CN101696415A - 一种油酸脱氢酶基因及其所编码的蛋白质 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种油酸脱氢酶基因及其所编码的蛋白质，属于基因工程领域。播娘蒿油酸脱氢酶基因DsFAD2的cDNA序列SEQ ID NO.1及其编码的氨基酸序列SEQ ID NO.2。本发明基因为双子叶植物播娘蒿的首次报道，参与播娘蒿种子贮藏亚油酸的生物合成，mRNA表达分析表明该基因受伤害诱导，不受温度影响。转基因实验证明DsFAD2基因转化油菜，可提高油菜中的亚油酸和亚麻酸含量；而转该基因反义片段则会抑制亚油酸合成，从而显著提高油菜籽油酸含量。
Description
技术领域
本发明公开了一种油酸脱氢酶基因及其所编码的蛋白质，属于基因工程领域，具体地涉及到植物中油酸合成的关键酶及其编码基因。
技术背景
油酸作为必须脂肪酸，在医疗、保健等方面具有重要作用，而Δ12-油酸去饱和酶(delta-12 oleate desaturase FAD2)是植物产生多聚不饱和脂肪酸的关键酶，催化油酸脱饱和产生亚油酸。油酸脱氢酶只存在于植物和微生物中，在人和哺乳动物中不存在，所以人体不能自身合成亚油酸，必须从体外摄取。人们先后从蓝细菌，拟南芥、芝麻、花生及棉花中分离到质体或微粒体的油酸脱氢酶基因。
油酸脱氢酶的活性受温度调节，温度可以调控油酸的去饱和过程，从而控制油酸的含量。然而，不同植物的油酸脱氢酶受温度的影响程度不同。
我们首次报道了双子叶植物播娘蒿的油酸脱氢酶基因。
发明内容
技术问题
本发明的目的在于公开一种油酸脱氢酶基因及其所编码的蛋白质，该基因来自播娘蒿，可作为目的基因导入植物，抑制亚油酸的合成，促使油酸的更多积累，进行植物品种改良。
技术方案
本发明油酸脱氢酶基因(DsFAD2)，其核苷酸序列SEQ ID NO.1为：
CTCCAGAAACATGGGTGCAGGTGGTAGAATGCCGGTTCCTTCTTCTTCCAAGA
AATCGGAAACCGATGCTCTAAAGCGGGTGCCGTGCGAGAAACCGCCTTTCTC
GCTGGGAGATCTTAAGAAAGCTATCCCACCGCATTGTTTCAAACGCTCAATCC
CTCGCTCTTTCTCCTACCTTATCACTGACATCATTATAGTCTCATGCTTCTACTAT
GTCGCCACCAATTACTTCTCTATCCTCCCTCACCCTCTCTCTTACTTGGCTTGGC
CCCTATATTGGGTCTGTCAAGGCTGTGTCCTTACCGGTGTTTGGGTCATAGCCC
ACGAATGTGGCCACCACGCTTTCAGCGACTACCAGTGGCTAGATGACACAGT
CGGTCTTATCTTCCATTCTTTCCTCCTTGTCCCTTACTTCTCCTGGAAATACAGC
CATCGCCGTCACCATTCCAACACGGGTTCCCTCGAAAGAGATGAAGTGTTTGT
CCCCAAGAAGAAATCTGCAATCAAGTGGTACGGCAAATACCTCAACAACCCT
GTTGGGCGAATCGTGATGTTGATTGTCCAGTTCACCCTCGGCTGGCCATTGTAC
TTGGCCTTCAATGTCTCGGGCAGACCCTATGACGGCTTTGCATGCCATTTCTTC
CCAAACGCTCCCATCTACAACGACCGGGAACGCCTCCAGATATACATCTCAGA
TGCCGGTATTCTCGCTGTCTGCTATGGTCTTTACCGTTATGCTGCTGCACAAGG
AATGGCCTCGATGATCTGCTTCTACGGAGTACCGCTTCTGATAGTGAACGGGTT
CCTCGTCTTGATCACTTACTTGCAGCACACTCATCCCTCGTTGCCTCACTACGA
TTCATCCGAGTGGGATTGGTTAAGGGGAGCTATGGCTACCGTAGACAGAGACT
ATGGAATCCTTAACAAGGTGTTCCACAACATCACGGACACACACGTGGCTCAT
