
近来研究发现，女性细菌性阴道感染可分为两种，一种是由厌氧菌和兼性厌氧菌引起的，临床上称细菌性阴道病BV，另一种是由需氧菌引起的，临床上称需氧菌阴道炎AV。两种阴道炎的病原体不同，临床症状和治疗方案也不相同，区别这两种阴道感染，在细菌性阴道感染检测中具有重要的意义。
临床上主要根据微生物学检验和临床表现来鉴定阴道感染，其中将微生物学检验结果作为确诊的依据。
BV的诊断金标准仍为1983年制定的Amsel方法，我国将唾液酸苷酶也纳入了BV的诊断标准。由于Amsel需做四项检测，特别是湿片镜检寻找线索细胞十分费时，不便于临床常规，特别是医院门诊等的使用。在我国主要采用单项唾液酸苷酶检测BV，但由于许多细菌和真菌均可以产生唾液酸苷酶，因此，单独使用唾液酸苷酶诊断BV时，易造成误诊。
AV的诊断主要采用Gilbert提出的，经Tempera修改的综合诊断方法，其诊断标准为：①异常阴道黄色分泌物；②阴道PH升高＞5.0；③分泌物有异味，KOH试验阴性；④阴道分泌物高倍镜检发现大量白细胞；⑤Donder AV评分＞1分。其中，AV评分为必备指标，但AV评分十分复杂，需综合阴道分泌物中乳酸杆菌分级、白细胞数量以及中毒白细胞所占比例、背景菌落数等指标，不适于在临床常规，特别是医院门诊等的使用。
发明内容
本发明的目的是提供一种阴道分泌物中需氧菌/厌氧菌和兼性厌氧菌的AV/BV联合检测试剂盒。
本发明的另一目的是提供所述试剂盒的制备方法。
为了实现本发明目的，本发明的一种检测阴道分泌物中细菌菌群的试剂盒，包括：1)反应装置：所述反应装置具有过氧化氢反应孔、唾液酸苷酶反应孔、白细胞酯酶反应孔、β-葡萄糖醛酸酶反应孔和凝固酶反应孔；2)一种或多种显色剂。
前述的试剂盒，其还包括样品稀释液。
前述的试剂盒，所述反应装置的过氧化氢反应孔包被有辣根过氧化物酶和二乙氨基对苯二胺。
前述的试剂盒，所述反应装置的唾液酸苷酶反应孔包被有5-溴-4-氯-3-吲哚-N-乙酰神经氨酸盐，其对应的显色剂A为固紫B或固红TR。
前述的试剂盒，所述反应装置的白细胞酯酶反应孔包被有5-溴-4-氯-3-吲哚-乙酸盐。
前述的试剂盒，所述反应装置的β-葡萄糖醛酸酶反应孔包被有5-溴-4-氯-3-吲哚-β-葡萄糖醛酸盐。
前述的试剂盒，所述反应装置的凝固酶反应孔包被有甘氨酰精氨酸β萘胺，其对应的显色剂B为固蓝B、固红B、固蓝BB或固蓝RR，优选固蓝B。
前述的试剂盒，所述样品稀释液中含有Triton×100和树胶。
前述的试剂盒，所述反应装置按如下方法制备获得：
1)反应基板的制备：
反应基板由ABS工程塑料制成，其上有5个Φ4mm的圆孔，分别为过氧化氢反应孔、唾液酸苷酶反应孔、白细胞酯酶反应孔、β-葡萄糖醛酸酶反应孔和凝固酶反应孔，在每个反应孔中填入下述相应的反应垫；
2)过氧化氢反应垫的制备：
溶液A：二乙氨基对苯二胺10mg
α-萘酚20mg
无水乙醇10ml
溶液B：辣根过氧化物酶10000单位
失活纯化的牛血清白蛋白1g
Tris-HCl 200mmol/L pH7.0 10ml
将溶液A 1μl滴加在Φ4mm层析纸垫上，避光条件下，25℃流动空气干燥1小时后，在纸垫上滴加溶液B 1μl，避光条件下，25℃流动空气干燥4小时，密封保存在2-8℃；
3)唾液酸苷酶反应垫的制备：
底物溶液：5-溴-4-氯-3-吲哚-N-乙酰神经氨酸盐0.05g
乙酸盐溶液200mmol/L pH5.510ml，其中含NaCl0.2mol/L
将底物溶液1μl滴加在Φ4mm层析纸垫上，避光条件下，25℃流动空气干燥4小时，密封保存在2-8℃；
4)白细胞酯酶反应垫的制备：
底物溶液：5-溴-4-氯-3-吲哚-乙酸盐0.05g
磷酸盐缓冲液200mmol/L pH7.0 10ml，其中含硫酸钠2wt％
将底物溶液1μl滴加在Φ4mm层析纸垫上，避光条件下，25℃流动空气干燥4小时，密封保存在2-8℃；
5)β-葡萄糖醛酸酶反应垫的制备：
底物溶液：5-溴-4-氯-3-吲哚-β-葡萄糖醛酸盐0.05g
磷酸盐缓冲液200mmol/L pH7.010ml，其中含乙二醇50mmol/L
将底物溶液1μl滴加在Φ4mm层析纸垫上，避光条件下，25℃流动空气干燥4小时，密封保存在2-8℃；
6)凝固酶反应垫的制备：
底物溶液：甘氨酰精氨酸β萘胺0.05g
Tris-HCl 200mmol/L pH 8.5 10ml
将底物溶液1μl滴加在Φ4mm层析纸垫上，避光条件下，25℃流动空气干燥4小时，密封保存在2-8℃；
将2)～6)制备的反应垫填入相应的反应孔中，用冲压机压实，在孔上粘贴铝箔保护膜，装入铝箔袋中，即得反应装置。
