CN101775007B - 具有hiv拮抗活性的三环烯类化合物及其制备方法与应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种具有HIV拮抗活性的三环烯类化合物及其制备方法与应用。该化合物的结构式如式I所示，其中，R为烷基、环烷基、杂芳基、取代的烷基、取代的苯基或取代的杂芳基；所述取代的烷基中的取代基选自下述任意一种：烷氧基、取代或未取代的苯氧基、环烷基、杂芳基、取代的环烷基、取代的杂芳基和取代的氨基。体外HIV-1感染的细胞模型测试活性表明，这些化合物是强效的HIV拮抗剂，可作为抑制HIV病毒复制的抑制剂，并可发展为抗艾滋病药物。

Description

具有HIV拮抗活性的三环烯类化合物及其制备方法与应用

技术领域

本发明涉及具有HIV拮抗活性的三环烯类化合物及其制备方法与应用。

背景技术

艾滋病流行情况

根据2006年5月联合国艾滋病规划署(Joint United Nations Programme onHIV/AIDS，UNAIDS)公布数据预测，截至2008年底，全世界估计有3320万艾滋病病毒感染者和艾滋病人。2008年新发生的感染为270万，死亡人数为200万。自艾滋病发现以来，全世界累计死于艾滋病的人已达2500万。艾滋病现已成为世界上仅次于心脏病、脑卒中和急性下呼吸道感染的第四个主要死亡原因，是世界上造成死亡最多的传染病。根据卫生部公布的《中国艾滋病防治联合评估报告(2007年)》，截至2007年10月底，全国累计报告艾滋病病毒感染者和艾滋病患者223501例，其中2007年新发艾滋病病毒感染者5万人，因艾滋病死亡2万人。《中国艾滋病防治联合评估报告(2007年)》估计目前我国现存艾滋病病毒感染者和病人约70万。

至今为止，已有25种抗HIV-1药物以及5种由这些药物组成的复方制剂被美国食品及药物管理局(Food and Drug Administration，FDA)批准应用于临床。根据作用机制，这些药物可分为4类，第1类是抑制HIV逆转录酶活性的药物，如齐多夫定(AZT)、去羟肌苷(DDI)、拉米夫定(DDC)等；第2类是抑制病毒蛋白水解的蛋白酶抑制剂，如沙奎那韦(Saquinavir)、利托那韦(Ritonavir)等；第3类是阻止病毒进入的HIV-1进入抑制剂，该类药物目前有T-20和Selzentry(Tilton，J.C.，et al.Antiviral Res，2009，doi：10.1016/j.antiviral.2009.07.022)；第4类是HIV-1整合酶抑制剂，该类药物目前有Isentress等。

各类抗HIV药物的研究进展

逆转录酶抑制剂

逆转录酶抑制剂与HIV的逆转录酶(HIV RT)有很高的亲和力，通过与RT结合而抑制其逆转录作用，从而提前终止病毒DNA的合成，抑制HIV的复制。逆转录酶抑制剂可分为核苷类逆转录酶抑制剂(NRTIs)和非核苷类逆转录酶抑制剂(NNRTIs)。核苷类似物是首先用来寻找抗HIV药物的一类化合物，首先用于临床的抗艾滋病药物是齐多夫定(AZT)(1986年FDA批准)。目前FDA批准的另外6个NRTIs是司他夫定(D4T)、扎西他滨(DDC)、拉米夫定(3TC)、去羟肌苷(DDI)、阿巴卡韦(Abacavir)、恩曲他滨(Emtricitabine)(Prajapati，D.G.，Bioorg.Med.Chem，17(2009)：5744-5762)。

近年来，一系列化学结构各异，但能高度专一地抑制HIV-1逆转录酶(RT)的非核苷类化合物得到广泛的研究(de Béthune，M.-P.，Antiviral Res，2009，doi：10.1016/j.antiviral.2009.09.008)。奈韦拉平(Nevirapine)是首先通过临床试验上市的一种NNRTIs，主要与核苷类似物联用治疗AIDS。FDA批准的NNRTIs还有依法韦仑(efavirenz)和地拉夫定(delavirdine)。