CATCTGTTCTCGACAATGCCGCATTATAACGCAATGGAAGCTACAAAGGCGAT
AAAGCCAATACTCGGAGACTATTATCAGTTCGATGGAACACCGTGGTATAAGG
CGATGTATAGGGAGGCAAAGGAGTGTATCTATGTAGAACCGGACAGGGAAGG
TGAGAAGAAAGGTGTGTACTGGTACAACAATAAGTTATGAGGATGATGGTGA
AACAGTGGATCTTTCACTTGTTTGAGTTGTCTTTGTCTAAGAAGAAGCTATGG
TTTGTTTCAATAATCTTATTGTCCATTTTGTTGTGTTTTGACATTTTGGCTAAATT
ATGTGATGTGGGAAGTTAGTGTTCAAATGTTTTGTGTCTGTATTGTTCTTCTCAT
CGCTG。
上述的油酸脱氢酶基因(DsFAD2)基因来自播娘蒿，其编码的蛋白质来自播娘蒿(Descurainia sophia)，它具有如下所示的氨基酸序列SEQ ID NO.2：
MGAGGRMPVPSSSKKSETDALKRVPCEKPPFSLGDLKKAIPPHCFKRSIPRSFSYL
ITDIIIVSCFYYVATNYFSILPHPLSYLAWPLYWVCQGCVLTGVWVIAHECGHHAF
SDYQWLDDTVGLIFHSFLLVPYFSWKYSHRRHHSNTGSLERDEVFVPKKKSAIK
WYGKYLNNPVGRIVMLIVQFTLGWPLYLAFNVSGRPYDGFACHFFPNAPIYNDR
ERLQIYISDAGILAVCYGLYRYAAAQGMASMICFYGVPLLIVNGFLVLITYLQHTH
PSLPHYDSSEWDWLRGAMATVDRDYGILNKVFHNITDTHVAHHLFSTMPHYNA
MEATKAIKPILGDYYQFDGTPWYKAMYREAKECIYVEPDREGEKKGVYWYNN
KL。
有益效果
1、本发明公开了一种油酸脱氢酶基因(DsFAD2)及其所编码的蛋白质。油酸脱氢酶基因在双子叶植物播娘蒿中是首次报道，可应用于双子叶植物的遗传改良。该基因来自播娘蒿(Descurainia sophia)，转基因实验证明DsFAD2基因转化油菜，可提高油菜中的亚油酸和亚麻酸含量；而转该基因反义片段则会抑制亚油酸合成，从而显著提高油菜籽油酸含量。所编码的蛋白质具有油酸脱氢酶功能。
2、本发明人提供的DsFAD2基因能催化油酸脱饱和产生亚油酸。mRNA表达分析表明DsFAD2基因属于组成型表达，但是DsFAD2基因在播娘蒿根和角果中表达量较高。
3、本发明的DsFAD2基因来自播娘蒿，具有适合于播娘蒿等双子叶植物表达的优化密码子，其基因工程受体植物除了单子叶植物，如小麦、玉米、水稻等之外更加适合于拟南芥、油菜、烟草、棉花等双子叶植物。
4、利用本发明DsFAD2基因作为目的基因构建植物反义表达载体，以种子特异性启动子，遗传转化油菜等双子叶植物，抑制亚油酸的合成，促使油酸的更多积累。转化可经农杆菌介导法、基因枪法、花粉管通道法或其它方法转化植物。
具体实施方式
实施例1
根据GenBank中拟南芥和其它物种FAD2序列设计了播娘蒿中DsFAD2引物FAD2 P1和FAD2 P2。以播娘蒿角果总RNA为起始材料，经反转录得到的cDNA作为PCR扩增的模板，运用引物组合FAD2 P1和FAD2 P2，进行PCR扩增，得到一条明亮的条带，测序。利用RACE试剂盒的反转录体系，将播娘蒿角果总RNA反转录为cDNA作为模板，运用基因特异性引物GST和锚定引物，进行PCR扩增，DsFAD2的特异性引物为5′FAD2 GST和3′FAD2 GST，分别得到一条明亮的条带。测序后序列比对显示，它们都含有引物设计时保守区域重复的一段序列，Blast搜索显示这些序列都很可能是这些基因所缺少的那一部分。根据上面的信息在DsFAD2非编码区设计了它的全长引物DsFAD2.1和DsFAD2.2，上述所用引物如下：
FAD2 P1：5′-ACTTGCTTCCAGTGCCCTTA-3′
