CN101695282A - 一种抗性处理提高齿瓣石斛试管苗移栽成活率的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种抗性处理提高齿瓣石斛试管苗移栽成活率的方法，包括前期培育，抗性处理，后期培育，幼苗移栽四个步骤，其有益技术效果是：通过植株在极端温度条件下，降低植株的生长代谢速度，促进茎干的纤维化，增强强植株对环境的适应能力；使其在人工创造的逆境下尽快茎条膨大，叶片脱落，抗性增强，进而提高移栽成活率，为一种较为简单的抗性处理工艺，可操作性强，成本较低。
Description
技术领域
本发明涉及一种提高齿瓣石斛移栽成活率的方法，更具体的说涉及一种抗性处理提高齿瓣石斛试管苗移栽成活率的方法。
技术背景
石斛属(Dendrobium)是兰科第二大属，全球约有1500种，我国有74种2个变种，其中可供药用的有40多种，主要分布于我国的华南和西南地区。其中，主要有铁皮石斛，紫皮石斛，金钗石斛，齿瓣石斛、霍山石斛，密花石斛；石斛为名贵中药材，在我国有悠久的历史，药用始载于《神农本草经》，列为上品，“味甘，平。主伤中，除痹，下气，补五脏虚劳赢瘦，强阴。久服厚肠胃，轻身延年。”其有效成分主要是石斛碱和多糖，目前广泛用于加工成保健品、药品及石斛汤、石斛酒等饮品。药用植物栽培是保护、扩大、再生利用药用植物资源的最直接、有效的手段。石斛属植物对生态条件的要求较高，栽培难度大，其栽培面积和规模受到很大限制。通过在栽培的过程中进行炼苗是一种有效的提高种苗存活率的方法。中国专利申请(200810195801.2)公开了一种铁皮石斛组培实生苗的炼苗方法，其主要是在组培的瓶苗分别在瓶盖密封时、松盖时、揭盖、分别光照由若到强炼苗；并且在移栽是光照由弱到强、湿度由大到小炼苗；上述专利期望通过炼苗达到提高铁皮石斛抗性的目的；但是效果并不理想。
发明内容
本发明提供了一种抗性处理提高齿瓣石斛试管苗移栽成活率的方法，该方法包括以下步骤：
1)配制生根培养基：在基本培养基加入香蕉提取液和蔗糖，香蕉提取液在生根培养基中的重量百分比为15～30％，蔗糖在生根培养基中的重量百分比为1.5～3％；每L培养基加入激素0.1～1.0mg、琼脂2～4g，调pH5.6～6.0，得到生根培养基；
2)前期培养：试管苗有3～5条根、根长度＞2cm、植株高度＞3cm时移栽到生根培养基上。
3)抗性处理：将移栽到生根培养基上的试管苗置于可控温的环境中，升温至40～50℃或降温至2～8℃，培养24～48小时；
4)后期培育：将试管苗移栽到培养室大棚里培养20～40天，观察植株的变化，判断是否达到抗性处理标准，未达到移栽标准则重复进行抗性处理；
5)幼苗移栽至苗床。
步骤1)所述的基本培养基为MS、1/2MS、N6、KC、KS或SH中的一种。
步骤1)所述的激素为NAA或IAA的一种。
步骤4)所述的判断是否达到抗性处理标准为：期间观察，植株是否减缓伸长生长并茎条长粗，若是则已达到处理标准；若仍保持旺盛的生长，则需要重新进行处理。保证培育20天后，茎条变粗，部分叶片变黄或脱落为正常现象。
步骤5)所述的苗床为床高10～15厘米、床宽1～1.2米、支架0.8～1.0米，苗床上的底料为木材加工的边皮废料或石棉瓦为下层，上层为碎树皮铺垫，厚度为5～10厘米。
本发明的有益技术效果：本发明通过植株在极端温度条件下，降低植株的生长代谢速度，促进茎干的纤维化，增强强植株对环境的适应能力；使其在人工创造的逆境下尽快茎条膨大，叶片脱落，抗性增强，进而提高移栽成活率，为一种较为简单的抗性处理工艺，可操作性强，成本较低。
具体实施方式
增殖培养基的制备：在1L的KC加入1毫克NAA，制成固体培养基。
生根培养基的制备：在MS加入香蕉提取液和蔗糖，香蕉提取液浓度为15～30％，蔗糖浓度为1.5～3％；每L培养基加入NAA0.1～1.0mg、琼脂2～4g，调pH5.6～6.0制成升根培养基。
苗床的制备：利用木材加工的边皮废料或石棉瓦作底，做成床高10～15厘米、床宽1～1.2米、床长因地而定、支架0.8～1.0米的种植床。以碎树皮作为基质铺于苗床上，厚度5～10厘米。碎树皮在使用前最好选用高温或药物消毒。
外植体的采集与灭菌，其操作步骤为：
1)选择生长健壮的3cm～6cm长的新芽作外植体。
2)用消了毒的利刃将新芽从从母体切下。
3)经自来水冲洗30分钟后，剥去最外面一层叶鞘，在75％的酒精中迅速蘸一下，立即放入15％次氯酸钠溶液中浸泡15分钟，或放入0.1％的升汞溶液中8～10分钟，并不时用手轻摇。