蛋白酶抑制剂(PIs)

HIV-1蛋白酶在病毒的成熟加工中起关键性的作用，抑制HIV-1蛋白酶会产生不成熟、无感染性的病毒颗粒并导致病毒繁殖的终止。美国FDA批准用于治疗艾滋病的HIV蛋白酶抑制剂有沙奎那韦(saquinavir)、安普那韦(amprenavir)、奈非那韦(nelfinavir)、茚地那韦(indinavir)、罗品那韦(lopinavir)、利托那韦(ritonavir)、阿扎那韦(atazanavir)、福沙那韦(fosamprenavir)、地瑞那韦(darunavir)(A.Hughes et al，J.Infect，2008，57：1-10)。这些蛋白酶抑制剂模拟了HIV蛋白酶的天然底物结构，通过抑制蛋白的后转录裂解从而阻止了新病毒的组装。

进入抑制剂

能抑制HIV-1进入靶细胞的这一类抗艾滋病药物被统称为HIV-1进入抑制剂(HIV entry inhibitors)。HIV gp120、gp41、CD4、CCR5、CXCR4均可以作为HIV进入抑制剂的药物作用靶点。根据这类药物作用于HIV进入的不同阶段，可将它们分为粘附抑制剂，HIV辅助受体拮抗剂和融合抑制剂(Moore，J.P et al.，Proc.Natl.Acad.Sci，2003，100(19)：10598-10602)。

Enfuvirtide(T-20，fuzeon)是第一个被FDA批准用来用来治疗艾滋病患者的进入抑制剂，它模拟了HIV-1gp41膜融合过程中的关键区域127-162的氨基酸序列，人工合成而得。Selzentry是目前唯一被FDA批准的CCR5抑制剂，它可以通过抑制CCR5受体从而阻断HIV的感染进程(JoséA Esté，Amalio Telenti，Lancet，2007，370：81-88)。

整合酶抑制剂

HIV-1整合酶(IN)是逆转录过程中重要的酶，它涉及到将HIV DNA整合到宿主细胞染色体DNA的过程。整合酶抑制剂是一新类型的HIV抑制剂，它可通过抑制病毒DNA的链转移从而阻止HIV DNA复制整合到宿主细胞DNA中。在过去的十多年中，一系列的整合酶抑制剂被发现，目前已经上市的药物有Selzentry，它对其它类型药物有耐受的HIV-1有抑制作用。

由于HIV病毒变异快，目前临床的抗HIV药物对不同的病人及在不同治疗进程中表现一定的耐药性。研发低毒副作用、低耐药性及新靶点药物仍是抗HIV药物的重要发展方向。

发明内容

本发明的目的是提供异吲哚基取代的苯甲酰胺类化合物及其制备方法。

本发明所提供的异吲哚基取代的苯甲酰胺类化合物的结构式如式I所示：

其中，R为烷基、环烷基、杂芳基、取代的烷基、取代的苯基或取代的杂芳基；

所述取代的烷基中的取代基选自下述任意一种：烷氧基、取代或未取代的苯氧基、环烷基、杂芳基、取代的环烷基、取代的杂芳基和取代的氨基。

所述R进一步可选自下述基团：含有至少一个成环氮原子的5-、6-、9-或10-元环烷基，含有至少一个成环氮原子的5-、6-、9-或10-元取代的杂芳基，含有至少一个成环氮原子的5-、6-、9-或10-元取代的或未取代的杂芳基烷基，被1个或2个相同或不同的下述基团取代的氨基烷基：烷基、苯基、取代的苯基和苄基，取代的苯氧基。

所述R最优选自下述任意一种基团：

式I所示的化合物药学上可接受的盐或其溶剂化合物(如水合物)也属于本发明的保护范围。

式I所示化合物的制备方法，是以N，N-二异丙基乙胺为催化剂，使式VII所示的托烷酸酐(Jordan et al，WO2004/112718)与式XII所示的化合物在加热回流的条件下进行反应，得到式I所示化合物；