前述试剂盒的制备方法，包括如下步骤：
1)反应基板的制备：
反应基板由ABS工程塑料制成，其上有5个Φ4mm的圆孔，分别为过氧化氢反应孔、唾液酸苷酶反应孔、白细胞酯酶反应孔、β-葡萄糖醛酸酶反应孔和凝固酶反应孔，在每个反应孔中填入下述相应的反应垫；
2)过氧化氢反应垫的制备：
溶液A：二乙氨基对苯二胺10mg
α-萘酚20mg
无水乙醇10ml
溶液B：辣根过氧化物酶10000单位
失活纯化的牛血清白蛋白1g
Tris-HCl 200mmol/L pH7.0 10ml
将溶液A 1μl滴加在Φ4mm层析纸垫上，避光条件下，25℃流动空气干燥1小时后，在纸垫上滴加溶液B 1μl，避光条件下，25℃流动空气干燥4小时，密封保存在2-8℃；
3)唾液酸苷酶反应垫的制备：
底物溶液：5-溴-4-氯-3-吲哚-N-乙酰神经氨酸盐0.05g
乙酸盐溶液200mmol/L pH5.5 10ml，其中含NaCl0.2mol/L
将底物溶液1μl滴加在Φ4mm层析纸垫上，避光条件下，25℃流动空气干燥4小时，密封保存在2-8℃；
4)白细胞酯酶反应垫的制备：
底物溶液：5-溴-4-氯-3-吲哚-乙酸盐0.05g
磷酸盐缓冲液200mmol/L pH7.010ml，其中含硫酸钠2wt％
将底物溶液1μl滴加在Φ4mm层析纸垫上，避光条件下，25℃流动空气干燥4小时，密封保存在2-8℃；
5)β-葡萄糖醛酸酶反应垫的制备：
底物溶液：5-溴-4-氯-3-吲哚-β-葡萄糖醛酸盐0.05g
磷酸盐缓冲液200mmol/L pH7.0 10ml，其中含乙二醇50mmol/L
将底物溶液1μl滴加在Φ4mm层析纸垫上，避光条件下，25℃流动空气干燥4小时，密封保存在2-8℃；
6)凝固酶反应垫的制备：
底物溶液：甘氨酰精氨酸β萘胺0.05g
Tris-HCl 200mmol/L pH 8.5 10ml
将底物溶液1μl滴加在Φ4mm层析纸垫上，避光条件下，25℃流动空气干燥4小时，密封保存在2-8℃；
7)将2)～6)制备的反应垫填入相应的反应孔中，用冲压机压实，在孔上粘贴铝箔保护膜，装入铝箔袋中，即得反应装置；
8)样品稀释液的制备：
Triton×100 20g
阿拉伯树胶 10g
防腐剂Proclin300 0.2g
蒸馏水 1000ml；
9)显色剂A的制备：
固紫B 1.5g
Triton×100 2g
PVPK30 4g
蒸馏水 1000ml
充分混匀，分装在深色瓶中；
10)显色剂B的制备：
固蓝B 1.5g
Triton×100 2g
PVPK30 4g
蒸馏水 1000ml
充分混匀，分装在深色瓶中。
本发明AV/BV联合检测试剂盒的使用方法为：
用棉签从阴道后穹隆取阴道分泌物，放入软塑料试管中，加入0.5ml样品稀释液，用手挤压试管，使分泌物与样品稀释液混匀，取出棉签，用吸管取稀释后的样品，滴加在反应装置的反应孔中，每孔1滴(约30μl)，在唾液酸苷酶孔中加入1滴(约30μl)显色剂A，将反应装置放在50℃干浴器上反应10min，在凝固酶反应孔中加1滴(约30μl)显色剂B，结果如表1所示：
表1
| 检测项目 | 阳性 | 阴性 |
| 过氧化氢 | 淡紫色 | 蓝色 |
| 唾液酸苷酶 | 紫色 | 无色 |
| 白细胞酯酶 | 蓝色 | 无色 |
| β-葡萄糖醛酸酶 | 蓝色 | 无色 |
| 凝固酶 | 紫色 | 浅黄色 |
结果表明：唾液酸苷酶阳性+过氧化氢阳性的为BV，过氧化氢阳性+白细胞酯酶阳性伴有β-葡萄糖醛酸酶、凝固酶阳性或其中之一阳性的为AV。
在本发明中，AV的主要致病菌金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、埃希氏大肠杆菌产生凝固酶GADP，B族链球菌和埃希氏大肠杆菌可产生β-葡萄糖醛酸酶；BV的主要致病菌消化链球菌、普雷沃菌和加德纳菌可产生唾液酸苷酶；白细胞酯酶是一种炎性反应指标，患AV时，阴道分泌物出现大量中毒白细胞，白细胞酯酶上升；两种阴道感染的致病菌均出现产过氧化氢的乳酸杆菌减少甚至消失的现象。基于这些研究结果，本发明建立了一种简便、快速的AV/BV联合测定试剂盒，包括过氧化氢的检测、唾液酸苷酶、白细胞酯酶、β-葡萄糖醛酸酶和凝固酶活性的检测。
本发明的优点在于，AV/BV联合检测试剂盒通过对过氧化氢的测定以及对唾液酸苷酶、白细胞酯酶、β-葡萄糖醛酸酶和凝固酶的活性的测定，从而直接鉴定出阴道分泌物中的需氧菌/厌氧菌和兼性厌氧菌等菌群，该方法操作简便快速，准确性高，适于临床常规特别是医院门诊的使用。
附图说明
