CN101703470B - 一种氟康唑脂质体固体制剂及其新应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种氟康唑脂质体固体制剂及其新应用，具体地说，所述的氟康唑脂质体固体制剂，由氟康唑脂质体和辅料制成。本发明意想不到的发现，当将氟康唑与特定的磷脂和胆固醇按照一定的配比组合，并联合抗氧剂制成脂质体，解决了氟康唑固体制剂存在的稳定性和溶出度等问题。本发明的脂质体工艺包封率高，产品质量好，可用于治疗毛霉菌病。

Description

一种氟康唑脂质体固体制剂及其新应用

技术领域

本发明涉及一种脂质体制剂，特别地涉及一种氟康唑脂质体固体制剂及其制法，以及在治疗毛霉菌病中的应用。

背景技术

毛霉菌为真菌中的一种，属条件致病菌，广泛存在于自然界，以粮食与水果上尤为多见。通过空气、尘埃和饮食而播散。免疫力降低是致病的诱发因素，因此糖尿病，白血病、营养不良、肝肾疾病及长期使用免疫抑制剂、肾上腺皮质激素等患者易患本病。主要通过皮肤粘膜交界处、呼吸道、消化道、手术或插管及破损皮肤进入人体。真菌侵入血管，特别是大、小动脉(很少静脉)而引起血栓和邻近组织缺血、梗死和坏死，可以化脓，但很少呈肉芽肿改变，可有中性粒细胞和浆细胞浸润，嗜酸粒细胞很少见。临床表现分为鼻脑型、心肺型、胃肠型、皮肤型和其它型等多种类型，并有血管栓塞引起的肺梗死现象，可有胸闷、胸痛、咳嗽、痰中带血，胸片显示非特异性肺炎和肺梗死。

氟康唑，其化学名称为：α-(2，4-二氟苯基)-α-(1H-1，2，4-三唑-1-基甲基)-1H-1，2，4-三唑-1-基乙醇，分子式：C₁₃H₁₂F₂N₆O，分子量：306.28，结构式为：

氟康唑是新型三唑类抗真菌药物，有广谱抗真菌作用，能选择性地抑制真菌的甾醇合成，对真菌细胞色素P-450依赖酶的抑制作用具有高度选择性。它在体内外对隐球菌属、念球菌属、黄曲菌、烟曲菌、皮炎芽生菌、粗球孢子菌及荚膜组织胞浆菌、斐氏着色菌、卡氏枝孢霉均显示良好的抗菌作用。它与蛋白结合率较低，且生物利用度高，并具有穿透中枢的特点，是临床抗真菌感染的首选药物，还可以用于治疗或预防滥用抗生素造成菌群失调后的真菌感染患者。由于艾滋病患者免疫低陷，粘膜特别容易感染真菌，所以该药还可用于艾滋病患者防真菌感染的治疗。

氟康唑最先由美国辉瑞公司上市，属世界级“重磅炸弹”药品。目前，我国临床上口服的制剂有片剂、胶囊剂、颗粒剂和分散片，均为活性成分氟康唑加一般辅料加工制得，由于氟康唑溶解性差，所以上述剂型的上市制剂一般溶出度较低，很容易出现不合格的现象，而且稳定性也很差。

专利文献CN1437940A公开了一种氟康唑口服片剂及其制备工艺，由1重量份的氟康唑作为原料药，以0-0.6重量份助崩剂、0.2-0.5重量份崩解剂、0-0.04重量份表面活性剂、0.9-1.9重量份粘合剂和1-1.5重量份增溶剂作为辅料制备而成。该专利采用乳糖作为增溶剂，吐温80或泊洛沙姆作为表面活性剂，对活性成分氟康唑的溶解性有一定的提高，但也只能达到85％左右，刚刚达到标准的80％，长时间放置后很容易不合格，而且稳定性也很差。

本发明人通过长期深入地研究，意想不到的发现当将氟康唑与特定的磷脂和胆固醇按照一定的配比组合，并联合抗氧剂制成脂质体，不仅解决了氟康唑脂质体固体制剂存在的上述问题，还可用于治疗毛霉菌病，从而完成了本发明。