4)取出后再剥去多余的组织，再放入5％次氯酸钠溶液中浸泡5～10分钟，取出后用无菌水冲洗数次，然后在无菌条件下剥去叶苞片，以顶芽或侧芽作为外植体接种于装有增殖培养基的试管中进行增殖培养。
待到试管苗有3～5条根、根长度＞2cm、植株高度＞3cm时移栽到生根培养基上。
试管苗置于可控温的环境中，相对湿度控制为70～90％，光照强度2000～4000lx，升温至40～50℃，培养36小时；
抗性处理后，用镊子或筷子轻轻取出幼苗，用自来水将根系上琼脂冲洗干净以防止微生物的滋生。洗净后的试管苗用0.01％高锰酸钾或0.1％的多菌灵或百菌清等杀菌剂浸泡3～5分钟，稍微晾干后再栽入大棚里已准备好的苗床中。在大棚里(保证温度在20～30℃之间)培养20～40天。期间观察，植株是否减缓伸长生长并茎条长粗，若是则已达到处理标准；若仍保持旺盛的生长，则需要重新进行上述的升温抗性处理。保证培育20天后，茎条变粗，部分叶片变黄或脱落。
试管苗移栽前期要适当遮阴，并加强水分管理，一般用玻璃或塑料薄膜覆盖以保持较高的空气湿度，但注意基质不宜过湿积水，以防烂苗。刚移栽成活的试管苗，可施用1/2MS营养液补充营养促进小苗生长。此外，温度对成活率影响也很大，一般以23℃～28℃最适宜，夏季温度过高、冬季温度过低时均较难管理，水少生长受影响，水多又易腐烂，成活率下降。试管苗在移栽4～6周后，新梢开始生长，可用0.1％的尿素和磷酸二氢钾作根外追肥，此时小苗即可转入正常管理。
Claims (5)
1.一种抗性处理提高齿瓣石斛试管苗移栽成活率的方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：
1)配制生根培养基：在基本培养基加入香蕉提取液和蔗糖，香蕉提取液在生根培养基中的重量百分比为15～30％，蔗糖在生根培养基中的重量百分比为1.5～3％；每L培养基加入激素0.1～1.0mg、琼脂2～4g，调pH5.6～6.0，得到生根培养基；
2)前期培养：试管苗有3～5条根、根长度＞2cm、植株高度＞3cm时移栽到生根培养基上；
3)抗性处理：将移栽到生根培养基上的试管苗置于可控温的环境中，升温至40～50℃或降温至2～8℃，培养24～48小时；
4)后期培育：将试管苗移栽到培养室大棚里培养20～40天，观察植株的变化，判断是否达到抗性处理标准，未达到移栽标准则重复进行抗性处理；
5)幼苗移栽至苗床。
2.根据权利要求1所述的抗性处理提高齿瓣石斛试管苗移栽成活率的方法，其特征在于：步骤1)所述的基本培养基为MS、1/2MS、N6、KC、KS或SH中的一种。
3.根据权利要求1所述的抗性处理提高齿瓣石斛试管苗移栽成活率的方法，其特征在于：步骤1)所述的激素为NAA或IAA的一种。
4.根据权利要求1所述的抗性处理提高齿瓣石斛试管苗移栽成活率的方法，其特征在于：步骤4)所述的判断是否达到抗性处理标准为：期间观察，植株是否减缓伸长生长并茎条长粗，若是则已达到处理标准；若仍保持旺盛的生长，则需要重新进行处理。保证培育20天后，茎条变粗，部分叶片变黄或脱落为正常现象。
5.根据权利要求1所述的抗性处理提高齿瓣石斛试管苗移栽成活率的方法，其特征在于：步骤5)所述的苗床为床高10～15厘米、床宽1～1.2米、支架0.8～1.0米，苗床上的底料为木材加工的边皮废料或石棉瓦为下层，上层为碎树皮铺垫，厚度为5～10厘米。
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102318547A (zh) * | 2011-07-22 | 2012-01-18 | 安徽康顺名贵中草药产业开发有限公司 | 霍山石斛试管苗的架空栽培方法 |
| CN102599039A (zh) * | 2012-03-30 | 2012-07-25 | 常熟市常福有机复合肥有限公司 | 一种齿瓣石斛人工繁育方法 |
| CN104094767A (zh) * | 2014-07-31 | 2014-10-15 | 张松波 | 一种铁皮石斛的种植方法 |
| CN116491277A (zh) * | 2023-03-13 | 2023-07-28 | 重庆市中药研究院 | 一种用于黄连幼苗种植的移栽装置及其使用方法 |
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