图1为本发明AV/BV联合检测试剂盒的反应装置示意图，其中1代表反应基板，2为过氧化氢反应孔，3为唾液酸苷酶反应孔，4为白细胞酯酶反应孔，5为β-葡萄糖醛酸酶反应孔，6为凝固酶反应孔。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
实施例1 AV/BV联合测定试剂盒制备
1、过氧化氢反应垫的制备：
溶液A：二乙氨基对苯二胺10mg
α-萘酚20mg
无水乙醇10ml
溶液B：辣根过氧化物酶10000单位
失活纯化的牛血清白蛋白1g
Tris-HCl 200mmol/L pH7.0 10ml
将溶液A 1μl滴加在Φ4mm层析纸垫上，避光条件下，25℃流动空气干燥1小时后，在纸垫上滴加溶液B 1μl，避光条件下，25℃流动空气干燥4小时，密封保存在4℃；
2、唾液酸苷酶反应垫的制备：
底物溶液：5-溴-4-氯-3-吲哚-N-乙酰神经氨酸钠盐0.05g
乙酸盐溶液200mmol/L pH5.5 10ml，其中含NaCl0.2mol/L
将底物溶液1μl滴加在Φ4mm层析纸垫上，避光条件下，25℃流动空气干燥4小时，密封保存在4℃；
3、白细胞酯酶反应垫的制备：
底物溶液：5-溴-4-氯-3-吲哚-乙酸钠盐0.05g
磷酸盐缓冲液200mmol/L pH7.0 10ml，其中含硫酸钠2wt％
将底物溶液1μl滴加在Φ4mm层析纸垫上，避光条件下，25℃流动空气干燥4小时，密封保存在4℃；
4、β-葡萄糖醛酸酶反应垫的制备：
底物溶液：5-溴-4-氯-3吲哚-β-葡萄糖醛酸钠盐0.05g
磷酸盐缓冲液200mmol/L pH7.0 10ml，其中含乙二醇50mmol/L
将底物溶液1μl滴加在Φ4mm层析纸垫上，避光条件下，25℃流动空气干燥4小时，密封保存在4℃；
5、凝固酶反应垫的制备：
底物溶液：甘氨酰精氨酸β萘胺0.05g
Tris-HCl 200mmol/L pH 8.5 10ml
将底物溶液1μl滴加在Φ4mm层析纸垫上，避光条件下，25℃流动空气干燥4小时，密封保存在4℃；
6、反应装置的制备：
反应装置由ABS工程塑料制成，其上有5个Φ4mm的圆孔，从上至下分别在孔中填入上述过氧化氢反应垫、唾液酸苷酶反应垫、白细胞酯酶反应垫、β-葡萄糖醛酸酶反应垫和凝固酶反应垫，用冲压机压实，在孔上粘贴铝箔保护膜，装入铝箔袋中；
7、样品稀释液的制备：
Triton×100 20g
阿拉伯树胶 10g
防腐剂Proclin300 0.2g
蒸馏水 1000ml；
充分混匀，装入瓶中。
8、显色剂A的制备：
固紫B 1.5g
Triton×100 2g
PVPK30 4g
蒸馏水 1000ml
充分混匀，分装在黑色瓶中；
9、显色剂B的制备：
固蓝B 1.5g
Triton×100 2g
PVPK30 4g
蒸馏水 1000ml
充分混匀，分装在黑色瓶中。
实施例2使用AV/BV联合测定试剂盒检测阴道分泌物中需氧菌/厌氧菌和兼性厌氧菌的准确性
1、分别采用临床和微生物学检验方法和本发明AV/BV联合测定试剂盒检测阴道分泌物中细菌菌群的结果如表2所示，准确性按下式计算：
敏感性＝D÷(C+D)×100％；特异性＝A÷(A+B)×100％
表2
对五组人群进行检测，分别为正常育龄妇女67例(第1组)、BV患者51例(第2组)、AV患者44例(第3组)，白色假丝酵母菌阴道炎VVC患者52例(第4组)和滴虫性阴道炎TV患者31例(第5组)，取阴道分泌物，用本发明试剂盒进行检测，结果如表3所示：
表3
2、分别采用临床和微生物学检验方法和唾液酸苷酶单项阳性检测BV的方法检测上述人群阴道分泌物中细菌菌群的结果如表4所示：
表4
敏感性＝49÷51×100％＝96％；特异性＝153÷194×100％＝78.8％
可见采用唾液酸苷酶单项阳性检测BV的特异度较差，且有28％的VVC患者(52例VVC患者中有15例唾液酸苷酶阳性)和35％的TV患者(31例TV患者中有11例唾液酸苷酶阳性)被误诊为BV。
3、依据本发明，唾液酸苷酶阳性、过氧化氢阳性者为BV；过氧化氢阳性、白细胞酯酶阳性并伴有凝固酶阳性、β-葡萄糖醛酸酶阳性或其中之一阳性者为AV，进行分析的结果如表5所示：
表5
(1)采用本发明AV/BV联合测定试剂盒检测阴道分泌物中BV的结果如表6所示，BV的准确度按下式计算：
表6
敏感性＝47÷51×100％＝92％；特异性＝188÷194×100％＝97％
(2)采用本发明AV/BV联合测定试剂盒检测阴道分泌物中AV的结果如表7所示，AV的准确度按下式计算：
表7
敏感性＝41÷44×100％＝93％；特异性＝195÷201×100％＝97％