式XII中，R为烷基、环烷基、杂芳基、取代的烷基、取代的苯基或取代的杂芳基；所述取代的烷基中的取代基选自下述任意一种：烷氧基、取代或未取代的苯氧基、环烷基、杂芳基、取代的环烷基、取代的杂芳基和取代的氨基。

所述反应在有机溶剂中进行，所述有机溶剂具体可为乙醇。

当式XII所示的化合物具体为式VI所示的化合物时

式VI中，X为N或O原子；R₁为烷基、苯基、苄基、含有至少一个成环氮原子的5-、6-、9-或10-元环烷基、含有至少一个成环氮原子的5-、6-、9-或10-元取代的杂芳基或杂芳基烷基。

式VI所示化合物可通过下述方法制备得到(反应流程图见图1)：

对甲基苯甲酸甲酯I与溴代丁二酰亚胺在四氯化碳溶液中搅拌过夜，得到溴代产物III。用DIEA作碱，使化合物III和二级胺在二氯甲烷溶液中反应得到化合物V，化合物V再与水合肼在乙醇溶液中回流得到对位引入取代基的苯甲酰肼VI。

当式XII所示的化合物具体为式XI所示的化合物时

式XI中，R₂为含有至少一个成环氮原子的5-、6-、9-或10-元取代的杂芳基。

式XI所示的化合物可由下述方法制备得到(反应流程图见图2)：对氨基苯甲酸甲酯I化合物IX通过一系列反应在氨基上引入多种取代，得到式XI所示化合物。

本发明的再一个目的是提供式I所示化合物的应用。

本发明所提供的式I化合物或其药学上可接受的盐或其溶剂化合物可用于制备HIV-1抑制剂、制备预防和/或治疗艾滋病的药物以及制备治疗获得性免疫缺陷综合症(AIDS)的药物。

以式I化合物或其药学上可接受的盐或其溶剂化合物为活性成分制备的抗艾滋病药物或HIV-1抑制剂，也属于本发明的保护范围。

所述抗艾滋病药物可通过注射、喷射、滴鼻、滴眼、渗透、吸收、物理或化学介导的方法导入机体如肌肉、皮内、皮下、静脉、粘膜组织；或是被其他物质混合或包裹后导入机体。

需要的时候，在上述药物中还可以加入一种或多种药学上可接受的载体。所述载体包括药学领域常规的稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂等。

用式I化合物或其药学上可接受的盐或其溶剂化合物制备的抗艾滋病药物可以制成注射液、片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊、口服液、膏剂、霜剂等多种形式。上述各种剂型的药物均可以按照药学领域的常规方法制备。

本发明的发明人以抗痘病毒药物ST-246为先导化合物(R.B.Thomas，et al.J.Med.Chem，2007，50：1442-1444)，经过对处于苯环对位的三氟甲基进行改造，设计与合成了式I化合物，经体外HIV-1感染的细胞模型测试活性表明，这些化合物是强效的HIV拮抗剂，可作为抑制HIV病毒复制的抑制剂，并可发展为抗艾滋病药物。

附图说明

图1为制备式I所示化合物的反应流程图。

图2为制备式XI所示化合物的反应流程图。

图3为化合物1的质谱图。

图4为化合物2的质谱图。

具体实施方式

本发明中的化合物可通过本领域已知的方法或通过下面的实施例中描述的方

法来制备本发明的化合物。下面的实施例不应被理解为是对本发明的限制。

下述实施例中所述方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。

下述实施例中溶剂和试剂的缩写如下：乙醇(EtOH)；甲醇(MeOH)；乙酸乙酯(EtOAc)；溴代丁二酰亚胺(NBS)；N，N-二异丙基乙胺(DIEA)；石油醚(PetroleumEther)；RT为室温；D.M.H₂O为去离子水。

实施例1

化合物1：N-(3，3a，4，4a，5，5a，6，6a十氢-1，3-二氧-4，6-亚乙烯基环丙【f】异吲哚-2(1H)-基)-4-(2-甲基哌嗪-1-甲基)苯甲酰胺

