CN101704884A

CN101704884A - 一种植物抗旱、耐盐相关蛋白EeABF6及其编码基因和应用

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Publication number: CN101704884A
Application number: CN200910238039A
Authority: CN
Inventors: 高世庆; 赵昌平; 唐益苗; 杨颖�; 王永波
Original assignee: Beijing Academy of Agriculture and Forestry Sciences
Current assignee: Beijing Academy of Agriculture and Forestry Sciences
Priority date: 2009-11-13
Filing date: 2009-11-13
Publication date: 2010-05-12
Anticipated expiration: 2029-11-13
Also published as: CN101704884B

Abstract

本发明涉及基因工程领域，具体地，本发明涉及一种植物抗旱、耐盐相关蛋白EeABF6及其编码基因和应用。所述蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，基因序列如SEQ ID NO.2所示。本发明的抗旱、耐盐相关蛋白及其编码基因对改良、增强烟草抗逆性，提高产量、加速抗逆分子育种进程，以及有效节省水资源具有十分重要的理论和实际意义。

Description

一种植物抗旱、耐盐相关蛋白EeABF6及其编码基因和应用

技术领域

本发明涉及基因工程领域，具体地，本发明涉及一种植物抗旱、耐盐相关蛋白EeABF6及其编码基因和应用。

背景技术

干旱、盐碱等非生物逆境是植物的生长和发育主要限制因素。据统计，世界干旱、半干旱地区占地球陆地面积的33％，盐碱地占地球陆地面积的7.6％。在我国，干旱地区的耕地面积约为5.7亿亩，盐碱地约为5.54亿亩，每年因干旱、盐碱等逆境对小麦造成的粮食减产达700-800亿公斤。小麦是我国重要的粮食作物之一，在国民经济中占有非常重要的地位。然而，干旱、高盐等逆境胁迫严重影响着小麦的产量和品质，制约着农业生产的快速发展。

植物的耐旱、耐盐性大多属于多基因控制的数量性状，利用常规育种方法改良作物的抗逆性受到周期长、优异种质资源缺乏的制约。随着现代分子生物学的发展，利用基因工程技术，从分子水平上深入研究植物与非生物逆境之间的关系，揭示植物对逆境胁迫信号传导及基因表达调控分子机理，为培育作物抗逆新种质提供了理论基础。

目前，通过基因工程技术已将许多抗旱，耐盐和耐低温相关的基因(如：合成各类渗透保护剂的酶类基因、转录因子和信号传导有关的蛋白激酶基因)导入到作物中，从而提高作物的抗逆性已有大量的报道。例如，将抗逆相关的功能基因导入作物，Lilius等将编码胆碱脱氢酶的基因(BetA)导入烟草和马铃薯，获得了抗盐和耐低温的转基因植株(Lilius et al.，1996)。Nakamura等将甜菜碱醛脱氢酶基因(BADH)导入烟草，增加了烟草中的甜菜碱的含量，同时明显提高了烟草对盐和寒冷胁迫的耐受能力(Nakamura et al.，1997)。在植物体内，抗氧化系统由许多酶组成，如SOD、过氧化氢酶、过氧化物酶和谷胱甘肽还原酶。SOD是植物体内清除活性氧的关键酶，植物中已有几种SOD酶基因被克隆出来并在转基因植株中得到了活验证性。McKEesie等将烟草Mn-SOD导入苜蓿，转基因苜蓿在干旱胁迫环境下的产量和存活率都有了显著提高(McKEesie et al.，1999)。植物对干旱、高盐等逆境胁迫的耐性是多基因控制的数量性状，其生理、生化过程是基因相互作用、共同调节的，导入单个功能基因虽然在一定程度上提高了植物的抗逆性，但提高幅度不大，往往不能达到有效增强植物抗逆性的目的(Liu et al.，1998；刘强等，2000)。

近年来，通过转录因子的结构与功能的分析来鉴定、阐明各种条件下基因表达调控的机理得到了广泛关注(刘强等，2000)。Yamaguchi-Shinozaki等人的研究结果表明：利用rd29A启动子启动AtDREB1A基因的表达，能够有效提高农作物(小麦)对干旱、高盐和低温的抗性(Yamaguchi-Shinozaki et al.，2002；Pellegrineschi et al。2004)。GmDREB3基因的超量表达能提高转基因拟南芥和烟草植株对干旱和低温胁迫的耐性(Chen et al.，2007)。将棉花GhDREB基因转化小麦品种扬麦10号，转基因小麦的耐旱、耐盐性得到明显提高(Gao et al.，2009)。