由此可见，采用本发明的试剂盒可以有效提高AV、BV的检测准确度。
虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
Claims (11)
1.一种检测阴道分泌物中细菌菌群的试剂盒，其包括：
1)反应装置
所述反应装置具有过氧化氢反应孔、唾液酸苷酶反应孔、白细胞酯酶反应孔、β-葡萄糖醛酸酶反应孔和凝固酶反应孔；
2)一种或多种显色剂。
2.如权利要求1所述的试剂盒，其还包括样品稀释液。
3.如权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于，所述反应装置的过氧化氢反应孔包被有辣根过氧化物酶和二乙氨基对苯二胺。
4.如权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于，所述反应装置的唾液酸苷酶反应孔包被有5-溴-4-氯-3-吲哚-N-乙酰神经氨酸盐，其对应的显色剂A为固紫B或固红TR。
5.如权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于，所述反应装置的白细胞酯酶反应孔包被有5-溴-4-氯-3-吲哚-乙酸盐。
6.如权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于，所述反应装置的β-葡萄糖醛酸酶反应孔包被有5-溴-4-氯-3-吲哚-β-葡萄糖醛酸盐。
7.如权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于，所述反应装置的凝固酶反应孔包被有甘氨酰精氨酸β萘胺，其对应的显色剂B为固蓝B、固红B、固蓝BB或固蓝RR。
8.如权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述样品稀释液中含有Triton×100和树胶。
9.如权利要求1～8任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述反应装置按如下方法制备获得：
1)反应基板的制备：
反应基板由ABS工程塑料制成，其上有5个Φ4mm的圆孔，分别为过氧化氢反应孔、唾液酸苷酶反应孔、白细胞酯酶反应孔、β-葡萄糖醛酸酶反应孔和凝固酶反应孔，在每个反应孔中填入下述相应的反应垫；
2)过氧化氢反应垫的制备：
溶液A：二乙氨基对苯二胺10mg
α-萘酚20mg
无水乙醇10ml
溶液B：辣根过氧化物酶10000单位
失活纯化的牛血清白蛋白1g
Tris-HCl 200mmol/L pH7.010ml
将溶液A 1μl滴加在Φ4mm层析纸垫上，避光条件下，25℃流动空气干燥1小时后，在纸垫上滴加溶液B 1μl，避光条件下，25℃流动空气干燥4小时，密封保存在2-8℃；
3)唾液酸苷酶反应垫的制备：
底物溶液：5-溴-4-氯-3-吲哚-N-乙酰神经氨酸盐0.05g
乙酸盐溶液200mmol/L pH5.5 10ml，其中含NaCl0.2mol/L
将底物溶液1μl滴加在Φ4mm层析纸垫上，避光条件下，25℃流动空气干燥4小时，密封保存在2-8℃；
4)白细胞酯酶反应垫的制备：
底物溶液：5-溴-4-氯-3-吲哚-乙酸盐0.05g
磷酸盐缓冲液200mmol/L pH7.010ml，其中含硫酸钠2wt％
将底物溶液1μl滴加在Φ4mm层析纸垫上，避光条件下，25℃流动空气干燥4小时，密封保存在2-8℃；
5)β-葡萄糖醛酸酶反应垫的制备：
底物溶液：5-溴-4-氯-3-吲哚-β-葡萄糖醛酸盐0.05g
磷酸盐缓冲液200mmol/L pH7.010ml，其中含乙二醇50mmol/L
将底物溶液1μl滴加在Φ4mm层析纸垫上，避光条件下，25℃流动空气干燥4小时，密封保存在2-8℃；
6)凝固酶反应垫的制备：
底物溶液：甘氨酰精氨酸β萘胺0.05g
Tris-HCl 200mmol/L pH 8.510ml
将底物溶液1μl滴加在Φ4mm层析纸垫上，避光条件下，25℃流动空气干燥4小时，密封保存在2-8℃；
将2)～6)制备的反应垫填入相应的反应孔中，用冲压机压实，在孔上粘贴铝箔保护膜，装入铝箔袋中，即得反应装置。
10.制备权利要求1～9任一项所述试剂盒的方法，其包括如下步骤：
1)反应基板的制备：
反应基板由ABS工程塑料制成，其上有5个Φ4mm的圆孔，分别为过氧化氢反应孔、唾液酸苷酶反应孔、白细胞酯酶反应孔、β-葡萄糖醛酸酶反应孔和凝固酶反应孔，在每个反应孔中填入下述相应的反应垫；
2)过氧化氢反应垫的制备：
溶液A：二乙氨基对苯二胺10mg