步骤1：对溴甲基苯甲酸甲酯

向对甲基苯甲酸甲酯(3.07g，20mmol)的四氯化碳(30ml)的溶液中，加入N-溴代丁二酰亚胺(4.14g，23mmol)，加热回流6h。然后将反应液冷却，过滤，用四氯化碳洗涤三次(每次10ml)，收集滤液，旋干，得到黄色油状的对溴甲基苯甲酸甲酯(4.22g，产率90％)，不需要纯化，可直接进行下一步反应。

步骤2：4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯甲酸甲酯

搅拌下向对溴甲基苯甲酸甲酯(4.22g，18mmol)和DIEA(5ml，29mmol)的二氯甲烷(35ml)溶液中，滴加2.22ml(20mmol)N-甲基哌嗪。滴加完毕后，室温下反应过夜。之后向反应液中滴加2M盐酸调节PH至5.0，EtOAc(20ml)萃取反应液，弃去有机相。水相中滴加浓氨水调节PH值至10.0，用EtOAc(25ml)萃取3次，合并有机相，无水Na₂SO₄干燥。过滤，旋干溶剂，得到黄色油状液体，即为小标题化合物(2.29g，产率50％)，不需要纯化，可直接进行下一步反应。

步骤3：4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯甲酰肼

向4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯甲酸甲酯(2.29g，10mmol)的EtOH(10ml)溶液中，加入85％的水合肼(2ml，30mmol)。加热回流1h，然后旋干溶剂，得到黄色固体1.44g。粗品用乙酸乙酯和石油醚(1∶1)的混合溶剂结晶，得到白色针状产品(1.13g，产率49.3％)，mp：132-133℃。

步骤4：化合物1的合成

向4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯甲酰肼(0.3719g，1.5mmol)的EtOH(5ml)溶液中，加入中间体VII托烷酸酐(0.2298，1.2mmol)以及2滴DIEA。加热回流6h，然后旋干，得到白色残留物。柱层析分离(CH₃OH∶CH₂Cl₂＝1∶5，v/v)，得到白色晶状固体(0.48g，产率76％)，mp：123-124℃。

结构确证数据如下：

¹H NMR(400Hz，CDCl₃)：δ7.79(d，J＝8.4Hz，2H，Ar-H)，7.38(d，J＝8.4Hz，2H，Ar-H)，5.84(t，J＝3.6Hz，2H，CH＝CH)，3.53(s，2H，Ar-CH₂)，3.46(s，2H，2×COCH)，3.14(s，2H，2×CH-CH＝CH)，2.50(m，8H，piperazine-H)，2.34(s，3H，CH₃)，1.14(d，J＝4Hz，2H，2×CH-CH₂)，0.32(m，2H，CH₂).

MS(FAB，Glycerin)m/z计算值C₂₄H₂₈N₄O₃(M+1)：421.5，测量值：421.3。

实施例2

化合物2：N-(3，3a，4，4a，5，5a，6，6a十氢-1，3-二氧-4，6-亚乙烯基环丙【f】异吲哚-2(1H)-基)-4-((1氢-苯并咪唑-1-基)甲基)苯甲酰胺

合成方法基本同化合物1，只需将实施例步骤2)中的N-甲基哌嗪替换成苯并咪唑即可。产率60％，mp：272-274℃。

结构确证数据如下：

¹H NMR(400Hz，d⁶-DMSO)：δ11.05(s，1H，CONH)，8.42(s，H，imidazol-2-H)，7.85(m，2H，Ar-H)，7.67(m，1H，Ar-H)，7.42(m，3H，Ar-H)，7.20(m，2H，Ar-H)，5.78(s，2H，CH＝CH)，5.60(s，2H，Ar-CH₂)，3.32(m，4H，2×COCH，2×CH-CH＝CH)，1.07(s，2H，2×CH-CH₂)，0.26(m，2H，CH₂).