碱性亮氨酸拉链(basic leucine zipper，bZIP)蛋白是真核生物转录因子中分布最广泛、最保守的一类蛋白.研究表明：bZIP蛋白不仅参与种子贮藏基因的表达、光形态的发生以及器官建成的控制(Finkelstein et al.，2002)，还参与植物对脱落酸、光和发育中各种信号的反应(Jakoby et al.，2002)。Marc Jakoby等对拟南芥基因组全序列分析发现了大量的bZIP类转录因子。

综上所述，转录因子(DREB类、bZIP类等)在调节植物的逆境反应，提高植物的抗逆性中起着至关重要的作用。目前，利用抗逆相关的转录因子基因改良和提高拟南芥、烟草、水稻等植物的抗逆性，取得了很大成功。

发明内容

本发明的目的是提供一种植物抗旱、耐盐相关蛋白EeABF6。

本发明的再一目的是提供编码上述植物抗旱、耐盐相关蛋白EeABF6的编码基因。

本发明的另一目的是提供包含上述基因的重组载体。

本发明的另一目的是提供包含上述基因的转基因细胞系。

本发明的另一目的提供上述植物抗旱、耐盐相关蛋白EeABF6的应用。

本发明所提供的抗旱、耐盐相关蛋白EeABF6，来源于长穗偃麦草(其直接来源为：北京草业与环境研究发展中心，其原始来源：中国新疆)，其氨基酸序列如SEQID NO.1所示。

本发明的转录因子由367个氨基酸残基组成，是bZIP类转录因子。自SEQ ID NO.1的氨基末端第295-355位氨基酸残基是保守的bZIP结构，自SEQ ID NO.1的氨基末端第290-293位氨基酸残基为核定位序列。

SEQ ID NO.1：

MDFPGGSGRP PPQQHQHQLL PPMTPLPLTR QGSSVYSLTF DEFQSALGGP

GKDFGSMNMD 60

ELLRNIWTAE ESQAIGAGAN AASSSAAAGP DHGGIQRQGS LTLPRTLSQK

TVDEVWRDMM 120

FFGGPASAST AAEAPPPAQR QQTLGEVTLE EFLVRAGVVR EDMPGPPPPV

SPAPVAQAPP 180

PPPQPQMLFP QSNMFAPMVN PLSLANGLIT GAYGQGGGGG GGAPAMVSPS

PTGRPVMSNG 240

YGKMEDRNLS SLSPPPMPYV FNGGLRGRKP PAMEKVVERR QRRMIKNRES

AARSRQRKQS 300

YMMELETEVA KLKERNEELQ RKQAEMLERQ KNEVFEKVTR QAGLTSKRIC

LRRTLTGPW 359

为了使蛋白EeABF6便于纯化，可在由SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列组成的蛋白质的氨基末端或羧基末端连接上如表1所示的标签。

表1 标签的序列

标签	残基	序列
标签	残基	序列	Poly-Arg	5-6(通常为5个)	RRRRR
Poly-His	2-10(通常为6个)	HHHHHH	Poly-Arg	5-6(通常为5个)	RRRRR
Poly-His	2-10(通常为6个)	HHHHHH	FLAG	8	DYKDDDDK
Strep-tag II	8	WSHPQFEK	FLAG	8	DYKDDDDK
Strep-tag II	8	WSHPQFEK	c-myc	10	EQKLISEEDL

