CN106942063B - 一种结合瓶外生根技术的泡桐组培快繁方法 - Google Patents

一种结合瓶外生根技术的泡桐组培快繁方法 Download PDF

Info

Publication number
CN106942063B
CN106942063B CN201710305685.4A CN201710305685A CN106942063B CN 106942063 B CN106942063 B CN 106942063B CN 201710305685 A CN201710305685 A CN 201710305685A CN 106942063 B CN106942063 B CN 106942063B
Authority
CN
China
Prior art keywords
bud
subculture
transplanting
medium
paulownia
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201710305685.4A
Other languages
English (en)
Other versions
CN106942063A (zh
Inventor
邹明洋
陈政璋
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Guangdong Xulong forestry science and Technology Co., Ltd.
Original Assignee
Guangxi Green Tree Agriculture Technology Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Guangxi Green Tree Agriculture Technology Co Ltd filed Critical Guangxi Green Tree Agriculture Technology Co Ltd
Priority to CN201710305685.4A priority Critical patent/CN106942063B/zh
Publication of CN106942063A publication Critical patent/CN106942063A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN106942063B publication Critical patent/CN106942063B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
    • A01H4/001—Culture apparatus for tissue culture
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
    • A01G24/00—Growth substrates; Culture media; Apparatus or methods therefor
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
    • A01G31/00—Soilless cultivation, e.g. hydroponics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
    • A01G7/00—Botany in general
    • A01G7/06—Treatment of growing trees or plants, e.g. for preventing decay of wood, for tingeing flowers or wood, for prolonging the life of plants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
    • A01H4/005—Methods for micropropagation; Vegetative plant propagation using cell or tissue culture techniques
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C05—FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
    • C05D—INORGANIC FERTILISERS NOT COVERED BY SUBCLASSES C05B, C05C; FERTILISERS PRODUCING CARBON DIOXIDE
    • C05D9/00—Other inorganic fertilisers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C05—FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
    • C05G—MIXTURES OF FERTILISERS COVERED INDIVIDUALLY BY DIFFERENT SUBCLASSES OF CLASS C05; MIXTURES OF ONE OR MORE FERTILISERS WITH MATERIALS NOT HAVING A SPECIFIC FERTILISING ACTIVITY, e.g. PESTICIDES, SOIL-CONDITIONERS, WETTING AGENTS; FERTILISERS CHARACTERISED BY THEIR FORM
    • C05G3/00—Mixtures of one or more fertilisers with additives not having a specially fertilising activity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C05—FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
    • C05G—MIXTURES OF FERTILISERS COVERED INDIVIDUALLY BY DIFFERENT SUBCLASSES OF CLASS C05; MIXTURES OF ONE OR MORE FERTILISERS WITH MATERIALS NOT HAVING A SPECIFIC FERTILISING ACTIVITY, e.g. PESTICIDES, SOIL-CONDITIONERS, WETTING AGENTS; FERTILISERS CHARACTERISED BY THEIR FORM
    • C05G3/00—Mixtures of one or more fertilisers with additives not having a specially fertilising activity
    • C05G3/60—Biocides or preservatives, e.g. disinfectants, pesticides or herbicides; Pest repellants or attractants

Abstract

本发明公开了一种结合瓶外生根技术的泡桐组培快繁方法，包括外植体处理、初始芽诱导培养、继代芽增殖培养、育苗基质准备、继代芽移植和移植后管理；选取生长健壮无病虫害的泡桐半木质化枝条，对枝条进行修剪成茎段作为外植体，对外植体灭菌消毒处理后接种于初始芽诱导培养基中获取初始芽，再将初始芽接种于继代培养基中后得到组培继代芽，单个切下生长健壮，高度≥2.5cm的继代芽移植于育苗基质中，经过移植后管理得到泡桐苗木。本发明方法简单可行，简化了流程，缩短了育苗周期，从初始芽诱导至苗木移植后成活最短45天即可实现，加快了苗木培育的速度，提高了生产效率，节约了成本，具有较好的经济效益、社会效益和生态效益。