发明内容

本发明的一个目的在于提供一种氟康唑脂质体固体制剂，具体地说，通过一定量的卵磷脂、胆固醇、抗氧剂和活性成分氟康唑的组合，采用薄膜分散技术制成氟康唑脂质体，然后和一定的辅料混合制成各种固体制剂，很好的解决了溶出度低、稳定性差的问题，获得了令人满意的效果。

本发明解决的技术方案如下：

本发明提供一种氟康唑脂质体固体制剂，由氟康唑脂质体和辅料制成，其中所述的辅料选自崩解剂、稀释剂、粘合剂、润滑剂、矫味剂中一种或几种，其特征在于其中所述的氟康唑脂质体是由以下重量份数的组分制成：

氟康唑          1份

卵磷脂类        1.8-10份

胆固醇          0.7-7份

抗氧剂          0.05-1.5份。

优选地，上述所述的氟康唑脂质体固体制剂，其特征在于其中所述的氟康唑脂质体是由以下重量份数的组分制成：

氟康唑        1份

卵磷脂类      2.2-6份

胆固醇        1.3-4.5份

抗氧剂        0.1-0.8份。

本发明上述所述的氟康唑脂质体固体制剂，其特征在于所述的卵磷脂类选自蛋黄卵磷脂、大豆卵磷脂、双硬脂酸卵磷脂、双软脂酸卵磷脂、双肉豆蔻酸卵磷脂、氢化蛋黄卵磷脂和氢化大豆卵磷脂中的一种或多种，优选大豆卵磷脂。

本发明上述所述的氟康唑脂质体固体制剂，其特征在于所述的抗氧剂选自亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、L-半胱氨酸、硫脲、甲醛合亚硫酸氢钠、维生素E、抗坏血酸棕榈酸酯、叔丁基对羟基茴香醚中的一种或多种，优选抗坏血酸棕榈酸酯。

本发明上述所述的氟康唑脂质体固体制剂，其特征在于其中所述的氟康唑脂质体的组分还包括pH值为5.5-7.5缓冲溶液，所述的缓冲溶液选自磷酸盐缓冲液、枸橼酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液中的一种或几种，优选枸橼酸钠-枸橼酸缓冲溶液。

本发明上述所述的氟康唑脂质体固体制剂，其特征在于其中所述的氟康唑脂质体是通过包括如下步骤的方法制成的：

(1)将氟康唑、卵磷脂、胆固醇和抗氧剂溶于基于四者总重量计的1∶5-8(g/ml)体积的有机溶剂中，混合均匀，于旋转薄膜蒸发器上减压除去有机溶剂，制得磷脂膜；

(2)加入pH值为5.5-7.5的缓冲溶液，振摇，搅拌20-40分钟，转速200-600r/min，使磷脂膜完全水化，采用组织捣碎机高速匀质乳化10-20分钟，保温50-60℃，转速12000-15000r/min，再用0.45μm微孔滤膜过滤，制得脂质体混悬液；

(3)将上述混悬液冷冻干燥或喷雾干燥，制得氟康唑脂质体。

其中，上述所述的氟康唑脂质体固体制剂，其特征在于所述的辅料中崩解剂选自羧甲淀粉钠、低取代羟丙纤维素、交联聚维酮、交联羧甲基纤维素钠、干淀粉中的一种或几种；稀释剂选自微晶纤维素、乳糖、淀粉、预胶化淀粉、山梨醇、甘露醇、糊精、硫酸钙、磷酸氢钙中的一种或几种；粘合剂选自聚维酮K30、羟丙甲纤维素、淀粉浆、羧甲基纤维素钠、糖浆中的一种或几种；矫味剂选自蔗糖、阿斯帕坦、糖精钠、甜菊素中的一种或几种；润滑剂选自硬脂酸镁、滑石粉、胶性二氧化硅、PEG6000、十二烷基硫酸钠等中的一种或几种。