MS(FAB，Glycerin)m/z计算值C₂₆H₂₂N₄O₃(M+1)：439.5，测量值：439.2(M+1)。

实施例3

化合物3：N-(3，3a，4，4a，5，5a，6，6a十氢-1，3-二氧-4，6-亚乙烯基环丙【f】异吲哚-2(1H)-基)-4-((2-甲基-1氢-苯并咪唑-1-基)甲基)苯甲酰胺

合成方法基本同化合物1，只需将实施例步骤2)中的N-甲基哌嗪替换成2-甲基苯并咪唑即可。产率74％，mp：261-262℃。

结构确证数据如下：

¹H NMR(400Hz，CDCl₃)：δ10.62(s，1H，CONH)，7.88(d，J＝8.0Hz，2H，Ar-H)，7.68(d，J＝7.6Hz，1H，Ar-H)，7.23(m，3H，Ar-H)，6.94(d，J＝7.6Hz，2H，Ar-H)，5.68(s，2H，CH＝CH)，5.35(s，2H，Ar-CH₂)，3.43(s，2H，2×COCH)，3.12(s，2H，2×CH-CH＝CH)，2.35(s，3H，CH₃)，1.11(d，J＝4.4Hz，2H，2×CH-CH₂)，0.28(m，2H，CH₂).

MS(Turbo Spray)m/z calcd for C₂₇H₂₄N₄O₃计算值：453.5，测量值：453.1。

实施例4

化合物4：N-(3，3a，4，4a，5，5a，6，6a十氢-1，3-二氧-4，6-亚乙烯基环丙【f】异吲哚-2(1H)-基)-4-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)苯甲酰胺

步骤1：4-(2，5-二甲基吡咯)苯甲酸甲酯

向对氨基苯甲酸甲酯(0.3g，2mmol)的冰醋酸(10ml)溶液中，加入2，5-己二酮(0.26g，2.2mmol)，加热回流过夜。停止反应，向反应液中加入30ml水，二氯甲烷(20ml)萃取三次，合并有机相，用硫酸钠干燥并在减压下浓缩。浓缩物经柱层析分离(乙酸乙酯/石油醚＝1/10(v/v))，得白色纯品(0.3g，产率67.3％)。

步骤2同化合物1步骤3，步骤3同化合物步骤4。

目标产品最后一步反应产率86％；mp：224-226℃。

结构确证数据如下：

¹H NMR(400Hz，CDCl₃)δ7.95(m，2H，Ar-H)，7.31(m，2H，Ar-H)，5.93(s，2H，CH＝CH)，5.86(t，J＝4.0Hz，2H，pyrrole-CH＝CH)，3.48(s，2H，2×COCH)，3.17(s，2H，2×CH-CH＝CH)，2.03(s，6H，2×CH₃)，1.16(d，J＝4.0Hz，2H，2×CH-CH₂)，0.34(m，2H，CH₂).

MS(Turbo Spray)m/z计算值C₂₄H₂₃N₃O₃(M+1)：402.5，测量值：402.1。

实施例5

化合物5：N-(3，3a，4，4a，5，5a，6，6a十氢-1，3-二氧-4，6-亚乙烯基环丙【f】异吲哚-2(1H)-基)-4-(3-异丙基-5-甲基-4H-1，2，4-三唑-4-基)苯甲酰胺

步骤1：4-甲酸甲酯异丁酰苯胺的合成

向对氨基苯甲酸甲酯(4.7g，31mmol)的二氯甲烷溶液(25ml)中加入无水碳酸钾(4.3g，31mmol)，混合物在冰浴搅拌下滴加异丁酰氯(6.55g，62mmol)，之后室温反应三个小时。然后向反应液中加入25ml水，分液，有机相干燥，旋干，得4-甲酸甲酯异丁酰苯胺粗品(4.16g，收率60.7％)。

步骤2：4-(3-异丙基-5-甲基-1，2，4-三唑)苯甲酸甲酯的合成

取步骤1所得粗品(4.16g)，用吡啶(10ml，120mmol)和CHCl₃(15ml)溶解，冰浴下滴加POCl₃(6ml)，然后恢复室温，搅拌反应6h。旋去溶剂，得黑色的粘稠残留物。