Description

一种结合瓶外生根技术的泡桐组培快繁方法
技术领域
本发明属于植物组织培养技术领域，涉及一种结合瓶外生根技术的泡桐组培快繁方法。
背景技术
泡桐为玄参科(Scrophulariaceae)泡桐属(Paulownia)物种的统称落叶乔木，适生范围甚广，我国23个省、市、自治区都有栽植，是我国人工栽培历史最悠久的树种之一。泡桐木材具有质轻、耐火性强、不易劈裂、不易变形、以及隔潮、耐腐、易干燥和声学性能好等特点，是重要的速生用材树种；成树开花多、花冠大、树冠优美，抗污染和空气净化能力较强，是城市和近郊重要的绿化和美化树种；泡桐叶、花、木材有消炎、止咳、利尿、降压等药用功效，具有较高的生态、社会和经济效益。
上世纪七、八十年代，泡桐常用繁殖方式是实生繁育，收集种子播种育苗，但种子萌芽率低，而且实生繁殖由于个体间分化严重，易造成林分品种混杂，低产株比例大，株间差异大等现象；后来，泡桐主要繁育方式为根插育苗，但这种繁殖方法根段不易采集，根萌芽时间不一致，苗木生长参差不齐，繁殖系数较低，且苗木易携带病毒，难以进行规模化生产；因此，为保证优树性状能稳定遗传，采用组织培养方式进行无性繁殖，可以在短时间内获得大量优良脱毒苗木，但传统的组培快繁技术要经过初始芽诱导、继代增殖、瓶内生根、炼苗和移栽等诸多工序，过程复杂，成本较高。
发明内容
本发明的目的在于针对传统组培快繁技术中过程复杂，周期长，成本高等不足，提供一种结合瓶外生根技术的泡桐组培快繁方法，建立一种高效的组培快繁体系，从而提高苗木繁殖速度，降低泡桐组培苗的培育成本。
为了实现上述目的，本发明的技术方案如下：
一种结合瓶外生根技术的泡桐组培快繁方法，包括外植体处理、初始芽诱导培养、继代芽增殖培养、育苗基质准备、继代芽移植和移植后管理；选取生长健壮无病虫害的泡桐半木质化枝条，对枝条进行修剪成茎段作为外植体，对外植体灭菌消毒处理后接种于初始芽诱导培养基中获取初始芽，再将初始芽接种于继代培养基中后得到组培继代芽，单个切下生长健壮，高度≥2.5cm的继代芽移植于育苗基质中，经过移植后管理得到泡桐苗木；主要操作步骤如下：
（1）外植体处理：选取生长健壮无病虫害的泡桐半木质化枝条，用常规的消毒液对枝条进行表面消毒，然后修剪成茎段作为外植体，软纱布轻轻擦洗茎段表面，置于质量浓度为1%洗衣粉溶液浸泡5min，用流水冲洗5min；然后置于超净工作台上，用体积浓度为75%的乙醇溶液对外植体浸泡30s，用无菌水清洗5~6遍；再用体积浓度为0.1%氯化汞溶液浸泡外植体5~10min进行消毒，用无菌水清洗5~6遍；在每一次浸泡期间不断进行搅动；
（2）初始芽诱导培养：将步骤（1）处理后的外植体两端分别剪除1~2mm，接种到诱导培养基上诱导初始芽；
（3）继代芽增殖培养：将步骤（2）获得的初始芽接种于继代培养基上进行增殖培养，得到组培继代芽；
（4）育苗基质准备：将配制好的育苗基质经过杀菌处理后装入规格8 cm×8 cm无纺纸育苗容器中；
（5）继代芽移植：单个切下生长健壮，高度≥2.5cm的继代芽，用清水洗去培养基，将单芽的切端蘸于生根剂后，移植于育苗容器中，压紧，清水淋透育苗基质；