α-萘酚20mg
无水乙醇10ml
溶液B：辣根过氧化物酶10000单位
失活纯化的牛血清白蛋白1g
Tris-HCl 200mmol/L pH7.010ml
将溶液A 1μl滴加在Φ4mm层析纸垫上，避光条件下，25℃流动空气干燥1小时后，在纸垫上滴加溶液B 1μl，避光条件下，25℃流动空气干燥4小时，密封保存在2-8℃；
3)唾液酸苷酶反应垫的制备：
底物溶液：5-溴-4-氯-3-吲哚-N-乙酰神经氨酸盐0.05g
乙酸盐溶液200mmol/L pH5.5 10ml，其中含NaCl0.2mol/L
将底物溶液1μl滴加在Φ4mm层析纸垫上，避光条件下，25℃流动空气干燥4小时，密封保存在2-8℃；
4)白细胞酯酶反应垫的制备：
底物溶液：5-溴-4-氯-3-吲哚-乙酸盐0.05g
磷酸盐缓冲液200mmol/L pH7.010ml，其中含硫酸钠2wt％
将底物溶液1μl滴加在Φ4mm层析纸垫上，避光条件下，25℃流动空气干燥4小时，密封保存在2-8℃；
5)β-葡萄糖醛酸酶反应垫的制备：
底物溶液：5-溴-4-氯-3-吲哚-β-葡萄糖醛酸盐0.05g
磷酸盐缓冲液200mmol/L pH7.010ml，其中含乙二醇50mmol/L
将底物溶液1μl滴加在Φ4mm层析纸垫上，避光条件下，25℃流动空气干燥4小时，密封保存在2-8℃；
6)凝固酶反应垫的制备：
底物溶液：甘氨酰精氨酸β萘胺0.05g
Tris-HCl 200mmol/L pH8.5 10ml
将底物溶液1μl滴加在Φ4mm层析纸垫上，避光条件下，25℃流动空气干燥4小时，密封保存在2-8℃；
7)将2)～6)制备的反应垫填入相应的反应孔中，用冲压机压实，在孔上粘贴铝箔保护膜，装入铝箔袋中，即得反应装置；
8)样品稀释液的制备：
Triton×100 20g
阿拉伯树胶 10g
防腐剂Proclin300 0.2g
蒸馏水 1000ml；
9)显色剂A的制备：
固紫B 1.5g
Triton×100 2g
PVPK30 4g
蒸馏水 1000ml
充分混匀，分装在深色瓶中；
10)显色剂B的制备：
固蓝B 1.5g
Triton×100 2g
PVPK30 4g
蒸馏水 1000ml
充分混匀，分装在深色瓶中。
11.权利要求1～9任一项所述试剂盒在检测阴道分泌物中需氧菌/厌氧菌和兼性厌氧菌中的应用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN200910244266XA CN101792791B (zh) | 2009-12-30 | 2009-12-30 | 一种检测阴道分泌物中细菌菌群的试剂盒及其制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN200910244266XA CN101792791B (zh) | 2009-12-30 | 2009-12-30 | 一种检测阴道分泌物中细菌菌群的试剂盒及其制备方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN101792791A true CN101792791A (zh) | 2010-08-04 |
| CN101792791B CN101792791B (zh) | 2011-12-21 |
Family
ID=42585705
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN200910244266XA Active CN101792791B (zh) | 2009-12-30 | 2009-12-30 | 一种检测阴道分泌物中细菌菌群的试剂盒及其制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN101792791B (zh) |
Cited By (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102251022A (zh) * | 2011-06-23 | 2011-11-23 | 泰普生物科学（中国）有限公司 | 一种阴道炎快速检测试剂盒 |
| CN102251021A (zh) * | 2011-06-23 | 2011-11-23 | 泰普生物科学（中国）有限公司 | 一种细菌性阴道病检测试剂盒及唾液酸酶检测方法 |
| CN102690861A (zh) * | 2011-03-25 | 2012-09-26 | 安徽深蓝医疗科技有限公司 | 一种细菌性阴道病系列妇检试剂盒及其应用方法 |