本发明上述所述的氟康唑脂质体固体制剂，其可以为片剂、胶囊剂、颗粒剂或分散片，将氟康唑脂质体和辅料混合，制粒，分装或压片制得。

本发明还提供了一种氟康唑脂质体，其包括以下重量份数比的组分：

氟康唑        1份

卵磷脂        1.8-10份

胆固醇        0.7-7份

抗氧剂        0.05-1.5份

优选地，所述脂质体包括以下重量份数比的组分：

氟康唑        1份

卵磷脂        2.2-6份

胆固醇        1.3-4.5份

抗氧剂        0.1-0.8份

在本发明中，所述的卵磷脂选自蛋黄卵磷脂、大豆卵磷脂、双硬脂酸卵磷脂、双软脂酸卵磷脂、双肉豆蔻酸卵磷脂、氢化蛋黄卵磷脂和氢化大豆卵磷脂中的一种或多种，优选大豆卵磷脂。

在本发明中，所述的抗氧剂选自亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、L-半胱氨酸、硫脲、甲醛合亚硫酸氢钠、维生素E、抗坏血酸棕榈酸酯、叔丁基对羟基茴香醚中的一种或多种，优选抗坏血酸棕榈酸酯。

在本发明中，所述的组分还包括pH值为5.5-7.5缓冲溶液，选自磷酸盐缓冲液、枸橼酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液中的一种或几种，优选枸橼酸钠-枸橼酸缓冲溶液。

本发明的另一个目的在于提供了本发明的氟康唑脂质体的制备方法，其包括步骤：

(1)将氟康唑、卵磷脂、胆固醇和抗氧剂溶于有机溶剂中，混合均匀，于旋转薄膜蒸发器上减压除去有机溶剂，制得磷脂膜；

(2)加入pH值为5.5-7.5的缓冲溶液，振摇，搅拌使卵磷脂膜完全水化，采用组织捣碎机高速匀质乳化，再用微孔滤膜过滤，制得脂质体混悬液；

(3)将上述混悬液冷冻干燥或喷雾干燥，制得氟康唑脂质体。

在本发明的的制备方法中，所述的有机溶剂选自氯仿、二氯甲烷、乙醇、甲醇、叔丁醇、正丁醇、异丙醇、丙酮、乙醚、苯甲醇、正己烷中的一种或几种，优选体积比为2∶1∶2的甲醇、异丙醇和丙酮组合的混合溶剂。有机溶剂的量根据加入的氟康唑、磷脂、胆固醇、抗氧剂的量进行选择，以完全溶解上述成分为最低量的要求，优选是基于氟康唑、磷脂、胆固醇、抗氧剂四者总重量计的1∶5-8(g/ml)体积的有机溶剂。

在本发明的制备方法中，缓冲溶液的量以能够完全水化磷脂膜为最低要求，一般为有机溶剂用量的0.5-0.8倍体积。

在本发明制备方法中，步骤(2)中，搅拌时间为20-40分钟，可使磷脂膜完全水化，搅拌的转速200-600r/min；高速匀质乳化可采用组织捣碎机高速搅拌10-20分钟，转速12000-15000r/min；微孔滤膜可选用的孔径为0.45μm。

作为优选，本发明提供的氟康唑脂质体的制备方法，包括如下步骤：

(1)将氟康唑、卵磷脂、胆固醇和抗氧剂溶于基于四者总重量计的1∶5-8(g/ml)体积的有机溶剂中，混合均匀，于旋转薄膜蒸发器上减压除去有机溶剂，制得磷脂膜；

(2)加入pH值为5.5-7.5的缓冲溶液，振摇，搅拌20-40分钟，转速200-600r/min，使磷脂膜完全水化，采用组织捣碎机高速匀质乳化10-20分钟，保温50-60℃，转速12000-15000r/min，再用0.45μm微孔滤膜过滤，制得脂质体混悬液；

(3)将上述混悬液冷冻干燥或喷雾干燥，制得氟康唑脂质体。

本发明解决的技术方案还包括：

一种氟康唑脂质体固体制剂，由上述所述的氟康唑脂质体和药学上可接受的其他辅料组成，辅料没有特别限制，可以为药剂学中常用的固体制剂的药剂辅料，包括崩解剂、稀释剂、粘合剂、润滑剂、矫味剂等。