（6）移植后管理：在摆有育苗容器的育苗床上方用塑料薄膜搭建小拱棚，再盖上遮荫度为75～85%的遮阴网，每3天淋施一次激素溶液，直至完全生根为止；移植10～15天后选阴天拆除小拱棚；每周用喷雾器补充水分3～5次，使育苗床湿度保持75%以上；移植18～21天后每半月喷洒一次600～800倍的50%退菌特；移植25天后每3周喷一次FA旱地龙500倍液的叶面肥；移植后管理期间光照强度1500～2500 lx，光照12～14h/d。
以上步骤（1）中所述的茎段长3.0～5.0 cm，至少带有一个腋芽。
以上步骤（2）中所述的诱导培养基的原料组分和质量含量为∶改良MS + 6-BA 2.0~4.0 mg/L + IBA 1.0~2.0 mg/L +蔗糖30000 mg/L + 琼脂3000 mg/L。
以上步骤（3）中所述的继代培养基的原料组分和质量含量为∶改良MS + 6-BA 4.5~6.5 mg/L + IBA 0.5~1.0 mg/L +IAA 0.5~1.0mg/L + 蔗糖30000 mg/L + 琼脂3500 mg/L。
以上所述的改良MS培养基的组成为：KNO3 1600 mg/L；NH4NO3 1500 mg/L；CaCl2·2H2O 220 mg/L；MgSO4·7H2O 370 mg/L；KH2PO3 100 mg/L；Ca(NO3)2 450 mg/L；MnSO4·4 H2O25 mg/L；ZnSO4·7 H2O 10 mg/L；CuSO4·5 H2O 0.025 mg/L；H3BO3 6.2 mg/L；Na2MoO4·2H2O 0.025 mg/L；维生素B1 0.2 mg/L；维生素B6 0.2 mg/L；烟酸 0.5 mg/L；甘氨酸 2.0mg/L；肌醇 100 mg/L。
以上步骤（2）、（3）的培养条件均为：温度28℃，光照1500～2000 lx，光照12～14h/d。
以上步骤（4）所述的育苗基质是泥炭和珍珠岩按体积比为1∶1混合，并在其混合物中加入质量分数为0.5%的辛硫酸颗粒剂和质量分数为0.5%硫酸亚铁，混匀。
以上步骤（4）对育苗基质的杀菌处理方法是将体积分数为50%多菌灵600～800倍溶液与育苗基质拌匀，湿度成团却不滴水。
以上步骤（5）所述的生根剂为200～400 mg/L ABT 6#溶液与滑石粉混合而成的匀浆。
以上步骤（6）所述的激素溶液为200～400 mg/L ABT 6#溶液。
相当于现有技术，本发明具有的优点及有益效果如下：
（1）本发明以改良MS作为基本培养基，辅以不同浓度的激素溶液对泡桐进行诱导和增殖培养，组培各阶段的培养基配方合理，更适应泡桐的生长，诱导率高达85%以上，增殖系数8~10。
（2）本发明在育苗基质中加入辛硫酸颗粒剂和硫酸亚铁对土壤进行消毒，能够更有效地防治地下病虫害，避免由于育苗基质携带病毒导致泡桐感染病毒，提高成活率。
（3）本发明以无纺纸作为育苗容器，既透气透水透根，又便于运输，且苗木造林时可直接连容器栽植，避免了根系损伤，造林成活率高。
（4）本发明在移植后瓶外生根阶段淋施ABT 6#激素溶液，能够促进泡桐快速生根，且使苗木更加健壮，移植15~20天生根，根系数量可达5~10条，生根成活率高达98%以上。
（5）本发明是移栽后进行生根，避免了传统组培快繁技术中移栽时对瓶内生根苗根系的损伤，提高了成活率。
