CN101757092A - 甘草提取物的医药用途 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及用微波萃取法分离甘草得到甘草提取物并确定了该提取物在小鼠溃疡性结肠炎中的应用。本发明方法简单、准确、重现性好,产品纯度高。
Description
技术领域:
本发明涉及一种甘草的提取分离方法及应用,特别是涉及用微波提取法分离甘草得到甘草提取物的方法及该提取物在小鼠溃疡性结肠炎中的应用。
背景技术:
甘草是豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch.、胀果甘草G.inflata Bat.、或光果甘草G.glabra.L.的干燥根茎,是临床常用的中草药之一。其性甘、平,具有补脾益气、清热解毒,祛痰止咳、缓急止痛、调和诸药之功效。甘草始载于《神农本草经》,列为上品,为应用历史悠久而广泛的最常用中药。据现代研究,甘草的根及根茎含三萜皂甙甘草酸即甘草甜素,为甘草的甜味成分,此外还含有多种黄酮成分,即甘草素、异甘草素和甘草甙、新甘草甙、新异甘草甙、芒柄花甙、甘草西定、甘草醇、5-O-甲基甘草醇和异甘草醇等。现代药理研究表明,甘草具有肾上腺皮质激素样作用,抑制溃疡作用,抗炎、抗变态反应及解毒作用,能促进高血压病人脂质代谢,增加胆汁分泌;以及镇咳、镇痛、抗惊厥、抗肿瘤、抗艾滋病病毒等。现代临床主要用于治疗胃、十二指肠溃疡,阿狄森氏病,席汉氏综合征,肺结核,支气管哮喘,传染性肝炎,急性血吸虫病,疟疾,血小板减少性紫癜,腓肠肌痉挛,先天性肌强直,血栓性脉管炎,子宫糜烂,眼科炎症,皮肤皲裂,艾滋病等。特别是甘草酸类成分,具有防治病毒性肝炎、高脂血症作用,能抗癌治癌,可作干扰素诱生剂及细胞免疫调节剂,又适用于制成多种生物碱、抗生素、氨基酸的复方制剂,常具协同、增溶、增效等作用。甘草在食用方面可以用甘草甜素作为饮料调味剂,根及根茎粉末及其提取残渣可以作为兽用饲料。因此,甘草的用途较为广泛,开发前景广阔,急待进一步开发研究。
传统的甘草提取方法步骤复杂,纯度低,存在一定缺陷。
本发明用微波萃取法分离甘草得到甘草提取物并确定了该提取物在小鼠溃疡性结肠炎中的应用。本发明方法简单、准确、重现性好,产品纯度高。
发明内容:
本发明用微波萃取法分离甘草得到甘草提取物并确定了该提取物在小鼠溃疡性结肠炎中的应用。本发明方法简单、准确、重现性好,产品纯度高。
本发明方法的一个具体实施方式为,甘草经粉碎后过65目筛,细粉于烘箱中60℃干燥4h,精密称取样粉1g于烧瓶中,加入80%乙醇60ml,将此烧瓶放入MCL 23型连续微波反应器中,调整功率400W,反应时间20min。将提取液经减压浓缩干燥得到甘草提取物。
本发明的甘草提取物可用于制备药物。
本发明的甘草提取物可用于制备治疗人或动物溃疡性结肠炎的药物。
具体实施例
实施例1甘草的提取分离
1仪器、试剂及样品
UV 22401型分光光度计(日本岛津),MCL 23型连续微波反应器。对照品芦丁购自中国药品生物制品检定所。试剂均为分析纯。甘草:购自中国药品生物制品检定所。
2方法与结果
2.1测定方法依据以芦丁为对照品测定甘草中总黄酮含量,加入铝离子试剂,同时控制适宜pH值,使黄酮化合物与铝盐形成络合物在可见区能获得稳定的特征吸收峰。
2.2测定方法建立
2.2.1样品处理 甘草经粉碎后过65目筛,细粉于烘箱中60℃干燥4h待用。
2.2.2标准曲线制备精密称取120℃干燥恒重的芦丁标准品