本发明所述的氟康唑脂质体固体制剂，由按重量份的下述组分制成：氟康唑脂质体1份、稀释剂0.2-5份，崩解剂0.1-1份，粘合剂0.01-0.5份，矫味剂0-20份，润滑剂0.01-0.2份。

上述所述的辅料，作为优选，崩解剂选自羧甲淀粉钠、低取代羟丙纤维素、交联聚维酮、交联羧甲基纤维素钠、干淀粉中的一种或几种；稀释剂选自微晶纤维素、乳糖、淀粉、预胶化淀粉、山梨醇、甘露醇、糊精、硫酸钙、磷酸氢钙中的一种或几种；粘合剂选自聚维酮K30、羟丙甲纤维素、淀粉浆、羧甲基纤维素钠、糖浆中的一种或几种；矫味剂选自蔗糖、阿斯帕坦、糖精钠、甜菊素中的一种或几种；润滑剂选自硬脂酸镁、滑石粉、胶性二氧化硅、PEG6000、十二烷基硫酸钠等中的一种或几种。

进一步地，上述所述的氟康唑脂质体固体制剂的制备方法，包括如下步骤：

(1)将氟康唑脂质体粉碎，过80目筛，备用；

(2)将稀释剂、崩解剂和矫味剂粉碎，过80目筛，混合，备用；

(3)将上述原辅料混合均匀，加入粘合剂制软材，过筛制粒，烘干，加入润滑剂混合均匀，整粒；

(4)将干燥的颗粒进行分装或压片，制得氟康唑脂质体固体制剂。

在本发明的脂质体的制备方法中，所采用的旋转薄膜蒸发器，也称为刮板薄膜蒸发器或机械搅拌薄膜蒸发器，本领域目前已知的这类薄膜蒸发器都可以用于本发明，例如可以采用无锡市雪浪发酵工程设备厂生产的LG2.5型离心式刮板薄膜蒸发器，也可以采用无锡市军嶂制药设备厂生产的LG-4型高效旋转薄膜蒸发器等。

在本文中，如果没有特别的说明，含量或用量都以重量份计；如果没有特别的说明，所采用的装置、仪器、原料、物质、用量、方法、时间、温度及其它条件等都为本领域众所周知的，或者是本领域技术人员根据本申请的描述结合现有技术可以获得的。

本发明的还提供了一种氟康唑脂质体固体制剂在治疗毛曲霉菌病中的应用。

与现有技术相比，本发明提供的氟康唑脂质体固体制剂主要具有如下优点：

稳定性高：本发明将氟康唑包裹于脂质体内，该脂质体的配方是经过长期研究筛选得到的，制备得到的脂质体制剂与常规方法得到的固体制剂相比，极大地提高了氟康唑的稳定性；

包封率高：本发明的脂质体的包封率通常为85％-90％，最高可达到95％，干燥过程中脂质体不会因脱水、融合、冰晶生成等发生破裂，在水化复溶之后，脂质体的包封率未曾降低，保证了产品质量；

副作用小：药物载体脂质体体内降解、无毒性和无免疫原性，而且可以提高药物治疗指数、降低药物毒性和减少药物副作用；

制备成本低：本发明的脂质体制剂的制备方法可采用常规的工艺设备，可工业规模、高效率生产、成本低。

具体实施方式

下面将参照实施例进一步详细阐述本发明，但是本领域技术人员应当理解，但本发明并不限于这些实施例以及使用的制备方法。而且，本领域技术人员根据本发明的描述可以对本发明进行对其进行等同替换、组合、改良或修饰，但这些都将包括在本发明的范围内。

实施例1氟康唑脂质体的制备

处方：

组分            用量

氟康唑          25g

大豆卵磷脂      55g

胆固醇          32.5g

抗坏血酸棕榈酸酯2.5g

制备工艺

(1)将25g氟康唑、55g大豆卵磷脂、32.5g胆固醇和2.5g抗坏血酸棕榈酸酯溶于600ml体积比为2∶1∶2的甲醇、异丙醇和丙酮的混合溶剂中，混合均匀，于旋转薄膜蒸发器上减压除去混合溶剂，制得磷脂膜；