FAD2 P2：5′-TCGCAAAGTGCAATGTCTTC-3′
5′FAD2 GST：5′-TCCTCTCTCCGATTCCCAC-3′
3′FAD2 GST：5′-AAATCACTCACCAGTCACCACT-3′
DsFAD2.1：5′-CTCCAGAAACATGGGTGC-3′
DsFAD2.2：5′-CAGCGATGAGAAGAACAATAC-3′
并以全长引物DsFAD2.1、DsFAD2.2进行PCR扩增得到特异性条带，获得播娘蒿油酸脱氢酶基因的全长序列。以总RNA为模板，经反转录合成cDNA第一条链后，用高保真Taq酶(购自大连宝生物工程有限公司)进行PCR扩增。PCR程序如下：94℃预变性3min，94℃变性60s，56℃复性90s，72℃延伸2min，32个循环后，72℃再延伸10min，最后4℃保存。PCR回收产物连接到pMD19-T克隆载体上(购自大连宝生物工程有限公司)，转化到大肠杆菌TOP10(北京天为时代生物工程有限公司)，以来自目的片段上的引物序列为引物，进行PCR扩增，鉴定阳性克隆；序列的测定委托上海Invitrogen生物技术有限公司完成。(见SEQ ID NO.1)。
BLAST的结果及分子建模结果证明从播娘蒿中新得到的基因确为一个编码油酸脱氢酶基因(delta-12 oleate desaturase FAD2)，该基因编码产物具有催化合成亚油酸的功能。
实施例2
上述获得播娘蒿油酸脱氢酶基因DsFAD2的cDNA序列SEQ ID NO.1，其编码的蛋白质，来自播娘蒿(Descurainia sophia)，它的氨基酸序列为SEQ ID NO.2，DsFAD2cDNA全长1343bp，ORF1152bp编码383个氨基酸，预测编码蛋白分子量为44.1KD，等电点PI为8.63。根据氨基酸序列比对的结果显示，DsFAD2与其他作物中FAD2的一致性为90％-73％，其中和拟南芥相似性最高为90％。该序列有3个高度保守的组氨酸Boxes，这一特性是所有膜结合去饱和酶的共同特性，这些组氨酸Boxes用以结合催化所需的两个铁离子，是去饱和酶行使功能所必须的。它和其它作物中的FAD2一样在N端没有明显的信号肽，但在C端发现有一富含芳香族氨基酸的信号肽，被认为是内质网修复信号。跨膜区预测显示该序列存在5个跨膜区。
实施例3
用DsFAD2全长引物进行半定量RT-PCR分析播娘蒿根、茎、叶、花蕾、花和角果的表达，结果表明，播娘蒿花蕾，花和幼嫩角果中的表达是逐渐增加的，这一结果反映了油酸脱氢酶在脂肪酸去饱和化的过程中起着重要作用，它们是花发育过程中花粉形成所必须的。DsFAD2在冷胁迫下表达量是基本恒定的；在伤害胁迫下受到诱导表达。
实施例4
利用全长引物进行PCR扩增，将PCR所得产物用BamHI和SacI进行双酶切，回收酶切产物并将其插入植物转化载体PBI121，构建重组转基因反义载体PBI121-DsFAD2，将转基因载体PBI121-DsFAD2转化大肠杆菌JM109，提PCR阳性菌落的质粒进行酶切鉴定。双酶切载体PBI121-DsFAD2，酶切后分别得到了预期大小目的片段，对克隆到载体PBI121的DsFAD2进行测序，测序结果与基因的序列进行比对分析，发现DNA序列完全相同。将验证正确的转基因载体PBI121-DsFAD2转化农杆菌LBA4404，对转化后的抗性单菌落进行PCR检测挑选阳性单克隆测序，将测序结果与DsFAD2基因序列比对，序列比对结果表明序列完全相同，表明转基因载体已经转入农杆菌LBA4404。采用根癌农杆菌介导法，将播娘蒿油酸脱氢酶基因转化甘蓝型油菜苏油1号。对获得的转基因植株进行PCR，RT-PCR及Southern杂交进行阳性验证，证明该基因已经转入苏油1号。
对转基因后代种子的脂肪酸含量进行测定，转正义的DsFAD2转基因植株亚油酸含量从20.1％±0.86提高到25.5％±0.67，平均提高了5.4％；亚麻酸含量从7.0％±0.27提高到8.3％±0.19，平均提高了1.3％；转反义的DsFAD2转基因植株油酸含量从60.8％±0.78提高到70.2％±0.89，平均提高了9.4％；亚油酸含量从20.1％±0.86降低到16.1％±0.46，平均降低了4.0％；说明DsFAD2基因转化油菜，可提高油菜中的亚油酸和亚麻酸含量；而转该基因反义片段则会抑制亚油酸合成，从而显著提高油菜籽油酸含量。