（6）本发明省去传统瓶内生根和炼苗等程序，方法简单可行，简化了流程，缩短了育苗周期，从初始芽诱导至苗木移植后成活最短45天即可实现，加快了苗木培育的速度，提高了生产效率，节约了成本，具有较好的经济效益、社会效益和生态效益。
具体实施方式
下面的实施例可以使本领域技术人员更全面地理解本发明，但不以任何方式限制本发明。
实施例1：
选取生长健壮无病虫害的泡桐半木质化枝条，用常规的消毒液对枝条进行表面消毒，然后修剪成长3.0 cm，至少带有一个腋芽的茎段作为外植体，软纱布轻轻擦洗茎段表面，置于质量浓度为1%洗衣粉溶液浸泡5min，用流水冲洗5min；然后置于超净工作台上，用体积浓度为75%的乙醇溶液对外植体浸泡30s，用无菌水清洗5~6遍；再用体积浓度为0.1%氯化汞溶液浸泡外植体5~10min进行消毒，用无菌水清洗5~6遍；在每一次浸泡期间不断进行搅动。
将处理后的外植体两端分别剪除1~2mm，接种到诱导培养基上诱导初始芽；诱导培养基的原料组分和质量含量为∶改良MS + 6-BA 2. 0 mg/L + IBA 1.0 mg/L +蔗糖30000mg/L + 琼脂3000 mg/L，并置于温度28℃，光照1500 lx，光照14h/d的条件下进行初始芽诱导培养。接种5天后，初始芽开始萌动，诱导率为90%。
将获得的初始芽接种于继代培养基上进行增殖培养，继代培养基的原料组分和质量含量为∶改良MS + 6-BA 4.5 mg/L + IBA 0.5 mg/L +IAA 0.5mg/L + 蔗糖30000 mg/L+ 琼脂3500 mg/L，并置于温度28℃，光照1500 lx，光照12 h/d的条件下进行继代芽增殖培养。接种30天后，芽增殖成健壮的丛芽，增殖系数为8。
用泥炭和珍珠岩按体积比为1∶1混合，并在其混合物中加入质量分数为0.5%的辛硫酸颗粒剂和质量分数为0.5%硫酸亚铁，混匀配成育苗基质。将体积分数为50%多菌灵600倍溶液与育苗基质拌匀，进行杀菌处理，湿度成团却不滴水。将经过杀菌处理后的育苗基质装入规格8 cm×8 cm无纺纸育苗容器中。
单个切下生长健壮，高度≥2.5cm的继代芽，用清水洗去培养基，将单芽的切端蘸于用200 mg/L ABT 6#溶液与滑石粉混合而成的匀浆后，移植于育苗容器中，压紧，清水淋透育苗基质。移植15天开始生根，根系数量可达5~10条，生根成活率为98%。
在摆有育苗容器的育苗床上方用塑料薄膜搭建小拱棚，再盖上遮荫度为75%的遮阴网，每3天淋施一次200 mg/L ABT 6#溶液，直至完全生根为止；移植10天后选阴天拆除小拱棚；每周用喷雾器补充水分3～5次，使育苗床湿度保持75%以上；移植18天后每半月喷洒一次600倍的50%退菌特；移植25天后每3周喷一次FA旱地龙500倍液的叶面肥；移植后管理期间光照强度1500 lx，光照14h/d。
以上所述的改良MS培养基的组成为：KNO3 1600 mg/L；NH4NO3 1500 mg/L；CaCl2·2H2O 220 mg/L；MgSO4·7H2O 370 mg/L；KH2PO3 100 mg/L；Ca(NO3)2 450 mg/L；MnSO4·4 H2O25 mg/L；ZnSO4·7 H2O 10 mg/L；CuSO4·5 H2O 0.025 mg/L；H3BO3 6.2 mg/L；Na2MoO4·2H2O 0.025 mg/L；维生素B1 0.2 mg/L；维生素B6 0.2 mg/L；烟酸 0.5 mg/L；甘氨酸 2.0mg/L；肌醇 100 mg/L。