(2)加入pH值为6.5的枸橼酸-枸橼酸钠缓冲溶液450ml，振摇，搅拌20分钟，转速600r/min，使磷脂膜完全水化，采用组织捣碎机高速匀质乳化20分钟，保温60℃，转速12000r/min，再用0.45μm微孔滤膜过滤，制得脂质体混悬液；

(3)将上述混悬液冷冻干燥，制得氟康唑脂质体。

实施例2氟康唑脂质体的制备

处方：

组分    用量

氟康唑           50g

大豆卵磷脂       210g

胆固醇           150g

抗坏血酸棕榈酸酯 22.5g

制备工艺

(1)将50g氟康唑、210g大豆卵磷脂、150g胆固醇和22.5g抗坏血酸棕榈酸酯溶于3400ml体积比为1∶1∶2的乙醇、异丙醇和甲醇的混合溶剂中，混合均匀，于旋转薄膜蒸发器上减压除去混合溶剂，制得磷脂膜；

(2)加入pH值为5.5的磷酸-磷酸氢二钠缓冲溶液2000ml，振摇，搅拌40分钟，转速200r/min，使磷脂膜完全水化，采用组织捣碎机高速匀质乳化10分钟，保温50℃，转速15000r/min，再用0.45μm微孔滤膜过滤，制得脂质体混悬液；

(3)将上述混悬液喷雾干燥，制得氟康唑脂质体。

实施例3氟康唑脂质体的制备

处方：

组分                用量

氟康唑              100g

大豆卵磷脂          600g

胆固醇              450g

抗坏血酸棕榈酸酯    80g

制备工艺

(1)将100g氟康唑、600g大豆卵磷脂、450g胆固醇和80g抗坏血酸棕榈酸酯溶于7500ml体积比为3∶2∶2的叔丁醇、丙酮和甲醇的混合溶剂中，混和均匀，于旋转薄膜蒸发器上减压除去混合溶剂，制得磷脂膜；

(2)加入pH值为7.5的枸橼酸-枸橼酸钠缓冲溶液3500ml，振摇，搅拌30分钟，转速400r/min，使磷脂膜完全水化，采用组织捣碎机高速匀质乳化15分钟，保温60℃，转速15000r/min，再用0.45μm微孔滤膜过滤，制得脂质体混悬液；

(3)将上述混悬液冷冻干燥，制得氟康唑脂质体。

实施例4氟康唑片的制备

处方(1000片)

氟康唑脂质体(以氟康唑计)    50g

乳糖                        38g

淀粉                        41g

羧甲淀粉钠                  8g

聚维酮K30                    2.5g

硬脂酸镁                    1.8g

制备工艺

(1)将实施例1制备的含50g氟康唑的脂质体粉碎，过80目筛，备用；

(2)称取38g乳糖、41g淀粉和8g羧甲淀粉钠，过80目筛，混合，备用；

(3)将上述原辅料混合均匀，加入5％聚维酮K₃₀50％乙醇溶液50ml制软材，过20目筛制粒，60℃烘干，加入1.8g硬脂酸镁混合均匀，18目筛整粒，得氟康唑颗粒；

(4)将干燥的颗粒压片，制得氟康唑片。

实施例5氟康唑胶囊的制备

处方(1000粒)

氟康唑脂质体(以氟康唑计)        50g

乳糖                            26g

微晶纤维素                      34g

聚维酮K30                       2g

滑石粉                          2.5g

十二烷基硫酸钠                  5g

制备工艺

(1)将实施例2制备的含50g氟康唑的脂质体粉碎，过80目筛，备用；

(2)称取26g乳糖、34g微晶纤维素，过80目筛，混合，备用；

(3)将上述原辅料混合均匀，加入5％聚维酮K₃₀50％乙醇溶液40ml制软材，过20目筛制粒，65℃烘干，加入2.5g滑石粉和5g十二烷基硫酸钠混合均匀，18目筛整粒，得氟康唑颗粒；

(4)将干燥的颗粒填充空囊壳，制得氟康唑胶囊。

实施例6氟康唑分散片的制备

处方(1000片)