上述实施例1、2表明本发明中来源于播娘蒿的油酸脱氢酶基因DsFAD2。实施例3、4表明该基因有提高种子油酸含量的功能。此类基因由于来源于双子叶植物，具有双子叶植物优化的密码子，与单子叶植物来源的油酸脱氢酶基因相比，更加适合于拟南芥、油菜、烟草、棉花等双子叶作物提高油酸含量的遗传改良。
本发明人从双子叶植物播娘蒿(Descurainia sophia)中克隆了一个cDNA，编码油酸脱氢酶基因，命名为DsFAD2。根据氨基酸序列比对的结果显示，DsFAD2与其他作物中FAD2的一致性为90％-73％，其中和拟南芥相似性最高为90％。该序列有3个高度保守的组氨酸Boxes，这一特性是所有膜结合去饱和酶的共同特性，这些组氨酸Boxes用以结合催化所需的两个铁离子，是去饱和酶行使功能所必须的。它和其它作物中的FAD2一样在N端没有明显的信号肽，但在C端发现有一富含芳香族氨基酸的信号肽，被认为是内质网修复信号。跨膜区预测显示该序列存在5个跨膜区。
mRNA表达分析表明DsFAD2在播娘蒿花蕾、花和幼嫩角果中的表达是逐渐增加的，这一结果反映了油酸脱氢酶在脂肪酸去饱和化的过程中起着重要作用，它们是花发育过程中花粉形成所必须的。DsFAD2在冷胁迫下表达量是基本恒定的；在伤害胁迫下受到诱导表达。
综上所述，本发明人提供的DsFAD2基因是首次在双子叶植物中分离的新基因，其功能是催化亚油酸的生物合成。本发明所述的一种植物油酸脱氢酶基因已经在很多植物中发现。可利用本发明DsFAD2基因作为目的基因构建植物反义表达载体，使用种子特异性的NAPIN启动子，使该基因特异的在种子中表达。所用的表达载体可为Ti质粒，Ri质粒，植物病毒载体等。转化方法可用农杆菌介导法、基因枪法、花粉管通道法或其它方法转化植物。
本发明的DsFAD2基因来自播娘蒿，具有适合于播娘蒿等双子叶植物表达的优化密码子，其基因工程受体植物除了单子叶植物，如小麦、玉米、水稻等之外更加适合于拟南芥、油菜、烟草、棉花等双子叶植物。
本发明涉及的序列及记号分列如下：
(1)SEQ ID NO.1的信息
(i)序列特征：
(A)长度：1343bp
(B)类型：核苷酸
(C)链性：单链
(D)拓扑结构：线性
(ii)分子类型：核苷酸
(iii)序列描述：SEQ ID NO.1
(2)SEQ ID NO.2的信息
(i)序列特征：
(A)长度：383a.a
(B)类型：氨基酸
(C)链性：单链
(D)拓扑结构：线性
(ii)分子类型：蛋白质
(iii)序列描述：SEQ ID NO.2
(3)SEQ ID NO.3的信息
(i)序列特征：
(A)长度：20b
(B)类型：核苷酸
(C)链性：单链
(D)拓扑结构：线性
(ii)分子类型：核苷酸
(iii)序列描述：SEQ ID NO.3
(4)SEQ ID NO.4的信息
(i)序列特征：
(A)长度：20b
(B)类型：核苷酸
(C)链性：单链
(D)拓扑结构：线性
(ii)分子类型：核苷酸
(iii)序列描述：SEQ ID NO.4
(5)SEQ ID NO.5的信息
(i)序列特征：
(A)长度：19b
(B)类型：核苷酸
(C)链性：单链
(D)拓扑结构：线性
(ii)分子类型：核苷酸
(iii)序列描述：SEQ ID NO.5
(6)SEQ ID NO.6的信息
(i)序列特征：
(A)长度：22b
(B)类型：核苷酸
(C)链性：单链
(D)拓扑结构：线性
(ii)分子类型：核苷酸
(iii)序列描述：SEQ ID NO.6
(7)SEQ ID NO.7的信息
(i)序列特征：
(A)长度：18b
(B)类型：核苷酸
(C)链性：单链
(D)拓扑结构：线性
(ii)分子类型：核苷酸
(iii)序列描述：SEQ ID NO.7
(8)SEQ ID NO.8的信息
(i)序列特征：
(A)长度：21b
(B)类型：核苷酸
(C)链性：单链
(D)拓扑结构：线性
(ii)分子类型：核苷酸
(iii)序列描述：SEQ ID NO.8