实施例2：
选取生长健壮无病虫害的泡桐半木质化枝条，用常规的消毒液对枝条进行表面消毒，然后修剪成长3.5～4..5 cm，至少带有一个腋芽的茎段作为外植体，软纱布轻轻擦洗茎段表面，置于质量浓度为1%洗衣粉溶液浸泡5min，用流水冲洗5min；然后置于超净工作台上，用体积浓度为75%的乙醇溶液对外植体浸泡30s，用无菌水清洗5~6遍；再用体积浓度为0.1%氯化汞溶液浸泡外植体5~10min进行消毒，用无菌水清洗5~6遍；在每一次浸泡期间不断进行搅动。
将处理后的外植体两端分别剪除1~2mm，接种到诱导培养基上诱导初始芽；诱导培养基的原料组分和质量含量为∶改良MS + 6-BA 3.0 mg/L + IBA 1.5 mg/L +蔗糖30000mg/L + 琼脂3000 mg/L，并置于温度28℃，光照2000 lx，光照12 h/d的条件下进行初始芽诱导培养。接种5天后，初始芽开始萌动，诱导率为85%。
将获得的初始芽接种于继代培养基上进行增殖培养，继代培养基的原料组分和质量含量为∶改良MS + 6-BA 5.5 mg/L + IBA 0.5 mg/L +IAA1.0mg/L + 蔗糖30000 mg/L +琼脂3500 mg/L，并置于温度28℃，光照1500 lx，光照12 h/d的条件下进行继代芽增殖培养。接种25天后，芽增殖成健壮的丛芽，增殖系数为10。
用泥炭和珍珠岩按体积比为1∶1混合，并在其混合物中加入质量分数为0.5%的辛硫酸颗粒剂和质量分数为0.5%硫酸亚铁，混匀配成育苗基质。将体积分数为50%多菌灵600倍溶液与育苗基质拌匀，进行杀菌处理，湿度成团却不滴水。将经过杀菌处理后的育苗基质装入规格8 cm×8 cm无纺纸育苗容器中。
单个切下生长健壮，高度≥2.5cm的继代芽，用清水洗去培养基，将单芽的切端蘸于用300 mg/L ABT 6#溶液与滑石粉混合而成的匀浆后，移植于育苗容器中，压紧，清水淋透育苗基质。移植15天生根，根系数量可达5~10条，生根成活率为99%。
在摆有育苗容器的育苗床上方用塑料薄膜搭建小拱棚，再盖上遮荫度为80%的遮阴网，每3天淋施一次300 mg/L ABT 6#溶液，直至完全生根为止；移植12天后选阴天拆除小拱棚；每周用喷雾器补充水分3～5次，使育苗床湿度保持75%以上；移植20天后每半月喷洒一次800倍的50%退菌特；移植25天后每3周喷一次FA旱地龙500倍液的叶面肥；移植后管理期间光照强度2000 lx，光照12 h/d。
以上所述的改良MS培养基的组成为：KNO3 1600 mg/L；NH4NO3 1500 mg/L；CaCl2·2H2O 220 mg/L；MgSO4·7H2O 370 mg/L；KH2PO3 100 mg/L；Ca(NO3)2 450 mg/L；MnSO4·4 H2O25 mg/L；ZnSO4·7 H2O 10 mg/L；CuSO4·5 H2O 0.025 mg/L；H3BO3 6.2 mg/L；Na2MoO4·2H2O 0.025 mg/L；维生素B1 0.2 mg/L；维生素B6 0.2 mg/L；烟酸 0.5 mg/L；甘氨酸 2.0mg/L；肌醇 100 mg/L。