氟康唑脂质体(以氟康唑计)        50g

微晶纤维素                      36g

淀粉                            40g

交联聚维酮                      8g

低取代羟丙纤维素                8g

阿斯帕坦                        5g

羟丙甲纤维素                    2g

硬脂酸镁                        1.5g

滑石粉                          3g

制备工艺

(1)将实施例3制备的含50g氟康唑的脂质体粉碎，过80目筛，备用；

(2)称取36g微晶纤维素、40g淀粉、8g低取代羟丙纤维素、5g阿斯帕坦和8g交联聚维酮，过80目筛，混合，备用；

(3)将上述原辅料混合均匀，加入2％羟丙甲纤维素20％乙醇溶液100ml制软材，过20目筛制粒，60℃烘干，加入1.5g硬脂酸镁和3g滑石粉混合均匀，18目筛整粒，得氟康唑颗粒；

(4)将干燥的颗粒压片，制得氟康唑分散片。

实施例7氟康唑颗粒的制备

处方(1000包)

氟康唑脂质体(以氟康唑计)        50g

蔗糖                            900g

甘露醇                          200g

羧甲淀粉钠                      60g

阿斯帕坦                        30g

羟丙甲纤维素                    12g

制备工艺

(1)将实施例3制备的含50g氟康唑的脂质体粉碎，过80目筛，备用；

(2)称取900g蔗糖、200g甘露醇、60g羧甲淀粉钠和30g阿斯帕坦，过80目筛，混合，备用；

(3)将上述原辅料混合均匀，加入2％羟丙甲纤维素20％乙醇溶液600ml制软材，过20目筛制粒，60℃烘干，18目筛整粒，得氟康唑颗粒；

(4)将干燥的颗粒分装，制得氟康唑颗粒。

对比例1氟康唑脂质体的制备(比较组分不同)

处方：

组分                  用量

氟康唑                25g

蛋黄磷脂酰丝氨酸      55g

胆固醇                32.5g

谷胱甘肽              2.5g

制备工艺同实施例1，制得本发明组分之外的脂质体制剂。

对比例2氟康唑脂质体的制备(比较组分用量不同)

处方：

组分              用量

氟康唑            50g

大豆卵磷脂        550g

胆固醇            360g

抗坏血酸棕榈酸酯  80g

制备工艺同实施例2，制得本发明处方配比范围之外的脂质体。

对比例3氟康唑脂质体的制备(比较工艺点的不同)

处方：

组分             用量

氟康唑           100g

大豆卵磷脂       600g

胆固醇           450g

抗坏血酸棕榈酸酯 80g

制备工艺

(1)将100g氟康唑、600g大豆卵磷脂、450g胆固醇和80g抗坏血酸棕榈酸酯溶于7500ml体积比为3∶2的叔丁醇和丙酮的混合溶剂中，混和均匀，于旋转薄膜蒸发器上减压除去混合溶剂，制得磷脂膜；

(2)加入pH值为7.5的枸橼酸-枸橼酸钠缓冲溶液3500ml，振摇，搅拌10分钟，转速800r/min，使磷脂膜完全水化，采用组织捣碎机高速匀质乳化40分钟，保温80℃，转速8000r/min，再用0.8μm微孔滤膜过滤，制得脂质体混悬液；

(3)将上述混悬液冷冻干燥，制得氟康唑脂质体。

对比例4选用对比例1制备的氟康唑脂质体，按实施例4的制备工艺制得氟康唑片。

对比例5选用对比例2制备的氟康唑脂质体，按实施例5的制备工艺制得氟康唑胶囊。

对比例6选用对比例3制备的氟康唑脂质体，按实施例6的制备工艺制得氟康唑分散片。

对比例7选用对比例3制备的氟康唑脂质体，按实施例7的制备工艺制得氟康唑颗粒。

试验例1包封率的测定

取实施例1-3和对比例1-3制备的脂质体，高效液相色谱法检测氟康唑的总含量为M，选用柱色谱法分离脂质体。

取1.5g葡聚糖凝胶G-50，用pH6.8磷酸盐缓冲液浸泡溶胀12h以上，装入层析柱内(200×10mm)，用上述磷酸盐缓冲液冲洗平衡，分别取实施例1-3和对比例1-2得到的氟康唑脂质体加水溶解，制成每1ml含有氟康唑约15mg的溶液，分别取各溶液1.8ml，加入层析柱顶部，用磷酸盐缓冲液50ml洗脱，流速1.3ml/min，收集的洗脱液加入破膜剂(乙醇∶苯甲醇＝6∶1)50ml，混匀，高效液相色谱法检测氟康唑的含量M1。