| CN102864208A (zh) * | 2012-08-31 | 2013-01-09 | 北京中生金域诊断技术有限公司 | Av/bv联合检测试剂盒的质控品及其制备方法 |
| CN104792986A (zh) * | 2015-02-14 | 2015-07-22 | 江苏宜偌维盛生物技术有限公司 | 一种阴道炎多项指标联合检测试剂盒 |
| CN104946727A (zh) * | 2015-05-19 | 2015-09-30 | 浙江亚培生物技术有限公司 | 一种需氧菌性及细菌性阴道病联合测定试剂盒 |
| CN105039497A (zh) * | 2015-05-25 | 2015-11-11 | 陕西阳光生物工程股份有限公司 | 细菌性阴道病联合检测试剂及使用该试剂的方法 |
| CN107779494A (zh) * | 2017-11-02 | 2018-03-09 | 北京中生金域诊断技术股份有限公司 | 一种检测感染性阴道炎的试剂盒及其制备方法 |
| CN107907682A (zh) * | 2017-11-02 | 2018-04-13 | 北京中生金域诊断技术股份有限公司 | 用于区分阴道分泌物中革兰氏菌的检测试剂盒及制备方法 |
| CN109265373A (zh) * | 2018-11-03 | 2019-01-25 | 郑州安图生物工程股份有限公司 | 一种氨基酸类底物及其制备方法和用途 |
| CN109490519A (zh) * | 2018-10-16 | 2019-03-19 | 迪瑞医疗科技股份有限公司 | 一种白细胞酯酶检测试纸及其制备方法 |
| CN113136007A (zh) * | 2021-03-26 | 2021-07-20 | 林轩 | 一种易干燥的带孔型abs接支聚合物颗粒的制备方法 |
| CN114317678A (zh) * | 2021-12-31 | 2022-04-12 | 港龙生物技术（深圳）有限公司 | 一种生物纸芯片、高通量多联检测微孔板装置、制备方法及用于阴道炎症多联检测的试剂盒 |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1850985A (zh) * | 2006-03-07 | 2006-10-25 | 北京中生金域诊断技术有限公司 | 细菌性阴道病联合测定试剂盒 |
| CN200996962Y (zh) * | 2007-01-26 | 2007-12-26 | 郑州安图绿科生物工程有限公司 | 阴道炎联检卡 |
| CN101294952A (zh) * | 2007-04-23 | 2008-10-29 | 廖秦平 | 一种新的阴道微生态评价体系、以及一种用于测评阴道微生态的试剂盒 |
| CN101320040A (zh) * | 2008-07-18 | 2008-12-10 | 杭州健宝医疗器械有限公司 | 妇科多项目干化学联合检测试纸条及测定方法 |
| CN201247244Y (zh) * | 2008-07-18 | 2009-05-27 | 杭州健宝医疗器械有限公司 | 妇科多项目干化学联合检测试纸条 |
| CN201289483Y (zh) * | 2008-08-15 | 2009-08-12 | 农高惠 | 细菌性阴道病四项联合检测反应板 |
| CN101487041A (zh) * | 2009-02-26 | 2009-07-22 | 广州鸿琪光学仪器科技有限公司 | 细菌性阴道病联合检测试剂 |
-
2009
- 2009-12-30 CN CN200910244266XA patent/CN101792791B/zh active Active
Cited By (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102690861A (zh) * | 2011-03-25 | 2012-09-26 | 安徽深蓝医疗科技有限公司 | 一种细菌性阴道病系列妇检试剂盒及其应用方法 |
| CN102251022A (zh) * | 2011-06-23 | 2011-11-23 | 泰普生物科学（中国）有限公司 | 一种阴道炎快速检测试剂盒 |
| CN102251021A (zh) * | 2011-06-23 | 2011-11-23 | 泰普生物科学（中国）有限公司 | 一种细菌性阴道病检测试剂盒及唾液酸酶检测方法 |