根据本发明所公开的SEQ ID NO.1序列，本发明的转录因子EeABF6可人工合成，也可先合成其编码基因，再进行生物表达得到。

根据本发明的EeABF6编码基因具有如SEQ ID NO.2或3所示核苷酸序列。EeABF6的表达受干旱、盐、脱落酸和低温胁迫的诱导。

SEQ ID NO.3

1 ATGGACTTTC CGGGAGGGAG CGGGAGGCCG CCGCCGCAGCAGCACCAGCA CCAGCTGCTG

61 CCGCCGATGA CGCCGCTGCC GCTCACAAGG CAGGGGTCATCGGTCTACTC GCTCACGTTC

121 GACGAGTTCC AGAGCGCGCT CGGCGGGCCG GGCAAGGACTTCGGATCCAT GAACATGGAC

181 GAGCTCCTCC GCAACATCTG GACGGCCGAG GAGTCGCAGGCCATCGGCGCCGGCGCCAAC

241 GCCGCCTCTT CCTCCGCCGC CGCGGGGCCA GATCACGGCGGCATCCAGCG CCAGGGCTCG

301 CTCACGCTGC CCAGGACGCT CAGCCAGAAG ACCGTCGACGAGGTCTGGCG CGACATGATG

361 TTCTTCGGTG GGCCCGCCTC CGCCTCCACG GCCGCCGAGGCTCCCCCGCC GGCCCAGAGG

421 CAGCAGACGC TCGGGGAGGT CACGCTCGAG GAGTTCCTCGTGCGCGCCGG CGTTGTGCGC

481 GAGGACATGC CGGGGCCGCC GCCCCCCGTG TCGCCGGCGCCCGTGGCCCA GGCGCCGCCT

541 CCGCCTCCGC AGCCGCAGAT GCTGTTTCCT CAGAGCAACATGTTTGCTCC TATGGTGAAT

601 CCTCTGTCCT TGGCCAATGG GTTGATCACC GGAGCATACGGCCAGGGAGG AGGAGGTGGT

661 GGTGGTGCGC CCGCTATGGT TTCGCCGTCG CCGACGGGGAGGCCGGTCAT GTCCAACGGC

721 TACGGCAAGA TGGAAGACCG CAACTTGTCC TCGCTGTCGCCGCCGCCGAT GCCGTATGTT

781 TTCAACGGCG GGCTGAGGGG GAGGAAGCCA CCGGCCATGGAGAAGGTGGT CGAGAGGAGG

841 CAGCGGCGGA TGATCAAGAA CCGGGAGTCT GCGGCGAGGTCGCGCCAGAG GAAACAGAGT

901 TATATGATGG AATTGGAGAC TGAGGTGGCA AAGCTTAAAGAGCGGAATGA GGAGTTGCAG

961 AGAAAACAGG CGGAGATGCT AGAGAGGCAA AAGAATGAGGTATTCGAGAA GGTCACCCGG

1021 CAAGCTGGAC TCACGTCGAA GAGGATCTGC CTGCGGAGGACGCTGACGGG CCCTTGG

含有EeABF6基因的表达盒、重组表达载体、转基因细胞系及重组菌均属于本发明的保护范围。

可用现有的植物表达载体构建含有EeABF6基因的重组表达载体。

所述植物表达载体包括双元农杆菌载体和可用于植物微弹轰击的载体等.所述植物表达载体还可包含外源基因的3’端非翻译区域，即包含聚腺苷酸信号和任何其它参与mRNA加工或基因表达的DNA片段.所述聚腺苷酸信号可引导聚腺苷酸加入到mRNA前体的3’端，如农杆菌冠瘿瘤诱导(Ti)质粒基因(如胭脂合成酶Nos基因)、植物基因3’端转录的非翻译区均具有类似功能.

使用EeABF6构建重组植物表达载体时，在其转录起始核苷酸前可加上任何一种增强型启动子或组成型启动子，如花椰菜花叶病毒(CaMV)35S启动子、玉米的泛素启动子(Ubiquitin)，它们可单独使用或与其它植物启动子结合使用；此外，使用本发明的基因构建植物表达载体时，还可使用增强子，包括翻译增强子或转录增强子，这些增强子区域可以是ATG起始密码子或邻接区域起始密码子等，但必需与编码序列的阅读框相同，以保证整个序列的正确翻译。所述翻译控制信号和起始密码子的来源是广泛的，可以是天然的，也可以是合成的。翻译起始区域可以来自转录起始区域或结构基因。

为了便于对转基因植物细胞或植物进行鉴定及筛选，可对所用植物表达载体进行加工，如加入可在植物中表达的编码可产生颜色变化的酶或发光化合物的基因(GUS基因、萤光素酶基因等)、具有抗性的抗生素标记物(庆大霉素标记物、卡那霉素标记物等)或是抗化学试剂标记基因(如抗除莠剂基因)等。从转基因植物的安全性考虑，可不加任何选择性标记基因，直接以逆境筛选转化植株。