用CHCl₃(40ml)溶解黑色残留物，再向溶液中加入乙酰肼(2.2g，30mmol)，加热回流5h。然后向反应液中加入Na₂CO₃(200ml)饱和的溶液，分液，水相用CH₂Cl₂(50ml)萃取两次，合并有机相，无水MgSO₄干燥。过滤，旋干得黄色粘稠残留物。

用甲苯(150ml)溶解得到的黄色残留物，然后向溶液中加入TsOH(80mg，0.45mmol)，加然回流3h，减压浓缩，浓缩物经柱层析分离(CH₃OH/CH₂Cl₂＝1/20(v/v))，得到产品(2.34g，三步产率48％)，mp：170-174℃。

步骤3、4同化合物1。目标产物最后一步反应产率77％，mp：276-277℃。

结构确证数据如下：

¹H NMR(400Hz，CDCl₃)：δ8.69(s，1H，CONH)，8.13(d，J＝8.0Hz，2H，Ar-H)，7.35(d，J＝8.0Hz，2H，Ar-H)，5.86(t，J＝4.0Hz，2H，CH＝CH)，3.48(s，2H，2×COCH)，3.17(s，2H，2×CH-CH＝CH)，2.78(m，1H，CH(CH₃)₂)，2.24(s，3H，CH₃)，1.24(d，J＝6.8Hz，6H，2×CH₃)，1.17(s，2H，2×CH-CH₂)，0.33(m，2H，CH₂).

MS(Turbo Spray)m/z计算值C₂₄H₂₅N₅O₃(M+1)：432.5，测量值：432.2。

实施例6

化合物6：N-(3，3a，4，4a，5，5a，6，6a十氢-1，3-二氧-4，6-亚乙烯基环丙【f】异吲哚-2(1H)-基)-4-((3-氯苯胺基)甲基)苯甲酰胺

合成方法基本同化合物1，只需将实施例步骤2)中的N-甲基哌嗪替换成3-氯苯胺即可。产率91％，mp：175-177℃。

结构确证数据如下：

¹H NMR(400Hz，CDCl₃)：δ8.11(s，1H，NH)，7.76(d，J＝7.6Hz，2H，Ar-H)，7.38(d，J＝8.4Hz，2H，Ar-H)，7.06(t，J＝8.4Hz，1H，Ar-H)，6.70(d，J＝8.0Hz，1H，Ar-H)，6.60(s，1H，Ar-H)，6.47(d，J＝8.0Hz，1H，Ar-H)，5.83(s，2H，CH＝CH)，4.36(s，2H，Ar-CH₂)，3.45(s，2H，2×COCH)，3.13(s，2H，2×CH-CH＝CH)，1.13(s，2H，2×CH-CH₂)，0.32(m，2H，CH₂).

MS(Turbo Spray)m/z计算值 for C₂₅H₂₂ClN₃O₃(M+1)：448.9，测量值：448.2。

实施例7

化合物7：N-(3，3a，4，4a，5，5a，6，6a十氢-1，3-二氧-4，6-亚乙烯基环丙【f】异吲哚-2(1H)-基)-4-((异丁基(苯基)氨基)甲基)苯甲酰胺、

合成方法基本同化合物1，只需将实施例步骤2)中的N-甲基哌嗪替换成N-异丁基苯氨即可。产率87％；mp：158-159℃。

结构确证数据如下：

¹H NMR(400Hz，CDCl₃)：δ7.93(s，1H，Ar-H)，7.74(d，J＝7.6Hz，2H，Ar-H)，7.25(m，2H，Ar-H)，7.17(m，2H，Ar-H)，6.63(m，3H，Ar-H)，5.83(s，2H，CH＝CH)，4.62(s，2H，Ar-CH₂)，3.45(s，2H，2×COCH)，3.23(d，J＝7.2Hz，2H，N-CH₂)，3.13(s，2H，2×CH-CH＝CH)，2.15(m，1H，CH(CH₃)₂)，1.13(d，J＝3.6Hz，2H，2×CH-CH₂)，0.96(d，J＝6.8Hz，6H，2×CH₃)，0.31(m，2H，CH₂).