SEQUENCE LISTING
<110>南京农业大学
<120>一种油酸脱氢酶基因及其所编码的蛋白质
<130>DsFAD2
<140>2009-10-26
<141>2009-10-26
<150>2009-10-20
<151>2009-10-20
<160>8
<170>PatentIn version 3.5
<210>1
<211>1343
<212>DNA
<213>Descurainia sophia
<400>1
ctccagaaac atgggtgcag gtggtagaat gccggttcct tcttcttcca agaaatcgga 60
aaccgatgct ctaaagcggg tgccgtgcga gaaaccgcct ttctcgctgg gagatcttaa 120
gaaagctatc ccaccgcatt gtttcaaacg ctcaatccct cgctctttct cctaccttat 180
cactgacatc attatagtct catgcttcta ctatgtcgcc accaattact tctctatcct 240
ccctcaccct ctctcttact tggcttggcc cctatattgg gtctgtcaag gctgtgtcct 300
taccggtgtt tgggtcatag cccacgaatg tggccaccac gctttcagcg actaccagtg 360
gctagatgac acagtcggtc ttatcttcca ttctttcctc cttgtccctt acttctcctg 420
gaaatacagc catcgccgtc accattccaa cacgggttcc ctcgaaagag atgaagtgtt 480
tgtccccaag aagaaatctg caatcaagtg gtacggcaaa tacctcaaca accctgttgg 540
gcgaatcgtg atgttgattg tccagttcac cctcggctgg ccattgtact tggccttcaa 600
tgtctcgggc agaccctatg acggctttgc atgccatttc ttcccaaacg ctcccatcta 660
caacgaccgg gaacgcctcc agatatacat ctcagatgcc ggtattctcg ctgtctgcta 720
tggtctttac cgttatgctg ctgcacaagg aatggcctcg atgatctgct tctacggagt 780
accgcttctg atagtgaacg ggttcctcgt cttgatcact tacttgcagc acactcatcc 840
ctcgttgcct cactacgatt catccgagtg ggattggtta aggggagcta tggctaccgt 900
agacagagac tatggaatcc ttaacaaggt gttccacaac atcacggaca cacacgtggc 960
tcatcatctg ttctcgacaa tgccgcatta taacgcaatg gaagctacaa aggcgataaa 1020
gccaatactc ggagactatt atcagttcga tggaacaccg tggtataagg cgatgtatag 1080
ggaggcaaag gagtgtatct atgtagaacc ggacagggaa ggtgagaaga aaggtgtgta 1140
ctggtacaac aataagttat gaggatgatg gtgaaacagt ggatctttca cttgtttgag 1200
ttgtctttgt ctaagaagaa gctatggttt gtttcaataa tcttattgtc cattttgttg 1260
tgttttgaca ttttggctaa attatgtgat gtgggaagtt agtgttcaaa tgttttgtgt 1320