本发明的另一个目的是提供一种培育耐逆植物的方法。

本发明所提供的培育耐逆植物的方法，是将上述任一种含有EeABF6基因的重组表达载体导入植物细胞中，得到耐逆植物。

利用任何一种可以引导外源基因在植物中表达的载体，将本发明所提供的bZIP转录因子EeABF6的编码基因导入植物细胞，可获得对干旱和盐等非生物逆境胁迫耐受力增强的转基因细胞系及转基因植株。携带有编码基因的表达载体可通过使用Ti质粒、Ri质粒、植物病毒载体、直接DNA转化、显微注射、电导、农杆菌介导等常规生物学方法转化植物细胞或组织，并将转化的植物组织培育成植株。被转化的植物宿主既可以是单子叶植物，也可以是双子叶植物，如：烟草、小麦、长穗偃麦草、拟南芥、水稻、玉米、黄瓜、番茄、杨树、草坪草、苜宿等。

所述植物耐逆性具体可为对非生物胁迫的耐逆性，如对或盐胁迫的耐逆性。

本发明以抗旱、耐盐性较强的长穗偃麦草(Elytrigia elongatum L.)为实验材料，得到了抗逆相关的bZIP转录因子EeABF6(Elytrigia elongatum ABA Responsive ElementBinding Factor 6)蛋白及其编码基因，并将EeABF6基因导入烟草，显著提高了植物的抗旱、耐盐性。本发明的抗旱、耐盐相关蛋白及其编码基因对改良、增强烟草抗逆性，提高产量、加速抗逆分子育种进程，以及有效节省水资源具有十分重要的理论和实际意义。

下面结合附图及具体实施例对本发明做进一步说明。

附图说明

图1为抗旱、耐盐相关蛋白EeABF6编码基因的cDNA克隆，以长穗偃麦草cDNA为模板，PCR扩增含有bZIP保守域的cDNA片段，1，2：长穗偃麦草片段；M：DL2000marker(100，250，500，750，1000，2000bp)。

图2为荧光定量PCR分析EeABF6在干旱、盐胁迫处理下的表达特征，A.烟草经农杆菌侵染后的筛选、分化培养；B.经筛选、分化后获得的再生植株生根培养；C.转基因烟草植株的PCR检测，其中，1，2，3，4：pBI35S-EeABF6转基因烟草；5，6，7，8：pBI29A-EeABF6转基因烟草.

图3为转基因烟草耐旱性鉴定，A.pBI35S-EeABF6转基因烟草和W38在含有2％PEG培养基上的生长情况；B.pBI35S-EeABF6转基因烟草和W38根的生长情况；C.pBI29A-EeABF6转基因烟草在和W38在含有2％PEG培养基上的生长情况；D.pBI29A-EeABF6转基因烟草和W38根的生长情况。

图4为转基因烟草耐盐性鉴定，A.pBI35S-EeABF6转基因烟草和W38在含有200mM NaCl培养基上的生长情况；B.pBI35S-EeABF6转基因烟草和W38根的生长情况；C.pBI29A-EeABF6转基因烟草在和W38在含有200mM NaCl培养基上的生长情况；D.pBI29A-EeABF6转基因烟草和W38根的生长情况。

具体实施方式

以下实施例中未作具体说明的分子生物学实验方法，均参照《分子克隆实验指南》(第三版)J.萨姆布鲁克一书中所列的具体方法进行，或者按照试剂盒和产品说明书进行。

以下的实施例便于更好地理解本发明，但并不限定本发明。

实施例1：长穗偃麦草抗旱、耐盐相关EeABF6基因的cDNA克隆。

对生长45天左右的长穗偃麦草幼苗进行干旱处理5小时，用Trizol提取长穗偃麦草总RNA。应用5’RACE试剂盒(5’RACE System for Rapid Amplification of cDNA EndsKit)(GIBCOBRL，CAT.NO.18374-058)和3’RACE试剂盒(3’RACE System for RapidAmplification of cDNAEnds Kit)(GIBCOBRL，CAT.NO.18373-019)获得EeABF6基因。

用Trizol提取长穗偃麦草幼苗的总RNA，用superscript II(invitrogen)反转录酶反转录获得到cDNA。根据EeABF6基因编码区序列设计引物P1和P2。以反转录得到的cDNA为模板，用引物P1和P2进行PCR扩增。引物P1和P2的序列如下：