MS(Turbo Spray)m/z计算值C₂₉H₃₁N₃O₃(M+1)：470.7，测量值：469.8。

实施例8

化合物8：N-(3，3a，4，4a，5，5a，6，6a十氢-1，3-二氧-4，6-亚乙烯基环丙【f】异吲哚-2(1H)-基)-4-((乙基(苯基)氨基)甲基)苯甲酰胺

合成方法基本同化合物1，只需将实施例步骤2)中的N-甲基哌嗪替换成N-乙基-苯氨即可。合成方法同化合物1，产率90％；mp：155-156℃。

结构确证数据如下：

¹H NMR(400Hz，DMSO-d₆)：δ11.03(s，CONH)，7.83(m，2H，Ar-H)，7.35(m，2H，Ar-H)，7.10(m，2H，Ar-H)，6.61(m，3H，Ar-H)，5.78(s，2H，CH＝CH)，4.59(s，2H，Ar-CH₂)，3.50(m，2H，CH ₂ CH₃)，3.29(m，4H，2×COCH，2×CH-CH＝CH)，1.13(m，5H，2×CH-CH₂，CH₃)，0.27(m，2H，CH₂).

MS(Turbo Spray)m/z计算值C₂₇H₂₇N₃O₃(M+1)：442.5，测量值：442.3。

实施例9

化合物9：N-(3，3a，4，4a，5，5a，6，6a十氢-1，3-二氧-4，6-亚乙烯基环丙【f】异吲哚-2(1H)-基)-4-((苄基(苯基)氨基)甲基)苯甲酰胺

合成方法基本同化合物1，只需将实施例步骤2)中的N-甲基哌嗪替换成N-苄基-苯氨即可。产率64％，mp：162-163℃。

结构确证数据如下：

¹H NMR(400Hz，CDCl₃)：δ8.13(s，1H，Ar-H)，7.76(m，2H，Ar-H)，7.31(m，6H，Ar-H)，7.17(m，2H，Ar-H)，6.71(m，3H，Ar-H)，5.83(s，2H，CH＝CH)，4.64(d，J＝5.6Hz，4H，2×Ar-CH₂)，3.45(s，2H，2×COCH)，3.13(s，2H，2×CH-CH＝CH)，1.12(s，2H，2×CH-CH₂)，0.31(m，2H，CH₂).

MS(Turbo Spray)m/z计算值C₃₂H₂₉N₃O₃(M+1)：504.6，测量值：504.4。

实施例10

化合物10：N-(3，3a，4，4a，5，5a，6，6a十氢-1，3-二氧-4，6-亚乙烯基环丙【f】异吲哚-2(1H)-基)-4-((4-氟苯氧基)甲基)苯甲酰胺

合成方法同化合物1，产率85％，mp：189-191℃。

结构确证数据如下：

¹H NMR(400Hz，CDCl₃)：δ8.03(s，1H，CONH)，7.83(d，J＝8.4Hz，2H，Ar-H)，7.48(d，J＝8.0Hz，2H，Ar-H)，6.98(m，2H，Ar-H)，6.89(m，2H，Ar-H)，5.84(s，2H，CH＝CH)，5.07(s，2H，Ar-CH₂)，3.46(s，2H，2×COCH)，3.14(s，2H，2×CH-CH＝CH)，1.13(s，2H，2×CH-CH₂)，0.31(m，2H，CH₂).