ctgtattgtt cttctcatcg ctg 1343
<210>2
<211>383
<212>PRT
<213>Descurainia sophia
<400>2
Met Gly Ala Gly Gly Arg Met Pro Val Pro Ser Ser Ser Lys Lys Ser
1 5 10 15
Glu Thr Asp Ala Leu Lys Arg Val Pro Cys Glu Lys Pro Pro Phe Ser
20 25 30
Leu Gly Asp Leu Lys Lys Ala Ile Pro Pro His Cys Phe Lys Arg Ser
35 40 45
Ile Pro Arg Ser Phe Ser Tyr Leu Ile Thr Asp Ile Ile Ile Val Ser
50 55 60
Cys Phe Tyr Tyr Val Ala Thr Asn Tyr Phe Ser Ile Leu Pro His Pro
65 70 75 80
Leu Ser Tyr Leu Ala Trp Pro Leu Tyr Trp Val Cys Gln Gly Cys Val
85 90 95
Leu Thr Gly Val Trp Val Ile Ala His Glu Cys Gly His His Ala Phe
100 105 110
Ser Asp Tyr Gln Trp Leu Asp Asp Thr Val Gly Leu Ile Phe His Ser
115 120 125
Phe Leu Leu Val Pro Tyr Phe Ser Trp Lys Tyr Ser His Arg Arg His
130 135 140
His Ser Asn Thr Gly Ser Leu Glu Arg Asp Glu Val Phe Val Pro Lys
145 150 155 160
Lys Lys Ser Ala Ile Lys Trp Tyr Gly Lys Tyr Leu Asn Asn Pro Val
165 170 175
Gly Arg Ile Val Met Leu Ile Val Gln Phe Thr Leu Gly Trp Pro Leu
180 185 190
Tyr Leu Ala Phe Asn Val Ser Gly Arg Pro Tyr Asp Gly Phe Ala Cys
195 200 205
His Phe Phe Pro Asn Ala Pro Ile Tyr Asn Asp Arg Glu Arg Leu Gln
210 215 220
Ile Tyr Ile Ser Asp Ala Gly Ile Leu Ala Val Cys Tyr Gly Leu Tyr
225 230 235 240
Arg Tyr Ala Ala Ala Gln Gly Met Ala Ser Met Ile Cys Phe Tyr Gly
245 250 255
Val Pro Leu Leu Ile Val Asn Gly Phe Leu Val Leu Ile Thr Tyr Leu
260 265 270
Gln His Thr His Pro Ser Leu Pro His Tyr Asp Ser Ser Glu Trp Asp
275 280 285
Trp Leu Arg Gly Ala Met Ala Thr Val Asp Arg Asp Tyr Gly Ile Leu
290 295 300
Asn Lys Val Phe His Asn Ile Thr Asp Thr His Val Ala His His Leu
305 310 315 320
Phe Ser Thr Met Pro His Tyr Asn Ala Met Glu Ala Thr Lys Ala Ile
325 330 335
Lys Pro Ile Leu Gly Asp Tyr Tyr Gln Phe Asp Gly Thr Pro Trp Tyr
340 345 350