P 1：5’-GCGGGATGGACTTTCCGG-3’，

P2：5’-CCAAGGGCCCGTCAGCGT-3’。

对PCR产物进行0.8％琼脂糖凝胶电泳检测，得到分子量约为1.0-1.2kb左右的条带，与预期结果相符。用琼脂糖凝胶回收试剂盒(TIANGEN)回收该片段。将该回收片段与pGEM-TEasy(Promega)连接，参照Cohen等的方法(ProcNatl Acad Sci，69：2110)，将连接产物转化大肠杆菌DH5α感受态细胞，根据pGEM-T Easy载体上的氨卞青霉素抗性标记筛选阳性克隆，得到含有回收片段的重组质粒。以该重组质粒载体上的T7和SP6启动子序列为引物对其进行核苷酸序列测定，测序结果表明扩增到的EeABF6基因的开放阅读框(ORF)为SEQ ID No.2的自5′末端第50至1126位脱氧核糖核苷酸，编码氨基酸序列是SEQ ID No.1的蛋白质。将含序列SEQ ID No.3所示EeABF6基因的重组载体命名为pTE-EeABF6，其cDNA克隆结果如图1所示。

EeABF6基因的序列在Genabnk上进行比对，该基因与拟南芥中bZIP类转录因子具有较高同源性，而在长穗偃麦草中未发现同源蛋白基因，证明EeABF6基因是一个新的基因。

实施例2：用EeABF6基因培育抗旱、耐盐转基因植物

1、重组表达载体的构建

1)35S-EeABF6重组表达载体的构建

以长穗偃麦草的总RNA反转录得到的cDNA为模板，用含有SmaI和XbaI接头序列的特异引物进行PCR扩增；然后SmaI和XbaI双酶切PCR产物，回收，将酶切产物正向插入载体pBI121的CaMV 35S启动子之后的SmaI和XbaI酶切位点之间，得到重组载体35S-EeABF6。

引物序列如下：

EeABF6[SmaI]5’-GCGCCCGGGGCGGGATGGACTTTCCGG-3’

EeABF6[XbaI]5’-TGCTCTAGACCAAGGGCCCGTCAGCGT-3’

2)29A-EeABF6重组表达载体的构建

以长穗偃麦草的总RNA反转录得到的cDNA为模板，用含有SmaI和SpeI接头序列的特异引物进行PCR扩增；然后SmaI和SpeI双酶切PCR产物，回收，将酶切产物正向插入载体pBI121的rd29A启动子之后的SmaI和SpeI酶切位点之间，得到重组载体29A-EeABF6。

引物序列如下：

EeABF6[SmaI]5’-GCGCCCGGGGCGGGATGGACTTTCCGG-3’

EeABF6[SpeI]5’-CGGACTAGTCCAAGGGCCCGTCAGCGT-3’

2、转基因烟草的获得和鉴定

1)转基因烟草的获得

将上述构建的重组表达载体29A-EeABF6、35S-EeABF6分别用冻融法转化根癌农杆菌EHA105，再用叶盘法分别将整合有29A-EeABF6和35S-EeABF6的根癌农杆菌EHA105转化烟草W38，用含100mg/L卡那霉素的MS培养基进行2轮筛选，每轮筛选10-15天，得到阳性转基因植株。将筛选得到的阳性转基因植株用PCR做进一步鉴定筛选，PCR所用的一对引物为P3和P4。

P3(上游引物)：5’-GCGGGATGGACTTTCCGG-3’，

P4(下游引物)：5’-CCAAGGGCCCGTCAGCGT-3’。

对29A-EeABF6、35S-EeABF6转基因烟草进行PCR鉴定，阳性转基因植株经PCR扩增可获得1Kb左右条带，结果获得转29A-EeABF6烟草、35S-EeABF6烟草各30株。

同时将pBI121空载体导入烟草W38，方法同上，作为对照，获得15个株系的转空载体烟草(筛选获得的转基因烟草用T₀代表示)。

2)转EeABF6基因植株耐旱、耐盐性鉴定

将T₀代转29A-EeABF6、35S-EeABF6基因烟草植株及T₀代转空载体对照植株的3周龄苗的根系分别移入含有200mM NaCl、2％PEG的培养基中进行盐、干旱胁迫处理30天，观察表型并拍照。

转基因烟草的荧光定量PCR分析如图2所示。

结果表明：盐胁迫处理30天后，29A-EeABF6转基因植株在干旱、盐胁迫条件下生长正常，根系发达，叶片颜色深绿；35S-EeABF6转基因植株在干旱、盐胁迫条件下也能够正常生长，根系发达，叶片颜色深绿；所有空载体转基因植株叶片均萎蔫或失绿、发白而导致死亡。转基因烟草耐旱、耐盐性鉴定结果证明EeABF6基因可以提高植物的耐旱及耐盐性。

图3A显示的是29A-EeABF6、35S-EeABF6转基因植株、空载体转基因植株干旱胁迫处理30天的照片；图3B显示的是29A-EeABF6、35S-EeABF6转基因植株、空载体转基因植株盐胁迫处理30天的照片.