实施例3：
选取生长健壮无病虫害的泡桐半木质化枝条，用常规的消毒液对枝条进行表面消毒，然后修剪成长4.5～5.0 cm，至少带有一个腋芽的茎段作为外植体，软纱布轻轻擦洗茎段表面，置于质量浓度为1%洗衣粉溶液浸泡5min，用流水冲洗5min；然后置于超净工作台上，用体积浓度为75%的乙醇溶液对外植体浸泡30s，用无菌水清洗5~6遍；再用体积浓度为0.1%氯化汞溶液浸泡外植体5~10min进行消毒，用无菌水清洗5~6遍；在每一次浸泡期间不断进行搅动。
将处理后的外植体两端分别剪除1~2mm，接种到诱导培养基上诱导初始芽；诱导培养基的原料组分和质量含量为∶改良MS + 6-BA4.0 mg/L + IBA 2.0 mg/L +蔗糖30000mg/L + 琼脂3000 mg/L，并置于温度28℃，光照2000 lx，光照12 h/d的条件下进行初始芽诱导培养。接种5天后，初始芽开始萌动，诱导率高于88%。
将获得的初始芽接种于继代培养基上进行增殖培养，继代培养基的原料组分和质量含量为∶改良MS + 6-BA 6.5 mg/L + IBA 1.0 mg/L +IAA 1.0mg/L + 蔗糖30000 mg/L+ 琼脂3500 mg/L，并置于温度28℃，光照2000 lx，光照12 h/d的条件下进行继代芽增殖培养。接种27天后，芽增殖成健壮的丛芽，增殖系数为9.5。
用泥炭和珍珠岩按体积比为1∶1混合，并在其混合物中加入质量分数为0.5%的辛硫酸颗粒剂和质量分数为0.5%硫酸亚铁，混匀配成育苗基质。将体积分数为50%多菌灵800倍溶液与育苗基质拌匀，进行杀菌处理，湿度成团却不滴水。将经过杀菌处理后的育苗基质装入规格8 cm×8 cm无纺纸育苗容器中。
单个切下生长健壮，高度≥2.5cm的继代芽，用清水洗去培养基，将单芽的切端蘸于用400 mg/L ABT 6#溶液与滑石粉混合而成的匀浆后，移植于育苗容器中，压紧，清水淋透育苗基质。移植17天生根，根系数量可达5~10条，生根成活率为98.5%。
在摆有育苗容器的育苗床上方用塑料薄膜搭建小拱棚，再盖上遮荫度为85%的遮阴网，每3天淋施一次400 mg/L ABT 6#溶液，直至完全生根为止；移植15天后选阴天拆除小拱棚；每周用喷雾器补充水分3～5次，使育苗床湿度保持75%以上；移植21天后每半月喷洒一次800倍的50%退菌特；移植25天后每3周喷一次FA旱地龙500倍液的叶面肥；移植后管理期间光照强度2500 lx，光照12 h/d。
以上所述的改良MS培养基的组成为：KNO3 1600 mg/L；NH4NO3 1500 mg/L；CaCl2·2H2O 220 mg/L；MgSO4·7H2O 370 mg/L；KH2PO3 100 mg/L；Ca(NO3)2 450 mg/L；MnSO4·4 H2O25 mg/L；ZnSO4·7 H2O 10 mg/L；CuSO4·5 H2O 0.025 mg/L；H3BO3 6.2 mg/L；Na2MoO4·2H2O 0.025 mg/L；维生素B1 0.2 mg/L；维生素B6 0.2 mg/L；烟酸 0.5 mg/L；甘氨酸 2.0mg/L；肌醇 100 mg/L。