包封率％＝M1/M×100％。

表1包封率测定结果

由以上结果可知，本发明范围内的实施例处方配比制得的脂质体包封率很高，符合实际生产要求；而本发明范围外的对比例处方配比制得的脂质体包封率很低，和实施例相比有明显的差距，不适合生产要求。

试验例2粒径的检测

取实施例1-3和对比例1-3制备的脂质体，采用显微图像分析仪测定脂质体的粒径分布，结果如表2：

表2粒径检测结果

由以上结果可知，实施例1-3制得的脂质体显球状，粒径均匀，范围为100-200nm；对比例1-3制得的脂质体形状不定，杂乱无章，大小不一，粒径不均匀，范围为400-800nm。

试验例3稳定性研究

将以上实施例4-7和对比例4-7制备的样品与上市的氟康唑片(山东齐都药业有限公司生产，批号20080908，规格0.1g)在高温40℃、相对湿度75％±5％条件下6个月，进行加速试验考察，结果见表3。

表3加速试验考察

由以上结果可知，本发明实施例4-7的样品溶出度都在92％以上，远远高于上市片剂的85％左右，说明本发明制得的氟康唑脂质体提高了其溶解性，从而相应的提高了溶出度。加速试验6个月以后，本发明实施例4-7的样品溶出度、含量和有关物质没有发生明显变化，而对比例4-7和上市制剂含量、溶出度下降较大，有关物质明显增大，说明本发明制得的氟康唑脂质体提高了其制剂的稳定性。

试验例4临床前准备

1、病例的选择

患者59例，26例经纤维胃检查，胃镜活检或术后病理证实为并发毛霉菌感染，这26例病人中，胃癌9例，胃溃疡15例，糜烂性胃炎2例；20例肺部真菌感染的患者经痰培养出毛霉菌，23例患者中支气管哮喘9例，慢性阻塞性肺病9例，肺癌1例，肺炎3例；10例肾病患者经术后病理证实为毛霉菌感染，这10例患者中，肾血肿6例，肾坏死4例。其中男32例，女27例，年龄在24～62岁，其中大于50岁者35例；病程20天～10年不等。

2、治疗方法

将患者分为治疗组、对照组和上市样组。治疗组21例，对照组18例，上市样组20例，三组患者性别、年龄、病程差异均无显著性。治疗组给予实施例5制备的氟康唑脂质体胶囊，首次剂量0.2g，以后一次0.1g，1次/天；对照组口服酮康唑，每日0.2～0.4g；上市样组给予江西红星药业有限公司生产的氟康唑胶囊(批号20080602，规格0.1g/粒)，首次剂量0.2g，以后一次0.1g，1次/天。4周为一疗程。

3、观察项目

①临床观察与检查：服药后30min内应观察有无即可反应；按试验方案要求对服用试验药、对照药及上市药的患者按时进行症状观察及体征检查。②细菌学检查：给药前、给药后及结束后对感染部位分离的标本进行细菌分离、鉴定。③实验室检查：给药前后及治疗结束后按试验方案要求进行血尿常规和肝肾功能检查。

4、临床评价

①临床效果按4级评定标准(痊愈、显效、有效、无效)进行评定，以痊愈+显效计算有效率。

②细菌学效果按消失、部分消失、不变3级评定。

③不良反应

试验例5临床试验结果

1、临床及真菌学疗效

起效时间最快2周，多数患者在3周时，临床症状消失。治疗一个疗程后，治疗组临床治愈13例(61.9％)，显效5例(23.8％)，进步3例(14.3％)，无效0例，有效率为85.7％；真菌清除率为95.7％。对照组治愈9例(50％)，显效3例(16.7％)，进步3例(16.7％)，无效3例(16.7％)，有效率为66.7％；真菌清除率为60.8％。上市样组治愈11例(55％)，显效6例(30％)，进步2例(10％)，无效1例(5％)，有效率为85％；真菌清除率为86.7％。治愈结束后3个月，临床治愈者经复诊或随访，治疗组无复发，对照组3例复发(复发率为16.7％)，均为临床病症严重者，上市样组2例复发(复发率为10％)。