序列表

<110>北京市农林科学院

<120>一种植物抗旱、耐盐相关蛋白EeABF6及其编码基因和应用

<160>2

<210>1

<211>359

<212>PRT

<213>长穗偃麦草(Elytrigia elongatum L.)

<400>1

MDFPGGSGRP PPQQHQHQLL PPMTPLPLTR QGSSVYSLTF DEFQSALGGP

GKDFGSMNMD 60

ELLRNIWTAE ESQAIGAGAN AASSSAAAGP DHGGIQRQGS LTLPRTLSQK

TVDEVWRDMM 120

FFGGPASAST AAEAPPPAQR QQTLGEVTLE EFLVRAGVVR EDMPGPPPPV

SPAPVAQAPP 180

VPPPQPQMLFP QSNMFAPMVN PLSLANGLIT GAYGQGGGGG GGAPAMVSPS

PTGRPVMSNG 240

YGKMEDRNLS SLSPPPMPYV FNGGLRGRKP PAMEKVVERR QRRMIKNRES

AARSRQRKQS 300

YMMELETEVA KLKERNEELQ RKQAEMLERQ KNEVFEKVTR QAGLTSKRIC

LRRTLTGPW 359

<210>2

<211>1077

<212>DNA

<213>长穗偃麦草(Elytrigia elongatum L.)

<400>2

atggactttc cgggagggag cgggaggccg ccgccgcagc agcaccagca ccagctgctg 60

ccgccgatga cgccgctgcc gctcacaagg caggggtcat cggtctactc gctcacgttc 120

gacgagttcc agagcgcgct cggcgggccg ggcaaggact tcggatccat gaacatggac 180

gagctcctcc gcaacatctg gacggccgag gagtcgcagg ccatcggcgc cggcgccaac 240

gccgcctctt cctccgccgc cgcggggcca gatcacggcg gcatccagcg ccagggctcg 300

ctcacgctgc ccaggacgct cagccagaag accgtcgacg aggtctggcg cgacatgatg 360

ttcttcggtg ggcccgcctc cgcctccacg gccgccgagg ctcccccgcc ggcccagagg 420

cagcagacgc tcggggaggt cacgctcgag gagttcctcg tgcgcgccgg cgttgtgcgc 480

gaggacatgc cggggccgcc gccccccgtg tcgccggcgc ccgtggccca ggcgccgcct 540

ccgcctccgc agccgcagat gctgtttcct cagagcaaca tgtttgctcc tatggtgaat 600

cctctgtcct tggccaatgg gttgatcacc ggagcatacg gccagggagg aggaggtggt 660

ggtggtgcgc ccgctatggt ttcgccgtcg ccgacgggga ggccggtcat gtccaacggc 720

tacggcaaga tggaagaccg caacttgtcc tcgctgtcgc cgccgccgat gccgtatgtt 780

ttcaacggcg ggctgagggg gaggaagcca ccggccatgg agaaggtggt cgagaggagg 840

cagcggcgga tgatcaagaa ccgggagtct gcggcgaggt cgcgccagag gaaacagagt 900

tatatgatgg aattggagac tgaggtggca aagcttaaag agcggaatga ggagttgcag 960

agaaaacagg cggagatgct agagaggcaa aagaatgagg tattcgagaa ggtcacccgg 1020

caagctggac tcacgtcgaa gaggatctgc ctgcggagga cgctgacggg cccttgg 1077

Claims

1.一种植物抗旱、耐盐相关蛋白EeABF6，其特征在于，其氨基酸序列如SEQID NO.1所示。

2.一种植物抗旱、耐盐相关基因，其特征在于，编码权利要求1所述的植物抗旱、耐盐相关蛋白EeABF6。

3.如权利要求2所述的植物抗旱、耐盐相关基因，其特征在于，其碱基序列如SEQ ID NO.2或3所示。

4.包含权利要求2或3所述植物抗旱、耐盐相关基因的重组载体

5.包含权利要求2或3所述植物抗旱、耐盐相关基因的转基因细胞系。

6.权利要求1所述植物抗旱、耐盐相关蛋白EeABF6的应用。

7.权利要求2或3所述植物抗旱、耐盐相关基因的应用。