| CN102864208A (zh) * | 2012-08-31 | 2013-01-09 | 北京中生金域诊断技术有限公司 | Av/bv联合检测试剂盒的质控品及其制备方法 |
| CN102864208B (zh) * | 2012-08-31 | 2014-02-19 | 北京中生金域诊断技术有限公司 | Av/bv联合检测试剂盒的质控品及其制备方法 |
| CN104792986A (zh) * | 2015-02-14 | 2015-07-22 | 江苏宜偌维盛生物技术有限公司 | 一种阴道炎多项指标联合检测试剂盒 |
| CN104946727A (zh) * | 2015-05-19 | 2015-09-30 | 浙江亚培生物技术有限公司 | 一种需氧菌性及细菌性阴道病联合测定试剂盒 |
| CN105039497A (zh) * | 2015-05-25 | 2015-11-11 | 陕西阳光生物工程股份有限公司 | 细菌性阴道病联合检测试剂及使用该试剂的方法 |
| CN107779494A (zh) * | 2017-11-02 | 2018-03-09 | 北京中生金域诊断技术股份有限公司 | 一种检测感染性阴道炎的试剂盒及其制备方法 |
| CN107907682A (zh) * | 2017-11-02 | 2018-04-13 | 北京中生金域诊断技术股份有限公司 | 用于区分阴道分泌物中革兰氏菌的检测试剂盒及制备方法 |
| CN107779494B (zh) * | 2017-11-02 | 2021-08-17 | 北京中生金域诊断技术股份有限公司 | 一种检测感染性阴道炎的试剂盒及其制备方法 |
| CN109490519A (zh) * | 2018-10-16 | 2019-03-19 | 迪瑞医疗科技股份有限公司 | 一种白细胞酯酶检测试纸及其制备方法 |
| CN109265373A (zh) * | 2018-11-03 | 2019-01-25 | 郑州安图生物工程股份有限公司 | 一种氨基酸类底物及其制备方法和用途 |
| CN113136007A (zh) * | 2021-03-26 | 2021-07-20 | 林轩 | 一种易干燥的带孔型abs接支聚合物颗粒的制备方法 |
| CN114317678A (zh) * | 2021-12-31 | 2022-04-12 | 港龙生物技术（深圳）有限公司 | 一种生物纸芯片、高通量多联检测微孔板装置、制备方法及用于阴道炎症多联检测的试剂盒 |
| CN114317678B (zh) * | 2021-12-31 | 2023-11-10 | 港龙生物技术（深圳）有限公司 | 一种生物纸芯片、高通量多联检测微孔板装置、制备方法及用于阴道炎症多联检测的试剂盒 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN101792791B (zh) | 2011-12-21 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN101792791B (zh) | 一种检测阴道分泌物中细菌菌群的试剂盒及其制备方法 | |
| CN102864208B (zh) | Av/bv联合检测试剂盒的质控品及其制备方法 | |
| Ilkit et al. | The epidemiology, pathogenesis, and diagnosis of vulvovaginal candidosis: a mycological perspective | |
| CN107779494B (zh) | 一种检测感染性阴道炎的试剂盒及其制备方法 | |
| Schwiertz et al. | Throwing the dice for the diagnosis of vaginal complaints? | |
| Millar et al. | Urinary tract infections complicating pregnancy | |
| Zurawski et al. | Invasive group A streptococcal disease in metropolitan Atlanta: a population-based assessment | |
| CN101792792B (zh) | 一种检测阴道分泌物中需氧菌群的试剂盒及其制备方法 | |
| Stuart | Transport medium for specimens in public health bacteriology | |