Claims (4)

1.一种结合瓶外生根技术的泡桐组培快繁方法，其特征在于：包括外植体处理、初始芽诱导培养、继代芽增殖培养、育苗基质准备、继代芽移植和移植后管理；选取生长健壮无病虫害的泡桐半木质化枝条，对枝条进行修剪成茎段作为外植体，对外植体灭菌消毒处理后接种于初始芽诱导培养基中获取初始芽，再将初始芽接种于继代培养基中后得到组培继代芽，单个切下生长健壮，高度≥2.5cm的继代芽移植于育苗基质中，经过移植后管理得到泡桐苗木；主要操作步骤如下：
（1）外植体处理：选取生长健壮无病虫害的泡桐半木质化枝条，用常规的消毒液对枝条进行表面消毒，然后修剪成茎段作为外植体，软纱布轻轻擦洗茎段表面，置于质量浓度为1%洗衣粉溶液浸泡5min，用流水冲洗5min；然后置于超净工作台上，用体积浓度为75%的乙醇溶液对外植体浸泡30s，用无菌水清洗5~6遍；再用体积浓度为0.1%氯化汞溶液浸泡外植体5~10min进行消毒，用无菌水清洗5~6遍；在每一次浸泡期间不断进行搅动；
（2）初始芽诱导培养：将步骤（1）处理后的外植体两端分别剪除1~2mm，接种到诱导培养基上诱导初始芽；
（3）继代芽增殖培养：将步骤（2）获得的初始芽接种于继代培养基上进行增殖培养，得到组培继代芽；
（4）育苗基质准备：将配制好的育苗基质经过杀菌处理后装入规格8 cm×8 cm无纺纸育苗容器中；
（5）继代芽移植：单个切下生长健壮，高度≥2.5cm的继代芽，用清水洗去培养基，将单芽的切端蘸于生根剂后，移植于育苗容器中，压紧，清水淋透育苗基质；
（6）移植后管理：在摆有育苗容器的育苗床上方用塑料薄膜搭建小拱棚，再盖上遮荫度为75～85%的遮阴网，每3天淋施一次激素溶液，直至完全生根为止；移植10～15天后选阴天拆除小拱棚；每周用喷雾器补充水分3～5次，使育苗床湿度保持75%以上；移植18～21天后每半月喷洒一次600～800倍的50%退菌特；移植25天后每3周喷一次FA旱地龙500倍液的叶面肥；移植后管理期间光照强度1500～2500 lx，光照12～14h/d；
步骤（1）中所述的茎段长3.0～5.0 cm，至少带有一个腋芽；
步骤（2）中所述的诱导培养基的原料组分和质量含量为∶改良MS + 6-BA 2.0~4.0 mg/L + IBA 1.0~2.0 mg/L +蔗糖30000 mg/L + 琼脂3000 mg/L；所述的改良MS培养基的组成为：KNO3 1600 mg/L；NH4NO3 1500 mg/L；CaCl2·2H2O 220 mg/L；MgSO4·7H2O 370 mg/L；KH2PO3 100 mg/L；Ca(NO3)2 450 mg/L；MnSO4·4 H2O 25 mg/L；ZnSO4·7 H2O 10 mg/L；CuSO4·5 H2O 0.025 mg/L；H3BO3 6.2 mg/L；Na2MoO4·2 H2O 0.025 mg/L；维生素B1 0.2mg/L；维生素B6 0.2 mg/L；烟酸 0.5 mg/L；甘氨酸 2.0 mg/L；肌醇 100 mg/L；
步骤（3）中所述的继代培养基的原料组分和质量含量为∶改良MS + 6-BA 4.5~6.5 mg/L + IBA 0.5~1.0 mg/L +IAA 0.5~1.0mg/L + 蔗糖30000 mg/L + 琼脂3500 mg/L；所述的改良MS培养基的组成为：KNO3 1600 mg/L；NH4NO3 1500 mg/L；CaCl2·2H2O 220 mg/L；MgSO4·7H2O 370 mg/L；KH2PO3 100 mg/L；Ca(NO3)2 450 mg/L；MnSO4·4 H2O 25 mg/L；ZnSO4·7 H2O 10 mg/L；CuSO4·5 H2O 0.025 mg/L；H3BO3 6.2 mg/L；Na2MoO4·2 H2O 0.025mg/L；维生素B1 0.2 mg/L；维生素B6 0.2 mg/L；烟酸 0.5 mg/L；甘氨酸 2.0 mg/L；肌醇100 mg/L；
步骤（4）所述的育苗基质是泥炭和珍珠岩按体积比为1∶1混合，并在其混合物中加入质量分数为0.5%的辛硫酸颗粒剂和质量分数为0.5%硫酸亚铁，混匀；
步骤（6）所述的激素溶液为200～400 mg/L ABT 6#溶液。
2.根据权利要求1所述的一种结合瓶外生根技术的泡桐组培快繁方法，其特征在于：所述步骤（2）、（3）的培养条件均为：温度28℃，光照1500～2000 lx，光照12～14h/d。
3.根据权利要求1所述的一种结合瓶外生根技术的泡桐组培快繁方法，其特征在于：步骤（4）对育苗基质的杀菌处理方法是将体积分数为50%多菌灵600～800倍溶液与育苗基质拌匀，湿度成团却不滴水。
4.根据权利要求1所述的一种结合瓶外生根技术的泡桐组培快繁方法，其特征在于：步骤（5）所述的生根剂为200～400 mg/L ABT 6#溶液与滑石粉混合而成的匀浆。
CN201710305685.4A 2017-05-03 2017-05-03 一种结合瓶外生根技术的泡桐组培快繁方法 Active CN106942063B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710305685.4A CN106942063B (zh) 2017-05-03 2017-05-03 一种结合瓶外生根技术的泡桐组培快繁方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710305685.4A CN106942063B (zh) 2017-05-03 2017-05-03 一种结合瓶外生根技术的泡桐组培快繁方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN106942063A CN106942063A (zh) 2017-07-14
CN106942063B true CN106942063B (zh) 2019-01-18