MS(Turbo Spray)m/z计算值C₂₅H₂₁N₂O₄(M+1)：433.5，测量值：433.4。

实施例11

化合物11：N-(3，3a，4，4a，5，5a，6，6a十氢-1，3-二氧-4，6-亚乙烯基环丙【f】异吲哚-2(1H)-基)-4-((2-酮-3-(吡啶-4-基)咪唑-1-基)甲基)苯甲酰胺

合成方法同化合物1，产率32％，mp：＞250℃。

结构确证数据如下：

¹H NMR(400Hz，DMSO-d₆)：δ11.08(bs，1H，CONH)，8.40(d，J＝5.2Hz，2H，pyridine-H)，7.90(d，J＝7.6Hz，2H，Ar-H)，7.58(d，J＝6.4Hz，2H，Ar-H)，7.46(d，J＝8Hz，2H，pyridine-H)，5.80(s，2H，CH＝CH)，4.50(s，2H，Ar-CH₂)，3.85(dd，J₁＝2.4Hz，J₂＝6.0Hz，2H，imidazolidin-CH₂)，3.44(dd，J₁＝8.4Hz，J₂＝8.0Hz，2H，imidazolidin-CH₂)，3.29(m，4H，2×COCH，2×CH-CH＝CH)，1.12(s，2H，2×CH-CH₂)，0.26(m，2H，CH₂).

MS(Turbo Spray)m/z计算值C₂₇H₂₅N₅O₄(M+1)：484.5，测量值：484.3。

实施例12、式I化合物的体外抗HIV活性试验

(1)实验试剂

HIV-1菌株Bal(R5)由美国国立卫生研究院艾滋病研究所提供；淋巴样细胞系CEMX1745.25M7表达受体CD4和辅助受体CXCR4和CCR5用来检测化合物的抗病毒活性。CEMx1745.25M7细胞在含有10％纤维蛋白原(FBS)、1μg/ml嘌罗霉素和200μg/ml G418的RPMI-1640培养基中培养。

(2)抑制活性的测定方法

为了测定化合物对HIV-1Bal感染CEMx1745.25M7细胞的抑制活性，不同浓度梯度的50μl待测化合物在相同的HIV-1病毒量中，于37℃培养30分钟。然后，加入100μl CEMx174 5.25M7细胞(5x10⁵/ml)。在37℃培养整晚后，用不含化合物新鲜培养基替代现在的培养基。在细胞感染三天后，采集并溶解细胞，通过测定萤光活性来计算萤光酶活性抑制比例和IC₅₀值。

(3)体外细胞毒性的测定方法

通过XTT试验确定化合物对CEMx174 5.25M7细胞的体外细胞毒性。不同浓度梯度的100μL的待测化合物加入到相同体积的细胞中(5×10⁵/mL)(96孔板)。在37℃培养4天后，向培养液中加入含有0.02μMPMS的1mg/mL XTT溶液50μL。培养4小时后，通过酶标仪测定450nm的吸光度，并通过CalcuSyn程序计算CC₅₀值。

            表1拮抗剂的抑制活性及毒性测定结果

a.IC₅₀：半数有效抑制浓度；b.CC₅₀：致半数细胞死亡所需浓度；c.ND：不能测量。

c.选择性指数；d.NR：不能评价；e.阳性对照。

表1所列的11个化合物中，有9个化合物对HIV-1 Bal感染CEMx174 5.25M7细胞有抑制活性，其中化合物2半数有效抑制浓度达到0.41μM，其选择性指数也高达291.68，因此，本发明化合物为新型HIV拮抗剂，可作为抑制HIV病毒复制的抑制剂。

Claims (7)

1.式I所示的化合物或其药学上可接受的盐；

其中，R选自下述任意一种基团：

2.制备权利要求1所述式I所示的化合物的方法，是以N，N-二异丙基乙胺为催化剂，使式VII所示的托烷酸酐与式XII所示的化合物在加热回流的条件下进行反应，得到式I所示化合物；

式XII中，R选自下述任意一种基团：

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述反应在有机溶剂中进行，所述有机溶剂为乙醇。

4.权利要求1中所述式I所示的化合物或其药学上可接受的盐在制备HIV-1抑制剂中的应用。

5.权利要求1中所述式I所示的化合物或其药学上可接受的盐在制备治疗和/或预防艾滋病药物中的应用。

6.一种治疗和/或预防艾滋病药物，其活性成分为权利要求1中所述式I所示的化合物或其药学上可接受的盐。

7.一种HIV-1抑制剂，其活性成分为权利要求1中式I所示的化合物或其药学上可接受的盐。

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