| CN207894938U (zh) | 重氮盐法β-葡萄糖醛酸酶干化学试纸 | |
| CN102321731B (zh) | 一种阴道炎检测试剂盒及其制备方法 | |
| WO2018001215A1 (zh) | 检测细菌性阴道病的试剂盒 | |
| CN201400688Y (zh) | 一种阴道炎联检卡 | |
| CN113030076B (zh) | 一种阴道分泌物多联检测试纸、制备方法及其测试方法 | |
| CN103266163B (zh) | 一种检测鉴别念珠菌和滴虫的联检试剂盒 | |
| CN104946727A (zh) | 一种需氧菌性及细菌性阴道病联合测定试剂盒 | |
| CN201514383U (zh) | 一种阴道炎快速检测装置 | |
| Sweet | Importance of differential diagnosis in acute vaginitis | |
| Font et al. | Catalase activity as a predictor of amniotic fluid culture results in preterm labor or premature rupture of membranes | |
| CN200996962Y (zh) | 阴道炎联检卡 | |
| Romero et al. | The clinical value of gas-liquid chromatography in the detection of intra-amniotic microbial invasion | |
| Zhao et al. | Mycobiome study reveals different pathogens of vulvovaginal candidiasis shape characteristic vaginal bacteriome | |
| CN101748188A (zh) | 一种细菌性阴道病的联合检测试剂 | |
| CN101294952A (zh) | 一种新的阴道微生态评价体系、以及一种用于测评阴道微生态的试剂盒 | |
| CN204714784U (zh) | 一种阴道炎联合测定试剂盒 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| C56 | Change in the name or address of the patentee | ||
| CP03 | Change of name, title or address |
Address after: 102200 No. 6, Spark Street, Changping District science and Technology Park, Beijing Patentee after: BEIJING ZHONGSHENG JINYU DIAGNOSIS TECHNOLOGY CO., LTD. Address before: 102200 Beijing City, Changping District science and Technology Park Beikong science and Technology Building Room 606 Patentee before: Beijing Zhongsheng Jinyu Diagnosis Technology Co., Ltd. |
|
| CB03 | Change of inventor or designer information |
Inventor after: Wang Jiayi Inventor after: Ling Yan Inventor after: Wu Haiyan Inventor after: Wang Shanshan Inventor after: Guo Zhifang Inventor after: Song Jincai Inventor after: Zhang Limei Inventor before: Wang Jiayi Inventor before: Guo Zhifang Inventor before: Song Jincai Inventor before: Zhang Limei |
|
| CB03 | Change of inventor or designer information |