2、不良反应

服用实施例5制备的氟康唑脂质体胶囊后1例出现轻度恶心，未影响治疗。对照组口服酮康唑后，3例出现上腹部饱胀不适，轻度恶心，不过也不影响治疗。上市样组使用上市样后2例患者出现头痛头昏的症状，停药后恢复正常。停药后2周，查功能和血尿常规无异常改变。

综上，本发明制备的氟康唑脂质体固体制剂治疗毛霉菌病具有安全、效好、价廉等优点，值得临床使用。

Claims (9)

1.一种氟康唑固体制剂，由氟康唑脂质体和辅料制成，其中所述的辅料选自崩解剂、稀释剂、粘合剂、润滑剂、矫味剂中一种或几种，其特征在于其中所述的氟康唑脂质体是由以下重量份数的组分制成：

或者，

或者，

2.根据权利要求1所述的氟康唑固体制剂，其特征在于其中所述的氟康唑脂质体的组分还包括pH值为5.5-7.5缓冲溶液，所述的缓冲溶液选自磷酸盐缓冲液、枸橼酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液中的一种或几种。

3.根据权利要求2所述的氟康唑固体制剂，其特征在于其中所述的缓冲溶液为枸橼酸钠-枸橼酸缓冲溶液。

4.根据权利要求1-3任一项所述的氟康唑固体制剂，其特征在于其中所述的氟康唑脂质体是通过包括如下步骤的方法制成的：

(1)将氟康唑、大豆卵磷脂、胆固醇和抗坏血酸棕榈酸酯溶于基于四者总重量计的1∶5-8g/ml体积的有机溶剂中，混合均匀，于旋转薄膜蒸发器上减压除去有机溶剂，制得磷脂膜；

(2)加入pH值为5.5-7.5的缓冲溶液，振摇，搅拌20-40分钟，转速200-600r/min，使磷脂膜完全水化，采用组织捣碎机高速匀质乳化10-20分钟，保温50-60℃，转速12000-15000r/min，再用0.45μm微孔滤膜过滤，制得脂质体混悬液；

(3)将上述混悬液冷冻干燥或喷雾干燥，制得氟康唑脂质体。

5.根据权利要求1-3任一项所述的氟康唑固体制剂，其特征在于氟康唑脂质体1份、稀释剂0.2-5份，崩解剂0.1-1份，粘合剂0.01-0.5份，矫味剂0-20份，润滑剂0.01-0.2份。

6.根据权利要求5所述的氟康唑固体制剂，其特征在于所述的辅料中崩解剂选自羧甲淀粉钠、低取代羟丙纤维素、交联聚维酮、交联羧甲基纤维素钠、干淀粉中的一种或几种；稀释剂选自微晶纤维素、乳糖、淀粉、预胶化淀粉、山梨醇、甘露醇、糊精、硫酸钙、磷酸氢钙中的一种或几种；粘合剂选自聚维酮K30、羟丙甲纤维素、淀粉浆、羧甲基纤维素钠、糖浆中的一种或几种；矫味剂选自蔗糖、阿斯帕坦、糖精钠、甜菊素中的一种或几种；润滑剂选自硬脂酸镁、滑石粉、胶性二氧化硅、PEG6000、十二烷基硫酸钠中的一种或几种。

7.根据权利要求5所述的氟康唑固体制剂，其为片剂、胶囊剂或颗粒剂，将氟康唑脂质体和辅料混合，制粒，分装或压片制得。

8.根据权利要求7所述的氟康唑固体制剂，其中所述的片剂为分散片。

9.根据权利要求1-8中任一项所述的氟康唑脂质体固体制剂在制备治疗毛霉菌病药物中的应用。