Family

ID=59477933

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201710305685.4A Active CN106942063B (zh) 2017-05-03 2017-05-03 一种结合瓶外生根技术的泡桐组培快繁方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN106942063B (zh)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110012834B (zh) * 2019-04-02 2020-08-04 云南省热带作物科学研究所 一种提高金菠萝组织培养效率的方法
CN111374056B (zh) * 2020-04-17 2021-05-18 山东省林业科学研究院 一种培养粗壮四倍体泡桐苗的增殖培养基配方及应用
CN112690211A (zh) * 2021-01-04 2021-04-23 海南品优种苗科技有限公司 一种泡桐树苗脱毒组培及驯化培育的方法
CN115136802B (zh) * 2022-08-02 2023-06-06 广西特色作物研究院 一种利用叶子繁殖泡桐的育苗方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102523860A (zh) * 2011-01-29 2012-07-04 国家林业局泡桐研究开发中心 一种白花泡桐优树嫩枝扦插幼化的方法
CN102835233A (zh) * 2012-08-22 2012-12-26 何聪 一种扦插繁殖泡桐的方法
CN106258971A (zh) * 2016-08-16 2017-01-04 广西福桐林业科技有限公司 一种泡桐优良单株的无性组培快繁方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102523860A (zh) * 2011-01-29 2012-07-04 国家林业局泡桐研究开发中心 一种白花泡桐优树嫩枝扦插幼化的方法
CN102835233A (zh) * 2012-08-22 2012-12-26 何聪 一种扦插繁殖泡桐的方法
CN106258971A (zh) * 2016-08-16 2017-01-04 广西福桐林业科技有限公司 一种泡桐优良单株的无性组培快繁方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
试管苗瓶外生根技术;黄卓忠等;《广西农业科学》;20071231;第38卷(第2期);第124页左栏第一段，右栏第一段，2.1基质培

Also Published As

Publication number Publication date
CN106942063A (zh) 2017-07-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN105165512B (zh) 台湾桤木控偏冠四季扦插快繁方法
CN105638025B (zh) 一种团花育苗的方法
CN106942063B (zh) 一种结合瓶外生根技术的泡桐组培快繁方法
CN103444305B (zh) 一种促使神秘果种子快繁的栽培的方法
CN103444526B (zh) 一种暗紫贝母的促生栽培方法
CN103348920B (zh) 一种奇楠沉香优质种苗快速繁殖方法
CN103960102A (zh) 一种中秋酥脆枣丰产栽培的方法
CN104025830A (zh) 大棚樱桃栽培方法
CN108522120A (zh) 红豆杉的培育方法
CN107926715A (zh) 一种茄子或/和辣椒或/和番茄的嫁接培育方法
CN103875515A (zh) 一种蓝莓组培苗瓶外生根方法
CN105123253B (zh) 一种七叶一枝花的育苗方法
CN103858637A (zh) 一种发财树回收再生培育方法
CN105191620A (zh) 一种小白菜种苗的培育方法
CN107409670A (zh) 一种烟草漂浮育苗拔株膜下移栽方法
CN104642000B (zh) 一种亮叶木莲种子萌发及育苗方法
CN1109490C (zh) 薇菜孢子繁殖“三段式”育苗培蔸方法
CN109906914B (zh) 伴矿景天简易化直播育苗方法
CN105191622A (zh) 一种辣椒种苗的培育方法
CN105191623A (zh) 一种棉花种苗的培育方法
CN107660464B (zh) 一种北美红杉优良种苗的组培快繁方法
CN105191617A (zh) 一种豇豆角种苗的培育方法
CN105191614A (zh) 一种丝瓜种苗的培育方法
CN105191619A (zh) 一种小青菜种苗的培育方法
CN103430843A (zh) 一种猴耳环种子苗茎段组织培养快速繁殖方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
TR01 Transfer of patent right
TR01 Transfer of patent right

Effective date of registration: 20191118

Address after: No. 302, floor 3, block B, city square, block A10, Guilan Road, Guicheng, Nanhai District, Foshan City, Guangdong Province

Patentee after: Guangdong Xulong forestry science and Technology Co., Ltd.

Address before: Nanning West Road, the Guangxi Zhuang Autonomous Region 530000 cod XiXiangTang District No. 9 Golden State Garden Building 2, unit 3, No. 505

Patentee before: Guangxi green tree Agriculture Technology Co., Ltd.