10mg,加80%乙醇溶解,定容至50ml容量瓶中,摇匀,制成浓度为0.2mg/L的标准品溶液。分别取标准品溶液0.0,0.2,0.5,1.0,2.0,3.0,4.0ml于10ml容量瓶中,加5%亚硝酸钠0.4ml,放置6min后,加10%硝酸铝0.4ml,放置6min,再加4%的氢氧化钠4ml,加水至刻度,摇匀,放置15min,进行全波长扫描,在510nm处均有最大吸收。以测定结果计算得直线方程C=79.22A-0.466,r=0.9978。
2.2.3供试品溶液制备精密称取样粉1g于烧瓶中,加入80%乙醇60ml,将此烧瓶放入MCL 23型连续微波反应器中,调整功率400W,反应时间20min。将提取液转移到100ml容量瓶中,用85%乙醇定容,作为供试品溶液。
2.2.4样品含量测定精密吸取供试品溶液2.0ml,置10ml容量瓶中,按与标准曲线相同的方法显色测定。通过标准曲线,计算出样品总黄酮含量为1.821%。
2.2.5样品经减压浓缩干燥得到甘草提取物。
实施例2甘草提取物的药理活性。
1实验材料
1.1药品与试剂
甘草提取物,实施例1方法制备;地塞米松片,国药准字H33020822,浙江仙琼制药有限公司生产,批号:040904;三硝基苯磺酸钠(TNBS),天津市福晨化学试剂生产厂生产,批号:20041112;髓过氧化物酶(MPO)试剂盒,南京建成生物工程研究所提供,批号:20050428。
1.2实验仪器
UV-9100型紫外分光光度计,北京瑞利分析仪器公司生产;BS110sartorius电子天平,北京赛多里斯有限公司生产;HH.S11-2型水浴锅,北京长安科学仪器厂生产。
1.3实验动物
昆明种小鼠,体质量(20±2)g,雌雄兼用。
2方法及结果
2.1造模和给药
小鼠按性别、体质量随机分为空白对照组,TNBS模型组,阳性对照组,甘草提取物大、中、小剂量组。空白对照组和TNBS模型组灌胃等容量生理盐水,阳性对照组灌胃地塞米松0.2mg/kg,甘草提取物大、中、小剂量组分别灌胃300mg/kg、200mg/kg、100mg/kg。各组每天给药1次,连续给药14d。
第1d给药后1h,YM轻度麻醉小鼠,用直径2mm灌肠器(蘸取少量液体石蜡)从肛门插入结肠约4cm处灌肠造模。其中空白对照组灌肠NS0.1mL/只;TNBS模型组,阳性对照组,甘草提取物大、中、小剂量组灌肠2%TNBS(用50%乙醇作溶媒)0.1mL/只。第7d,空白对照组灌肠NS 0.1mL/只,其余各组灌肠1%TNBS(用50%乙醇作溶媒)0.1mL/只。
2.2统计学分析
采用SPSS10.0统计软件包分析,实验数据用(±s)表示,组间比较采用t检验。
2.3观察指标及结果
2.3.1甘草提取物对TNBS所致UC小鼠体质量的影响
分别于造模前及造模后隔日称小鼠体质量,观察各组小鼠体质量变化。结果表明300mg/kg、200mg/kg、100mg/kg对TNBS所致UC小鼠体质量下降有明显抑制作用。
Claims (4)
1.一种甘草提取物的分离方法,其特征在于甘草经粉碎后过65目筛,细粉于烘箱中60℃干燥4h,精密称取样粉1g于烧瓶中,加入80%乙醇60ml,将此烧瓶放入MCL 23型连续微波反应器中,调整功率400W,反应时间20min。将提取液经减压浓缩干燥得到甘草提取物。
2.含有如权利要求1所述的甘草提取物的药物组合物。
3.如权利要求1所述的甘草提取物在制备药物中的应用。
4.如权利要求3所述的甘草提取物在制备人或动物溃疡性结肠炎药物中的应用。
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