Lys Ala Met Tyr Arg Glu Ala Lys Glu Cys Ile Tyr Val Glu Pro Asp
355 360 365
Arg Glu Gly Glu Lys Lys Gly Val Tyr Trp Tyr Asn Asn Lys Leu
370 375 380
<210>3
<211>20
<212>DNA
<213>Descurainia sophia
<400>3
acttgcttcc agtgccctta 20
<210>4
<211>20
<212>DNA
<213>Descurainia sophia
<400>4
tcgcaaagtg caatgtcttc 20
<210>5
<211>19
<212>DNA
<213>Descurainia sophia
<400>5
tcctctctcc gattcccac 19
<210>6
<211>22
<212>DNA
<213>Descurainia sophia
<400>6
aaatcactca ccagtcacca ct 22
<210>7
<211>18
<212>DNA
<213>Descurainia sophia
<400>7
ctccagaaac atgggtgc 18
<210>8
<211>21
<212>DNA
<213>Descurainia sophia
<400>8
cagcgatgag aagaacaata c 21
Claims (2)
1.一种双子叶植物油酸脱氢酶基因(DsFAD2)，来自播娘蒿(Descurainia sophia)，命名为DsFAD2基因，其核苷酸序列SEQ ID NO.1为：
CTCCAGAAACATGGGTGCAGGTGGTAGAATGCCGGTTCCTTCTTCTTCCAAGAAATCGGAAACCGATGCTCTAAAGCGGGTGCCGTGCGAGAAACCGCCTTTCTCGCTGGGAGATCTTAAGAAAGCTATCCCACCGCATTGTTTCAAACGCTCAATCCCTCGCTCTTTCTCCTACCTTATCACTGACATCATTATAGTCTCATGCTTCTACTATGTCGCCACCAATTACTTCTCTATCCTCCCTCACCCTCTCTCTTACTTGGCTTGGCCCCTATATTGGGTCTGTCAAGGCTGTGTCCTTACCGGTGTTTGGGTCATAGCCCACGAATGTGGCCACCACGCTTTCAGCGACTACCAGTGGCTAGATGACACAGTCGGTCTTATCTTCCATTCTTTCCTCCTTGTCCCTTACTTCTCCTGGAAATACAGCCATCGCCGTCACCATTCCAACACGGGTTCCCTCGAAAGAGATGAAGTGTTTGTCCCCAAGAAGAAATCTGCAATCAAGTGGTACGGCAAATACCTCAACAACCCTGTTGGGCGAATCGTGATGTTGATTGTCCAGTTCACCCTCGGCTGGCCATTGTACTTGGCCTTCAATGTCTCGGGCAGACCCTATGACGGCTTTGCATGCCATTTCTTCCCAAACGCTCCCATCTACAACGACCGGGAACGCCTCCAGATATACATCTCAGATGCCGGTATTCTCGCTGTCTGCTATGGTCTTTACCGTTATGCTGCTGCACAAGGAATGGCCTCGATGATCTGCTTCTACGGAGTACCGCTTCTGATAGTGAACGGGTTCCTCGTCTTGATCACTTACTTGCAGCACACTCATCCCTCGTTGCCTCACTACGATTCATCCGAGTGGGATTGGTTAAGGGGAGCTATGGCTACCGTAGACAGAGACTATGGAATCCTTAACAAGGTGTTCCACAACATCACGGACACACACGTGGCTCATCATCTGTTCTCGACAATGCCGCATTATAACGCAATGGAAGCTACAAAGGCGATAAAGCCAATACTCGGAGACTATTATCAGTTCGATGGAACACCGTGGTATAAGGCGATGTATAGGGAGGCAAAGGAGTGTATCTATGTAGAACCGGACAGGGAAGGTGAGAAGAAAGGTGTGTACTGGTACAACAATAAGTTATGAGGATGATGGTGAAACAGTGGATCTTTCACTTGTTTGAGTTGTCTTTGTCTAAGAAGAAGCTATGGTTTGTTTCAATAATCTTATTGTCCATTTTGTTGTGTTTTGACATTTTGGCTAAATTATGTGATGTGGGAAGTTAGTGTTCAAATGTTTTGTGTCTGTATTGTTCTTCTCATCGCTG
2.权利要求1所述的一种双子叶植物油酸脱氢酶基因所编码的蛋白质，来自播娘蒿(Descurainia sophia)，命名为DsFAD2蛋白质，它具有如下所示的氨基酸序列SEQ ID NO.2：
MGAGGRMPVPSSSKKSETDALKRVPCEKPPFSLGDLKKAIPPHCFKRSIPRSFSYLITDIIIVSCFYYVATNYFSILPHPLSYLAWPLYWVCQGCVLTGVWVIAHECGHHAFSDYQWLDDTVGLIFHSFLLVPYFSWKYSHRRHHSNTGSLERDEVFVPKKKSAIKWYGKYLNNPVGRIVMLIVQFTLGWPLYLAFNVSGRPYDGFACHFFPNAPIYNDRERLQIYISDAGILAVCYGLYRYAAAQGMASMICFYGVPLLIVNGFLVLITYLQHTHPSLPHYDSSEWDWLRGAMATVDRDYGILNKVFHNITDTHVAHHLFSTMPHYNAMEATKAIKPILGDYYQFDGTPWYKAMYREAKECIYVEPDREGEKKGVYWYNNKL。
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| CN200910233687A CN101696415A (zh) | 2009-10-28 | 2009-10-28 | 一种油酸脱氢酶基因及其所编码的蛋白质 |
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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| CN103525841A (zh) * | 2013-10-21 | 2014-01-22 | 昆明理工大学 | 一种δ12-脂肪酸脱氢酶基因及其重组表达载体 |
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-
2009
- 2009-10-28 CN CN200910233687A patent/CN101696415A/zh active Pending
Cited By (6)
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|---|---|---|---|---|
| CN103703135A (zh) * | 2011-05-27 | 2014-04-02 | 淡马锡生命科学研究院有限公司 | 微粒体ω6油酸去饱和酶 |
| CN103703135B (zh) * | 2011-05-27 | 2015-12-02 | 淡马锡生命科学研究院有限公司 | 微粒体ω6油酸去饱和酶 |
| CN103525842A (zh) * | 2013-10-21 | 2014-01-22 | 昆明理工大学 | 一种δ12-脂肪酸脱氢酶基因及其重组表达载体 |
| CN103525841A (zh) * | 2013-10-21 | 2014-01-22 | 昆明理工大学 | 一种δ12-脂肪酸脱氢酶基因及其重组表达载体 |
| CN103525842B (zh) * | 2013-10-21 | 2015-03-11 | 昆明理工大学 | 一种δ12-脂肪酸脱氢酶基因及其重组表达载体 |
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